血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书1.实验原理脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。
尿素被脲酶水解产氨。
在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。
NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。
本法是连续监测法。
脲酶尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－谷氨酸脱氢酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD＋+H2O2 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。
无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。
用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：申能尿素测定试剂盒（142 3107170 1 试剂1：6×64ml＋试剂2：6×16ml）6.1.1 试剂组成试剂1：Tris缓冲液pH7.8 120mmol/Lα-酮戊二酸7mmol/LADP 0.6mmol/L谷氨酸脱氢酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L试剂2：NADH 0.25mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
实验十三血清尿素氮测定(脲酶—Berthelot比色法)
实验十三血清尿素氮测定（脲酶—Berthelot比色法）一、实验目的与要求1 了解血液尿素氮（BUN）在人体营养学上的生理学意义及其在代谢上的重要性。
2 掌握血液尿素氮测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理尿素在脲酶作用下分解生成氨。
在碱性条件下，经次氯酸氧化生成的氯胺与苯酚被亚硝基铁氰化钠催化生成蓝色的靛酶。
其反应式为： CH2NH2N尿素O+HOH脲酶NH3彩+CHOH2N氨基甲酸O-2NH3+CO2氨NH3+OCl-NH2Cl+OH-次氯酸氨胺催化剂NH2Cl+OH+OH-Cl-+H2O+HONH2苯酚P胺基苯酚HONH2+OH-+O2==N——O-+H2O酚靛三、实验仪器与试剂1 仪器（1） AT648半自动生化分析仪1台；（2） 4孔恒温水浴锅1个；（3）振动摇床1台。
2 分组及仪器2人一组，每组仪器包括：（1）试管架1个；（2） 2ml试管10个；（3） 20μl微量加样器1个；（4） 1ml移液管1个；（5） 5ml移液管2个；（6）吸耳球1个；（7）搪瓷盘1个；（8）微量加样滴头；（9）吸水纸。
3 本试剂盒内含5种试剂：（1）脲酶（冻干） 2瓶（2） pH 8.0缓冲液：由乙二胺四乙酸二钠盐和磷酸氢二钾组成 1×46ml（3）显色剂Ⅰ：由苯酚和亚硝基铁氰化钠组成 1×225ml（4）显色剂Ⅱ：由氢氧化钠和安替福民组成 1×225ml（5）尿素氮标准液（20mg/dl） 2×2ml四、实验步骤1 血清（1）取脲酶一瓶，用23.0ml pH 8.0缓冲液溶解。
（2）于一系列试管中，按下表加入各溶液。
表131系列反应管中所加溶液的量空白管标准管样品管样品（μl）——20标准液（μl）—20—酶液（μl）0.50.50.5 （3）于37℃水浴中保温15min，然后各管分别加入显色剂Ⅰ和显色剂Ⅱ各2.5ml。
血清尿素氮的测定[方案]
![血清尿素氮的测定[方案]](https://img.taocdn.com/s3/m/90f2e958ff4733687e21af45b307e87100f6f855.png)
血清尿素氮的测定【目的要求】1.了解血清尿素氮测定的方法及临床意义。
2.复习尿素的生成机理及其意义。
【实验原理】血清（或血浆）中的尿素，在尿素氮试剂的酸性环境中与二乙酰-肟（DAM）共沸后，可缩合成一红色化合物，称为fearon反应。
其颜色的深浅与血清（或血浆）中尿素的含量成正比，与同样处理的尿素氮标准液比色，即可测算出血清（或血浆）中尿素氮的含量。
【实验材料】1.器材刻度吸管（0.1ml、2ml、10ml）恒温水浴箱分光光度计2.试剂（1）待测血浆（2）尿素氮试剂（3）二乙酰-肟试剂（4）尿素氮标准液【操作步骤】取试管三支按下表操作1：4稀释血清（或0.1血浆）尿素氮标准液0.1（0.02mg/ml）蒸馏水0.1二乙酰-肟0.5 0.5 0.5尿素氮试剂 5.0 5.0 5.0 混匀，置沸水浴中加热15min，立即用自来水冷却5分钟。
分光光度计选用540nm波长，以空白管调零点，读取各管吸光度。
计算及结果分析尿素（mg%）×尿素氮标准液浓度*5(mg/ml；mg/100ml)【注意事项】1. 此法灵敏度高，用量极微（一般只需0.02ml血清即可）。
本实验是先将血清用生理水以1：4加以稀释再取0.1ml，故最后计算时，应乘以稀释倍数“5”2. 试剂中加入硫胺脲和镉离子，可增进显色强度和色泽稳定性，但仍有轻度褪色现象（小于5%/h）。
