生化试剂参数..
体外诊断生化试剂应用参数
CHEMISTRY ACP ALB ALP ALT AM 货号270010036008201110060180006051000503601850111018018001803601870111050018005003600930TEST ACP ALB ALP ALT AM SAMPLE VOL．20371025 DILUTION0101000 REAGENT VOL.1-STEP250300270290250 DILUTION00000 2-STEP50[N] DILUTION00000 WAVE-LENGTH-1410600410340340 WAVE-LENGTH-2450700480410700 METHOD RATE END RATE RATE END REACTION+++--FIRST-POINT-160439 LAST-POINT-1166161616 FIRST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A LAST-POINT-2N/A N/A N/A N/A N/A NO LAG-TIME YES NO YES YES NO TURBIDITY NO NO NO NO NO PROZONE CHECK NO NO NO NO NO REAGENT OD L-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 H 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 SERUM BLANK L N/A N/A N/A N/A N/A REAGENT OD H N/A N/A N/A N/A N/A MIN-OD-0.5-0.5-0.5-0.5-0.5 MAX-OD 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 LINEARITYDYNAMIC RANGE L00000 H8060100010001180 UNIT U/L g/L U/L U/L umol/L CORRELATION FACTORA=11111 B=00000 COUNT11111 DILUTION VOLUME00000 CONDENSE VOLUME00000 MONITOR SPAN11111 AGC POINT00000 K.FACTOR1308.42628.260780上述参数仅供参考，详情请参阅试剂说明及仪器说明。
常用生化检测项目分析方法及参数设置
常用生化检测项目分析方法及参数设置一、常用生化检测项目分析方法举例1．终点法检测常用的有总胆红素（氧化法或重氮法)、结合胆红素（氧化法或重氮法）、血清总蛋白（双缩脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、总胆汁酸（酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法）、尿酸(尿酸酶法)、总胆固醇(胆固醇氧化酶法)、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白胆固醇(直接测定法）、钙(偶氮砷Ⅲ法)、磷（紫外法）、镁（二甲苯胺蓝法）等.以上项目中，除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外，其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法,包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用.2．固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。
3．连续监测法对于酶活性测定一般应选用连续监测法，如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。
一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等,也可用连续监测法。
4．透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目，多数属免疫比浊法，载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗”O”、类风湿因子,以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法.二、分析参数设置分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等,其程序均已经固化在存储器里，用户不能修改.各种测定项目的分析参数（analysis paramete）大部分也已设计好,存于磁盘中，供用户使用；目前大多数生化分析仪为开放式，用户可以更改这些参数。
生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道，由用户自己设定分析参数。
因此必须理解各参数的确切意义。
一、分析参数介绍（一）必选分析参数这类参数是分析仪检测的前提条件，没有这些参数无法进行检测.1．试验名称试验名称(test code）是指测定项目的标示符，常以项目的英文缩写来表示。
2．方法类型（也称反应模式) 方法类型（assay）有终点法、两点法、连续监测法等，根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。
各厂家生化仪器技术参数
