常见液相色谱柱性能比较
反相 液相色谱柱 类型
反相液相色谱柱类型1.引言1.1 概述反相液相色谱(reversed-phase liquid chromatography, RP-LC)是指在液相色谱中使用极性流动相和非极性固定相的一种分离技术。
相比于传统的正相液相色谱,反相液相色谱更为常用,其应用领域涵盖了许多不同的样品类型和化学物质。
在反相液相色谱中,固定相通常由选择性的疏水性填料组成,而流动相则是一种较为极性的有机溶剂和水的混合物。
当样品在流动相中被注入柱子时,根据样品分子与固定相之间的相互作用力,不同成分将以不同的速率被分离。
这种分离的基本原理是根据分析物分子的极性差异来实现的。
反相液相色谱柱的选择也是非常重要的,不同类型的柱子具有不同的特点和分离效果。
例如,C18柱是最常用的反相液相色谱柱之一,其固定相表面上有十八个碳原子,对中等极性物质具有良好的分离效果。
另外,还有C8柱、C4柱等,它们根据碳原子数的不同而具有不同的分离能力。
总体而言,反相液相色谱柱是一种非常重要和广泛应用的色谱技术。
它在药物分析、环境监测、食品安全检测等领域发挥着重要的作用。
本文将详细介绍反相液相色谱柱的类型以及它们的特点和应用,希望能够为读者对该领域的了解提供一定的帮助。
1.2 文章结构本文将按照以下结构来展开讨论反相液相色谱柱类型。
在引言部分,我们将首先进行概述,介绍反相液相色谱柱的基本概念和重要性。
接着,我们会详细说明全文的结构和组织方式,以便读者能够清楚地了解文章的整体框架。
最后,我们会明确阐述本文的目的,即为读者提供关于反相液相色谱柱类型的全面指南。
在正文部分,我们将分为两个主要要点进行讨论。
首先,我们将介绍反相液相色谱柱类型的基本原理和特点。
这个要点的主要目的是使读者了解反相液相色谱柱的工作原理和它们在分析化学中的应用。
接着,我们将详细介绍不同类型的反相液相色谱柱,例如C18、C8、Phenyl等。
我们将对每种类型的反相液相色谱柱进行描述和比较,以便读者能够理解它们之间的差异和选择适合自己的柱子。
液相色谱分析型色谱柱
液相色谱分析型色谱柱/保护柱
天津琛航科苑科技发展有限公司是一家实验室产品供应商。
产品:Scienhome液相色谱柱(P/N:91182545)、Scienhome分析保护柱芯(P/N:612111)、Scienhome色谱保护柱组件(P/N:600220)、co∙ιv恒温柱箱、针头滤器、微孔滤膜等其它色谱配套产品。
Kromasi1硅胶基填料是为满足高效液相色谱(HP1C)、超临界流体色谱(SFC)和模拟流动床(SMB)的需求而设计的,适合从分析到流程规模应用。
高性能KromaSi1硅胶基填料的特点:
球形颗粒,化学纯度高,化学稳定性好,大表面积,高机械强度,优化的表面性质,规则的孔结构,各批量间重现性好。
Kromasi1色谱柱是瑞典EKACHEMICA1S公司采用自己生产的的填料和高压匀浆填充技术生产的高性能色谱柱,具有高柱效和寿命长的特点。
91182545Kromasi1C18250X4.6,5u
91182045Kromasi1C18200X4.6,5u
91181545Kromasi1C18150X4.6,5u。
安捷伦的色谱柱的介绍及选择
安捷伦的色谱柱的介绍及选择安捷伦(Agilent)是一家全球领先的科学仪器和化学分析解决方案提供商,其色谱柱产品在色谱分析领域具有广泛的应用和卓越的性能。
在选择安捷伦色谱柱时,需要考虑样品类型、分析目标、分析条件和仪器兼容性等因素。
本文将详细介绍安捷伦色谱柱的特点、类型和选择要点,以帮助读者更好地了解和选择适合自己实验需求的色谱柱。
安捷伦色谱柱主要有液相色谱柱和气相色谱柱两大类,涵盖了分子筛柱、反相柱、离子交换柱、氨基酸柱等各种类型。
以下是对其中一些常用色谱柱类型的详细介绍:1.反相柱(C18、C8等):反相柱是液相色谱柱中应用广泛的类型之一,它的固定相通常是疏水性的烷基链(如C18、C8等),适用于非极性或弱极性化合物的分离。
安捷伦的反相柱具有较高的分离效果和使用寿命,能够提供良好的保留和分辨能力。
2.离子交换柱:离子交换柱可以根据溶液中离子的电荷和大小进行选择,可分为阳离子交换柱和阴离子交换柱。
它们广泛应用于药物分析、环境分析和生物样品分析等领域。
安捷伦的离子交换柱具有良好的耐酸碱性和高分辨能力,可有效分离带电离子和无机离子。
3.氨基酸柱:氨基酸柱是一类特殊的反相柱,其固定相是在C18固定相的基础上修饰上了特殊的萘乙酰氨基酸萃取相。
这种柱材具有特异性和选择性,特别适用于氨基酸的分离和分析。
4.手性柱:手性柱是用于分离和分析具有镜像异构体的化合物。
安捷伦色谱柱的手性柱具有优良的立体选择性和分离能力,适用于手性药物、香精香料、农药等领域的研究。
在选择安捷伦色谱柱时,需要综合考虑以下几个方面:1.样品特性和分析目标:根据样品的性质和分析目标确定使用的色谱柱类型。
如反相柱适合非极性和弱极性化合物的分离,离子交换柱适用于阳离子和阴离子的分析。
2.分析条件和分离效果:考虑分析条件(如流速、温度等)对色谱柱性能的影响。
根据分析条件来选择具有适当相容性和稳定性的柱材。
3.样品矩阵和交叉污染:如果样品矩阵复杂或存在交叉污染问题,可以选择具有更好选择性和保持高分辨能力的色谱柱。
常用液相色谱柱型号及适用范围
常用液相色谱柱型号及适用范围
液相色谱柱是一种常用的色谱分析仪器,常用的液相色谱柱型号及适用范围如下:
