P0012S BCA蛋白浓度测定试剂盒说明书
BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装价格P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒500次258.00 元O 碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
O 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。
O 在50-2000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
O BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。
不适用BCA法时建议使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。
O 每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：BCA试剂A 100 mlBCA试剂B 3 ml蛋白标准（5mg/ml BSA） 1 ml说明书 1 份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年注意事项：O 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液,B液和样品的体积。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
O 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
O EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。
不适用BCA法时，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
碧云天 BCA蛋白浓度测定试剂盒
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒 500次产品简介：¾BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
¾灵敏度高，检测浓度下限达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。
¾在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
¾BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。
不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。
¾BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性，请参见碧云天如下网页:/Compatibility Chart For BCA Kit.pdf¾每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：产品编号产品名称包装P0012-1 BCA试剂 A 100mlP0012-2 BCA试剂 B 3mlP0012-3 蛋白标准(5mg/ml BSA) 1ml—说明书1份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年内有效。
注意事项：¾需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。
BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
BCA法测定蛋白浓度-酶标仪一、药品1.BCA蛋白浓度测定试剂盒（P0012，500次酶标仪，碧云天），含以下成分：a)BCA试剂A（P0012-1，100ml，碧云天），室温保存b)BCA试剂B（P0012-2，3ml，碧云天），室温保存c)蛋白标准（5mg/ml BSA）（P0012-3，1ml，碧云天），-20度保存二、仪器和试剂1.酶标仪（测定波长为540-595nm之间，562nm最佳），水浴锅2.96孔单条可拆酶标板（平底）3.15 ml 离心管1个（准备BCA工作液用）4. 1.5 ml 离心管1个（准备蛋白标准品工作液用）5.单道移液器和枪头，8道移液器（排枪）和枪头6.PBS三、操作步骤1.水浴锅调至37℃。
2.蛋白标准品工作液（1 mg/ml）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml）从-20℃冰箱中取出，完全溶解并混匀。
取60μl 蛋白标准品（5mg/ml），加入240μl PBS，即稀释5倍，即配成蛋白标准品工作液（1 mg/ml）。
3.计算BCA工作液总量= 0.2 ml×（样本数+8）×2×1.1（标准品和样本均需测复孔）。
BCA工作量按50体积的BCA试剂A加上1体积的BCA试剂B配制（即50:1），需充分混匀。
BCA 工作液室温24小时内稳定。
4.按下表配制8个蛋白标准液（S0~S7），充分摇匀。
5.将96孔酶标板的A1孔放在左上角，按下表加入蛋白样本和标准品。
（1）先在第3~4条酶标板的蛋白样本孔（N 1~N8）中加入待测蛋白样本各2μl，再用排枪在蛋白样本孔中追加PBS液各18μl，使总量达到20μl。
（此时蛋白样本的稀释比为10，适用于预计蛋白浓度为2~8mg/ml时。
如预计蛋白浓度太高或太低，可适当调整稀释比例）（2）再在第1~2条酶标板的蛋白标准品孔（S0~S7）中加入上面配制的8个蛋白标准液各20μl。
