分光光度计培训课件
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分光光度计及其操作ppt课件
0.575
光源
单色器 吸收池 接收器
以下分别介绍各部件
6
为了规范事业单位聘用关系，建立和 完善适 应社会 主义市 场经济 体制的 事业单 位工作 人员聘 用制度 ，保障 用人单 位和职 工的合 法权益
1. 光源 用6～12V白炽灯 作用：提供光强一定的复合光(白光) 性能要求: 亮度稳定(以使入射光通量强度 故需电源电压稳定, 一般用稳压器提供稳压。
误差越小。 4.分光光度法，其他条件一定，ε越大，测定的灵
敏度越高。 5.朗伯-比尔定律不仅使用于可见分光光度法,也使
用于紫外分光光度法。 6. 透光率T与吸光物质浓度成反比。
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为了规范事业单位聘用关系，建立和 完善适 应社会 主义市 场经济 体制的 事业单 位工作 人员聘 用制度 ，保障 用人单 位和职 工的合 法权益
721型分光光度计 应用
1. 测定组分浓度与含量: 依据A= -lgT= bc
2. 测定配合物的组成
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为了规范事业单位聘用关系，建立和 完善适 应社会 主义市 场经济 体制的 事业单 位工作 人员聘 用制度 ，保障 用人单 位和职 工的合 法权益
小结
1.熟练掌握分光光度计的基本组成 部件 2.了解分光光度计的基本组成部件的作用 3.明确参比溶液的作用
作业:P232-10.12 15
自测题 为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益 判断题 1.可见分光光度法所用参比溶液的作用是调A=0.00 2.可见分光光度法测定KMnO4时,应选紫色光为
入射光。 3.光度分析中,测定的吸光度越大,测定结果的相对
光源 参比
样品
紫外可见分光光度计的使用课件PPT
定义与工作原理
定义
紫外可见分光光度计是一种基于 物质对紫外可见光的吸收特性进 行物质定量和定性分析的仪器。
工作原理
通过测量物质在特定波长下的吸光 度，利用朗伯-比尔定律（A=εbc） 计算物质的浓度。
类型与特点
类型
单光束分光光度计、双光束分光光度 计和双波长分光光度计。
特点
具有较高的测量精度和稳定性，广泛 应用于化学、生物学、医学、环境监 测等领域。
每次使用后记录仪器使用 情况，包括测试样品、测 试波长、测试结果等，以 便后续分析。
常见故障排除
波长不准确
检查仪器是否正确设置波长，并 确保仪器没有受到强烈震动或磁
场干扰。
读数不稳定
检查样品是否均匀，仪器是否处于 稳定状态，以及是否有外界干扰。
仪器无响应
检查电源是否正常，仪器是否处于 正常工作状态，以及是否有硬件故 障。
THANKS
开始测量
点击开始按钮，仪器自动扫描并记录 数据。
数据处理
将测量数据导入计算机进行进一步处 理和分析。
实验操作技巧
保持样品池清洁
定期清洗样品池，避免残留物对测量结果的 影响。
选择合适的标准物质
选择与待测样品性质相近的标准物质进行校 准，提高测量准确性。
控制环境因素
确保实验室内温度、湿度和光照等环境因素 稳定，以减小误差。
多次测量求平均值
为减小误差，可以对同一样品进行多次测量， 取平均值作为最终结果。
常见问题及解决方案
波长校准不准确
可能是由于仪器内部棱镜或光路不干 净导致。解决方法是清洁仪器内部并 重新进行波长校准。
测量数据不稳定
数据处理软件崩溃
可能是由于计算机内存不足或软件 bug导致。解决方法是关闭不必要的 程序，释放计算机内存，或更新数据 处理软件。
分光光度计.ppt
等灯热平衡后，重新校正“0”和“1 00”然 后再测量。
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使 用时放置在坚固平稳的工作台上。 室内照明不宜太强。热天时不能用电 扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。 2、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构 和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未通电源 之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应 牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该 正确，然后再按通电源开关。
除此之外，还有光路故障、电路故障维修和其他故障。
光路故障
1．无单色光或光斑不完整
有2钨．灯钨光灯进亮入但单总色无器出，射无光出射单色光或光斑不均 匀 5钨器8、灯光0n亮路不m3，，完．处无首整光，论先。斑在如检把大出何查钨调单小光整色灯不孔光器光均处源进源匀放灯口调且一的狭到模纸位缝最糊置处卡，应亮散片总有，光以无 光波便出亮长观射进转察光入盘。，，打如放重开果在新单无色， 调 状可镜偏拆部整，调方右开件节向，光使单 ，光移可源 其色 发源动通灯 为灯，过器 现灯 黄位使调， 狭丝 色置光节拆缝位且使斑反下上光落射置光四下亮在镜，斑个不进准的同最入直位长平时完，镜置螺衡在整再的纠钉，纸。用中正分而白央再卡如且开纸稍检片不小入卡 下 查处 好片处出圆射观 ，随，口保及察 可着如狭护出光 松光太缝玻射斑偏处斑 开璃调向左是形 光开节准或否直太有 源光裂灯谱，带与一，底般太板高狭紧太缝固低部螺或件太丝宽左，0太使.3右m其，m前都且后不要能左求从右出上移口下动狭平，缝衡观处。射察通出使单过色 光光调斑，节调最狭节好缝准.直位镜置的、三更个换螺保钉，护使玻光璃斑，在仪58器0n恢m处复为正黄常色。且光斑
• 721型分光光度计是一种常用的分光光度计，具有取样少、 分析快、简便、准确、灵敏度高、干扰少、结构紧凑、应 用广泛且使用简便、价格低廉等优点。