- 反相色谱柱(Reverse Phase Column):由高吸附性的非极性填料填充,用于对极性化合物的分离,常见的填充物包括C18,C8,C4和CN等,反相色谱柱广泛应用于药物分析,天然产物分离等领域。
- 手性色谱柱(Chiral Column):适用于分离具有手性结构的化合物,如药物、农药、食品添加剂等,常见的手性色谱柱包括手性固定相色谱柱和手性流动相色谱柱。
- 离子交换色谱柱(Ion Exchange Column):由离子交换树脂填充而成,能够分离带电荷的化合物,如阴阳离子、蛋白质、多肽等,常用于环境分析、食品分析、药物分析等领域。
- 尺寸排阻色谱柱(Size Exclusion Column):由多孔性填料填充而成,能够分离分子大小不同的化合物,如蛋白质、多糖、聚合物等,常用于生物大分子的分离和分析。
不同型号的液相色谱柱适用范围不同,在选择液相色谱柱时,需要根据待测化合物的性质和色谱分析的要求选择合适的色谱柱。
中药制剂高效液相常见的色谱柱类型及其检测器类型
中药制剂高效液相常见的色谱柱类型及其检测器类型中药制剂高效液相常见的色谱柱类型包括C18、C8、Phenyl、CN、NH2等。
其中C18属于常规的反相色谱柱,适用于大多数化合物的分离;C8柱的分离效果较C18柱略差,但可以用于分离易失活的化合物;Phenyl柱可以增加由于芳香环与反相胶体间的作用而引起的选择性;CN柱比C18柱对亲水性化合物更为灵敏,适合分离极性化合物;NH2柱与CN柱相似,适于极性化合物的分离。
常见的检测器类型包括UV检测器、荧光检测器、电化学检测器和质谱检测器。
UV检测器是常见的检测器类型,根据样品吸收UV光谱特征进行定量或者鉴定;荧光检测器则根据荧光光谱特征进行检测,其对于化合物的灵敏度一般高于UV 检测器;电化学检测器包括阳极和阴极两种类型,可用于检测电化学反应产生的电信号,最常用的电化学检测器是电化学荧光检测器;质谱检测器则可以对化合物的结构进行进一步的确认和鉴定,其灵敏度和选择性都比较高。
如何选择色谱柱
如何选择色谱柱,比较一下C-18及C-8柱的硅烷基质C-18和C-8硅烷色谱柱是高效液相色谱(HPLC)中最常使用的色谱柱,而且,在美国市场上有多于100种C-18和C-8色谱柱出售。
面对这么多可供选择的色谱柱,分析工作者很难从中选出适当的色谱柱来具体使用,同时更难选择出一根合适的替换柱。
对于非极性样品(如小分子芳烃)或弱极性样品(如对羟基苯甲酸酯),C-18和C-8色谱柱是最容易选择的。
对于这类样品,色谱柱之间的主要差异在于保留因子(k);而在选择性方面却只有微小的差异。
但对于极性和中等极性样品色谱柱的选择却相当困难。
例如含氨基或酸性基团的药物化合物。
分析工作者会发现极性样品在保留时间、选择性和峰形都有很大的差别。
色谱柱的选择性和峰形受到担体硅胶的影响远大于键合相的影响。
另外,有研究报道在反相色谱中表面硅烷醇、硅酸及金属杂质的影响。
在特殊情况下,选择性的差异可由填料制备时使用的键合过程决定的。
通常情况下,色谱工作者选择HPLC色谱柱是通过比较由色谱柱供应商所提供的填料介质的规格来决定的。
这些规格内容包括:表面积、末端封尾、含碳量、颗粒形状、颗粒尺寸、孔径、孔容积、装填密度和键合度。
含碳量和键合度仅由色谱制造商提供,没有这些规格使用者不可能计算出碳的克数,也不可能计算出一根色谱柱中键合相的微分子数。
分析工作者可使用这两个数据来估计一根色谱柱的疏水性质。
然而,即使制造商提供所有上述规格数据,使用者也不可能精确地预测出色谱柱对含有极性官能团的化合物的选择性。
由于色谱的保留时间是基于分析物和填充基质之间许多微妙的相互作用,我们建议使用混合物测试来比较填充基质的规格与性能。
Engelhardt 和他的同伴回顾了硅烷反相色谱的特性,并且提出用溶解物试验来描述固定相的疏水性和亲硅基醇特性。
另外有一些人也改进了测试条件和方法来解释那些色谱数据,但他们只测试了很少的商品色谱柱,并且在他们的测试混合物中没有羧酸。
液相柱子
请问C8,C18,ODS,RP-8和RP-18;APS,diol,CN和NH2等柱子的功能,适用条件,区别1、反相柱子:一般适用范围比较大。
分离极性比较小的物质。
极性强的物质先出柱。
ODS就是C18柱子。
RP-8和RP-18分别是C18柱子和C8柱子。
C18柱子和C8柱子是柱子的碳链的长度不一样的。
碳链增长了,也增加了键合相的非极性作用的面积,对保留值和选择性都有影响,随烷基碳链的增长对溶质分离的选择性也增强了.但是对单一或简单组分确实看不出太大区别。
2、正相柱子:一般分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。
APS为NH2柱子另外diol 代表的是球形硅胶邻二羟基丙基醇基柱,正相柱,极性强的物质后出。
硅胶柱子的特点是可分离异构体,柱子的载样量大,用于制备分离,不污染收集的流分了,缺点是分析应用不方便,如流动相的含水量应该严格控制,再现性较差,需较长的平衡时间,不适用于梯度洗脱。
碱性化合物在氨基和二醇柱上的保留强,而偶极化合物在腈基柱子上的保留强。
建议您看看色谱分析等专业书籍有帮助的。
化学工业出版社有一套周同惠编的色谱系列从书,有色谱柱分册,建议你看一下那套书ODS-AODS-A液相色谱柱是国际上是销售最好的一种传统色谱柱,同时也是HPLC中应用最广泛的应用。
YMC ODS-A液相色谱采用高度封端的表面结构和具有适当的疏水性,广泛地应用于多种化合物的分离。