3. 此法操作简单，特异性强，不受其他非蛋白质含氮化合物如尿酸、肌酸等影响，但应控制好实验条件。
4. 吸管必须校正，使用时务必注意清洁干净，加量务必准确。
5.尿液中的尿素氮也可用此法进行测定。
由于尿液中尿素氮含量高，标本需用蒸馏水以1:50稀释。
如果呈色后吸光度仍超过本法的线性范围，还需将尿液再稀释，重新测定。
【思考题】。
测定血清尿素的实验报告
一、实验目的1. 掌握血清尿素测定的原理和方法。
2. 熟悉二乙酰-肟法测定血清尿素氮的实验操作。
3. 了解实验中可能出现的误差及其处理方法。
二、实验原理血清尿素氮（Blood Urea Nitrogen，BUN）是血液中尿素氮的浓度，是反映肾功能的重要指标。
尿素氮是蛋白质代谢的终产物，主要由肝脏产生，通过肾脏排泄。
二乙酰-肟法是一种常用的测定血清尿素氮的方法，其原理如下：在酸性反应环境中加热，尿素与二乙酰缩合，生成色素原二嗪，称为Feorin反应。
因为二乙酰不稳定，所以通常由反应系统中二乙酰-肟与强酸作用，产生二乙酰，二乙酰与尿素反应，综合生成红色的二嗪。
其颜色的深浅与血清中尿素含量成正比。
三、实验材料1. 试剂：- 碱性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%H3PO466ml冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉2g溶解后加蒸馏水稀释至1升，置棕色瓶放冰箱保存，可稳定半年。
- 二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml溶解后，再用蒸馏水稀释至1升置棕色瓶中，贮存放于冰箱内可保存半年不变。
- 尿素标准贮存液（100mmol/L）：称取干燥纯尿素（MW60.06）0.6g，溶解于水中并稀释至100毫升，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内稳定六个月。
- 尿素标准应用液（5mmol/L）：取5.0ml贮存液用去氨蒸馏水稀释至100ml。
2. 仪器：- 分光光度计- 离心机- 实验室试管四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：- 取5支试管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0ml尿素标准应用液，用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。
- 向每支试管中加入2.0ml碱性试剂，混匀。
- 将试管置于沸水中加热5分钟，取出冷却至室温。
- 以540nm波长，1cm光程，测定各管吸光度。
- 以尿素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：- 取2支试管，分别加入0.5ml血清和0.5ml尿素标准应用液，用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。
bun检查标准值-概述说明以及解释
bun检查标准值-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述是文章引言的一部分，旨在简要介绍文章主题和目标。
对于本篇文章来说，概述部分应该对BUN检查及其标准值进行简要介绍，并提出本文的目的。
以下是关于BUN检查标准值的概述：在医学检验中，血尿素氮（Blood Urea Nitrogen，简称BUN）是一项常见的检查项目，被广泛用于评估肾脏功能和水平衡。
BUN指的是血液中尿素氮的浓度，它是尿素通过肝脏代谢产生的一种氮代谢产物。
BUN检查在临床诊断中扮演着重要的角色。
通过检测BUN水平，医生可以对肾脏和泌尿系统的功能进行评估，从而及早发现和治疗许多与肾脏相关的疾病和病理状态。
BUN检查结果还可以帮助医生判断体内的氮代谢情况，及时调整治疗方案。
在BUN检查中，有一组常见的标准值被广泛接受和使用。
这些标准值是根据大量的临床研究和统计数据得出的，能够为医生提供可靠的参考范围，帮助判断一个人的BUN水平是否正常。
本文的目的是通过对BUN检查的概述和常见标准值的讨论，深入了解BUN检查在临床实践中的重要性。
同时，我们还将探讨当前对BUN检查标准值的争议和讨论，并对未来BUN检查的发展趋势进行展望。
在接下来的章节中，我们将详细介绍什么是BUN检查，以及它在临床中的意义。
我们还将探讨常见的BUN检查标准值，并讨论这些标准值的合理性和适用性。
最后，我们将总结BUN检查的重要性，并展望未来在该领域的研究和发展方向。
通过对BUN检查标准值的全面了解，我们可以更好地理解其在临床实践中的应用，并为医生和研究人员提供有价值的参考信息。
让我们一起深入研究BUN检查标准值的内容，探索其背后的科学原理和临床应用。
1.2 文章结构一、文章结构文章旨在探讨"BUN检查标准值"的相关内容，主要分为引言、正文和结论三个部分。
1. 引言在引言部分，我们将对文章的整体内容进行概述，介绍"BUN检查标准值"的背景和意义，并明确文章的目的和重要性。
尿素检测标准操作规程SOP
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
α-酮戊二酸
13.0mol/l
