植物组织切片染色步骤(修改)

组织切片技术铁苏木精染色

组织切片技术铁苏木精染色Weigert铁苏木精染色法试剂：Weigert铁苏木精染液A液：1%苏木精（95%酒精）溶液：苏木精1克，95%酒精100毫升B液：29%三氯化铁水溶液4毫升，盐酸（25%）1毫升，蒸馏水95毫升（氯化铁1.16克溶于蒸馏水98毫升，加盐酸1毫升）用时将两液混合。

只能用几天。

方法：⑴切片脱蜡，经各级酒精至水。

⑵Weigert铁苏木精液染色数分钟。

⑶流水洗，染色适当则不分化；过染，用0.1%盐酸70%酒精溶液分色，流水充分洗涤。

结果：细胞核蓝色。

Heidenhain铁苏木精染色法⑴石蜡切片（3~6微米）脱蜡至水。

⑵入2.5%铁明矾水溶液媒染2~12小时，蒸馏水洗。

⑶Heidenhain苏木精染色4~36小时，蒸馏水洗，Heidenhain苏木精染液：苏木精0.5克溶于无水酒精10毫升，加蒸馏水90毫升，静置4~6周成熟。

用时加一倍蒸馏水稀释。

新配苏木精加碘酸钠0.1克氧化成熟。

⑷2.5%铁明矾水溶液分色。

⑸自来水洗15~60分钟，蒸馏水洗数次。

⑹各级酒精上行脱水，二甲苯透明，树胶封固。

结果：线粒体、中心体、染色体呈深蓝色至蓝黑色。

Heidenhain铁苏木精染色简化法（Sher ，1969)方法：⑴切片脱蜡至水。

⑵入0.2%铁明矾水溶液1小时。

⑶流水洗10~20分钟。

⑷入0.2%自然成熟的苏木精染色1小时。

⑸流水洗3~5分钟。

⑹入0.1N盐酸水溶液分化至细胞核清晰。

⑺流水充分洗涤或用Tris 缓冲液（pH9)洗3~5分钟。

⑻也可用1%光绿或伊红复染。

⑼酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。

结果：细胞核蓝黑色，细胞质绿色或粉红色。

Heidenhain铁明矾苏木精染色法（骨骼肌横纹）试剂：①苏木精染液：苏木精0.5克完全溶于无水酒精10毫升，再加蒸馏水90毫升，一个月后使用②媒染液：5％铁明矾水溶液③分化液：5%铁明矾水溶液铁明矾（透明、淡紫色结晶）5克，蒸馏水100毫升方法：⑴组织固定于Zenker、Helly、甲醛升汞液、10%甲醛液、Bouin 液等，石蜡包埋，切片厚度不超过6微米。

植物细胞学分析之组织切片技术

植物细胞学分析之组织切片技术一、试剂（1）卡诺氏固定液：无水乙醇与冰醋酸按体积比为3:1混合配制。

（2）1mol／L盐酸溶液：取浓盐酸（比重1.19）82.5ml，加入蒸馏水917.5ml。

（3）醋酸洋红染液：4-5g洋红，冰醋酸45ml，蒸馏水55ml，先将冰醋酸加入蒸馏水中煮沸，然后将火移去，立刻加入洋红，用玻璃棒搅匀溶化，冷却后过滤即成。

（4）70%酒精；95%酒精。

二、细胞分析方法1．有丝分裂全过程的染色体制片方法步骤：取材-预处理-固定-根尖解离1mol/L HCL-醋酸洋红染色-压片（1）发根挑选每份黑麦种子材料25粒，经流水冲洗，放于培养皿内温水浸泡24h。

置于25℃恒温箱中发根。

待根长到1～2cm时，于适宜时间用蒸馏水洗净，将水吸干，剪取根尖0.5～1cm进行预处理。

为获得尽可能多的分裂相，根尖以上午9～10时剪取为宜。

（2）预处理为了有利于有丝分裂中，染色体的观察和计数，通常要对材料进行不同的预处理。

预处理主要通过抑制和破坏纺锤丝的形成，来获得更多的中期分裂相，同时还可以改变细胞质的粘度，促使染色体缩短和分散，便于压片和观察。

将根尖浸于蒸馏水内，1-4℃低温处理24h。

（3）固定材料经预处理后，用流水冲洗2次，然后投入卡诺液（3份甲醇∶1份冰乙酸）中固定26h，用95％的乙醇洗两次，转入70％乙醇中保存备用（4℃）。

固定的目的是：①迅速防止细胞死亡后的变化，如自溶、腐败等，尽量保持生长状态结构。

②使细胞中的蛋白质、脂肪等成分转变为不溶性物质，以保持生前的形态。

③使组织内各种物质成分产生不同的折光率，便于观察和鉴定。

④使不同组织成分对染料有不同的亲和力，便于染色。

⑤防止细胞过度收缩或膨胀，失去原有的形态结构。

（4）解离常用酸解法：从70％乙醇中取出固定好的根尖，用蒸馏水冲洗后，吸水纸吸干，放入盛有1 mol/L的HCl的1.5ml离心管中，60℃水浴，恒温条件下解离10min。

