单宁含量测定三种方法
总酚与单宁的测定
一、单宁红葡萄酒颜色的稳定很大程度上取决于单宁荷花色素苷发生的缩合反应，由于这种物质的存在，葡萄酒成熟过程中的颜色趋于稳定。
单宁也是呈味物质，它与多糖和肽缩合，使酒更为柔和。
有氧时缩合为浅黄色，有收敛性;无氧时为棕红色，无收敛性。
1、 高锰酸钾氧化法① 原理：利用酒中的单宁色素和其他非挥发性还原物质，在酸性条件下，能被高锰酸钾所氧化，而酒中的单宁色素又能被活性炭吸附除掉，据此测出酒中单宁色素的含量。
② 试剂a.0.1mol/L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）标准溶液：称取3.3g 高锰酸钾，溶于100m L 水中，缓缓煮沸15min ，冷却后用水稀释至1000mL ，置于暗处保存一周。
以4号玻璃漏斗过滤于干燥的棕色瓶中。
标定：准确称取0.2g （准确至0.0002g ）于105～110℃烘至恒重的基准草酸钠置入250m L 三角瓶中，加100m L （8+92）硫酸溶液溶解，加热至60～70℃，趁热用高锰酸钾溶液滴定至溶液呈粉红色。
同时做空白试验。
计算公式如下：高锰酸钾浓度（1/5KMnO 4，mol/L ）=m/((V-V 0)*0.06700)式中 m-----草酸钠的质量，gV -----测定时消耗高锰酸钾溶液的体积，mLV 0----空白试验消耗高锰酸钾溶液的体积，m L0.06700-----消耗1mL 1mol/L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）标准溶液相当于草酸钠的质量，g/mmol b.0.05mol /L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）溶液：将0.1mol/L 高锰酸钾（1/5KMnO 4）标准溶液稀释至原浓度的1/2c.靛红纸试剂（靛蓝二黄酸钠，靛胭脂）：称取靛红1.5g ，溶于50m L 硫酸中，用水稀释至1000m L 。
单宁含量的测定
单宁含量的测定1、采用风光光度法，先用苯抽提除去有机溶剂抽出物后，用乙醇处理将单宁溶解，采用分光光度计测定溶出液在波长500nm处的光密度，由标准曲线即可得到单宁含量。
2、精确量取不同量标准单宁酸溶液与50ml容量瓶中（瓶中预先放好25ml水），假如2ml乙醇、5ml1mol/LNa2CO3溶液及2.5ml钨酸钠-磷钼酸试剂，再加水冲稀至刻度，摇匀后在25℃水浴中放置30min。
将此有色溶液倒入比色皿中，用分光光度计，以波长500nm （或红色滤光片）分别测定其光密度。
以单宁含量（mg）为横坐标，光密度为纵坐标，绘制成标准曲线。
3、精确称取1g（称准至0.0001g）已磨细的试样（同时另称试样测定水分），用滤纸包好，用苯在索氏抽提器中抽提8h。
而后将试样风干，将风干后的试样放入100ml具磨口玻塞的锥形瓶中，加入20ml乙醇，于沸水浴中加热回流1h。
过滤于50ml干容量瓶中，用平头玻璃棒用力挤压瓶中的残渣，将挤出的抽提液也滤入同一容量瓶中，然后向锥形瓶中再加入20ml乙醇，继续在沸水浴中抽提1h，再滤入同一容量瓶中，并用乙醇分次洗涤残渣，直至容量瓶刻度，摇匀，即为样品溶液。
4、用移液管吸取2ml样品溶液于50ml容量瓶中（瓶中预先放好25ml水），按上述绘制标准曲线的操作，进行分光光度法测定，记录其样品溶液的光密度，再根据标准曲线，求的样品中相当的单宁含量。
5、结果计算原料中单宁含量X （%）按下式计算： X= 11000100(1)25m m w ⨯⨯⨯-⨯ m 1——根据标准曲线求得相当样品中的单宁含量，mg m ——风干试样质量,gw ——试样水分，%分光光度法的再现性较好，准确度符合要求，但必须严格按规定条件进行。
——————摘自（石淑兰等，纸浆造纸与分析，2003）。
单宁的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握单宁的提取方法；2. 熟悉单宁含量的测定方法；3. 分析不同样品中单宁含量的差异。
二、实验原理单宁，又称鞣酸，是一种多酚类化合物，广泛存在于植物中。
单宁具有抗氧化、抗菌、抗炎等生理活性。
本实验采用Folin-Denis法测定样品中单宁的含量。
该方法原理是：单宁在碱性条件下，可与磷钨钼酸反应生成蓝色络合物，该络合物在波长760nm处有最大吸收峰，其吸收值与单宁含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：高粱、茶叶、苹果等含有单宁的样品；2. 仪器：分光光度计、电子天平、研钵、烧杯、移液管、容量瓶、玻璃棒等。
四、实验步骤1. 样品预处理：将样品烘干、磨碎，过筛，备用；2. 样品提取：准确称取一定量的样品，加入适量乙醇，搅拌溶解，过滤，滤液备用；3. 标准曲线绘制：准确配制一定浓度的单宁标准溶液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，以单宁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线；4. 样品测定：准确移取一定量的样品提取液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，从标准曲线上查得单宁含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：根据实验数据，绘制单宁标准曲线，得到线性回归方程为：y=0.0522x-0.0043，R²=0.9988；2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中单宁含量，结果如下：（1）高粱样品：单宁含量为2.5mg/g；（2）茶叶样品：单宁含量为15.2mg/g；（3）苹果样品：单宁含量为1.8mg/g。
从实验结果可以看出，不同样品中单宁含量存在明显差异。
高粱和苹果中单宁含量较低，而茶叶中单宁含量较高。
六、实验结论本实验采用Folin-Denis法成功测定了高粱、茶叶、苹果等样品中单宁的含量。
实验结果表明，不同样品中单宁含量存在明显差异，为后续研究单宁的生理活性提供了参考依据。