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
340nm
辅助波长
405nm
反应方法
速率法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
200ulቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
样本
2.5ul
4.1生理性：高蛋白饮食可引起血尿素浓度和尿液排出量显著增高。成人血清尿素浓度男性比女性平均高出0.3-0.8mmol/l，并随着年龄增加有增高倾向。妊娠妇女由于血容量增加，尿素浓度比非孕妇低。
4.2病理性：分为肾前性、肾性、肾后性。①肾前性:主要是严重失水引起的血液浓缩，肾血流量減少及肾小球滤过率降低，从而使尿素潴留，可见于剧烈呕吐、肠梗阻和长期腹泻;②肾性:为最常见的因素，可见于急性肾小球肾炎、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等，在肾功能不全的代偿期可见尿素轻度升高(＞8.0mmol/L)，肾功能衰竭失代偿期，尿素可中度升高(17.9～21.4mmol/L)，肌酐也中度升高(442.0umol/L);尿毒症时尿素＞21.4mmol/L，肌酐也可达1800umol/L，为尿毒症的诊断标准之一;③肾后性:如前列腺肥大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等都可能使尿路阻塞引起血尿素升高。血液尿素减少较为少见，除了妊娠、蛋白质营养不良等情況外。常表示有严重的肝病、肝坏死。
12.2尿素氮测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（0.3-35.7）mmol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（0.3-10.0）mmol/L范围内，线性偏差应≦2.0mmol/L;（10.0-35.7）mmol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
血清尿素尿素氮(UreaBUN)测定标准操作程序SOP文件
CALIBRATION METHOD [ LINEAR ]
POINT(3) [ 0 ]
CALIBRATION POINT [ 2 ]
POINT(4) [ 0 ]
SPAN POINT [ 2 ]
WAVELENGTH(PRIMARY) [ 340 ]
DUPLICATE LIMIT(%) [ 6 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ -22 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
SE(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 20000 ]
R.VOLUME(R3) [ 110 ]
来源：Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-19
血清尿素/尿素氮（Urea/BUN）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共4页
其它适合的质控品
贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
9.2在测定过程中，各种器材和蒸馏水应无氨离子污染，否则结果偏高。GLDH的测定会在反应杯中残留氨，会干扰到UREA/BUN的检测。因此不能将此两个项目安装在一起。
9.3血氨升高可使尿素结果升高。尿液中，内生得氨也会干扰UREA/BUN的检测。在酸性条件下，检测结果也会偏高。
9.4仅应用于体外诊断。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-19
血清尿素/尿素氮（Urea/BUN）测定
谷氨酸脱氢酶的检测方法
GLDH检测方法(Glutamate Dehydrogenase)SDZ5001401. 目的本程序是为了建立谷氨酸脱氢酶（Glutamate Dehydrogenase）的活性检测方法，适用于GLDH成品的活性检测。
2. 检测2.1原理α-Ketoglutarate + NH3 + NADH + H+L-Glutamate+ NAD+ +H2ONADH的消耗可以通过340nm的光吸收进行检测。
2.2试剂：A 0.1 M Tris-HCl 缓冲液, pH 8.3B 1.5M NH4Cl溶液C 0.225M α-酮戊二酸溶液(pH 7.0-9.0)D 7.5mM NADH溶液E 酶稀释液: 0.1 M Tris-HCl 缓冲液, pH 8.3试剂的配制方法详见各试剂配制记录,配制人员需完整填写配制记录。
3 操作规程：3.1仪器参数设定若仪器中无已保存参数，按以下参数设定。
若已有相关参数，调取后确认。
检测方法：动力学扫描测量波长：340nm 测量时间：180s延迟时间：60s 积分时间：120s系数/因子：6.776 测量温度：30±1℃3.2 样品准备若待测样品为固体，可以按10mg 样品/1000ul 超纯水比例溶解。
溶解后于2-8度放置30min。
