荧光寿命的认识 ppt课件
荧光寿命的定义
荧光寿命的定义简介荧光寿命是描述荧光物质发光时间的一个重要参数。
随着光学技术的快速发展，对荧光寿命的研究也越来越深入。
荧光寿命在许多领域中都有广泛的应用，如生物物理学、材料科学、化学等。
本文将对荧光寿命的定义进行详细探讨，包括荧光寿命的概念、测量方法和影响因素等。
荧光寿命的概念荧光寿命是指荧光物质由受激态回到基态所需的时间。
当荧光物质受到外界激发能量时，部分电子会从基态跃迁到激发态，形成受激态。
随后，受激态上的电子会自发地跃迁回到基态，释放出能量并产生荧光。
荧光寿命是受激态电子从激发态回到基态所需的平均时间。
荧光寿命的长短与荧光物质的性质密切相关，它可以通过荧光寿命测量仪器来获得。
荧光寿命的测量方法有许多方法可以用来测量荧光寿命，其中最常用的方法是荧光寿命衰减法。
该方法通过测量荧光强度随时间的衰减曲线来得到荧光寿命。
具体操作步骤如下： 1. 准备样品：选择合适的荧光物质作为样品，并将其制备成适当的形式，如溶液、薄膜等。
2. 激发样品：使用合适的激发源，如激光器或荧光灯，对样品进行激发。
激发波长通常与样品的吸收峰相匹配。
3. 收集荧光信号：使用荧光探测器收集样品发出的荧光信号，并将其转化为电信号。
4. 记录荧光信号随时间的变化：使用荧光寿命测量仪器记录荧光信号随时间的变化，并得到荧光强度随时间的衰减曲线。
5. 拟合曲线：利用合适的数学模型，如指数衰减模型，对荧光衰减曲线进行拟合，从而得到荧光寿命。
影响荧光寿命的因素荧光寿命受到多种因素的影响，其中包括以下几个方面： 1. 荧光物质的性质：荧光物质的分子结构和化学组成对荧光寿命有重要影响。
不同的分子结构会导致不同的荧光激发和退激发机制，从而影响荧光寿命的长短。
2. 温度：温度是影响荧光寿命的重要因素。
一般情况下，荧光寿命会随着温度的升高而缩短。
这是因为温度的升高会增加分子的振动和动力学速率，从而加快荧光退激发的速率。
3. 溶剂效应：溶剂对荧光寿命也有较大影响。
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常数k可以用各种退激过程的速率常数之和来表示:
kkF+ki ki表示各种非辐射过程的衰减速率常数。
则总的寿命为:
1/k1/(kF+ ki)
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由于吸收几率与发射几率有关， F与摩尔消光系数 max (单位为cm2mol-1或 (mol dm-3) -1cm-1)也密切相关。
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• 研究荧光寿命的意义 • （3）除了直接应用之外,荧光寿命测定还是其它
时间分辨荧光技术的基础。例如基于荧光寿命 测定的荧光猝灭技术可以研究猝灭剂与荧光标 记物或探针相互靠近的难易,从而对所研究体系 中探针或标记物所处微环境的性质作出判断。
• （4）基于荧光寿命测定的时间分辨荧光光谱可 以用来研究激发态发生的分子内或分子间作用 以及作用发生的快慢。
荧光寿命(fluorescence lifetime)
当某种物质被一束激光激发后，该物质的分
子吸收能量后从基态跃迁到某一激发态上，再以
辐射跃迁的形式发出荧光回到基态。当去掉激发
光后，分子的荧光强度降到激发时的荧光最大强
度I0的1/e所需要的时间，称为荧光寿命，常用表 示。如荧光强度的衰减符合指数衰减的规律:
映了体系中荧光物种的多样性或存在状态的复杂性。
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• 图中有三条曲线, 分别是实际测定强度衰减曲线 N(tk) 、仪器响应函数 L(tk)和拟合函数Nc(tk) 。
• 仪器响应函数也被称之为光源函数,实际工作中 以胶体SiO2为虚拟样品进行
• 测定,所得到的衰减曲线就是图中的L(tk) ,光源函数 表明了仪器能够测定的最短荧光寿命。
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• 式中τ为荧光寿命。荧光强度正比于衰减的激发态分子 数,因此可将上式改写为:
