软骨细胞-骨基质明胶复合物修复兔关节软骨缺损的初步观察

软骨细胞-骨基质明胶复合物修复兔关节

软骨缺损的初步观察

王

民1，宋红星1，刘

淼1，曹峻岭2，王栋琪1

（西安交通大学：1第一医院骨科；2医学院地方病研究所，西安

710061）

摘要：目的初步观察骨基质明胶（bone matrix gelatin ，BMG ）复合软骨细胞移植修复关节软骨缺损的可行性。方法BMG 复合软骨细胞体外培养，

并将培养复合物植入同种异体兔膝关节软骨缺损处，术后行大体及组织学观察。结果BMG 复合软骨细胞体外培养后能形成软骨组织，

此“工程软骨”植入兔膝关节软骨缺损处能继续生长发育。结论

BMG 复合软骨细胞体外培养及体内移植均能形成软骨组织，

有可能修复关节软骨缺损。关键词：关节软骨缺损；软骨细胞；移植；骨基质明胶中图分类号：R681.3

文献标识码：A

文章编号：1671-8259（2003）01-0054-02

The primary study on the repair of rabbit articular cartilage defects

by the complex of chondrocyte-bone matrix gelatin

Wang Min ，Song Hongxing ，Liu Miao ，Cao Junling ，Wang Dongqi

（Department of Orthopaedic Surgery ，First Hospital of Xi ’an Jiaotong University ，Xi ’an 710061，China ）ABSTRACT ：Objective

To investigate the feasibility of BMG engineered with chondrocyte transplantation for the

repair of articular cartilage defects.Methods Chondrocytes were seeded onto BMG and cultured in #i$%&，then the

complex was implanted into cartilage defects made on rabbit knee joints.The rabbits were killed at different intervals after

operation.ResuIts

BMG engineered with chondrocyte transplantation ，the engineered “cartilage ”grafted into the

cartilage defects of knee of rabbits developed gradually.ConcIusion

Cartilage tissue can be formed by chondrocyte

cultured in #i$%&or implanted in #i#&.Articular cartilage defects may be repaired by BMG engineered chondrocytes.

KEY WORDS ：articular cartilage defects ；chondrocyte ；transplantation ；bone matrix gelatin 收稿日期：2002-04-11修回日期：2002-10-31基金项目：陕西省自然科学基金资助项目（No.1999SM47）作者简介：王民（1956-），男（汉族），副教授，研究生导师.研究方向：

骨关节病.

关节软骨缺损是骨科的常见病、疑难病。由于关节软骨自身修复能力很差，常引起关节功能障碍。为此，关节软骨缺损的修复一直是骨科研究的热点。随着组织工程学的进展，软骨细胞移植将为关节软

骨缺损修复开辟一条新途径［1］

。实验研究显示骨基

质明胶（bone matrix gelatin ，BMG ）在体内外均有较强

的诱导骨、软骨生成作用，该材料作为骨移植替代物

已有较多研究，并在临床应用中取得初步疗效［2，3］，

但尚未见用于关节软骨缺损修复的文献报道。本文初步观察BMG 复合软骨细胞体外培养及体内移植修复兔膝关节软骨缺损的效果。1

材料和方法

1.1材料新西兰兔购自第四军医大学实验动物中心；新鲜小牛血清购自杭州四季青生物材料公

司；DMEM 合成培养基、

结晶胰蛋白酶、透明质酸酶、Ⅱ型胶原酶、链酶蛋白酶购自美国Sigma 和Gibco 公司。

1.2方法1.

2.1

BMG 制备

取新西兰兔长骨干骺端松质

骨，去除所有软组织、关节软骨和骨髓，NaN 3洗去血液，氯仿甲醇反复脱脂，HCl 脱钙，再次脱脂。依次用CaCl 2、EDTA 、LiCl 连续抽提。制成的骨基质明胶呈海绵状，剪成直径4mm 、厚2mm 的圆盘，用前灭菌。

1.2.2软骨细胞体外培养取1月龄新西兰兔四肢关节软骨片，采用体外单层软骨细胞培养方

法［4］，分离软骨细胞，于原代培养细胞形成单层后

收获细胞，按每管6×105个细胞种植于BMG 支架上体外培养，12d 后取材固定。切片作Safranin-O 染色观察。

1.2.3关节软骨缺损修复戊巴比妥钠静脉麻醉。右膝关节内侧切口，用钻在股骨内髁制作直径

第24卷第1期2003年2月西安交通大学学报（医学版）Journal of Xi ’an Jiaotong University （Med Sci ）Vol.24No.1

Feb.2003