培养基的配制原则及配制时应注意的问题和比较各种水解糖制备方法的优缺点

1.培养基的配制原则及配制时应注意那些问题？

答：

配置原则：

第一，根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。

第二，营养成分的恰当配比；培养基中的碳氮的比例(C／N)在发酵工业中尤其重要。第三，渗透压；渗透压一定要与微生物的自然生存环境相符。

第四，ＰＨ值；一般霉菌和酵母菌比较适于微酸性环境，放线菌和细菌适于中性或微碱性环境。

第五，氧化还原电位；厌氧菌，由于氧的存在对其有毒害作用，因而往往在培养基中加入还原剂一降低氧化还原电位，所一必须考虑氧化还原电位。

注意问题：

1、培养基配方的选定；同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此需依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。

2、的制备记录；每次制备均应有记录。

3、成分的称取；各种成分必须精确称取，最好一次完成，不要中断。

4、各成份的混合和溶化；化学药品均应是化学纯的，最好使用不锈钢锅加热溶化。

5、pH的初步调正；因在加热消毒过程中、pH会有所变化，各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。

6、的过滤澄清；液体必须绝对澄清，琼脂也应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要。

7、分装；应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。8、灭菌；一般可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。

9、质量测试；每批制备好以后，应仔细检查一遍，发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被沾染等、均应挑出弃去，并测定其最终pH。

10、保存；应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内。

2.培养基的碳氮比对菌体的生长和产物形成的影响？

答：

发酵培养基应该选用适当的碳氮比。培养基中碳氮比的影响极为明显。一般情况下，碳氮比偏小，能导致菌体的旺盛生长，易造成菌体提前衰老自溶，影响产物的积累；碳氮比过大，菌体繁殖数量少，不利于产物的积累；碳氮比较合适，但碳源、氮源浓度高，仍能导致菌体的大量繁殖，增大发酵液粘度，影响溶解氧浓度，容易引起菌体的代谢异常，影响产物合成；碳氮比较合适，但碳源、氮源浓度过低，会影响菌体的繁殖，同样不利于产物的积累。具体来说，氮源过多，会使菌体生长过于旺盛，pH偏高，不利于代谢产物的积累；氮源不足，则菌体繁殖量少，从而影响产量。碳源过多，则容易形成较低的pH；碳源不足，易引起菌体衰老和自溶。另外碳氮比不当还会影响菌体按比例地吸收营养物质，直接影响菌体的生长和产物的形成。菌体在不同的生长阶段，其对碳氮比的最适要求也不一样。一般碳源因为既作碳架又作能源，因此用量要比氮多。从元素分析来看，酵母菌细胞中碳氮比约为100：20，霉菌约为100：10；一般工业发酵培养基的碳氮比约为100：0.2－2.0；但在氨基酸发酵中，因为产物中含氮多，所以碳氮比就要相对高一些。例如谷氨酸生产中取碳氮比100：15－21，若碳氮比为100：0.5－2.0，则会出现只长菌体，而几乎不合成谷氨酸的现象。碳氮比随碳水化合物及氮源的种类以及通气搅拌等条件而异，很难确定一个统一的比值。

3.试比较各种水解糖制备方法的优缺点。

答：

其优缺点的比较见下表：

总之，采用不同的水解制糖工艺。各有其优点和存在的问题，但从水解糖液的质量和降低糖耗、提高原料利用率方面来考虑，酶解法最好，其次是酸酶法，酸解法最差。从淀粉水解整个过程所需的时间来看，酸解法最短，酶解法最长。