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12A S0 S0 N1 N1B S1 S1 N2 N2C S2 S2 N3 N3D S3 S3 N4 N4E S4 S4 N5 N5F S5 S5 N6 N6G S6 S6 N7 N7H S7 S7 N8 N86.用排枪在各孔中加入200μl BCA工作液，轻轻摇匀，37℃放置30分钟或室温放置2小时。
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BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装价格P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒500次258.00 元O 碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
O 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。
O 在50-2000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。
O BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20, 60, 80。
但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。
不适用BCA法时建议使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。
O 每个试剂盒可以检测500个样品。
包装清单：BCA试剂A 100 mlBCA试剂B 3 ml蛋白标准（5mg/ml BSA） 1 ml说明书 1 份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。
本试剂盒自订购之日起一年注意事项：O 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。
需96孔板。
如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液,B液和样品的体积。
使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
O 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
O 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
O EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。
不适用BCA法时，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明BCA法（bicinchoninic acid assay）是一种用于测定蛋白质含量的常用方法。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明如下：试剂盒组成：1.BCA试剂A：含有重铜离子和碱性溶液。
2.BCA试剂B：含有双咪唑试剂和碱性溶液。
3.蛋白标准溶液：一系列已知浓度的牛血清蛋白标准溶液。
4.BCA试剂C：含有特殊缓冲溶液。
注意事项：1.所有试剂和样品在使用前均需室温下静置至少30分钟。
2.打开试剂盒后，避免将试剂直接暴露于空气中，以免影响试剂稳定性。
3.在所有步骤中，使用干净且蛋白污染的工具可能会导致错误的结果。
步骤1：制备标准曲线1.准备一系列不同浓度的蛋白标准溶液，如0、20、40、60、80和100μg/mL。
2.取0.1mL蛋白标准溶液加入1.9mL去离子水，即配制出100μg/mL的稀释溶液。
3.以同样的方法依次配制出20、40、60和80μg/mL的稀释溶液。
4.将每个稀释溶液的0.2mL与2mLBCA试剂A混合，放置30分钟。
5.加入0.5mLBCA试剂B，再次混合均匀。
6.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
7. 使用紫外-可见光谱仪测定吸光度，以280 nm为波长，绘制标准曲线。
步骤2：测定待测样品1.取待测样品，如细胞裂解液，加入BCA试剂C进行稀释，使得样品中的蛋白质浓度在标准曲线范围内。
2.取样品0.1mL加入1.9mL去离子水，配制出与标准曲线相同浓度的稀释液。
3.加入1mLBCA试剂A混合均匀，放置30分钟。
4.加入0.2mLBCA试剂B，再次混合均匀。
5.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。
6. 使用280 nm波长的紫外-可见光谱仪测定吸光度。
步骤3：计算蛋白质含量1.将待测样品的吸光度值与标准曲线进行比较，根据吸光度值确定样品中蛋白质的含量。
2.通过线性拟合标准曲线计算待测样品中蛋白质的浓度。
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书一、产品简介BCA 蛋白定量试剂盒是一种常用的蛋白质浓度测定方法，具有操作简便、灵敏度高、准确性好等优点。
本试剂盒适用于细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆等多种样品中总蛋白浓度的定量测定。
二、试剂盒组成1、 BCA 工作液：A 液与 B 液按 50:1 的比例混合而成，现配现用。
2、蛋白标准品（2mg/ml）：牛血清白蛋白（BSA）溶液。
3、 96 孔板三、所需设备1、酶标仪（波长 562nm）2、移液器（量程分别为20μl、200μl、1000μl）3、涡旋振荡器4、离心机四、操作步骤1、标准曲线的绘制（1）将蛋白标准品（2mg/ml）用 PBS 或生理盐水稀释成一系列浓度梯度，如0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml、600μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml、1500μg/ml、2000μg/ml。