植物细胞的细胞壁对细胞形态和结构起支撑和保护作用，分生组织的细胞壁结构将分生细胞结合成一个整体，因此在压片之前需要采用适当方法软化或部分分解细胞壁使细胞间易于分离，这一操作称为解离。

植物组织石蜡切片制作

植物组织石蜡切片的制作一、实验目的1．熟练掌握石蜡切片的方法。

2．掌握永久制片的制作过程，为研究植物的内部结构奠定基础。

3．学会植物内部结构的比较研究方法。

二、实验器具与试剂1．器具石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻片等。

2．试剂10%番红水溶液、0.5%固绿（用95%的酒精配制）、酒精（100%、95%、80%、70%、50%）、二甲苯、蒸馏水、甘油、中性树胶等。

三、实验材料幼嫩植物各部分，根据季节选择材料。

四、实验内容与方法石蜡切片法是显微技术上最重要、最常用的一种方法。

它是把材料封埋在石蜡里面，用旋转切片机切片，可以切出很薄的切片。

凡是精细的工结构，大都用石蜡切片。

全都过程如下：1．固定 2．洗涤 3．脱水与硬化 4．脱酒精 2．封埋 6．切片7．粘片 8．脱蜡 9．染色 10．脱水 11. 透明 12．胶封（一）固定1．固定的意义：固定就是用药品把细胞杀死，使细胞的原生质凝固，死后不发生变化，尽可能保持原来的结构以供我们观察。

