碧云天谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒
碧云天生物技术过氧化氢酶检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号过氧化氢酶检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0051过氧化氢酶检测试剂盒100次产品简介：过氧化氢酶检测试剂盒(Catalase Assay Kit)是一种简单易行的通过显色反应来检测细胞、组织或其它样品中过氧化氢酶(Catalase)活性的试剂盒。
在过氧化氢相对比较充足的情况下，过氧化氢酶可以催化过氧化氢产生水和氧气。
残余的过氧化氢在过氧化物酶(Peroxidase)的催化下可以氧化生色底物，产生红色的产物(N-(4-antipyryl)-3-chloro-5-sulfonate-p- benzoquinonemonoimine)，最大吸收波长为520nm 。
用过氧化氢标准品，制作标准曲线，这样就可以计算出样品中的过氧化氢酶在单位时间单位体积内催化了多少量的过氧化氢转变为水和氧气，从而可以计算出样品中过氧化氢酶的酶活力。
过氧化氢酶分布非常广泛。
在肝脏、肾脏和红细胞中，过氧化氢酶的水平非常高，是清除能导致氧化损伤的过氧化氢的主要场所。
过氧化氢酶的活性也可以用紫外分光光度计测定A 240，但蛋白质或其它组份在A 240附近都有比较强的吸收，会对测定产生严重干扰。
因此，用紫外法测定过氧化氢酶的活性，比较适合纯化的过氧化氢酶。
本试剂盒通过检测A 520来测定过氧化物酶催化下由过氧化氢氧化生色底物产生的红色产物，受干扰的因素小，检测灵敏度高，可以检测出低达1U/ml 的过氧化氢酶。
本试剂盒可以检测全血、红细胞裂解产物、血清、组织匀浆产物、细胞裂解产物等生物样品中的过氧化氢酶的活性。
一个试剂盒共可以进行100次检测。
包装清单：产品编号 产品名称包装 S0051-1 过氧化氢酶检测缓冲液 60ml S0051-2 过氧化氢 (约1M) 5ml S0051-3 过氧化氢酶反应终止液50ml S0051-4 显色底物 20ml S0051-5 过氧化物酶 20µl —说明书1份保存条件：-20ºC 保存，一年有效。
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)检测试剂盒(比色法)
离心 10min，取上清用于酶活性的测定。
GSH 工作液的配制：用 GSH 配制夜：GSH 储存液(100μ mol/L)=99:1 的比例稀释至 1mmol/L，即为 GSH 工作液(1mmol/L)，该溶液配制好以后可 4℃保存 1 天。
2、 GSH-Px 酶促反应: 可参考下表设置检测反应体系，依次加入试剂：
30.8mg 200ml 125ml 30ml 100ml 说明书
Storage
RT -20℃ RT RT -20℃ 避光 -20℃ 避光
操作步骤(仅供参考)：
1、 样本处理： ① 血清、血浆样本：从待测样本中分理出的血清或血浆丌应有溶血，如果含有应去除红细
胞后，直接检测，如超过检测范围，用生理盐水稀释后检测。血清去除红细胞的简易方 法如下：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少 500μl 全血。弃上清，用冰冷的红细 胞沉淀 10 倍体积的样品匀浆液重悬沉淀，再同前离心，弃上清。加入约红细胞沉淀 4 倍体积的冰冷的 ddH2O 裂解红细胞。取上清。亦可采用红细胞裂解液去除红细胞，如 Leagene ACK 红细胞裂解液等。 ②组织样本：动物用含有 20U/ml heparin 的生理盐水(0.9% NaCl containing 20U/ml heparin)灌流清除血液后获取组织样品。按照每 20mg 组织加入 200μl 样品匀浆液的比例，
计算：
谷胱甘肽过氧化物酶酶活力单位的定义：1 个酶活力单位(1unit)是指在 37℃， 每 1L 血清，排除非酶促反应，1min 内可以催化 1μmol/L GSH 氧化所需(减少)的酶量为一个 GSH-Px 活性单位。
GSH-Px(U/L)= (A 本底－A 测定－A 空白)/(A 本底－A 空白)×200
S0109 总SOD活性检测试剂盒_NBT法_
液。配制好的反应启动工作液4℃或冰浴保存，可以在当天使用，但建议尽量现配现用。
c. (可选做)SOD标准品准备：需自备SOD标准品，用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度：
200U/ml，100U/ml，50U/ml，20U/ml，10U/ml，5U/ml，2U/ml。在随后的检测中可以各取20微升，参考样品进行检
中，适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a细胞样品的制备方法，或其它不含
Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
d. 上述样品准备完毕后可以用碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)测定蛋
超氧化物岐化酶活性水平。本试剂盒的检测原理图如下:
基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和NBT的SOD酶活力检测原理图。XO：xanthine oxidase。 本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试
剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标 准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。 本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进 行100次检测。
测。说明：为避免稀释后SOD酶活性的下降， SOD标准品宜现稀释现使用；本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作
为标准品，但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
3. 样品测定：