（2）在 96 孔板中，每个浓度梯度设置 2 个复孔。
分别向孔中加入25μl 不同浓度的标准品溶液。
（3）向每个孔中加入200μl BCA 工作液，轻轻振荡混匀，37℃孵育 30 分钟。
（4）使用酶标仪在 562nm 波长下测定吸光度值（OD 值）。
（5）以蛋白浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线。
2、样品测定（1）将待测样品用 PBS 或生理盐水适当稀释（若样品浓度过高，可能会超出标准曲线范围）。
（2）在 96 孔板中，设置样品孔和空白孔（仅加25μl 稀释液和200μl BCA 工作液）。
向样品孔中加入25μl 稀释后的样品。
（3）向每个孔中加入200μl BCA 工作液，轻轻振荡混匀，37℃孵育 30 分钟。
（4）使用酶标仪在 562nm 波长下测定样品孔和空白孔的吸光度值（OD 值）。
（5）样品的蛋白浓度可根据标准曲线计算得出。
五、注意事项1、 BCA 工作液应现配现用，避免长时间放置导致失效。
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
产品使用说明书BCA 蛋白定量试剂盒试剂盒简介以下货号试剂盒可参照此说明书操作：建议同时参考本说明书英文原文（说明书编号TB380）。
BCA Protein Assay Kit ：500 / 2500 rxn 货号71285-3BCA 蛋白定量方法是基于双缩脲反应，即在碱性溶液中蛋白将Cu 2+ 还原成Cu 1+，而根据检测到的单价Cu 离子的浓度可以检测体系中对应蛋白的量。
Bicinchoninic acid 是一种显色剂，可以螯合被还原的铜离子，产生一种在562nm 有强吸收的紫色复合物。
Novagen 的BCA 试剂盒可以用于测定浓度在20-2,000µg/ml 范围内的蛋白的浓度，根据样品量分为标准型和微型两种形式进行测定。
试剂盒提供的组分足够用于500次标准型反应（50µl 蛋白样品加上1ml 反应试剂）或2,500次微型测定（25µl 蛋白样品加上200µl 反应试剂，可以在96孔板中进行高通量定量）。
试剂盒中提供的BSA （牛血清白蛋白，2mg/ml ）为用户制作标准浓度曲线提供了便利。
Novagen 的BCA 试剂盒准确度高，兼容性好，能与各种化学试剂和表面活性剂兼容，可以方便地配合默克Novagen 的BugBuster ®，PopCulture ®，CytoBuster™，Reportasol™和Insect PopCulture 抽提蛋白的细胞裂解试剂一起使用。
有些化学成分，例如螯合剂，强酸、强碱、还原剂等，可能会干扰BCA 法采用的还原及螯合定量过程，详细情况请看说明书后附列表。
试剂盒提供的组分500ml BCA 反应液（0.1M NaOH 缓冲的bicinchoninic acid ，碳酸钠，酒石酸钠，碳酸氢钠，pH11.25） 15ml 4% 硫酸铜3×1ml BSA 标准品（2mg/ml ）储存室温存放。
BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明书
注意事项
1•在低温条件或长期保存出现沉淀时，可搅拌或37C温育使溶解，如发现细
菌污染则应丢弃
2.样品中若含有EDT
A、EGT
A、DTT硫酸铵、脂类会影响检测结果，请试用Bradford蛋白浓度测定试
剂盒；高浓度的去垢剂也影响实验结果，可用TCA沉淀去除干扰物质。
3.要得到更为精确的蛋白浓度结果，每个蛋白梯度和样品均需做复孔,每次
均应做标准曲线。
4•当试剂A和B混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失，工作液在密闭 情况下可保存1周。
5.需准备37C水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为540-
595nm之间，562nm最佳。酶标仪需与96孔酶标板配套使用。使用分光光度计 测定蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应 注意防止因水粉蒸发影响检测结果。
3•加适当体积样品到96孔板的样品孔中，补加PBS到20微升。
4.各孔加入200微升BCA工作液，37C放置30分钟。
5•冷却到室温，用酶标仪测定A562，根据标准曲线计算出蛋白浓度。BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明书
产品简介
蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。博奥森开发的BCA蛋白质检测
试剂（bicinchonic acid是理想的蛋白质定量方法；是当前比Lowry法更优越的专用 于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白 质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA法测定蛋白浓度不受绝
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定，确保蛋白浓度在20-2000μg/ml内。
货号：BC1720规格：100T/96S产品内容：试剂A：液体×1瓶，4℃保存。
试剂B：液体×1支，4℃保存。
标准品：液体×1支，4℃保存。
产品说明：样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。
