毒理学基础实验设计.
毒理学实验报告
毒理学实验报告毒理学实验报告引言：毒理学是研究毒物对生物体产生的有害效应的科学。
毒理学实验是评估和研究毒物对生物体的毒性的重要手段之一。
本文将介绍一项关于某种化学物质的毒理学实验。
实验目的：本实验的目的是评估化学物质X对小鼠的急性毒性和慢性毒性，并研究其可能的致癌性。
实验设计：1. 急性毒性实验：将实验小鼠分为不同剂量组和对照组，分别给予不同剂量的化学物质X。
观察小鼠在给药后的行为、体重变化、死亡情况等指标，以评估化学物质X的急性毒性。
2. 慢性毒性实验：将实验小鼠分为长期接触组和对照组，长期给予化学物质X。
观察小鼠在长期接触后的行为、体重变化、器官病变等指标，以评估化学物质X的慢性毒性。
3. 致癌性实验：将实验小鼠分为不同剂量组和对照组，长期给予化学物质X。
观察小鼠在长期接触后的肿瘤发生情况，以评估化学物质X的致癌性。
实验结果：1. 急性毒性实验结果显示，高剂量组的小鼠在给药后出现明显的中毒症状，如食欲减退、运动能力下降等。
部分小鼠在给药后短时间内死亡。
低剂量组的小鼠则没有出现明显的中毒症状，但体重增长速度较对照组较慢。
2. 慢性毒性实验结果显示，长期接触化学物质X的小鼠在行为上出现明显的异常，如活动减少、毛发脱落等。
体重增长速度较对照组明显减慢。
解剖观察发现，部分小鼠出现肝脏、肾脏等器官的病变。
3. 致癌性实验结果显示，长期接触高剂量化学物质X的小鼠中出现了肿瘤的发生。
肿瘤种类包括肺癌、肝癌等。
低剂量组和对照组的小鼠中未观察到肿瘤的发生。
讨论：根据实验结果，可以得出以下结论：1. 化学物质X对小鼠具有急性毒性和慢性毒性。
高剂量给药会导致小鼠出现明显的中毒症状和死亡，低剂量给药会导致小鼠体重增长速度减慢。
2. 长期接触化学物质X会引起小鼠行为异常、体重减慢和器官病变。
这表明化学物质X对小鼠的慢性毒性较明显。
3. 长期接触高剂量化学物质X会增加小鼠发生肿瘤的风险，表明化学物质X可能具有致癌性。
结论：本实验结果表明，化学物质X对小鼠具有急性毒性、慢性毒性和致癌性。
毒理学实验基础
11
毒理学实验的原则与局限性
第二，在毒理学试验中，为了寻求毒作用的靶器官，并能在相对少 量的动物上就能得到剂量-反应或剂量-效应关系，往往选用较大的 染毒剂量，这一剂量通常要比人实际接触的剂量大得多。有些化学 物在高剂量和低剂量的毒性作用规律并不一定一致，如大剂量下出 现的反应有可能是由于化学物在体内超过了机体的代谢能力，这就 存在高剂量向低剂量外推的不确定性。
6
毒理学实验的原则与局限性
第三，成年的健康（雄性和雌性未孕）实验动物和人可能的暴露途 径是基本的选择。成年的健康（雄性和雌性未孕）实验动物是为了 使实验结果具有代表性和可重复性。以成年的健康（雄性和雌性未 孕）实验动物作为一般人群的代表性实验模型，而将幼年和老年动 物、妊娠的雌性动物疾病状态作为特殊情况另作研究。这样可降低 实验对象的多样性，减少实验误差。
3．确定毒作用的靶器官
确定受试物有害作用的靶器官，是毒理学研究的重要目的，以阐 明受试物毒作用的特点，并为进一步的机制研究和毒性防治提供线 索。
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毒理学毒性评价试验的基本目的
4．确定损害的可逆性
一旦确认有害作用存在，就应研究停止接触后该损害是否可逆和 消失，器官功能是否能恢复，还是像化学致癌作用那样停止接触后 损害继续发展？毒性的可逆性关系到对人的危害评价，如果受损的 器官组织能够修复并恢复正常功能，则可能接受较高危险性的接触 水平。
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实验动物的选择与管理及受试物样品的准备
实际上没有一种实验动物完全符合上述物种选择的原则，目前常规 选择物种的方式是利用两个物种，一种是啮齿类，另一种是非啮齿 类。常用实验动物的生物学和生理学参数详见表1。系统毒性研究 最常用的啮齿类是大鼠和小鼠，非啮齿类是犬。豚鼠常用于皮肤刺 激试验和致敏试验，兔常用于皮肤刺激试验和眼刺激试验。遗传毒 理学试验多用小鼠，致癌试验常用大鼠和小鼠，致畸试验常用大鼠、 小鼠和兔。迟发性神经毒性试验常用母鸡。
《毒理学实验基础》课件
通过统计图表（如柱状图、折线图、散点 图等）直观地展示实验数据和分析结果。
05
毒理学实验的应用与展望
毒理学实验在药物研发中的应用
药物安全性评价
毒理学实验是药物研发过程中评 估药物安全性的重要手段，通过 动物实验观察药物对机体的毒性 作用，为新药上市提供安全性依
据。
药物作用机制研究
毒理学实验可以帮助研究药物的 作用机制，了解药物在体内的代 谢、转化和毒性作用机制，为新
生态风险评估
毒理学实验可以帮助评估人类活 动对生态环境的潜在风险，预测 污染物对生物多样性和生态平衡 的影响，为环境保护和可持续发 展提供支持。
环境修复与治理
毒理学实验可以用于环境修复与 治理过程中，研究生物修复技术 的有效性，评估治理措施对环境 的影响，提高环境治理的效果。
毒理学实验的发展趋势与展望
实验动物的选择
实验动物种类
01
选择适合的实验动物种类，如小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等，以
满足实验需求。
实验动物品系
02
根据实验目的和要求，选择不同品系的实验动物，以确保实验
结果的准确性和可靠性。
实验动物年龄与性别
03
根据实验目的和要求，选择不同年龄和性别的实验动物，以确
保实验结果的准确性和可靠性。
染毒方法与途径
盲法原则
实验过程中应保持盲态，避免主观偏见对实 验结果的影响。
实验数据的收集与整理
数据记录
准确、完整地记录实验数据，包括实验对象的基本信息、实验条件、观察指标等。
数据整理
对实验数据进行分类、排序、筛选等处理，使其更易于分析和解释。
数据核对
对实验数据进行核对，确保数据的准确性和完整性。
数据保密
03第四章-毒理学实验基础
(3)封闭群动物：指在5年以上不从外部引进新
血缘，仅由同一品系的动物在固定场所保存繁 殖的动物群. 具有一定程度的遗传学差异. 昆明种小鼠、 NIH小鼠、LACA小鼠、SD大鼠、 青紫蓝兔、新西兰兔等均属封闭群动物.