周期10秒，1点加R1，2点加S,13点加R2,最大点51.空白校正点要设置在13 点前。先输入测试参数，在标准管理内设置标准，B1为空白，S1-S20为校 东软400 准液位置，再回测试参数内输入浓度，再执行->执行状态->运行监控->开 始标准执行 36秒，共50个测点。起始加入R1，9-10点加入S样本，R2在18-19点加入。 速率法建议：延迟时间不小于90秒，即单试剂起点13点，双试剂起点22点 。测量时间不小于180秒，即单试剂结束点18点，双试剂结束点27点。两点 蓝韵LW C100Plus 法：延迟时间不小于60秒，单起12点，双起21点，测量时间不小于120秒， 单结束点16点，双结束点22点。苦味CR按说明书设置起止点。 终点法建议 设置单9-19/双18-28。S:2-45 R1:180-450 R2:10-300 180<R1+S+R2<450 周期24s，起始加入R1,5-6点加样本，第10-11点加试剂2，反应终点50 蓝韵200/220 点.S:2-48 R1:50-480 R2:10-300 双试剂起点6-10点内。 （有软件：9-10点加样，19点加R2，150<R1+S+R2<360) 起0点加R1试剂，7-8(8-9数点）加样本，34-35加2试剂，单试剂从8点计 算,最大读点65点，周期10秒。S:2-43 R1:150-450 R2:10-300 180<R1+S+R2<450 推荐双波长，次波长用700nm（工程师设置参数是负 蓝韵LWC360/400 波长全用800nm)空白时间单试剂固定为7-7，双试剂32-34，终点法反应时 间：终点反应起始点+2（63-65），速率法空白时间设为空，样本盘80号位 置放水做试剂空白。定标公式：C=K*(R-R0) 华天恒达F2600 起始点加入R1+S(吸完R1洗针后直接吸样本，一起注入反应杯）15-16点加 R2，最大读点42（10分钟），最小反应液量240，S:1-40 R1+R2:1-500
生化试剂参数
在特定的温度下，一般是37度，待测物质直接或是间接或试剂中的底物发生反应，使整个液体环境的吸光度或是颜色发生变化，这个变化可能是变深或变淡，根据朗伯比尔定律，然后我们用数字光电设备去监测发生的变化，把颜色转化成电信号再转化成数字，电脑再加以计算，套入我们预先设定好的公式，这样就有结果了。
*朗伯比尔定律又称比尔定律，是光吸收的基本定律，适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质，包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。
光被吸收的量正比于光程中产生光吸收的分子数目,在我们生化分析上通俗的说就是光通过颜色均匀的液体光被吸收的多少或是颜色的变化和液体中物质的浓度成线性关系。
例如AST和GLU的检测原理：L-天门冬氨酸+ α-酮戊二酸—AST—草酰乙酸+ L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+ —MDH— L-苹果酸+ NAD+ + H2ONADH在340nm有吸收峰，所以NADH的减少速度就可以反应出AST的含量葡萄糖 + H2O + O2 —葡萄糖氧化酶—H2O2 + 葡萄糖酸2 H2O2+ 4-氨基安替比林+酚—过氧化物酶—醌亚胺（红色）+ 4 H2O生成红色的醌亚胺在500nm波长就可以检测到。
一、分析方法的选择：常见的分析方法有:终点法,速率法。
1 终点法：一般分一点终点法和两点终点法，一点法其原理是经过一定反应时间后,反应达到平衡时进行的一点分析。
例如:溴甲酚绿法测定白蛋白均用该法。
对于反应快的物质选用一点终点分析法。
二点终点法，是用二点的吸光度之差进行计算。
2速率法：也叫速度法或连续监测法，多数用于酶活力的测定。
所有酶活力测定均选用速率法。
其原理是根据酶所催化反应的速率来测定酶活力的大小，实际操作时要注意反应的方向，正反应和负反应。
二、双波长测定中辅波长的选择：双波长的应用是为了消除样品中对测定有干扰的物质的影响,而实际应用中选择第二波长主要用于消除脂血、溶血、黄疸等的干扰。
例如:钼酸铵法测定无机磷,其测定波长为340ｎｍ,对于溶血样品,血红蛋白在340ｎｍ有较强吸收,其吸光度同380ｎｍ处吸光度相同,选用380ｎｍ作辅助波长,可消除溶血对测定的干扰。
一、诺华单人份核酸检测试剂参数
一、诺华单人份核酸检测试剂参数1.适用于核酸检测设备，试剂原理：转录介导扩增技术。
★2.试剂灵敏度：常规工作模式下： HIV-1：21.2 IU/ml、HCV: 5.4 IU/ml、HBV: 3.4 IU/ml★3.检测形式：检测系统能够在同一反应管内同时进行HBV DNA/HCV RNA/HIV-1 RNA三项核酸检测4.内置的过程控制：核酸检测试剂盒包含有内对照，能够监控核酸提取、扩增和检测全过程5.灵活的试管兼容性：检测试剂适合用于标本类型为血清以及EDTA、ACD、CPD、CPDA抗凝的血浆★6.全封闭系统：核酸提取、扩增、检测在同一密闭系统中进行，核酸纯化产物的转移无需人工干预7.扩增系统：扩增反应体系由仪器自动加样，检测试剂有防污染设计，降低污染发生★8.应急标本检测：检测系统能满足随时插入应急标本进行检测的需求。
9．检测模式：适用于单检或混样检测，对血站现有采供血流程应无影响。
★10.应急模式：单采血小板和应急标本必须实施单检模式，单采血小板和应急标本的判定由血液中心自行指定。
11.其他检测性能：针对HIV-1，具有两个或两个以上的检测区域。
二、BECKMAN COULTER丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（乳酸脱氢氨法）参数一、适用Beckman Coulter AU400分析仪二、试剂用途：定量测定人血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）三、技术参数1．试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。
2．储藏和稳定性：在2-8℃不开封储藏时，试剂可保持稳定到声明的失效期；开封后，在分析仪上储藏时，可保持稳定30天3.参与反应成分的最终浓度：Tris 缓冲液，pH：7.15 (37°C) 100 mmol/LL- 丙氨酸 500 mmol/L2-氧戊二酸盐 12 mmol/LLDH ≥ 1.8 kU/LNADH 0.20 mmol/L4、线性：在3-500U/L(0.05-8.33ukat/L)的浓度范围内，实验结果呈线性。
生化试剂SOP标准操作程序（魅力）
⽣化试剂SOP标准操作程序（魅⼒）ALT/GPT 丙氨酸氨基转移酶试剂盒临床意义：本试剂盒适⽤于体外临床检验，⽤于测定⼈⾎清中丙氨酸氨基转移酶的活⼒。
临床上，有许多疾病会导致⾎清中丙氨酸氨基转移酶活⼒增⾼。
如肝胆类疾病：包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎；⼼⾎管疾病：包括⼼肌梗塞、⼼肌炎、脑出⾎等。