a. 参考下表使用96孔板设置样品孔和各种空白对照孔。并按下表依次加入待测样品和其它各种溶液。加入反应启动工作
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB 比色法)说明书
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒自备材料：1、匀浆器或研钵、离心管或小试管、低温离心机、水浴锅2、蒸馏水、PBS或生理盐水、70%乙醇3、分光光度计、比色皿操作步骤(仅供参考)：1、配制GSSG标准储存液：取12.5mgGSSG标准加入2mlddH2O，溶解并混匀，即为GSSG 标准储存液(10mM)。
一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
2、配制GSH清除剂工作液：在1mlGSH清除剂中加入9ml70%乙醇，溶解并混匀，即为GSH 清除剂工作液。
3、配制NADPH工作液：在33.2mgNADPH中加入4mlddH2O，即成NADPH工作液，一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
4、配制DTNB储存液：在79.2mgDTNB中加入16mlDMSO，溶解并混匀，即为DTNB储存液(12.5mM)。
一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
5、配制GR工作液：按GR：GSSGassaybuffer=1:49的比例混合，即为GR工作液。
-20℃保存，1个月有效。
注意：试剂(I)量较少，使用前应先4℃离心后再使用。
6、配制标准品：把GSSG标准储存液(10mM)用蛋白清除试剂稀释成50μM标准溶液，然后依次稀释成25、12.5、6.25、3.125μMGSSH标准溶液，取空白、3.125、6.25、12.5、25、50μMGSSG标准溶液6个点作标准曲线。
注意：由于GSSG标准在蛋白清除试剂中不太稳定，用蛋白清除试剂配制的GSSG溶液必须新鲜配制后使用，不可冻存后再使用。
7、准备样品：①红细胞或血浆样品：取新鲜血液，600r/min离心10min，沉淀为红细胞，上清为血浆。
对于红细胞，用PBS洗涤两次，取约50μl红细胞沉淀或血浆，加入50μl蛋白清除试剂，充分Vortex振匀。
4℃或冰浴放置10min，4℃10000r/min离心10min，取上清，用于GSSG测定，样品需暂时4℃保存备用，不立即测定的样品可以-70℃保存，但不宜超过10天。
碧云天(beyotime)生物产品代理目录价格表(2015年)
生物素3' 末端DNA标记试剂盒 生物素随机引物DNA标记试剂盒 D3308 化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒 D3308B 封闭液(D3308专用) D3308W 洗涤液(5X，D3308专用)
产品名称
内切酶 产品编号 D6049 D6053 D6093 D6257 D6329 D6330 D6337 D6389 D6390 D6417 D6449 D6481 D6485 D6489 D6497 D6565 D6566 D6581 D6585 D6593 D6597 D6633 D6713 D6721 修饰酶 产品编号 D7012 D7021 D7027 D7035 D7039 D7051 D7062 D7066 D7069 D7073
1000U DNase I 100U RNase H Terminal Deoxynucleotidyl Transferase 500U 100U T4 Polynucleotide Kinase 500U T4 Polynucleotide Kinase 2000U BeyoRT M-MuLV反转录酶 2000U BeyoRT M-MuLV反转录酶(RNase H-) 产品名称 产品包装 2000U
ApaI BamHI BglII DpnI EcoRI EcoRI EcoRV HindIII HindIII KpnI MluI NcoI NdeI NheI NotI PstI PstI PvuII RsaI SacI SalI SmaI XbaI XhoI
产品名称
DNA末端平滑试剂盒 T4 RNA Ligase BeyoAP Alkaline Phosphatase Klenow Fragment Klenow Fragment，ExoT4 DNA Polymerase SP6 RNA Polymerase T3 RNA Polymerase T7 RNA Polymerase DNase I
过氧化物酶(Peroxidase,POD)试剂盒使用说明
3、细菌或细胞 POD 活性
（1）按样本蛋 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活 力单位。
POD（U/mg prot）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样 本体积（5μL）÷0.01×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）=4900×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）
2、组织 POD 活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个酶 活力单位。
POD（U/mg prot）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样 本体积（5μL）÷0.005×ΔA 测定÷蛋白质浓度（mg/mL）=9800×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）
用 96 孔板测定的计算公式如下
1、血清（浆）POD 活性
单位的定义：每 mL 血清（浆）在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个 酶活力单位。
POD（U/mL）＝245μL（反应体系）÷1000μL×血清（浆）总体积（1000μL）÷样本 体积（5μL）÷0.005×ΔA =9800×ΔA
（2）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一 个酶活力单位。
