第十节_谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力测定
谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽转硫酶研究进展
动物医学进展,2008,29(10):53-56Pr ogress in Veterinary Medicine文献综述谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽转硫酶研究进展*马森(武夷学院化学系福建省高校绿色化工技术重点实验室,福建武夷354300)摘要:谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和谷胱甘肽转硫酶(GST)是一对抗氧化酶。
GSH-Px为含硒半胱氨酸,至少有4种同工酶,催化还原H2O2和有机氢过氧化物。
GST不含硒,有多种同工酶,不能分解H2O2,但具有清除过氧化物和解毒的双重功能。
二者广泛存在于组织细胞、红细胞、血浆和乳中,与细胞损伤、缺氧、中毒、衰老、多种疾病的发生有关;GSH-Px活性也与机体硒水平密切相关。
文章综述了GSH-Px 和GST的分类与结构、性质、作用、检测原理、动物临床方面的应用及研究进展。
关键词:谷胱甘肽过氧化物酶;谷胱甘肽转硫酶;研究进展中图分类号:Q554.6文献标识码:A文章编号:1007-5038(2008)10-0053-04谷胱甘肽过氧化物酶(g lutathione pero xidase, GSH-Px)于1957年由M ills从牛红细胞中发现,分子结构中含硒,故又名硒谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GSH-Px),是体内清除H2O2和许多有机氢过氧化物的重要酶。
1976年,Law rence等发现组织中还存在一种不含硒的GSH-Px,命名为谷胱甘肽转硫酶或不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶(g lutathio ne-S-tr ansferase,GST或on-Se-GSH-Px),在体内具有清除过氧化物及解毒的双重功能。
文章对GSH-Px和GST的分类与结构、性质、作用、检测原理、动物临床方面的应用及研究进展进行了阐述。
1分类与结构从人和动物组织或细胞中提纯的GSH-Px,分子质量为76ku~95ku,为水溶性四聚体蛋白,4个亚基相同或极为类似,每个亚基有1个硒原子。
目前发现GSH-Px至少有4种同工酶,其在机体中的分布、亚基结构、一级序列和酶学特点上有显著不同。
医学检验·检查项目：血清谷胱甘肽过氧化物酶_课件模板
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简介： 护细胞的结构和功能。因此，GSH-Px在细 胞抗氧化防御机制中的作用越来越受到临 床关注。
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临床意义：
(1)机体抗过氧化能力指标之一。 (2) 升高：糖尿病、镰状红细胞性贫血、新生 儿溶血、地中海贫血。 (3)降低：克山病、 大骨关节病、多发性硬化症、癌症、冠心 病、慢性胰腺炎、烧伤、手术。
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正常值： (1)酶速率法(37℃)：2.96～
83U/g·Hb (2)比色法： 127.64±>>
相关检查： 红细胞谷胱甘肽还原酶、血糖测定、全血 糖化Hb、餐后2小时血葡萄糖 （2HPG,PBG）、血葡萄糖。
医学检验·各论 血清谷胱甘肽过氧化
物酶 内容课件模板
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简介：
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px或GPX) 是体内重要的自由基捕获酶之一。研究表 明，自由基与肿瘤发病密切相关，GSH-Px 不仅具有清除自由基和衍生物的作用，还 减少脂质过氧化物的形成，增强机体抗氧 化损伤的能力。GSH-Px还参与前列腺素 (PGI2)和血栓素(TXA2)的合成，保
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相关症状： 口干、溶血性贫血、尿频、溶血现象。
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相关疾病： II型糖尿病、I型糖尿病、糖尿病、新生 儿溶血病、磷脂酰胆碱-胆固醇酰基转移 酶缺乏、糖尿病肾病、妊娠合并糖尿病。
谢谢！
谷胱甘肽过氧化物酶
谷胱甘肽过氧化物酶开放分类：医学植物生理学•目录•图片•讨论•知识魔块分享完善词条谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。
GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映机体硒水平。