食品分析《单宁含量的测定》 (第10章)
3、EDTA络合滴定法测定单宁含量 、 络合滴定法测定单宁含量
基本原理： 基本原理： 根据单宁与重金属离子形成络合物沉淀的性质， 根据单宁与重金属离子形成络合物沉淀的性质，在样品提 取液中加入过量的标准Zn(Ac)2溶液，待反应完全后，再用 溶液，待反应完全后， 取液中加入过量的标准 EDTA标准溶液滴定剩余的 标准溶液滴定剩余的Zn(Ac)2,根据 根据EDTA的消耗量计 标准溶液滴定剩余的 根据 的消耗量计 算样品中的单宁的含量。 算样品中的单宁的含量。 样品测定程序： 样品测定程序： 说明： 说明： （1）指示剂为铬黑 ； ）指示剂为铬黑T； （2）单宁遇 3+会发生颜色反应 因此处理样品时不能与铁 ）单宁遇Fe 会发生颜色反应,因此处理样品时不能与铁 器接触，切碎样品应用不锈钢刀。 器接触，切碎样品应用不锈钢刀。
第10章：单宁含量的测定 10章 Chapter 10 Analysis of Tannins
浙江科技学院 生物与化学工程学院
刘铁兵 tbliu@
食品分析
浙江科技学院 生物与化学工程学院
刘 铁 兵 tbliu@
1、概述
单宁又名鞣质，是一类有机酚类复杂化合物的总称， 单宁又名鞣质，是一类有机酚类复杂化合物的总称，广 泛存在于植物组织中。在蔬菜中含量较少， 泛存在于植物组织中。在蔬菜中含量较少，但在果实中 却普遍存在。 却普遍存在。 在柿、李等果实未成熟时， 在柿、李等果实未成熟时，由于细胞液中含有较多的单 宁物质，所以有涩味。 宁物质，所以有涩味。在果实成熟过程中单宁被过氧化 物酶氧化成无涩味的过氧化物， 物酶氧化成无涩味的过氧化物，或凝集成不溶于水的胶 状物质，而使涩味消失。生产上用乙烯利处理柿子， 状物质，而使涩味消失。生产上用乙烯利处理柿子，即 可脱涩转红。 可脱涩转红。 根据单宁的化学组成，可分为： 根据单宁的化学组成，可分为： （1）水解类：又称没食子类，是由葡萄糖分子与一定数目 ）水解类：又称没食子类，
葡萄酒单宁检测
森博（Symbol）检测
单宁检测
单宁，它是葡萄酒中所含有的两种酚化合物其中的一种物质，尤其在红葡萄酒中含量较多。
葡萄酒中的单宁一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡发酵而来，或者是因为存于橡木桶内而萃取橡木内的单宁而来。
单宁可加入化妆品中，因其对皮肤有很好的收敛、防晒、美白、抗皱、保湿作用，且长期服用有益于心脏血管疾病的预防。
检测方法：
1、皮粉法
2、EDTA络合滴定法
3、高锰酸钾滴定法
4、分光光度法
5、高效液相色谱法
适用标准：
NY/T 1600-2008 水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定分光光度法
原理：
以没食子酸为主的单宁类化合物在碱性溶液中可将钨钼酸还原成蓝色化合物，该化合物在765nm处有最大吸收，其吸收值与单宁含量成正比，以没食子酸为标准物质，标准曲线法定量。
森博（Symbol）检测。
单宁含量测定
单宁含量测定单宁是一种广泛存在于植物中的化合物，对于食品、药品和化妆品等行业具有重要的意义。
因此，准确测定单宁的含量是非常重要的。
在本文中，将介绍三种常用的单宁含量测定方法：Folin-Ciocalteu法、酶法和高效液相色谱法。
一、Folin-Ciocalteu法Folin-Ciocalteu法是一种经典的测定单宁含量的方法，常用于测定果实、蔬菜、茶叶和酒类等样品。
该方法的基本原理是单宁与Folin-Ciocalteu试剂反应，生成蓝色化合物，通过比色测定蓝色化合物的吸光度，从而确定单宁的含量。
具体操作步骤如下：1.准备样品溶液：将待测样品粉碎并称取适量加入溶剂中，使其浓度在1-1000µg/mL范围内。
2. 加入Folin-Ciocalteu试剂：向样品溶液中加入一定量的Folin-Ciocalteu试剂，混匀后静置一段时间，使反应充分进行。
3.加入碱液：向反应溶液中加入碱液，混匀后静置一段时间，使反应继续进行。
4.比色测定：将反应溶液转移到比色皿中，使用紫外可见光谱仪测定反应溶液的吸光度，得到单宁的含量。
二、酶法酶法是一种基于单宁酶的反应原理分析单宁含量的方法，常用于测定茶叶、果汁和葡萄酒等样品的单宁含量。
该方法的基本原理是单宁酶可以与单宁结合，并生成可测定的产物，通过测定产物的光吸收来确定单宁的含量。
具体操作步骤如下：1.准备酶溶液：将单宁酶溶解于合适的缓冲液中，制备一定浓度的酶溶液。
2.准备样品溶液：将待测样品粉碎并称取适量加入缓冲液中，使其浓度在1-1000µg/mL范围内。
3.加入酶溶液：向样品溶液中加入一定量的酶溶液，混匀后静置一段时间，使反应进行。
4.比色测定：将反应溶液转移到比色皿中，使用紫外可见光谱仪测定产物的吸光度，得到单宁的含量。
三、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种快速、准确的测定单宁含量的方法，常用于测定茶叶、葡萄酒和草药中单宁的含量。
该方法的基本原理是利用色谱柱将样品中的单宁与其他组分分离，通过测定峰面积来确定单宁的含量。
单宁含量的测定实验报告
单宁含量的测定实验报告这次我们要聊的实验报告，是关于单宁含量的测定。
听起来好像有点“高大上”，其实也没那么复杂，大家放松点，我们慢慢来。
单宁呢，就是那种天然存在于植物中的物质，尤其是在茶叶、葡萄酒这些地方，常常能看到它的身影。
要知道，单宁的味道有点苦涩，喝茶时如果你觉得口感有点“干”，就是它的功劳。
所以，今天我们就要搞明白它到底有多少，看看它到底有多“给力”。
咱们得先搞清楚实验的目的。
简单说，就是要通过一系列步骤，测出样品中单宁的含量。
这一过程呢，既要仔细，也要有点技巧。
你要知道，科学实验可不是走马观花的事儿，不然最后结果出来了，可能跟你想的不太一样。
所以，咱们得一点一点捯饬，慢慢摸索。
这次实验的工具也很简单，主要有一瓶溶液——叫做Fe3+溶液，别看它名字这么简单，它可是和单宁有着“深厚的友情”。
当单宁跟这溶液混在一起时，它们会发生反应，生成一种我们能用眼睛看得见的沉淀，虽然不算多惊艳，但却能让我们知道：嘿，单宁来了！你可能会问了，这么简单的反应，能不能直接看出结果啊？嗯，不能。