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使 用时放置在坚固平稳的工作台上。 室内照明不宜太强。热天时不能用电 扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。 2、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构 和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未通电源 之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应 牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该 正确，然后再按通电源开关。
除此之外，还有光路故障、电路故障维修和其他故障。
光路故障
1．无单色光或光斑不完整
有2钨．灯钨光灯进亮入但单总色无器出，射无光出射单色光或光斑不均 匀 5钨器8、灯光0n亮路不m3，，完．处无首整光，论先。斑在如检把大出何查钨调单小光整色灯不孔光器光均处源进源匀放灯口调且一的狭到模纸位缝最糊置处卡，应亮散片总有，光以无 光波便出亮长观射进转察光入盘。，，打如放重开果在新单无色， 调 状可镜偏拆部整，调方右开件节向，光使单 ，光移可源 其色 发源动通灯 为灯，过器 现灯 黄位使调， 狭丝 色置光节拆缝位且使斑反下上光落射置光四下亮在镜，斑个不进准的同最入直位长平时完，镜置螺衡在整再的纠钉，纸。用中正分而白央再卡如且开纸稍检片不小入卡 下 查处 好片处出圆射观 ，随，口保及察 可着如狭护出光 松光太缝玻射斑偏处斑 开璃调向左是形 光开节准或否直太有 源光裂灯谱，带与一，底般太板高狭紧太缝固低部螺或件太丝宽左，0太使.3右m其，m前都且后不要能左求从右出上移口下动狭平，缝衡观处。射察通出使单过色 光光调斑，节调最狭节好缝准.直位镜置的、三更个换螺保钉，护使玻光璃斑，在仪58器0n恢m处复为正黄常色。且光斑
• 721型分光光度计是一种常用的分光光度计，具有取样少、 分析快、简便、准确、灵敏度高、干扰少、结构紧凑、应 用广泛且使用简便、价格低廉等优点。
分光光度计基本原理与结构ppt课件
• m λ= 2dsinθ
• 式中，d 是沟纹之间的距离，θ是光栅常数； m是干涉价数。当m=1时，为一阶谱； m=2时，为二阶谱。
• 光栅的分辨能力取决于它的mN值，N是光 栅上总沟纹数或总条数。条数多时，一阶 谱的分辨力高。与棱镜相比，光栅的分辨 能力更高些，并能用于所有谱段范围，光 栅的色散呈线性。
• ⊿E=hυ
• 这里，h为普朗克常数。此时，在微观上出 现分子由较低的能级跃迁到较高的能级， 在宏观上则表现为透射光的强度变小。若 用一连续辐射的电磁波照射分子，将照射 前后光强度的变化转变为电信号，并记录 下来，就可以得到一张光强度变化对波长 的关系曲线图——分子吸收光谱图。
• 紫外--可见区的分子吸收光谱一般是谱带较 宽的带状光谱，它是由于电子能级跃迁而 产生的光谱，因此又叫做电子光谱。
• 溶液颜色的深浅与浓度之间的关系可以用 吸收定律来描述。它是由朗伯定律和比尔 定律相结合而成的，所以叫朗伯-比尔定律。 原子吸收分光光度计也符合这个定律。
• 溶液对光的吸收 当一束强度为I的平行单 色光照到溶液时，一部分光被溶液吸收， 一部分光被界面散射，其余的光则透过溶 液，如图4-2所示
• 有：
• 实验证明，棱镜的色散具有非线性，即① 谱线弯曲；②不同波长区域色散效果不同， 红端色散差，紫端色散较好。虽然在实际 应用中的棱镜单色器与图示的不尽相同， 然而它们的工作原理是一样的。
• 2．光栅单色器
• 衍射光栅也可用作单色器。衍射光栅是由 一系列刻划在高光洁度反射表面上沟纹组 成的。沟纹排列异常密集，每英寸长度上 有15000或30000条。将光栅放在一平行光 束里，光栅的一面被照亮，这一面可看作 是块非常小的反射镜。
• 光栅的表面镀有铝膜，质地松软，极易擦 伤。所以在维护时严禁用任何擦拭物擦拭， 更不能用手去触摸，否则，会造成永久损 坏。也不准用嘴去吹光栅上的灰尘。光栅 万一脏了，可以用洗耳球吹去表面上的灰 尘。如不奏效，可以在光栅上均匀地涂上 一层粘胶棉〔俗称火棉胶〕液，等胶液干 了以后，将液膜轻轻揭下。此法可以将光 栅上的脏物去掉。现在有的光栅已镀有保 护膜。
• 式中，d 是沟纹之间的距离，θ是光栅常数； m是干涉价数。当m=1时，为一阶谱； m=2时，为二阶谱。
• 光栅的分辨能力取决于它的mN值，N是光 栅上总沟纹数或总条数。条数多时，一阶 谱的分辨力高。与棱镜相比，光栅的分辨 能力更高些，并能用于所有谱段范围，光 栅的色散呈线性。
• ⊿E=hυ
• 这里，h为普朗克常数。此时，在微观上出 现分子由较低的能级跃迁到较高的能级， 在宏观上则表现为透射光的强度变小。若 用一连续辐射的电磁波照射分子，将照射 前后光强度的变化转变为电信号，并记录 下来，就可以得到一张光强度变化对波长 的关系曲线图——分子吸收光谱图。
• 紫外--可见区的分子吸收光谱一般是谱带较 宽的带状光谱，它是由于电子能级跃迁而 产生的光谱，因此又叫做电子光谱。
• 溶液颜色的深浅与浓度之间的关系可以用 吸收定律来描述。它是由朗伯定律和比尔 定律相结合而成的，所以叫朗伯-比尔定律。 原子吸收分光光度计也符合这个定律。
• 溶液对光的吸收 当一束强度为I的平行单 色光照到溶液时，一部分光被溶液吸收， 一部分光被界面散射，其余的光则透过溶 液，如图4-2所示
• 有：
• 实验证明，棱镜的色散具有非线性，即① 谱线弯曲；②不同波长区域色散效果不同， 红端色散差，紫端色散较好。虽然在实际 应用中的棱镜单色器与图示的不尽相同， 然而它们的工作原理是一样的。
• 2．光栅单色器
• 衍射光栅也可用作单色器。衍射光栅是由 一系列刻划在高光洁度反射表面上沟纹组 成的。沟纹排列异常密集，每英寸长度上 有15000或30000条。将光栅放在一平行光 束里，光栅的一面被照亮，这一面可看作 是块非常小的反射镜。
• 光栅的表面镀有铝膜，质地松软，极易擦 伤。所以在维护时严禁用任何擦拭物擦拭， 更不能用手去触摸，否则，会造成永久损 坏。也不准用嘴去吹光栅上的灰尘。光栅 万一脏了，可以用洗耳球吹去表面上的灰 尘。如不奏效，可以在光栅上均匀地涂上 一层粘胶棉〔俗称火棉胶〕液，等胶液干 了以后，将液膜轻轻揭下。此法可以将光 栅上的脏物去掉。现在有的光栅已镀有保 护膜。
分光光度计课件
❖ 式中c为物质的量浓度(或质量浓度)，k2为与吸光物质种
类、溶剂、入射光波长、液层厚度和溶液温度有关的常数。 Beer定律仅适用于单色光。
如果同时考虑溶液浓度C 和液层厚度b对光吸收的影响，将 Lambert和Beer定律合并，用a取代k1和k2 两个常数则可以 推出