POD（U/104 cell）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样 本体积（5μL）÷0.01×ΔA÷细菌或细胞密度（104 cell /mL）=4900×ΔA÷细菌或细胞密 度（104 cell /mL）
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织在每 ml 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活力单 位。
碧云天生物技术 Human Angiogenin ELISA Kit PA023说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************碧云天网站微信公众号网址：Human Angiogenin ELISA Kit产品编号产品名称包装PA023 Human Angiogenin ELISA Kit 96次产品简介：碧云天的Human Angiogenin ELISA Kit (Human Angiogenin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人血管生成素酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Angiogenin的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。
多次重复检测结果表明，最小检出量为4.75pg/ml，与EGF、GM-CSF、MIP-1α、MIP-1β、TGF-α、TGF-β1，小鼠 EGF、GM-CSF、MIP-1α等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
人血管生成素(Angiogenin, ANG)是一种分子量为14kDa的单链非糖基化蛋白，属于核糖核酸酶中RISBASE家族。
该家族成员不仅具有核糖核酸酶活性，还具有一些特殊的生物学功能。
ANG氨基酸长度为123，包括3个链内二硫键。
人ANG与小鼠ANG具有75%的氨基酸同源性，且具有一定的种间交叉反应。
能够表达ANG的细胞主要有血管内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞、结肠柱状上皮细胞、淋巴细胞和部分肿瘤细胞。
ANG主要参与血管的形成过程。
基底膜的降解是血管新生过程中内皮细胞发生迁移的先决条件。
ANG首先与肌动蛋白结合，随后肌动蛋白-ANG复合物发生裂解，激活组织血纤维蛋白溶酶原。
这一过程产生的血纤维蛋白溶酶会降解基底膜中的层粘连蛋白和纤连蛋白。
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法)
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法) 简介：谷胱甘肽(glutathione，GSH)存在于几乎身体的每一个细胞，参与细胞许多功能活动，是一种氧自由基消除剂。
谷胱甘肽能帮助保持正常的免疫系统的功能，保护组织细胞免受氧化损伤，并具有抗氧化作用和整合解毒作用，半胱氨酸上的巯基为其活性基团，故常简写为G-SH或GSH，易与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、碘乙酸、铅、汞、砷等)等结合，具有整合解毒作用。
谷胱甘肽具有广谱解毒作用，在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用。
谷胱甘肽是研究活性氧和自由基的重要指标，亦是机体氧化物牵累的重要指标。
还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG)，其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率比色法)(GSSG Assay Kit)是一种简单易行的氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测的试剂盒，其检测原理是先检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量，再检测总谷胱甘肽(T-GSH)含量T-GSH减去GSH即得氧化型谷胱甘肽(GSSG)：待测样品中的还原型谷胱甘肽(GSH)与发色底物DTNB反应，产生稳定黄色的TNB和GSSG；谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH)，由GSSG还原成的GSH和样品本身含有的GSH都与发色底物DTNB反应，生成黄色的TNB和GSSG，前后两个反应合并起来，总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个呈色的限速反应，总谷胱甘肽(T-GSH)含量决定了黄色含量。
通过分光光度法(酶标仪)检测410nm处吸光度，与相应处理的GSH标准比较，分别获得还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽(T-GSH)，用T-GSH 减去GSH即得氧化型谷胱甘肽(GSSG)。
该试剂盒可用于检测血浆、血清、组织、细胞等样品中氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量，亦可检测还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽(T-GSH)含量。
S0051-过氧化氢酶检测试剂盒说明书(碧云天)
3. He Z, Yu S, Mei G, Zheng M, Wang M, Dai Y, Tang B, Li N. Maternally transmitted milk containing recombinant human catalase provides protection against oxidation for mouse offspring during lactation. Free Radic Biol Med. 2008 Oct 15;45(8):1135-42.