3.3 检测方法3.3.1 在石英比色皿中加入2.5ml 试剂A, 200ul试剂B,100ul 试剂C, 100ul D于30度孵育2min。
3.3.2 加入50ul 样品后, 温和混匀后开始测定。
3.3.3 测定结束后，记录相应数值：起始读数、△A/min test、活性值（U/ml）。
3.3.4 活性值（U/ml）范围为0.1-0.3U/ml，若超出范围，待测样品需经试剂D稀释后再次进行检测。
3.3.5测定样品前需检测空白反应值，即其他操作不变，用500ul E代替样品加入比色皿后进行反应,测定△A/min blank。
3.3.6计算公式活性(U/ml) =(△A/min test-△A/min blank)×6.776×df （稀释倍数）。
尿素氮测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求北化康泰
尿素氮测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中尿素氮的含量。
1.1产品型号规格试剂1：10ml×10（干粉复溶后的体积）；试剂2：100ml×1。
2.1 外观：试剂1为干燥粉末，试剂2为澄清溶液，外包装完整。
2.2 净含量：不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：A≥1.00。
（波长340nm，光径10mm）2.3.2试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.010。
（波长340nm，光径10mm）2.4 分析灵敏度：浓度为7.14mmol/L时,吸光度变化率△A/min≤-0.03。
2.5 线性区间2.5.1线性相关系数：[0.9，35.7]mmol/L范围内，线性相关系数r≥ 0.9900。
2.5.2线性偏差：[0.9，7.14] mmol/L时，绝对偏差不超过±0.714mmol/L；（7.14, 35.7] mmol/L时，相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度2.6.1重复性：变异系数（CV）≤5.0%。
2.6.2批内瓶间差：CV≤5.0%。
2.6.3批间差：相对极差≤10%。
2.7 准确度：测定国家标准物质，相对偏差不超过±10%。
2.8 稳定性2.8.1效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃贮存，有效期为24个月,保存至有效期末进行测定，试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.6.2、2.7的要求。
2.8.2复溶稳定性：工作液(将试剂1用10ml试剂2溶解)18℃～25℃可稳定24小时，2℃～8℃可稳定7天。
测定结果满足2.5、2.7的要求。
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法作业指导书1.实验原理脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。
尿素被脲酶水解产氨。
在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。
NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。
本法是连续监测法。
脲酶尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－谷氨酸脱氢酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD＋+H2O2 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。
无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。
用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：奥林巴斯尿素测定试剂盒试剂1：＋试剂2：6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
尿素测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求senmeixikema
尿素测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法) 适用范围：用于体外定量检测人血清中尿素的浓度。
1.1规格a) 试剂1：2×40ml，试剂2：2×10ml；b) 试剂1：2×60ml，试剂2：2×15ml；c) 试剂1：2×72ml，试剂2：2×18ml；d) 试剂1：2×80ml，试剂2：2×20ml；e) 试剂1：2×400ml，试剂2：2×100ml；f) 试剂1：4×60ml，试剂2：4×15ml；g) 试剂1：4×60ml，试剂2：4×60ml；h) 试剂1：6×66ml，试剂2：6×43ml；i) 试剂1：8×60ml，试剂2：2×60ml；j) 试剂1：12×16ml，试剂2：12×4ml；k) 试剂1：1×40ml，试剂2：1×10ml；l) 试剂1：6×16ml，试剂2：6×4ml；m) 试剂1：4×40ml，试剂2:4×10ml。