别急，咱们后面有办法解决。
实验的步骤其实挺直接的：取一定量的样品溶液，加入Fe3+溶液，搅拌均匀后静置一会儿，接着就会看到沉淀的出现。
这时我们要做的，就是估算出沉淀的量，进而推算出单宁的含量。
这一步其实挺像是做菜，看着锅里煮的汤，慢慢等着味道出来。
但你得记得，这个“沉淀”可不是像你小时候捉到的小鱼那么“乖”，它是有自己的性格的，轻轻一动，它就会消失。
所以，搅拌要适度，千万别太用力，搞不好就啥也看不见了。
咱们要干的事儿就是根据反应的程度来测量单宁的含量。
这时候就需要一点数学功底了，得算一下溶液中单宁的浓度。
大家别慌，记得你不是一个人在战斗！如果对这些公式还不太熟悉，完全可以参考实验中的标准曲线，给自己一个参考系。
简单点说，就是通过对照已知浓度的标准溶液，找到一个“标尺”，然后用它来推算咱们自己实验的结果。
就像你吃火锅，吃着吃着你心里大概能知道哪个锅底辣，哪个不辣，那个味道该多浓，只不过这里用的是数值和公式。
单宁的测定方法范文
单宁的测定方法范文
单宁测定是一种确定植物材料中单宁含量的方法，其结果可以衡量植物材料的酸性和抗氧化特性。
本文将介绍几种常用的单宁测定方法，包括显色法、比色法、重量法和高效液相色谱法。
1.显色法：
显色法是一种简单易行且常用的方法，可以用于测定单宁含量。
常见的显色试剂有菲洛蓝、酸性丙酮、硫酸铁三阳离子等。
测定过程包括提取单宁样品，加入显色试剂，观察反应产生的显色程度。
然后可以通过比较样品与标准曲线之间的差异来确定单宁含量。
2.比色法：
比色法是利用一些试剂与单宁反应生成有色产物的方法。
通常使用的试剂包括苯酚、硼酸、吡啶和黄原胶等。
这些试剂与单宁反应后，可以通过分光光度计或比色计测定产生的有色产物的吸光度，并从标准曲线中确定单宁含量。
3.重量法：
重量法是一种通过测量单宁提取物的干燥样品的重量来测定单宁含量的方法。
首先，从植物样品中提取单宁，然后将提取物置于恒温恒湿条件下干燥，最后测量干燥后的重量。
通过计算提取物中单宁的含量，可以确定原始材料中的单宁含量。
4.高效液相色谱法：
高效液相色谱法（HPLC）是一种准确、重复性好的分析方法，可以用于测定单宁含量。
该方法基于单宁化合物的分离和检测，可用于定性和定
量分析。
它通过将样品溶液通过色谱柱，并利用不同单宁化合物的保留时
间和峰面积来确定样品中的单宁含量。
需要注意的是，不同植物材料可能含有不同类型和形式的单宁化合物。
因此，在选择测定方法时，应根据样品的特性和研究目的来决定最适合的
方法。
此外，多种方法的综合使用可以提高测定结果的准确性。
植物单宁的含量测定方法
植物单宁的含量测定方法1 植物单宁单宁（Tannins）又称单宁酸、鞣质、鞣酸。
按Bategnt的定义，指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。
主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。
单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢，外用于局部止血和创面保护防止感染发炎；近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。
单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品，生产食品添加剂、风味剂等；在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用；在制革工业中，单宁是栲胶的主要成分。
2 单宁的含量测定经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等；现阶段涌现出许多新型的测定方法，如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。
2.1 经典测定方法2.1.1 皮粉法皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法，从 20 世纪 60 年代至今，原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。
皮粉的主要成分是蛋白质，单宁是多元酚类，分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀，以此使单宁沉淀下来，用重量法测定其含量。
根据皮粉与单宁溶液接触方式不同，可将其分为震荡法和过滤法。
震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁；过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。
通常，过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%～7%。
皮粉法所测的是单宁的绝对含量，并且不需要标样，操作简单，可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。
但皮粉法的缺点是，用重量法测定样品时，须经过过滤、干燥、称重，样品耗用量大，测定时间较长，一般样品分析需20 h 左右，不适合大批量样品的快速测定；没有选择性，对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力，往往使测定结果偏高；适用于单宁含量高的样品，不适合低含量和微量测定；另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。
葡萄酒单宁检测
森博（Symbol）检测
单宁检测
单宁，它是葡萄酒中所含有的两种酚化合物其中的一种物质，尤其在红葡萄酒中含量较多。
葡萄酒中的单宁一般是由葡萄籽、皮及梗浸泡发酵而来，或者是因为存于橡木桶内而萃取橡木内的单宁而来。
单宁可加入化妆品中，因其对皮肤有很好的收敛、防晒、美白、抗皱、保湿作用，且长期服用有益于心脏血管疾病的预防。
检测方法：
1、皮粉法
2、EDTA络合滴定法