良好的固定剂，应是穿透力强，使细胞立刻致死，原生质全部凝固；不发生任何变形，增强折光率，并且不妨碍染色。

2．固定液的种类：固定液的种类很多，根据配制成分可划分为：(1) 简单固定液：以一种化学药品配制的固定液。

常用的简单固定液有：A．酒精即乙醇，用作固定液，常用纯酒精或95％酒精。

酒精穿透力强，固定时间常在1小时以内。

高浓度酒精有使材料收缩的作用。

70％的酒精可作保存液。

配制低度酒精必需要用普通酒精即95％的酒精，绝不可用纯酒精。

酒精为还原剂，不能与铬酸、锇酸、重铬酸钾等氧化剂配合。

酒精可使核酸，蛋白质及肝醣等发生沉淀，但能溶解脂肪及拟脂。

B．福尔马林即甲醛，具强烈刺激性的气味，纯净的甲醛，为无色透明液体。

固定用的浓度为4-10％甲醛也是强还原剂。

不能与铬酸、锇酸等氧化剂配合。

经固定后，材料变硬，通常不引起皱缩，但随后经过他种药剂处理时，就每每出现皱缩。

切片染色实验步骤

1.1 石蜡组织切片
1) 室温下用二甲苯浸泡石蜡组织切片2次，每次5 min，以彻底脱掉石蜡。

注：二甲苯有毒，易挥发，请在通风橱中进行此操作。

2) 室温下用梯度乙醇(100%、90%、80%、70%)各浸泡润洗1次，每次3 min。

3) PBS 浸润清洗切片两次，每次5min。

4) 按1:100的比例，将2 mg/ml的Proteinase K溶液用1 ×PBS稀释，使其终浓度为20 µg/ml。

每个样本上滴加100 µl稀释好的Proteinase K溶液，使溶液覆盖全部样本区域，室温孵育20 min。

（Proteinase K 的孵育时间、温度需根据不同类型组织样本进行优化）。

5) PBS 浸润清洗切片两次，每次5 min，用滤纸吸去多余的液体。

1.2 冰冻组织切片
1) 将冰冻切片放置于室温的片架上，室温20 min，晾干。

2) 将载玻片浸没在4%多聚甲醛溶液（in PBS）中，室温固定30 min。

3) PBS 浸润清洗切片两次，每次5min。

4) 用滤纸小心吸干载玻片上样本周围的液体。

5) 按1:100的比例，将2 mg/ml的Proteinase K溶液用1 ×PBS稀释，使其终浓度为20 µg/ml。

每个样本上滴加100 µl稀释好的Proteinase K溶液，使溶液覆盖全部样本区域，室温孵育10 min。

6) PBS 浸润清洗切片两次，每次5 min，用滤纸吸去多余的液体。

植物实验中的部分染色法

活动五：练习掌握植物实验中的部分染色法
2010年11月22日高晓梅【实验目的】
学习植物制片的一般染色方法
【实验原理】
硫酸可将纤维素水解成胶态水解纤维素，遇碘后呈现蓝色反应；
苏丹Ⅲ染液可将脂肪染成橘黄色。

【实验器材】
芹菜叶柄、花生种子、徒手切片器、双面刀片、毛刷、培养皿、载玻片、盖玻片、吸水纸、1%碘液、66.5%硫酸、体积分数为50%的酒精、蒸馏水、苏丹Ⅲ染液、显微镜
【实验步骤】
1、用徒手切片法切得植物组织薄片。

2、纤维素的染色：将1%碘液滴在芹菜茎切片上，然后再加一滴66.5%硫酸。

稍后，制成临时装片镜检。

3、脂肪的染色：在花生子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染液，染色3分钟；用吸水纸吸去染液，再滴加1~2滴体积分数为50%的酒精溶液，洗去浮色；用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精，滴一滴蒸馏水，制成临时装片镜检。

作业：
填写实验报告册。

植物组织切片制作以及注意事项

植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定：用50%或70% FAA固定液（50%或70%酒精：甲醛：冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA；老的材料用70%的FAA），置于4℃固定24 h。

⑵脱水：将固定液倒去，加入50%乙醇，室温静置30 min；重复一次，室温静置20 min。

换成1%番红O溶液(用70%酒精配制)，室温脱水染色过夜。

次日继续脱水，酒精浓度梯度和时间依次为：80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min（2次）。

⑶透明：1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h，纯二甲苯1h、40 min（2次）。

最后加入少量二甲苯（浸没材料即可）和碎蜡，放入38℃温箱中过夜。

⑷浸蜡：将温箱温度调至56℃，计时1h；换成二级蜡1h；三级蜡（3次）各1h、1h、40min（从温度上升到56℃开始计时）。

⑸包埋：将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中，迅速放入冰水中使蜡凝固，防止气泡产生，以及凝蜡不匀。

⑹切片：修整蜡块，用Lica RM2126切片机切片，厚度5-10 μm。

⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂，将切好的蜡带放入温水中，捞至载玻片上，最后置于37℃恒温箱过夜烤片。

⑻脱蜡及染色：①番红-固绿对染ⅰ脱蜡：二甲苯60min，二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。

ⅱ染色：80%乙醇5 min，1%固绿（用95%酒精配制）迅速蘸一下，大约10s，直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min（2次）。

②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡：二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。

一款制作植物组织永久切片的简单工序

一款制作植物组织永久切片的简单工序
植物组织永久切片，是一种实验室常用的技术，它能够精确地显示出细胞结构和组织关系，为进一步的生物学研究提供重要的实物参考。

本文将介绍一种简易的制作植物组织永久切片的工序。

1. 收集静态干燥的植物组织样品，若有生长的植物组织，可使用锋利的剪刀将其剪成稍细的片段，然后将其放入焦磷酸盐纸中，处理到它们在纸中能够保持它们的原形；
2. 将其从焦磷酸盐纸中取出，放入70%甲醇中浸泡5分钟，然后将甲醇沥干；
3. 将该块片段放入离心瓶中，倒入脱水甲醇，再加入2-3滴甲醇衍生物，然后像正常甲醇操作一样在37℃处理一小时；
4. 将片段放入脱模剂中浸泡5分钟，然后抽出片段，放入彻底的脱水甲醇中，处理2-3分钟；
5. 用混合85%醇，5％玻璃胶和10％蓝指甲油的溶液将片段放入，加热至60-65℃，处理五分钟；
6. 将处理过的植物片段放入原位置，放入含石蜡的贴片切片机中，切片，厚度约为4-5微米；
7. 将切好的片段放入石蜡胶片中，再放入至少5％氢氧化钾溶液中浸泡；
8. 胶片冷却到室温后，用正常的洗涤法洗涤，再用100％乙醇洗涤；
9. 用染料渗透染色，准备放大装配的抛光膜，细腻制作，就可以得到完美的植物组织永久切片了。