1.2 组成试剂主要组分见表1：表1 试剂主要组分2.1 外观外包装完整无破损，标签清晰；试剂1应为无色或淡黄色透明溶液；试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。
2.2 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在340nm处测定试剂空白吸光度，应≥1.0。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率(△A/min)应≤0.04。
2.4 分析灵敏度测定浓度为30mmol/L的样品，吸光度变化率（△A/min）应不低于0.025。
2.5 线性2.5.1在[0.9，43]mmol/L范围内，线性回归的相关系数应不低于0.990；2.5.2测试浓度[15，43]mmol/L的样品，相对偏差应不超过±10%；测试浓度[0.9，15)mmol/L的样品，绝对偏差应不超过±1.5mmol/L。
尿素测定试剂盒(尿素酶-谷氨酸脱氢酶法)产品技术要求shouyi
尿素测定试剂盒（尿素酶-谷氨酸脱氢酶法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中的尿素含量。
1.1 产品型号/规格1.2. 产品组成试剂1:谷氨酸脱氢酶≥5.4U/L，α-酮戊二酸15mmol/L，NADH 0.18mmol/L。
试剂2:脲酶≥1KU/L。
2.1 外观试剂1与试剂2均为无色透明溶液；试剂盒各组分齐全、完整，液体无渗漏，包装标签文字符号清晰牢固不易脱落，外包装完整无破损。
2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不小于1.0。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，试剂空白波光度变化率（ΔA/min）应不大于 0.04/min。
2.4分析灵敏度测定16.4mmol/L尿素时，吸光度的变化率在（0.1525±0.0202）/min范围内。
2.5准确度相对偏差在±10%范围内。
2.6 精密度2.6.1重复性用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数（CV）应不大于4.0%。
2.6.2批间差试剂（盒）批间相对极差应不大于5.0%。
2.7 线性区间试剂线性在[0.5, 35.7] mmol/L区间内：a) 线性相关系数|r|应不小于0.990；b) [0.5，5.0] mmol/L区间内，线性绝对偏差应不超过±0.5mmol/L；（5.0，35.7] mmol/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装试剂2～8℃避光保存有效期12个月，到效期末的样品检测，检测结果应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法-检验科生化室作业书
血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法实验原理脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。
尿素被脲酶水解产氨。
在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH 同时被氧化成NAD＋。
NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。
本法是连续监测法。
脲酶尿素+2H2O2NH4＋+2HCO3－谷氨酸脱氢酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADHL-谷氨酸+NAD＋+H2O2标本：2.1病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。
无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。
用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3.标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。
4.标本运输：常温条件下保存运输。
5.标本拒收标准：细菌污染的标本。
6.实验材料6.1试剂：申能尿素测定试剂盒（14231071701试剂1：6×64ml＋试剂2：6×16ml）6.1.1试剂组成试剂1：Tris缓冲液pH7.8120mmol/Lα-酮戊二酸7mmol/LADP0.6mmol/L谷氨酸脱氢酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L试剂2：NADH0.25mmol/L6.1.2试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3试剂稳定性与贮存试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
应采取必要的预防措施使用试剂。
生化检测方法汇总