It=Io*10-k1b It=Io*10-k2c
（2）Beer定律： 说明吸收与溶液浓度间的关系
入射光
c1
I0
透射光 I1
C1 ＞ C2， I2 ＞ I1
入射光
透射光
C2
I0
I2
❖ Beer定律：当一适当波长的单色光通过溶液时，若液层厚 度一定，透射光的强度随着溶液浓度的增加而成指数函数
减少，即 It=Io*10-k2c
❖ 其吸光度与溶液浓度成正比。
❖ Lambert定律：当一适当波长的单色光通过一固 定浓度的溶液时，其透射光强度随液层厚度的增 加而成指数函数减少，即It=Io*10-k1b
❖ 其吸光度与光通过的液层厚度成正比。
❖ 式中b为液层厚度，k1为比例系数，它与被测物
质性质、入射光波长、溶剂、溶液浓度及温度有 关，Lambert定律对所有的均匀介质都是适用的。
❖ 光电管产生光电流的大小，与光强度和波长有关。 ❖ 光电管对弱光的灵敏度大，光照过强或长时间曝光灵敏
度显著下降，即“疲劳” 现象。 ❖ 温度对光电管的灵敏度有影响。
电子放大器 ❖ 读数单元
读数元件
注意事项
❖ 1、比色杯应相匹配性（对光的吸收和反射应一致），不得随意挪用。 ❖ 2、比色杯应持其侧壁的毛玻璃面。 ❖ 3、盛液时达到比色杯的3/4即可，不能太满，外壁如有液体，
It=Io.10-abc
类、溶剂、入射光波长、液层厚度和溶液温度有关的常数。 Beer定律仅适用于单色光。
如果同时考虑溶液浓度C 和液层厚度b对光吸收的影响，将 Lambert和Beer定律合并，用a取代k1和k2 两个常数则可以 推出
It=Io*10-k1b It=Io*10-k2c
（2）Beer定律： 说明吸收与溶液浓度间的关系
入射光
c1
I0
透射光 I1
C1 ＞ C2， I2 ＞ I1
入射光
透射光
C2
I0
I2
❖ Beer定律：当一适当波长的单色光通过溶液时，若液层厚 度一定，透射光的强度随着溶液浓度的增加而成指数函数
减少，即 It=Io*10-k2c
❖ 其吸光度与溶液浓度成正比。
❖ Lambert定律：当一适当波长的单色光通过一固 定浓度的溶液时，其透射光强度随液层厚度的增 加而成指数函数减少，即It=Io*10-k1b
❖ 其吸光度与光通过的液层厚度成正比。
❖ 式中b为液层厚度，k1为比例系数，它与被测物
质性质、入射光波长、溶剂、溶液浓度及温度有 关，Lambert定律对所有的均匀介质都是适用的。
❖ 光电管产生光电流的大小，与光强度和波长有关。 ❖ 光电管对弱光的灵敏度大，光照过强或长时间曝光灵敏
度显著下降，即“疲劳” 现象。 ❖ 温度对光电管的灵敏度有影响。
电子放大器 ❖ 读数单元
读数元件
注意事项
❖ 1、比色杯应相匹配性（对光的吸收和反射应一致），不得随意挪用。 ❖ 2、比色杯应持其侧壁的毛玻璃面。 ❖ 3、盛液时达到比色杯的3/4即可，不能太满，外壁如有液体，
It=Io.10-abc
超微量分光光度计ppt课件.ppt
仪器应用范围
K5500型微量分光光度计可用于测量： 核酸：核酸样品的浓度和纯度，包括双链DNA，单链
DNA和RNA。 蛋白质：①A280测蛋白质样品浓度，包括1Abs =
1mg/mL，BSA，IgG，Lysozyme；②试剂盒法 （Lowry法、BCA法、Bradford法）测定蛋白质浓度， 软件自动绘制标准曲线，直接给出浓度值。 常规紫外/可见全波长扫描：可进行紫外/可见全波长 （200～850nm）扫描。 细胞溶液：细胞溶液密度的测定。
样品需要稀释，测量浓 电磁阀调节)，样品无需稀释，测量
度范围小Βιβλιοθήκη 范围可达到常规分光光度计的50倍
与传统分光光度计的区别与优势
传统分光光度计
●灯源一般由氘灯（紫外） 和钨灯（可见）组成 寿命短 ●需要预热半个小时以上
K5500微量分光光度计
●氙气闪光灯为灯源 寿命长,性能稳定
●不需要预热，可随时检测
●显示吸光度值，不显示浓 度值
仪器特点
样品用量少（1～2µL）！ 无需比色皿！ 紫外-可见全波长扫描（200～850nm）！ 无需预热，可随时检测！ 检测速度快！ 直接显示浓度值！ 样品无需稀释，可测样品的浓度范围是常规紫外-
可见分光光度计的50倍！ 数据统计软件方便容易掌握！
与传统分光光度计的区别与优势
传统分光光度计
样品测量
（1） 以移液枪吸取样品（1～2µL）滴加到检测平台上。 （2 ）放下取样臂。 （3） 点击软件界面上的“Measure”按钮，即可得出样品参
数（吸光度和浓度）和图表。 （4 ）以干净的吸水纸擦去上下检测平台上的空白对照用溶
剂。
（5） 如需保存图表，可点击“Save Graph”按钮。
分光光度计培训课件共35页PPT资料
工作环境
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
1、该仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35 ℃ 。 2、该仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈震动或持 续震动。
3、室内照明不宜太强，且避免日光直射。 4、电风扇不宜直接吹向仪器，以免影响仪器的正常使用。 5、尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 6、供给仪器的电源为220V±10%，49.5-50Hz，并须装有良好的 接地线。宜使用100W以上的稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。 7、避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
5、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。
a 可见光区：光学玻璃池
b 紫外区：石英池
6、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流信号。
光电池，光电管，光电倍增管
7、指示器：
a 低档仪器：刻度显示
