植物组织切片制作以及注意事项

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植物切片相关实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解植物切片的制作过程及注意事项。

2. 掌握植物组织切片技术在植物学研究中的应用。

3. 通过观察植物切片，了解植物组织的结构特征。

二、实验原理植物切片技术是一种重要的植物学研究方法，通过将植物组织制成薄片，便于在显微镜下观察其结构特征。

本实验采用石蜡切片法，将植物组织固定、脱水、透明、包埋、切片、染色，最后进行封片。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱鳞片叶、马铃薯块茎、胡萝卜根等。

2. 仪器设备：切片机、显微镜、显微镜载物台、显微镜镜头、载玻片、盖玻片、酒精灯、酒精、二甲苯、甲醛、石蜡、刀片、剪刀、镊子、滴管、烧杯、滤纸等。

四、实验步骤1. 固定：将植物材料放入装有甲醛的烧杯中，浸泡24小时。

2. 脱水：将固定后的植物材料依次放入50%、70%、90%、95%、无水酒精中，每级酒精浸泡30分钟。

3. 透明：将植物材料放入二甲苯中，室温下浸泡，使组织透明。

4. 包埋：将透明后的植物材料放入熔化的石蜡中，使其成为石蜡块。

5. 切片：将石蜡块放入切片机中，切取5-10微米的薄片。

6. 染色：将切片放入染液中，如苏木精-伊红染色液，室温下染色30分钟。

7. 水洗：将染色后的切片用蒸馏水冲洗，去除多余的染液。

8. 封片：将冲洗后的切片用中性树胶封片，制成植物切片。

五、实验结果与分析1. 洋葱鳞片叶切片观察：- 表皮细胞：细胞呈长方形，排列紧密，细胞壁较厚，细胞核较大，染色较深。

- 保卫细胞：位于表皮层，呈肾形，细胞壁较薄，细胞核较小。

- 保卫细胞间隙：保卫细胞之间形成的空隙，有利于气体交换。

- 气孔：保卫细胞之间形成的开口，是气体交换的主要通道。

2. 马铃薯块茎切片观察：- 表皮细胞：细胞呈多边形，排列紧密，细胞壁较厚，细胞核较大。

- 薄壁组织：位于表皮下方，细胞较大，细胞壁较薄，含有丰富的营养物质。

- 维管束：由韧皮部和木质部组成，负责水分和养分的运输。

3. 胡萝卜根切片观察：- 表皮细胞：细胞呈长方形，排列紧密，细胞壁较厚，细胞核较大。

植物组织切片制作以及注意事项

植物组织石‎蜡切片的制‎作以及注意‎事项1 植物组织石‎蜡切片的制‎作方法⑴固定：用50%或70% FAA固定‎液（50%或70%酒精：甲醛：冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用‎50 % FAA；老的材料用‎70%的FAA），置于4℃固定24 h。

⑵脱水：将固定液倒‎去，加入50%乙醇，室温静置3‎0 min；重复一次，室温静置2‎0min。

换成1%番红O溶液‎(用70%酒精配制)，室温脱水染‎色过夜。

次日继续脱‎水，酒精浓度梯‎度和时间依‎次为：80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1‎h、40min‎（2次）。

⑶透明：1/2无水乙醇‎+二甲苯混合‎液1h，纯二甲苯1‎h、40 min（2次）。

最后加入少‎量二甲苯（浸没材料即‎可）和碎蜡，放入38℃温箱中过夜‎。

⑷浸蜡：将温箱温度‎调至56℃，计时1h；换成二级蜡‎1h；三级蜡（3次）各1h、1h、40min‎（从温度上升‎到56℃开始计时）。

⑸包埋：将带有材料‎的液体蜡倒‎入叠好的纸‎槽中，迅速放入冰‎水中使蜡凝‎固，防止气泡产‎生，以及凝蜡不‎匀。

⑹切片：修整蜡块，用Lica‎RM212‎6切片机切‎片，厚度5-10‎μm。

⑺贴片: 在载玻片上‎涂少许粘片‎剂，将切好的蜡‎带放入温水‎中，捞至载玻片‎上，最后置于3‎7℃恒温箱过夜‎烤片。

⑻脱蜡及染色‎：①番红-固绿对染ⅰ脱蜡：二甲苯60‎m in，二甲苯5 min、1/2无水乙醇‎+1/2二甲苯混‎合液5 min、无水乙醇5‎min、无水乙醇5‎min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过‎夜。