⼀些药物和毒物也可以引起ALT活性升⾼：如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。
因此，⾎清丙氨酸氨基转移酶活⼒的测定可⽤于这些致病的诊断和监测，特别是⽤于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测⽅法原理：上海科华⽣物⼯程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1（国际临床化学委员会）推荐法为基础设计，采⽤两步法测定：丙氨酸氨基转移酶L-丙氨酸+ α-酮戊⼆酸-----------------------→丙酮酸+ L-⾕氨酸乳酸脱氢酶丙酮酸+ β-NADH + H+---------------→L-乳酸+ H2O + NAD+底物L-丙氨酸和α-酮戊⼆酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,⽣成丙酮酸和L-⾕氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,⽣成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降.在⼀定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与⾎清中丙氨酸氨基转移酶活⼒成正⽐。
样本：病⼈准备：应空腹取⾎。
样本类型：新鲜⽆溶⾎现象的⾎清或EDTA抗凝⾎浆。
最少样品量：0.2ml。
样本稳定性：⾎清中的ALT在2～8℃可稳定7天，不推荐使⽤冰冻保存的样本2。
仪器与试剂:仪器：魅⼒1800⽣化分析仪试剂：上海科华⽣物⼯程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒试剂准备：丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即⽤的液体双剂型，⽆需特殊准备。
试验⽤试管的直径在12～16mm。
试剂组份：参见试剂盒内说明书。
注意事项：1.此试剂为体外诊断⽤。
2.试剂有毒，不要⼊⼝，吞下有害，如误服（包括内部接触）应⽴即寻求医疗保护。
常用生化检测项目分析方法与参数设置
常用生化检测项目分析方法及参数设置一、常用生化检测项目分析方法举例1．终点法检测常用的有总胆红素（氧化法或重氮法）、结合胆红素（氧化法或重氮法）、血清总蛋白（双缩脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、总胆汁酸（酶法）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、总胆固醇（胆固醇氧化酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白胆固醇（直接测定法）、钙（偶氮砷Ⅲ法）、磷（紫外法）、镁（二甲苯胺蓝法）等。
以上项目中，除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外，其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法，包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用。
2．固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。
3．连续监测法对于酶活性测定一般应选用连续监测法，如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。
一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等，也可用连续监测法。
4．透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目，多数属免疫比浊法，载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗"O"、类风湿因子，以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。
二、分析参数设置分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等，其程序均已经固化在存储器里，用户不能修改。
各种测定项目的分析参数（analysisparamete）大部分也已设计好，存于磁盘中，供用户使用；目前大多数生化分析仪为开放式，用户可以更改这些参数。
生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道，由用户自己设定分析参数。
因此必须理解各参数的确切意义。
一、分析参数介绍（一）必选分析参数这类参数是分析仪检测的前提条件，没有这些参数无法进行检测。
1．试验名称试验名称（testcode）是指测定项目的标示符，常以项目的英文缩写来表示。
2．方法类型（也称反应模式）方法类型（assay）有终点法、两点法、连续监测法等，根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。
自动生化分析仪试验参数设置
COBAS常用波长：12个波段,从紫外线到红外线340~800nm
反应方向(Reaction Direction )
在一定反应时间内，吸光度是增大还是下降
表示方法
• • • • COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN INC/DEC INC/DEC Reaction Slope Reaction Direction Reaction Mode
试剂量（Reagents Volume ）
最小反应体积 ：在仪器光度读数用于结果计算时，反应液液 面高度不低于光度计光径最小体积 ，保证仪器的正确读 数和计算，也是仪器测定精密度和经济性的指标之一 设定原则 在单试剂测定中：样本与试剂的总体积不得少于此参数 在双试剂测定中： R1与样本的反应读数不纳入结果计算：R1加液量可不考虑 此参数，如连续监测法； R1与样本的反应读数纳入结果计算：应考虑它对结果的影 响，用于两点终点法和带样本空白的速率法