荧光寿命的认识
荧光寿命在环境科学中的 应用拓展
利用荧光寿命对环境因素的敏 感性，开发基于荧光寿命的环 境监测技术，实现对环境污染 物的快速、灵敏检测。
跨学科合作与交流
加强荧光寿命研究领域的跨学 科合作与交流，推动荧光寿命 理论、技术和应用的创新发展 。
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荧光寿命的认识
目
CONTENCT
录
• 荧光现象与荧光寿命基本概念 • 荧光寿命测量方法与技术 • 荧光寿命影响因素分析 • 荧光寿命在科学研究中的应用 • 荧光寿命测量实验设计与操作注意
事项 • 总结与展望
01
荧光现象与荧光寿命基本概念
荧光现象定义及产生原理
荧光现象定义
荧光现象是指某些物质在受到激发光照射后，能够吸收光能并发 出比激发光波长更长的可见光的现象。
光电材料
荧光寿命是研究光电材料性能的重要参数，可用 于评估材料的发光效率、载流子传输等性能。
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荧光传感器
基于荧光寿命变化的荧光传感器具有高灵敏度、 高选择性等优点，可用于检测各种分析物，如离 子、分子、气体等。
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荧光寿命测量实验设计与操作注意事项
实验设计思路及步骤
01
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明确实验目的
荧光寿命测量可用于研究分子 结构、能量转移等过程，首先 需要明确实验的具体目的。
的程度也有所差异。
溶剂效应对荧光寿命影响
溶剂极性对荧光寿命的影响
溶剂的极性会影响荧光物质的激发态能量和稳定性，从而影响荧光寿命。一般来说，极性 溶剂会使荧光寿命变短。
溶剂粘度对荧光寿命的影响
溶剂的粘度会影响荧光分子在激发态时的旋转和振动，从而影响荧光寿命。粘度较大的溶 剂通常会使荧光寿命变长。
tict效应 荧光寿命
tict效应荧光寿命荧光寿命是指荧光分子从受激发态回到基态所需的时间。
它是一种重要的物理特性，广泛应用于化学、生物、材料等领域。
本文将以人类的视角来描述荧光寿命的概念、原理及其在实际应用中的意义。
让我们来了解一下荧光寿命的概念。
当荧光分子受到激发后，会从基态跃迁到激发态，随后以荧光的形式释放出能量并回到基态。
荧光寿命就是荧光分子从受激发态回到基态所需的时间。
荧光寿命的长短取决于荧光分子的内禀特性，如分子结构、环境条件等。
荧光寿命在化学和生物学研究中具有重要的意义。
首先，荧光寿命可以用来研究荧光分子的环境。
由于荧光寿命受到周围环境的影响，因此通过测量荧光寿命的长短可以获得有关分子所处环境的信息。
例如，在生物体内，荧光标记的分子可以用来研究细胞内的化学反应、离子浓度等生物过程。
荧光寿命也可以用来研究分子间的相互作用。
当两个或多个荧光分子靠近时，它们的荧光寿命可能会发生变化。
通过测量荧光寿命的变化，可以研究分子间的相互作用，如配位反应、荧光共振能量转移等。
荧光寿命还被广泛应用于材料科学领域。
荧光寿命可以用来评估材料的性能和质量。
例如，在有机发光二极管（OLED）中，荧光寿命的长短直接影响着OLED的亮度和寿命。
通过调控荧光分子的结构和环境，可以改变荧光寿命，从而实现对OLED性能的调控。
除了以上应用，荧光寿命还被广泛应用于药物研发、环境监测、食品安全等领域。
例如，在药物研发中，荧光标记的药物可以用来研究药物在体内的代谢和分布情况。
在环境监测中，荧光探针可以用来检测水体、空气中的污染物。
在食品安全领域，荧光寿命可以用来检测食品中的添加剂、农药等有害物质。
荧光寿命是一种重要的物理特性，具有广泛的应用前景。
通过测量荧光寿命，我们可以了解荧光分子的内禀特性、研究分子间的相互作用、评估材料性能等。
荧光寿命在化学、生物、材料等领域都有重要的应用，对推动科学研究和实际应用具有重要意义。
希望通过本文的介绍，读者能对荧光寿命有更深入的了解，并认识到它的重要性和潜在的应用前景。
荧光寿命的认识 ppt
•τ= (Γ+ knr)- 1(4)
•也就是说荧光强度衰减到初始强度的1/e时所需要的
