液相凝胶色谱仪分析通则

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S-P液相凝胶色谱仪分析通则

xx发布 xx 实施

xx冰箱公司发布

QJ/KB xx

前言

本标准是S-P液相凝胶色谱仪的通用标准，本公司凡是要用到液相凝胶色谱仪进行检测时均可执行此标准。

本标准由冰箱公司标准化委员会提出。

本标准由计量检验部起草并解释。

本标准主要起草人：

本标准首次发布日期：1996年12月28日。

xx企业标准

S-P液相凝胶色谱仪分析通则

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1 1 范围

本标准规定了美国SP公司液相凝胶色谱仪的操作过程及注意事项。

本标准适用于冰箱公司。

2引用标准

下列标准包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本校准的条文。在标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨、使用下列标准最新版本的可能性。

3S-P液相凝胶色谱仪操作规程。

3.1S-P液相色谱仪操作规程

3.1.1溶剂处理：所有溶剂必须经过0.45μm滤膜过滤，或经过G 5布氏漏斗抽滤，装入专用储液瓶中，然后超声波脱气（30～60）min。

3.1.2 开电源：开总电源开关，稳压器，开UPS-1000不间断电源，预热一分钟。

3.1.3 开真空脱气机：将后部电源开关打到“ON”位置，此时真空泵开始工作，约

3分钟后达到真空度，自然停机，绿灯亮。

3.1.4 输液泵起动

3.1.

4.1打开泵电源开关于“ON”位置，自检正常后小屏幕显示S-P，1992，V3.04字样，停留数秒钟，自动显示当前状态：流速、静止压力、最大压力。

3.1.

4.2清洗液路：打开面板，逆时针方向旋开旁通阀，按“Purse”键，用“+”、“-”键选择通道A、B、C、all、blend，用光标准、“+”、“-”键选择清洗最大压力、清洗时间，按“Enter”，此时流量约为10mL/min，清洗完毕，按“STOP“键，顺时针方向旋紧旁通阀，切忌太紧。合上面板。

文件编辑：按“menu“键，根据提示编辑所需要执行的文件，文件内容包括：文件号、文件名、溶剂比例、时间参数、最大压力、最小压力、梯度曲线、显示溶剂等。文件编辑后将会自动储存，按“RUN”键将自动执行当前文件。

冰箱公司 1996-12-28 批准 1997-01-28 实施

3.1.5柱的选择：现有三支柱C8、C18、Si，其中C8、C18为反相柱，流经此柱的

溶剂必须是极性溶剂，如甲醇、乙腈、四氢呋喃等；Si为正相柱，流经该柱的溶剂必须

是非极性溶剂，如甲苯、正己烷、丙酮等。每次换柱时要将通道中溶剂彻底清洗干净，

柱内任何时候不能混入不允许的溶剂。

3.1.6开“FOCUS”检测器：按仪器后面开关于“1”位置，此时检测器屏幕显示主

菜单。

3.1.7 数据工作站操作

3.1.7.1开机：开打印机电源，开显示屏电源，电脑自检后，OS/2引导，自动显示“Group-Spectra Focus”操作窗口。

3.1.7.2检测器条件设定与编辑：根据检测样品的需要，选择扫描方式、扫描范围、

采样时间、光源选择、积分波长等，选择完毕后，取一文件名，储存，退出。

3.1.7.3选择系统配置：即选择泵、检测器、自动进样器型号配置。

3.1.7.4方法设定：包括方法名称、定量方式（面积百分法、面积归一化法、内标法、

外标法）、最小峰宽、最小峰高、衰减、最小峰面积、报告形式（峰高、峰面积）、终止

时间、各种时间参数、校正系数、存储方式、数据文件名称等等。

3.1.7.5进入实时显示后（real time display），编辑绘图方式：纵座标标度、观察

波长偏置等。

3.1.7.6进样阀进样：使进样阀手柄处于水平状态，注射超过定量环容积的样品溶液，

迅速将手柄按顺时针方向转入垂直状态，同时用mouse按RUN即开始采集数据。

3.1.7.7采样结束后，自动积分、校正、打印色谱及分析结果。

3.1.8 关机：按与开机相反的顺序关机，即主机电源→显示屏→打印机→Focus →检测器→泵→脱气机→ UPS →稳压器→总电源。

3.2 S-P凝胶色谱仪操作规程

3.2.1 溶剂处理：参照2.1.1。

3.2.2 开电源：开总电源开关，稳压器，调压器在115V位置。

3.2.3 开真空脱气机：参照2.1.3。

3.2.4 输液泵起动：参照2.1.4。

3.2.5 柱的选择：根据被测样品分子量大小，选择单一凝胶色谱专用柱或2～3支串联。3.2.6 ShodexRI-71检测器：打开面板上电源开关，将后面温控器开关拨到“ON”位置，

按“Purge”键，绿指示灯亮，启动输液泵，当“Optical Bal”指示灯只有中间绿灯亮

时，表示样品池与参比池折光率达到平衡，可以检测样品，再按一下“Purge”键，绿灯灭。

3.2.7积分仪操作：

3.2.7.1开机：打开尾部电源开关，此时仪器进行自检，自检正常后显示“Ready”，并显示四种功能选择，此时可按2+Enter，即进入GPCPlus状态。

3.2.7.2用已知分子量标样进样，得出各分子量分布与保留时间的对应关系。

3.2.7.3按“Dilog”键，根据检测要求选择方法编码、起止积分时间、输入校正曲线数据、绘图方式、切片积分间隔等等数据处理条件。

3.2.8用流动相溶剂溶解未知样品，用G3沙芯漏斗过滤。用25μL针筒抽取样

品，注射进样。

3.2.9数据处理：当数据处理条件输入齐备后，积分仪将根据操作者的要求打印

出各种平均分子量及分子量分布。

3.2.10关机：与开机顺序相反。

4 填写设备点检表。

5 仪器每年检定一次，要在计量有效期内使用。

6 在仪器检测样品过程中必须注意开通风机，因液相凝胶检测时用的都是有毒有机溶剂。

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