3、高锰酸钾滴定法
4、分光光度法
5、高效液相色谱法
适用标准：
NY/T 1600-2008 水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定分光光度法
原理：
以没食子酸为主的单宁类化合物在碱性溶液中可将钨钼酸还原成蓝色化合物，该化合物在765nm处有最大吸收，其吸收值与单宁含量成正比，以没食子酸为标准物质，标准曲线法定量。
森博（Symbol）检测。
单宁含量测定三种方法
单宁含量测定三种方法单宁是一种常见的有机化合物，在食品和药物中广泛存在。
单宁含量是判断食品和药物质量的重要指标之一、本文将介绍三种常见的单宁含量测定方法：重量法、光度法和高效液相色谱法。
1.重量法重量法是一种简单直观的单宁含量测定方法。
首先，需要准备一定量的样品，并根据需要进行粉碎和干燥处理。
然后，将样品称取一定重量，加入一定体积的溶剂中，用搅拌器进行充分搅拌，使样品中的单宁溶解在溶剂中。
接着，将样品溶液过滤，滤液即为待测溶液。
然后，将待测溶液取一定体积，加入预先称取的副液中，使用滴定法进行滴定。
滴定液可以是酸性溶液，滴定过程中，单宁与滴定液中的酸发生反应，并转化为酸性盐，通过滴定液的消耗量可以计算出单宁的含量。
2.光度法光度法是一种利用单宁与一些试剂反应产生色素的方法。
该方法测定单宁含量的原理是：单宁与一些试剂反应后，生成有色物质，该有色物质的颜色与单宁的含量成正比。
在进行光度法测定时，首先需要准备一定量的样品，并进行粉碎和干燥处理。
然后，将样品加入适量的试剂中，使其与单宁反应产生有色物质。
接着，使用分光光度计测量试剂溶液的吸光度，通过标准曲线进行计算，得出样品中单宁的含量。
3.高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的分析方法，具有分离度高、灵敏度高、重复性好等特点。
该方法测定单宁含量的原理是：利用色谱柱对样品中的单宁进行分离，通过检测柱后流出的样品中单宁的峰面积或峰高，可以得出单宁的含量。
在进行高效液相色谱法测定时，首先需要准备一定量的样品，并进行粉碎和干燥处理。
然后，将样品溶解在适量的溶剂中，并进行过滤处理。
接着，将样品注入高效液相色谱仪中进行分析，根据标准曲线进行计算，得出样品中单宁的含量。
综上所述，重量法、光度法和高效液相色谱法是常用的单宁含量测定方法。
不同的方法有各自的特点和适用范围，根据实际需要选择合适的方法进行测定。
单宁含量测定 三种方法
2、混吸匀取，样微品热滤（液550.℃0m）L，5m于in1后00用mL0三.0角1 瓶mo中l/，L 加KM1n0Om4L水标和准5溶mL液2滴.5定m至ol淡/L粉H色2S维O4持，
30s不褪色即为终点，记下消耗的体积V1，重复一次做两个平行样。
3、吸取样品滤液5.0mL，于100mL烧杯中，并加3g活性炭，加热搅拌10min，过滤
NH3-NH4Cl缓冲溶液12.5mL、铬黑T指示剂10滴，混匀。用 0.0500mol/L的ＥＤＴＡ标准溶液滴定，溶液由酒红色变为纯 蓝色金额为终点。
四、注意事项
1.单宁遇Fe3+会发生颜色反应，因此处理样品时，不能与分歧 接触，切碎样品应采用不锈钢刀。
2.单宁容易被氧化，样品处理后应立即进行测定。同时要注意 控制加热温度，加热过程中要加些摇动数次，意识反应完全。
三、材料、仪器与试剂
1、材料： 香蕉（未熟透）50g 2、仪器： 天平 组织捣碎机 烧杯 移液管
分光光度计 容量瓶 恒温箱 （30℃） 3、试剂 ：
① 标准单宁酸溶液（0.5mg/mL）：准确称取标准单宁
酸50 mg，溶解后用水稀释至100 mL，用时现配。 ② F-D( Folin-Donis)试剂：称取钨酸钠（Na2WO4· H2O） 50g、磷钼酸10g，置于500mL锥形瓶中，加375mL水溶解， 再加磷酸25mL，连接冷凝管，在沸水浴上加热回流2h，冷却 后用水稀释至500mL。 ③ 60g/L 偏磷酸溶液。 ④ 1 mol/L碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠53g，加水溶解并稀释 至500mL。 ⑤ 95%和75%乙醇溶液。
1、材料： 香蕉（未熟透）5g 2、仪器：容量瓶 电子天平 研钵 碱式滴定管
3、试剂：
①12.10.0905gm,o用l/水L醋溶酸解锌后标定准容溶至液10：0m准L。确称取Zn(Ac)2·H2 O
单宁简单测定方法
单宁简单测定方法一、原理单宁物质作为多酚，为强还原剂，极易被氧化还可被活性碳吸附。
样品加水浸提出单宁后，用高锰酸钾滴定，以靛红为指示剂。
试样中除了单宁，还有其它物质以及靛红均可被高锰酸钾氧化，故要做空白滴定。
空白试验可用活性炭吸收单宁后，再用高锰酸钾滴定，从试样与空白液所消耗的高锰酸钾溶液体积之差求得样品中单宁的含量。
靛红被高锰酸钾氧化，从蓝色变为黄色，从而指示终点。
二.试剂与工具试剂：1. 0.01mol/L标准高锰酸钾溶液：称取AR纯高锰酸钾1.588克，蒸馏水定容1000ml，棕色瓶内暗处保存。
2. 0.1％靛红: 称取0.5克靛红，加25ml浓硫酸(98%) ，放置4小时后，慢慢加入内装200ml蒸馏水的500ml容量瓶，冷却后定容至500ml。
3. 粉状活性炭工具：研钵漏斗三角瓶刻度吸管量筒25 ml酸式滴定管容量瓶滤纸三. 测定步骤:1. 样品处理:A. 固体样品: 称取样品5-10克(视材料含单宁量多少而定) ，研磨碎或打碎，全部移入100ml容量瓶中，摇匀，振荡提取30分钟至2小时。
用干燥滤纸过滤或离心，得样液。
B. 液体样品: 直接吸原汁10ml，用蒸馏水定容至100ml，用干燥滤纸过滤或离心，得样液。
2. 测定:吸取5ml样液，加5ml靛红溶液，100ml蒸馏水，用0.01mol/L KMnO4溶液快速滴定至黄绿色，再缓慢滴定至明亮的金黄色为终点。
记下消耗的KMnO4的毫升数。
3. 空白测定:A. 取样液5ml, 加活性炭2克，置水浴上加热搅拌约10min，过滤至三角瓶，用热水再洗涤数次。
于滤液中准确加入靛红溶液5ml，补足100ml水，用上法滴定至金黄色。
B.取样液5ml ，同上法滴定至金黄色。