时间就是该荧光物种在测定条件下的荧光寿命。实际
上用荧光强度的对数对时间作图,直线斜率即为荧光
寿命倒数的负值。荧光寿命也可以理解为荧光物种在
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• 事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返 回基态,有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返 回基态,这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲 线。由于实际体系的复杂性,荧光衰减往往要用多 指数或非指数衰减方程描述:
的时间都应等于。
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如果激发态分子只以发射荧光的方式丢失能量，则 荧光寿命与荧光发射速率的衰减常数成反比，荧光发射 速率即为单位时间中发射的光子数，因此有F 1/KF。 KF是发射速率衰减常数。
F表示荧光分子的固有荧光寿命，kF表示荧光发射 速率的衰减常数。
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处于激发态的分子，除了通过发射荧光回到基态以外， 还会通过一些其它过程(如淬灭和能量转移)回到基态，其 结果是加快了激发态分子回到基态的过程(或称退激过程) ，结果是荧光寿命降低。
从下式可以得到F的粗略估计值(单位为秒)。 1/F≈104 max
在讨论寿命时，必须注意不要把寿命与跃迁时间混淆 起来。跃迁时间是跃迁频率的倒数，而寿命是指分子 在某种特定状态下存在的时间。
通过量测寿命，可以得到有关分子结构和动力学方面 的信息。
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• 荧光寿命及其含义
• （1）假定一个无限窄的脉冲光(δ函数)激发n0个荧 光分子到其激发态,处于激发态的分子将通过辐射 或非辐射跃迁返回基态。假定两种衰减跃迁速率分 别为Γ和knr,则激发态衰减速率可表示为dn(t)/dt=-
ItI 0e-kt
荧光寿命纵坐标
荧光寿命纵坐标
荧光寿命是指荧光物质在受到激发后，荧光强度衰减到原来的 1/e 所需的时间。
荧光寿命的测量通常可以通过时间分辨荧光光谱仪来完成。
在荧光寿命的测量中，通常会使用荧光寿命图来表示荧光物质的荧光寿命。
荧光寿命图的纵坐标通常表示荧光强度，横坐标通常表示时间。
当荧光物质被激发时，它会发出荧光，荧光强度会随着时间的推移而逐渐衰减。
在荧光寿命图中，荧光强度随时间的变化曲线通常呈现出指数衰减的趋势。
通过对荧光寿命图进行分析，可以得到荧光物质的荧光寿命。
荧光寿命的测量对于研究荧光物质的性质和荧光标记技术的应用非常重要。
荧光寿命可以提供有关荧光物质的分子结构、环境因素和相互作用等信息。
需要注意的是，荧光寿命的测量需要使用专门的仪器和技术，并需要对实验条件进行严格控制，以确保测量结果的准确性和可靠性。
希望这个解释对你有所帮助！如果你有任何其他问题，请随时提问。
荧光寿命的认识
常数k可以用各种退激过程的速率常数之和来表示:
kkF+ki ki表示各种非辐射过程的衰减速率常数。 则总的寿命为:
1/k1/(kF+ ki)
由于吸收几率与发射几率有关， F与摩尔消光系数 2 -1 -3 -1 -1 ( cm mol (mol dm ) cm )也密切相关。 单位为 或 max 从下式可以得到F的粗略估计值(单位为秒)。 1/F≈104 max 在讨论寿命时，必须注意不要把寿命与跃迁时间混 淆起来。跃迁时间是跃迁频率的倒数，而寿命是指分 子在某种特定状态下存在的时间。 通过量测寿命，可以得到有关分子结构和动力学方 面的信息。
• 荧光寿命单指函数，双指函数，三指函数拟 合有什么区别 • I(t) = I0exp(- t/τ) • I(t)=I0+A1exp(-t/τ1)+A2exp(-t/τ2) • τ=(A1τ12+A2τ22)/(A1τ1+A2τ2)