在严格质量控制体系下,对50个以上的参数进行严格控制,保证了稳定的质量。
其通常作为液相色谱标准柱。
ODS-AMODS-AM液相色谱柱是一种高碳含量的C18柱,具有和ODS-A液相色谱柱相似的选择性。
二者的主要区别是ODS-AM液相色谱柱采用的是专利的封端技术,采用十分严格的生产技术规范,可提供优良的峰对称性和更高分离效果的重现性,从而改善较难分离组分的峰形。
ODS-AQODS-AQ液相色谱填料具有中等强度的疏水性和氢键键合相色谱填料,由于其具有相对高的疏水性,其与ODS-A相比有不同的保留行为,其主要用于碳水化合物的分离,如寡聚多糖类、葡萄糖苷类、药物和天然化合物的分离。
常用液相色谱柱选择
常用色谱柱简介气相色谱毛细柱(键合,聚二甲基硅氧烷)HP-1,DB-1,P-1,CP-SIL5CB,Ultra-1,007-1,RTx-1,AT-1类似固定相:SE-30,SP-2100,OV-1,OV-101,使用温度:-60℃-320℃应用范围:烷烃,芳烃,多环芳烃,醇,酚,酮,酯,醛,胺,卤代烃,吡啶,糖衍生物,氨基酸衍生物,维生素衍生物,镇痛药,农药,溶剂,胆固SPB-50型中等极性柱醇,香料,咖啡,食品添加剂等。
(键合, 50%二苯基,50%二甲基聚硅氧烷)对照品牌:HP-50,HP-17,DB-17,RTx-50,AT-50 SPB-5型弱极性柱类似固定相:OV-17, SP-2250,使用温度:30℃-310℃(键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)应用范围:烷烃,低沸点芳烃,多环芳烃,醇,甘对照品牌:HP-5,DB-5,BP-5,CP-SIL 8CB,油三酸酯,喹啉,卤素化合物,香料,农药,酯,Ultra-2, ,RTx-5,AT-5镇痛药,除草剂等。
类似固定相:SE-54,SE-52,OV-73 使用温度:-60℃-320℃PTE-5,PTE-5QTM型弱极性柱应用范围:烷基苯,多环芳烃,醇,酚,酮,脂肪(MS专用柱,键合,5%苯基,95%甲基聚硅氧烷)酸酯,苯二甲酸酯,硝基芳烃,芳胺,烷基胺,联对照品牌:HP-5 MS,DB-5 MS, DB-5.625,XTI-5,苯胺,卤代烃,多氯联苯,,糖类衍生物,维生素衍BPX625,半挥发污染物分析柱(US EPA方法525,生物,有机酸,镇痛药,农药,抗组胺药,溶剂,625.5,625)生物碱,防腐剂,香料等。
类似固定相:SE-54,SE-52 使用温度:-60℃-320℃应用范围:多氯联苯,胺,有机磷,有机氯农药,SUPELCOWAX 10型极性柱含氯除草剂,酚,苯胺,香料等。
(键合,聚乙二醇二万)对照品牌:HP-Wax,DB-Wax,BP-20,CP-Wax 52CB,SPB-1701型中等极性柱HP-INNO Wax,AT-Wax(键合, 14%氰丙基,86%二甲基聚硅氧烷)类似固定相:PEG-20M, CARBOWAX-20M,使用温对照品牌:HP-1701,DB-1701,RTx-1701,AT-1701,度:35℃-280℃BP-10,CPSil19CB应用范围:低沸点芳烃,醇,酮,酸,酯,醛,醚,类似固定相:OV-1701,SP-2250 使用温度:室温-280乙二醇,丙二醇,甘油,吡啶,胺,亚硝胺,卤代℃烃,胆汁酸衍生物,冰片,薄荷,精油,香料,酒,应用范围:醇,卤素化合物,有机氯农药,酸性药苯乙烯,茶,溶剂等。
安捷伦液相C18色谱柱性能测试试验
7.742
0.86
0.248155
0.93
0.2450
5532
对于废糖水中的柠檬酸而言(其他条件相同,仅使用不同色谱柱),新C18柱的峰形、对称性优于原柱,保留时间缩短,但新柱的容量因子不如原柱。
新柱对废糖水的测定,共分离出34个峰,柠檬酸峰位于第12位;原柱对废糖水的测定,共分离出31个峰,柠檬酸峰位于第17位。
安捷伦液相C18色谱柱性能测试试验
一、目的
分别使用Diamonsil-C18和Diamonsil RD-5 C18色谱柱对柠檬酸标准(1.0396g/100ml)、中和废糖水进行测定,通过中和废糖水图谱对比两色谱柱性311A、G1316A、G1329A、G1315D
方法信息:流速0.6ml/min、进样量8.0μl、柱温25℃、流动相乙腈:0.1%磷酸溶液=3.5:96.5
三、结果:
两色谱柱对同一中和废糖水样品中柠檬酸的定量检测结果对比
色谱柱名称
柠檬酸RT
K
含量
对称因子
峰宽
塔板数
Diamonsil-C18
9.694
1.33
0.160451
0.81
0.3433
4417
液相色谱柱固定相类型
液相色谱柱固定相类型
液相色谱柱的固定相类型主要有以下几种:
1.硅胶:是最常用的固定相,它具有高吸附性、高渗透性和高化学
稳定性等特点,能够满足大多数液相色谱分析的需求。
2.氧化铝:具有与硅胶相似的物理和化学性质,也是一种常用的固
定相。
3.聚酰胺:具有较高的稳定性,可以在各种溶剂和酸碱条件下使用,
常用于分离芳香胺和酚类化合物。
4.氨基甲酸酯:是一种低成本、高效率的固定相,特别适合分离氨
基酸和肽类化合物。
5.反相固定相:这种固定相通常由硅胶表面涂覆聚合物而成,适用
于分离非极性或中等极性的化合物。
常见的反相固定相包括C18、C8和苯基等类型。
6.离子交换固定相:这种固定相基于离子交换原理,适用于分离带
电的离子或离子化合物。
常见的离子交换固定相包括SAX、SCX和阴离子交换柱等类型。