ⅱ染色：80%乙醇5 min，1%固绿（用95%酒精配制）迅速蘸一下‎，大约10s‎，直接放到9‎5%乙醇5mi‎n、无水乙醇5‎m in、无水乙醇5‎m in、1/2无水乙醇‎+1/2二甲苯混‎合液5mi‎n、二甲苯5 min（2次）。

②甲苯胺蓝染‎色ⅰ脱蜡：二甲苯60‎min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇‎+1/2二甲苯混‎合液5 min、无水乙醇5‎min、无水乙醇5‎min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。

植物细胞学分析之组织切片技术

植物细胞学分析之组织切片技术一、试剂（1）卡诺氏固定液：无水乙醇与冰醋酸按体积比为3:1混合配制。

（2）1mol／L盐酸溶液：取浓盐酸（比重1.19）82.5ml，加入蒸馏水917.5ml。

（3）醋酸洋红染液：4-5g洋红，冰醋酸45ml，蒸馏水55ml，先将冰醋酸加入蒸馏水中煮沸，然后将火移去，立刻加入洋红，用玻璃棒搅匀溶化，冷却后过滤即成。

（4）70%酒精；95%酒精。

二、细胞分析方法1．有丝分裂全过程的染色体制片方法步骤：取材-预处理-固定-根尖解离1mol/L HCL-醋酸洋红染色-压片（1）发根挑选每份黑麦种子材料25粒，经流水冲洗，放于培养皿内温水浸泡24h。

置于25℃恒温箱中发根。

待根长到1～2cm时，于适宜时间用蒸馏水洗净，将水吸干，剪取根尖0.5～1cm进行预处理。

为获得尽可能多的分裂相，根尖以上午9～10时剪取为宜。

（2）预处理为了有利于有丝分裂中，染色体的观察和计数，通常要对材料进行不同的预处理。

预处理主要通过抑制和破坏纺锤丝的形成，来获得更多的中期分裂相，同时还可以改变细胞质的粘度，促使染色体缩短和分散，便于压片和观察。

将根尖浸于蒸馏水内，1-4℃低温处理24h。

（3）固定材料经预处理后，用流水冲洗2次，然后投入卡诺液（3份甲醇∶1份冰乙酸）中固定26h，用95％的乙醇洗两次，转入70％乙醇中保存备用（4℃）。

固定的目的是：①迅速防止细胞死亡后的变化，如自溶、腐败等，尽量保持生长状态结构。

②使细胞中的蛋白质、脂肪等成分转变为不溶性物质，以保持生前的形态。

③使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于观察和鉴定。

④使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色。

⑤防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。

（4）解离常用酸解法：从70％乙醇中取出固定好的根尖，用蒸馏水冲洗后，吸水纸吸干，放入盛有1 mol/L的HCl的1.5ml离心管中，60℃水浴，恒温条件下解离10min。

植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用，分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体，因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离，这一操作称为解离。

一款制作植物组织永久切片的简单工序

一款制作植物组织永久切片的简单工序制作植物组织永久切片的简单工序___________________________________________植物的永久切片是由植物学家和生物学家制作的一种技术，可以用来观察植物细胞的结构和形态，从而获得有关植物生长、发育、适应性等的重要信息。

制作植物永久切片的工序简单易行，但需要一定的技术。

下面介绍了制作植物组织永久切片的简单工序：### 一、准备材料要制作植物组织永久切片，需要准备如下材料：1. 植物样本：通常是取自健康的植物，尽量避免使用伤口或染色体变异的植物；2. 水和盐水：用于浸泡样本；3. 一把实验剪刀：用来剪取植物样本；4. 盐酸：用于脱落去除样本表面的死细胞和细胞外物质；5. 水溶性胶：用于将样本固定在显微镜片上；6. 水溶性染料：用于染色切片；7. 显微镜片：用于观察切片；8. 盐水：用于保存切片。