A520 (空白对照－样品)
Blank
－
－
－
1.17 (空白对照实测值)
Human red blood cell lysate
0.2mg/ml
4μl
2min
0.46
Rat liver lysate
0.3mg/ml
7.5μl
1min
0.57
Rat kidney lysate
0.3mg/ml
7.5μl
3min
2. 样品的准备：
用适当的裂解液裂解细胞或组织(可以使用碧云天生产的Western及IP细胞裂解液(P0013)进行裂解)。用本试剂盒提供的过
氧化氢酶检测缓冲液稀释样品，裂解好的样品至少加入等体积的过氧化氢酶检测缓冲液进行稀释。具体的稀释倍数可
谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)试剂盒使用说明
谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)试剂盒使用说明微量法注意：正是测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1195规格：100管/96样产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1支，-20℃保存。
混合试剂配制：临用前，在试剂二中加入试剂一20mL，充分震荡溶解后加入全部试剂三，混匀。
（注意：必须现配现用，当天使用完）试剂四：液体×1瓶，4℃保存。
产品说明：GSH-Px是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽（GSH）氧化的主要酶之一。
GSH-Px不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与ROS反应，生成氧化型谷胱甘肽GSSG，从而保护生物膜免受ROS的损害，维持细胞的正常功能；而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。
GSH-Px催化H2O2氧化GSH，产生GSSG；谷胱甘肽还原酶（GR）催化NADPH还原GSSG，再生GSH，同时NADPH氧化生成NADP+；NADPH在340nm有特征吸收峰，而NADP+没有；通过测定340nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。
自备仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：1.组织：按照组织质量（g）:试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。
10000rpm，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量104个：试剂一体积（ml）500~1000:1的比例,建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（率300w，超声3s，间隔7s，总时间3min）然后10000rpm，4℃，离心10min，取上清置冰上待测。
碧云天生物技术Beyotime Biotechnology产品说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号BeyoECL Moon (极超敏ECL 化学发光试剂盒)产品编号 产品名称包装 P0018FS BeyoECL Moon (极超敏ECL 化学发光试剂盒) 100ml P0018FMBeyoECL Moon (极超敏ECL 化学发光试剂盒)500ml产品简介：碧云天生产的Western 萤光检测试剂BeyoECL Moon 是一种极超敏的以luminol 为基础的ECL 化学发光试剂盒，发光效果显著优于BeyoECL Star ，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X 光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
碧云天生产的Western 萤光检测试剂目前共有三种，分别是P0018S/P0018M BeyoECL Plus 、P0018AS/P0018AM BeyoECL Star 和P0018FS/P0018FM BeyoECL Moon 。
常规的Western 检测，优先推荐使用BeyoECL Star 。
对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的BeyoECL Plus 。
对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用检测灵敏度最高的BeyoECL Moon 。
但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BeyoECL Moon ，因为使用BeyoECL Moon 时由于检测灵敏度特别高，容易产生过曝的现象。
BeyoECL Moon 灵敏度极高，Western blot 检测效果与Thermo 公司SuperSignal West Dura 相当或略佳(参考图1)，化学发光效果在1小时内显著优于Thermo 公司的SuperSignal West Dura ，30分钟内发光效果可达SuperSignal West Dura 的约1.8-3.6倍，BeyoECL Star 的4.2-6.9倍(参考图2)。
碧云天BeyoFast Probe qPCR Mix (2X, Low ROX)说明书
BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX)产品编号产品名称包装 D7272-1ml BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX) 1ml D7272-5mlBeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX) 5ml D7272-25ml BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX)25ml产品简介：碧云天的BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX)是一种基于TaqMan等探针的用于实时荧光定量PCR，即探针法qPCR(Quantitative PCR)或real-time PCR的高品质预混液，主要用于cDNA和基因组DNA等的特异性超高灵敏度定量检测。
由于使用的探针一般是TaqMan探针，所以本方法也常称作TaqMan探针法。
本产品特别适合用于低丰度或高特异性的目的基因的定量或定性检测。
例如一些低丰度的mRNA、lncRNA、小RNA、微生物RNA反转录后的高灵敏度检测，一些相似度较高的常规染料法难以区分的同源基因或者基因的SNP检测。
检测原理：探针法qPCR不使用荧光染料如SYBR Green等对PCR产物进行荧光染色，而是采用了荧光基团和淬灭基团(quencher)标记的DNA探针靶向拟通过PCR检测的目标序列(设计的探针结合位点通常位于两条引物结合位点之间)。
