线性评价及方法可报告范围的确定张传宝
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验室已建立的验证患者试验结果可报告范围的计划要求更经常 性地校准验证。
评价仪器： 贝克曼、日立、Olympus AU 样本数5个 样本重复测定次数：5
验证1：校准线的斜率与1、截距与0无统计学差异，校准验证的测定 值在可接受范围内，分析检测系统的校准有效。
校准线的斜率与1或截距与0有统计学差异，但所有校准验证的测定 值在可接受的范围内，分析检测系统的校准有效.
偏倚（bias） +6 -1 0 -6 -11
% 误差 N/A -0.7% 0 -1.4% -2.0%
是以患者样本相同的方式检测已知浓度的材料证实在整个患者试验 结果可报告范围之内仪器或检测系统的校准情况（CLIA）。
包括至少最低（或零）值，中值和最大值接近范围的上限来验证实 验室检测系统试验结果可报告范围；
临床可报告范围（Clinically Reportable Range)是方法 可采用对标本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接 分析测量下的分析物值的范围。
临床有用性
可报告范围（Reportable Range）：实验室可建立或验 证仪器或检测系统测量相应的准确度实验结果值的范围。 （CLIA），也被称为线性范围 （Linear Range）
D．画出通过数据点的最佳直线给出头3个坐标更多权 重。
E．检查线性图，直观地作出可报告范围的决定。
混合物 混合物1: 0 混合物2: 25% 混合物3: 50% 混合物4: 75% 混合物5: 100%
均值 (Y) 6
138 278 411 545
理论值(X) 0
139 278 417 556
D2/2 总和39.05，平均值7.81；平方根2.8，相当 于总体的重复性（SD）；百分差值的SD 0.9%；
随机误差0.9%，分析误差一般小于2%（2SD）， 但是也有可能超过。
低、中、高浓度测定结果超过5%，结论：非线性。
偏差超过非线性误差（0.2）；决定舍去第6点，用1-5进行评价。如 果1-5符合要求，则其线性为4.65-15.4
0
5
5
100 100
0
200 200
0
300 300
0
400 390 -10
3
12 24
-34
40
500 470wenku.baidu.com-30
3
15 30
-60
50
线性范围可延伸到400mg/dL
A．X轴标记为0%, 25%, 50%, 75%和100%稀释物。
B．Y轴标记为基于平均值或试验检测范围的适当水平。
C．绘制【 (0%，混合物1均值), (25%，混合物2均 值), (50%，混合物3均值), (75%，混合物4均 值), (100%，混合物5均值)】坐标。
样本浓度
测定次数及结果
X1
Y1-1 Y1-2 Y1-3 Y1-4
X2
Y2-1 Y2-2 Y2-3 Y2-4
X3
Y3-1 Y3-2 Y3-3 Y3-4
X4
Y4-1 Y4-2 Y4-3 Y4-4
X5
Y5-1 Y5-2 Y5-3 Y5-4
实验室设定cv 2%；非线性5% 无明显离群点，重复测定数据间的偏差随浓度增加而增加。
关于“确认” (Validation)
方法学研究或方法产品性能研究 由方法建立者或产品生产者完成 给出主要方法性能： ―准确度(accuracy) ―精密度(precision) ―特异性(specificity) ―检测限和定量限(LOD and LOQ, "灵敏度") ―线性(linearity) ―耐变性(robustness) ... ...