四. 计算:单宁％＝M(V1-V2) ×b×0.00416×100/(W×B)式中:M--高锰酸钾标准溶液的摩尔浓度V1--样品滴定消耗高锰酸钾溶液的量(ml)V2--空白滴定消耗高锰酸钾溶液的量(ml)B--样品提取液定容总体积（ml）b--测定时取样品液的体积（ml）W-- 样品的重量(克)0.0416--1mmol高锰酸钾溶液氧化单宁的克数。
单宁含量测定(三种方法)
四、实验步骤
1.样品处理 称取切碎混匀的样品5~10g，置于研钵中，加少许石英砂 研磨成浆状（干样品经磨碎过筛后，准确称取1~2g），转入 150mL锥形瓶中，用50mL水分多次洗净研钵，洗液一并转入锥 形瓶中，振动、提取10~15min. 2.络合沉淀 在100mL容量瓶中，准确加入Zn（Ac）2标准溶液5mL、浓氨 水3.5mL，摇匀（开始有白色沉淀产生，摇动使沉淀溶解）。 慢慢将提取物转入容量瓶中，不断振摇，在35℃水浴中保温
方法三、高锰酸钾法
一、目的
了解单宁性质及熟练掌握单宁含量的测定方法
二、原理
作为多酚，单宁是一种强还原剂，极易被氧化剂氧化，还可 被活性炭吸附。本测定以高锰酸钾为氧化剂，根据样品中单宁 可以被活性炭吸附，测定样品液用活性碳吸附前后的氧化值之 差，计算单宁物质的含量。
三、材料、仪器与试剂
1、材料：香蕉（未熟透） 2、仪器 ：天平 烧杯（50、100mL） 滤纸（Φ 15㎝）2张 研钵 漏斗 刻度试管（5、10mL）
四、结果计算
c 10 x 100 m K
式中:
x—样品中单宁的质量分数，%； c— 比色用样品溶液中单宁的含量（由标准曲线查得 ）， μg； m — 样品质量，g； K —稀释倍数，如按上述方法取样50时，K=（20/200） ×（2/100）=1/500
6
五、注意事项
1、样品处理时要尽快进行，以免单宁氧化而造成误差。 2、维生素C也能与F-D试剂作用产生蓝色，因此当样品含 有维生素C时需要进行校正，1㎎维生素C相当于0.8㎎单宁 酸。
三、材料、仪器与试剂
1、材料： 香蕉（未熟透）50g 2、仪器： 天平 组织捣碎机 烧杯 移液管 分光光度计 容量瓶 恒温箱 （30℃） 3、试剂 ：
单宁含量测定三种方法
单宁含量测定三种方法单宁是一种广泛存在于植物中的天然化合物，具有很多药理活性以及抗氧化和抗炎作用。
因此，单宁含量的测定对于评估植物材料的药用和保健价值非常重要。
目前，常用的单宁含量测定方法有葡萄单宁定量法、酶解法和高效液相色谱法。
本文将对这三种方法进行详细介绍。
首先是葡萄单宁定量法。
该方法是使用与单宁化学反应形成显色产物，并通过测定产物的吸光度来间接测定单宁含量。
这种方法简单、可靠，并且适用于各种植物材料的单宁含量测定。
具体步骤如下：首先将植物样品粉碎，然后用醇提取单宁，将提取液与酸溶液反应形成有色产物，然后通过分光光度计测定产物的吸光度，并与已知浓度的单宁标准曲线比较，计算出单宁含量。
其次是酶解法。
该方法通过使用单宁酶来降解植物材料中的单宁，并通过测定酶解液中的还原能力来测定单宁含量。
这种方法可以在比较短的时间内得到准确的结果，并且相对简单。
具体步骤如下：首先将植物材料粉碎，并加入含有单宁酶的酶解液，将混合物在恒温条件下酶解一段时间，然后通过淬灭试剂去除还原能力较强的成分，最后通过测定还原能力的方法来估计单宁含量。
最后是高效液相色谱法。
该方法是使用高效液相色谱仪分离和测定植物材料中的单宁化合物。
相比于前两种方法，高效液相色谱法具有更高的准确性和灵敏度。
具体步骤如下：首先将植物样品提取并进行预处理，然后通过高效液相色谱仪进行分离，最后使用紫外检测器或荧光检测器进行检测，并通过峰面积或峰高进行定量分析。
总结起来，葡萄单宁定量法、酶解法和高效液相色谱法是目前常用的单宁含量测定方法。
不同的方法有其各自的优势和适用范围，在实际应用中需要根据具体情况选择合适的方法。
单宁含量的准确测定有助于评价植物材料的药用和保健价值，为植物资源的合理开发和利用提供参考。
单宁含量测定(三种方法)
20~30min.冷却，用水定容至100mL，充分混匀，静置、过滤
（处滤液弃去）。 3.滴定 准确吸取滤液10mL，置于150mL锥形瓶中。加水40mL、 NH3-NH4Cl缓冲溶液12.5mL、铬黑T指示剂10滴，混匀。用 0.0500mol/L的ＥＤＴＡ标准溶液滴定，溶液由酒红色变为纯 蓝色金额为终点。
六、记录实验结果
项目 样品 活性碳吸附后样品
消耗VKMnO4 （mL）
平均消耗VKMnO4 （mL） 单宁含量 （mg/100g）
七、注意事项
1、过滤时由于溶液粘度大，过滤缓慢，只保 留接下来的10mL滤液，以部分代整体。且过 滤时要用干燥滤纸。 2、开始滴定时反应速度慢，待溶液中产生了 Mn2+后，由于Mn2+的催化作用，加快了反应 速率，故能顺利地滴定到呈现稳定的淡粉色为 终点，因而此反应称为自动催化反应，稍过量 的滴定剂本身是紫红色即显示终点。
三角瓶（100mL） 量筒10mL 25mL碱式滴定管 容量瓶 100mL 恒温水浴锅50℃ 3 、试剂 ①0.01 mol/L KMnO4 标准溶液：称取约1.60g KMnO4溶于1000mL蒸馏水中，盖 上表面皿，加热至沸并保持微沸状态约1h。冷却后，放暗处约一周后用垂熔 玻璃漏斗或玻璃丝过滤。将滤液转至棕色瓶内暗处保存。用NaC2O4标定KMnO4 。 ②2.5 mol/L硫酸溶液：取138.8mL浓硫酸稀释至1000mL。 ③活性炭 四、操作步骤 1、称取5g样品在研钵中研磨成匀浆，用漏斗转移容量瓶定容至 100mL，混匀后 用干燥滤过滤，保留滤液。 2、吸取样品滤液5.0mL，于100mL三角瓶中，加10mL水和5mL 2.5 mol/L H2SO4， 混匀，微热（50℃）5min后用0.01 mol/L KMnO4 标准溶液滴定至淡粉色维持 30s不褪色即为终点，记下消耗的体积V1，重复一次做两个平行样。 3、吸取样品滤液5.0mL，于100mL烧杯中，并加3g活性炭，加热搅拌10min，过滤 用少量的热蒸馏水冲洗残渣，收集的滤液中加2.5 mol/L硫酸5mL，同样用 0.01 mol/L KMnO4 标准溶液滴定至终点，记下消耗的体积V2,重复一次做两 个平行样。
植物单宁的含量测定方法
植物单宁的含量测定方法1 植物单宁单宁（Tannins）又称单宁酸、鞣质、鞣酸。