此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：碱性条件下，蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键，能将Cu2+还原成Cu+；2分子的BCA与Cu+结合，生成紫色络合物，在540-595nm有吸收峰，562nm 处吸收峰最强。
自备仪器和用品：台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸馏水。
工作液配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×0.2mL），将试剂A和B按照50：1的比例混合，盖紧后充分混匀。
操作步骤：一、样品中可溶性蛋白质提取：1.液体样品：澄清液体样品可以直接测定。
2.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水），冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
（动物样品常常需要稀释）3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
二、测定操作：1.可见分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到562nm，蒸馏水调零。
2.工作液置于60℃水浴预热30min。
空白管标准管测定管蒸馏水（μL）4标准品（μL）4待测液（μL）4工作液（μL）200200200混匀后置于60℃保温30min，于微量玻璃比色皿/96孔板，于562nm处测定吸光值A，分别记为A空白管、A标准管、A测定管。
BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明书
产品简介
蛋白质定量是蛋白质研究的基础工作之一。博奥森开发的BCA蛋白质检测试剂(bicinchonic acid)是理想的蛋白质定量方法;是当前比Lowry法更优越的专用于检测总蛋白质含量的产品。该方法以快速灵敏、稳定可靠，对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小而倍受专业人士的青睐。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞裂解实验中，常用浓度的去垢剂SDS，TritonX-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。该产品不受此影响，因此与之配合使用，可免除您实验中的许多烦恼。
基本原理
碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
主要特点
1.准确xx,线性xx:
BCA试剂的蛋白质测定范围是10－2000ug/ml；
2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法;还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
主要特点
1.准确xx,线性xx:
BCA试剂的蛋白质测定范围是10－2000ug/ml；
2.快速：45分钟内完成测定，比经典的Lowry法快4倍而且更加方便。
3.经济实用：
在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。
4.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。
BCA蛋白定量试剂盒使用说明书
产品使用说明书BCA 蛋白定量试剂盒试剂盒简介以下货号试剂盒可参照此说明书操作：建议同时参考本说明书英文原文（说明书编号TB380）。
BCA Protein Assay Kit ：500 / 2500 rxn 货号71285-3BCA 蛋白定量方法是基于双缩脲反应，即在碱性溶液中蛋白将Cu 2+ 还原成Cu 1+，而根据检测到的单价Cu 离子的浓度可以检测体系中对应蛋白的量。
Bicinchoninic acid 是一种显色剂，可以螯合被还原的铜离子，产生一种在562nm 有强吸收的紫色复合物。
Novagen 的BCA 试剂盒可以用于测定浓度在20-2,000µg/ml 范围内的蛋白的浓度，根据样品量分为标准型和微型两种形式进行测定。
试剂盒提供的组分足够用于500次标准型反应（50µl 蛋白样品加上1ml 反应试剂）或2,500次微型测定（25µl 蛋白样品加上200µl 反应试剂，可以在96孔板中进行高通量定量）。
试剂盒中提供的BSA （牛血清白蛋白，2mg/ml ）为用户制作标准浓度曲线提供了便利。
Novagen 的BCA 试剂盒准确度高，兼容性好，能与各种化学试剂和表面活性剂兼容，可以方便地配合默克Novagen 的BugBuster ®，PopCulture ®，CytoBuster™，Reportasol™和Insect PopCulture 抽提蛋白的细胞裂解试剂一起使用。
有些化学成分，例如螯合剂，强酸、强碱、还原剂等，可能会干扰BCA 法采用的还原及螯合定量过程，详细情况请看说明书后附列表。
试剂盒提供的组分500ml BCA 反应液（0.1M NaOH 缓冲的bicinchoninic acid ，碳酸钠，酒石酸钠，碳酸氢钠，pH11.25） 15ml 4% 硫酸铜3×1ml BSA 标准品（2mg/ml ）储存室温存放。
BCA蛋白质定量试剂盒说明书
适用范围：
本检测方法可耐受的干扰物质浓度表：
干扰物质 盐/缓冲液 HEPES (pH7.9) PIPES(pH6.8) NaCl HCl NaOH Sodium citrate TRICINE(pH8.0) Sodium Acetate Guanidine.HCl Tris
BCA Protein Assay Kit
BCA 蛋白质定量试剂盒
目录号：PA115 试剂盒内容：
试剂盒组成
BCA 试剂 A BCA 试剂 B BSA 标准品(2mg/ml)
说明书
PA115-01*