b 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作 台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防 止灯泡灯丝发亮不稳定。 2、为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光 路切断，以延长光电管的使用寿命。 3、取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰 比色皿的光学表面。 4、比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛 刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸 吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
722分光光度计
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
简介：该仪器适用于对可见光谱区域内物质的含量进行定 量分析，可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生 化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
分光光度分析法ppt课件
Fe2++3R[Fe(3R)]2+ （红橙色，max=510 nm） （注： Fe3++3R[Fe(3R)]3+ ，兰色，max=600 nm ）
用盐酸羟胺还原，再显色反应，则可以测得溶液中总 铁含量：
2Fe3++2NH2OH·HCl=2Fe2++N2+2H2O+2Cl-
精选ppt课件
29
三、实验步骤
H2O 稀至刻度
以试剂溶液作参比，在508 nm处，测定不同pH下的吸
光度，并且pH计测定相应溶液pH值，绘制A-pH曲线
，考察pH的影响。
精选ppt课件
32
5、标准溶液曲线的制作 按照书中方法配制0#~8#溶液，以0#为参比溶液，测
定1#~8#溶液的吸光度值，并且绘制A~c标准曲线。 6、未知样中总铁含量的测定 按照书中的方法配制9#溶液，测定其吸光度值，从标
精选ppt课件
27
分光光度法测定铁的含量
一、实验目的 1、了解分光光度法测铁的基本原理； 2、学习分光光度法中显色与测量条件的优化与选择； 3、学习标准曲线的绘制以及试样测定方法； 4、了解分光光度计的性能、结构及使用方法。
精选ppt课件
28
二、实验原理
A=bc
在一定实验条件下，A=kc，Ax值cx值。 pH3~9，Fe2+与Phen反应：
1、吸收曲线的制作
试样溶液：
1.00mL100mg/L 铁标
1.00mL10%盐酸羟胺
摇匀
50
2.00mL 0.15%邻二氮菲
5.00mL 1mol/L NaAC
H2O 稀至刻度
试剂溶液：不加铁标，其余同上配制。
《分光光度计培训》课件
准备待测的样品，确保样品适用于分光光度计测量。
2
2. 校准和基线
校准仪器并进行基线校正，确保准确的测量结果。
3
3. 光程、波长设置
设置适当的光程和测量波长，以获得准确的吸光度。
4
4. 测量和记录
将样品放入进样系统，测量吸光度并记录结果。
VI. 分光光度计的原理
分光光度计原理基于比较样品吸收的光线强度与参考样品或空白试验的光线强度的差异。这样可 以确定样品中特定物质的浓度。
VII. 分光光度计的应用领域
生物化学
用于测量酶活性、细胞浓度等。
环境科学
用于水质、大气等环境参数测量。
药学
用于药物配方和质量控制。
食品科学
用于食品成分和质量分析。
VIII. 分光光度计的精度和灵敏度
分光光度计具有高精度和灵敏度，可以测量微量物质的浓度和变化，从而在科学研究和质量控制 方面发挥重要作用。
II. 分光光度计的分类
紫外可见分光光度计
用于测量UV和可见光范 围内的吸光度。
红外分光光度计
用于测量红外光范围内 的吸光度。
紫外可见红外分光 光度计
同时覆盖紫外、可见和 红外光范围。
III. 常见的分光光度计
台式分光光度计
适用于实验室和教学环境，具有较高的精度和 灵敏度。
手持式分光光度计
便携、易于携带，适用于野外研究和快速测量。
《分光光度计培训》PPT 课件
这个PPT课件将向您介绍分光光度计的各个方面，包括原理、分类、工作原理 以及应用领域。让我们来一起探索这个精密仪器的世界。
I. 什么是分光光度计
分光光度计是一种用于测量物质溶液中吸光度的仪器。它可以通过分析样品对特定波长的光线的 吸收情况，来确定样品中特定物质的浓度。
分光光度计的使用课件
数据分析
根据实验数据，进行数据的整理、分析和处理。利用图表、统计软件等方法 ，对数据进行趋势分析、差异显著性检验等，以得出实验结果并进行结论。
03
分光光度计的实验数据分析
数据分析的基本原则
1 2
实验数据的完整性
要确保实验数据的完整性，避免数据缺失或遗 漏。
数据分析的可靠性
对实验数据进行可靠性的评估，以保证数据的 准确性和可信度。
在食品检测方面的应用
食品安全
01
分光光度计可以检测食品中的有害物质和添加剂，如甲醛、亚
硝酸盐、重金属等，保障食品安全。
营养成分分析
02
分光光度计可以检测食品中的营养成分，如蛋白质、脂肪、维
生素等，为营养学研究提供数据支持。
产地和真伪鉴别
03
通过检测食品中的特定元素或化合物，分光光度计可以鉴别食
品的产地、真伪和品种等。
用拟合方法将实验数据与理论公式相比较， 以获得更好的结果。
平滑处理可去除数据中的噪声，使数据更接 近真实值。
数据的分离
数据的归一化
将不同类型的数据进行分离，以更好地分析 各数据的特征。
将数据进行归一化处理，以便更好地比较各 数据的特征。
04
分光光度计的实验技术
标准曲线法
总结词
标准曲线法是一种通过对比已知浓度标准品与待测样品吸光度的差异，推算待测 样品浓度的定量方法。
对同一份样品进行 多次测量，并取平 均值，以减小误差 。
选择合适的测量波 长和带宽，以减少 误差。
选择合适的实验条件
了解样品的基本性质和特点，选择适合的测量条 件。
选择合适的溶剂和稀释比例，使样品的浓度在分 光光度计的线性范围内。
选择合适的测量时间，因为某些化学反应会随着 时间的推移而发生变化。
根据实验数据，进行数据的整理、分析和处理。利用图表、统计软件等方法 ，对数据进行趋势分析、差异显著性检验等，以得出实验结果并进行结论。
03
分光光度计的实验数据分析
数据分析的基本原则
1 2
实验数据的完整性
要确保实验数据的完整性，避免数据缺失或遗 漏。
数据分析的可靠性
对实验数据进行可靠性的评估，以保证数据的 准确性和可信度。
在食品检测方面的应用
食品安全
01
分光光度计可以检测食品中的有害物质和添加剂，如甲醛、亚