7.体积排阻固定相:这种固定相基于分子尺寸排阻原理,适用于分
离大分子化合物如蛋白质、多糖和核酸等。
常见的体积排阻固定相包括SEPHADEX和BIOGEL等类型。
这些固定相各有特点,适用于不同的分离需求。
选择合适的固定相是实现高效液相色谱分离的关键之一。
常见液相色谱柱性能比较
常见液相色谱柱性能比较一、高性能色谱柱特点:柱效高,价格高,通用性好,使用寿命长,pH范围宽1、Waters公司Xbridge2005年waters公司推出,杂化颗粒柱。
优点:pH 1-12,在高pH状态下,没有能与此色谱柱匹敌的,目前市场的宽pH色谱柱在高pH的状态下(9-12)普遍寿命很短,如Gemini,资生堂公司Capcell,YMCPro-C18,包括waters的第一代杂化柱Xterra都是寿命不长,Zorbax Extend更是不堪。
柱效与一流的硅胶柱相当,甚至有过之无不及,杂化颗粒柱和聚合物色谱柱的问题在于柱效,Xterra和常见的PSDVB的色谱柱都有不错的pH范围,但是柱效低的问题无法解决,这是聚合物填料一般比较软且不耐压的原因造成。
在如此宽的pH范围,最大的好处是可以在化合物的保留平台区去开发方法(pH1-3,pH9-12),这样能得到更稳定更容易重现的方法,对酸性,中性,尤其是碱性化合物都能得到理想的峰形。
注:Waters UPLC色谱柱与Xbridge采用同类型填料,只是颗粒度是1.7um,所以不再重复。
缺点:价格高,平均每支¥7000多的,不是大多数中国客户可以接受的。
2、MerckChromolith整体化色谱柱Merck公司2001年推出。
优点:高流速、低压力,可以快速分析样品,因为压力低,所以可以串联色谱柱以获得更高的柱效而不用担心色谱柱耐压问题,低压力是因为硅胶棒的大量中孔的存在,中孔的存在也让这支色谱柱不怕堵,在处理比较脏的样品的时候会优势很大(如中药),实际的寿命也因此延长。
这个色谱柱最大的特点是柱效高出峰时间快,特别适合之前分析时间超长的实验条件,目前很好的例子就是人参的指纹图谱,因为成分复杂,之前出峰要2个小时,现在用整体化色谱柱30min就可以分析完了(已有报导),且不影响柱效,类似于UPLC,但不像UPLC那么容易堵。
缺点:规格单一,单价比较高,单价¥7000左右,所以通过串联获得更高柱效的方式显得比较奢侈。
常用液相色谱柱品牌及型号
常用液相色谱柱品牌及型号一、液相色谱柱品牌在液相色谱分析中,色谱柱是关键的部件,其性能直接影响到整个分析过程的效率和结果的准确性。
以下是一些常见的液相色谱柱品牌:1.安捷伦(Agilent)2.沃特世(Waters)3.布鲁克(Bruker)4.色谱柱科技(Chromolith)5.思佳液相(Sugar HPLC)6.雷勃(Rheodyne)7.菲尼根(Phenomenex)8.依利特(Eluent)9.纳杰(Najing)10.博纳艾杰尔(Bonna-Agilent)二、液相色谱柱型号以下是一些常见的液相色谱柱型号:1.C18柱2.C18柱是最常用的液相色谱柱之一,具有高效、高选择性、高柱效等优点,广泛用于生物医药、食品分析、环境监测等领域。
3.C8柱4.C8柱是另一种常见的液相色谱柱,其特点是在反相色谱中具有较好的保留能力和分离效果,常用于分离中等极性和非极性化合物。
5.C30柱6.C30柱是一种具有长碳链的液相色谱柱,能够分离出更多的化合物,特别适合于分离蛋白质、多肽等大分子物质。
7.C4柱8.C4柱具有较低的极性和较高的稳定性,是一种常见的反相色谱柱,适用于分离极性和中等极性的化合物。
9.C16柱10.C16柱是一种具有较长碳链的液相色谱柱,具有较好的保留能力和分离效果,常用于分离非极性和中等极性的化合物。
11.NH2柱12.NH2柱是一种具有氨基功能团的液相色谱柱,适用于分离极性和中等极性的化合物,常用于生物医药、环境监测等领域。
13.HILIC柱14.HILIC柱是一种具有极性固定相的液相色谱柱,适用于分离极性和非极性化合物,特别适合于分析水溶性化合物。
15.RP柱16.RP柱是一种反相色谱柱,具有较高的保留能力和分离效果,适用于分离中等极性和非极性化合物。
17.水相色谱柱18.水相色谱柱是一种适用于分离水溶性化合物的液相色谱柱,具有较高的分离效果和稳定性,常用于生物医药、环境监测等领域。
液相色谱柱的分类与选择
液相色谱柱的分类与选择液相色谱柱的分类(按色谱固定相基质分)1.硅胶基质:1.1反相色谱柱:反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
1.2正相色谱:正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),,二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
1.3离子交换色谱柱:以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱,常用规格:强阴离子色谱柱(SAX),强阳离子交换色谱柱(SCX)2.聚合物基质:聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。
相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。