• ①经验公式是多项式。 ②所以在一般场合下，这种拟合模型统称为 线性的。 ③最小二乘法下，得到【关于待定参数的方 程组都是线性的】。 相异点（都是【非本质】的） • （1）经验公式里待定参数的个数不同，前 者两个，后者三个。 （2）经验公式的函数图形，前者是直线， 后者是抛物线。 • （3）最小二乘法下，得到关于待定参数的 线性方程组，前者是二阶，后者是三阶。
运动所发生的时间尺度 ,因此利用荧光技术可以
“看”到许多复杂的分子间作用过程 ,例如超分
子体系中分子间的簇集、固液界面上吸附态高
分子的构象重排、蛋白质高级结构的变化等。
• 研究荧光寿命的意义 • （3）除了直接应用之外,荧光寿命测定还是其它 时间分辨荧光技术的基础。例如基于荧光寿命 测定的荧光猝灭技术可以研究猝灭剂与荧光标 记物或探针相互靠近的难易 ,从而对所研究体系 中探针或标记物所处微环境的性质作出判断。 • （4）基于荧光寿命测定的时间分辨荧光光谱可 以用来研究激发态发生的分子内或分子间作用 以及作用发生的快慢。
荧光寿命的定义
荧光寿命的定义荧光寿命是指荧光分子从激发态退回到基态所需的时间。
荧光寿命是荧光分析中的一个重要参数，它可以用来确定荧光分子的性质和环境。
荧光寿命的测量方法有很多种，其中最常用的是荧光寿命测量仪。
荧光是一种物质在受到激发后发出的光。
荧光分子在受到激发后，会从基态跃迁到激发态，然后再从激发态退回到基态，发出荧光。
荧光寿命是指荧光分子从激发态退回到基态所需的时间。
荧光寿命的单位是秒。
荧光寿命的测量方法荧光寿命的测量方法有很多种，其中最常用的是荧光寿命测量仪。
荧光寿命测量仪是一种专门用于测量荧光寿命的仪器，它可以测量荧光分子在不同环境下的荧光寿命。
荧光寿命测量仪的原理是利用荧光分子在受到激发后发出的荧光光谱来测量荧光寿命。
荧光寿命测量仪会向样品中注入一定量的激发光，然后测量样品中发出的荧光光谱和荧光寿命。
荧光寿命测量仪可以测量荧光分子在不同环境下的荧光寿命，例如在溶液中、在固体中、在生物体内等。
荧光寿命的应用荧光寿命在生物医学、环境监测、材料科学等领域有着广泛的应用。
在生物医学领域，荧光寿命可以用来研究生物分子的结构和功能，例如蛋白质、核酸、糖类等。
荧光寿命还可以用来研究生物分子在细胞内的分布和运动。
在环境监测领域，荧光寿命可以用来研究环境中的污染物和有害物质，例如重金属、有机物等。
荧光寿命还可以用来研究水体、土壤、大气等环境中的生物和非生物成分。
在材料科学领域，荧光寿命可以用来研究材料的结构和性质，例如聚合物、纳米材料等。
荧光寿命还可以用来研究材料的光学性质和电学性质。
荧光寿命是荧光分析中的一个重要参数，它可以用来确定荧光分子的性质和环境。
荧光寿命的测量方法有很多种，其中最常用的是荧光寿命测量仪。
荧光寿命在生物医学、环境监测、材料科学等领域有着广泛的应用。
荧光寿命的定义
荧光寿命的定义荧光寿命的定义荧光是一种物质在受到激发后，通过放出能量的方式发射光线的现象。
荧光寿命则是指物质从受到激发到放出最后一束光线所经过的时间。
在化学、生物、医学等领域中，荧光寿命被广泛应用于分析和研究。
1. 荧光原理当物质受到能量激发时，其内部电子会处于高能态。
这些电子会迅速回到低能态，并释放出部分能量以形成荧光。
这些释放出来的能量以光子形式发射出来，形成一个荧光信号。
2. 荧光寿命测量原理荧光寿命测量是通过测定物质从受到激发到放出最后一束荧光所经过的时间来实现的。
在实验中，使用一个脉冲激发源将样品激发，并使用一个探测器记录样品放出的所有荧光信号。
然后，使用计算机对数据进行处理并计算出平均寿命。
3. 荧光寿命应用3.1 生物医学领域在生物医学领域，荧光寿命被广泛应用于细胞成像、蛋白质结构分析、药物筛选等方面。
例如，在蛋白质结构分析中，荧光标记的蛋白质可以通过测量其荧光寿命来确定其构象和结构。
3.2 化学领域在化学领域，荧光寿命被应用于分析有机化合物、检测金属离子等方面。
例如，在有机化合物分析中，荧光染料可以通过测量其荧光寿命来确定其种类和浓度。
4. 荧光寿命的影响因素4.1 分子内部环境分子内部环境是影响荧光寿命的重要因素之一。
例如，溶剂极性、温度、pH值等都会影响分子内部电子能级的位置和能量差，从而影响荧光寿命。
4.2 分子结构分子结构也是影响荧光寿命的重要因素之一。