本方法均为视个体样品的不同而定，步骤或配方可调整。

作出完美切片不仅需要操作工具与药剂的加减，还需要有足够的经验和技能，只有经过细致的操作，才能将植物组织永久切片做得完美。

植物制片的染色及显微化学鉴定方法

植物制片的染色及显微化学鉴定方法Revised as of 23 November 2020植物制片的染色及显微化学鉴定方法一、目的与要求1、学习植物制片的一般染色方法。

2、学会并掌握常用显微化学鉴定法，即细胞壁化学组成及细胞内主要后含物性质的鉴定方法。

二、材料和用品1、自备材料：植物叶片、芹菜叶柄、土豆块茎、花生种子等等，解剖器、剃刀或双面刀片。

2、其它材料和用品：显微镜、载玻片、盖玻片、纱布、吸水纸、蒸馏水、染色缸；%番红、% 固绿或1%苯胺蓝等染液、中性树胶、二甲苯、酒精、碘—氯化锌、盐酸—间苯三酚、苏丹Ⅲ、碘—碘化钾、10%氯化铁、盐酸等。

三、实验内容1、植物制片的染色方法2、常用显微化学鉴定法四、实验方法1、植物制片的染色方法用徒手切片法切得的薄片，如果仅仅是为了临时观察，制成临时装片即可，这种临时制片不能长久保存，只能作临时观察之用，又由于没经过染色，结构显示的也不够清晰。

为了求得更清晰地显示其细微结构及化学成分，并能够较长时间的保存，可以进一步染色及其它处理以至封片，从而可制成半永久或永久制片。

常用的染色方法是番红—苯胺蓝（或固绿）二重染色法，具体操作方法有二：方法一：（1）将植物切片材料放入30%酒精中，5分钟后移入水中。

（2）用%番红水溶液染色12—24小时。

（3）倒去番红液，用清水冲洗数次后，再放回50%酒精中浸泡5分钟。

（4）将材料从50%酒精中转入70%酒精中脱色，直至硬木质化的细胞壁呈现红色，其它部分呈粉红色或近于无色时为止。

（5） 1%苯胺蓝（用70%酒精配制）对染2—5分钟。

若用%固绿对染，则仅需半分钟左右即可。

注意：此步染色，要不时地在显微镜下检视，切忌染色过深，当木质化细胞壁呈红色，其它部分为淡蓝或淡绿色时，即可停止。

（6）用95%酒精冲去多余染液，再经无水酒精脱水5分钟。

（7）放入等量无水酒精与二甲苯溶液中及纯二甲苯中透明各3分钟。

（8）将切片材料移入载玻片上，在二甲苯未干时立即加一滴中性树胶封片，尔后将玻片平放，自然凉干或置于摄氏35度温箱中烘干。

组织切片茜素红染色步骤

组织切片茜素红染色步骤
1、切片准备：首先，将组织切片切成适当厚度（通常为4-5微米），并将它们贴在载玻片上。

接着，将载玻片放入60°C 烤箱中烘烤大约30分钟，以便石蜡能够更好地附着到切片上。

2、去石蜡和水化：在水化过程中，切片会在二甲苯中经过两次处理，每次5分钟，以去除石蜡。

随后，通过一系列浓度递减的酒精（从100%开始，依次为95%、70%）进行水化处理，每步5分钟。

最后，用蒸馏水冲洗切片，以去除多余的染料。

3、染色：将切片浸入茜素红染色液中，染色时间为5-10分钟。

之后，用蒸馏水冲洗切片，以去除多余的染料。

4、对比染色：如果需要，可以将切片再浸入快速绿染色液中1-3分钟，然后用蒸馏水冲洗干净。

5、脱水、透明、封片：通过递增浓度的酒精系列进行脱水，即70%、95%、100%，每步5分钟。

使用二甲苯或其他透明剂透明处理切片，同样每步5分钟。

最后，用适当的封片剂封片。

6、显微镜下观察：在光学显微镜下观察切片，软骨和纤维素会被茜素红染成红色，而细胞核和其他组织则可能被染成绿色。

植物印染流程

植物印染流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!Download Tip: This document has been carefully written by the editor. I hope that after you download, they can help you solve practical problems. After downloading, the document can be customized and modified. Please adjust and use it according to actual needs. Thank you!植物印染流程：①采摘与准备：选择适合印染的植物，如洋葱皮、茶叶、石榴皮等，确保材料新鲜。

