糖酵解中间产物的鉴定

二．教案与讲稿一、教案

二、讲稿

[实验目的]

1.通过本实验对糖酵解过程进一步加深理解。

2.初步了解一碘醋酸对酶的抑制作用。

3.通过一碘醋酸和硫酸肼的作用，了解使中间产物堆积的方法在研究中间代谢的意义。

[实验原理]

[实验步骤]

1.肝匀浆的制备

取兔肝3g剪碎，在研钵中先加Krebs-Ringer缓冲液2ml，待研匀后再加5ml缓冲液。

[讨论]

第1管中，水浴之前已加有三氯醋酸，可使参与糖酵解酶变性。但三氯醋酸与肝匀浆比例不当，不能使所有的酶变性，糖酵解过程中各种酶有少量活性，故必然有各种中间代谢物的生成，其中包括磷酸二羟丙酮与3-磷酸甘油醛。由于加有一碘醋酸与硫酸肼，故这二种中间代谢物堆积。故本管中有成腙反应，参与成腙反应的磷酸丙糖少量堆积。

第2管中，水浴之前未加有三氯醋酸，各种酶处在适宜条件下。但水浴之前加有一碘醋酸与硫酸肼，故糖原及磷酸丙糖之前步骤的中间代谢物将在实验过程中进行不完全的糖酵解，使磷酸丙糖堆积。故本管中有成腙反应，参与成腙反应的磷酸丙糖堆积。

第3管中，水浴之前未加有三氯醋酸、一碘醋酸、硫酸肼，各种酶处在适宜条件下，糖原及各中间代谢物均在实验过程中发生彻底的糖酵解，转变成终产物。故本管无成腙反应。

[结论]

3-磷酸甘油醛与磷酸二羟丙酮是糖酵解的中间产物。

[注意事项]

1.操作中应严格按表加样，避免溶液的错加、多加、漏加。

2.用吸量管及吸管加样多种不同液体时，应在每次加样另一种液体之前用清水

洗净。

3.每次水浴前必须摇匀。

4.过滤的方法。