毒理学实验结果评价
结果评价需要解决的问题 是否具有统计学意义 是否具有生物学意义 是否具有毒理学意义
统计学意义和生物学意 义的相关p131表6-6
（1）纵向比较：剂量-反应关系； （2）横向比较：其它相关参数是否改变； （3）与历史对照比较
九、优良实验室规范 Good Laboratory Practice-GLP
制备成一定剂型：水溶液、油溶液、混悬液.
六、毒理学实验设计要点
一、体内毒理学试验设计
剂量分组—以获得剂量-反应关系，确认受试物 与毒作用的关系 ： 至少三个剂量组（高、中、 低）；设对照组（阳性、阴性、未处理对照、 历史性对照）
各组动物数：实验目的和设计、统计学要求
试验期限： 由实验目的和所用动物种或品系决 定：急毒为一次或24h内多次染毒观察 14天，亚 慢性规定持续至动物寿命的10%，慢性实验、致 癌实验为持续至动物寿命的大部分。
六、毒理学实验设计要点
二、体外毒理学试验设计
溶解性测试：在实验测试期间，受试物溶解性可 能改变，起始和结束时评价溶解性具有意义； 最高剂量推荐：高剂量会影响渗透压引发损伤， 上限为：动物细胞 10mmol/L 或 5mg/ml; 细菌实验 5mg/平板。毒性物应有毒效应和致死率。
食品科学毒理学实验教案
食品科学毒理学实验教案一、实验目的1. 让学生了解和掌握毒理学的基本概念、原理和方法。
2. 培养学生对食品安全性的认识，提高防范意识。
3. 通过对食品中毒理学实验的学习，使学生能够识别和判断食品安全风险。
二、实验原理1. 毒理学基本概念：毒理学是研究外源化学物质对生物体产生有害效应的科学。
2. 食品安全性评价：通过对食品中化学污染物、微生物等有害因素的检测和评估，确定食品安全性。
3. 实验方法：主要包括急性毒性实验、慢性毒性实验、遗传毒性实验等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：实验动物（如小鼠、大鼠）、食品样品、试剂等。
2. 实验仪器：显微镜、离心机、分析天平等。
四、实验步骤1. 急性毒性实验：（1）准备实验动物，对其进行体重测量和分类。
（2）将食品样品配制成不同浓度，分别给予实验动物。
（3）观察实验动物的食欲、活动状况、死亡情况等，记录数据。
（4）对实验数据进行统计分析，得出急性毒性LD50值。
2. 慢性毒性实验：（1）准备实验动物，对其进行体重测量和分类。
（2）将食品样品配制成不同浓度，分别给予实验动物。
（3）观察实验动物的生活状况、体重变化、病理变化等，记录数据。
（4）对实验数据进行统计分析，评估慢性毒性影响。
3. 遗传毒性实验：（1）准备实验材料，如细菌、细胞等。
（2）将食品样品配制成不同浓度，分别处理实验材料。
（3）观察实验材料的遗传变异情况，如突变频率、基因损伤等。
（4）对实验结果进行统计分析，评估遗传毒性影响。
五、实验结果与分析1. 通过对急性毒性实验数据的分析，得出食品样品的急性毒性LD50值。
2. 分析慢性毒性实验数据，评估食品样品对实验动物长期健康的影响。
3. 分析遗传毒性实验结果，判断食品样品是否具有遗传毒性。
注意事项：1. 实验过程中要严格遵守实验室规定，确保实验安全。
2. 对待实验动物要有人道主义精神，确保其福利。
3. 实验数据要真实可靠，避免误差。
1. 实验报告内容：（1）实验目的（2）实验原理（3）实验材料与仪器（4）实验步骤（5）实验结果与分析（6）讨论与结论（7）参考文献2. 实验报告格式：（1）食品科学毒理学实验报告（2）作者：实验者姓名（3）日期：实验完成日期（4）单位：实验所在学校或研究机构七、实验考核与评价1. 实验考核内容：（1）实验操作技能（3）实验结果分析与讨论2. 实验考核方式：（1）实验操作过程观察：占比30%（2）实验报告评分：占比40%（3）实验结果分析与讨论：占比30%八、实验拓展与研究1. 拓展方向：（1）食品毒理学在食品安全评价中的应用（2）新型食品毒性检测技术研究（3）食品安全与健康的关系2. 研究方法：（1）文献综述：查阅相关领域的研究成果和进展。
毒理学实验方案
毒理学实验方案一、实验目的本实验的目的是通过现代毒理学常用的实验方法和技术，了解化学物质对生物体的毒性作用，探究毒物的剂量-效应关系，为毒物的风险评估和毒理学研究提供实验基础。
二、实验原理1. 毒理学基本概念毒理学是研究外源性物质对生物体的有害作用及其机理的学科。
毒性是指有害物质与生物体接触后引起的生物学、生化学或药理学的异常反应。
毒力则是指毒物对生物体的损害能力。
2. 毒物的剂量-效应关系毒物的剂量-效应关系是指毒物剂量与生物体效应之间的关系。
根据剂量-效应曲线，可以推断毒物的最低有效剂量（LDD）和最大耐受剂量（MTD），以及剂量引起半最大效应（ED50）等参数。
3. 毒理学实验方法（1）急性毒性试验：通过给小鼠、大鼠等动物一次性或短期高剂量的毒物暴露，观察其致死率和临床毒理学表现，确定毒物的急性毒性。
（2）亚急性和慢性毒性试验：通过长期低剂量的毒物暴露，观察其对生物体的慢性毒性。
常用的方法包括亚急性口服试验、亚急性皮肤接触试验和慢性吸入试验。
（3）遗传毒性试验：通过检测毒物对遗传物质（DNA和染色体）的损害来评估毒物的遗传毒性。
常用的方法包括热休克试验、微核试验和染色体畸变试验。
三、实验步骤1. 实验前准备（1）选择合适的实验动物，如小鼠、大鼠等。
（2）准备毒物溶液，确定不同浓度的毒物。
（3）配制实验动物的饲料和饮水，保证其营养和水分的摄入。
2. 实验操作（1）急性毒性试验：①将实验动物按随机分组的原则分成不同剂量组和对照组。