硒是GSH-Px酶系的组成成分，它能催化GSH变为GSSG，使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物，从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。
NADPH的减少量则和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
GSH-Px主要包括4种：分别为胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。
编辑摘要谷胱甘肽过氧化物酶- 简介谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。
硒是GSH-Px酶系的组成成分，它能催化GSH变为GSSG，使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物，同时促进H2 O2的分解，从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。
GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映机体硒水平。
谷胱甘肽过氧化物酶可以催化GSH产生GSSG，而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH，通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。
在上述反应中谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
谷胱甘肽过氧化物酶- GSH-Px酶系主要包括4种不同的GSH-Px，分别为胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。
胞浆GSH-Px由4个相同的分子量大小为22kDa的亚基构成四聚体，每个亚基含有1个分子硒半胱氨酸，广泛存在于机体内各个组织，以肝脏红细胞为最多。
它的生理功能主要是催化GSH参与过氧化反应，清除在细胞呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基，从而减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的过氧化作用。
大鼠谷胱甘肽过氧化物酶GSHPX酶联免疫分析ELISA
大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）的活性。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）水平。
用纯化的谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽-过氧化物酶，再与HRP标记的GSH-PX抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽-过氧化物酶呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）的活性。
试剂盒组成：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
索莱宝 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px GPX）活性检测试剂盒说明书-微量法
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px/GPX ）活性检测试剂盒说明书微量法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1195规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×2瓶4℃保存试剂二液体10 μL×1瓶4℃保存试剂三液体30mL×1瓶4℃保存试剂四液体15 mL×1瓶4℃保存试剂五液体5mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支 4℃保存稀释液液体20 mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前加入3.3 mL 稀释液，充分溶解；2、试剂二：临用前按2 μL 试剂二：10 mL 蒸馏水的比例稀释试剂二，现用现配；3、试剂三：瓶底若有结晶可50℃水浴溶解，此溶液为饱和溶液，若底部最终还有结晶，吸取上清使用即可；4、标准品：10 mg 还原型谷胱甘肽。
临用前加入0.405 mL 稀释液溶解为80 μmol/mL 的标准溶液备用。
产品说明：谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-Px 或GPX ）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。
GPX能够催化还原型谷胱甘肽（GSH ）生成氧化型谷胱甘肽（GSSG ），使有毒的过氧化氢还原成无毒的羟基化合物。