所有聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。
用于HPLC的高交联度聚合物填料,其膨胀和收缩要有限制。
溶剂或小分子容易渗入聚合物基质中,因为小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢,所以造成小分子在这种基质中柱效低。
对于大分子像蛋白质或合成的高聚物,聚合物基质的效能比得上陶瓷性基质。
因此,聚合物基质广泛用于分离大分子物质。
色谱柱的选择液相色谱仪基质的选择大致遵循以下法则,硅胶基质的填料被用于大部分的HPLC分析,尤其是小分子量的被分析物,聚合物填料用于大分子量的被分析物质,主要用来制成分子排阻和离子交换柱。
色谱柱hp和db
色谱柱hp和db全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:色谱柱是色谱分析中必不可少的设备之一,扮演着分离和分析样品成分的重要角色。
目前市场上常见的色谱柱主要有HP(高效液相色谱柱)和DB(气相色谱柱)两种类型。
它们在不同的分析场景下具有各自的优势和特点,下面我们就来详细介绍色谱柱HP和DB。
HP色谱柱(High Performance Liquid Chromatography Column)是一种针对液相色谱技术的色谱柱。
HP色谱柱具有高效、快速、灵敏和选择性好等特点,被广泛应用于食品、医药、环境等各个行业的分析领域。
HP色谱柱的填料通常是一种多孔的固定相,填料的种类和粒径大小会直接影响到柱的分离效果。
HP色谱柱通常要求在高压下进行分离,因此需要使用高压液相色谱系统进行操作,同时还需要使用高品质的溶剂、梯度和检测器等辅助设备。
HP色谱柱的应用场景非常广泛,比如在医药行业中,HP色谱柱可以用于检测药物的纯度和含量;在环境监测中,HP色谱柱可以用于检测水质和大气中的污染物;在食品行业中,HP色谱柱可以用于检测食品中的添加剂和残留物等。
HP色谱柱的应用范围涵盖了许多领域,并且具有高效、准确、灵敏等优点,是色谱分析中不可或缺的重要设备。
与HP色谱柱相对应的是DB色谱柱(Deactivated Borosilicate),是一种适用于气相色谱技术的色谱柱。
DB色谱柱具有高分离效率、高分辨率和快速分离的特点,被广泛应用于各种气相色谱分析中。
DB色谱柱的填料通常是一种不活性的硼硅玻璃,填料的粒径大小和孔径大小不仅影响到柱的分离效果,还直接影响到样品的进样量和分析速度。
HP色谱柱和DB色谱柱是色谱分析中常见的两种色谱柱类型,它们在液相色谱和气相色谱分析领域中有着各自的优势和特点。
HP色谱柱具有高效、快速、灵敏和选择性好等特点,适用于液相色谱分析;而DB色谱柱具有高分离效率、高分辨率和快速分离的特点,适用于气相色谱分析。
hplc的柱子类型
hplc的柱子类型HPLC(高效液相色谱)是一种广泛应用于化学分析、药物分析、环境检测等领域的分离技术。
HPLC技术的核心在于使用高压泵将流动相(溶剂)以高流速通过柱子,进而实现目标组分的分离与分析。
柱子作为HPLC中最重要的组件,起到分离化合物的作用,而柱子的类型和性能直接决定了HPLC分析的选择性、分离效果和分离速度。
下面将详细介绍几种常见的HPLC柱子类型。
1. 反相柱(RP柱):反相柱是HPLC中最常见的柱子类型。
反相柱的固定液相为疏水性材料,如脱水层析纸、聚酸酯等,并用非极性稳定剂提高其稳定性。
反相柱主要用于分离极性化合物,通过控制流动相溶剂中的有机溶剂比例,使样品中的极性化合物与反相柱液相间发生相互作用,以实现化合物的分离。
2. 正相柱(NP柱):正相柱与反相柱相反,其固定液相为亲水性材料,如硅胶、氨基化硅胶等。
正相柱主要用于分离非极性化合物,其与反相柱相比较而言,对极性化合物的分离能力较差。
3. 离子交换柱:离子交换柱可以进一步分为阴离子交换柱和阳离子交换柱。
阴离子交换柱用于分离阳离子类型的化合物,而阳离子交换柱则用于分离阴离子类型的化合物。
离子交换柱的固定液相为离子交换树脂,具有强大的分离能力,因此在药物分析和生化分析等领域中被广泛应用。
4. 大孔径柱:大孔径柱也被称为快速流动相柱(FRC柱),其特点是具有较大的孔径和较小的比表面积。
大孔径柱的主要作用是提高流速和样品处理速度,适用于分析中需要快速分离的大分子化合物的情况。
5. 手性柱:手性柱主要用于分离具有手性的化合物。
由于手性化合物的旋光性质以及手性与生命科学和药物活性之间的密切关系,手性柱在医药领域得到了广泛的应用。
手性柱的固定液相一般是手性配体,具有对特定手性的化合物具有较高的选择性。
除了上述几种常见的柱子类型外,还有许多其他类型的HPLC柱子,如气相色谱柱、高效毛细管电泳柱(CEC柱)等。
每种柱子类型都有其独特的应用领域和特点,科学家们需要根据具体的实验目的和需求选择合适的柱子类型。
液相不同粒径色谱柱最佳流速选择
液相不同粒径色谱柱最佳流速选择
液相色谱柱是液相色谱法中的重要组成部分,其中不同粒径的色谱柱对于流速的选择有着不同的最佳值。
本文将介绍液相色谱柱最佳流速的选择方法,以便更好地发挥色谱柱的性能,提高分离效果。
一、液相色谱柱粒径对流速的影响
液相色谱柱的粒径是影响流速的重要因素之一。
一般来说,粒径越小,色谱柱的塔板高度越低,传质效率越高,但是柱压降也会增加。
因此,选择合适的粒径对于液相色谱柱的流速选择至关重要。
二、最佳流速选择方法
1. 实验测定法
实验测定法是一种常用的确定液相色谱柱最佳流速的方法。
