比较动植物细胞培养条件
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动植物细胞培养条件的比较
动植物细胞培养条件的比较
动植物细胞的培养是细胞工程中非常重要的环节,在培养动植物细胞的过程中,培养条件有相似之处,但也有各自特殊的地方。下面,先就培养条件的不同之处进行比较:
一、培养基
植物细胞培养基一般为合成培养基,多为固体培养基,成分主要有无机营养、碳源、维生素、植物生长物质和有机附加物等。
动物细胞培养基包括天然培养基和合成培养基,可为固态,也可为液态,成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等,此外,动物细胞培养还需要各种培养液。
二、营养要求
根据动植物细胞培养基的不同,我们可以看出,动植物细胞对培养基的营养要求有所不同。
植物细胞培养基根据无机盐成分可分为:
(1)富盐平衡培养基(MS、LS、BL、BM):无机盐浓度高,离子平衡性好,具较强缓冲性;营养丰富,无需额外添加复杂有机成分;微量元素种类多,浓度高。
(2)高硝态氮培养基(B5、N6):硝酸钾含量高;铵态氮含量低;含有较高的VB1。
(3)中盐培养基(H、Nitsch):大量元素为MS的一半;微量元素种类减少而含量增高;维生素种类比MS多(生物素、叶酸等)。
(4)低盐培养基(White、WS):无机盐含量低;有机成分含量低。
对植物细胞的营养要求:生长代谢需要大量无机盐,需多种维生素、氨基酸和激素,要求的N源一般为无机N源,一般以蔗糖为C 源,细胞培养基要有缓冲性、等渗性。
动物细胞培养基可分为:基本培养基、通用培养基(能满足多种类型细胞生存)、完全培养基、生长培养基(基本培养基加入血清)、无血清培养基(基本培养基加入取代血清的成分)。
并且动物细胞培养基中都要加入血清或可代替血清的物质来提
供必须生长因子,以保证动物细胞的正常生长。
三、特殊条件
在所有的细胞离体培养中,最困难的是动物细胞培养。下面是它所需要的特殊条件。
(1)血清:动物细胞离体培养常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生长必需因子,如激素、微量元素、矿物质和脂肪,血清等于是动物细胞离体培养的天然营养液。
(2)支持物:大多数动物细胞有贴壁生长的习惯。离体培养常用玻璃,高速冷冻离心机塑料等作为支持物。
(3)气体交换:二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节,不断维持所需要的气体条件,每一次开箱操作后的快速恢复对设备的要求很高,由此决定了动物细胞离体培养设备要求高、投资大。
植物细胞由于其特殊性,其培养过程需要一定的特殊条件:
(1)光照:离体培养的植物细胞对光照条件不甚严格,因为细胞生长所需要的物质主要是靠培养基供给的。但光照不但与光合作用有关,而且与细胞分化有关,例如光周期可对性细胞分化和开花调控作用,所以以获得植株为目的的早期植物细胞培养过程中,光照条件特别重
要。以植物细胞离体培养方式获得重要物质,如药物的过程,植物细胞大多是在反应器中悬浮培养。
(2)激素:植物细胞的分裂和生长特别需要植物激素的调节,促进生长的生长素和促进细胞分裂的分裂素是最基本的激素。植物细胞的分裂,生长,分化和个体生长周期都有相应的激素参与调节。和动物细胞相比,植物细胞离体培养对激素要求的原理已经了解,其应用技术也已相当成熟,已经有一套广泛作为商品使用的培养液。同时解决了植物细胞对水、营养物、激素、渗透压、酸碱度、微量元素等的需求。
四、环境条件
动植物细胞的差异决定了其培养的环境条件存在差异。动物细胞对温度、气体环境、PH、渗透压有特殊要求,而植物细胞则除对温度、气体环境、PH有特殊要求外,还对光照、湿度有一定要求。
正因为动植物细胞的培养条件存在许多的不同之处,所以正确区分动植物细胞培养条件(营养条件、环境条件)的不同,是成功培养细胞的关键。针对不同的细胞,使用不同的培养基、培养方法及培养条件,以达到最好的培养效果,是我们在细胞培养工作中所追求的。