GPX 催化H 2O 2氧化GSH ，产生GSSG ，GSH 能与DTNB 生成在412nm 处有特征吸收峰的化合物，412nm 下吸光度的下降即可反应GPX 的活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP 管。
几种禾本科作物幼苗期谷胱甘肽过氧化物酶活力研究
几种禾本科作物幼苗期谷胱甘肽过氧化物酶活力研究杨继轩;任治鹏;徐悦;刘玉美;朱祥春;孟婧【摘要】采用DTNB直接法,对5种常见的禾本科作物小麦、高粱、玉米、大麦和水稻幼苗期不同器官的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力进行测定.结果表明,不同作物的不同器官GSH-Px活力不同,小麦、高粱和玉米根的GSH-Px活力较高,且小麦>高粱>玉米;大麦茎段的酶活力最高;水稻叶片的酶活力最高.各作物最高酶活力出现的时间不同,种子出芽后7 d,大麦茎段和水稻叶片的GSH-Px活力达到峰值,分别为80.50 U和45.17 U;高粱、玉米和小麦根系的GSH-Px活力分别在出芽后11、15、19 d达到峰值,酶活力分别为41.00、71.00、79.08 U.本研究可为禾本科作物源GSH-Px的开发利用提供参考.【期刊名称】《现代农业科技》【年(卷),期】2018(000)005【总页数】4页(P1-3,5)【关键词】禾本科作物;幼苗期;谷胱甘肽过氧化物酶;酶活力【作者】杨继轩;任治鹏;徐悦;刘玉美;朱祥春;孟婧【作者单位】东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨 150030;东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨 150030;东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150030;东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨 150030;东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨 150030;东北农业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨 150030【正文语种】中文【中图分类】S51酶促抗氧化剂包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和硒依赖型谷胱甘肽过氧化物酶（Se-GSH-Px）等。
多数类型的非生物胁迫（如干旱、盐胁迫、高温和低温胁迫）会破坏细胞的代谢平衡，导致活性氧（ROS）增加[1]。
GSH-Px 是一种含硒酶，其辅因子为硒元素，可以催化过氧化物分解，清除脂质过氧化物[2]和有机氢过氧化物，在ROS防御中起主要作用[3]。
酵母中谷胱甘肽过氧化物酶_GSH_Px_活性的分析
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以减轻和阻断脂质过氧化作用的一级引发作用g以及ab1kde通过还原过氧化物来减轻和阻止二级引发作用证实在红细胞中有ab1kde以来g大量的文献报导了各种哺乳动物中的ab1kdegab1kde的特性进行了研究但关于植物和微生物中的ab1kde报道较少本文以种酵母为实验材料g研究ab1kde种酵母中的活性在生物体中g特别是酵母g还原氧的衍生物的一些酶如超氧化物歧化酶过氧化氢酶g表现出来的酶的活性受细胞中酶的底物代谢速率所控制酶母细胞中的过氧化物的浓度与生长环境有关g因此本文又研究了酶母在含有1
"+!
在无氧条件下培养对酵母 %& ’()* 活性的影响 在培养基中添加 , F C D 的 GH<<=-#、 $# AF C D 的麦角甾酵 ; 进行无氧培养 + 培养结束后 ; 再 加 " F C D 的氯酶素 ; 阻止酵母在有氧的情况下生长和合成新的蛋白质 + 测定酵母的 %&’()* 的 活性; 其结果 4 见表 $ 9 表明 ; &<(%&’()* 的活性下降; 而 =>=(&<(%&’()* 活性上升+ "+. 酵母在含硒的培养基中生长对 %& ’()* 的影响 酵母 ,$", 在含有 ,# E . A>B C D 的 IJ" &<8$ 培养基中生长 ; 在对数期离心收集酵母 + 测定 %&’()* 活性 ; 结果 4 见表 $ 9 显示 ; 酵母在含 IJ" &<8$ 培养基中生长 ; &<(%&’()* 的活性增加 ; 这 与动物组织中的 %&’()* 相类似 +
第十节 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力测定
1.3.6.2 血或组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）活力测定1.3.6.2.1 原理谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是体内存在的一种含硒清除自由基和抑制自由基反应的系统。
对防止体内自由基引起膜脂质过氧化特别重要，其活力以催化GSH氧化的反应速度，及单位时间内GSH减少的量来表示，GSH和5,5’-二硫对硝基苯甲酸（DTNB）反应在GSH-Px催化下可生成黄色的5-硫代2-硝基苯甲酸阴离子，于423nm波长有最大吸收峰，测定该离子浓度，即可计算出GSH减少的量，由于GSH能进行非酶反应氧化，所以最后计算酶活力时，必须扣除非酶反应所引起的GSH减少。