通过实验测定不同流速下的分离效果,可以找到最佳流速。
具体步骤如下:
(1)选择合适的色谱柱,确定色谱条件;
(2)改变流速,分别进行实验;
(3)记录每个流速下的分离效果,如峰形、分离度等;
(4)分析实验结果,找到最佳流速。
2. 经验公式法
经验公式法是根据液相色谱柱的粒径和其他因素,通过经验公式估算最佳流速的方法。
常用的经验公式如下:
V=d^2*1.5*10^4/t
其中,V为最佳流速(mL/min),d为粒径(cm),t为塔板高度(cm)。
可以根据色谱柱的粒径和塔板高度计算出最佳流速。
三、最佳流速选择注意事项
1. 考虑到实验条件和分离效果,选择合适的流速范围;
2. 对于不同粒径的色谱柱,最佳流速可能不同;
3. 在选择最佳流速时,需要考虑色谱柱的使用寿命和维护成本;
4. 在实际应用中,可以根据具体分离物质的特点和分离度要求,适当调整流速。
常用C18柱性能介绍
大家好。
我是资生堂先端科学事业推进部的城田•修。
今天为大家讲解的第一个主题是“常用C18色谱柱不同特性及聚合物包被型色谱柱的介绍”。
因为只要是能够溶解在溶剂中的物质都可以成为分析对象,所以液相色谱可以广泛应用在各个领域。
液相色谱中使用C18柱的反相色谱法以生物体相关物质为分析对象,能够满足主要研究领域的需要,使用最为广泛。
现在,市场上出售的C18柱品牌繁多,约有数百种。
在此,向大家介绍多种C 18柱共存的原因以及从中选择符合分析目的商品的一些技巧。
此主题相关图片如下1-2.jpg:C18填料制法如下。
将具有烷基链的硅烷化剂与硅胶表面的硅醇基反应。
因为使用了共价键和的方式将烷基链紧紧固定在硅胶表面,所以烷基链不会被流动相冲洗掉,作为色谱固定相稳定发挥着作用。
这张图描述的C18填料的合成过程看似简单,但实际上固相与液相之间的反应比液相之间的反应更难控制。
与一般化学品相比,对色谱填料再现性的要求也会高很多。
如果实际使用的原料和反应条件稍有差别,最终产品的分离特性将会有很大改变。
这种变化,随目的不同或者成为缺点,或者也可能成为优点。
但是,如果不具有良好再现性,在实际应用中就不能被采用。
这样,在市场上就出现了数百种具有不同分离选择特性的C18色谱柱。
此主题相关图片如下1-3.jpg:关于填料的合成进一步详细说明。
市场上的商品大多分为两个步骤进行合成。
首先,如刚才介绍的,将C18基团导入到硅胶表面。
接下来进行第二步反应,将小分子试剂导入到第一步残留的硅醇基上,此过程被称为封尾。
通过封尾,尽可能地减少原料硅胶的影响,确保与硅胶表面有较强相互作用的化合物的分离效果。
另外,通过此步骤,能够比较容易的确保产品性能的再现性。
不受原料硅胶自身特性影响,提供性能稳定的商品是厂家永恒的课题。
另外,最近作为硅胶的替代物,含有机物的原料也在商品化并在出售,但是,这样的原料还没有超过硅胶,大半的商品仍然是以硅胶为原料。
此主题相关图片如下1-4.jpg:C18键合型填料差别化的主要原因如下。
色谱柱的性能 色谱柱技术指标
色谱柱的性能色谱柱技术指标色谱柱的性能与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。
色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯—二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成,如:较为经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等。
一、基质的特点:1、硅胶硅胶是陶瓷性质的无机物基质,刚性大,不易变形。
化学性质较稳定,但对于水溶液尤其碱性水溶液仍旧是不稳定的,即使表面经过良好的化学键合,覆盖了固定液,还是要注意水、碱性溶液、酸性溶液对硅胶的溶解作用,基质或者说是柱床(packed bed)溶解对色谱柱的影响是致命的。
以硅胶为基质的填料构成了目前绝大多数的色谱柱填料。
纯硅胶填料适合分别溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,硅胶也可以做凝胶色谱但柱效较低。
硅胶基质键合固定相的高压液相填料,有其他填料无法比拟的高分别效能。
2、二氧化铝二氧化铝和硅胶相像,但对水溶液、酸性碱性水溶液溶液更加不稳定。
所以,极少用作键合固定相的基质,也是适合分别溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,尤其是分别芳香族碳氢化合物。
酸性易离解的化合物简单在二氧化铝上形成死吸附。
另外,氧化铝分别几何异构体本领优于硅胶。
3、聚合物填料聚合物基质受压会变形,压力限度低但pH使用范围宽。
苯乙烯—二乙烯苯基质疏水性强,使用任何流动相,在整个pH范围内稳定,可以用强酸、强碱来清洗色谱柱。
甲基丙烯酸酯基质比苯乙烯—二乙烯苯疏水性更强,但可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。
由于不耐压、有溶胀性,所以聚合物填料适合用于大分子像蛋白质或合成的高聚物,另外还可以制成分子排阻、离子交换柱。
近年进展快速的大孔树脂,实际上主体就是苯乙烯—二乙烯苯聚合物或仿佛的合成高聚物。
由于硅胶基质的确定地位,以下紧要以硅胶为例。
色谱柱填料的种类及性能
色谱柱填料的种类及性能色谱柱填料是色谱分析中的核心部件,对于色谱分析的分离效果和分析结果具有决定性的作用。