不同的分子结构会导致不同的电子能级布局和能量差，从而影响荧光寿命。
5. 荧光寿命测量技术5.1 时间分辨荧光光谱仪时间分辨荧光光谱仪是一种能够测量荧光寿命的仪器。
它通过使用激光脉冲激发样品，并使用快速探测器记录样品放出的所有荧光信号，从而实现对荧光寿命的测量。
5.2 荧光共振能量转移技术荧光共振能量转移技术是一种能够测量分子间距离和相互作用的技术。
它利用两个不同的荧光染料，其中一个作为给体，另一个作为受体。
当两个染料非常接近时，给体染料会将其激发态能量传递给受体染料，导致受体染料发出荧光。
荧光寿命名词解释
荧光寿命名词解释
荧光寿命是指荧光物质从激发态返回基态所需要的时间。
荧光物质在受到能量激发后，会进入激发态，此时电子处于高能级，不稳定的状态。
荧光物质会通过自发辐射的方式跃迁到较低的能级，释放出能量，并产生荧光现象。
荧光寿命就是这个跃迁过程所需要的时间。
荧光寿命是荧光物质特性的重要指标，通常用来描述荧光物质的稳定性和发光效率。
荧光寿命与分子的内部结构、化学环境和溶剂有关。
不同的荧光物质具有不同的荧光寿命，通常在纳秒到微秒的范围内。
荧光寿命可以通过多种方法进行测量，最常用的是时间相关单光子计数技术。
这种方法通过测量荧光物质所释放的光子的到达时间和强度，来推断荧光寿命。
还有一种方法是使用荧光寿命成像技术，该技术可以用来观察并测量荧光物质在空间上的分布和寿命。
荧光寿命的测量对于很多领域都有重要的应用价值。
在生物医学领域，荧光寿命可以用来研究生物分子的结构和功能，例如蛋白质的折叠状态和交互作用。
在材料科学领域，荧光寿命可以用来评估和优化荧光材料的性能，例如有机发光二极管（OLED）和荧光染料。
此外，荧光寿命还可以用来研究分子的运动和环境变化。
通过观察荧光寿命的变化，可以推断分子所处的生化过程和环境参数，如温度、离子浓度和pH值。
这些信息对于理解分子的功
能和反应动力学具有重要意义。
总之，荧光寿命是荧光物质特性的重要指标，可以用来研究分子结构和功能。
通过测量荧光寿命，可以获得对分子的独特信息，有助于推断分子的性质和反应过程。
荧光寿命在生命科学、材料科学和化学分析等领域都有广泛的应用。
荧光寿命的认识
事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返 回基态,有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返 回基态,这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲 线。由于实际体系的复杂性,荧光衰减往往要用多 指数或非指数衰减方程描述:
分析采用非线性最小二乘曲线拟合方法,迭代过程用 Marquardt法。拟合初值可由用户输入,也可对曲线粗 略分析得到。如对两种衰变成分的衰变曲线,先由曲 线尾部段进行单指数曲线拟合得到长寿命成分参数, 再由曲线前段进行双指数曲线拟合得到(其中长寿命 成分参数已得到)短寿命成分参数。
2.研究荧光寿命的意义
研究荧光寿命的意义 （5）非辐射能量转移、时间分辨荧光各向异性等主
要荧光技术都离不开荧光寿命测定。 （6）在材料研究中，测量材料的荧光寿命，可以获
得能级结构和激发态弛豫时间等信息。
3荧光寿命的影响因素包括哪些
根据激发态寿命理论，物质的荧光寿命主要由自发辐 射跃迁寿命和无辐射跃迁寿命来决定。自发辐射寿命 与温度无关，但对环境的扰动敏感。在环境扰动下， 例如，和体系的任何其它分子碰撞，体系可能通过非 辐射过程失去其电子的激发能量。任何一种趋于和自 发发射过程相竞争的过程都会降低激发态寿命。在实 际体系中，物质的荧光寿命要比由积分吸收强度得到 的自发辐射寿命下短。在有其它竞争消激发过程存在 的情况下，实际荧光寿命为τN=I/(Kf+∑Kt)。这里k，是 第t个竞争过程的速率常数。
荧光寿命(fluorescence lifetime)
荧光寿命的定义
荧光寿命的定义荧光寿命是指荧光分子从激发态退回到基态所需的时间。
荧光分子在受到激发后，会从基态跃迁到激发态，然后在一定时间内发出荧光，最终回到基态。
这个过程中，荧光分子的寿命就是荧光寿命。
荧光寿命是荧光分析中非常重要的参数之一。