X1: 低浓度混合血清，浓度接近或等于下限； X5: 高浓度混合血清，浓度等于或接近上限； X2: 3份X1 + 1份X5 X3: 2份X1 + 2份X5 X4: 1份X1 + 3份X5
全部实验和数据采集应在同一试验批（run）内完成。样
本随机排列。有显著携带污染时，应用空白隔开样本。每 个浓度样本重复测定4次。记录分析结果。
符合方法学性能，测量总误差满足方法规定的性能指标。
临床可报告范围（Clinically Reportable Range)是方法可采用对标 本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接分析测量下的分析物值 的范围。
临床有用性
可报告范围（Reportable Range）：实验室可建立或验证仪器或 检测系统测量相应的准确度实验结果值的范围。（CLIA）
t0.05,7=2.365
偏差小于0.2，在4.65-15.4范围内，符合线性要 求。
分析测量范围（Analytical Measurement Range）方法 直接测量标本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处 理等过程下的分析物值的范围。（CAP）
符合方法学性能，测量总误差满足方法规定的性能指 标。
范围，2-4次测定。
样本：混合病人血清、加入待测物的混合人血清、商品质控物或校准 物、水溶液等。避免干扰，尽量减少基质效应。高浓度样本可用说明 书指定稀释液稀释成系列低浓度样本。
评价的是理论值（实际浓度、相对浓度）与仪器给出的最终结果（而 非仪器内部的响应值）之间的线性关系。
采用足量的混合血清样本时，准备如下：
---陈文祥
关于验证 (Verification)
对主要方法性能的证实 在引入新方法时进行 对配套系统，一般验证下列指标： ―准确度(accuracy) ―精密度(precision) ―可报范围(reportable range) ―参考区间(reference interval) 对非配套系统，验证更为广泛，除上述指标外： ―分析特异性 ―分析灵敏度 ―任何其他必要指标
至少每6个月进行一次，及不论何时出现下列情况时：
试剂批号的改变，除非实验室能证实并没有影响用于报告患者试 验结果的范围，以及室内质控值并没有受到试剂批号改变的影 响。
进行了重大的保养维护或关键部件的替换，可能影响试验性能。
室内质控出现异常的趋势或偏移，或超出实验室的可接受界限， 及其他评价和纠正方法未能识别和纠正的问题。
将每个浓度4次按从大到小排列（Yi-1到Yi-4) 计算极差 D = Yi-1 –Yi-4 计算 D1= (Yi-1-Yi-2)/D 计算 D4= (Yi-3-Yi-4)/D D1或D4如果大于0.765（0.05)或0.889（0.01）则该点为 离群点；
以分析物浓度为X轴，测定结果为Y轴，绘制X-Y线性图：Y = aX + b，目测或进行统计学分析，判断是否符合要求。
[The U.S. CLIA]
---陈文祥
线性范围（Linear Range)是指系统最终的输出值（浓度或活性）与 被分析物的浓度成正比的范围。
分析测量范围（Analytical Measurement Range）方法直接测量标 本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处理等过程下，测量结果 总误差符合要求的分析物浓度的范围。（CAP）
数据 mg/dL
指定值
测定值
均值
0
0
5
10
5
100
95
100
105
100
200
200
195
205
200
300
310
300
290
300
400
380
390
400
390
500
470
460
480
470
y轴为均值与x轴为指定值的图形
y轴为均值与x轴为指定值的图形
指定值 均值 估计偏差 给定CV% S 2S TE(|bias|+2s) TEa
张传宝 卫生部临床检验中心 cbzhang@nccl.org.cn
NCCLS EP6-A2 ：Evaluation of Linearity of Quantitative Analytical Methods; Approved Guide-Second Edition
《临床检验方法确认与性能验证》P153
也称：（分析）测量范围。
测量程序可给出测量结果（数值）、由测量低限和 测量高限构成的闭区间；
在此区间内，测量总误差满足方法规定的性能指 标。
设备熟悉期：在控、校准、样本准备等；
注意生物安全防护；
样本数量：
证明（Demonstration）：5-7个样本，覆盖线性范围，2次测定； 确认（Validation): 7-9个样本，覆盖线性范围，2-3次测定； 建立（ Establishment）：9-11个样本，超出20-30%预期线性
浓度水平：5个（或以上）； 材料：标准溶液、厂家或者PT机构提供的线性材料；（混
合）患者样本、添加分析物；
稀释液：水、生理盐水、牛蛋白或者血清白蛋白溶液、低 浓度样本、空白血清。
制备稀释物的程序：如前述，高低浓度样本比例混合；
重复测定次数：3次
数据分析：绘图，手工绘制通过所有点的最佳直线，如果 不能通过所有点，应首先通过较低浓度点；对于直线不通 过的点，估算非线性的系统误差。将系统误差与该浓度的 预期随机误差（2s）之和与TEa相比较。
一般要求：实验人员必须熟练掌握仪器操作和维护程序、 样本准备方法和校准。
样本浓度 X1 X2 X3 X4 X5
测定次数及结果
Y1-1 Y2-1 Y3-1 Y4-1 Y5-1
Y1-2 Y2-2 Y3-2 Y4-2 Y5-2
Y1-3 Y2-3 Y3-3 Y4-3 Y5-3
Y1-4 Y2-4 Y3-4 Y4-4 Y5-4
校准线的斜率与1、截距与0无统计学差异，但校准验证测定值至少
有一个超过了可接受范围，分析检测系统校准无效。反映出有随机误 差
校准线的斜率与1或截距与0有统计学差异，校准验证测定值至少有 一个超出可接受范围，分析检测系统的校准无效。反映出有系统误差
Xx.xxx 理论浓度-试剂浓度的线性
在制造商给定的线性范围内（10-1000mmol/L) 范围内，相关系数>0.9975.