正常情况下，探针上的淬灭基团由于空间上的荧光共振能力转移(FRET)而导致荧光基团淬灭。
在PCR反应扩增目标序列时，引物和探针都会退火到目标基因上，随着引物的延伸，Taq酶的5'→3'外切酶活性会导致结合在目标序列上的探针从5’端开始逐渐被降解。
探针的荧光基团和淬灭基团被Taq酶切开后，淬灭基团的作用消失，荧光基团就能正常地被激发光所激发而产生荧光了。
每经过一个PCR循环，就会有更多的荧光基团被释放，荧光强度与新合成的目标片段数量成正比，从而就可以实现定量检测了。
谷胱甘肽还原酶测定试剂盒(谷胱甘肽底物法)产品技术要求广州科方生物技术
医疗器械产品技术要求编号：谷胱甘肽还原酶测定试剂盒（谷胱甘肽底物法）2.性能指标2.1试剂盒性能指标2.1.1外观试剂盒各组分应齐全、完整、无液体渗漏；液体试剂应为澄清透明、无絮状物、无肉眼可见颗粒及沉淀的液体；包装标签应清晰，准确、牢固。
2.1.2装量液体试剂的装量应不小于标示量。
2.1.3试剂空白2.1.3.1试剂空白吸光度在温度37℃、波长340nm条件下检测，试剂空白吸光度应≥0.5000（比色杯光径1.0cm）。
2.1.3.2试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.0100（比色杯光径1.0cm）。
2.1.4分析灵敏度测定谷胱甘肽还原酶活性为70U/L的样品时，其吸光度变化率（△A/min）应≤0.5000。
2.1.5线性a）线性区间[4,300]U/L，相关系数r应≥0.9900；b）[4,30]U/L区间内绝对偏差应不超过±4.5U/L；（30,300]U/L区间内相对偏差应不超过±15%。
2.1.6精密度2.1.6.1重复性CV应≤10%。
2.1.6.2批间差相对极差（R）应≤10%。
2.1.7准确度以企业参考品为检测样本，测定结果与企业参考品靶值浓度的相对偏差应在±15%范围内。
2.2校准品性能指标2.2.1性状校准品应为无色至淡黄色液体。
2.2.2装量校准品装量应不少于标示值。
2.2.3正确度使用校准物校准后测量参考物质，量值传递的正确度应符合｜En｜≤1。
2.2.4均匀性a）瓶内均匀性：CV≤10%；b）瓶间均匀性：CV≤15%。
2.3质控品性能指标2.3.1外观质控品应为无色至淡黄色液体。
2.3.2装量质控品装量应不少于标示值。
2.3.3预期结果用校准品校准测量程序后测定质控物，结果应在靶值范围内。
2.3.4均匀性瓶间均匀性：CV应≤15.0%。
碧云天活性氧检测试剂盒 S0033S S0033M 说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号活性氧检测试剂盒产品编号 产品名称包装 S0033S 活性氧检测试剂盒 >100次 S0033M活性氧检测试剂盒>500次产品简介：活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit ，也称ROS Assay Kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA 进行活性氧检测的试剂盒。
DCFH-DA 本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH 。
而DCFH 不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。
细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH 生成有荧光的DCF 。
检测DCF 的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。
本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup ，以便于活性氧的检测。
Rosup 是一种混合物(compound mixture),浓度为50mg/ml 。
本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。
本试剂盒S0033S 包装可以测定100-500个样品，S0033M 包装可以测定500-2500个样品。
包装清单：产品编号 产品名称 包装 S0033S-1 DCFH-DA (10mM)0.1ml S0033S-2 活性氧阳性对照(Rosup, 50mg/ml)1ml —说明书1份产品编号 产品名称 包装 S0033M-1 DCFH-DA (10mM)0.5ml S0033M-2活性氧阳性对照(Rosup, 50mg/ml)5ml —说明书1份保存条件：-20ºC 保存，一年有效。
注意事项：探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px_GPX)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4499
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4499规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×2瓶4℃保存试剂二液体10μL×1瓶4℃保存试剂三液体30mL×1瓶4℃保存试剂四液体15mL×1瓶4℃保存试剂五液体5mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存稀释液液体20mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前加入3.3mL稀释液，充分溶解；2、试剂二：临用前按2μL试剂二：10mL蒸馏水的比例稀释试剂二，现用现配；3、试剂三：瓶底若有结晶可50℃水浴溶解，此溶液为饱和溶液，若底部最终还有结晶，吸取上清使用即可；4、标准品：10mg还原型谷胱甘肽。
临用前加入0.405mL稀释液溶解为80μmol/mL的标准溶液备用。
产品说明：谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px或GPX）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。
GPX能够催化还原型谷胱甘肽（GSH）生成氧化型谷胱甘肽（GSSG），使有毒的过氧化氢还原成无毒的羟基化合物。
GPX催化H2O2氧化GSH，产生GSSG，GSH能与DTNB生成在412nm处有特征吸收峰的化合物，412nm下吸光度的下降即可反应GPX的活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：按照组织质量（g）:提取液体积(mL)为1:5~10的比例（建议称取0.05g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆。
谷胱甘肽还原酶检测试剂盒
GSSG。1 U=1000 mU。