②给实验动物灌胃或注射不同剂量的毒物。
③观察实验动物的致死率和临床表现，如体重变化、食欲、精神状态等。
（2）亚急性和慢性毒性试验：①将实验动物按随机分组的原则分成不同剂量组和对照组。
②将不同浓度的毒物溶液涂抹在实验动物的皮肤上，或使实验动物吸入不同浓度的毒物。
③观察实验动物的生长发育、行为、生殖功能等方面的变化，同时进行临床化验和病理学检查。
（3）遗传毒性试验：①将实验动物按随机分组的原则分成不同剂量组和对照组。
实习一 毒理学动物实验基础
实习一毒理学动物实验基础【实验设计的原则】毒理学作为一门动物实验课程，应该遵循动物实验中对照、重复和随机三个基本原则。
【不成文原则】1、保护好自己最重要。
2、经典的步骤只是提供一个符合的大多数人习惯的参考，具体实验时每个人可按照自己的习惯以及现实有的条件来完成操作，只要能够按要求完整地实现相关的操作目的即可。
【实验动物】大鼠（价格低廉，同时相比小鼠，大鼠的生理生化过程与人类较为接近，故在毒理学实验中常用）【大鼠的捕捉及固定】大鼠的门齿很长，在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤,所以,不要突然袭击式地去抓它，取用时应轻轻抓住其尾巴后提起，置于实验台上，用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内，这样即可进行尾静脉取血或注射。
如要作腹腔注射或灌胃等操作时，实验者应戴上手套(有经验者也可不戴)，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾巴尖端皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤，并将大鼠固定在左手中，右手即可进行操作。
【大鼠性别的鉴定】动物性别不同对毒物的敏感性也不同，因此，要根据实验要求选择性别，一般实验如对性别无特殊要求者，以选用雌雄动物各半。
大鼠、小鼠主要以肛门与生殖空间的距离区分，间距大者为雄性，小者为雌性。
成年雄鼠卧位时可见到睾丸，雌性在腹部可见乳头。
【实验动物的编号及标记方法】好的标记应达到清晰、耐久、简便适用的要求。
常用的方法有化学染色法，耳缘剪口法或打小孔法，挂牌法及烙印法。
1. 化学染色法: 染色标记法是用毛笔或棉签蘸取化学药品，在实验动物体表不同部位涂上斑点，以示不同编号。
常用染色液：3％～5％的苦味酸溶液(染成黄色)；0.5％的中性品红溶液(染成红色)（1）用一种染色剂染动物的不同部位，颜色可标记1～10号（10号不标记）。
如图：（2）若用两种颜色的染液配合使用，其中一种颜色代表个位数，另一种颜色代表十位数，可编到99号。
例如要标记12号，就可以在左前腿涂上红色，左腹部涂上黄色。
毒理学基础案例讨论（二）
毒理学基础案例讨论(二)【目的要求】1.掌握致畸、致癌、致突变的基本概念。
2.熟悉生殖和发育毒性的评价方法【案例1】上世纪60年代初,欧洲各国陆续发生了一种可怕的现象:许多刚出生的婴儿出现一种罕见的畸形,他们的手脚比正常人短,甚至根本没有,很像海豹的鳍足, 这种症状被称为海豹肢症。
1957年到1962年间,联邦德国就有5500名海豹肢症患儿出生,英国则高达8000多名。
恐慌在蔓延,人们急切地寻找着其中的原因。
此时,澳大利亚的产科医生威廉·麦克布里德也发现了类似的患儿。
经调查,相关产妇都曾服用过早期妊娠止吐药物沙利度胺(即反应停) 。
他的第一反应就是两者肯定有内在联系,深入的调查更是证实了他的猜想。
1961年,英国著名杂志《柳叶刀》刊登了威廉的来信。
信中指出,反应停是导致海豹肢症的罪魁祸首,海豹肢症患儿是药物检测失控带来的灾难性后果。
【问题讨论1】 1. 什么是生殖毒性？2. 什么是发育毒性？发育毒性有哪些具体的表现？3. 出生缺陷包括哪些？“反应停”在1957年作为镇静催眠剂上市。
美国一家小制药公司梅里尔公司获得“反应停”的经销权，梅里尔公司研究过“反应停”对怀孕大鼠和孕妇的影响，并没有发现异常。
人们后来才知道，大鼠和人不一样，体内缺少一种把“反应停”转化成有害异构体的酶，不会引起畸胎。
“反应停”的副作用则发生于怀孕初期（怀孕前三个月），即婴儿四肢形成的时期，梅里尔公司所试验的孕妇都是怀孕后期的。
经过调查证实，母亲从停止月经算起，34-54天之内，服用此药后，迟早会出现各种不同的症状。
基因上的生命密码在正常情况下，手脚的长度，以及5个手指等都应当按照指令有规律地形成。
可是反应停能使这种指令在某一部位受到障碍，其结果就产生畸形儿。
通过对数十种不同种属动物进行的致畸试验表明，反应停对大约15个种属的动物有不同程度的致畸作用，并且致畸作用有明显的种属差异。
小鼠和大鼠的大部分种系不敏感。
家兔的几个种系和绝大部分灵长类动物较敏感，并可观察到与人相似的缺肢或短肢畸形。
毒理学实验设计模板
毒理学实验设计模板一、引言毒理学实验是研究化学物质或其他物质对生物体的毒性作用的一种方法，其目的是评估化学物质或其他物质对人类和环境的潜在危害性。
本文将介绍毒理学实验设计模板，以帮助研究者更好地设计毒理学实验。
二、实验设计1. 实验目的明确实验目的是设计一个成功的毒理学实验的关键。
在确定实验目的时，需要考虑以下几个方面：（1）所要评估的化学物质或其他物质；（2）所要评估的生物体；（3）所要评估的毒性效应；（4）所要达到的结果。
2. 实验类型根据实验目的和需要评估的化学物质或其他物质，可以选择以下几种类型的毒理学实验：（1）急性毒性试验：评估单次暴露下化学物质或其他物质对生物体产生致死或致残效应。