评价仪器： 贝克曼、日立、Olympus AU 样本数5个 样本重复测定次数：5
验证1：校准线的斜率与1、截距与0无统计学差异，校准验证的测定 值在可接受范围内，分析检测系统的校准有效。
校准线的斜率与1或截距与0有统计学差异，但所有校准验证的测定 值在可接受的范围内，分析检测系统的校准有效.
偏倚（bias） +6 -1 0 -6 -11
% 误差 N/A -0.7% 0 -1.4% -2.0%
是以患者样本相同的方式检测已知浓度的材料证实在整个患者试验 结果可报告范围之内仪器或检测系统的校准情况（CLIA）。
包括至少最低（或零）值，中值和最大值接近范围的上限来验证实 验室检测系统试验结果可报告范围；
临床可报告范围（Clinically Reportable Range)是方法 可采用对标本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接 分析测量下的分析物值的范围。
临床有用性
可报告范围（Reportable Range）：实验室可建立或验 证仪器或检测系统测量相应的准确度实验结果值的范围。 （CLIA），也被称为线性范围 （Linear Range）
D．画出通过数据点的最佳直线给出头3个坐标更多权 重。
E．检查线性图，直观地作出可报告范围的决定。
混合物 混合物1: 0 混合物2: 25% 混合物3: 50% 混合物4: 75% 混合物5: 100%
均值 (Y) 6
138 278 411 545
理论值(X) 0
139 278 417 556
D2/2 总和39.05，平均值7.81；平方根2.8，相当 于总体的重复性（SD）；百分差值的SD 0.9%；
随机误差0.9%，分析误差一般小于2%（2SD）， 但是也有可能超过。
低、中、高浓度测定结果超过5%，结论：非线性。
偏差超过非线性误差（0.2）；决定舍去第6点，用1-5进行评价。如 果1-5符合要求，则其线性为4.65-15.4
0
5
5
100 100
0
200 200
0
300 300
0
400 390 -10
3
12 24
-34
40
500 470wenku.baidu.com-30
3
15 30
-60
50
线性范围可延伸到400mg/dL
A．X轴标记为0%, 25%, 50%, 75%和100%稀释物。
B．Y轴标记为基于平均值或试验检测范围的适当水平。
C．绘制【 (0%，混合物1均值), (25%，混合物2均 值), (50%，混合物3均值), (75%，混合物4均 值), (100%，混合物5均值)】坐标。
样本浓度
测定次数及结果
X1
Y1-1 Y1-2 Y1-3 Y1-4
X2
Y2-1 Y2-2 Y2-3 Y2-4
X3
Y3-1 Y3-2 Y3-3 Y3-4
X4
Y4-1 Y4-2 Y4-3 Y4-4
X5
Y5-1 Y5-2 Y5-3 Y5-4
实验室设定cv 2%；非线性5% 无明显离群点，重复测定数据间的偏差随浓度增加而增加。
关于“确认” (Validation)
方法学研究或方法产品性能研究 由方法建立者或产品生产者完成 给出主要方法性能： ―准确度(accuracy) ―精密度(precision) ―特异性(specificity) ―检测限和定量限(LOD and LOQ, "灵敏度") ―线性(linearity) ―耐变性(robustness) ... ...