硝酸盐、重金属等，保障食品安全。
营养成分分析
02
分光光度计可以检测食品中的营养成分，如蛋白质、脂肪、维
生素等，为营养学研究提供数据支持。
产地和真伪鉴别
03
通过检测食品中的特定元素或化合物，分光光度计可以鉴别食
品的产地、真伪和品种等。
用拟合方法将实验数据与理论公式相比较， 以获得更好的结果。
平滑处理可去除数据中的噪声，使数据更接 近真实值。
数据的分离
数据的归一化
将不同类型的数据进行分离，以更好地分析 各数据的特征。
将数据进行归一化处理，以便更好地比较各 数据的特征。
04
分光光度计的实验技术
标准曲线法
总结词
标准曲线法是一种通过对比已知浓度标准品与待测样品吸光度的差异，推算待测 样品浓度的定量方法。
对同一份样品进行 多次测量，并取平 均值，以减小误差 。
选择合适的测量波 长和带宽，以减少 误差。
选择合适的实验条件
了解样品的基本性质和特点，选择适合的测量条 件。
选择合适的溶剂和稀释比例，使样品的浓度在分 光光度计的线性范围内。
选择合适的测量时间，因为某些化学反应会随着 时间的推移而发生变化。
分光光度计的使用课件
光的衍射
当光通过障碍物或狭缝时，光线会发生衍射现象。衍射现象会导致光线的方向发 生变化，形成类似于干涉的明暗相间的条纹。分光光度计中的衍射光栅利用光的 衍射原理来分离不同波长的光线。
光的偏振与极化
光的偏振
当光通过某些介质时，其电矢量会相对于传播方向以一定角 度振荡，导致光的偏振现象。偏振现象可用于分析物质的晶 体结构和光学性质。
分光光度计的使用课件
汇报人：
日期:
• 分光光度计基本原理 • 分光光度计基本构造 • 分光光度计使用方法 • 分光光度计实验技术 • 分光光度计应用实例 • 分光光度计维护保养与安全防护
01 分光光度计基本原理
光的吸收与散射
光的吸收
当光通过介质时，介质中的分子或原 子会吸收特定波长的光，导致光的强 度减弱。这种吸收现象可用于分析物 质中的特定成分。
药物代谢研究
通过测量药物在人体内的 吸收和代谢过程，可以研 究其动力学。
医学诊断
某些疾病可以通过测量人 体组织在特定波长下的透 射或反射光谱来进行诊断 。
06 分光光度计维护保养与安全防护
仪器维护与保养
01
02
03
04
仪器表面清洁
保持仪器表面清洁，避免使用 腐蚀性液体擦拭，以免对仪器
造成损害。
光学元件清洁
信号处理器
信号处理器是将检测器输出的电信号进行放大、处理和转换的装置，以便进行后续的数据处理和分析 。
03 分光光度计使用方法
样品制备与测量前的准备
01 02
样品制备
在开始测量之前，需要将待测样品进行适当处理，以适应分光光度计的 测量需求。例如，对于液体样品，可能需要摇匀、稀释或过滤以消除误 差。
误差来源 1. 比色皿不干净，导致吸光度测量值不准确。
当光通过障碍物或狭缝时，光线会发生衍射现象。衍射现象会导致光线的方向发 生变化，形成类似于干涉的明暗相间的条纹。分光光度计中的衍射光栅利用光的 衍射原理来分离不同波长的光线。
光的偏振与极化
光的偏振
当光通过某些介质时，其电矢量会相对于传播方向以一定角 度振荡，导致光的偏振现象。偏振现象可用于分析物质的晶 体结构和光学性质。
分光光度计的使用课件
汇报人：
日期:
• 分光光度计基本原理 • 分光光度计基本构造 • 分光光度计使用方法 • 分光光度计实验技术 • 分光光度计应用实例 • 分光光度计维护保养与安全防护
01 分光光度计基本原理
光的吸收与散射
光的吸收
当光通过介质时，介质中的分子或原 子会吸收特定波长的光，导致光的强 度减弱。这种吸收现象可用于分析物 质中的特定成分。
药物代谢研究
通过测量药物在人体内的 吸收和代谢过程，可以研 究其动力学。
医学诊断
某些疾病可以通过测量人 体组织在特定波长下的透 射或反射光谱来进行诊断 。
06 分光光度计维护保养与安全防护
仪器维护与保养
01
02
03
04
仪器表面清洁
保持仪器表面清洁，避免使用 腐蚀性液体擦拭，以免对仪器
造成损害。
光学元件清洁
信号处理器
信号处理器是将检测器输出的电信号进行放大、处理和转换的装置，以便进行后续的数据处理和分析 。
03 分光光度计使用方法
样品制备与测量前的准备
01 02
样品制备
在开始测量之前，需要将待测样品进行适当处理，以适应分光光度计的 测量需求。例如，对于液体样品，可能需要摇匀、稀释或过滤以消除误 差。
误差来源 1. 比色皿不干净，导致吸光度测量值不准确。
分光光度计培训课件共35页
722分光光度计
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
简介：该仪器适用于对可见光谱区域内物质的含量进行定 量分析，可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生 化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
用途：在近紫外和可见光谱区域内对样品物质作定性和定 量的分析，是理化实验室常用分析仪器之一。
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作 台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防 止灯泡灯丝发亮不稳定。 2、为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光 路切断，以延长光电管的使用寿命。 3、取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰 比色皿的光学表面。 4、比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛 刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸 吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
5、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。
a 可见光区：光学玻璃池
b 紫外区：石英池
6、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流信号。光电池，ຫໍສະໝຸດ 电管，光电倍增管 7、指示器：
a 低档仪器：刻度显示