（2）亚急性毒性试验：评估连续暴露下化学物质或其他物质对生物体产生致死、致残或亚致死效应。
（3）慢性毒性试验：评估长期暴露下化学物质或其他物质对生物体产生致癌、致畸或其他慢性毒性效应。
3. 实验方法根据实验类型和实验目的，选择合适的实验方法。
常用的实验方法包括：（1）口服试验：将化学物质或其他物质加入动物饮水或食物中，评估其对生物体的毒性效应。
（2）皮肤接触试验：将化学物质或其他物质涂抹在动物皮肤上，评估其对生物体的毒性效应。
（3）吸入试验：将化学物质或其他物质喷雾至动物呼吸道中，评估其对生物体的毒性效应。
4. 动物模型选择合适的动物模型是评估化学物质或其他物质对生物体毒性效应的关键。
常用的动物模型包括：（1）小鼠；（2）大鼠；（3）兔子；（4）犬。
5. 实验设计要点在设计毒理学实验时需要考虑以下几个要点：（1）样本量：确定足够数量的样本以确保结果具有统计显著性。
（2）对照组：使用对照组以比较实验组的结果。
（3）剂量：确定合适的剂量以评估化学物质或其他物质的毒性效应。
（4）实验时间：确定合适的实验时间以评估化学物质或其他物质对生物体的毒性效应。
三、数据分析1. 数据收集在进行毒理学实验后，需要收集实验数据。
毒理学基础实验设计.
四氯化碳毒理学的基础实验设计生化系食品082 200800602052 黄瑞锦引言：在进行某一种受试物毒理学的基础实验设计前要先认识和了解其有关知识。
所以，要进行四氯化碳毒理学的基础实验设计先认识和了解有关性质。
一、理化性质四氯化碳 (carbon tetrachloride，CCl4)，化学式CCl4，又称四氯甲烷(tetrachloromethane)。
是一种比水重，无色、易挥发、不易燃，易流动的液体。
具氯仿的微甜气味，并具有一种令人愉快的气味。
相对分子量153.84，相对密度1.595g/cm3(20/4℃)，沸点76.74℃，熔点－22.8℃，蒸气压15.27kPa(25℃)，蒸气密度5.3g/L。
四氯化碳的蒸气有毒，它的麻醉性较氯仿为低，但毒性较高。
吸入人体2～4ml就可使人死亡。
四氯化碳在水中的溶解度很小，且遇湿气及光即逐渐分解生成盐酸。
易溶于各种有机溶剂，能与醇、醚、氯仿、苯等任意混合。
对于脂肪、油类及多种有机化合物为一极优良的溶剂。
四氯化碳用作灭火剂时，不能灭活泼金属的火，因为活泼金属可以与之反应。
也会在高温下与水反应生成有毒物质。
遇火或炽热物可分解为二氧化碳、氯化氢、光气和氯气等。
二.污染来源四氯化碳（CCl4）是较常用的有机溶剂。
在工业生产中用作萃取剂、清洗剂、脱脂剂、制冷剂、灭火剂和驱虫剂等。
在医学上用作麻药剂。
在日常生活中，用作衣服的洗涤及去脂等。
在生产和使用过程中，四氯化碳可释入空气而污染环境。
近年来，美国对供水系统中CCl4的检测结果发现，约2000万人饮用的水源被CCl4污染。
据估计美国有近400万人在生产中暴露于CCl4中。
三.毒性作用CCl4可经消化道、呼吸道和皮肤进入机体。
吸入量的20%～35%可被人及动物机体吸收。
CCl4在血液中的浓度与脑中的含量接近，脂肪组织蓄积的量为血液中的2～8倍。
部分CCl4在肝微粒体细胞色素P450的催化作用下，通过脱卤素和氧化作用，解离成Cl·和CCl3·自由基，后者能使生物膜脂质过氧化，扰乱干细胞脂质代谢，引起干细胞坏死。
毒理学实验设计的基本原则
毒理学实验设计的基本原则所有毒理学实验设计都必须符合随机、对照、重复三个基本原则。
(一)随机的原则随机化( randomization)是指在抽样时,使总体中每一个体都有同等的机会被抽取;在分配样本时,确保样本中的每一个体都有同等的机会被分入任何一个组中。
随机化的目的是使样本具有极好的代表性,使一切干扰因素分配到各组时只受纯机遇抽样误差的影响,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。
在进行毒理学动物实验时,动物必须随机分组,最常用的方法是完全随机或随机区组的方法。
完全随机即将研究对象随机地分配到各个处理组中,可通过随机数字表或抽签的方式进行。
随机区组即将可能影响实验结果的非处理因素均衡地分配到各组,如动物体重、性别等,具体做法是将条件相近的实验对象配成一组(配伍组) ,再将每个配伍组中的实验对象随机分配到各个处理组中。
随机不等于随便、随意,在动物分组时若不采用适当的随机方法,而是抓取动物随意放在各组,不能排除动物机敏性等因素对选择动物的影响,不能满足随机化的要求。
(二)对照的原则对照( contro1)是指在实验时针对实验组设立的可以对比的组。
对照的意义在于通过对照鉴别处理因素与非处理因素的差异及处理因素的效应大小,消除和减少随机化原则所不能控制的抽样误差及实验者操作熟练程度等所造成的差异。
毒理学实验中常用的对照形式有以下几种。
1. 未处理对照(空白对照) :即不施加任何处理措施,用于确定实验对象生物学特征的本底值,进行质量控制。
2. 阴性对照:不给要研究的处理因素,但给以其他的实验因素,以排除这些实验因素的影响。
常用的阴性对照是溶剂/赋形剂对照,以此作为与染毒组比较的基础。
阴性对照除了要研究的因素外,其他处理应和实验组完全相同。
对照组与实验组必须在同时、同地、同条件下进行处理,否则就失去了对照的意义。
3. 阳性对照:用已知的阳性物检测实验体系的有效性。
阳性对照组的实验因素与实验组应尽可能一致,如与受试物采用相同的溶剂、染毒途径及采样时间。
毒理学动物实验设计
生物学意义
解释实验结果在生物学上的意义，探讨其对 毒理学研究的意义和价值。
结果的局限性
分析实验结果的局限性，提出可能的改进和 进一步研究的方向。