100 ml 3 ml
2× 1 ml 1份
PA115-02**
500 ml 15 ml 10 × 1 ml 1份
产品简介：
BCA 蛋白质定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用 的两种蛋白浓度检测方法中的 BCA（bicinchoninic acid）法研制而成，实现了 对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。本试剂盒的原理是蛋白质分子中 的肽键结构在碱性环境下能与 Cu2+生成络合物，并将 Cu2+还原成 Cu+，而 BCA 试剂可敏感特异地与 Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物，并在 562nm 处 有最大光吸收值，该复合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大 小来测定蛋白质的含量。
1 小时内即可完成蛋白质定量检测。本试剂盒含有牛血清白蛋白（BSA） 溶液作为蛋白质标准溶液，测定范围为 20～2000 ug/ml。
操作步骤：
1. 标准品的稀释：用与样品相同缓冲体系的稀释剂按下表对 BSA 标准品进
行稀释：
BSA 标准浓度配制表
BCA蛋白浓度测定说明书
BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装CHEM001 BCA蛋白浓度测定试剂盒102ml包装清单：产品编号产品名称包装CHEM001A BCA试剂A 100mlCHEM001B BCA试剂B 3mlCHEM001C 蛋白标准（2mg/ml） 1.2ml—说明书1份产品简介：增强型BCA蛋白浓度测定试剂(Enhanced BCA Protein Assay)是常用蛋白浓度测定方法之一。
Viagene的BCA测定试剂测定方法简单，稳定性好，灵敏度高和抗干扰性强。
增强型BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20, 60, 80。
能够耐受低浓度的EDTA、EGTA、二硫苏糖醇，但高浓度螯合剂和还原剂可能会对测定有影响。
增强型BCA蛋白浓度测定试剂适合用于测定Western Blotting样品，EMSA核提取液的蛋白浓度。
检测灵敏度达到10μg/ml。
按照本说明书操作，每套试剂可进行145次比色杯法测定或500次微板法测定。
比色杯法测定的BCA工作液用量较微板法多，但抗干扰性强，结果更准确。
使用说明：A.比色杯法测定1、根据待测定样品数算出所需BCA工作液总体积（每个测定需0.7ml工作液），按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B（50：1）配制适量BCA工作液，充分混匀。
BCA工作液在室温可稳定24小时。
2、试管编号，按以下操作。
管号S0 S1 S2 S5 S10 S20 S40 样品xH2O （µl）20 19.5 19 17.5 15 10 0 20样品制备液（µl） 4 4 4 4 4 4 4 －蛋白标准液（µl）0 0.5 1 2.5 5 10 20 －样品体积－－－－－－－ 4反应体积24 24 24 24 24 24 24 24 BCA工作液（ml）0.7 0.7 0.7 0.7 0.7 0.7 0.7 0.7蛋白浓度（µg/µl）0 1 2 5 10 20 40 待定注：1）标准曲线一般做4个点加一个空白。
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明
BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定，确保蛋白浓度在20-2000μg/ml内。
货号：BC1720规格：100T/96S产品内容：试剂A：液体×1瓶，4℃保存。
试剂B：液体×1支，4℃保存。
标准品：液体×1支，4℃保存。
产品说明：样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。
此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：碱性条件下，蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键，能将Cu2+还原成Cu+；2分子的BCA与Cu+结合，生成紫色络合物，在540-595nm有吸收峰，562nm 处吸收峰最强。
自备仪器和用品：台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸馏水。
工作液配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×0.2mL），将试剂A和B按照50：1的比例混合，盖紧后充分混匀。
操作步骤：一、样品中可溶性蛋白质提取：1.液体样品：澄清液体样品可以直接测定。
2.组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水），冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。
（动物样品常常需要稀释）3.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
二、测定操作：1.可见分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到562nm，蒸馏水调零。
2.工作液置于60℃水浴预热30min。
空白管标准管测定管蒸馏水（μL）4标准品（μL）4待测液（μL）4工作液（μL）200200200混匀后置于60℃保温30min，于微量玻璃比色皿/96孔板，于562nm处测定吸光值A，分别记为A空白管、A标准管、A测定管。
BCA蛋白浓度测定试剂盒完整版.