### 二、准备样本1. 将样本浸泡在水中或盐水中10-15分钟，以便其表皮和内部的细胞均匀地膨胀；2. 使用剪刀剪取样本的一小部分，然后放入盐酸中浸泡5-10分钟，以去除表皮死细胞和外部物质；3. 用凉水冲洗样本，直至表皮无法剥离。

### 三、固定样本并制作切片1. 将样本放入水溶性胶中浸泡10-15分钟，以将样本固定在显微镜片上；2. 使用一把实验剪刀将样本剪成3-4微米厚的切片；3. 将制作出的切片放入盐水中浸泡5-10分钟，以保证细胞不被剪断。

### 四、染色并观察切片1. 将样本切片浸泡在水溶性染料中10-15分钟，以使其形成彩色染色效果；2. 将彩色的样本切片放入显微镜下观察，以获得关于植物生长、发育、适应性等信息。

### 五、保存切片1. 将彩色的样本切片取出后用凉水冲洗干净；2. 将冲洗后的样本切片放入盐水中保存。

通过以上步骤就可以完成一份优秀的植物永久切片。

在制作过程中要尽量避免使用伤口或变异的样本，以便得到真实而准确的信息。

植物切片制作

植物组织制片技术是随着显微镜的出现而发展起来的技术,是人们认识植物体结构的有效手段，已成为植物生物学的重要组成部分.植物制片技术已建立了许多方法，现简要介绍如下几种最常见的制片技术:徒手切片法、滑走切片法、离析法、压片法、石蜡制片法和冰冻切片法。

徒手切片法徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片，所作的切片通常不经染色或经简单染色后，制成临时的水装片用于观察，亦可以通过脱水与染色制成永久制片。

优点：简单、方便，不需要复杂的设备，不经过化学药物的处理，基本上保留了植物活体的状态。

用品与材料显微镜、载（盖)玻片、刀片、毛笔、培养皿、吸水滤纸、滴管、ddH2O或清水、1％番红水溶液、菜叶、胡萝卜、马铃薯实验材料对于软硬适中,便于手持的材料，可将实验材料截成适当小块,一般以长2~3cm,切片断面不超过3～5mm2为宜。

对于过于柔嫩的器官（如叶片等），一般可选用胡萝卜根、土豆块茎等作为支撑物，包被住材料后再进行切片。

有时也可将叶片卷成圆筒后再进行切片. 实验步骤1、在小培养皿中放入ddH2O或清水。

2、用左手拇指、食指和中指拿住材料，拇指略低于食指与中指，并使材料略为突出在指尖上面。

3、右手持刀，将刀片平稳地放在左手食指之上，与材料切面平行，然后以均匀的动作,自左前方向右后方，斜着向后拉切，切时用臂力而不用腕力。

4、切下许多薄片后，用湿毛笔将这些薄片放人培养皿中.用毛笔挑选透明的薄片,放在载玻片上，用吸管滴一滴水在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片进行观察。

注意事项1、在切片前，要不断地用水湿润材料和刀片。

2、切片时，两只手应该保持活动状态，不要使它们紧靠身体或实验台，且用力不要过猛,不能用刀片挤压材料或来回切割材料。

3、动作要敏捷,材料要一次切下，不要追求切片形状的完整。

简单的组织化学染色经徒手切片法切下的薄片，可以进行简单的组织化学染色，这样更容易分辨细胞的结构，同时可以观察到细胞各部分的化学成分。

一款制作植物组织永久切片的简单工序

一款制作植物组织永久切片的简单工序
植物组织永久切片，是一种实验室常用的技术，它能够精确地显示出细胞结构和组织关系，为进一步的生物学研究提供重要的实物参考。

本文将介绍一种简易的制作植物组织永久切片的工序。

1. 收集静态干燥的植物组织样品，若有生长的植物组织，可使用锋利的剪刀将其剪成稍细的片段，然后将其放入焦磷酸盐纸中，处理到它们在纸中能够保持它们的原形；
2. 将其从焦磷酸盐纸中取出，放入70%甲醇中浸泡5分钟，然后将甲醇沥干；
3. 将该块片段放入离心瓶中，倒入脱水甲醇，再加入2-3滴甲醇衍生物，然后像正常甲醇操作一样在37℃处理一小时；
4. 将片段放入脱模剂中浸泡5分钟，然后抽出片段，放入彻底的脱水甲醇中，处理2-3分钟；
5. 用混合85%醇，5％玻璃胶和10％蓝指甲油的溶液将片段放入，加热至60-65℃，处理五分钟；
6. 将处理过的植物片段放入原位置，放入含石蜡的贴片切片机中，切片，厚度约为4-5微米；
7. 将切好的片段放入石蜡胶片中，再放入至少5％氢氧化钾溶液中浸泡；
8. 胶片冷却到室温后，用正常的洗涤法洗涤，再用100％乙醇洗涤；
9. 用染料渗透染色，准备放大装配的抛光膜，细腻制作，就可以得到完美的植物组织永久切片了。