• 不同仪器波长的表示方式
主波长 COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN ABBOTT Wave(Main/ Wave(Main/ Wavelength pri Primary Wavelength Wavelength Primary 次波长 Sub) Sub) Wavelength sec Secondary Wavelength Wavelenght Secondary
试剂加入时间（Adding Time）
• 概念： COBAS和 HITACHI 第一试剂/第二试剂：试剂的成分的区别 R1/R2/R3/R4：试剂的加注时间，试剂一在样 本加入后即刻加入，试剂二可以在R2（1.5 分钟）或R3（5分钟）时加入
生化试剂sop
丙氨酸氨基转移酶测定试剂（ALT）（酶法）1. 检测原理本试剂采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐方法：丙氨酸+α-酮戊二酸−−→−ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+−−→−LDH L-乳酸+NAD++H2ONADH氧化成NAD+引起340nm处吸光度的下降，下降速率与样品中ALT活性成正比。
2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用肝素或EDTA（1mg/mL）作为抗凝剂2.4 标本的处理和储存：1血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，置洁净试管加盖低温保存。
2标本在2-8℃可稳定3天，避免溶血。
3．试剂3.1 试剂及配套品：3.1.1试剂：本科使用重庆中元生物技术有限公司ALT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂R1：Tris缓冲液NADH 100mmol/L 0.3mmol/L试剂R2：Tris缓冲液100mmol/Lα-酮戊二酸85mmol/LL-丙氨酸 800mmol/LLDH ≥8.5kU/L不同批号试剂盒中各组份不能互换。
3.1.2配套品：无配套品。
3.2 试剂的稳定性：1.原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
试剂的有效期为12个月。
2.试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天4：校准4.1校准血清：朗道复合校准品4.2校准方式：使用去离子水与校准血清两点定标。
生化试剂
常用生化试剂品名Tris：Tris(Hydroxymethyl)aminomethane三羟甲基氨基甲烷分子式: NH2C(CH2OH)3 分子量: 121.14TRIS是一种最常用的生物缓冲液，常配成PH值为6.8，7.4，8.0，8.8。
其PH 值随温度变化很大。
一般来说，温度每升高一度，PH值下降0.03。
EDTA：Ethylene Diamine Tetraacetic Acid乙二胺四乙酸分子式: C10H16N2O8 分子量: 292.248EDTA是化学中一种良好的配合剂，它有六个配位原子，形成的配合物叫做鳌合物，EDTA在配位滴定中经常用到，一般是测定金属离子的含量。
尿素：（脲; 碳酰胺; 碳酰二胺脲）Urea分子式: CH4N2O分子量: 60.05尿素易溶于水，在20℃时100毫升水中可溶解105克。
SDS：dodecyl sulfate, sodium salt十二烷基硫酸钠分子式: C12H25SO4Na 分子量: 288.38溶解性：溶于水，微溶于醇，不溶于氯仿、醚。
健康危害：对粘膜和上呼吸道有刺激作用，对眼和皮肤有刺激作用。
可引起呼吸系统过敏性反应。
SDS是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。
它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。
它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸：蛋白复合物。
在乳液聚合反应中，可充当两相溶液的乳化剂。
DTT：DL-Dithiothreitol二硫苏糖醇分子式为C4H10O2S2，分子量为154.25常用还原剂，有抗氧化作用，进口分装。
DTT和巯基乙醇相比，作用相似，但DTT的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。
DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。
巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。
这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验（如DNA在生物感应器中的固定）的效率；而在DNA 溶液中加入DTT，反应一段时间后除去，就可以降低DNA的二聚化。
全自动生化分析仪常用分析参数的设置
基本分析参数设置
2.次波长选择的原则
主、次波长选择模式三
③选择试剂空白的 吸收峰为次波长， 在反应液中待测物 浓度越大，剩余的 显色剂量越小，主 次波长的吸光度差 距越大，使“表观” 吸光度增大，提高 了检测灵敏度。
基本分析参数设置
3.双波长设置的应用 对于吸收曲线有重叠的单组分(次波长一般大于主波长100nm，原因也是考 虑降低脂浊干扰。因为脂浊的吸收光谱没有特异的吸收峰，波长越长，吸 光度越低。跟主波长相差100nm，主、次波长因脂浊引起的光吸收比较接 近是最主要的原因。
溶血、黄疸、脂浊、NADH的吸收光谱
ISO15189实验室认可系列培训讲座 辽宁中医药大学附属医院临床检验中心
收光谱重叠)或多组分(两种性质相近的组分所形成的反 应物吸收光谱重叠)样本、混浊样本(脂浊)以及背景吸收 较大的样本(溶血、黄疸)，由于存在很强的散射和特征 吸收，对待测组分的测定造成很大干扰。利用双波长吸 光光度法，可以从分析波长的吸光度信号中扣除来自次 波长的信号，消除上述各种干扰，求得待测组分的含量 。该法不仅简化了分析环节，还能提高分析方法的灵敏 度、选择性及测量的精密度。