23235微型BCA蛋白检测试剂盒工作范围为0.5-20 gJ mL
23236考马斯亮蓝检测试剂盒，工作范围的1 - 1500g^mL
23215Compat-Able ?蛋白检测试剂组
23250BCA蛋白检测试剂盒-兼容还原剂
附加信息
A•请访问我们的网站了解更多的信息，包括下列事项：
绍..1
准备标准试剂和工作试
剂..2
准备试
管..3
准备微型
版..3
故障检
修..4
有关美国热电其他产
品..5
附加信
息..5
参考文
献..6
介绍
美国热电（Thermo）公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒 是基于二喹啉甲酸（BCA）通过比色检测和定量测定总蛋白的洗涤剂兼容配方。该方法通过碱性介质中的一 种蛋白结合了Cu2使其显著减少转变为Cu1（缩二脲反应）。用一种含二奎琳甲 酸的试剂选择性的比色法高敏感的比色杯中的Cu1.这种测定方法的紫色色反应 产物是通过BCA的两个分子和亚铜离子螯合作用形成的。这种水溶性复合物在562nm处有强吸收峰。在大的活性范围内（20-2000 gMmL）几乎同蛋白浓度增加 呈线性关系。BCA法不是真正的终点的方法；也就是说，最终颜色继续发展。 孵化之后，继续的颜色发展速度是足够慢以允许一起进行测定大量样本。
3）增加培养时间或样品工作试剂的体积比率，增加每个well在562nm的净测量 值，降低实际的最低测量水平和测量的working range。只要每个标准样与未知样 都被同等对待，这样的修改也是有益的。
6、 所有的单个标准品与所测的样品重复在562nm测得的吸光度都要减去在
562nm测得的所有空白标准品的吸光度平均值。
BCA蛋白浓度测定说明书
BCA蛋⽩浓度测定说明书BCA法蛋⽩质浓度测定试剂盒BCA Protein Assay Kit产品编号：SK3021包装规格：500 Assays产品简介BCA法是理想的蛋⽩质定量⽅法，在碱性环境下蛋⽩质分⼦中肽键结构与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。
BCA特异地与Cu1+结合形成稳定的紫蓝⾊复合物，在562 nM处有最⼤的光吸收值并与蛋⽩质浓度成正⽐，颜⾊的深浅与蛋⽩质的含量成正⽐，可以根据吸收值测定蛋⽩质浓度。
该测定⽅法灵敏度⾼，操作简单，试剂及其形成的颜⾊复合物稳定性俱佳，并且受⼲扰物质去垢剂等影响⼩。
产品特点1. 准确灵敏，线性范围⼴，BCA试剂的蛋⽩质测定范围是25－500 µg/ml。
2. 快速：45分钟内完成测定，⽐经典的Lowry法快4倍⽽且更加⽅便。
3. 不受样品中离⼦型和⾮离⼦型去污剂影响。
4. 检测不同蛋⽩质分⼦的变异系数远⼩于考马⽒亮蓝。
5. 可以酶标板法或分光光度计法。
运输和保存条件在常温下运输，收到后，将试剂A、试剂B 4℃保存，BSA蛋⽩标准液-20℃，保质期⼀年。
产品组成本试剂盒由溶液A、溶液B和BSA标准蛋⽩构成，酶标板法可以使⽤500次，分光光度计法100次。
SK3021-1 溶液A 100 mlSK3021-2 溶液B 2 mlBSA标准蛋⽩(5mg/ml) 1 ml使⽤⽅法A. 试剂准备1. 按照以下公式计算所需的BCA⼯作液总体积。
BCA⼯作液总体积=（标准曲线测定点数+样品数）×重复次数×每个样品所需的BCA⼯作液体积2. 根据所需的BCA⼯作液总体积，取50份溶液A和1份溶液B，混匀，制成BCA⼯作液。
3. 取⼀定量的BSA标准溶液，⽤1XPBS溶液稀释为500 µg/ml。
4. 取8⽀1.5 ml离⼼管，按照下表平⾏操作。
B. 分光光度法1. 制作标准曲线（离⼼管法的蛋⽩定量线性范围：25-500µg/ml）1）取8⽀1.5ml离⼼管，各管分别加⼊100µl相应浓度的标准蛋⽩质溶液。
P0010S BCA蛋白浓度测定试剂盒_增强型_
包装清单：
产品编号 P0010S-1 P0010S-2 P0010S-3 P0010S-4
—
产品名称 BCA试剂 A BCA试剂 B 蛋白标准(BSA) 蛋白标准配制液
说明书
包装 40ml 1.2ml 20mg 1ml 1份
保存条件：
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
注意事项：
¾ 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测 定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用 量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
3. Zheng CH, Gao JQ, Zhang YP, Liang WQ. A protein delivery system: biodegradable alginate-chitosan-poly(lactic-co-glycolic acid) composite microspheres. Biochem Biophys Res Commun. 2004 Oct 29;323(4):1321-7.