本方法均为视个体样品的不同而定，步骤或配方可调整。

作出完美切片不仅需要操作工具与药剂的加减，还需要有足够的经验和技能，只有经过细致的操作，才能将植物组织永久切片做得完美。

植物切片制作

植物组织制片技术是随着显微镜的出现而发展起来的技术，是人们认识植物体结构的有效手段，已成为植物生物学的重要组成部分。

植物制片技术已建立了许多方法，现简要介绍如下几种最常见的制片技术：徒手切片法、滑走切片法、离析法、压片法、石蜡制片法和冰冻切片法。

优点：简单、方便，不需要复杂的设备，不经过化学药物的处理，基本上保留了植物活体的状态。

用品与材料显微镜、载（盖）玻片、刀片、毛笔、培养皿、吸水滤纸、滴管、ddH2O或清水、1%番红水溶液、菜叶、胡萝卜、马铃薯实验材料对于软硬适中，便于手持的材料，可将实验材料截成适当小块，一般以长2~3cm，切片断面不超过3~5mm2为宜。

对于过于柔嫩的器官（如叶片等），一般可选用胡萝卜根、土豆块茎等作为支撑物，包被住材料后再进行切片。

有时也可将叶片卷成圆筒后再进行切片。

实验步骤1、在小培养皿中放入ddH2O或清水。

2、用左手拇指、食指和中指拿住材料，拇指略低于食指与中指，并使材料略为突出在指尖上面。

3、右手持刀，将刀片平稳地放在左手食指之上，与材料切面平行，然后以均匀的动作，自左前方向右后方，斜着向后拉切，切时用臂力而不用腕力。

4、切下许多薄片后，用湿毛笔将这些薄片放人培养皿中。

用毛笔挑选透明的薄片，放在载玻片上，用吸管滴一滴水在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片进行观察。

注意事项1、在切片前，要不断地用水湿润材料和刀片。

2、切片时，两只手应该保持活动状态，不要使它们紧靠身体或实验台，且用力不要过猛，不能用刀片挤压材料或来回切割材料。

3、动作要敏捷，材料要一次切下，不要追求切片形状的完整。

简单的组织化学染色经徒手切片法切下的薄片，可以进行简单的组织化学染色，这样更容易分辨细胞的结构，同时可以观察到细胞各部分的化学成分。

安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤

安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤制作植物细胞和组织切片是植物学和生物学研究中常用的实验方法之一、下面是一般的植物细胞和组织切片制作步骤。

