质粒提取试剂盒 说明书 翻译
OMEGA小提试剂盒提取质粒步骤（中文翻译版）
质粒提取（小提，mini kit）1、将携带目的质粒的大肠杆菌接种于含10~15ul基础培养基/氨苄西林培养介质的50ml培养瓶中。
2、室温下5000×g离心10min。
3、弃去上清，剩余沉淀物中加入500ul的SolutionⅠ/RNase A，彻底混匀。
4、将混悬液移至新的2ml离心管中，加入500ul SolutionⅡ，轻柔彻底混匀，可得清亮的细菌裂解物，室温下孵育2min（混匀时用力过大，可破碎出染色体DNA，使目的质粒纯度下降）。
5、向4中液体加入250ul预冷的Buffer N3，轻柔、彻底混匀，直到出现白色絮状沉淀，4℃≥12000×g离心10min（可室温，最好4℃）（Buffer应彻底混匀，若混合物粘稠呈棕色或呈球状，应多混匀几次以中和溶液，溶液的彻底中和对于获得好的产出是必要的）。
6、小心吸取并将上清液转移进新的1.5ml离心管1：0.1的比例向上清液中加入ETR Solution 混匀溶液并于冰上孵育10min，孵育过程中颠倒几次以混匀（加入ETR Solution后，细菌裂解物将出现浑浊，但冰上孵育后将变澄清）（勿用2ml离心管收集上清，因为2ml离心管中有太多液体时，ETR Solution将悬浮于溶液中）。
7、将6中液体于42℃孵育5min，溶液将再次变浑。
室温下12000×g离心3min，ETR Solution将于离心管底部形成蓝色层。
8、将上层水相转移入新的2ml离心管中，按1：0.5的比例加入无水乙醇（室温，96~100％），轻柔混匀，室温下孵育1~2min。
9、将8中的溶液取700ul到柱子中，组装收集管，室温下1000×g 离心1min，弃去收集管中通过柱子的液体，柱子和收集管重复利用。
10、重复9中步骤，直到收集的细菌裂解物全部用完。
11、将500ul Buffer HB加入柱子中，室温下10000×g离心1min，弃去收集管中废液（目的：将残存的蛋白污染物除去，是获得高质量DNA所必需的）。
omga质粒提取试剂盒_说明书_翻译
omgaE.Z.N.A.质粒试剂盒操作规程说明书（译版）1. 自新鲜划痕选择培养板中分离单菌落，接种含适当选择性抗生素的2-5ml的LB或YT培养基进行培养。
37℃强力摇动（~300rpm）孵育20-24h。
使用10-20ml培养管或容量至少4倍于培养容积的培养瓶。
强烈推荐使用endA阴性大肠杆菌菌株进行常规质粒分离。
此类菌株包括DH5α和JM109。
2. 将1.5-5.0ml细菌菌液室温13,000 g离心3min。
轻轻倒出或吸走培养基并丢弃。
3. 加入200μl 的溶液Buffer T 1/Rnase A重悬沉淀，涡旋或用移液器反复吹打。
充分重悬沉淀对于获得高质量的DNA非常重要。
4. 加入200μl溶液Buffer T 2，倒置、转动试管5-10次使之轻轻混匀，得到透明的裂解产物。
室温孵育5min。
不要用力混合，以免使染色体DNA断裂，减低质粒的纯度。
该步反应不要超过5min。
溶液II不用时要拧紧瓶盖，以免试剂被空气中的CO2酸化。
5. 加入200μl溶液Buffer T 3，立即倒置试管15-20次混匀，直至白色絮状沉淀物形成。
冰上孵育5min。
为避免形成局部沉淀，加入溶液III后应立即、充分混匀溶液。
6. 4℃13,000 g离心10分钟。
白色沉淀物形成，立即进行下一步操作。
7. 小心翼翼的吸取上清液，加入到新的1.5ml离心管（不是试剂盒提供的）中。
加入200ul 用异丙醇稀释的BAC 结合液（缓冲液），颠倒3-5次充分混匀。
BAC 结合液使用前必须用96%-100%的异丙醇稀释，详细的说明见瓶壁或第三页说明书8.加入样本DNA（HiBind DNA MicroElute）到提供的2ml收集管中。
9. 室温8000g离心30s，丢弃收集管，将离心柱放入新的收集管中。
10. 将收集柱放回收集管并加入750ul SPM buffer（用乙醇稀释），室温8000g离心30s，丢弃收集管，将离心柱放入新的收集管中。
QIAGEN Plasmid Kits(德国凯杰质粒提取试剂盒说明书中文翻译)
QIAGEN Plasmid Mini,Midi,and Maxi Kits（说明书中文翻译版）Plasmid Midi Kit(cat.Nos.12143and12145)The kit can be stored at room temperature(15~25℃)for up to2years.使用前的注意事项：（1）将Rnase A solution加入Buffer P1中，混匀，2~8℃储存。
（2）可选步骤：按1:1000的比例将LyseBlue试剂加入到Buffer P1中。
（3）使用前在4℃预冷Buffer P3，检查Buffer P2是否出现SDS沉淀。
（4）需准备好异丙醇和70%酒精。
（5）标志：圆形代表小提试剂盒；三角形代表中提试剂盒；正方形代表大提取试剂盒。
表1推荐LB培养物体积试剂盒高考倍质粒低拷贝质粒小提3mL不推荐中提25mL100mL大提100mL500mL具体操作步骤：1.收取过夜培养的细菌培养物，在4℃条件下6000×g离心15min。