一、血清谷丙转氨酶（SGPT）赖氏改良法器材：试管及试管架、移液器或吸量管、恒温水浴锅、721型分光光度计、温度计、动物血清试剂：(1）0.1mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液：①0.1mol/L磷酸氢二钠溶液：称取Na2HPO414.22g或Na2HPO4·2H2O17.8g溶解于蒸馏水中，并稀释至1 000ml，4℃保存.②0.1mol/L磷酸二氢钾溶液：称KH2PO413.61g溶解dH2O中，稀释至1000ml，4℃保存。
③将0。
1mol/L磷酸氢二钠溶液420ml和0。
1mol/L磷酸二氢钾溶液80ml混和即为0。
1mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液。
加氯仿数滴,4℃保存.（2）标准丙酮酸(含丙酮酸2.0μmol/mL）：取标准丙酮酸钠10mg,用上述缓冲液准确定容为50mL。
此液须当日用当日配。
（3）SGPT底物液(含α-酮戊二酸2μmol/ml及DL-丙氨酸200μmol/ml) : 取α—酮戊二酸29.2mg，DL-丙氨酸7g ,用试剂1溶成100ml，在稀释到刻度前，以1mol /L NaOH调pH 7.4（因为转氨酶在pH7.3以下或7。
6以上的环境中酶活性下降)，加数滴氯仿防腐。
此液于冰箱保存可使用4天。
(4）GOT底物液(DL–天冬氨酸200mmol/L ,α—酮戊二酸 2mmol/L）:称取α- 酮戊二酸29。
2mg和DL-门冬氨酸2.66g置于一小烧杯中，加入1mol/L氢氧化钠20.5ml使溶解,并校正pH至7。
4,然后将溶液移入100ml容量瓶内,用0。
1mol/L磷酸盐缓冲液定容至刻度.放置冰箱内保存。
(5）2。
4—二硝基苯肼溶液:取分析纯2，4-二硝基苯肼19。
8mg，用1mol/LHCl溶于100ml，置棕色瓶中保存。
（6）0.4mol/L NaOH溶液：0.1M磷酸盐缓冲液PH7。
4 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1相当于谷丙转氨酶单位0 28 57 97 150 200相当于谷草转氨酶单位0 24 61 114 190 —每个样做3个平行,置37水浴30分钟，各管加2,4—二硝基苯肼液0。
BUN检测标准操作规程
BUN检测标准操作规程1 目的建立BUN检测标准操作规程，确保其操作规范化。
2 适用范围适用于迈瑞BS200生化仪BUN检测的操作。
3 引用文件卫生部<<全国临床检验操作规程>>第三版第四篇临床化学检验第六章第一节463页。
浙江省<<临床检验管理与技术规程>>第四篇第七章第一节515页4 原理及试剂1）试剂厂家:深圳迈瑞脲酶2）原理:尿素+2H2O + --------→2NH4+CO2谷氨酸脱氢酶α-酮戊二酸+NH4+NADH ------------→L-谷氨酸+NAD+ + H2O 通过上述二步反应，使NADH氧化成NAD+，从而引起在波长340nm处吸光度下降，在固定间隔时间内吸光度下降值正比于样本中尿素氮含量。
3）试剂组成:尿酸试剂成分成份成份实验浓度R1 Tris缓冲液120mmol/LADP 750mmol/L脲酶≥40KU谷氨酸脱氢酶≥0.4KUR2 NADH 1.2mmol/Lα-酮戊二酸25mmol/L5 标本采集与处理：血清于2℃-8℃避光保存可稳定5天，或冰冻保存，但不能反复冻融。
6 测定程序6.1 测定器材：全自动生化分析仪（迈瑞BS200）。
6.3.1开机前检查6.3.1.1检查电源，确认电源有电并且能够提供正确的电压。
6.3.1.2检查分析部、操作部和输出部的通讯线和电源线，确认已连接且没有松动。
6.3.1.3检查打印纸是否足够。
6.3.1..4确认试剂盘的39号位置已放置足够的强化清洗液，40号位置已放置足够的蒸馏水。
6.3.1.5检查去离子水的连接、废液的连接、注射器的连接是否漏液。
6.3.1.6检查加样针是否弯曲、有污物、挂液。
6.3.1.7检查搅拌针是否弯曲、有污物。
6.3.1.8检查去离子水桶内是否有足够的去离子水。
6.3.1.9检查废液桶是否清空。
6.4开机系统通上电后，按下列顺序依次打开电源：分析部主电源、分析部电源、操作部显示器电源、操作部主机电源、打印机电源。
血清尿素氮谷氨酸脱氢酶测定法
血清尿素氮（BUN）谷氨酸脱氢酶测定法1.实验原理脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。
尿素被脲酶水解产氨。
在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD ＋。
NADH的减少和样品中尿素浓度成正比。
本法是连续监测法。
脲酶尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－谷氨酸脱氢酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD＋+H2O2 标本：2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。
无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。