500ul不等，样品量和试剂量的设置主要由样品体积分数 (SVF)来决定。 SVF是样品体积(Vs)与反应总体积(Vt)的比值，即SVF = Vs/Vt。 Vt包括反应系统中所用的样品体积、样品稀释液体积、试 剂(单试剂、双试剂或多试剂)体积、试剂稀释液体积之 和。
基本分析参数设置
同样的免疫比浊法次波长的选择，原则上亦是距离越远越好，因为 可以得到较高的灵敏度。但凝集比浊法，由于灵敏度太高，故主、 次波长选择非常接近。
基本分析参数设置
五、反应方向 反应方向有正向反应和负向反应两种。
常用生化试剂作用
常用生化试剂作用：1、蛋白酶K：能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白，在尿素和SDS中稳定。
一般工作浓度是50—100μg/ml，推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2。
2、SDS：十二烷基硫酸钠，溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中的核蛋白，SDS 还能与蛋白质结合而沉淀。
3、IPTG：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷，常用于蓝白斑筛选及IPTG 诱导的细菌内的蛋白表达等。
IPTG和乳糖的结构相似，所以它和乳糖一样，可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白的空间构像变化，四聚体解聚成单体，失去与操纵子特异性结合的能力，从而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。
与乳糖不同的是，IPTG不被β-半乳糖苷酶水解。
常与X-GAL一起用于蓝白斑筛选。
作用极强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定。
4、X-gal：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，是IPTG的显色试剂，在IPTG的催化下显蓝色。
常跟IPTG一起用与蓝白斑筛选。
5、G418：一种抗生素，对几乎所有的细胞都有毒性，是稳定转染最常用的选择试剂。
当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后，则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA，从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达，使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。
Ｇ418的这一选择特性，已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
6、DMSO：二甲基亚砜。
实验室常用于作液体层析溶剂，同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。
能溶于所有烷烃和烯烃。
7、曲拉通X-100：TritonX-100，用的细胞裂解液成分之一，在保护蛋白活性方面有一定作用，能力介于NP40和SDS之间，偏向于NP40。
8、NP-40：很温和的去垢剂，1%浓度的基本可以破坏掉胞膜，而对核膜破坏的作用弱，结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。
1生化试剂介绍
1生化试剂介绍生化试剂是一类用于生物化学、分子生物学、细胞生物学及其他生命科学研究领域的化学试剂。
它们一般用于检测、分析和测量生化过程中的分子、酶、蛋白质等，可用于生物标记、酶活性测定、DNA/RNA分离纯化、细胞培养、免疫分析等多个领域。
本文将对生化试剂的分类、功能以及常见应用进行详细介绍。
一、分类根据其功能与应用的不同，生化试剂可以分为许多不同的类别。
以下是一些常见的生化试剂分类：1.缓冲液和盐溶液：生化试剂常常用于调节酸碱度和离子浓度，以维持反应体系的平衡。
2.染料：用于检测和观察生物分子的染色试剂，如染蓝、染红等。
3.底物和试剂盒：用于测定特定酶活性的物质。
常见的底物有还原剂、显色剂等。
4.标准品和质控品：用于进行质量控制和标定仪器的标准物质。
5.抗体：特异性识别和结合特定抗原的蛋白质，广泛应用于免疫印迹、免疫组化等实验中。
6.酶：催化生物反应的蛋白质分子，如DNA酶、蛋白酶等。
7.DNA/RNA相关试剂：用于DNA/RNA的提取、纯化、扩增和测序等实验。
8.蛋白质相关试剂：用于蛋白质的提取、纯化、定量和研究。
二、功能与应用1.生物标记：如离子荧光染料、荧光素、生物素等，用于检测、定位和量化生物分子。
2.酶活性测定：通过添加特定的底物和试剂盒，测定酶的活性，以研究酶的性质和功能。
3.DNA/RNA提取与纯化：通过化学方法，可以从生物样本中提取DNA 或RNA，并经过纯化得到高质量的核酸样品。
4.细胞培养：提供细胞所需的培养基、添加剂和生长因子等，用于细胞的培养和增殖。
5.免疫分析：通过特异的抗体与抗原结合反应来检测和分析生物样本中的分子、蛋白质等。
6.分子诊断：通过分离、扩增和测序DNA/RNA，进行疾病的诊断、基因突变分析等。
三、常见应用生化试剂广泛应用于生命科学研究和医学诊断领域。
以下是一些常见的生化试剂应用：1.实验室研究：生化试剂常用于生物学、生物化学、分子生物学、遗传学等实验室的常规实验。
tmb显色试剂盒技术参数
tmb显色试剂盒技术参数
TMB显色试剂盒是一种常用的生化试剂盒，通常用于酶联免疫吸附实验（ELISA）等生化实验中。
它的技术参数包括但不限于以下几个方面：
1. 吸光度测量范围，TMB显色试剂盒的吸光度测量范围通常在450nm左右，这是因为TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）在这个波长下的吸光度较高。
2. 灵敏度，TMB显色试剂盒的灵敏度是指它能够检测到的最低浓度的分子或物质。
通常来说，TMB显色试剂盒的灵敏度在实验室条件下可以达到较低的浓度，这使得它在检测低浓度的生物分子时非常有用。
3. 稳定性，TMB显色试剂盒的稳定性是指它在常温下或特定储存条件下的保存时间和稳定性。
