蛹虫草人工培育技术
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蛹虫草人工培育技术
蛹虫草人工培育技术
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蛹虫草,又称北冬虫夏草,北虫草,是子囊菌亚门,麦角菌目,麦角菌科,虫草属的模式种,与冬虫夏草是同属不同种,也是一种久负盛名的药用真菌。可全草入药,具有特殊的药用价值和滋补功效。含有虫草酸、虫草素、虫草多糖、超氧化物歧化酶SOD和微量元素硒等多种生物活性物质,可促进机体新陈代谢,提高机体的免疫功能。古人就有宁要虫草一把,不要黄金满车之说。
蛹虫草生理独特,生态复杂,自然界是鳞翅目昆虫的蛹体感染虫草菌后形成的虫与真菌两部分组成复合体,主要生长在针、阔叶林或混交林地表土层中。在冬季幼虫蛰居土里,菌类寄生其中,吸取营养,幼虫体内充满菌丝而死。到了夏季,从幼虫尸体上面生出幼苗,形似草,夏至前后采集而得到。蛹虫草自然分布资源数量很少,价格昂贵。采用传统人工栽培,是把虫草菌注入到活的蚕蛹身上,模拟自然条件得到蛹虫草。但采用这种方法培育,注射技术
难以控制,容易污染,产量低,一般农户难以操作。
近年来,也有不少人参照常规药用真菌的生产方法,出现培养基营养配比不合理,菌种退化、污染严重等多种现象,导致产量下降、效益较低。为此,杭州市农科院科研人员通过多年的高产栽培研究和不同菌株比较试验,采用大米代替蛹体作为培养基,培育蛹虫草,获得了成功。经检测,人工培养虫草的主要营养与药用成分与野生虫草的含量相当。而且采用人工代料培育蛹虫草具有成功率高,生长周期短等优点,一般从接种到子座成熟只要40—45天。蛹虫草人工培育过程与天然冬虫夏草不同,只是生产虫草上部子座,没有下部虫子。现将培育技术介绍如下:
人工培育蛹虫草的操作流程主要可分为以下几个阶段。
菌种准备→ 培养基的准备→ 接种→ 菌丝培养→ 出草管理→ 采收
菌种准备:
蛹虫草的菌种不能长期保存,也不要多次转管扩繁,否则菌种容易退化、变异,使子实体生长不良,而且产量和质
量都会有明显下降。因此采用人工栽培,需要经常留种,更新原来保存的菌种。为了保证菌种的种性、纯度和活力,对没有条件进行组织分离留种的农户,应尽量到有关单位购买优质菌种,以便达到生产优质高产蛹虫草的目的。
优质菌种是栽培成功和高效的关键。选用适应性强、见光后转色出草快、性状较稳定的速生高产的菌种,初次栽培应选购菌种量多的固体菌种,有栽培经验和规模栽培者可直接购买斜面试管种和液体菌种。
目前接种方法主要有固体菌种和液体菌种进行接种。为了节约接种时间,操作方便,缩短蛹虫草的栽培周期,一般建议采用液体菌种来接种。
首先要进行液体培养基的配制:挑选优质、无病菌的马铃薯,用水清洗表面的泥土,削好皮,称好重量,将马铃薯切成厚度为3-4mm的片状,放到锅中,按500克马铃薯加入清水5升,煮沸到酥而不烂的程度,用纱布过滤残渣,取出过滤液,倒入容器中,等冷却后待用。液体菌种培养液的配方为:磷酸二氢钾2g;硫酸镁1g;柠檬酸铵1g;葡萄糖30g;蛋白胨3g;维生素B1 50mg;分别用天平称
量好,按以上配比分别装入容器中,再加入200g马铃薯的煮出液,搅拌均匀,最后在玻璃容器中稀释至1000mL容量。分装到500ml的三角瓶里,每瓶300ml培养液,用塑料薄膜封口后,整齐摆放到高压灭菌锅里,关紧盖子,打开电源加热至121℃,高压灭菌30分钟,冷却后取出备用。
用试管母种转扩栽培,用酒精消毒双手,在酒精灯上消毒器具,将发满试管的蛹虫草母种切成大约0.5cm×0.5cm大小的菌种块,从试管里取出,接种到盛有上述液体培养基的三角瓶里,每瓶接种母种10块左右,封好瓶口,然后放在120转/分钟,21℃条件下的摇床上进行震荡培养8天左右,待液体培养基内形成均匀小球后,就可作为蛹虫草栽培用的菌种。
培养基的准备
采用大米代料栽培,这种方法取材方便,操作简单,而且培育蛹虫草的成功率较高,生长周期短,是目前值得推广的一种栽培方法。选用350ml的玻璃广口瓶作为培养瓶,按培养基配方比例。先称量大米,要求大米新鲜无霉变、无有害物质污染,最好是杂交米。在天平上称量出30g的
大米,倒入培养瓶中,加入35ml左右的液体培养基。液体培养基配制同上,注意各种配比,如蛋白胨加过量了,会诱发产生大量的气生菌,影响蛹虫草的产量;辅料加少了,营养不足,出草就慢,也不均匀。,一批完成后,用聚丙烯塑料膜封口包扎好,摇动均匀,整齐摆放在架子上。这些培养基要经过高压蒸汽灭菌处理,将摆放架子一起推入到高压蒸汽炉里,密闭加热蒸汽至121℃,在1.5千克/平方厘米压力下,灭菌30分钟左右。冷却后,取出整个架子,待培养瓶冷却后就可以用于接种了。
接种
为了避免在接种过程中菌种受到污染,整个接种过程需要在超净工作台等无菌环境条件下进行操作。先用75%的酒精擦拭工作台面、接种工具、操作人员双手等易引起菌种和培养料污染的物品,进行消毒。将一批装有大米代料的培养瓶放在工作台上,点燃酒精灯,在酒精灯旁打开培养瓶的封口膜,用移液器从广口瓶中吸取液体菌种,每次5ml 左右,注入到培养瓶后,注好后立即盖好封口膜,接种时可两人一起操作,一人取出菌种,另一人拿培养瓶封口,默契配合,接种动作要快,以免菌种受到污染。将接种好菌种的培养瓶,完成一批后,及时转移到培养室里进行菌
丝培养。注意两批之间要用紫外灯给超净工作台灭菌消毒。
菌丝培养
培养室是蛹虫草生产的重要场所,要求具有调节温度、湿度和光照的条件。目前大都采用智能人工气候室,方便调节,减较劳动强度,可一年四季栽培。培养室里放有培养架,进行立体栽培可节省空间。为了操作和管理方便,架高一般在2米左右,分成四层,每层上安装有日光灯,保证培养瓶都有光线照到。
蛹虫草属中低温菌类,菌丝最适宜的生长温度为15—25℃,子座最适宜生长温度为18—22℃,如果低于或高于这个温度范围,生长减慢,高于30℃会很快死亡。小心将培养瓶整齐摆放在培养架上。初始阶段,是菌丝体生长阶段,既要控光又控温。放在避光环境下进行培养,这时不要打开灯光,温度要低一点,室温控制在15℃-18℃,较低的温度,想来捣乱的杂菌也就不来了。保持空气湿度60%。经过5天的培养,当培养瓶里的料面布满蛹虫草的菌丝后,将温度提高到20℃-23℃,继续栽培15天左右,菌丝就可吃透整瓶培养料,完成营养生长。菌丝体成熟