荧光分析是一种非常灵敏的分析方法，可以用于检测生物分子、环境污染物等。
荧光寿命可以提供有关荧光分子的信息，例如荧光分子的构象、环境等。
因此，荧光寿命的测量对于荧光分析非常重要。
荧光寿命的测量可以通过荧光寿命仪来实现。
荧光寿命仪是一种专门用于测量荧光寿命的仪器。
荧光寿命仪可以通过激发荧光分子，然后测量荧光分子发出的荧光的时间来计算荧光寿命。
荧光寿命仪可以测量不同的荧光分子，例如荧光染料、荧光蛋白等。
荧光寿命的测量可以提供有关荧光分子的信息。
例如，荧光寿命可以提供荧光分子的构象信息。
荧光分子的构象会影响荧光寿命，因为不同的构象会影响荧光分子的能级结构。
因此，通过测量荧光寿命，可以了解荧光分子的构象信息。
荧光寿命还可以提供荧光分子的环境信息。
荧光分子的环境会影响荧光寿命，因为不同的环境会影响荧光分子的能级结构。
例如，荧光分子在溶液中的荧光寿命会比在固体中的荧光寿命长，因为溶液中的荧光分子受到的环境影响较小。
因此，通过测量荧光寿命，可以了解荧光分子所处的环境信息。
荧光寿命还可以用于荧光共振能量转移（FRET）的研究。
FRET是一种通过荧光分子之间的能量转移来研究分子间相互作用的方法。
在FRET中，一个荧光分子（受体）受到激发后，会将能量转移给另一个荧光分子（供体），从而使供体发出荧光。
FRET的效率取决于受体和供体之间的距离和方向。
因此，通过测量荧光寿命，可以了解受体和供体之间的距离和方向信息。
荧光寿命是荧光分析中非常重要的参数之一。
荧光寿命的测量可以提供有关荧光分子的信息，例如荧光分子的构象、环境等。
荧光寿命的测量可以通过荧光寿命仪来实现，可以测量不同的荧光分子。
荧光寿命还可以用于荧光共振能量转移（FRET）的研究。
荧光寿命的认识
例子（7）
图5是2SrO·0.25B2O3·0.75P2O5:Ce3+/Tb3+憎+中随着 Ce3+浓度的变化，Tb3+的5D4-7F5跃迁的衰减曲线。由 于，Tb3+的5D4能级的f-f跃迁是禁戒的 ，所以Tb3+ (5D4) 的 荧 光 寿 命 是 毫 秒 级 的 。 当 Ce3+ 的 浓 度 由 0.25 ％变化到2.5％，Tb3+的5D4能级的寿命由1.71 ms增 加至3.40 ms，结果表明Tb3+的5D4能级寿命随着Ce3+ 含量的增加而增长，Ce3+的引入对于Tb3+来说存在 着一个布居数增加的过程，在这一个过程中，Tb3+ 从Ce3+获得部分激发的能量，使其5D4能级寿命增长。
寿命和这些过程的速率常数有关，总的退激过程的速率
常数k可以用各种退激过程的速率常数之和来表示:
kkF+ki ki表示各种非辐射过程的衰减速率常数。
则总的寿命为:
1/k1/(kF+ ki)
由于吸收几率与发射几率有关， F与摩尔消光系数 max (单位为cm2mol-1或 (mol dm-3) -1cm-1)也密切相关。
如果激发态分子只以发射荧光的方式丢失能量，则 荧光寿命与荧光发射速率的衰减常数成反比，荧光发射 速率即为单位时间中发射的光子数，因此有F 1/KF。 KF是发射速率衰减常数。
F表示荧光分子的固有荧光寿命，kF表示荧光发射 速率的衰减常数。
处于激发态的分子，除了通过发射荧光回到基态以外， 还会通过一些其它过程(如淬灭和能量转移)回到基态，其 结果是加快了激发态分子回到基态的过程(或称退激过程) ，结果是荧光寿命降低。
荧光寿命的定义
荧光寿命的定义荧光寿命是指荧光分子从激发态退回到基态所需的时间。
荧光寿命是荧光分析中的一个重要参数，它可以用来确定荧光分子的性质和环境。
荧光寿命的测量方法有很多种，其中最常用的是荧光寿命测量仪。
荧光是一种物质在受到激发后发出的光。
荧光分子在受到激发后，会从基态跃迁到激发态，然后再从激发态退回到基态，发出荧光。
荧光寿命是指荧光分子从激发态退回到基态所需的时间。
荧光寿命的单位是秒。
荧光寿命的测量方法荧光寿命的测量方法有很多种，其中最常用的是荧光寿命测量仪。
荧光寿命测量仪是一种专门用于测量荧光寿命的仪器。
它可以通过测量荧光分子的荧光强度随时间的变化来确定荧光寿命。
荧光寿命的应用荧光寿命在生物医学、环境监测、材料科学等领域都有广泛的应用。
在生物医学领域，荧光寿命可以用来研究生物分子的结构和功能。
例如，荧光寿命可以用来研究蛋白质的折叠状态、酶的催化机制等。