这一参数对于实验室的长期使用非常重要，因为稳定的试剂可以减少实验误差。
4. 使用方法，TMB显色试剂盒的使用方法包括试剂的配制、反应时间、反应温度等。
正确的使用方法可以确保实验结果的准确性
和重复性。
5. 包装规格，TMB显色试剂盒通常有不同的包装规格，包括不
同的试剂量、试剂瓶规格等。
这些信息对于实验室进行实验计划和
成本预算非常重要。
总的来说，TMB显色试剂盒的技术参数涉及到吸光度测量范围、灵敏度、稳定性、使用方法和包装规格等方面。
这些参数对于科研
人员和实验室来说都是非常重要的，因为它们直接影响着实验结果
的准确性和可重复性。
希望这些信息能够对你有所帮助。
1 生化 试剂 介绍
吸 光 度
从校准液（1）测定 到校准液（5）或（6）， 绘制出工作曲线。该工 作曲线是将校准液各点 的吸光度值用圆滑曲线 连接起来，校准曲线如 图所示:
STD(6) STD(5)
STD(4)
STD(3)
STD(2)
STD(1) C1 C2 C3 CA C4 C5 C6
某些速率法的反应线性较差，没有近乎直线的 反应平衡期或者这种平衡期很短，就需要使用两 点速率法来进行测定。
一、基本概念
两点速率法的反应示意图
吸 光 度 A
吸 光 度 A R1 S R2
R
S
t1
t2 t3
t4
时间t
t1 t2
t3
时间t
一、基本概念
关于测定方法的几个概念：
A、跟速率法（包括两点速率法）有关的 延迟时间：指试剂与样品混合后到检测开始之间的时间。一般用于速 率法。本段时间的作用是使样品和试剂温度等反应条件达到最佳状态， 进入反应稳定期。 读数时间：延迟时间过后开始进入读数期，记录有效吸光度变化的时 间。 B、跟终点法（包括两点终点法）有关的 终点时间：终点法试剂盒测定到达反应终点，吸光度不再变化的时间。 读数时间：终点法只有一个时间，默认从零时间开始，此时间必须大 于终点时间；两点终点法除了后面这个大于终点时间的点外，在加入 R2之前还有一个读点，这两个点之间的为读数时间。
一、基本概念
速率法的反应示意图
吸 光 度 A
吸 光 度 A R1 S R2
R
S
t1
t2 t3
t4
时间t
t1 t2
t3
时间t
1 生化 试剂 介绍
一、基本概念
6、试剂空白
试剂空白包括两个概念：空白吸光度和空白吸光度变化率 (1)空白吸光度 A、反应杯空白:在特定波长下，光通过以蒸馏水或空气 为反应体系所测得的吸光度值。 B、试剂空白:在各特定波长下，光通过以蒸馏水或生理 盐水为样品和相应测定项目试剂构成的反应体系所测得的 吸光度值。试剂空白对于试剂是否有效有重要意义，如： ALT试剂，若试剂空白小于1.000A（以蒸馏水为空白， 340nm波长，1cm光径）时，表明试剂已失效。
一、基本概念
终点法的反应示意图
吸 光 度 A
吸 光 度 A
R1 S t1
R2
R S
t2
t3
t4
反应时间t
t1
t2
t3
反应时间t
一、基本概念
（2）速率法 速率法又称连续监测法、动态法、动力学法。 此法是通过仪器，连续测定酶促反应过程中某 一反应产物或底物的浓度随时间变化的情况。在酶 反应的最适条件下，用物理、化学或酶促反应的分 析方法，在反应速度恒定期（零级反应期）来连续 观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变化， 引起吸光度的变化，以单位时间酶反应初速度计算 出酶活的大小或代谢物的浓度。
一、基本概念
（4） Logit-log3P非 线性法 适用于随浓度升高 而吸光度表现为收敛 的工作曲线，Logitlog3P（非线性法） 校准曲线如图所示:
一、基本概念
（5） Logit-log4P （非线性法） 适用于随浓度升 高而吸光度表现为 收敛 的工作曲线， Logit-log4P（非 线性法）校准曲线 如图所示:
一、基本概念
速率法的反应示意图
吸 光 度 A
化学试剂中ar、gr、cp、pt、表示什么意思
是按杂质含量的多少分：实验试剂：缩写为LR，又称四级试剂。
化学纯试剂：缩写为CP，又称三级试剂，一般瓶上用深蓝色标签。
分析纯试剂：缩写为AR，又称二级试剂，一般瓶上用红色标签。
保证试剂：缩写为GR，又称一级试剂，一般瓶上用绿色标签（又称优级纯）基准试剂：缩写为PT,专门作为基准物用，可直接配制标准溶液。
光谱纯试剂：缩写为SP，表示光谱纯净。
但由于有机物在光谱上显示不出，所以有时主成分达不到99.9%以上，使用时必须注意，特别是作基准物时，必须进行标定。
其他的有AAS 原子吸收光谱AR 分析纯试剂BC 生化试剂BP 英国药典BR 生物试剂BS 生物染色剂CP 化学纯CR 化学试剂EP 特纯FCP 层析用FMP 显微镜用FS 合成用GC 气相色谱GR 优级纯试剂HPLC 高压液相色谱Ind 指示剂IR 红外吸收光谱LR 实验试剂MAR 微量分析试剂NMR 核磁共振光谱OAS 有机分析标准PA分析用Pract 实习用PT 基准试剂Puriss 特纯Purum 纯SP 光谱纯Tech 工业用TLC 薄层色谱UP 超纯USP 美国药典UV 紫外分光光度纯第十三章：干燥通过本章的学习，应熟练掌握表示湿空气性质的参数，正确应用空气的H–I 图确定空气的状态点及其性质参数；熟练应用物料衡算及热量衡算解决干燥过程中的计算问题；了解干燥过程的平衡关系和速率特征及干燥时间的计算；了解干燥器的类型及强化干燥操作的基本方法。
二、本章思考题1、工业上常用的去湿方法有哪几种？态参数？11、当湿空气的总压变化时，湿空气H–I图上的各线将如何变化? 在t、H 相同的条件下，提高压力对干燥操作是否有利? 为什么?12、作为干燥介质的湿空气为什么要先经预热后再送入干燥器？13、采用一定湿度的热空气干燥湿物料，被除去的水分是结合水还是非结合水？为什么？14、干燥过程分哪几种阶段？它们有什么特征？15、什么叫临界含水量和平衡含水量？16、干燥时间包括几个部分？怎样计算？17、干燥哪一类物料用部分废气循环？废气的作用是什么？18、影响干燥操作的主要因素是什么？调节、控制时应注意哪些问题？三、例题例题13-1：已知湿空气的总压为101.3kN/m2 ,相对湿度为50%，干球温度为20o C。
参数设置步骤2000FR
TBA-2000FR全自动生化分析仪参数设置步骤
一、设置试剂名称及位置
点Reagent,点画面上方的R1,找一空位，双击，输入试剂名称，选择试剂类型，瓶子规格。
输入警戒体积。
R2设置同R1.