将植物材料清洗干净，根据需要切割或捣碎以提高色素释放。

②提取染液：将处理好的植物材料放入大锅中，加入足够的水，比例一般为1:10（植物材料:水），加入少量醋或碱性物质（如小苏打）可帮助提取颜色。

慢火煮沸后转小火慢炖1-2小时，期间可适当搅拌，直至水色变深。

③固色处理：提取的染液需过滤去除杂质，可选用明矾等天然固色剂，按比例加入染液中，搅拌均匀，有助于提升布料的着色牢固度。

④布料预处理：将待染的布料先用清水洗净，去除浆料和杂质，可选择浸泡在碱性溶液中（如加入小苏打的水）一段时间，有助于布料更好地吸收染料。

⑤染色：将预处理过的布料缓缓浸入染液中，保持低温慢煮或室温浸泡，时间根据所需颜色深浅调整，通常几小时到一整天不等，期间可翻动布料，确保染色均匀。

⑥冲洗与晾干：染色完成后，取出布料用清水冲洗，直至水清无色。

轻轻挤去多余水分，避免扭曲或搓揉，然后平铺或挂起自然晾干。

⑦后期处理：根据需要，对干燥的布料进行熨烫平整，完成整个植物印染过程。

植物组织石蜡切片的制备与染色观察

植物组织石蜡切片的制备与染色观察植物组织石蜡切片的制备与染色观察一．实验器具与试剂1.器具小培养皿、锡箔纸、尖头和平头镊子、剪刀、刀片、吸水纸、移液枪、1枪头、移液器和移液管、量筒（50，100，250，500）、废液瓶、水浴锅、酒精灯、三角瓶、真空锅、烘片箱、木筷、石蜡切片机、染色缸、载玻片、盖玻片、显微镜等2.试剂100%酒精、100%二甲苯、100%叔丁醇、石蜡块、蒸馏水、多聚甲醛、中性树胶、甲苯胺蓝（）染色剂等二. 实验步骤1.溶液配制10×溶液：（国药或生工）75.95g24.12H2O（国药）25.07g24.2H2O （国药） 4.68g充分溶解后，用（国药）调7.0，定容1000，高压灭菌25，4℃保存。

4%多聚甲醛固定液：1×1001 0.5水浴加热至60-70℃，在通风橱中加入4g多聚甲醛，待溶解后冷却至4℃，加入100μl的10%的浓硫酸调节为7.0。

2.材料准备⑴固定取幼嫩的植物材料，将植物组织剪成合适大小的小块，立即放入一个装有新配制的4%多聚甲醛固定液的小器皿中，固定液体积视材料多少而定，一般材料少时10材料较多时可放15，小器皿置于冰上。

上面用锡箔纸盖好后扎孔。

抽真空使得材料浸没其中（反复真空和非真空状态，并保固定液不要沸腾），待材料下沉到管底。

具体操作如下：①放置在冰上的器皿放入真空锅里，盖上锅盖，拧开盖上螺旋，拧紧侧面螺旋，打开开关当压力表上显示到0.2时可计时10分钟。

②关上锅盖螺旋，拧松侧面螺旋，外面空气会进入真空锅内，当内外压力相等时计时10分钟。

③再重复步骤①，换一次新的固定液，4℃过夜固定，但不要超过16h。

(2)漂洗用1×缓冲液（7.0）漂洗组织块2次，每次4℃放置30。

注意容易结晶可75℃水浴加热。

(3) 脱水在翻转下进行梯度乙醇和叔丁醇脱水：30%、40%、50%、60%、70%乙醇（此步可保存可过夜）、10%叔丁醇+20%水+70%乙醇、20%叔丁醇+10%水+70%乙醇、30%叔丁醇+70%乙醇、50%叔丁醇+50乙醇、70%叔丁醇+30%乙醇、90%叔丁醇+10%乙醇、100%叔丁醇（2次），30次。

