第五章、植物人工繁殖PPT教学课件
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1、发展历史1
细胞学说
Schwann Schleiden
植物组织培养之父 Haberlanclt 1902 年 细胞全能性
White 1934年诱导愈伤组织。 1943年正 式提出 细胞全能性
植物激素的发ຫໍສະໝຸດ Baidu F.W.Went发现生长素 1934年
1948年,崔徴和Skoog发现激素杠杆现象
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生长物质配制:
IAA、IBA、GA3先溶于少量95%酒精, 再加水定容至一定浓度;
NAA可溶于热水或少量95%酒精中,再 加水定容至一定浓度
2,4-D用1MNaOH溶解后,再加水定 容至一定浓度
KT和BA先溶于少量1MHCl中,再加水
定容 2020/12/09
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二、植物组织培养
植物组织培养(plant tissue culture):将 植物器官、组织、细胞或原生质体等外 植体材料于无菌条件下培养在人工培养 基上,在适当条件下诱发长成完整植株 的一种技术。
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主要内容
发展历史 植物组织培养的基本步骤 植物细胞分化与脱分化 植物组织培养再生植株的途径 植物组织培养的问题分析
第五章、植物人工繁殖
植物人工繁殖 植物组织培养
植物胚胎培养 脱毒植物培养
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一、植物人工繁殖
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器官形成方式
植物无性繁殖过程中器官形成方式有:
不定芽型 器官型 器官发生型 胚状体发生型 原球茎型
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1、不定芽型:
诱导顶端分生组织产生不定芽,再生成 植株的方式。即选取已经发育成熟的顶 芽和腋芽,连同它们的短枝经表面消毒 后,在无菌条件下培养,诱导不定芽并 使其生根形成植株的方式。
只要有明显的顶端分生组织和次生分生 组织的植物均适用。
特点:不仅繁殖率高,利用外植体原有 2020的/12/09芽,包括隐芽在内繁殖数量大,同时 4
不定芽型
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2、器官型:
从器官外植体诱导不定芽 ,再生成植株 的方式。即选取充分发育的器官诸如茎 、叶、花器、鳞片等,经离体培养而产 生植株的方式。
2020部/12/09加入溶解为止,定容.
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(2)、外植体的选择及处理1
选择优良的基因型 从健壮的植株上取材 选择外植体的大小 选取外植体的时间(季节因素、天气因素
)
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特点:繁殖速度快,由于经愈伤组织而 再生植株,遗传性不稳定。
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愈伤组织分化不定芽
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4、胚状体发生型
由植物器官、组织和细胞培养而直接发 生类胚体结构,最后以胚状体成苗的方 式。
在被子植物中有胚状体发生的植物已达 100余种,分属近40个科。
特点:遗传性一致,有些植物体细胞发 生数量也相当大。如胡罗卜1L培养基有 10万个以上的胚状体。
如烟草、大蒜、甘蓝的花茎培养诱导不
定芽;水仙、百合、风信子、贝母的鳞
片培养诱导不定芽;亚麻的下胚轴培养
诱导不定芽;虎眼万年青的任何一部分
均可诱导不定芽。
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3、器官发生型:
从器官外植体诱导愈伤组织,经愈伤组 织细胞的分化再生成植株的方式。
例:禾本科:甘蔗、水稻、小麦,百合 、小苍兰、菊花、番茄、石刁柏、柑橘 、棕榈等常以器官发生型方式再生植株 。
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培养基的配制
配制母液:按顺序加药,避免沉淀; 配制培养基:琼脂、糖、大量元素、微
量元素、铁盐、有机物、激素、调pH值
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常用培养基
富盐平衡培养基:MS、LS、BL、BM、 ER
高硝态氮培养基:B5、N6、SH。 中盐培养基:Nitsch、Miller、Blaydes、
H 低盐培养基:White、WS、HE、HB
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母液配制
母液配制顺序是:
用灵敏度为0.1mg的天平称取药品。
往烧杯中加入适量蒸馏水。
将药品放入烧杯内,并用玻璃棒搅拌使其 溶解,难溶时可适当加温以加速溶解。
要待一种药品完全溶解再加入下一种药 品
所加入的药品应依次加入,直至药品全
1972年,Carlson 通过两个种的烟草原生质 2020/12/09体融合培养,获得了第一个体细胞杂交的杂19
2、植物组织培养的基本步骤
培养基的准备-培养材料的采集-消毒-制 备外植体-接种和培养-芽和根的诱导-练 苗移栽
涉及内容:
培养基及其配制
外植体的选择及处理
接种和培养(环境条件的控制)
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器官发生与胚状体发生
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几种器官发生方式的优点、缺 点比较
(1)不定芽型容易成苗,对培养基要求 不高,后代遗传性较为稳定,但取材受 到一定的限制,仅限于具有明显顶端分 生组织和次生分生组织的物种;
(2)器官型和胚状体发生型,对培养基 要求高,器官发生条件苛刻。繁殖数量 不如不定芽型和器官发生型多,但遗传 性稳定;
2020(/12/093)器官发生型成苗数量大,对培养基11
5、原球茎型
是兰属特有的器官发生方式。种子消毒 后,在培养基上播种,经一段时间培养 而发生原球茎,然后由原球茎直接长成 植株。
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原球茎分化
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蝴蝶兰原球茎分化
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20201/129/0956年,发现KT
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发展历史2
20世纪60年代后期,植物组织培养开始 走向大规模应用阶段。
法国Morel(1952年)等以大丽花茎尖进行培养 试验,得到了无病毒植株。通过原球茎途径 快繁,成为“兰花工业”
1964-1966年,印度科学家Guha 和 Maheswari 在曼陀罗花药培养中首次由花粉 诱导得到了单倍体植株。
芽和根的诱导
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(1)、培养基及其配制
基本培养基
MS, B5, HE, SH, ER, NT, KM-8P,
White, N6, RM, BM, Hoagland, CPW等
完全培养基
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培养基中包括植物生长所必需的16种 营养元素和某些生理活性物质。