1.实验材料准备-植物标本：选择具有代表性的植物标本，新鲜度较高的嫩叶、茎和根部适合制作细胞和组织切片。

-植物细胞和组织固定剂：常用的固定剂有乙醇、乙酸、福尔马林等。

选择适当浓度的固定剂根据样本的特性来确定。

-切片工具：显微刀片、玻璃切片、切片夹和切片盒等。

-切片染色剂：苏木素、伊红等。

2.样本处理-选择适当大小的植物标本，将其放置在固定剂中固定一段时间，常规处理时间为1-24小时，具体时间根据固定剂浓度和标本的特性来确定。

较硬的组织可选择用150-200mL的固定液浸泡2-12小时，较脆弱的组织可缩短固定时间。

-固定后，将样本从固定剂中取出，用纸巾轻轻擦干外表水分。

3.组织松解-对于较厚的植物组织，需要进行松解以使细胞方便切片观察。

通常，可用腐解溶液进行松解。

常用的腐解溶液有酶解液、盐酸和氯化铁等。

将样本浸泡在腐解溶液中，温度和处理时间根据样本的特性而定，通常需要温和的温度（如37°C）并持续一段时间（如30分钟-4小时），直到细胞组织松解。

4.切片制备-用镊子将处理好的样本取出，用切片钳将样本固定在切片夹上。

夹住样本的位置要仔细选择，以尽量保留较好的细胞和组织结构。

-使用显微刀片沿着横切面或纵切面将样本切割成较薄的切片。

刀片的角度和力度要适中，避免切片过厚或者过薄。

厚度通常为10-20微米。

-将切好的样本放在预先准备好的玻璃切片上。

用切片钳将切片夹住，并用切片盒盖上，防止灰尘和水分进入。

5.切片染色-拿起玻璃切片，将其放在染色剂（如苏木素溶液）中浸泡。

染色时间根据样本和染色剂而定，通常需要15-30分钟。

-取出染色剂，用去离子水或蒸馏水冲洗切片，直到水洗液透明。

-将切片用纸巾轻轻吸干水分，然后放在显微镜玻片上。

6.保存和观察-将切片放在带盖玻片上，用透明胶带黏贴边缘以防止切片移动。

植物组织切片技巧

植物组织切片技巧植物组织切片技巧是生物学研究中非常重要的一项实验技术，它能够帮助我们观察和研究植物的细胞结构、组织构成以及生理功能。

本文将介绍一些常用的植物组织切片技巧，希望能够对读者有所帮助。

1. 样品采集与固定在进行植物组织切片之前，首先需要采集新鲜的植物样品，并将其固定。

样品的选择应根据研究目的而定，可以是植物的叶片、茎、根等部位。

固定样品的目的是保持其原有的形态和结构，常用的固定剂有福尔马林、醋酸乙酯等。

固定时间一般为数小时至数天，具体时间根据样品的大小和组织结构而定。

2. 组织切片的准备在进行组织切片之前，需要将固定的样品进行处理和准备。

首先，将样品进行脱水处理，这可以通过逐渐将样品浸泡在浓度递增的酒精溶液中来实现。

脱水的目的是去除样品中的水分，以便后续的切片操作。

接下来，将样品进行透明化处理，这可以通过将样品浸泡在透明剂（如苯酚、甘油等）中来实现。

透明化的目的是使样品变得透明，以便于观察切片。

3. 切片的技巧在进行组织切片时，需要使用显微镜和切片刀。

首先，将透明化的样品取出并放置在显微镜玻片上。

然后，使用切片刀将样品切成薄片，薄片的厚度一般为几十至几百微米。

切片时需要保持手稳定，刀片锋利，以免损坏样品或者切出不理想的切片。

切片完成后，将切片放置在显微镜玻片上，并加入一滴适当的显微镜溶液，以保持切片的湿润。

4. 切片染色与观察为了更好地观察和研究植物组织的细胞结构，可以对切片进行染色处理。

常用的染色剂有甲苯胺蓝、伊红等。

染色的目的是使细胞和组织的结构更加清晰可见。

将染色剂滴在切片上，静置片刻后，用纸巾轻轻吸去多余的染色剂。

然后，将切片放置在显微镜下观察。

可以调节显微镜的放大倍数和焦距，以获得更清晰的图像。

总结起来，植物组织切片技巧是一项需要细心和耐心的实验技术。

在进行植物组织切片之前，需要采集和固定样品，然后进行脱水、透明化和切片处理。

最后，可以对切片进行染色处理，并使用显微镜观察和研究植物组织的细胞结构。

植物组织切片制作以及注意事项

植物组织石蜡切片的制作
1 植物组织石蜡切片的制作方法
⑴固定：用50%或70% FAA固定液,置于4℃固定24 h。

⑵脱水：倒去固定液，蒸馏水洗，加入50%乙醇，室温静置30 min；重复一次，
室温静置20 min。

换成1%番红O溶液(用70%酒精配制)，室温脱水染色过夜。

次日继续脱水酒精浓度梯度和时间依次为：50%2h，80% 乙醇2h、95% 乙醇4h、无水乙醇3h。

⑶透明：1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h纯二甲苯2h。

⑷浸蜡：一蜡缸1h，二蜡缸2h，三蜡缸2h。

⑸包埋：按照所要求的面进行包埋。

⑹切片：修整蜡块，用Thermo切片机切片，厚度8-10 μm。

⑺贴片: 在防脱载玻片将切好的蜡带放入温水中，捞至载玻片上，烤片1小时。

⑻脱蜡及染色：
①番红-固绿双染
1、脱蜡：二甲苯（1）10min，二甲苯（2）10 min、二甲苯（3）10 min ，无
水乙醇8 min、、95%乙醇8 min、80%乙醇8 min、70%乙醇8min，蒸馏水洗。

2、番红固绿染色：
苯胺番红约10分钟，95%酒精去浮色，苯胺固绿约2－3分钟，再经95%酒精、无水酒精、1/2无水酒精+1/2二甲苯、二甲苯（两次）各约4—5秒钟。

（9）封片中性树胶封片
结果：厚壁组织、导管、细胞核红色，其余部分为绿色。

植物制片方法

1. 徒手制片及特点徒手制片（切片）一般指徒手用刀片（常用单面刀片）把新鲜的植物材料切成薄片的制片方法。

此法在植物制片中具有十分重要的地位，是一种普遍应用的制片方法。

徒手制片的主要优点是：能及时观察研究植物生活组织的结构和天然色彩；方法及用具简单，不需切片机等机械设备，短时间即可完成，这是其他方法所不及的；徒手制片的主要缺点是：对于微小、柔软、水分过多以及坚硬的材料，难以用徒手切成薄片；对于操作不熟练者，往往切成厚薄不匀或不完整的切片。