b 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
722型分光光度计结构方框图
光 分光 源 系统
吸收池
检测系统
本页仅供参考，具体需详细查阅相应仪器说明书
分光光度计的主要部件
1、光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度。 a 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) b 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 2、单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 3、棱镜:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm。 4、光栅:波长范围宽,色散均匀,分辨性能好,使用方便。
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分光光度计培训课件
目录
A
B
722分光光度计
C
仪器故障及解决
D
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
简介
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长 范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下， 产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的， 各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光 通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度 和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比 耳定律。
722型分光光度计的使用操作方法
5、调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比 色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻 轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。
6、吸光度的测定 将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处， 用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，将选择开关置于“A”，盖上试 样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显 示为“0.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它 格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路， 此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室 盖，切断光路。
主要技术性能及规格：
1、光学系统：单光束、衍射光 栅。 2、波长范围：330~800nm.。 3、光源：钨卤素灯12V30W。 4、接收元件：端窗式G1030光电 管。 5、波长精度：±2nm。 6、波长重现性：0.5nm。 7、光谱带宽：6nm。 8、杂散光：1%（T）（在360nm 处）。
9、透过率测量范围：0-100% （T）。 10、吸光度测量范围：0-1.999 （A）。 11、浓度直读范围：0-2000。 12、光度精度：
722型分光光度计的使用操作方法
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值 （吸光度值尽可能在0.2-0.8之间）。
7、浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品 放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放 入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
a 透过率线性精度±0.5% （T）。
b 吸光度精度±0.004A(在0.5A 处)。 13、透过率重现性：0.5%（T）。
722型分光光度计结构方框图
光 分光 源 系统
吸收池
检测系统
分光光度计的主要部件
1、光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度。 a 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) b 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm)
722分光光度计
简介：该仪器适用于对可见光谱区域内物质的含量进行定 量分析，可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生 化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
用途：在近紫外和可见光谱区域内对样品物质作定性和定 量的分析，是理化实验室常用分析仪器之一。
工作环境
1、该仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35 ℃ 。 2、该仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈震动或持 续震动。 3、室内照明不宜太强，且避免日光直射。 4、电风扇不宜直接吹向仪器，以免影响仪器的正常使用。 5、尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 6、供给仪器的电源为220V±10%，49.5-50Hz，并须装有良好的 接地线。宜使用100W以上的稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。 7、避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。