在环境监测领域，荧光寿命可以用来检测水中的有机物污染。
在材料科学领域，荧光寿命可以用来研究材料的光学性质和电子结构。
荧光寿命的影响因素荧光寿命受到许多因素的影响，包括荧光分子的结构、环境、温度等。
荧光分子的结构对荧光寿命有很大的影响。
例如，苯乙烯分子的荧光寿命比苯环分子的荧光寿命长。
环境对荧光寿命也有很大的影响。
例如，荧光分子在溶液中的荧光寿命比在固体中的荧光寿命长。
温度对荧光寿命也有影响。
一般来说，温度越高，荧光寿命越短。
荧光寿命的优缺点荧光寿命作为一种分析方法，具有许多优点。
首先，荧光寿命可以用来研究生物分子的结构和功能，具有很高的生物学意义。
其次，荧光寿命测量方法简单、快速、灵敏，可以用来检测微量物质。
但是，荧光寿命也存在一些缺点。
首先，荧光寿命受到许多因素的影响，需要进行严格的控制。
其次，荧光寿命测量仪的价格较高，需要专业人员进行操作。
荧光寿命作为一种分析方法，在生物医学、环境监测、材料科学等领域都有广泛的应用。
荧光寿命的测量方法简单、快速、灵敏，可以用来检测微量物质。
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从下式可以得到F的粗略估计值(单位为秒)。 1/F≈104 max
在讨论寿命时，必须注意不要把寿命与跃迁时间混 淆起来。跃迁时间是跃迁频率的倒数，而寿命是指分 子在某种特定状态下存在的时间。
通过量测寿命，可以得到有关分子结构和动力学方 面的信息。
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• 荧光寿命及其含义
• （1）假定一个无限窄的脉冲光(δ函数)激发n0个荧 光分子到其激发态,处于激发态的分子将通过辐射 或非辐射跃迁返回基态。假定两种衰减跃迁速率分
• 图中第二条曲线为样品的实测荧光衰减曲线N(tk) ,
实际上为L(tk)与脉冲响应函数I(t)的卷积，即N(tk)
= L(tk) ○I(t) (6)
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• 第三条曲线是实测荧光强度衰减曲线的拟合 函数Nc(tk) 。利用解卷积的办法有可能得到 脉冲响应函数I(t) ,进而求得描述样品荧光衰 减本质的荧光寿命(τ)等有关参量。
荧光寿命(fluorescence lifetime)
当某种物质被一束激光激发后，该物质的分
子吸收能量后从基态跃迁到某一激发态上，再以
辐射跃迁的形式发出荧光回到基态。当去掉激发
光后，分子的荧光强度降到激发时的荧光最大强
度I0的1/e所需要的时间，称为荧光寿命，常用表 示。如荧光强度的衰减符合指数衰减的规律:
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• 事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返 回基态,有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返 回基态,这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲 线。由于实际体系的复杂性,荧光衰减往往要用多 指数或非指数衰减方程描述:
• I(t) = ∑αiexp(- t/τi) (5) • 式中αi 为第i 项的指前因子。衰减方程的复杂性反
• I(t) = I0exp(- t/τ) (3)其中I0 是时间为零时的荧光强度。 • 于是,荧光寿命定义为衰减总速率的倒数:
• τ= (Γ+ knr)- 1(4) •也就是说荧光强度衰减到初始强度的1/e时所需要的时 间就是该荧光物种在测定条件下的荧光寿命。实际上 用荧光强度的对数对时间作图,直线斜率即为荧光寿命 倒数的负值。荧光寿命也可以理解为荧光物种在激发 态的统计平均停留时间。
的时间都应等于。
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如果激发态分子只以发射荧光的方式丢失能量， 则荧光寿命与荧光发射速率的衰减常数成反比，荧光发 射速率即为单位时间中发射的光子数，因此有F 1/KF 。KF是发射速率衰减常数。