2. 徒手制片的方法及注意事项徒手制片最主要的工具就是刀片，常可用单面保安刀片。

要获得良好的切片，首先要保持刀口的锋利，切片前，先准备好一个培养皿盛好清水，同时准备好显微镜、载玻片、盖玻片、刀片等用具，然后拿取材料进行切片。

材料可以是新鲜的材料，也可以是经过固定的材料。

切片时，将欲切材料断面和刀片上滴上清水以保持材料湿润。

以左手拇指、食指、中指捏住材料，拇指应低于食指，以免切伤手指；材料高出指尖。

右手执刀，将刀平放在食指上，刀口朝内，刀面与材料断面平行，然后以均匀快捷的动作自左前方向右后方以臂力带动刀片水平切割移动，不要用腕力。

切片时还要注意，切时动作要迅速，材料一次切下，切忌停顿或拉锯式切割。

连续切数片后，将切下的薄片轻轻移入盛水的培养皿中备用。

然后挑选薄而透明的切片，放在载玻片上的水滴中，加上盖玻片制成临时制片进行观察。

用徒手切片的材料不宜过大，一般以表面不超过5-8mm²为宜。

对于过于柔软或微小的材料（如叶片、细小的根尖等）需要借助一些夹持物方可进行切片，如果临时制片需保存一段时间，（1）将材料封在水中，每隔20-30分钟再加一滴水，此法可保持数小时；（2）用10%-30%的甘油水溶液代替清水封片，并将制片放在铺有湿滤纸的大培养皿中保存，或用石蜡或指甲油封边保存，可保存1-2周或更长时间。

涂片和压片是进行植物染色体观察研究常用的制片方法。

其中涂片是将新鲜的材料或者是经过固定的材料于载片上，托涂成均匀一层，经染色后盖上盖玻片镜检。

植物组织切片制作以及注意事项(精)

植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定:用50%或70% FAA固定液(50%或70%酒精:甲醛:冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA;老的材料用70%的FAA,置于4℃固定24 h。

⑵脱水:将固定液倒去,加入50%乙醇,室温静置30 min;重复一次,室温静置20 min。

换成1%番红O溶液(用70%酒精配制,室温脱水染色过夜。

次日继续脱水,酒精浓度梯度和时间依次为:80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min(2次。

⑶透明:1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h,纯二甲苯1h、40 min(2次。

最后加入少量二甲苯(浸没材料即可和碎蜡,放入38℃温箱中过夜。

⑷浸蜡:将温箱温度调至56℃,计时1h;换成二级蜡1h;三级蜡(3次各1h、1h、40min(从温度上升到56℃开始计时。

⑸包埋:将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中,迅速放入冰水中使蜡凝固,防止气泡产生,以及凝蜡不匀。

⑹切片:修整蜡块,用Lica RM2126切片机切片,厚度5-10 μm。

⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂,将切好的蜡带放入温水中,捞至载玻片上,最后置于37℃恒温箱过夜烤片。

⑻脱蜡及染色:①番红-固绿对染ⅰ脱蜡:二甲苯60min,二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。

ⅱ染色:80%乙醇5 min,1%固绿(用95%酒精配制迅速蘸一下,大约10s,直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min(2次。

②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡:二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。