植物组织(枝条、叶片、木材)切片处理和图像分析-YYM - 修改1

植物组织切片实验步骤一、野外采样枝条采样：选取冠层阳生枝条，一般长度约50cm，直径约1-2cm。

用高枝剪采集，做好采样记录和样品标记，装入黑色塑料袋内，带回实验室。

叶片采样：选取健康叶片进行采样。

根据试验需要，一般采集冠层阳生叶片。

做好采样记录和编号后，装入黑色塑料袋或自封袋，带回实验室。

二、植物叶片生理性状测定：叶片面积（Aleaf）测定：对于野外采回来的叶片,在叶面积仪(LI-3000A,LI-COR,Nebraska)上测定叶面积；叶片干重（Wleaf）：将干净,新鲜的叶片,放在70°C的烘箱中48小时，然后用电子天平测量叶片干重；比叶面积SLA（比叶重 LMA）：SLA=LA（叶面积）/DW（叶片干重）；叶片饱和重（Wleaf_saturated）：将叶片放在纯净水中，浸泡24h，从水中取出后，擦干叶片表面水分后立刻测定其饱和重；叶片相对含水量（SWCleaf）：=（叶片鲜重-叶片干重）/（叶片饱和重-叶片干重）；叶片元素含量测定（Lean Nutrients）：全碳、全氮：碳氮分析仪测定；全磷、全钾：HNO3-HClO4消解，HCl溶解，ICP-AES测定（LY/T 1270-1999）；叶片稳定性碳同位素（δ13C）：样品经研磨后过100目筛，准确称量4.000- 5.000mg样品用锡舟包裹放入EA自动进样盘，进行高温燃烧裂解生成CO2，生成的气体经二氧化碳吸附柱最终分离，并由载气He带入离子源离子化后进行检测，设置580秒时通入CO2气体（>99.999%)作为参考气体，持续30秒，通过参考气体与样品气体的检测对比，最终得到13C/12C 的比值。

反应温度：920℃和600℃；叶片长期内禀水分利用效率（iWUE）计算：叶片δ13C值是负的并且与细胞间与环境的时间比呈线性关系，与叶片内的长期水分利用效率（iWUE）正相关。

三、枝条生理性状测定：木材体积（Vwood）：用排水法测量木材体积；木材干重（Wdry）：将干净的剥皮的木材放在烘箱中７０°Ｃ72h，称取其重量；木材鲜重（Wwet）：将采集回来的材料，在电子天平上称量其鲜重；木材饱和重（Wsaturated）：将剥皮的干净的木材放在纯净水中浸泡48h，后用纸将表面的水擦干净后在电子天平中称量饱和重；木材相对含水量（SWCwood）：=木材饱和重-木材鲜重/木材饱和重-木材干重木材密度（Wood density）：=木材干重/木材体积皮厚度：用游标卡尺测量皮的厚度；髓芯大小（面积）：用游标卡尺测量髓芯的直径并计算其髓芯面积植物叶片解剖特征的测定：1.叶片组织石蜡切片制作（见附件一）；2.叶片组织厚度测定（附件二）：叶片厚度，栅栏组织，海绵组织，上下表皮，角质层3.叶片气孔特征：叶片气孔制片（印迹法-指甲油，徒手切片法）；气孔密度，气孔保卫细胞大小，气孔指数（气孔数量与表皮细胞个数的比值）；4.叶脉密度测定：透明叶制作方法；徒手切片法；叶脉密度计算。

植物组织切片染色步骤(修改)

常规H.E染色
1）浸入二甲苯中脱蜡两次，每次处理10-15分钟。

2）用100%乙醇处理两次，95%乙醇，70%乙醇，50%乙醇依次各一次，每次处理5分钟。

3）加入蒸馏水中处理5分钟，用蒸馏水润洗1次。

4）将玻片放入苏木精中染细胞核8-10分钟
5）自来水稍冲洗，浸入1%盐酸中处理5-10秒。

镜检观察分化适宜时最佳。

6）将玻片用流水冲洗30-60秒至玻片返蓝。

7）将玻片放入伊红中染细胞质5分钟。

8）将玻片用自来水稍冲洗一下，乙醇快速梯度脱水，50%乙醇，70%乙醇，95%乙醇，100%乙醇，100%乙醇，每次处理时间10秒。

9）将玻片在二甲苯中透明处理两次，每次5分钟。

10）滴加中性树脂封片，干燥，照相。

分化液配置：浓盐酸0.5 - 1ml
75%酒精99ml
此液用一段时间后需要延长或更换液体，新液分化时间要短。

机器最好用0.5%，手工用1%。

植物组织切片制作以及注意事项(精)

植物组织石蜡切片的制作以及注意事项1 植物组织石蜡切片的制作方法⑴固定:用50%或70% FAA固定液(50%或70%酒精:甲醛:冰乙酸=16:1:1; 幼嫩材料用50 % FAA;老的材料用70%的FAA,置于4℃固定24 h。