二、定标液架子的设置
C/C. 找一空行双击，输入定标液的名称，定标架子号，定标液类型，定标液水平。
三、设置项目名称，参数
点Assay，找一空格，出现设置画面，
outline画面输入项目序号，项目名称,通道序号。
Base画面：设置测试方法、主/副波长、读点时间、终点（速率）、样品量/试剂量及试剂位置等。
Calibration画面：设置定标方式、定标液量、定标次数、定标液浓度等。
四、组合的设置
Database画面，点patient order，点panel cofig ，点一空格，输入组合序号，组合名，选择组合项目。
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A1，延迟一定时间后读取吸光度A2，计算吸光度差值与标准比较求得结果。 如肌酐苦味酸法等。可消除内源性物质干扰。
生化试剂主要参数及意义
动力学法
一级动力学法：（两点速率法）样本与试剂反应不断消耗反应物，反应速度
不断减小，吸光度变化不断减小，在特定时间段内进行监测，该时间段内吸 光度升高或降低与样本浓度成正比，如同型半胱氨酸、总胆汁酸等。
生化试剂其他参数及意义
试剂吸光度范围(Linearity） 线性度不能超过设定界限，超限时说明吸光度的变化量之间已经不成 线性或说明底物不足，检测结果会变低。
试剂线性范围（Dynamic Range/Technical Limit） 与试剂/样本比值有关，超出范围的样本应增加样本量重测或样本稀释 后重测。
生化试剂其他参数及意义
前区检查限(Prozone Check Limt) 主要用于免疫比浊法项目，可根据项目要求选YES或NO，比较终点法 后两个读数点的差别，如果后一点比前一点的吸光度低，表示已经有 抗原过剩，样本应稀释后重测 方程式（Fomular） Y=aX+b a为截距，b为斜率。用于校正检测结果，一般a为1.000，b为0.000，
生化试剂主要参数及意义
测定波长（wavelength）： 不同生化分析仪具备不同的波长。可选择单波长或双波长。
主波长（main
wavelength/primary wavelength ）
根据待测物质在特定波长下具有最大吸收峰来选择主波长。
副波长（次波长sub
wavelength/second wavelength ）
生化试剂各机型参数确定
目录
生化试剂主要参数及意义 生化试剂其他参数及意义
各机型生化分析仪概括介绍
各机型参数特点
生化试剂主要参数及意义
生 化 试 剂 说 明 书 中 各 参 数 （ 例 ： 脂 肪 酶 ）
生化试剂主要参数及意义
项目名称 方法类型 反应方向 测定波长 测定温度 样本体积 试剂量 分析时间 校正方法
ABBOTT
Reaction Mode
Up/Down
各机型参数特点
不同机型测定波长
主波长
COBAS HITACHI OLYMPUS BECKMAN ABBOTT Wave(Main/ Wave(Main/ Wavelength pri Primary Wavelength Wavelength Primary
日 立 系 列
各机型生化分析仪概括介绍
Beckman CX5
Beckman LX20
各机型生化分析仪概括介绍
机型 试剂位 R1/R2 项目 速度 无 ISE 样本 (ul) R1 (ul) R2 (ul) 反应液 (ul)
Beckmam
CX4 CX5 CX7 CX9 LX20
24 24 24 24 41
小数位（Decimal Places） 主要根据项目参考范围的小数位进行设定，一般0-2位。
生化试剂其他参数及意义
双份界限（Duplicate Limit） 也称离散性，是同一个标准液两次测定吸光度的差值，表示试剂和仪 器的重复性,此值越小表示试剂和仪器的精密度越高 敏感性界限(Sensitivity Limit) 可以检测的最低吸光度值，也就是检测最低浓度的可靠性 第一标准吸光度界限(S1 Abs.limt) 通常指零浓度标准品的吸光度界限，在终点法和速率法中计算方式不 同
各机型参数特点
• 不同机型试剂加入相应时间(分钟) HITACHI R1 R2(1.5) R3(5) R4(9)
P800 C501 OLYMPUS ABBOTT
R1 R1 R1 R1
R2(1.5) R3(5) R4(9) R2(1.5) R3(5) R2(3.3) R2(5.1)
各机型参数特点
• 不同机型读点间隔时间及最大读点数
生化试剂其他参数及意义
反应过程吸光度界限(Absorbance Limit) 在动力学反应中,由于高浓度（活性）样本使底物耗尽，所测吸光度已 不可靠,使高浓度的样本测定值低很多,甚至为负值。为能正确反映测定 结果，需设置底物耗尽限(某一特定吸光度)，是在反应时间内反应没有 发生底物耗尽时所能达到的最小(反应曲线向下)或最大(反应曲线向上) 的吸光度值 ，该吸光度即为吸光度界限。可用于确保高浓度（活性） 样本结果的准确性。
ABBOTT Reaction defintion Rate /Flex Rate/End
各机型参数特点
不同机型反应方向
表示方法 可选择项