15.Wu ZQ, Li M, Chen J, Chi ZQ, Liu JG. Involvement of cAMP/cAMP-dependent protein kinase signaling pathway in regulation of Na+,K+-ATPase upon activation of opioid receptors by morphine. Mol Pharmacol. 2006 Mar;69(3):866-76.
(完整word版)BCA蛋白浓度测定-酶标仪法
蛋白标准品工作液 （1 mg/ml ） （M ）PBS (41) 蛋白标准品终浓度（mg/ml ）S0 0 100 0 S1 5 950.05 S2 10 90 0.1 S3 20 80 0.2 S4 30 70 0.3 S5 40 60 0.4 S650 50 0.5 S71001.0BCA 法测定蛋白浓度-酶标仪、药品 1.BCA 蛋白浓度测定试剂盒（P0012, 500次酶标仪，碧云天），含以下成分: a ） BCA 试剂A （ P0012-1，100ml ，碧云天），室温保存 b ） BCA 试剂B （ P0012-2，3ml ，碧云天），室温保存c ） 蛋白标准（5mg/ml BSA ）（ P0012-3，1ml ，碧云天），-20 度保存 二、仪器和试剂 1. 酶标仪（测定波长为540-595nm 之间，562nm 最佳），水浴锅 2. 96孔单条可拆酶标板（平底）3. 15 ml 离心管1个（准备BCA 工作液用）4. 1.5 ml 离心管1个（准备蛋白标准品工作液用）5. 单道移液器和枪头，8道移液器（排枪）和枪头6.PBS三、操作步骤 1. 水浴锅调至37 C 。
2.蛋白标准品工作液（1 mg/ml ）的配制：将蛋白标准品（5mg/ml ）从-20 C 冰箱中取出， 完全溶解并混匀。
取60 d 蛋白标准品（5mg/ml ），加入240 d PBS ，即稀释5倍，即配 成蛋白标准品工作液（1 mg/ml ）。
3.计算BCA 工作液总量=0.2 ml ※样本数+8） X2X1.1 （标准品和样本均需测复孔）。
BCA 工作量按50体积的BCA 试剂A 加上1体积的BCA 试剂B 配制（即50:1）,需充分混匀。
BCA样本数（n ） 1~5 6~7 8~10 11~12 13~14 15~16 17~19 20~21 22~23 24~26 A (ml )67891011121314154.按下表配制8个蛋白标准液（S0~S7）,充分摇匀。
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使用说明：
1. 取0.8ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(20mg BSA)中，充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即 使用，也可以-20℃长期保存。
2. 取适量25mg/ml蛋白标准，稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20l 25mg/ml蛋白标准，加入980l稀释液即可配制成 0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl或PBS 稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20℃长期保存。
15. Zong-Chun Yi, Hong Wang, Guang-Yao Zhang, Bing Xia. Downregulation of connexin 43 in nasopharyngeal carcinoma cells is related to promoter methylation. Oral Oncol. 2007 Feb 14;
注: 也可以室温放置2小时，或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反 应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。 7. 测定A562，540-595nm之间的波长也可接受。根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。
常见问题：
1. 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化。 可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质，详细的BCA法的兼容性列表请参考碧云天如下网页: /Compatibility Chart For BCA Kit.pdf
9. Le-Feng Zhang, Shuang-Qing Peng, Sheng Wang. Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5-hydroxytryptamine. Toxicology Letters 159 (2005) 71–82.