按Bategnt的定义，指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。
主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。
单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢，外用于局部止血和创面保护防止感染发炎；近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。
单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品，生产食品添加剂、风味剂等；在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用；在制革工业中，单宁是栲胶的主要成分。
2 单宁的含量测定经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等；现阶段涌现出许多新型的测定方法，如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。
2.1 经典测定方法2.1.1 皮粉法皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法，从 20 世纪 60 年代至今，原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。
皮粉的主要成分是蛋白质，单宁是多元酚类，分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀，以此使单宁沉淀下来，用重量法测定其含量。
根据皮粉与单宁溶液接触方式不同，可将其分为震荡法和过滤法。
震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁；过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。
通常，过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%～7%。
皮粉法所测的是单宁的绝对含量，并且不需要标样，操作简单，可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。
但皮粉法的缺点是，用重量法测定样品时，须经过过滤、干燥、称重，样品耗用量大，测定时间较长，一般样品分析需20 h 左右，不适合大批量样品的快速测定；没有选择性，对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力，往往使测定结果偏高；适用于单宁含量高的样品，不适合低含量和微量测定；另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。
植物单宁含量检测方法
植物单宁含量检测方法我折腾了好久植物单宁含量检测方法，总算找到点门道。
一开始啊，我真的是瞎摸索。
我就知道单宁这东西在植物里有不少作用，可检测它们的含量那可把我难住了。
我最开始就想，这单宁是能跟一些东西反应的，就像酸和碱能反应一样，那是不是能找到个专门和单宁反应的试剂，然后看反应的情况就能知道单宁含量呢？我尝试用斐林试剂，我寻思这试剂不是能检测还原糖嘛，说不定能跟单宁有点反应呢，结果白费劲，啥动静都没有。
后来我才知道有一种专门检测单宁含量的方法叫高锰酸钾滴定法。
这就像你有一杯浑水，你想知道里面有多少沙子，你可以一勺一勺往外舀沙子，数着舀了多少勺一样。
你把植物提取液放在那儿，然后用高锰酸钾溶液滴定它，高锰酸钾就像专门找单宁的小检查官，碰到单宁就会发生反应。
不过这中间有好多细节得注意。
比如说吧，你得先把植物材料处理好，就像要把菜洗干净切好了才能下锅炒一样。
要把植物弄碎，然后用合适的溶剂提取单宁出来，这溶剂就像小偷，把单宁从植物组织这个大房子里偷出来，我试过水和乙醇，各有利弊吧，乙醇可能提取得更干净点，但你得注意安全啊，那东西可是易燃的呢。
提取完了，开始滴定时，眼睛可得瞪大了，看那个溶液颜色的变化。
最开始我就没看好，滴过了头，结果数据完全不对。
就像做饭放盐放多了，没法吃了。
这个滴定终点的颜色变化真的得仔细看，稍微有点红紫色的时候就得停。
还有啊，高锰酸钾溶液的浓度得配置准确，你浓度错了，那计算出来的单宁含量肯定也是错的。
这就像你量身高，尺子不准，量出来的数据肯定不靠谱。
还有一种方法是比色法。
这个方法呢，感觉有点高级，但说起来也简单。
就好比你挑苹果，要比哪个苹果红，你得有个标准的红色来对比。
比色法就是把提取的单宁和标准的单宁溶液比颜色，颜色越深呢，可能单宁含量就越高。
但是这也有麻烦的地方，就是那个标准曲线不容易做准。
我就做错过一次，把浓度对应的颜色值给搞混了，算出的结果也是乱七八糟的。
我还试过用皮粉法，这皮粉就像单宁的捕手。
不同方法测定苹果中单宁的含量
黑龙江东方学院食品化学综合设计实验实验题目：不同方法测定苹果中单宁的含量姓名曹智学号10202201专业食品科学与工程班级2010-2/2指导教师姚晶学部食品与环境工程实验设计2012年6月8日实验题目果蔬中单宁含量的测定摘要单宁是多酚中高度聚合的化合物，广泛存在于自然界中，主要应用于日化、食品、医药、制革等领域。
简要介绍了植物单宁的性质、生理活性及应用，综述了单宁含量的经典测定方法以及现代测定方法，并对其发展前景进行了展望化学本质：鞣质是高分子多酚衍生物性质：1.有涩味、易氧化2.易与金属离子反应生成褐黑色物质3.重金属离子与鞣质生成不溶性盐4.易溶于水、丙酮、乙醇等，不溶于烃类、氯仿、无水乙醚关键词：1.涩味2.氧化3.金属离子4.吸光值目录摘要 (1)1前言 (3)1.1实验目的 (3)1.2实验原理 (3)2材料与方法 (4)2.1实验材料 (4)2.1.1实验原料 (4)2.1.2实验试剂 (4)2.2实验设备 (5)2.3实验方法 (6)2.3.1络合滴定法 (6)2.3.2分光光度法 (6)2.3.3高锰酸钾滴定法 (7)3结果与讨论 (8)3.1络合滴定法 (8)3.2分光光度法 (9)3.3高锰酸钾滴定法 (9)结论 (11)参考文献 (12)致谢 (13)实验题目果蔬中单宁含量的测定）1 前言1.1 实验目的了解单宁性质及熟练掌握单宁含量的测定方法1.2 实验原理方法一：EDTA络合滴定法本方法操作简便，实验条件容易控制，适合于单宁含量较少的植物样品的测定，测定相对误差一般不超过2%。