用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂：申能尿素测定试剂盒（142 3107170 1 试剂1：6×64ml＋试剂2：6×16ml）6.1.1 试剂组成试剂1：Tris缓冲液pH7.8 120mmol/Lα-酮戊二酸7mmol/LADP 0.6mmol/L谷氨酸脱氢酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L试剂2：NADH 0.25mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
实验五血清尿素氮的测定
血清尿素氮的测定一 .实验原理血清中尿素在氨基硫脲存在下，与二乙酰一肟在强酸溶液中共煮时，可生成双乙酰和尿素形成的红色复合物( 二嗪衍生物)，其颜色深浅与尿素含量成正比，与同样处理的尿素标准液比色。
即可求得血清中尿素的含量。
由于反应在强酸中进行，所产生的羟胺是干挠物质，所以必须用氧化剂将其氧化除去。
在呈色反应中产生的有色复合物对光不稳定．加入氨基硫脲可增加其稳定性，还可提高尿素与双乙酰反应的灵敏度。
二 .实验操作取试管 3支，注明空白管、标准管、测定管，按下表操作管试号测定管标准管空白管剂血清(ml) 0.02 ————尿素氮标准应用液 (ml) ——0.02 ——蒸馏水 (ml) ————0.02二乙酰一肟试剂 (ml) 0.5 0.5 0.5尿素氮试剂 (ml) 5.0 5.0 5.0混匀后置沸水浴中煮沸12分钟，取出在冷水中冷却5分钟，分光光度计波长540nm比色，以空白管调零，测定各管吸光度值。
三 .计算测定管吸光度血清尿素氮（mmol / L ） = ——————— X 17.85标准管吸光度正常值参考范围3． 57～ 14． 28mmol／ L四 .临床意义血液中非蛋白含氮化合物包括尿素、尿酸、肌酸、肌酐、胆红素及氨等。
其中尿素含量约占l ／ 3～ 1／ 2。
尿素是蛋白质代谢的产物．通过肾脏排出，故测血清尿素氮可作为检测肾脏功能的试验，并且其增高程度与病变的严重程度呈平行关系。
五 .试剂1.尿素氮试剂：蒸馏水lOOml ，浓硫酸 44ml， 85％磷酸 66ml，冷却至室温后，加氨基硫脲50mg，硫酸镉 (3CdSO４· 8H 2O)2g ，溶解后稀释至1000ml。
2.20g／ L 二乙酰一肟试剂：称取二乙酰一肟20g，加入蒸馏水约900ml，溶解后稀释至 1000ml.３.尿素氮标准贮存液 (357mmol／L)：称取尿素 1.072g溶解于蒸馏水中定容至 1000ml。
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血清尿素氮BUN谷氨酸脱氢酶测定法
1.实验原理
脲酶-谷氨酸脱氢酶（Urease-GLDH）连续监测法。
尿素被脲酶水解产氨。
在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反应生成谷氨酸，NADH同时被氧化成NAD＋。
NADH 的减少和样品中尿素浓度成正比。
本法是连续监测法。
脲酶
尿素+ 2H2O 2 NH4＋+ 2 HCO3－
谷氨酸脱氢酶
NH4＋+α-酮戊二酸+NADH L-谷氨酸+NAD
＋+H
2O
2 标本：
2.1 病人准备：血清无特殊要求。
要留取24小时尿样。
2.2 类型：血清、血浆（不可使用肝素铵）、新鲜尿液。
无溶血和凝块的血清，如果必须使用血浆，建议使用无铵离子的抗凝血剂，如EDTA和肝素钠。
用新鲜尿液作样品时，用蒸馏水作1:100稀释。
3. 标本存放：血清或血浆稳定性：4～25℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1年。
尿液稳定性：20～25℃保存可稳定2天；4～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定1个月。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂：奥林巴斯尿素测定试剂盒试剂1：＋试剂2：6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存
试剂保存于2～25℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的
叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以TruCal U复合校准品尿素氮校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。
将尿素量乘以系数2.8可以换算成尿素氮量；将尿素氮量乘以系数0.357可以换算成尿素量。
手工测定计算方法为：
Au
尿素氮浓度（mmol/L）＝×校准液浓度
As
12. 参考值范围
血清/血浆[1]
成人（mmol/L）
全球 2.8～7.2
女性<50岁 2.6～6.7
女性>50岁 3.5～7.5
男性<50岁 3.2～7.3
男性>50岁 3.0～9.2
儿童
1～3岁 1.8～6.0
4～13岁 2.5～6.0
14～19岁 2.9～7.5
尿素/肌酐比率[1]25～40[(mmol/L)/(mmol/L)] 尿液[2]0.43～0.72mol/d
（注：各实验室应有自己的参考范围。