如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。 EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。不适用BCA法时，请试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
10. Wu ZQ, Li M, Chen J, Chi ZQ, Liu JG. Involvement of cAMP/cAMPdependent protein kinase signaling pathway in regulation of Na+,K+-ATPase upon activation of opioid receptors by morphine. Mol Pharmacol. 2006 Mar;69(3):866-76.
2. 是否每次测定时都需要做标准曲线？ 建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关， 所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。
使用本产品的部分文献：
1. Liu MJ, Wang Z, Li HX, Wu RC, Liu YZ, Wu QY. Mitochondrial dysfunction as an early event in the process of apoptosis induced by woodfordin I in human leukemia K562 cells. Toxicol Appl Pharmacol. 2004 Jan 15;194(2):141-55.
5. Liu MJ, Yue PY, Wang Z, Wong RN. Methyl protodioscin induces G2/M arrest and apoptosis in K562 cells with the hyperpolarization of mitochondria. Cancer Lett. 2005, 224:229–241.
13. Ma JF, Guo JK, Peng LW, Chen CY, Zhang LX. Decrease of Photosystem II Photochemistry in Arabidopsis ppt1 Mutant Is Dependent on Leaf Age. Journal of Integrative Plant Biology. 2006,48(12):1409-1414.
6. Liu MJ, Wang Z, Ju Y, Wong RN, Wu QY. Diosgenin induces cell cycle arrest and apoptosis in human leukemia K562 cells with the disruption of Ca2+ homeostasis. Cancer Chemother Pharmacol. 2005 Jan;55(1):79-90.
包装清单：
产品编号 P0012S-1 P0012S-2 P0012S-3 P0012S-4
—
产品名称 BCA试剂 A BCA试剂 B 蛋白标准(BSA) 蛋白标准配制液
说明书
包装 40ml 1.2ml 20mg 1ml 1份
保存条件：
室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。
注意事项：
需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测 定，但测定时，需根据比色皿的最小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积，样品和标准品的用 量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
2. Wu RC, Chen DF, Liu MJ, Wang Z. Dual effects of cycloheximide on U937 apoptosis induced by its combination with VP-16. Biol Pharm Bull. 2004 Jul;27(7):1075-80.
产品编号 P0012S
BCA蛋白浓度测定试剂盒
产品名称 BCA蛋白ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ度测定试剂盒
包装 200次
产品简介：
BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而 成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。
3. 根据样品数量，按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液，充分混匀。例如5ml BCA试剂A加 100lBCA试剂B，混匀，配制成5.1ml BCA工作液。 BCA工作液室温24小时内稳定。
4. 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20l加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液补足到20l。 5. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20l。 6. 各孔加入200l BCA工作液，37℃放置30分钟。
8. Zhang LF, Peng SQ, Wang S. Influence of lead (Pb2+) on the reactions of in vitro cultured rat aorta to 5-hydroxytryptamine. Toxicol Lett. 2005 Oct 15;159(1):71-82.
4. R.-C. Wu, Z. Wang, M.-J. Liu, D.-F. Chen and X.-S. Yue.β2-integrins mediate a novel form ofchemoresistance in cycloheximide-induced U937 apoptosis. Cell. Mol. Life Sci. 2004,61(16):2071–2082.
灵敏度高，检测浓度下限达到25g/ml，最小检测蛋白量达到0.5g，待测样品体积为1-20l。 在50-2000g/ml浓度范围内有较好的线性关系。 BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的
Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM， -巯基乙醇低于0.01%。不适用BCA法时建议试用碧云天生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(P0006)。 BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质的详细的兼容性，请参见碧云天如下网页: /Compatibility Chart For BCA Kit.pdf 每个试剂盒可以检测200个样品。
16. Zhang LF, Peng SQ, Wang S, Li BL, Han G, Dong YS. Direct effects of lead (Pb2+) on the relaxation of in vitro cultured rat aorta to acetylcholine. Toxicol Lett. 2007 Apr 25;170(2):104-10.
7. Zhao Y, Guan H, Liu SF, Wu RC, Wang Z. Overexpression of QM induces cell differentiation and mineralization in MC3T3-E1. Biol Pharm Bull. 2005 Aug;28(8):1371-6.