实验三 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定.

实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定

小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。

黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch。），三角叶黄连（C。deltoidea C。 Y。Cheng et Hsiao）或云连（C。teetoides C。Y。 Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。

目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。 R1 R2 R3 R4 R51

R1O

R2O

R5£-OR3

OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23

H CH3 CH3 CH3 H

2345

小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。Mp.145℃至160℃即分解。

OCH3

H3N

H

OCH3

O

H

小檗胺

H3CO

H

CH3

游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。

小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：

小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。

一、实验目的

1. 学会从黄连中提取、精制盐酸小檗碱的方法；

2. 学会小檗碱的化学与色谱检识方法。

二、实验原理

利用小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大，而盐酸盐几乎不溶于水的性质，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用水提出；再使其转化为盐酸盐，结合盐析法降低其在水中的溶解度，制得盐酸小檗碱。

三、实验内容

（一）盐酸小檗碱的提取

1.润湿

取黄连粗粉50g置烧杯中，加0.3%硫酸约10ml润湿，放置30

min

2.装筒（分次装入渗漉筒并排气）

3.浸渍

用0.3%硫酸浸泡过夜

4.渗漉

收集9—10倍量的渗漉液

等待空余时间：

10g硅胶G + 30ml(0.8 % CMC-Na)研匀，铺板

（二）分离

1.取渗漉液，加40% NaOH调PH至11～12，放置过夜；

2.抽滤，将滤液加浓盐酸调PH值2～3，加入6% NaCl，搅拌均匀，放置过夜；

3.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱粗品。

（三）精制

1.将上述粗品放入25倍量沸水中，于水浴上加热使溶解，趁热过滤液在65℃时加浓盐酸调PH值2～3，放置过夜

2.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱精品。

（四）检识

1. 取自制精制盐酸小檗碱 50mg，加水 5ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液2滴显橙红色，放冷，加丙酮4滴，即发生浑浊，放置后，生成黄色沉淀，即为丙酮小檗碱。

2. 取自制精制盐酸小檗碱少许，加入稀硫酸8ml溶解，搅拌均匀，分置两支试管中，一支加漂白粉少量，即显樱红色；另一支加入2滴浓硝酸,也显樱红色。

3. 取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀硫酸12m1使溶解，分置于三支试管中，分别加入碘化汞钾试剂、碘化铋钾试剂及硅钨酸试剂，观察其产生的现象。

4. 盐酸小檗碱的薄层层析

吸附剂：硅胶G硬板(未活化)

样品：①自制精制盐酸小檗碱乙醇溶液

②盐酸小檗碱标准品乙醇溶液

展开剂：①氯仿－乙醇(9:1)

②甲醇－丙酮－乙酸 (4:5:1)

显色剂：先置于紫外光灯(365nm)下检视，再喷雾改良碘化铋钾试剂，观察斑点颜色，并与标准品对照。