植物组织切片方法简介

植物组织切片方法简介植物是地球上最重要的生命体之一，它们不仅可以提供人类所需的食物和纤维，还可以提供药物和其他重要的化学物质。

研究植物的结构和功能对于我们了解植物的生长、发育和适应环境的能力至关重要。

而植物组织切片技术是研究植物结构和功能的基础，它可以帮助我们观察和分析植物细胞、组织和器官的结构和组成。

植物组织切片方法是将植物样品切成薄片，然后在显微镜下观察。

这种方法可以用于研究植物的各个方面，包括根、茎、叶、花和果实等。

在进行植物组织切片之前，需要采集植物样品并进行处理。

处理的方式取决于要研究的组织类型和目的。

以下是一些常用的植物组织切片方法：1. 剥离法剥离法是一种简单的植物组织切片方法，适用于研究表皮、叶片和茎皮等表层组织。

首先，将植物样品放入一些蒸馏水中，使其软化。

然后，用镊子或刀片轻轻地将表皮或皮层剥离下来，再将其放在载玻片上，用显微镜观察。

2. 横切法横切法是一种常用的植物组织切片方法，适用于研究茎、根和叶等器官的内部组织结构。

首先，将植物样品固定在一些化学试剂中，如福尔马林或乙醛等。

然后，用刀片将样品切成横截面，将切片放在载玻片上，进行染色和显微镜观察。

3. 纵切法纵切法是一种用于研究植物器官内部结构的方法，适用于研究茎、根和叶等器官。

首先，将植物样品固定在一些化学试剂中，然后用刀片将样品切成纵截面，将切片放在载玻片上，进行染色和显微镜观察。

4. 整体染色法整体染色法是一种将整个植物器官染色的方法，适用于研究植物器官的形态和结构。

将植物样品浸泡在一些染料中，如苏木精和伊红等，然后用酒精和二甲苯等溶剂进行脱水和透明处理，最后将样品置于载玻片上进行显微镜观察。

总之，植物组织切片方法是研究植物结构和功能的基础，它可以帮助我们观察和分析植物细胞、组织和器官的结构和组成。

不同的组织类型和目的需要采用不同的处理方法和切片方法。

因此，在进行植物组织切片之前，需要仔细选择合适的方法和技术，并遵循正确的操作步骤和安全措施，以确保得到准确、可靠和有意义的结果。

植物徒手切片法

植物徒手切片法植物徒手切片法是一种基于人工操作的植物组织切片技术，在植物科学领域中被广泛应用。

与机械切片法和冷冻切片法相比，植物徒手切片法具有操作简便、花费低廉、得到的切片形态更完整等优点。

下面将详细阐述植物徒手切片法的具体操作流程及其在各个领域中的应用。

一、操作流程植物徒手切片法主要是通过手工操作来制备植物组织切片，其步骤如下：1、准备植物材料首先应选择质地较软的植物组织，如果肉、嫩叶、茎尖等部位。

在制备切片前，需要将植物材料沿着纵向切开成薄片，并在切片表面涂上几滴液体切片液，使切片更易于切割。

2、切片将植物材料置于平板上，使用手工刀片沿着组织指定的方向进行切割，制备出薄片。

为使切片均匀，则需细心、耐心地调整刀片角度和切割力度，避免损伤植物组织。

3、染色和封片经过切片制备后，需要进行染色和封片处理，以保证切片的结构完整和细胞形态的清晰显示。

不同的组织染色方法不同，一般采用常见的克罗姆酸盐染色或吉姆萨染色。

然后用封片剂将切片封装，保证切片在显微镜下不受光线干扰。

二、应用领域在植物科学领域中，植物徒手切片法得到了广泛的应用。

以下为其在各个领域中具体的应用。

1、生理学和解剖学研究植物徒手切片法可以用于研究植物组织器官的内部结构和功能，进而揭示植物生理生态的内在机理。

该方法也被广泛应用于植物生长发育、光合作用及植物对环境适应性等方面的研究。

2、细胞学研究植物徒手切片法也可用于分析植物细胞的形态和功能，进一步研究细胞在不同生理生态条件下的变化。

例如，在植物育种中，利用植物徒手切片法可以对遗传育种材料进行细胞形态学评价，从而为植物品种改良提供理论和技术支持。

3、药物和化学物质筛选研究植物徒手切片法可应用于筛选具有抗氧化、抗肿瘤、复含、抗病毒等生物活性物质的植物成分。

通过对植物样品进行切片、染色、显微镜观测等步骤，可以对植物中所含物质的活性和生理效应等进行初步研究。

4、教学与科普植物徒手切片法是学生学习植物科学的基础实验，在学校的植物科学教学中经常用到。

植物切片实验报告心

一、实验目的1. 了解植物切片的制作过程及注意事项。

2. 学习显微镜观察植物组织结构的方法。

3. 掌握植物细胞的基本结构及其功能。

二、实验原理植物切片实验是植物解剖学的重要实验之一，通过制作植物切片，可以在显微镜下观察植物组织、细胞的结构，了解植物的生长发育规律。

植物切片的制作过程主要包括植物材料的采集、固定、切片、染色和封片等步骤。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：植物叶片、茎、根等。