）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义：尿素是蛋白质分解代谢的含氮终产物。
高尿素血症或氮血症表现为血液中尿素水平升高。
鉴别肾前和肾后氮血症时可以同时检测尿素和肌酐。
因脱水、蛋白质代谢增加、皮质醇治疗或肾脏灌注减少等引起的肾前氮血症，表现为尿素水平升高而肌酐水平正常。
由泌尿管道阻塞引起的肾后氮血症，表现为尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度较小。
发生肾病时，肾小球滤过作用明显下降或蛋白质摄入量大于200 g/天都会导致尿素浓度升高。
尿素氮的检测用于诊断和治疗某些肾脏疾病和代谢紊乱。
尿素氮大约占血液中非蛋白氮的75%。
它通过肝脏中的氨进行合成，是蛋白质脱氨作用的产物。
通过肾小球从血液中过滤尿素到尿中，是消除体内多余氮的主要方法。
血液尿素氮（BUN）水平是肾功能以及肾前状态和肾后状态的度量标准，肾前因素引起的BUN的升高包括心脏代偿失调，缺水或增加的蛋白质分解代谢。
水平增加的肾脏因素有急性肾小球肾炎，慢性肾炎，多囊肾，肾纤维化和肾小管坏死。
任何类型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的肾后因素1。
肾小球清除尿素和肌酸酐，但是，尿素随后部分地被肾小管重吸收，然而肌酸酐却不会。
因此，血清尿素氮和血清肌酸酐测定经常同时用于肾功能的不同诊断中。
14. 操作性能
14.1 线性范围：0.3～50mmol/L
14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内不精密度小于3%，总不精密度小于5%。
用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规
则。
批内精密
度
n=20
x
(mmol/L
)
s
(mmol/L
)
CV
(%)
天间精密
度
n=20
x
(mmol/L
)
s
(mmol/L
)
CV
(%)
样品1 4.96 0.27 5.41 样品1 5.23 0.30 5.79 样品28.77 0.27 3.13 样品28.77 0.34 3.87 样品319.48 0.25 1.27 样品319.48 0.55 2.86 14.3 方法学比较：本公司的试剂(y)与某商品化试剂
(x)，同时对68个样品进行Urea检测，将检测结果作方
法学比较，其统计结果如下：y=0.99x+0.176mmol/L；
r=0.999。
14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.3mmol/L。
14.5 病人结果可报告范围：0.3～50mmol/L
15. 超出范围结果处理：本法线性上限血清/血浆为
50mmol/L、尿液为5mol/L。
如样品测定值超过上限时，应
将样品用0.9%的氯化钠溶液作1:2稀释，重新测定，结
果乘以3。
16. 病危报警值的处理：当尿素氮测定值>36mmol/L时，
在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。
17. 方法局限性
17.1 本法线性上限血清/血浆为50mmol/L、尿液为
5mol/L。
如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%的
氯化钠溶液作1:2稀释，重新测定，结果乘以3。
17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度≤1704μmol/L，
胆红素浓度≤684μmol/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，甘油
三酯浓度≤22.6mmol/L时没有观察到干扰。
铵离子会影响
检测结果，因此收集血浆时勿用肝素铵抗凝！
18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家
进行维修。
19. 参考文献
1.T homas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1s t ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.374-7.
2.B urtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3r d ed. Philadelphia: W. B.
Saunders Company; 1999.p.1838.
3. Talk H, Schubert GE. Enzymatische Harstoff bestimmung in Blut und Serum im optischen Test nach Warburg (Enzymatic determination of urea in blood and serum with the optical test according to Warburg). Klin Wschr 1965;43:174-5.
20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。