1.3.6.2.2 试剂和仪器仪器：可见光分光光度计、酶标仪、低温高速离心机、匀浆器、恒温水浴锅、微量加样器试剂：叠氮钠磷酸缓冲液pH7.0N a N316.25mg 终浓度2.5mmol/LEDTA-N a27.44mg 终浓度0.2mmol/LN a2HPO4 1.732g 终浓度0.2mol/LN a H2PO4 1.076g 终浓度0.2mol/L加蒸馏水至100mL，用少量HCL、N a OH调pH7.0，4℃保存。
1mmol/L谷胱甘肽（还原型GSH）溶液GSH 30.7mg加叠氮钠磷酸缓冲液至100mL，临用前配制，冰冻保存1－2日。
1.25－1.5mmol/LH2O2溶液取30％H2O20.15－0.17mL，用双蒸水稀释至100mL，作为贮备液，4℃避光保存，临用前将贮备液用双蒸水稀释10倍即可。
偏磷酸沉淀液HPO316.7g（先用蒸馏水溶解）EDTA 0.5gN a Cl 280g加蒸馏水至1000mL，用普通滤纸过滤，室温保存。
0.32mol/LN a2HPO4溶液:N a2HPO422.7g加蒸馏水至500mL，室温保存。
DTNB显色液DTNB 40mg柠檬酸三钠 1.0g加蒸馏水至100mL，4℃避光保存1个月。
0.2M磷酸缓冲液pH7.40.9%生理盐水1.3.6.2.3 实验步骤1.3.6.2.3.1 样品制备溶血液：取鼠血10μl加入到1mL双蒸水中，充分振摇，使之全部溶血1:100待测，4h内测定酶活力。
大鼠谷胱甘肽过氧化物酶GSHPX酶联免疫分析ELISA
大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）的活性。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）水平。
用纯化的谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽-过氧化物酶，再与HRP标记的GSH-PX抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽-过氧化物酶呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）的活性。
试剂盒组成：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒说明书
货号：MS1202 规格：100管/96样谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：GSH-Px是谷胱甘肽氧化还原循环中催化还原型谷胱甘肽（GSH）氧化的主要酶之一。
GSH-Px 不仅能够特异地催化还原型谷胱甘肽与ROS反应，生成氧化型谷胱甘肽GSSG，从而保护生物膜免受ROS的损害，维持细胞的正常功能；而且具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等能力。
测定原理：GSH-Px催化H2O2氧化GSH，产生GSSG；谷胱甘肽还原酶（GR）催化NADPH还原GSSG，再生GSH，同时NADPH氧化生成NADP+；NADPH在340nm有特征吸收峰，而NADP+没有；通过测定340nm光吸收减少速率来计算GSH-Px活性。
自备仪器和用品：低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。
试剂组成和配置：试剂一：液体×1 瓶，室温保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体×1 支，-20℃保存。
混合试剂配制：临用前，在试剂二中加入试剂一 20mL，充分震荡溶解后加入全部试剂三，混匀。
（当天用完）试剂四：液体×1 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。
8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间 3min）；然后 8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体：直接测定。
GSH-Px 测定操作：1. 分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到340nm，蒸馏水调零。
凯基谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测试盒
注意
注 1：空白管、标准管一般只需做 1-2 只。
注 2：最佳取样量及最佳取样浓度因样品种类不同，其 GSH-PX 活力不一。根据酶的百分抑制率与酶的活 力呈抛物线关系，各种测定样品取样量及取样浓度不一样，在每测定一种新的样品前最好选择一个最佳取
样量及最佳取样浓度。
最佳取样浓度的摸索
测试前先预试以确定最佳取样浓度：当您第一次使用本试剂盒测试某一种新的样品时最好先做三只不同浓
4℃或室温保存 6 个月
4℃保存 6 个月 4℃避光保存五天
4℃保存