2. 实验仪器：解剖刀、镊子、剪刀、解剖盘、酒精灯、载玻片、盖玻片、显微镜、染色剂、封片剂等。

四、实验步骤1. 植物材料的采集：选取新鲜、健康的植物叶片、茎、根等作为实验材料。

2. 固定：将采集到的植物材料放入盛有固定液的烧杯中，浸泡一段时间，使植物组织固定。

3. 切片：将固定好的植物材料取出，用解剖刀切成薄片，厚度约为0.1-0.2mm。

4. 染色：将切片放入染色液中浸泡，使植物组织染色，便于观察。

5. 封片：将染色后的切片取出，滴上封片剂，盖上盖玻片，用封片剂封好。

6. 观察显微镜：将制作好的植物切片放在显微镜下观察，记录观察结果。

五、实验结果与分析1. 观察叶片切片：叶片切片可见明显的表皮、叶肉和叶脉。

表皮细胞呈扁平状，排列紧密，具有保护作用；叶肉细胞呈圆柱状，排列疏松，含有叶绿体，负责光合作用；叶脉细胞呈管状，含有导管和筛管，负责水分和养分的运输。

2. 观察茎切片：茎切片可见明显的韧皮部、木质部和髓部。

韧皮部细胞呈长条状，排列紧密，含有筛管，负责养分的运输；木质部细胞呈管状，排列紧密，含有导管，负责水分的运输；髓部细胞呈多边形，排列疏松，负责储存营养物质。

3. 观察根切片：根切片可见明显的表皮、皮层、维管柱和髓部。

表皮细胞呈长条状，排列紧密，具有保护作用；皮层细胞呈圆柱状，排列疏松，含有根毛，负责水分和养分的吸收；维管柱细胞呈管状，含有导管和筛管，负责水分和养分的运输；髓部细胞呈多边形，排列疏松，负责储存营养物质。

植物徒手切片注意事项

植物徒手切片注意事项
1. 需要使用锋利的切刀，在干净的工作台上进行切片操作。

2. 切片时要尽量保持手稳定，避免手颤抖导致切片不均匀或影响切片质量。

3. 切片前需要将植物标本处理好，比如将过多的叶片、枝条等部分去除，使得标本在切片过程中更容易稳定。

4. 切片时需要适量加压，将待切物贴紧刀片，但不要过度用力，以防切出的组织断裂或变形。

5. 每次切片后，需要清理刀片以及工作台，避免污染其他标本或影响下一次切片质量。

6. 切完片后，最好用显微镜检查一下切片的质量，避免出现切片不完整、断裂或损坏等问题。

7. 注意安全，避免切伤自己或他人。

植物组织切片

8
修快和切片
• 按需要的切面将蜡块切成梯形，切面在梯形的上部，注意上部矩形的对边平行。
• 用手摇切片机将蜡块切成连续的蜡带。切片时，把切片刀夹在刀架上，再把木块夹在固定装置上，调整固着位置，使材料的切与面刀口平行。然后调整厚度，转动切片机切片。
9
粘片
• 粘片是将切好的蜡片粘在载玻片上。在洁净的载玻片上，加少许粘贴剂并涂匀。
然后将材料和石蜡一起倒人小纸盒中用加热的镊子迅速把材料按需要的切面和一定的间隔排列整齐再将小纸盒平放于冷水中使其很快凝固
植物组织永久制片
• 一、徒手切片法 • 二、滑走切片法 • 三、离析法 • 四、压片法 • 五、石蜡切片法 • 六、冰冻切片法
1
石蜡切片法
石蜡切片法是用石蜡作为包埋剂的一种显微制片方法，是显微技术中最重要最常用的方法之一。它的优点是能够切出薄而均匀的连续切片，便于进行器官的三维重构。此法多用手摇切片机切片。对于较硬的材料，也可以使用滑走切片机。石蜡切片法的操作程序包括：取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、修块、切片、粘片、染色和封片。
6
浸蜡
• 使石蜡慢慢溶于透明剂中，然后完全取代透明剂进人植物组织中。一般将透明好的材料换入新的二甲苯中，然后加入等体积的碎蜡，置于40℃左右的温箱中。随着碎蜡的溶解，不断加入碎蜡使石蜡饱和为止。时间大约l~2天。
7
包埋
• 浸蜡后，在60℃的温箱中，换两次已溶解的纯蜡，每次约2h。然后将材料和石蜡一起倒人小纸盒中，用加热的镊子迅速把材料按需要的切面和一定的间隔排列整齐，再将小纸盒平放于冷水中，使其很快凝固。
• 再将带有蜡片的载玻片放在温台上，温台的温度在45℃左右，蜡片受热后慢慢伸直。用滤纸吸去多余液体，表面烤干后，转入 30℃温箱放置一昼夜。