分类-按波长
1、可见光分光光度计：测定波长范围为400～760nm的可见光区； 2、紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区； 3、红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区； 4、荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光 谱； 5、原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经 过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定 特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
8、关机 比色完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比 色皿座架用用软布或软纸擦净。
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作 台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防 止灯泡灯丝发亮不稳定。
2、为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光 路切断，以延长光电管的使用寿命。
2、单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 3、棱镜:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm。 4、光栅:波长范围宽,色散均匀,分辨性能好,使用方便。
5、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 a 可见光区：光学玻璃池 b 紫外区：石英池
6、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流信号。 光电池，光电管，光电倍增管
3、取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰 比色皿的光学表面。
4、比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛 刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸 吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
注意事项
5、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原 理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的 安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋 钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。
7、指示器： a 低档仪器：刻度显示 b 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
722型分光光度计的使用操作方法
1、预热仪器 打开电源开关，使仪器预热30分钟（为了防止 光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖 打开，使光路切断）。
2、选定波长 转动波长手轮，调至所需要的单色波长。 3、固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下， 尽可能采用灵敏度较低的档，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不 够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。 选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。 4、调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”，（此 时试样室是打开的）。
目录
A
B
722分光光度计
C
仪器故障及解决
D
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
简介
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长 范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。
分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下， 产生了对光吸收的效应，物质对光的吸收是具有选择性的， 各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱，因此当某单色光 通过溶液时，其能量就会被吸收而减弱，光能量减弱的程度 和物质的浓度有一定的比例关系，也即符合于比色原理---比 耳定律。
722型分光光度计的使用操作方法
5、调节T=100% 将盛蒸馏水（或空白溶液，或纯溶剂）的比 色皿放入比色皿座架中的第一格内，并对准光路，把试样室盖子轻 轻盖上，调节透过率“100%”旋钮，使数字显示正好为“100.0”。
6、吸光度的测定 将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处， 用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，将选择开关置于“A”，盖上试 样室盖子，将空白液置于光路中，调节吸光度调节旋钮，使数字显 示为“0.000”。将盛有待测溶液的比色皿放入比色皿座架中的其它 格内，盖上试样室盖，轻轻拉动试样架拉手，使待测溶液进入光路， 此时数字显示值即为该待测溶液的吸光度值。读数后，打开试样室 盖，切断光路。