实验报告的撰写
报告结构
遵循标准的实验报告格式， 包括摘要、引言、方法、结 果、讨论和结论等部分。
数据呈现
以图表、表格等形式呈现实 验数据，使数据更直观、易 于理解。
05
实验结果的解读与报告
实验结果的解读
数据分析
对实验数据进行统计分析，识别出显著性差异和趋势，判断实验结 果是否符合预期。
实验误差分析
评估实验误差对结果的影响，确保实验结果的可靠性和准确性。
对照组与实验组比较
将对照组与实验组的结果进行比较，分析实验处理对实验结果的影 响。
实验结果的解释与讨论
潜在机制探讨
实验组
02
接受不同剂量的受试物或不同处理方式的动物，用于观察受试
物对动物的影响。
剂量分组
03
根据实验目的和受试物的特性，将实验组分为不同的剂量组，
以便观察不同剂量下的毒性反应。
实验剂量选择
最低剂量组
选择一个接近于0的剂量，作为观察受试物对动物影 响的起点。
中间剂量组
选择一个适中的剂量，用于观察受试物对动物的中等 毒性反应。
数据分类
将数据按照不同的分类标准进行分类，便于后 续分析。
数据转换
对数据进行适当的转换，以便更好地进行数据分析。
数据分析与解释
描述性分析
对数据进行描述性统计分析，如均值、中位 数、标准差等。
推断性分析
利用统计模型对数据进行深入分析，如回归 分析、方差分析等。
“毒理学基础”实验教学改革的实践分析
The Science Education Article CollectsNo.1,2021 Sum No.5172021年第1期总第517期摘要该文受预防医学和健康检查专业开设“毒理学基础”实验课程的启发，探讨如何通过实践技能培训创新技能和提高学生综合素质，改善“毒理学基础”课程教学质量。
通过积累实验培训经验，找到完善课程实验培训方法、提高实验培训质量的途径。
关键词毒理学基础；实验教学；改革；实践分析Practical Analysis on the Experimental Teaching Reform of"Fundamentals of Toxicology"//WU JingAbstract Inspired by the experimental course of"Fundamentals of Toxicology"for the major of preventive medicine and health examination,this paper explores how to improve the teaching quality of"Fundamentals of Toxicology"by training practical skills,innovating skills,and improving students'comprehensive quality.By accumulating the experience of experimental training, the writer hopes to find the methods to improve the methods of experimental training,and improve the quality of experimental training.Key words Fundamentals of Toxicology;experimental teaching; reform;practical analysis1引言“毒理学基础”是公共卫生与预防医学、现代医学和药学的重要基础课程，其对化学、物理和生物等因素的研究可以揭示对生物和生态系统的有害影响和机理，以及成瘾的预防、诊断和治疗。
毒理学基础实验指导
卫生毒理学实验指导编写：陈秉符古雅2009年3月目录实验一毒理学实验设计 ..................................................................... 错误!未定义书签。
实验二实验动物的一般操作技术 ..................................................... 错误!未定义书签。
实验三灭多威经口急性毒性试验 ..................................................... 错误!未定义书签。
实验四苯经呼吸道急性毒性试验 ..................................................... 错误!未定义书签。
实验五蓄积毒性试验 ......................................................................... 错误!未定义书签。
实验六亚慢性和慢性毒性试验 ......................................................... 错误!未定义书签。
实验七小鼠骨髓细胞微核试验 ......................................................... 错误!未定义书签。
实验八小鼠精子畸形试验 ................................................................. 错误!未定义书签。
实验九骨髓细胞染色体畸变分析 ..................................................... 错误!未定义书签。
实验十鼠伤寒沙门菌回复突变试验 ................................................. 错误!未定义书签。