GSH 的分子量为 307，每次测定前将 1 支 3.07mg 的 GSH 标准品粉剂加到 GSH 标准品的溶剂应用液 中，定容至 10ml 即为 1mmol/L 的 GSH 溶液，现用 现配。
取 1mmol/L GSH 溶液 2ml 加 GSH 标准品溶剂应用 液 18ml 定容至 20ml，作标准曲线用，若不做标准 曲线可以不配。
保存条件 4℃
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GSH 应用液的配制： 1mmol/L GSH 溶液
100u mol/L GSH 溶液 20umol/L 的 GSH 标准溶液
试剂二应用液的配制：将已配好的 甲乙两种混合。此为过饱和溶液， 室温静置冷却后，如有结晶，则取 上清进行实验。 加蒸馏水 100ml 溶解 每支加蒸馏水 10ml 溶解 标准品溶剂应用液：GSH 标准品 溶剂贮备液：双蒸水=1：9 即 10 倍稀释配成应用液；按所需量现用 现配。
二．试剂盒的组成和配制
25 Tests (50 Tubes)试剂盒的组成和保存： 试剂编号 1
2
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名称 贮备液
甲粉 乙液 粉剂 液体 粉剂
6
GSH 标准品粉剂
(完整版)GSH-Px活力的测定SOP
主要目的：——测定物质谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）活力。
主要原理：——谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px ）可以促使过氧化氢（H 2O 2）与还原性谷胱甘肽（GSH ）反应生成H 2O 及氧化性谷胱甘肽（GSSG ）,谷胱甘肽过氧化物酶的活力可用其酶促反应的速度来表示，测定此酶促反应中还原型谷胱甘肽的消耗，则可求出酶的活力。
H 2O 22O+GSSGGSH-Px 的活力以催化GSH 的反应速度来表示，由于这两个底物在没有酶的条件下，也能进行氧化还原反应（称为非酶促反应），所以最后计算此酶活力时必须扣除非酶促反应引起的GSH 减少的部分。
而GSH 含量的测定可以跟据GSH 和二硫代二硝基苯甲酸作用生成5-硫代二硝基苯甲酸阴离子呈现较稳定的黄色，在412nm 处测其吸光度即可计算出实验室签章一、试剂——谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）测定试剂盒（南京建成生物研究所）二、仪器设备——96孔酶标板——UV-Vis可见多功能酶标仪——旋涡混匀器——离心机——水浴锅——移液枪及其相应量程枪头三、实验方法根据试剂盒说明书具体操作步骤如下:1. 非酶管和酶管各加入1 mmol/LGSH 0.2 mL ，酶管加入稀释后的待测血清和组织匀浆液0.2 mL ，37 ºC 水浴预温5分钟，酶管和非酶管分别加入试剂一应用液0.1 mL ，37 ºC 水浴准确反应5分钟，酶管和非酶管分别加入试剂二应用液2 mL ，同时非酶管加入待测细胞上清液0.2 mL 。
混匀，3500-4000转/分，离心10分钟，取上清1 mL 作显色反应。
2. 空白管加入1 mL GSH 标准品溶剂应用液，标准管加入1 mL 20 μmol/LGSH 标准液，非酶管和酶管各加入上一步骤1 mL 上清液，然后空白管、标准管、非酶管和酶管各加入1 mL 试剂三应用液，0.25 mL 试剂四应用液和0.05 mL 试剂五应用液。
大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶GSH-PX酶联免疫分析ELISA
大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）的活性。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）水平。
用纯化的谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽-过氧化物酶，再与HRP标记的GSH-PX抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽-过氧化物酶呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠谷胱甘肽-过氧化物酶（GSH-PX）的活性。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
谷胱甘肽过氧化物酶的综述
谷胱甘肽过氧化物酶的综述作者摘要：谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶，与细胞损伤缺氧，中毒，衰老及多种疾病的发生有关。
文章综述了GSH-Px的结构与分类，性质，作用及临床方面的应用。
关键词：谷胱甘肽过氧化物酶谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)于1957年由Mills从牛红细胞中发现，分子结构中含硒，故又名硒谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GSH-Px)，是体内清除H2O2和许多有机氢过氧化物的重要酶。