COBAS INC/DEC HITACHI INC/DEC OLYMPUS Reaction Slope BECKMAN Reaction Direction
INC/DEC INC/DEC +/Positive/Negative
生化试剂其他参数及意义
试剂吸光度上限、下限/试剂吸光度界限(OD Limt) 常用规定波长及光径下的吸光度值表示。终点法常在0点读数，连续监 测法常以反应监测起始点来判读该吸光度值。 可用于判断试剂质量。检测试剂空白时，若超过此参数的限值，则提 示试剂可能失效。 底物耗尽限额(substrate exhaust limit) 连续监测法或两点终点法时设置。 根据吸光度上升或下降设定MAX-OD/MIN-OD，吸光度超过设定界限 时，代表样品酶活非常高，底物消耗太快，所测得结果不能代表真实 酶活力。
48/48 48/48 48/48 48/48
38 48 48 48
400 800 800 1600 2640
2-50 2-50 2-50 1.6-
25-300 25-300 25-300 15-250 120-430 150-550
各机型生化分析仪概括介绍
各机型生化分析仪概括介绍
试剂位 机型 项目 （双） 速度 无 ISE 800 2400 86 32 49 36 800 360 360 200 600 86 800 1.5-35 20-270 样本 (ul) 2-35 20-270 7600D 7170S 7060 7080 7020 7150 7180 16 45/45 32/32 33/33 40 32/32 33/33 2-20 2-35 3-50 2-25 2-50 20-270 50-350 20-270 20-350 150-355 250-500 150-320 180-500 250120-300 150-380 R1 (ul) R2 (ul) 反应液 (ul) R1/R2 7600P 44
延迟时间（delay
time）
加入第二反应试剂后到第一个吸光度监测点开始的时间。即样本与反 应试剂（第二试剂）混匀开始至第一个吸光度选择点之间的时间。单 试剂一般设置为30s，双底物反应或酶类反应一般设置为1-3min。
连续监测时间（
continuous monitoring time）
在延迟时间后的零级反应开始，监测至少4个点（3个吸光度变化值）， 一般为1-2min。
24 29 33 33 70
225 600 900 900 800
3-25 3-69 3-25 3-25 3-25 200-327/6-75 225-325
系 列
各机型参数特点
不同机型分析方法
表示方法 常用选择项
COBAS Asaay Rate A/2Pont rate/1 Ponit/2 Point end HITACHI Assay code Rate A/2Pont rate/1 Ponit/2 Point end OLYMPUS Method RATE/FIXED/END BECKMAN Reaction type RATE1/2/END1/2
零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）样本与试剂反应，反应物
可匀速生成某个产物，如NADH，在特定波长下吸光度均匀的增大或减小，增 大或减小的速度与样本浓度呈正比。如碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等。
生化试剂主要参数及意义
一级动力学法：（两点速率法）
生化试剂主要参数及意义
零级动力学法：（连续监测法，用于酶活性监测）
读点间隔(秒) P800 18 C501 8 HITACHI 18 OLYMPUS 18 ABBOTT 17
BECKMAN 非连续性
最大读点数 34 70 35/68 27/14 33
生化试剂主要参数及意义
反应方向(response direction)
正向反应（UP/INC/+）：吸光度增加。
负向反应（DOWN/DEC/-）：吸光度下降。
测定温度 30℃、37℃、25℃ 样本体积（sample volum） 一般为2-35μl ，以0.1μ l步进。 试剂量（regengt volum） 一般为20-300μ l ，以1μ l步进。 不同机型生化分析仪的样本量及试剂量限制不同，样本与试剂可根据比例进行增 大或减少。
生化试剂主要参数及意义
项目名称(test name)： 常以项目的英文缩写来设置。 方法类型(assay/Method )（适用于仪器的方法）： 方法类型主要分为：终点法和动力学法
终点法 一点终点法：样本与试剂混匀一定时间后读取反应终点吸光度，如血糖氧化
酶法、总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法等。
淡蓝色字体标注参数设定时一般为机器默认。
各机型生化分析仪概括介绍
AU400 AU2700
AU640
AU480
各机型生化分析仪概括介绍
试剂位 R1/R2 项目 ( 双) 速度 无 ISE 样本 (ul) R1 (ul) R2 (ul) 反应液 (ul)
机型
AU
系 列
AU400 AU600 AU640 AU2700 AU5600