根据单宁可与重金属离子形成络合物沉淀的性质，在样品提取液中加入过量的标准醋酸锌溶液，待反应完全后，再用EDTA标准溶液滴定剩余的醋酸锌，根据EDTA标准溶液的消耗量，可计算出样品中单宁的含量方法二：分光光度法分光光度法是通过测定被测物质在特定波长或一定波长范围内光的吸收度，以此对该物质进行定性和定量分析的方法。
单宁的测定方法
油菜籽皮中单宁含量的测定Folin-Denis比色法[3]。
原理单宁类化合物在碱性溶液中,可将磷钨酸钠还原并生成蓝色化合物,颜色的深浅与单宁含量正相关,在760 nm最大吸收处比色,以单宁酸为标样作标准曲线,再根据测得的吸光值在标准曲线上查得对应的单宁含量。
标准曲线的制作准确配制01100 mg/mL的单宁酸标准溶液,分别吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL标准液加入装有25 mL水的50 mL容量瓶中,再各加215 mL Folin-Denis显色剂, 10 mLNa2CO3饱和溶液,摇匀定容,室温下放置30 min后比色,用0 mL标准液的反应体系作参比,每个样品作3次平行测定,以平均吸光值与标准溶液的反应体系作线性回归分析,得到回归方程。
标准曲线如图1所示。
图1 Folin-Denis法测定单宁含量的标准曲线
油菜籽皮中单宁含量的测定取油菜籽皮5 g,用50%乙醇(料液比1：6)在70℃下搅拌40min,超声波辅助提取。
提取3次,将油菜籽皮单宁的提取液合并,定容至250 mL,取提取液1 mL于含约25 mL水的50 mL容量瓶中,加215 mL Folin-Denis显色剂, 10 mLNa2CO3饱和溶液,摇匀定容至50 mL,室温下放置30 min后于760 nm处进行比色测定。
再根据标准曲线查找所测吸光值对应的单宁浓度,计算出油菜籽皮中单宁含量。
单宁含量(% )=单宁量(g) /样品重(g)*250。
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c— 比色用样品溶液中单宁的含量（由标准曲线查得 ）， μg；
m — 样品质量，g；
K —稀释倍数，如按上述方法取样50时，K=（20/200） ×（2/100）=1/500
五、注意事项
1、样品处理时要尽快进行，以免单宁氧化而造成误差。
2、维生素C也能与F-D试剂作用产生蓝色，因此当样品含 有维生素C时需要进行校正，1㎎维生素C相当于0.8㎎单宁 酸。
2、混吸匀取，样微品热滤（液550.℃0m）L，5m于in1后00用mL0三.0角1 瓶mo中l/，L 加KM1n0Om4L水标和准5溶mL液2滴.5定m至ol淡/L粉H色2S维O4持，
30s不褪色即为终点，记下消耗的体积V1，重复一次做两个平行样。
3、吸取样品滤液5.0mL，于100mL烧杯中，并加3g活性炭，加热搅拌10min，过滤
吸取上述滤液2置于已盛有25mL蒸馏水、2.5mLF-D试剂的 50mL容量瓶中，然后加入，剧烈振摇后，以水稀释至刻度， 充分摇匀（此时溶液的蓝色逐渐产生）。同时做空白试验。
于30 ℃恒温箱中放置后，用分光光度计在波长处，以试剂 空白调零，测定吸光值。
四、结果计算
6
x c10 100 mK
式中:
1、材料：香蕉（未熟透） 2、仪器 ：天平
烧杯（50、100mL）
研钵 漏斗
滤纸（Φ15㎝）2张
刻度试管（5、10mL）
三角瓶（100mL）
量筒10mL
25mL碱式滴定管
容量瓶 100mL
恒温水浴锅50℃
3 、试剂
①0.01 mol/L KMnO4 标准溶液：称取约1.60g KMnO4溶于1000mL蒸馏水中，盖
方法二、EDTA络合滴定法
一、 实验目的
了解单宁的性质及熟练掌握单宁含量的测定方法
二、实验原理
根据单宁可与重金属离子形成络合物沉淀的性质，在样品提取 液中加入过量的标准Zn(Ac)2溶液，待反应完全后，再用EDTA 标准溶液滴定剩余的，根据EDTA标准溶液的消耗量，可计算出 样品中单宁的含量。
三、材料、仪器与试剂
2、开始滴定时反应速度慢，待溶液中产生了 Mn2+后，由于Mn2+的催化作用，加快了反应 速率，故能顺利地滴定到呈现稳定的淡粉色为 终点，因而此反应称为自动催化反应，稍过量 的滴定剂本身是紫红色即显示终点。
单宁（tannin）是涩味（acerbity）的重 要代表物，食品化学分析中有多种测 定单宁含量的方法。
2.络合沉淀
水3在.51m0L0，mL摇容匀量（瓶开中始，有准白确色加沉入淀Zn产（生Ac，）摇2标动准使溶沉液淀5溶mL解、）浓。氨 慢慢将提取物转入容量瓶中，不断振摇，在35℃水浴中保温
20~30min.冷却，用水定容至100mL，充分混匀，静置、过滤 （处滤液弃去）。
3.滴定 准确吸取滤液10mL，置于150mL锥形瓶中。加水40mL、
上表面皿，加热至沸并保持微沸状态约1h。冷却后，放暗处约一周后用垂熔 玻璃漏斗或玻璃丝过滤。将滤液转至棕色瓶内暗处保存。用NaC2O4标定KMnO4 。
②2.5 mol/L硫酸溶液：取138.8mL浓硫酸稀释至1000mL。
③活性炭
四、操作步骤
1、称取5g样品在研钵中研磨成匀浆，用漏斗转移容量瓶定容至 100mL，混匀后 用干燥滤过滤，保留滤液。
③p浓H=氨10水的3N5H03m-LN,H用4C水l缓定冲容溶至液10：00称mL取。54gNH4Cl 加水溶解后加入
④铬黑T指示剂：称取0.59铬黑T，溶于10mL 缓冲溶液中，用95%乙醇定容至100mL。
pH=10的NH3-NH4Cl
四、实验步骤
1.样品处理
称取切碎混匀的样品5~10g，置于研钵中，加少许石英砂 研磨成浆状（干样品经磨碎过筛后，准确称取1~2g），转入 150mL锥形瓶中，用50mL水分多次洗净研钵，洗液一并转入锥 形瓶中，振动、提取10~15min.