毒理实验基本技术
实验一毒理实验基本技术一、常用实验动物染毒技术在进行毒理学动物实验时要使动物经一定的途径接触毒物，染毒的途径（Route of administration）要依实验目的并结合人类的实际接触方式，毒物的多少及理化性质和具体设备条件等来决定。
食品毒理学中最常用的染毒方式有经消化道染毒（Gastrointestinal tract exposure），在特殊需要时也使用注射染毒。
（一）经消化道染毒方法经消化道染毒方法主要有灌胃法、喂饲法和吞咽胶囊三种。
为防止胃纳充盈影响化合物的吸收及毒性，经消化道染毒要求实验动物空腹。
依动物生活习性的不同，禁食的时间也不同，白天进食的动物（如兔、猫、狗等）可在白天动物进食前给毒，夜间进食的动物（如大鼠、小鼠等）应隔夜禁食。
1 ．灌胃法( 1 ）大鼠、小鼠及豚鼠灌胃法灌胃针头连接注射器，吸取受试物。
左手抓住动物背部皮肤，将动物固定，要使动物的消化道为自然垂直位。
右手持注射器，针头由动物嘴角插入，沿咽后壁缓缓插入食道。
进针过程应没有阻力，若遇阻力，应调整方向，不要强行进针。
进针后先回抽针芯，如无气泡抽出，并有一定负压，说明位置在胃中，可进药。
否则应重新进针。
一般灌胃针插入深度小鼠约3~4cm，大鼠、豚鼠约4~6cm。
灌胃量小鼠0.2~ l ml，大鼠l~4ml，豚鼠l~5ml。
( 2 ）免、猫、狗等较大动物灌胃法通常以胃管或导尿管为灌胃导管。
先将动物固定，保持伸直的体位。
在动物上、下门牙间放一开口器，并固定之。
开口器可用本料或金属制成，梭形，宽度依动物口腔大小而定，中间钻一小孔，以使灌胃导管能通过。
灌胃导管经开口器中心圆孔插入，沿咽后壁经食道插入胃中。
如遇阻力应拔出，稍等片刻后重新插入，不可强行插管，以免造成创伤或误入肺部。
为检查导管插入是否正确，将导管外口通人一盛水的烧杯中，如不发生气泡，即认为在食道中，若不断出现气泡，则可能误人肺内，应拔出重插。
确认插入胃中后，用注射器吸取受试物，经导管注入。
毒理学基础本科实验教学大纲
毒理学基础本科实验教学大纲课程名称：毒理学英文名称：TOXICOLOGY课程性质：专业基础课，必修课程代码：5046350本大纲主笔人：黄毅娜面向专业：预防医学专业和卫生检验专业实验指导书名称：毒理学实验方法与技术出版单位：人民卫生出版社出版日期：2003年8月主编：王心如一、课程学时学分课程总学时：90学时课程总学分：5分实验总学时：18学时（预防医学专业）15学时（卫生检验专业）实验总学分：1分二、实验的地位、作用和目的毒理学研究外源化学物对于机体（特别是人体）的有害作用及其机制。
毒理学作为一门实验科学，以动物实验为主要研究方法，评估外源化学物对健康的危害。
毒理学基础理论与实践技能对于提高专业素质，培养创新性预防医学专业人才具有同等重要的地位，故毒理学实验课程目的是使学生在掌握毒理学的基本概念、基本理论的基础上，熟悉和掌握一些基础的毒理学动物实验基本技能，外源化学物评价试验的设计、实施、结果观察和评价等毒理学研究基本功。
三、实验方式及基本要求采用观看视听教材，教师讲解和示教，以及学生自己动手操作等方式。
熟悉和掌握一些基本的毒理学动物实验的设计、实施、结果观察和评价等。
四、实验报告实验报告内容包括实验名称、目的要求、方法、结果、讨论。
五、考核与考试考核学生实验报告，评优（A）、良（B）、差（C）三个等级。
实习成绩占期末总成绩的20%。
六、基本设备与器材配置小鼠笼子(10个/组)、天平（1台/组）、剪刀（1把/人）、镊子（1把/人）、止血镊（1把/人）、灌胃针（1个/人）、显微镜（1台/人）、多目共览显微镜（1台）、静式染毒柜（2个）、超净工作台（2台），培养箱（1台）等。
七、实验项目及内容提要以下内容双线部分应重点掌握，单线部分应熟悉，其它部分应有所了解。
实习一染毒方法和实验动物目的要求1.了解动物饲养和动物房环境的基本要求。
了解大、小鼠习性。
2.了解染毒的各种方法，掌握大、小鼠灌胃方法，熟悉家兔皮肤染毒方法。
毒理学实验基础ppt课件
前 言
• 毒理学：研究外源化学物与机体有害的交互作用 • 毒理学是一门实验科学，其研究的主要手段是动 物实验。 • 体内实验：是以实验动物为模型，通过外源化学 物对实验动物的毒性反应，向人外推，以评估对 人的危害及危险性 • 体外实验：主要用于筛选和预测急性毒性和机制 研究
主要内容
3.安死术
尿液采集-----代谢笼、膀胱穿刺术
胆汁采集-----插胆管
粪便采集----代谢笼采集
2.麻醉
麻醉过程的注意事项
在麻醉过程中，必须确定麻醉深度；对麻醉动物多个系统（如：心率、 脉搏、血压、心电图、体温、呼吸频率等）仔细监测，并作出针对不同情况 作出相应措施。
常用的麻醉药物
短效：乙醚 中效：赛拉嗪+氯胺酮 长效：戊巴比妥钠
中剂量组
高剂量组
低、中、高剂量组的剂量一般按等比计算，剂量间距一般为2或 10
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未处理对照组 （空白对照组）
阴性（溶剂） 对照组
阳性对照组
历史性对照
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实验动物染毒和处置
实验动物染毒 • 在毒性实验中染毒途径的选择，应尽可能模拟人 在接触该受试物的方式。
• 常用的染毒途径有：经口、经呼吸道、经皮及注
实验动物 和人对外 源化学物 的反应敏 感性不同， 甚至存在 质的差别
存在高 剂量向 低剂量 外推的 不确定 性