c. 对于谷胱甘肽还原酶：1mU/ml＝1nmol NADPH/min/ml＝(A340/min)/0.00622 即相当于：[检测体系中谷胱甘肽还原酶活力]=[A340/min(sapmle)－A340/min(blank)]/0.00622 注：[检测体系中谷胱甘肽还原酶活力]的单位为mU/ml。
如果A340/min(sapmle)＝0.0255，A340/min(blank)＝0.0006，那么 [检测体系中谷胱甘肽还原酶活力]= (0.0255-0.0006)/0.00622=4.0mU/ml
[样品中谷胱甘肽还原酶活力]= 4.0mU/mlX10X20/(0.5mg/ml)=1.6U/mg(蛋白)
注意事项：
¾ 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。另外，硫酸钠、硫酸铵和铁氰化 物都会干扰本试剂盒的测定。请尽量避免。
¾ 样品可以立即测定，也可以-70℃冻存待以后测定。 ¾ 一定要严格控制反应时的温度，否则会引起较多误差。 ¾ NADPH不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。 ¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 S0055
谷胱甘肽还原酶检测试剂盒
产品名称 谷胱甘肽还原酶检测试剂盒
包装 100次
产品简介：
¾ 谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(Glutathione Reductase Assay Kit)是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样 品中谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase)活性的试剂盒。谷胱甘肽还原酶可以还原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成还原型谷 胱甘肽(GSH)。谷胱甘肽还原酶在许多组织中都有分布，可以维持细胞内充足的还原型谷胱甘肽(GSH)水平。GSH可以清 除自由基和一些有机过氧化物，或作为谷胱甘肽氧化酶(Glutathione peroxidase)的底物来清除一些过氧化物。
碧云天Casapase 3活性检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线：400-168-3301或800-8283301订货e-mail：******************技术咨询：*****************碧云天网站微信公众号网址：Caspase 3活性检测试剂盒产品编号产品名称包装C1115 Caspase 3活性检测试剂盒20次产品简介：Caspase 3活性检测试剂盒(Caspase 3 Activity Assay Kit)是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 3酶活性或纯化的caspase 3酶活性的试剂盒。
Caspase (Cysteine-requiring Aspartate Protease)是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。
Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain，有时被写作caspase-3或caspase 3，属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily)，是细胞凋亡过程中的一个关键酶。
Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的一个caspase。
Caspase 3可以剪切procaspase 2、6、7和9，并可以直接特异性剪切许多caspase底物，包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase)，ICAD (Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease)，gelsolin和fodrin等。
这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。
另外，caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用，包括染色质固缩(chromatin condensation)，DNA片段化(DNA fragmentation)等。
同时caspase 3对细胞起泡(cell blebbing)也起到关键作用。
谷胱甘肽还原酶测定试剂盒(谷胱甘肽底物法)产品技术要求jiuqiang
谷胱甘肽还原酶测定试剂盒（谷胱甘肽底物法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清谷胱甘肽还原酶的含量。
1.1 包装规格包装规格见表1。
表1 包装规格1.2 主要组成成分主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分2.1 外观试剂1a为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂1b为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；质控品为无色或浅黄色粉末状物质，复溶后为无色或浅黄色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白吸光度2.3.1 试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≤1.5000。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率A340nm下测定试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应≤ 0.0100。
2.4 准确度与已上市产品进行比对试验：在[12，184] U/L区间内，相关系数r≥0.975，在[12，50] U/L区间内测定的绝对偏差应不超过±7.5 U/L，在(50，184]U/L区间内测定的相对偏差应不超过±15%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为70U/L时，其吸光度变化率应不超过0.5000。
2.6 线性范围在[12，184] U/L区间内，线性相关系数r≥0.990，在[12，50]U/L区间内线性绝对偏差应不超过±7.5U/L，在(50，184] U/L区间内线性相对偏差应不超过±15%。
2.7 测量精密度2.7.1 重复性使用高、低不同浓度的血清样本或质控品重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于10％。
2.7.2 批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8 瓶间差试剂1b、试剂2、质控品的瓶间差应≤10%。
