中国药典仪器分析方法应对

HPL C
TL CS
UV
GC
其 他
中成
10版 新增
259 1818
25
9
54 426
8
32
16 2
6
709 12 8 24 1
药
05版 收载
281 1144
11
16 102 627
8
10 90 1
321 33 16 19 4
10版Biblioteka Baidu
提取 新增 物 05版
收载
21 3 2 5 1 11
50 16 17
7
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例：离子色谱（氯膦酸二钠）
➢ 照离子色谱法（附录Ⅴ J）试 验
用阴离子交换色谱柱或效能 相当），柱温30℃，
以水为流动相A，以 0.1mol/L氢氧化钾溶液为流 动相B，梯度洗脱，流速为 1.2 ml/min。
检测器为电导检测器，检测 方式为抑制电导检测。
HPLC法
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2005年版
530 0
142
24 4 315 165 107 216 359
2010年版
580 73
707
97 45 414 219 132 372 694
3
色谱法在2010年版药典的应用
柱色谱 纸色谱 薄层色谱 气相色谱
• 高效液相色谱 • 离子色谱
正相色谱 反相色谱 离子对色谱
发展出了整体柱、无机和有机杂化硅胶。
目前，市场上流行的分析用的 HPLC 硅胶基质填料主要为 B 型硅胶。 填料发展史
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色谱法的应用：高效液相色谱
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填料发展史
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色谱法的应用：高效液相色谱
2010版药典二部中色谱柱的使用情况
色谱柱类型 品种数
C18柱 C8柱 氰基柱 硅胶柱 苯基柱
TLC
品种数量
硅胶G
254个品种
硅胶G254
148个品种
硅胶H
15个品种
硅胶HF254
12个品种
硅藻土
2个品种
微晶纤维素
3个品种
氧化铝
1个品种
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色谱法的应用：气相色谱
进样方式 直接进样 顶空进样
品种数量 75个 112个
检测方式 FID ECD
品种数量 181个 6个
ECD
伊曲康唑 联苯苄唑 恩氟烷 林旦乳膏 林旦 异氟烷
•离子交换色谱法主要用于分析有机酸、氨基酸、多肽及核酸等离子型化合物的分离。
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色谱法的应用：离子色谱
阳离子交换柱 ➢ 山梨醇及制剂 ➢ 甘油果糖氯化钠注射液 ➢ 甘露醇及制剂 ➢ 利巴韦林及制剂 ➢ 盐酸二甲双胍及制剂 ➢ 苹果酸及制剂 ➢ 富马酸及制剂
阴离子交换柱
➢ 肝素钠及制剂 ➢ 帕米磷酸二钠及制剂 ➢ 氯膦酸二钠及制剂 ➢ 硫酸软骨素钠及制剂
球形硅胶。
90年代早期，粒径为 5 µm 的高纯硅胶，即所谓的 B 型硅胶被发展，并成为
这个行业填料的标准，这种 B 型硅胶含有微量的金属。
90年代后期，为了满足快速分离的需求，发展了 3 µm 或 3.5 µm 的球形硅胶，
其作用和性能逐渐的获得了人们的认同和接受。手性色谱柱的开发。
21世纪早期，为适应超快速的分离要求，粒径小于 2 µm 的填料被开发出来，
• 凝胶色谱
• 毛细管电泳
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色谱法的应用：纸色谱
纸色谱的基本原理-分配色谱 固定相-吸附在滤纸上的水 移动相-展开剂 样品在水和展开剂中的溶解度不同，故分
配不同而达到分离。例：盐酸苯乙双胍
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色谱法的应用：薄层色谱
2010版药典（二部）采用TLC的品种数量，共435个
甲氨蝶呤
甲氨蝶呤片
牛血清白蛋白键合硅胶柱
注射用甲氨蝶呤
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色谱法的应用：高效液相色谱
2010版药典主要修订项目
1、色谱柱 （1）常用色谱柱填料粒径3～10μm （2）微径柱填料粒径 约2μm（UPLC或UFLC） 硬件须匹配 色谱条件可适当调整 以品种正文规定条件的测定结果为准
2、柱温 （1）通常为室温 （2）以硅胶为载体的普通色谱柱，最高使用温度不得超过60℃，（HTLC）
16
17 10 12 1 56
9 115
中药
10版 新增
374
526
3
材
05版 收载
339
347
5
2 26 1127 12 14 31 179 726 17 17 71
412 3 17 9 34 175 13 20 7 30
10版 新增
633 2492
31
12 134 1554
31
40
24 3
22
1138 15 25 16 32
现代分析技术的应用进一步扩大
红外光谱 原料药、制剂
气相色谱 残留溶剂
HPLC 检测器
分析技术
毛细管电泳
总有机碳测定法 （TOC）
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离子色谱
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《中国药典》2010年版一部新修订项目
项目 类别
鉴别
检查
特
含量测定
征
重金
显微 TLC
HP LC
GC
理化
通则
属有 毒性 其 害元 成分 他
素
或 指 纹 图 谱
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色谱法的应用：离子色谱
基本原理
➢离子色谱中发生的基本过程就是离子交换，
因此，离子色谱本质上就是离子交换色谱。 色谱柱类型
➢在离子色谱的基本组成中，重要的和与其 他高效液相色谱不同的就是抑制器和电导 检测器，离子色谱用的泵是PEEK材料衬里的不
阳离子交换柱 阴离子交换柱
锈钢泵。
品种个数 23个 14个
1210个 93个 21个 31个 9个
色谱柱类型 氨基柱 丁基柱
三甲基硅烷柱 二羟基丙基硅烷键合
硅胶柱
苯乙烯-二乙烯基柱
品种数 5个 3个 2个 1个
1个
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色谱法的应用：高效液相色谱
缬沙坦 盐酸帕罗西汀
a-酸性糖蛋白柱
瑞格列奈 瑞格列奈片
手性色谱柱α1酸性蛋白柱
苯磺酸顺阿曲库铵 注射用苯磺酸顺阿曲库铵 手性色谱柱chiralcel OD-RH
合计
05版 收载
620 1507
16
16 298 1363 37
28
21 7
1
505 47 37 31 34
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2010年版二部与2005年版药典主要项目收载情况比对表
增修订项目
红外光谱鉴别
原料 制剂
有关物质
HPLC方法
残留溶剂 渗透压摩尔浓度 溶出度或释放度 含量均匀度 无菌检查方法 细菌内毒素 含量测定
检查项目 残留溶剂 残留溶剂 残留溶剂，有关物质 含量，六六六 六六六 残留溶剂，有关物质
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色谱法的应用：高效液相色谱
20世纪70年代中期，HPLC仪开始出现，主要填料：10 µm 的无定型硅胶颗粒。 70年代后期，发展了反相液相色谱。 80年代，HPLC 被广泛应用于化合物的分离，主要填料：粒径为5 ～ 10 µm