存在小 数量实 验动物 到大量 人群外 推的不 确定性
实验动物 对外源化 学物的反 应单一
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毒理学毒性评价试验的基本目的
受试物毒作用的表现 和性质
剂量---反应（效应） 研究
实验动物物种的选择 基本原则： 1.对受试物在代谢、生物化学和毒理学特征与 人最接近的物种 2.选择自然寿命不太长的物种
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四氯化碳毒理学的基础实验设计生化系食品082 200800602052 黄瑞锦引言：在进行某一种受试物毒理学的基础实验设计前要先认识和了解其有关知识。
所以，要进行四氯化碳毒理学的基础实验设计先认识和了解有关性质。
一、理化性质四氯化碳 (carbon tetrachloride，CCl4)，化学式CCl4，又称四氯甲烷(tetrachloromethane)。
是一种比水重，无色、易挥发、不易燃，易流动的液体。
具氯仿的微甜气味，并具有一种令人愉快的气味。
相对分子量153.84，相对密度1.595g/cm3(20/4℃)，沸点76.74℃，熔点－22.8℃，蒸气压15.27kPa(25℃)，蒸气密度5.3g/L。
四氯化碳的蒸气有毒，它的麻醉性较氯仿为低，但毒性较高。
吸入人体2～4ml就可使人死亡。
四氯化碳在水中的溶解度很小，且遇湿气及光即逐渐分解生成盐酸。
易溶于各种有机溶剂，能与醇、醚、氯仿、苯等任意混合。
对于脂肪、油类及多种有机化合物为一极优良的溶剂。
四氯化碳用作灭火剂时，不能灭活泼金属的火，因为活泼金属可以与之反应。
也会在高温下与水反应生成有毒物质。
遇火或炽热物可分解为二氧化碳、氯化氢、光气和氯气等。
二.污染来源四氯化碳（CCl4）是较常用的有机溶剂。
在工业生产中用作萃取剂、清洗剂、脱脂剂、制冷剂、灭火剂和驱虫剂等。
在医学上用作麻药剂。
在日常生活中，用作衣服的洗涤及去脂等。
在生产和使用过程中，四氯化碳可释入空气而污染环境。
近年来，美国对供水系统中CCl4的检测结果发现，约2000万人饮用的水源被CCl4污染。
据估计美国有近400万人在生产中暴露于CCl4中。
三.毒性作用CCl4可经消化道、呼吸道和皮肤进入机体。
吸入量的20%～35%可被人及动物机体吸收。
CCl4在血液中的浓度与脑中的含量接近，脂肪组织蓄积的量为血液中的2～8倍。
部分CCl4在肝微粒体细胞色素P450的催化作用下，通过脱卤素和氧化作用，解离成Cl·和CCl3·自由基，后者能使生物膜脂质过氧化，扰乱干细胞脂质代谢，引起干细胞坏死。
CCl4是典型的肝脏毒物，通过各种途径进入人体后，均可引起肝脏的严重损伤，如中心小叶坏死及脂肪变性。
同时受损的还有肾脏、肺泡膜及肺血管。
肾脏及肺的损伤不及肝脏，通常发生于肝脏损害之后，因全身代谢失调而发生。
吸入四氯化碳蒸气时若饮酒、冷冻或提高空气中的含氧量，均可加重毒性作用。
另外，四氯化碳可增加心肌对肾上腺素的敏感性，引起严重心律失常。
人对四氯化碳的个体易感性差异较大，有报道口服3～5ml 即可中毒，29.5ml即可致死。
在160～2OOmg/m3浓度下可发生中毒。
但也有在1～2g/m3浓度下接触3Omin方出现轻度中毒。
目前认为四氯化碳无致畸和致突变作用，但具有胚胎毒性。
根据IARCl972及1979年资料，四氯化碳长期作用可以引起啮齿动物的肝癌，被列为"对人类有致癌可能"一类的化学物。
CCl4能引起皮炎，也可引起湿疹及麻疹。
对皮肤刺激性比苯强。
CCl4可经烧伤皮肤多量进入机体。
皮肤与CCl4接触30min相当于浓度为0.063mg/L的CCl4被人体吸入3h.动物实验发现，小鼠、大鼠、豚鼠及家兔急性中毒时血液中蛋白质含量减低、各种蛋白质比例失调、血清多种酶（转氨酶、醛缩酶、精氨酸酶、黄嘌呤氧化酶、谷酰胺酶、氨基移换酶等）活性增加。
组织学检查显示，肝脏出现脂肪性肝硬化和肾管状上皮退化等。
这些现象与细胞膜渗透性或肝脏本身酶反应过程的破坏有关。
四.临床表现1.急性中毒急性CCl4中毒的病理改变主要在肝脏，同时累及神经系统和肾脏。
另外也可发生心肌炎、支气管炎以及大脑中毒退行性病变。
临床症状有：(1)潜伏期: 一般为1～3天，也有短至数分钟者。
潜伏期长短与接触剂量及侵入途径有关。
经呼吸道或胃肠道吸收中毒的临床表现类似;均可出现中枢神经系统麻醉及肝、肾损害症状。
(2)神经系统症状: 可有头晕、头痛、乏力、精神恍惚、步态蹒珊、短暂意识障碍或昏迷等。
极高浓度吸入时，可因延髓受抑制而迅速出现昏迷、抽搐，甚至突然死亡。
(3)消化道症状: 口服中毒时较明显。
可有恶心、呕吐、食欲减退、腹痛、腹泻及黄疸、肝大、肝区压痛、肝功能异常等中毒性肝病征象。
严重者可发生暴发性肝功能衰竭。
肝损害症状多于发病第2～4天出现。
(4)肾损害症状: 可出现蛋白尿、红细胞尿、管型尿。
严重者出现少尿、无尿、氮质血症等急性肾功能衰竭表现。
(5)其他: 少数患者可有心肌损害、心律失常。
心室颤动及呼吸中枢麻痹多为致死原因。
(6)吸入中毒者常伴有眼及上呼吸道刺激症状。
有时可引起肺水肿。
2.慢性中毒慢性接触CCl4的病变也主要在肝脏。
慢性中毒的报道较为少见。
长期反复接触四氯化碳，可有头晕、乏力、失眠、记忆力减退、食欲不振、恶心、腹泻和腹痛等。
可有肝大、肝功能异常。
严重者可发展为门脉性肝硬化。
少数患者发生球后视神经炎，出现视野缩小，视力减退。
此外，国外还有报道可引起听力障碍、耳蜗前庭系统功能障碍及再生障碍性贫血等。