主要技术性能及规格：
1、光学系统：单光束、衍射光 栅。 2、波长范围：330~800nm.。 3、光源：钨卤素灯12V30W。 4、接收元件：端窗式G1030光电 管。 5、波长精度：±2nm。 6、波长重现性：0.5nm。 7、光谱带宽：6nm。 8、杂散光：1%（T）（在360nm 处）。
9、透过率测量范围：0-100% （T）。 10、吸光度测量范围：0-1.999 （A）。 11、浓度直读范围：0-2000。 12、光度精度：
722型分光光度计的使用操作方法
重复上述测定操作1-2次，读取相应的吸光度值，取平均值 （吸光度值尽可能在0.2-0.8之间）。
7、浓度的测定 选择开关由“A”旋置“C”，将已标定浓度的样品 放入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示为标定值，将被测样品放 入光路，此时数字显示值即为该待测溶液的浓度值。
a 透过率线性精度±0.5% （T）。
b 吸光度精度±0.004A(在0.5A 处)。 13、透过率重现性：0.5%（T）。
722型分光光度计结构方框图
光 分光 源 系统
吸收池
检测系统
分光光度计的主要部件
1、光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度。 a 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) b 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm)
722分光光度计
简介：该仪器适用于对可见光谱区域内物质的含量进行定 量分析，可广泛应用于工厂、学校、冶金、农业、食品、生 化、环保、石油化工、医疗卫生等单位的基础实验室。
用途：在近紫外和可见光谱区域内对样品物质作定性和定 量的分析，是理化实验室常用分析仪器之一。
工作环境
1、该仪器应安放在干燥的房间内，使用温度为5℃~35 ℃ 。 2、该仪器应放置在坚固平稳的工作台上，且避免强烈震动或持 续震动。 3、室内照明不宜太强，且避免日光直射。 4、电风扇不宜直接吹向仪器，以免影响仪器的正常使用。 5、尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。 6、供给仪器的电源为220V±10%，49.5-50Hz，并须装有良好的 接地线。宜使用100W以上的稳压器，以加强仪器的抗干扰性能。 7、避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。
分类-按波长
1、可见光分光光度计：测定波长范围为400～760nm的可见光区； 2、紫外分光光度计：测定波长范围为200～400nm的紫外光区； 3、红外分光光度计：测定波长范围为大于760nm的红外光区； 4、荧光分光光度计：用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光 谱； 5、原子吸收分光光度计：光源发出被测的特征光谱辐射，被经 过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收，通过测定 特征辐射被吸收的大小，来求出被测元素的含量。
8、关机 比色完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比 色皿座架用用软布或软纸擦净。
注意事项
1、该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作 台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防 止灯泡灯丝发亮不稳定。
2、为了防止光电管疲劳，不测定时必须将试样室盖打开，使光 路切断，以延长光电管的使用寿命。
2、单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 3、棱镜:玻璃350～3200nm,石英185～4000nm。 4、光栅:波长范围宽,色散均匀,分辨性能好,使用方便。
5、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 a 可见光区：光学玻璃池 b 紫外区：石英池
6、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流信号。 光电池，光电管，光电倍增管
3、取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰 比色皿的光学表面。
4、比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛 刷清洗。比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸 吸干，不要擦拭，以免损伤它的光学表面。
注意事项
5、使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原 理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的 安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋 钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。
7、指示器： a 低档仪器：刻度显示 b 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录
722型分光光度计的使用操作方法
1、预热仪器 打开电源开关，使仪器预热30分钟（为了防止 光电管疲劳，不要连续光照，预热仪器时和不测定时应将试样室盖 打开，使光路切断）。
2、选定波长 转动波长手轮，调至所需要的单色波长。 3、固定灵敏度档 在能使空白溶液很好地调到“100%”的情况下， 尽可能采用灵敏度较低的档，使用时，首先调到“1”挡，灵敏度不 够时再逐渐升高。但换挡改变灵敏度后，须重新校正“0%”和“100%”。 选好的灵敏度，实验过程中不要再变动。 4、调节T=0% 轻轻旋动“0%”旋钮，使数字显示为“00.0”，（此 时试样室是打开的）。