⑵脱水:将固定液倒去,加入50%乙醇,室温静置30 min;重复一次,室温静置20 min。

换成1%番红O溶液(用70%酒精配制,室温脱水染色过夜。

次日继续脱水,酒精浓度梯度和时间依次为:80% 乙醇1h、95% 乙醇1h、无水乙醇1h、40min(2次。

⑶透明:1/2无水乙醇+二甲苯混合液1h,纯二甲苯1h、40 min(2次。

最后加入少量二甲苯(浸没材料即可和碎蜡,放入38℃温箱中过夜。

⑷浸蜡:将温箱温度调至56℃,计时1h;换成二级蜡1h;三级蜡(3次各1h、1h、40min(从温度上升到56℃开始计时。

⑸包埋:将带有材料的液体蜡倒入叠好的纸槽中,迅速放入冰水中使蜡凝固,防止气泡产生,以及凝蜡不匀。

⑹切片:修整蜡块,用Lica RM2126切片机切片,厚度5-10 μm。

⑺贴片: 在载玻片上涂少许粘片剂,将切好的蜡带放入温水中,捞至载玻片上,最后置于37℃恒温箱过夜烤片。

⑻脱蜡及染色:①番红-固绿对染ⅰ脱蜡:二甲苯60min,二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、1%番红室温过夜。

ⅱ染色:80%乙醇5 min,1%固绿(用95%酒精配制迅速蘸一下,大约10s,直接放到95%乙醇5min 、无水乙醇5min、无水乙醇5min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5min、二甲苯5 min(2次。

②甲苯胺蓝染色ⅰ脱蜡:二甲苯60 min、二甲苯5 min、1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液5 min、无水乙醇5 min、无水乙醇5 min、95%乙醇5 min、80%乙醇5 min、70%乙醇5 min、50%乙醇5 min 、30%乙醇5 min、蒸馏水5 min。

组织切片染色步骤

组织切片染色步骤
组织切片染色的步骤通常包括以下几个阶段：
取材：从生物体中取出需要研究的组织结构。

固定：使用适当的固定液将组织固定，以保持其结构稳定。

脱水：通过不同浓度的乙醇溶液对组织进行逐级脱水。

透明：将脱水后的组织依次浸泡于二甲苯中，使其变得透明。

浸蜡：将透明的组织依次浸泡于石蜡中。

包埋：将液态的石蜡倒入模具盒中，再将浸好蜡的组织块放入，待石蜡凝固后修整蜡块。

切片：使用微切机将包埋后的组织切成薄片。

脱蜡：将切片通过脱蜡过程，使其恢复到水合状态。

染色：常用的染色方法有HE染色（苏木素-伊红染色法），以及其他特殊染色如Masson染色、PAS染色等。

在实际操作中，每一步都需要精确控制时间和温度，以确保染色效果的准确性和可重复性。

此外，不同的染色方法适用于不同的组织结构和研究目的，因此在选择染色方法时应根据实际需要来决定。

组织切片染色步骤

组织切片染色步骤全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：组织切片染色是生命科学研究中常用的一种技术手段，它可以让我们观察组织的结构和功能。