皮肤长期接触，可因脱脂而出现干燥、脱屑和皲裂等。
五.紧急处理方法吸入：迅速脱离现场至新鲜空气处。
保持呼吸道通畅。
如呼吸困难，给输氧。
如呼吸停止，立即进行人工呼吸。
就医。
误食：饮足量温水，催吐，洗胃。
就医。
皮肤接触：立即脱去被污染衣着，用肥皂水和清水彻底冲洗皮肤。
就医。
眼睛接触：立即提起眼睑，用流动清水或生理盐水冲洗。
就医。
六.治疗方法目前尚无特效解毒剂，主要按一般急救措施及对症治疗。
(1)急性中毒时，应将患者迅速移出现场。
脱去被污染的衣物。
皮肤、眼睛受污染时可用清水或2%碳酸氢钠溶液冲洗，至少l5min以上。
口服中毒者必须及早洗胃,洗胃前，先用液体石蜡或植物油以溶解四氯化碳。
(2)患者应卧床休息，密切观察3～4 天，要注意尿常规、尿量、血肌酐及肝功能情况，及早发现肝、肾损害征象。
(3)早期给氧，给予高热量，高维生素及低脂饮食。
(4)积极防治神经系统及肝、肾功能损害，治疗原则同内科。
出现少尿、无尿时应及早作血液透析或腹膜透析，以防治尿毒症、高钾血症等。
(5)忌用肾上腺素及含乙醇药物。
(6)近年国外曾报道及早应用乙醚半胱氨酸可防止或减轻肝、肾功能损害。
还有以高压氧治疗有效的报道。
实验结果认为高压氧可减少四氯化碳在肝内自由基的形成，从而降低脂质过氧化作用，减轻肝损害。
但国内尚未见报道。
七.基础实验设计1.四氯化碳急性毒性实验设计1.1实验目的为了测试和求出四氯化碳对SD（sprague-dawley）大鼠的致死量（以LD50表示），提供四氯化碳的急性毒作用性质、可能的靶器官和致死原因、剂量-反应关系，提供四氯化碳的进行中毒资料，初步评价对人体产生损害的危险性，为慢性实验以及其他道路学实验提供接触剂量和观察指标选择的依据。
1.2实验方法及步骤通过四氯化碳（CCl4）急性毒性实验设计来进行其对机体的毒性效应的研究。
CCl4作为外源化合物，它的毒性作用也是通过生物体表现出来的，所以生物体对四氯化碳的吸收、排泄及代谢转化过程和生物体本身的种属品系、年龄、营养及健康等机体状态也是影响其毒性作用的重要因素。
因此，对四氯化碳的急性毒性实验设计包括实验动物的选择及分组、四氯化碳进入机体的剂量和方式及时间发布、观察指标和LD50的计算等内容。
1.2.1实验动物的选择及饲养管理本实验选用SD大鼠作为研究对象。
因为大鼠在代谢和毒性反应上与人类较为接近，并且大鼠的繁殖能力较强、价格较低、体积小（占地少、易操作）、寿命短（实验期短）食谱与人相似（杂食动物）及具有便于分析明确的生物指标。
因此，我们选用60只雌雄各半，体重为200g左右（相差不超过10g），未交配和未受孕的健康成年的SD大鼠作为实验对象。
而且试验前要进行1~2周的检疫观察和适应期，剔除临床异常者，所选用的饲料要能满足实验动物的营养需求。
观察期间的喂养大鼠和小鼠的室温控制在（22±3）℃，相对湿度为30%～70%。
饲养密度为每笼2只，无对流风，人工昼夜环境，饮水、饲料清洁，保持室内卫生。
1.2.2实验动物分组为尽量降低和消除动物的个体差异对实验结果的影响，我们将60只雌雄各半的SD大鼠随机分成6组，1个对照组和5个不同药物剂量组，每组10只SD大鼠（雌雄各半）。
1.2.3染毒方法及周期将四氯化碳用0.1%～1%橄榄油或精致花生油配制所需浓度，采用灌胃方法（灌药前要隔夜禁食，灌药后2~4h复食）,实验组按0.5ml/100g体重1次给受试物，对照组按0.5ml/100g体重一次给0.1%～1%橄榄油或精致花生油。
观察期为14d.1.2.4剂量选择查相关资料已知四氯化碳的半数致死量为2.92g/kg(大鼠，经口)，本实验以此作为计算四氯化碳对SD大鼠一次灌胃的半数致死量LD的中间剂量。
50为2。
92g/kg(大鼠，经口)可知，四由四氯化碳对SD大鼠的半数致死量LD50氯化碳属低毒物质，剂量选择时组距应较大，所以本实验的组距对数值选lg1.6=0.2，上下各推两个剂量组，则四氯化碳SD大鼠灌胃一次实验的剂量设计见下表。
表1 四氯化碳SD大鼠灌胃一次实验的剂量设计1.3毒性观察1.3.1中毒症状全面观察中毒的发生、发展过程和规律以及中毒特点和毒作用的靶器官。
观察的系统包括：表2 啮齿类动物急性中毒表现的观察内容1.3.2死亡与死亡时间给药后立即观察并记录动物的中毒表现，症状出现和消失的时间及死亡时间，重点观察和记录每只动物的死亡时间，特别是最早出现死亡的时间以及各个剂量组动物的死亡数。
给药当日应连续观察，其后，每日至少观察2次，观察期为14d.1.3.3体重给药前、死亡时各称量以体重、观察期间每3d称量一次。
1.3.4病理检查及时剖检死亡动物，肉眼观察主要脏器的大小、外观、色泽、有无充血、出血、水肿或其他病变，对有病理变化的组织及脏器应做组织病理学检查。
试验结束时，对各剂量组存活动物和对照组动物也应该进行病理学检查。
根据文献，本实验需进行的病理学检验项目有：（1）检测、比较不同染毒剂量组及对照组之间反映肝坏死损伤的指标如血清丙氨酸氨基转换酶（ALT）活力和反应脂肪变性损伤的指标如肝甘油三酯（TG）的含量。
（2）检测、比较不同染毒剂量组及对照组之间肝脏抗氧化指标如氧化物歧化酶（SOD）活力和还原性谷胱甘肽（GSH）含量及肝脏过氧化指标如脂质过氧化(LPO)含量。
分析脂质过氧化指标变化与肝损伤指标变化之间的关系。
（3）检测、比较不同染毒剂量组及对照组之间血液中蛋白质含量、各种蛋白质含量、血清多种酶（转氨酶、醛缩酶、精氨酸酶、黄嘌呤氧化酶、谷酰胺酶、氨基移换酶等）活性。
1.4实验数据记录及LD50的计算根据各组的大鼠死亡数，用改良寇式法法计算动物半数死亡剂量(LD50)及其95％的可信限。