F表示荧光分子的固有荧光寿命，kF表示荧光发射 速率的衰减常数。
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处于激发态的分子，除了通过发射荧光回到基态以外， 还会通过一些其它过程(如淬灭和能量转移)回到基态，其 结果是加快了激发态分子回到基态的过程(或称退激过程) ，结果是荧光寿命降低。
映了体系中荧光物种的多样性或存在状态的复杂性。
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• 图中有三条曲线, 分别是实际测定强度衰减曲线 N(tk) 、仪器响应函数 L(tk)和拟合函数Nc(tk) 。
• 仪器响应函数也被称之为光源函数,实际工作中 以胶体SiO2为虚拟样品进行测定,所得到的衰减曲 线就是图中的L(tk) ,光源函数表明了仪器能够测定 的最短荧光寿命。
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• 2.研究荧光寿命的意义
• （1）荧光物质的荧光寿命与自身的结构、所处 微环境的极性、粘度等条件有关,因此通过荧光 寿命测定可以直接了解所研究体系发生的变化。
• （2）荧光现象多发生在纳秒级,这正好是分子 运动所发生的时间尺度,因此利用荧光技术可以 “看”到许多复杂的分子间作用过程,例如超分 子体系中分子间的簇集、固液界面上吸附态高 分子的构象重排、蛋白质高级结构的变化等。
ItI 0e-kt
其中I0是激发时最大荧光强度，It是时间t时的
荧光强度，k是衰减常数。假定在时间时测得的It
为I0的1/e，则是我们定义的荧光寿命。
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寿命是衰减常数k的倒数。事实上，在瞬间激发后的某个
时间，荧光强度达到最大值，然后荧光强度将按指数规律
下降。从最大荧光强度值后任一强度值下降到其1/e所需
别为Γ和knr,则激发态衰减速率可表示为dn(t)/dt=-
(Γ+ knr) n(t) (1)
• 其中n(t)表示时间t时激发态分子的数目,由此可得
到激发态物种的单指数衰减方程。n(t) = n0exp(- t/τ)
(2)
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• 式中τ为荧光寿命。荧光强度正比于衰减的激发态分子 数,因此可将上式改写为:
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• 研究荧光寿命的意义
• （3）除了直接应用之外,荧光寿命测定还是其它 时间分辨荧光技术的基础。例如基于荧光寿命 测定的荧光猝灭技术可以研究猝灭剂与荧光标 记物或探针相互靠近的难易,从而对所研究体系 中探针或标记物所处微环境的性质作出判断。
• （4）基于荧光寿命测定的时间分辨荧光光谱可 以用来研究激发态发生的分子内或分子间作用 以及作用发生的快慢。
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研究荧光寿命的意义 （5）非辐射能量转移、时间分辨荧光各向异
性等主要荧光技术都离不开荧光寿命测定。 （6）在材料研究中，测量材料的荧光寿命，
可以获得能级结构和激发态弛豫时间等信息。
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• 3荧光寿命的影响因素包括哪些
• 根据激发态寿命理论，物质的荧光寿命主要由自发辐 射跃迁寿命和无辐射跃迁寿命来决定。自发辐射寿命
寿命和这些过程的速率常数有关，总的退激过程的速率
常数k可以用各种退激过程的速率常数之和来表示:
kkF+ki ki表示各种非辐射过程的衰减速率常数。
则总的寿命为:
1/k1/(kF+ ki)
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由于吸收几率与发射几率有关， F与摩尔消光系数 max (单位为cm2mol-1或 (mol dm-3) -1cm-1)也密切相关。