在进行组织切片染色的过程中，需要按照一定的步骤来进行操作，以确保获取到清晰、准确的结果。

一、制备组织样本在进行组织切片染色之前，首先要制备好组织样本。

通常需要从动植物的组织中取材，比如叶片、根茎、器官等。

在取材的过程中要保持组织的完整性，避免损伤。

取得样本后，可以进行固定处理，比如用福尔马林、乙酸乙酯等物质固定组织。

二、蜡块包埋将经过固定处理的组织样本放入蜡块中进行包埋。

蜡块包埋是为了固定组织的形状，方便进行切片。

在包埋的过程中，可以加入一些填充物质，比如纸片或者细碎木片，以保持样本的垂直方向。

三、切片包埋完成后，将组织样本切成薄片。

可以使用切片机或者手动切片刀进行切片操作。

切片的厚度通常在几微米到几十微米之间。

切片时要注意保持样本的完整性，避免切片时产生损伤。

四、脱脂切片完成后，可以进行脱脂处理。

脱脂是为了去除切片中的蜡质，使得染色液能够渗透到组织内部，使得染色效果更好。

脱脂可以用醚、醇等物质进行处理。

五、染色脱脂完成后，可以进行染色操作。

染色是组织切片染色的关键步骤，可以根据实验需要选择不同的染色方法。

比如可以用伊红染色、伊红-蓝染色、增强光亮伊红等方法进行染色，以观察组织结构和功能。

六、封片染色完成后，将切片放入载玻片上，并加入封片剂进行封片。

封片是为了保护切片，并避免染色液脱落。

封片完成后，可以在显微镜下观察切片，观察组织的结构和功能。

组织切片染色技术在生物学研究中起着重要的作用，通过对组织样本的切片和染色，可以揭示生物组织的结构与功能，为科学研究提供重要的依据。

希望以上介绍的组织切片染色步骤能够对您有所帮助。

第二篇示例：组织切片染色是一种常见的组织学技术，用于观察组织结构和细胞形态。

通过对组织切片进行染色，可以使细胞和组织结构更加清晰，便于进行形态学、病理学和实验室研究。

安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤

安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作
步骤
安徽高等院校植物细胞及组织切片标本制作步骤如下：
1. 材料准备：准备需要制作切片的植物样品，可以是根、茎、叶等组织，将其放入无菌蒸馏水中洗净，并使用无菌器具将样品切成适当大小的块状。

2. 固定样品：将植物样品放入固定液中，常用的固定液有缓冲福尔马林液、乙酸铅等。

固定液的选择应根据实验目的和样品的性质来确定。

固定时间根据样品的厚度和性质有所不同，一般为数小时至数天。

3. 组织脱水：将固定的样品从固定液中取出，用一系列的醇溶液逐步脱水，例如50%、70%、85%、95%和100%的乙醇浓度。

每个浓度的乙醇浸泡时间一般为几分钟至数小时，直到样品完全脱水。

4. 渗透剂处理：将脱水后的样品放入透明剂中，常用的透明剂有二甲苯、苯酚等。

透明剂的选择也要考虑样品的性质，渗透剂的浸泡时间一般为数小时至数天。

5. 浸渍和切片：将样品从透明剂中取出，放入浸蜡剂中，浸泡时间一般为数小时至数天，直到样品浸渍均匀。

然后，将浸渍后的样品放入专门的石蜡模具中，倒入石蜡进行固化，待石蜡固化后，用切片机将石蜡块切成薄片。

6. 制片染色：将切得的薄片放入脱脂苯中进行溶剂脱蜡，然后使用一系列的醇浓度逐步脱水。

最后，将薄片放入适当的染色剂中，如苏木精和伊红染剂进行染色。

7. 封片：将染色后的薄片放在载玻片上，涂上适当的封片剂，然后将另一片玻片压在上面，使其充分粘合。

8. 标本保存：将制作好的植物细胞及组织切片标本放入干燥、通风、阴凉的地方，避免阳光直射，可长时间保存。

这些步骤仅为大致参考，实际操作应根据具体情况和实验要求进行调整。

植物组织dab染色步骤

植物组织dab染色步骤嘿，咱今儿就来讲讲植物组织 DAB 染色的那些事儿！这可真是个有趣又有点小复杂的过程呢。

首先，咱得准备好咱的“战场”呀，把植物组织切得薄薄的，就像给它来个精心的“理发”。

这一步可得小心点，别把它弄破啦，不然可就前功尽弃咯！然后呢，就该把这切好的植物组织放进那神奇的 DAB 溶液里啦。

这就好像给植物组织洗了个特别的“澡”，让它好好地泡一泡，染上那漂亮的颜色。

在这个过程中啊，时间可得把握好，不能太短也不能太长，就跟做饭掌握火候似的。

太短了，颜色染不上去，太长了，又怕颜色太深变得怪怪的。

接着呀，等泡得差不多了，就得把植物组织捞出来啦。

这时候就得轻手轻脚的，可别把好不容易染上的颜色给弄花了。

捞出来之后，还得给它来个清洗，把多余的染液洗掉，就像给它冲个干净的“淋浴”。

清洗完了，可别急着结束哦。

还得把它放在合适的地方晾干，让它好好地展示一下自己染上的美丽颜色。

你说这像不像给植物组织来了一场华丽的变身呀？从原本普普通通的样子，经过这一系列的步骤，变得色彩斑斓，充满了神秘的气息。

想象一下，如果我们没做好这些步骤，那会怎么样呢？植物组织可能就染不上颜色，或者颜色乱七八糟的，那不就白折腾啦？所以呀，每一步都得认真对待，不能马虎。

而且哦，做这个实验的时候，可得有耐心，不能着急忙慌的。

就像绣花一样，得一针一线慢慢来。

要是着急了，说不定就会出岔子呢。

总之呢，植物组织 DAB 染色虽然有点麻烦，但只要咱认真细心，按照步骤一步一步来，肯定能得到让人满意的结果。

让我们一起动手，给植物组织来一场奇妙的染色之旅吧！这就是植物组织 DAB 染色的步骤啦，你学会了吗？。