X1: 低浓度混合血清，浓度接近或等于下限； X5: 高浓度混合血清，浓度等于或接近上限； X2: 3份X1 + 1份X5 X3: 2份X1 + 2份X5 X4: 1份X1 + 3份X5
全部实验和数据采集应在同一试验批（run）内完成。样
本随机排列。有显著携带污染时，应用空白隔开样本。每 个浓度样本重复测定4次。记录分析结果。
符合方法学性能，测量总误差满足方法规定的性能指标。
临床可报告范围（Clinically Reportable Range)是方法可采用对标 本的稀释、浓缩或者其他预处理用于扩展直接分析测量下的分析物值 的范围。
临床有用性
可报告范围（Reportable Range）：实验室可建立或验证仪器或 检测系统测量相应的准确度实验结果值的范围。（CLIA）
t0.05,7=2.365
偏差小于0.2，在4.65-15.4范围内，符合线性要 求。
分析测量范围（Analytical Measurement Range）方法 直接测量标本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处 理等过程下的分析物值的范围。（CAP）
符合方法学性能，测量总误差满足方法规定的性能指 标。
范围，2-4次测定。
样本：混合病人血清、加入待测物的混合人血清、商品质控物或校准 物、水溶液等。避免干扰，尽量减少基质效应。高浓度样本可用说明 书指定稀释液稀释成系列低浓度样本。
评价的是理论值（实际浓度、相对浓度）与仪器给出的最终结果（而 非仪器内部的响应值）之间的线性关系。
采用足量的混合血清样本时，准备如下：
---陈文祥
关于验证 (Verification)
对主要方法性能的证实 在引入新方法时进行 对配套系统，一般验证下列指标： ―准确度(accuracy) ―精密度(precision) ―可报范围(reportable range) ―参考区间(reference interval) 对非配套系统，验证更为广泛，除上述指标外： ―分析特异性 ―分析灵敏度 ―任何其他必要指标
至少每6个月进行一次，及不论何时出现下列情况时：
试剂批号的改变，除非实验室能证实并没有影响用于报告患者试 验结果的范围，以及室内质控值并没有受到试剂批号改变的影 响。
进行了重大的保养维护或关键部件的替换，可能影响试验性能。
室内质控出现异常的趋势或偏移，或超出实验室的可接受界限， 及其他评价和纠正方法未能识别和纠正的问题。
将每个浓度4次按从大到小排列（Yi-1到Yi-4) 计算极差 D = Yi-1 –Yi-4 计算 D1= (Yi-1-Yi-2)/D 计算 D4= (Yi-3-Yi-4)/D D1或D4如果大于0.765（0.05)或0.889（0.01）则该点为 离群点；
以分析物浓度为X轴，测定结果为Y轴，绘制X-Y线性图：Y = aX + b，目测或进行统计学分析，判断是否符合要求。
[The U.S. CLIA]
---陈文祥
线性范围（Linear Range)是指系统最终的输出值（浓度或活性）与 被分析物的浓度成正比的范围。
分析测量范围（Analytical Measurement Range）方法直接测量标 本，而不需要任何的稀释、浓缩或者其它预处理等过程下，测量结果 总误差符合要求的分析物浓度的范围。（CAP）
数据 mg/dL
指定值
测定值
均值
0
0
5
10
5
100
95
100
105
100
200
200
195
205
200
300
310
300
290
300
400
380
390
400
390
500
470
460
480
470
y轴为均值与x轴为指定值的图形
y轴为均值与x轴为指定值的图形
指定值 均值 估计偏差 给定CV% S 2S TE(|bias|+2s) TEa
张传宝 卫生部临床检验中心 cbzhang@nccl.org.cn
NCCLS EP6-A2 ：Evaluation of Linearity of Quantitative Analytical Methods; Approved Guide-Second Edition
《临床检验方法确认与性能验证》P153
也称：（分析）测量范围。
测量程序可给出测量结果（数值）、由测量低限和 测量高限构成的闭区间；
在此区间内，测量总误差满足方法规定的性能指 标。
设备熟悉期：在控、校准、样本准备等；
注意生物安全防护；
样本数量：
证明（Demonstration）：5-7个样本，覆盖线性范围，2次测定； 确认（Validation): 7-9个样本，覆盖线性范围，2-3次测定； 建立（ Establishment）：9-11个样本，超出20-30%预期线性
浓度水平：5个（或以上）； 材料：标准溶液、厂家或者PT机构提供的线性材料；（混
合）患者样本、添加分析物；
稀释液：水、生理盐水、牛蛋白或者血清白蛋白溶液、低 浓度样本、空白血清。
制备稀释物的程序：如前述，高低浓度样本比例混合；
重复测定次数：3次
数据分析：绘图，手工绘制通过所有点的最佳直线，如果 不能通过所有点，应首先通过较低浓度点；对于直线不通 过的点，估算非线性的系统误差。将系统误差与该浓度的 预期随机误差（2s）之和与TEa相比较。
一般要求：实验人员必须熟练掌握仪器操作和维护程序、 样本准备方法和校准。
样本浓度 X1 X2 X3 X4 X5
测定次数及结果
Y1-1 Y2-1 Y3-1 Y4-1 Y5-1
Y1-2 Y2-2 Y3-2 Y4-2 Y5-2
Y1-3 Y2-3 Y3-3 Y4-3 Y5-3
Y1-4 Y2-4 Y3-4 Y4-4 Y5-4
校准线的斜率与1、截距与0无统计学差异，但校准验证测定值至少
有一个超过了可接受范围，分析检测系统校准无效。反映出有随机误 差
校准线的斜率与1或截距与0有统计学差异，校准验证测定值至少有 一个超出可接受范围，分析检测系统的校准无效。反映出有系统误差
Xx.xxx 理论浓度-试剂浓度的线性
在制造商给定的线性范围内（10-1000mmol/L) 范围内，相关系数>0.9975.