因此,填料的种类和性能对于色谱分析具有重要的意义。
本文将介绍几种常见的色谱柱填料的种类及其性能特点。
硅胶填料硅胶填料是一种广泛使用的液相色谱柱填料。
硅胶填料通常包括疏水性硅胶和亲水性硅胶两种。
疏水性硅胶填料适用于非极性物质和中等极性的化合物的分离,而亲水性硅胶填料则适用于极性物质的分离。
硅胶填料具有较高的环保性和稳定性,适用范围广,但对于大分子类化合物,分离效果较差。
碳水化合物填料碳水化合物填料是用于气相色谱柱和液相色谱柱的其中一种填料,具有高热稳定性和惰性,能够对一些高沸点和热敏性化合物进行选择性的分离。
碳水化合物填料通常分为活性和非活性两种。
活性碳水化合物填料通常包含含有官能团的碳,如酸、醛、酮和胺等,这些官能团与有官能团的分子进行特异性的相互作用。
这种填料更适合用于对有官能团的显色分子进行分离。
聚合物填料聚合物填料又称高分子填料,指的是将一些含有双键和活性基团的单体聚合在一起,形成具有内部空隙的球状颗粒物。
聚合物填料分为亲水性和疏水性两种。
在液相色谱柱中,亲水性聚合物填料通常用于分离疏水类化合物,而疏水性聚合物填料则用于分离亲水类化合物。
氨基填料氨基填料也是一种常见的液相色谱柱填料,是在硅胶或聚合物球上引入含有氨基的官能团而制成的。
氨基填料可根据官能团的亲疏水性来选择分离特定极性分子的溶剂。
氨基填料通常用于分离带有氨、羟基或酚基等极性官能团的化合物。
结论以上几种色谱柱填料是常见的液相和气相色谱柱填料。
在选择填料时,需要根据待分离分子的物化性质和官能团来选择最适合的填料,以期达到更好的分离效果和分析结果。
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常见液相色谱柱性能比较
一、高性能色谱柱特点:柱效高,价格高,通用性好,使用寿命长,pH范围宽
1、Waters公司Xbridge
2005年waters公司推出,杂化颗粒柱。
优点:pH 1-12,在高pH状态下,没有能与此色谱柱匹敌的,目前市场的宽pH色谱柱在高pH的状态下(9-12)普遍寿命很短,如Gemini,资生堂公司Capcell,YMCPro-C18,包括waters 的第一代杂化柱Xterra都是寿命不长,Zorbax Extend更是不堪。
柱效与一流的硅胶柱相当,甚至有过之无不及,杂化颗粒柱和聚合物色谱柱的问题在于柱效,Xterra和常见的PSDVB的色谱柱都有不错的pH范围,但是柱效低的问题无法解决,这是聚合物填料一般比较软且不耐压的原因造成。
在如此宽的pH范围,最大的好处是可以在化合物的保留平台区去开发方法
(pH1-3,pH9-12),这样能得到更稳定更容易重现的方法,对酸性,中性,尤其是碱性化合物都能得到理想的峰形。
注:Waters UPLC色谱柱与Xbridge采用同类型填料,只是颗粒度是1.7um,所以不再重复。
缺点:价格高,平均每支¥7000多的,不是大多数中国客户可以接受的。
2、MerckChromolith整体化色谱柱
Merck公司2001年推出。
优点:高流速、低压力,可以快速分析样品,因为压力低,所以可以串联色谱柱以获得更高的柱效而不用担心色谱柱耐压问题,低压力是因为硅胶棒的大量中孔的存在,中孔的存在也让这支色谱柱不怕堵,在处理比较脏的样品的时候会优势很大(如中药),实际的寿命也因此延长。
这个色谱柱最大的特点是柱效高出峰时间快,特别适合之前分析时间超长的实验条件,目前很好的例子就是人参的指纹图谱,因为成分复杂,之前出峰要2个小时,现在用整体化色谱柱30min 就可以分析完了(已有报导),且不影响柱效,类似于UPLC,但不像UPLC那么容易堵。
缺点:规格单一,单价比较高,单价¥7000左右,所以通过串联获得更高柱效的方式显得比较奢侈。
3、Phenomenex公司Gemini ,采用硅胶球聚合物包被技术。
pH范围1-12。
优点:因为聚合物涂层抑制了碱性溶液水解硅胶,所以可以承受一定的碱性条件,由于是硅胶球颗粒,所以柱效不错,比Xterra或者PSDVB这类色谱柱柱效好。
单价比较低,¥3000以内。
缺点:聚合物涂层稳定性比较差,所以当涂层损失时,色谱柱会很坏被碱性溶液溶解,这也是其寿命远不及Xbridge的原因。
另外涂层损失也会影响结果重现性。
4、资生堂Capcell ,采用硅胶球聚合物包被技术。
pH范围1-10。
类似于Gemini同样的技术,只是参数指标比phenomenex低调。
单价偏高,¥5000以内。
5、Agilent ZorbaxExtend,采用双配位键和相技术。
pH2-10
优点:不详
缺点:在使用高pH时,基本上都会介绍Extend,但是实测数据说明该款色谱柱的耐高pH 能力较差。
二、高纯硅胶柱特点:柱效高,峰形好,适用广泛,价格合适,为各色谱柱公司目前主流色谱柱
1、Merck的Purosphere STAR ,为Merck公司1999年推出,pH 1.5-10.5,通用性好,柱效高;缺点:市场推广较差,知名度比较低,
2、Phenomenex的Luna ,Phenomenex公司的主打色谱柱,pH1.5-10,通用性好,在进口色谱柱市场上占有一定份额;缺点:装填相对松散,柱头填料容易塌陷
3、Waters的Symmetry ,由于Waters推出Sunfire超纯硅胶柱,而降为低端色谱柱,但实际性能优异 pH2-8,属于很通用的色谱柱。
柱寿命不错;缺点:柱压稍高。
.
