血糖含量的测定
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• 2. 血糖测定 取3支血糖管按下表操作： 血糖管 空白管 •
试剂/mg
标准管 — 1.0 1.0 2.0
测定管 1.0 1.0 — 2.0
无蛋白血滤液 蒸馏水 葡萄糖应用标准 溶液 碱性铜试剂
— 2.0 — 2.0
混匀，同时放入100℃沸水裕中煮8min，取出置冷水中冷却3min（切勿摇动血糖管）
一 实验目的
• 1、掌握无蛋白血滤液 • 2、血糖测定的原理和方法
二 实验原理
• • 1.无蛋白血滤液的制备 血液中所含的蛋白质常影响其他成分的测定， 可以采用钨酸法除去蛋白质，制备无蛋白血滤液， 供非蛋白氮、血糖、氨基酸、尿素等测定使用。 • 钨酸钠与硫酸混合生成钨酸。在pH值小于等电 点的溶液中，钨酸与血液中的蛋白质分子的阳离 子形成不溶性的蛋白沉淀，沉淀过滤或离心，上 清液即为无色、透明、pH值约为6的无蛋白滤液。
准管光密度）*0.1*100/0.1 • = （测定管光密度/标准管光密度）*100 •
五 注意事项
• 一定要等水沸后，再放血糖管。准确加热8min，时间 过久则呈色较深，反之则浅，均影响结果的准确性。 为避免还原生成的亚铜被空气中的氧再氧化，冷却时 切勿摇动血糖管。
• 六.记录表。
三 实验器材
• 仪器 ：锥形瓶；试管及试管架；离心机； 电炉；血糖管；奥氏吸管；分光光度计。 • 试剂：动物全血；1／3mol· Ｌ 硫酸溶液； 碱性铜试剂；磷钼酸试剂；0.25％苯甲酸溶 液；葡萄糖应用标准溶液0.1mg· mL
－１ －１
四 实验步骤
• • 1.无蛋白血滤液的制备 吸取充分均匀的抗凝血1mL，擦净管外血液， 缓慢放入锥形瓶或试管中。加入蒸馏水7mL，混 匀，使完全溶血。加入0.33mol· L 硫酸溶液1mL， 充分混匀。此时血液由鲜红色变为棕色，静置 5~10min，使其酸化完全。加入10%钨酸钠溶液 1Biblioteka BaiduL，边加边摇。当摇到不再产生泡沫时为止。 说明蛋白质已经完全变性沉淀。放置5~10min，过 滤或离心出去沉淀，既得无蛋白滤液（每毫升相 当于1/10全血）
2.血糖测定
葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物，具有还原性， 与碱性铜试剂混合加热， 葡萄糖分子中的醛基被氧 化成羧 [suō] 基，而铜试剂中的二价铜被还原成砖红 色的氧化亚铜沉淀。氧化亚铜可以使磷钼[mù]酸还 原成钼蓝，使溶液成蓝色。其生成蓝色的深度与血 滤液中葡萄糖浓度成正比。通过分光光度计比色， 即可求出血糖的含量。
2.0 2.0 2.0 磷钼酸试剂 混匀后放置2min（使二氧化碳气体逸出） 25 25 25 蒸馏水加至
• 用蒸馏水加至25刻度处后，混匀，空白管 调零，在波长420nm处比色，记录各管光 密度。计算求出每100mL血液中葡萄糖的 质量（mg） • 计算公式： • 样品中的血糖（mg/100mL）=（测定管光密度/标
• 2. 血糖测定 取3支血糖管按下表操作： 血糖管 空白管 •
试剂/mg
标准管 — 1.0 1.0 2.0
测定管 1.0 1.0 — 2.0
无蛋白血滤液 蒸馏水 葡萄糖应用标准 溶液 碱性铜试剂
— 2.0 — 2.0
混匀，同时放入100℃沸水裕中煮8min，取出置冷水中冷却3min（切勿摇动血糖管）
一 实验目的
• 1、掌握无蛋白血滤液 • 2、血糖测定的原理和方法
二 实验原理
• • 1.无蛋白血滤液的制备 血液中所含的蛋白质常影响其他成分的测定， 可以采用钨酸法除去蛋白质，制备无蛋白血滤液， 供非蛋白氮、血糖、氨基酸、尿素等测定使用。 • 钨酸钠与硫酸混合生成钨酸。在pH值小于等电 点的溶液中，钨酸与血液中的蛋白质分子的阳离 子形成不溶性的蛋白沉淀，沉淀过滤或离心，上 清液即为无色、透明、pH值约为6的无蛋白滤液。
准管光密度）*0.1*100/0.1 • = （测定管光密度/标准管光密度）*100 •
五 注意事项
• 一定要等水沸后，再放血糖管。准确加热8min，时间 过久则呈色较深，反之则浅，均影响结果的准确性。 为避免还原生成的亚铜被空气中的氧再氧化，冷却时 切勿摇动血糖管。
• 六.记录表。
三 实验器材
• 仪器 ：锥形瓶；试管及试管架；离心机； 电炉；血糖管；奥氏吸管；分光光度计。 • 试剂：动物全血；1／3mol· Ｌ 硫酸溶液； 碱性铜试剂；磷钼酸试剂；0.25％苯甲酸溶 液；葡萄糖应用标准溶液0.1mg· mL
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四 实验步骤
• • 1.无蛋白血滤液的制备 吸取充分均匀的抗凝血1mL，擦净管外血液， 缓慢放入锥形瓶或试管中。加入蒸馏水7mL，混 匀，使完全溶血。加入0.33mol· L 硫酸溶液1mL， 充分混匀。此时血液由鲜红色变为棕色，静置 5~10min，使其酸化完全。加入10%钨酸钠溶液 1Biblioteka BaiduL，边加边摇。当摇到不再产生泡沫时为止。 说明蛋白质已经完全变性沉淀。放置5~10min，过 滤或离心出去沉淀，既得无蛋白滤液（每毫升相 当于1/10全血）
2.血糖测定
葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物，具有还原性， 与碱性铜试剂混合加热， 葡萄糖分子中的醛基被氧 化成羧 [suō] 基，而铜试剂中的二价铜被还原成砖红 色的氧化亚铜沉淀。氧化亚铜可以使磷钼[mù]酸还 原成钼蓝，使溶液成蓝色。其生成蓝色的深度与血 滤液中葡萄糖浓度成正比。通过分光光度计比色， 即可求出血糖的含量。
2.0 2.0 2.0 磷钼酸试剂 混匀后放置2min（使二氧化碳气体逸出） 25 25 25 蒸馏水加至
• 用蒸馏水加至25刻度处后，混匀，空白管 调零，在波长420nm处比色，记录各管光 密度。计算求出每100mL血液中葡萄糖的 质量（mg） • 计算公式： • 样品中的血糖（mg/100mL）=（测定管光密度/标