1．结构与分类谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）分子质量为76 ku～95 ku，为水溶性四聚体蛋白，4个亚基相同或极为类似，每个亚基有1个硒原子。
GSH-Px的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映机体硒水平。
GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。
GSH-Px酶系主要包括4种不同的GSH-Px，分别为：胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。
第一种：胞浆GSH-Px 由4个相同的分子量大小为22kDa的亚基构成四聚体，每个亚基含有1个分子硒半胱氨酸，广泛存在于机体内各个组织，以肝脏红细胞为最多。
它的生理功能主要是催化GSH参与过氧化反应，清除在细胞呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基，从而减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的过氧化作用。
第二种：血浆GSH-Px的构成与胞浆GSH-Px相同，主要分布于血浆中，其功能目前还不是很清楚，但已经证实与清除细胞外的过氧化氢和参与GSH的运输有关。
第三种：磷脂过氧化氢GSH-Px是分子量为20kDa的单体，含有1个分子硒半胱氨酸。
最初从猪的心脏和肝脏中分离得到，主要存在于睾丸中，其它组织中也有少量分布。
其生物学功能是可抑制膜磷脂过氧化。
第四种：胃肠道专属性GSH-Px是由4个分子量为22kDa的亚基构成的四聚体，只存在于啮齿类动物的胃肠道中，其功能是保护动物免受摄入脂质过氧化物的损害。
谷胱甘肽过氧化物酶正常值范围
谷胱甘肽过氧化物酶正常值范围谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，简称GPx）是一种重要的抗氧化酶，广泛存在于人体各种组织中。
正常情况下，人体内的谷胱甘肽过氧化物酶水平处于一个平衡状态，以保持细胞膜的稳定和生理功能的正常运行。
谷胱甘肽过氧化物酶的正常值范围因检测方法、年龄、性别等因素而略有差异。
一般来说，血清谷胱甘肽过氧化物酶的正常范围在100-200 U/L（单位：微摩尔·分钟/升）。
同时，尿液谷胱甘肽过氧化物酶的正常范围为男性0.6-1.9 U/mmol·Cr，女性0.5-1.4 U/mmol·Cr。
需要注意的是，不同实验室和诊断标准可能会有所不同，具体数值应以实际检测报告为准。
谷胱甘肽过氧化物酶的主要作用是清除体内的过氧化物和自由基，防止氧化应激导致的细胞损伤。
在生理状态下，人体内会产生一定量的过氧化物和自由基，正常范围内的谷胱甘肽过氧化物酶可以有效清除这些有害物质，维持体内氧化-抗氧化平衡。
当谷胱甘肽过氧化物酶水平降低时，氧化应激水平升高，可能导致疾病的发生和发展，如炎症、肿瘤、神经系统疾病等。
为了评估谷胱甘肽过氧化物酶的水平，可以通过血液和尿液检测。
血液检测主要包括血清谷胱甘肽过氧化物酶活性测定，尿液检测主要包括尿液谷胱甘肽过氧化物酶活性测定。
根据检测结果，可以了解个体的谷胱甘肽过氧化物酶水平是否在正常范围内，从而有针对性地进行干预和调整。
保持谷胱甘肽过氧化物酶水平的重要性不言而喻。
首先，合理的饮食结构可以帮助维持谷胱甘肽过氧化物酶的水平。
富含抗氧化物质的食物，如新鲜蔬菜、水果、坚果、豆类等，可以提高谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
其次，保持良好的生活习惯，如适当运动、充足睡眠、避免过度劳累等，也有助于提高谷胱甘肽过氧化物酶的水平。
最后，对于患有疾病或氧化应激状态的人群，可以在医生建议下使用抗氧化剂，如维生素C、维生素E、硒等，以提高谷胱甘肽过氧化物酶的水平，减轻氧化应激损伤。
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的生物学作用
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的生物学作用谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。
GSH-Px 的活性中心是硒半胱氨酸，其活力大小可以反映机体硒（Se）水平。
硒是GSH-Px酶系的组成成分，它能催化GSH变为GSSG，使有毒的过氧化物还原成无毒的羟基化合物，同时促进H2O₂的分解，从而保护细胞膜的结构及功能不受过氧化物的干扰及损害。
而谷胱甘肽还原酶可以利用NADPH催化GSSG产生GSH，通过检测NADPH的减少量就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活力水平。
在上述反应中谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，NADPH的减少量则和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。
几乎所有的有机氢过氧化物(ROOH)都可以在GSH-Px的作用下还原为ROH。
大概反应如下：2GSH＋H2O2→GSSH＋2H2O，2GSH＋ROOH→GSSH＋2ROH。
谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）分类谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）系主要包括4种不同的GSH-Px，分别为：胞浆GSH-Px、血浆GSH-Px、磷脂氢过氧化物GSH-Px及胃肠道专属性GSH-Px。
第一种：胞浆GSH-Px 由4个相同的分子量大小为22kDa的亚基构成四聚体，每个亚基含有1个分子硒半胱氨酸，广泛存在于机体内各个组织，以肝脏红细胞为最多。
它的生理功能主要是催化GSH参与过氧化反应，清除在细胞呼吸代谢过程中产生的过氧化物和羟自由基，从而减轻细胞膜多不饱和脂肪酸的过氧化作用。
第二种：血浆GSH-Px的构成与胞浆GSH-Px相同，主要分布于血浆中，其功能目前还不是很清楚，但已经证实与清除细胞外的过氧化氢和参与GSH的运输有关。
第三种：磷脂过氧化氢GSH-Px是分子量为20kDa的单体，含有1个分子硒半胱氨酸。
最初从猪的心脏和肝脏中分离得到，主要存在于睾丸中，其它组织中也有少量分布。
其生物学功能是可抑制膜磷脂过氧化。
禾本科植物谷胱甘肽氧化物酶的活性测定
禾本科植物谷胱甘肽氧化物酶的活性测定摘要：本文以羊草的叶片和根为材料, 用0. 2 mo l /L pH 6. 2的磷酸缓冲液( 含1 mmo l/L EDTA-2Na，5%的水溶性PVP)作为谷胱甘肽过氧化物酶（GSH一PX）的提取介质，偏磷酸为酶促反应的蛋白质沉淀剂, 二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB ) 与GSH显色反应3min, 在412 nm测定酶管和非酶管的OD值, 以测定谷胱甘肽过氧化物酶的活性关键词：盐碱胁迫；羊草；GSH-PX；酶活性Analyzing Soluble Sugar Content and Biomass of Sweet Sorghumunder Saline-alkali StressAbstract:Soil salinization is a global issue. Experiments prove that growing state of sweet sorghum shows growth inhibition，lower production and physiological disorders under soil salinity In this study,sweet sorghum as our material，was sowed in neutral soil and saline soil, respectively，exploring characteristics of salinity stress for the sweet sorghum and the change of soluble sugar and biomass. According to the particularity of different soils，we observed the relationship between different varieties and salt-alkali stress at different growth stages.Profound understanding of physiological mechanism of sweet sorghum response to salt-alkali stress for screening sweet sorghum germplasm,identifying salinity tolerance and cultivating the new sweet sorghum species is significance.Keywords: Salt stress; sweet sorghum; Glutathione peroxidase; enzyme actirityⅠ1前言植物是一个需氧代谢的有机体。
谷胱甘肽过氧化物酶
谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）检测
谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione Peroxidase, GPX）是广泛存在于生物体内的一种重要的过氧化物分解酶，能催化还原型谷胱甘肽（GSH）转化为氧化型谷胱甘肽（GSSG），使有毒的过氧化氢还原成无毒的羟基化合物，从而保护生物膜免受活性氧（ROS）的损害，维持细胞的正常功能。
此外，GPX还具有保护肝脏、提高机体免疫力、拮抗有害金属离子对机体的伤害和增加机体抗辐射等作用。
迪信泰检测平台采用生化法，结合相应的酶类的试剂盒，可高效、精准的检测谷胱甘肽过氧化物酶的活性变化。
此外，我们还提供其他ASA-GSH循环类的检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定谷胱甘肽过氧化物酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关参数（中英文）
3. 图片
4. 原始数据
5. 谷胱甘肽过氧化物酶活性信息。