碧云天脂质氧化检测试剂盒计算公式
碧云天脂质氧化检测试剂盒计算公式
摘要：
1.碧云天脂质氧化检测试剂盒概述
2.碧云天脂质氧化检测试剂盒的计算公式
3.计算公式的应用实例
4.注意事项
正文：
一、碧云天脂质氧化检测试剂盒概述
碧云天脂质氧化检测试剂盒是一款用于检测脂质氧化程度的产品，通过检测可以评估脂质受到氧化损伤的程度，从而为研究脂质氧化机制提供有力依据。
二、碧云天脂质氧化检测试剂盒的计算公式
碧云天脂质氧化检测试剂盒的计算公式为：
氧化程度（%）=（吸光度差值/初始吸光度）×100%
其中，吸光度差值为试剂盒检测后的吸光度与初始吸光度的差值。
三、计算公式的应用实例
以检测某脂质样本为例，初始吸光度为0.6，检测后的吸光度为0.8，则吸光度差值为0.8-0.6=0.2。
代入公式，得到氧化程度为（0.2/0.6）
×100%=33.3%。
四、注意事项
在使用碧云天脂质氧化检测试剂盒时，应注意以下几点：
1.确保试剂盒的保存条件符合要求，避免试剂盒受潮、高温等因素影响检测结果。
2.操作过程中应遵循说明书的步骤，确保检测结果的准确性。
3.对于检测结果，应结合实际情况进行分析，避免片面理解。
总之，碧云天脂质氧化检测试剂盒通过计算公式可快速、准确地检测脂质氧化程度，为相关研究提供有力支持。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
¾ 谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有机醇。如果以过氧 化氢为底物进行检测，则同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶(Catalase)的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。本 试剂盒利用了一种间接测定的方法。谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH产生GSSG，而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH 催化GSSG产生GSH，通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。在上述反应中，谷胱甘 肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
e. 所有试剂使用前须在水浴中或PCR仪等设备上温育到25℃。
3. 样品测定：
表1
空白对照 (blank)
样品本底对照
样品 (sample)
谷胱甘肽过氧化物酶l
176-184 µl
待测样品
－
2-10 µl
2-10 µl
GPx检测工作液
10 µl
10 µl
10 µl
谷胱甘肽还原酶
0.4 µl
4 µl
8µl
GPx检测工作液体积
10.4 µl
104 µl
208µl
d. 15mM过氧化物试剂溶液的配制。取21.5微升过氧化物试剂(t-Bu-OOH)加入10毫升Milli-Q级纯水，混匀，即配制成
15mM过氧化物试剂溶液。配制好的15mM过氧化物试剂溶液仅限当日使用，且需尽量在冰浴上存放。
产品编号 S0056
谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒
产品名称 谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒
包装 100次
产品简介：
¾ 谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit)是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组 织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase)活性的试剂盒。绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是 含硒的，且硒为该酶的活性中性组成部分。细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。本试剂盒检测的是 最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
使用说明：
1. 样品的准备： a. 细胞样品的准备：对于贴壁细胞，由于后续用于酶活性的测定，避免使用胰酶消化细胞。可以使用EDTA处理细胞或 用细胞刮子收集细胞。细胞用PBS或生理盐水洗涤一遍。后续a1和a2步骤可以任选其一(优先推荐步骤a1)： a1. 可以用碧云天生产的Western及IP细胞裂解液(P0013)参考相应说明裂解细胞样品。按照每100万细胞加入100-200微 升裂解液的比例进行裂解。如果出现裂解效果不佳的情况，可以把处在裂解液中的细胞样品用玻璃匀浆器在4℃或冰 浴匀浆。随后4℃，12000g离心10分钟。取上清用于酶活性的测定。 a2. 可以用本试剂盒中的匀浆液，按照每100万细胞加入100-200微升匀浆液的比例用玻璃匀浆器在4℃或冰浴匀浆。随 后4℃，12000g离心10分钟。取上清用于酶活性的测定。进行匀浆处理。 b. 组织样品的准备：动物用含有0.16mg/ml heparin的生理盐水(0.9% NaCl containing 0.16mg/ml heparin)灌流清除血液后获 取组织样品。按照约每20mg组织加入200微升匀浆液的比例，用玻璃匀浆器在4℃或冰浴匀浆。4℃，12000g离心10分 钟。取上清用于酶活性的测定。
体溶解后可继续使用。如果有水分蒸发到管壁上，则需先离心，随后再促进晶体溶解。如果出现盖子未盖紧导致水汽泄 漏的情况，则需补加蒸发掉的水量，然后再促进晶体溶解。可在晶体溶解后使用，但不溶解晶体直接使用也可以，此时 可以使用的酶的总体积会稍稍减小一些。 ¾ 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. An R, Dong C, Lei Y, Han L, Li P, Chen J, Wang G, Shi Q, Gao C, Jiang H, Zhou W, Han J, Chu Y, Dong X. PrP mutants with different numbers of octarepeat sequences are more susceptible to the oxidative stress. Sci China C Life Sci. 2008 Jul;51(7):630-9. Epub 2008 Jul 13.
使用本产品的文献：
1. Pan Q, Huang K, He K, Lu F. Effect of different selenium sources and levels on porcine circovirus type 2 replication in vitro. J Trace Elem Med Biol. 2008;22(2):143-8.