1/10进行滴定。
方法三、高锰酸钾法
一、目的
了解单宁性质及熟练掌握单宁含量的测定方法
二、原理
作为多酚，单宁是一种强还原剂，极易被氧化剂氧化，还可 被活性炭吸附。本测定以高锰酸钾为氧化剂，根据样品中单宁 可以被活性炭吸附，测定样品液用活性碳吸附前后的氧化值之 差，计算单宁物质的含量。
三、材料、仪器与试剂
1、材料： 香蕉（未熟透）5g 2、仪器：容量瓶 电子天平 研钵 碱式滴定管
3、试剂：
①12.10.0905gm,o用l/水L醋溶酸解锌后标定准容溶至液10：0m准L。确称取Zn(Ac)2·H2 O
②0.0500 mol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准溶液：准确称 取乙二胺四乙酸二钠9.306g,溶解于水，并用水稀释至500mL.
升数，mL W——样品克数，g 0.0416——1mL 0.01 mol/L KMnO4 溶液相当
于单宁的毫克数，mg
六、记录实验结果
项目
样品
消耗VKMnO4 （mL）
平均消耗VKMnO4 （mL）
单宁含量 （mg/100g）
活性碳吸附后样品
七、注意事项
1、过滤时由于溶液粘度大，过滤缓慢，只保 留接下来的10mL滤液，以部分代整体。且过 滤时要用干燥滤纸。
用少量的热蒸馏水冲洗残渣，收集的滤液中加2.5 mol/L硫酸5mL，同样用
0.01 mol/L
个平行样。
KMnO4
标准溶液滴定至终点，记下消耗的体积V2,重复一次做两
xc(V1V2)0.04157100 m
式中： C——KMnO4 摩尔浓度，mol/L V1——滴定样品消耗KMnO4 的毫升数，mL V2——活性碳吸附单宁后所消耗的KMnO4的毫
四、实验步骤
1、标准曲线的绘制 按下表编号，分别加入试剂 于50mL容量瓶，加完后，剧
烈 振摇，以蒸馏水稀释至刻度，充分混合，于30℃恒温箱中放 置 ， 1.5h后，用分光光度计在波长680处测定吸光值，并 绘制标准曲线。
试剂
标准单宁溶液/ml 乙醇（75%）/ml
管号
60g/L偏磷酸溶液/ml 蒸馏水 /ml
４．结果计算
x (c 1 V 1 1 0 c 2 V 2 ) 0 .1 5 5 6 1 0 0 m
式中: χ——样品中单宁的质量分数，％ Ｃ１——Ｚｎ（Ａｃ）２标准溶液的浓度，ｍｏｌ／Ｌ Ｖ１——吸取Ｚｎ（Ａｃ）２标准溶液的体积，mL Ｃ２——EDTA标准溶液的浓度，ｍｏｌ／Ｌ V2——滴定时消耗ＥＤＴＡ标准溶液的体积， mL 0.1556——由实验得出的比例常数，ｇ／ｍｍｏｌ ｍ——样品质量，ｇ 10——分取倍数，及样品络合沉淀后定容至100mL，吸取其中的
F-D试剂 /ml 1mol/l 碳酸钠溶液/ml
0
0 1.7 0.1 25 2.5 10
1
0.1 1.7 0.1 25 2.5 10
2
0.2 1.7 0.1 25 2.5 10
3
0.4 1.7 0.1 25 2.5 10
4
0.6 1.7 0.1 25 2.5 10
5
0.8 1.7 0.1 25 2.5 10
6
1.0 1.7 0.1 25 2.5 10
2、样品测定 果实去皮，迅速称取50g，加入95%乙醇 50mL、偏磷酸
50mL、水50mL，置于高速组织捣碎机中打浆1min（或在研钵 中研磨成浆状）。称取匀浆20于100容量瓶中，加75%乙醇 40mL，在沸水浴中加热20min，冷却后用75%乙醇稀释至刻 度。充分混合，以慢速定量滤纸过滤，弃去初滤液。
NH3-NH4Cl缓冲溶液12.5mL、铬黑T指示剂10滴，混匀。用 0.0500mol/L的ＥＤＴＡ标准溶液滴定，溶液由酒红色变为纯 蓝色金额为终点。
四、注意事项
1.单宁遇Fe3+会发生颜色反应，因此处理样品时，不能与分歧 接触，切碎样品应采用不锈钢刀。
2.单宁容易被氧化，样品处理后应立即进行测定。同时要注意 控制加热温度，加热过程中要加些摇动数次，意识反应完全。
不同方法测定单宁（tannin）含量
的比较研究
测定单宁含量的方法
一、比色法 二、EDTA络合滴定法 三、高锰酸钾滴定法
三种方法的比较
方法一、 比色法
一、 实验目的
了解单宁的性质及熟练掌握单宁含量的测定方法
二、实验原理
样品中的单宁在碱性溶液中将磷钨钼酸还原，生成深蓝 色化合物，其颜色的深浅与单宁的含量成正比，可与标准 进行比较定量。
三、材料、仪器与试剂
1、材料： 香蕉（未熟透）50g 2、仪器： 天平 组织捣碎机 烧杯 移液管
分光光度计 容量瓶 恒温箱 （30℃） 3、试剂 ：
① 标准单宁酸溶液（0.5mg/mL）：准确称取标准单宁
酸50 mg，溶解后用水稀释至100 mL，用时现配。 ② F-D( Folin-Donis)试剂：称取钨酸钠（Na2WO4· H2O） 50g、磷钼酸10g，置于500mL锥形瓶中，加375mL水溶解， 再加磷酸25mL，连接冷凝管，在沸水浴上加热回流2h，冷却 后用水稀释至500mL。 ③ 60g/L 偏磷酸溶液。 ④ 1 mol/L碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠53g，加水溶解并稀释 至500mL。 ⑤ 95%和75%乙醇溶液。