,稍胜一筹, pH2-8两款色谱柱均为专业色谱柱公司提供,性能相当,KromasilHypersil 4、Kromasil以及ODS2 ,属常规色谱柱,通用性不错。
YMC ProC18 ,性能不错,被多家公司挑选进行性能比较。
5、 Shim-pak,通用性好。
缺点:性能普通,单价稍高。
技术多年没有更新。
的Zorbax XDB以及岛津的6、Agilent最新超纯硅胶色谱柱,为二官能团封端,峰形更尖锐,此外性能较其它高纯硅,WatersWaters的Sunfire 7、等。
Symmetry以及Luna胶柱并无明显优异,比如PurosphereSTAR、公司经典的高纯硅胶柱,峰形好,通用型好,理论柱效需GLSciences、Inertsil ODS-3色谱柱。
优点:日本8 性能相当。
LUNA,SYMMETRY要超过8.8万/m才可出厂,与,SharpPeakSP说明了它的特点,公司经典的高纯硅胶柱,Inertsil ODS-SP色谱柱。
特点:日本GL Sciences9、水溶液,保留时间短,现在为岛津日本机型的标配色谱柱。
缺点:碳载量低会导致100%碳载量很低,可以运行它对非极性样品的保留较弱,分离度会下降。
kromasil,hypersil性能与通用型较好,性价比高。
RP18e色谱柱。
特点:纯硅胶,且端基封尾,10、Lichrospher
色谱柱相当。
缺点:硅胶杂质含量相对较高,峰形会较高纯硅胶柱差一些。
三、亲水色谱柱。
都是疏水色谱柱,所以分析极性强的样品,都会保留比较弱,而调低有机溶剂比例又会造成疏C18特点:一般的并且可以所以很多公司都会推出不封端的或特殊封端的色谱柱,通过亲水基团达到增加极性样品保留,水塌陷, 100%水。
AQ或者Hydro表示,可耐降低疏水塌陷的影响。
这类色谱柱一般都会用稳定性,寿命提高,采用了专利的封端使其对。
采用三官能团键合,获得了很好的低pH1、Waters AtlantisT3
极性化合物有良好的保留,并且对碱性化合物峰形也不错。
并且柱寿命低,柱采用了不封端的技术,所以造成分析碱性化合物拖尾,优点:很多公司的分析极性化合物的c18 T3在极性化合物的保留、碱性化合物的拖尾、柱寿命三方面都完成得很好。
而缺点:价格偏高。
2、AgilentSB-AQ
稳定pH),所以在低pH下碳链难水解,低优点:采用二异丙基空间位阻技术,碳链结构为专利(应该不是C18Xbridge的下稳定最好的色谱柱,只有waters采用的是二异丁基位阻技术,是目前在低性非常好,(SB-C18pH 能与之相比)。
碰到碱性SB-C18SB-C18一样,无法封端,造成了缺点和优点一样突出,所以缺点:因为空间位阻影响,所以和 pH1-3。
另外在pH7左右这款色谱柱寿命也更差,所以一般适用于左右,化合物的峰形是非常差的,尤其是在pH7 phenomenex SynergiHydro-RP 。
采用极性封端。
3、
四、低价色谱柱特点:一般价格在¥1000-3000之间,通用性好,低价但不一定低性能,是目前国内客户使用最广泛的色谱柱,尤其是制药企业的客户,因为拥有很高的性价比,用坏了也不用太心疼,所以目前国内市场至少有每年2万支左右的市场。
1、迪马钻石色谱柱。
优点:属于高纯硅胶柱,柱压低,峰形好,尤其用于中药客户更有优势,目前与依利特并列为两大最常用国产色谱柱品牌,拥有这么广阔的市场,说明这款色谱柱是经得起考验的。
缺点:质量控制较大品牌的原装进口柱差,批次重现性差,使用寿命短。
2、InertsilOEM色谱柱。
优点:GLSciences公司为国内客户提供的经济型OEM色谱柱,采用Inertsil高纯硅胶填料,从硅胶原料的选择到键合工艺以及最终色谱柱的装填,各道工序都经过了严格的考察、设计,OEM 色谱柱是批量生产和检测的色谱左右。
2.5MPa水压力在/乙腈35:65的短柱150mm柱,价格经济,性能优异可靠。
属于高纯硅胶柱,柱压低,
3、依利特色谱柱。
优点:属于纯硅胶柱。
缺点:批次重现性差,使用寿命短。
4、Kromasil国产色谱柱。
优点:属于纯硅胶柱,拥有较多的客户,价格较低。
缺点:批次重现性差,使用寿命短。