注意事项：
¾ 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。如果在样品中的还原剂无法避 免，例如DTT、巯基乙醇等，则这些还原剂的总浓度至少低于0.1mM。0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
¾ 常用的Triton X-100、Tween 20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物，会影响本试剂盒的测定。如果必须使用这些去垢 剂，最好使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
—
产品名称 样品匀浆液 谷胱甘肽过氧化物酶检测缓冲液 谷胱甘肽还原酶
NADPH 还原型谷胱甘肽(GSH) 过氧化物试剂(t-Bu-OOH)
说明书
包装 100ml 50ml 40µl 5mg 14mg 200µl 1份
保存条件：
谷胱甘肽还原酶4℃保存，其余-20℃保存，半年有效。NADPH溶解后宜-70℃保存，4℃可以保存一天，-20℃保存一周后 NADPH会减少10%以上。GSH在配制成溶液后，适当分装，-20℃保存。
的样品如果当日测定，可以在冰浴保存，如果日后测定可以-70℃冻存。 2. 试剂盒的准备工作：
a. 配制10mM NADPH。取2.5mg NADPH，加入300微升Milli-Q级纯水或重蒸水，溶解，混匀。预计多余的NADPH需立 即分装，-70℃保存。
b. 84mM GSH溶液的配制。在14mg GSH中加入550微升 Milli-Q级纯水，溶解并混匀。或称取少量GSH，配制少量84mM GSH溶液。预计多余的GSH需立即分装，-20℃保存。
e. 测定出来的A340/min最好能控制在0.03-0.15范围内。如测定出来的A340/min数值过大，则可以把样品适当稀释，如 A340/min数值过小，处理样品时需设法尽量浓缩样品。
4. 样品中谷胱甘肽过氧化物酶酶活力的计算： a. 谷胱甘肽过氧化物酶酶活力单位的定义：1个酶活力单位(1 unit)在25℃，pH8.0，在GSH、谷胱甘肽还原酶、t-Bu-OOH 存在的条件下，在1分钟内可以催化1微摩尔NADPH转变成NADP+。1 U=1000 mU。 b. 对于谷胱甘肽过氧化物酶溶液：1mU/ml＝1nmol NADPH/min/ml＝(A340/min)/0.00622 即相当于：[检测体系中谷胱甘肽过氧化物酶活力]=[A340/min(sapmle)－A340/min(blank)]/0.00622 注：[检测体系中谷胱甘肽过氧化物酶活力]的单位为mU/ml。 c. [样品中谷胱甘肽过氧化物酶活力]＝[检测体系中谷胱甘肽过氧化物酶活力] X[稀释倍数]/[样品中的蛋白浓度] [样品中谷胱甘肽过氧化物酶活力]的单位为：U/mg蛋白或mU/mg蛋白； [样品中的蛋白浓度]的单位为：mg/ml。 d. 计算示例：样品的蛋白浓度经测定为0.5mg/ml，用样品稀释液稀释2倍后，取10微升稀释后的样品参考表1进行测定。 如果A340/min(sapmle)＝0.065，A340/min(blank)＝0.003，那么 [检测体系中谷胱甘肽过氧化物酶活力]= (0.065-0.003)/0.00622=10mU/ml [样品中谷胱甘肽过氧化物酶活力]= 10mU/mlX2X20/(0.5mg/ml)=800mU/mg(蛋白)
¾ 为消除样品中可能含有的可以消耗NADPH的酶的干扰，可以检测不加过氧化物试剂的样品作为对照。 ¾ 样品可以立即测定，也可以-70℃冻存待以后测定。 ¾ 一定要严格控制反应时的温度，否则会引起较多误差。 ¾ NADPH不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。 ¾ 谷胱甘肽还原酶配制在接近饱和的硫酸铵溶液中，存放一段时间后容易出现硫酸铵结晶，属正常现象。室温孵育促进晶
15mM过氧化物试剂溶液
4 µl
－
4 µl
总体积
200 µl
200 µl
200 µl
a. 参考表1，依次加入检测缓冲液、待测样品和GPx检测工作液，混匀。加入4微升15mM过氧化物试剂溶液后，反应开
始。需适当混匀，可以使用培养板振荡器。
b. 使用适当的酶标仪或微量紫外分光光度计测定A340。如果仪器可以设置温度，把温度设置在25℃，否则可以通过空调 调节室温到25℃，待预计仪器也达到25℃后再开始测定A340。
¾ 本试剂盒利用了如下的反应原理，GPx为谷胱甘肽过氧化物酶，GR为谷胱甘肽还原酶，R-OOH为过氧化物。
¾ 本试剂盒提供的有机过氧化物试剂(t-Bu-OOH)在没有谷胱甘肽过氧化物酶存在的情况下不会和GSH产生反应，也不会被 细胞内的过氧化氢酶催化而分解。因而可以较为特异地检测出谷胱甘肽过氧化物酶的活力。
c. 连续测定3分钟或自动每隔30秒测定一次A340。如果仪器不具备相应功能，可以手工操作，每隔30秒记录A340值，至少 连续记录3分钟，获得6个点的数据。前15秒的数据由于反应体系需要混合等原因，数据可能不太准确，需弃掉。
d. 第一次测定时建议做1-2个样品本底对照，如果样品本底对照和空白对照非常接近，则说明样品中不存在干扰物质， 后续检测类似样品时，可以不再检测样品本底对照。如果样品本底对照和空白对照有显著差异，则每个样品在测定时 多需做样品本底对照。计算时每个样品的A340/min都需要扣除相应的样品本底对照测定出来的A340/min。