葡萄糖杂质检查(一))

葡萄糖杂质检查(一))
葡萄糖的杂质检查（一）4学时
（无水）葡萄糖：2010版中国药典二部P927
实验目的
1、掌握葡萄糖中杂质的检查方法。

2、熟悉供试品溶液与对照品溶液制备、检查、比色等操作方法。

3、了解称量、平行操作、干燥等操作要点。

实验原理
葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜生成红色氧化亚铜沉淀。

本品除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等到一般杂质外，还需检查溶液的澄清度与颜色（目的是检查水不溶性物质或有色杂质）、乙醇溶液的澄清度（检查醇不溶性杂质如糊精、蛋白质等）、亚硫酸盐与可溶性淀粉（因为制备时使用的酸可能带有亚硫酸盐，而可溶性淀粉是中间体引入）。

实验操作
1、干燥失重
取本品1~2g，置与供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，使供试品平铺于瓶底，厚度不超过5mm，加盖，精密称定，将称量瓶放入洁净的培养皿中，瓶盖半开或置瓶旁，放入105℃干燥箱中干燥。

取出后迅速盖好瓶盖，置干燥器放冷至室温，迅速精密称重，再于105℃干燥箱中至恒重，即得，减失重量不得过9.5%。

2、性状
（1）本品为无色结晶或白色结晶性或颗粒粉末，无臭，味甜；
（2）在水中易溶，乙醇中微溶。

极易溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂不到1ml中溶解；
易溶系指溶质1g(ml)能在溶剂1～不到10ml中溶解；
溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂10～不到30ml 中溶解；
略溶系指溶质1g(ml)能在溶剂30～不到100ml 中溶解；
微溶系指溶质1g(ml)能在溶剂100～不到1 000ml中溶解;
极微溶解系指溶质1g(ml)能在溶剂1000～不到10 000ml中溶解；
几乎不溶或不溶系指溶质1g(ml)在溶剂10 000ml中不能完全溶解。

溶解度试验法：除另有规定外，称取研成细粉的供试品或量取液体供试品，置于25℃±2℃一定容量的溶剂中，每隔5分钟强力振摇30秒钟；观察30分钟内的溶解情况，如无目视可见的溶质颗粒或液滴时，即视为完全溶解。

溶解度试验具体操作：称取约1g样品置100ml容量瓶，先加0.8ml水（在极易溶解范围内：1g在不到1ml溶剂中溶解），按药典试验方法30分钟内观察溶解情况，如果未完全溶解，则接着往里加约8ml水（在易溶范围内：1g在1～不到10ml溶剂中溶解），继续同法试验30分钟内观察溶解情况，如还未完全溶解，再往后加约20ml水（在溶解范围内）......
因为采用的是100ml容量瓶，则当加到90ml水时（在略溶范围内）如还未完全溶解，则需要重新配制样品继续往下作，这时可以适当减少药物称样量，也可节约溶剂用量，比如称取约10mg样品置100ml容量瓶，加9ml水（在微溶范围内），同法操作，如还未完全溶解，则接着往里加约80ml水（在极微溶解范围内）.....如还未完全溶解，则接着往里加水至刻度（在几乎不溶范围内）......
做到某一步完全溶解，就是该药在这个溶剂中的溶解度
（3）比旋度测定：
取本品约10g，精密称定，置100ml量瓶中，加水适量与氨试液0.2ml（2ml），溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，放置10min，在25℃时测定比旋度，应为52.5~53.0°
旋光度随葡萄糖浓度增大而增大新配制的单糖溶液在放置时,其比旋光度会逐渐增加或减少,最后达到一个恒定的数值。

如,葡萄糖配成水溶液,其比旋光度是+112.2°,但放置若干天后就降低至+52.7°
浓氨试液可取浓氨溶液应用。

测定葡萄糖的旋光度时为什么要加氨？
加入氨试液的作用是加速D-葡萄糖的α-与β-两种互变异构体互变平衡的到达（因为药用葡萄糖是D-葡萄糖，而D-葡萄糖有α和β两种互变异构体，因而药用葡萄糖是他们的混合物，比旋度相差甚远，而在水溶液中逐渐平衡，称作变旋。

加热、加酸或加弱碱可加速平衡）10%或10%以下规格的试液中，D-葡萄糖的α-与β-两种互变异构体浓度都很低，相互影响不大，因而可不加氨试液。

葡萄糖的比旋度测定：精密称取经干燥的本品10.00g，加适量纯化水使溶解，定量转移至100ml 的量瓶中，再加氨试液2ml 后，用纯化水稀释至刻度。

置2dm测定管于20℃测得旋光度为
+2.30°，零点为-0.25°，葡萄糖的比旋度为在比旋度计算公式比旋度的计算公式
[α]tD=(100×α)／(L×C)中，规定：测定温度为20℃，测定管长度L单位是dm，C为供试品溶液的浓度，单位是g/100ml。

C = 10g/100ml，L = 2dm，α = 2.3 —（-0.25）
= 2.55，计算[α]tD = 100 *2.55/（2*10） = 12.75。

3、酸度
取本品2.0g，加新沸过的冷蒸馏水20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴NaOH 滴定液0.2ml，应显粉红色。

4、乙醇溶液的澄清度
取本品1.0g加90%乙醇30ml，置水浴中加热回流约10min，溶液应澄清。

5、亚硫酸盐与可溶性淀粉
取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。

6、蛋白质
取本品1.0g加水溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3ml，不得发生沉淀。

附1：一般杂质检查规则
1．检查所用的比色管必须是同一牌号，同一规格，无色（尤其是管底），管的直径大小相等，管上的刻度高低一致，如有差别不应超过2mm。

使用前洗净，装入水或其他适当溶液，置白色背景从上向下垂直观察色调一一致。

2．供试品与标准管应同时操作，按顺序加入试药，试药量，操作条件应一致。

3．称样时将供试品混匀。

4．供试品称量1g或1g以下时，误差应不超过规定量的±2%，1g以上时，应不超过规定量的±1%。

5．进行浑浊或溶液色泽比较时，必要时应反复调换供试管的位置，然后进行观察比较。

6．一般情况下可取一份供试品进行检查，如结果不符合规定或在限度边缘时，应对供试品和标准管各复检二份，方可判定。

7．检查所用标准溶液的贮备液，使用期限一般不得超过3个月。

标准溶液每周稀释一次，但供试品不符合规定或在限度边缘时，应重新稀释标准液再进行复检。

8．一般杂质检查结果以＞，＜，＝，0.xx%表示。