2.（弃去上清液）使用4mL Buffer P1重悬菌体沉淀。
3.加入4mL Buffer P2，颠倒4~6次使彻底混匀，室温（15~25℃）孵育5min。
注：如果使用了LyseBlue试剂，溶液会变蓝。
4.加入4mL预冷过的Buffer P3，颠倒4~6次使彻底混匀，冰上孵育15min。
注：如果使用了LyseBlue试剂，溶液混匀后直至蓝色消失。
5.在4℃条件下≥20000×g（14000×g）离心30min。
6.平衡柱子QIAGEN-tip100：加入4mL Buffer QBT，通过重力流使液体过柱。
7.将第5步的上清液转移至QIAGEN-tip中，使其依靠重力流通过柱中的树脂。
8.使用10mL Buffer QC洗涤QIAGEN-tip，使Buffer QC依靠重力流通过柱中的树脂。
洗涤2次。
QIAGEN最新试剂盒质粒大提操作步骤(翻译版)
QIAGEN EndoFree Plasmid Maxi KitCatalog numbers 12362 室温下15-25度存放2年。
在开始之前作如下准备1）按照说明把RNase A加到Buffer P1 中，混匀，放到2-8度储存。
选作：按照1:1000的比例把LyseBlue 加到Buffer P12）pre-chill Buffer P3 4°C存放。
3）检查Buffer P2 是否有SDS沉淀物，可以放到37℃短暂温热以便溶解分子沉淀物。
4）准备异丙醇。
5）用试剂盒提供的无内毒素的水中加入40ml的96-100%的酒精。
大量质粒提取过程在LB培养基中种植转化的E.coli菌。
使用100ml（高复制数的质粒）或者250ml（低复制数的质粒）过夜培养。
操作步骤如下1.收获LB培养过夜的细菌，在6000g，4℃条件下离心15min。
2.加入10ml Buffer P1（根据SBI要求加倍，用20ml）重悬细菌。
3. 加10ml Buffer P2（根据SBI要求加倍，用20ml），剧烈晃动离心管4-6次使其彻底混匀，室温放置5min。
如果使用了LyseBlue试剂，溶液应该变成均匀蓝色。
4.在孵育期间，打开针口的密封盖.并把过滤器放到合适的架子上。
5.加入10ml冰浴的Buffer P3（根据SBI要求加倍，用20ml）到此溶菌产物中，剧烈晃动离心管4-6次使其混匀。
如果加入了LyseBlue试剂，混匀试剂直到没有颜色。
6.将溶菌产物倒入针口密封的过滤器中，室温放置10min，不要插入活塞。
打开针口的密封盖，轻轻挤压活塞将溶菌产物过滤到一新的50ml离心管中。
7. 加2.5ml Buffer ER到过滤的溶菌液中，充分混匀10次后冰上孵育30min。
8.将QIAGEN-tip 500的柱子挂在另一离心管上，加入10ml Buffer QBT，让管中溶液通过重力滴下排空。
9.将第7步冰上孵育的溶菌液加入QIAGEN-tip柱子中让其透过树脂慢慢滴下。
promega质粒提取试剂盒操作说明（中文）
promega质粒提取试剂盒操作说明（中⽂）注意:所有纯化和洗脱步骤均在室温下进⾏。
1. 将转化⼤肠杆菌细胞在最佳培养条件下培养50-250ml过夜(16 - 21h)。
注意:本⽅案优化为过量培养50-250ml，OD600 = 2-4。
2. 将细菌收集起来，5000 g离⼼10分钟，弃上清。
⽤纸⼱除去多余的介质。
表1 解液所需的溶液体积。
3. 在细胞重悬液中重悬细菌。
4. 加⼊细胞裂解液和轻轻混合翻转管3-5次或混合裂解液轻轻滚动。
室温下孵育3分钟。
注:如果细胞裂解液过冷，可能会发⽣SDS沉淀，导致细胞裂解不良。
如果有沉淀形成，将细胞裂解液加热到37°C，并轻轻摇晃。
5. 在溶解细胞中加⼊中和液，盖住并轻轻翻转5-10次。
6. 15000g室温离⼼15分钟。
这种离⼼法将使颗粒化⼤量的细菌碎⽚。
使⽤PureYield™清除柱清除剩余碎⽚。
要区分PureYield™Clearing和PureYield™Binding列，请注意过滤管是蓝⾊的，⽽结合柱是⽩⾊的。
7. 通过在PureYield™顶部嵌套⼀个PureYield™(蓝⾊)组装。
如图1所⽰，将组装好的柱堆放在真空泵上。
图1所⽰。
蓝⾊清除列插⼊⽩⾊绑定列。
8. 将澄清的裂解液倒⼊PureYield™澄清柱中。
不要让颗粒状的碎⽚落⼊管内。
9. 启动真空泵。
裂解液将通过PureYield™澄清柱中的澄清膜，并且 DNA将在PureYield™结合柱中结合到结合膜上。
继续抽吸所有的液体都通过了两个柱。
注意:所有纯化和洗脱步骤均在室温下进⾏。
10. 在进⾏前，从过滤装置中缓慢释放真空。
移除PureYield™清除柱，将PureYield™结合⾊谱柱留在泵上。
注意:如果真空释放得太快，膜可能会从柱上分离。
如结合膜脱落，⽤带⼿套的⼿指或1.0ml⽆菌溶液的⼤端轻轻轻拍移液器尖端，或打开真空，让压⼒重新安置膜。
11. 向柱中加⼊5.0ml的内毒素清除液，让真空泵将溶液穿过。
ZYMORESEARCH质粒提取试剂盒说明书
ZYMORESEARCH质粒提取试剂盒说明书预期用途
本试剂盒可用于提取咽拭子样本中人上皮细胞、细菌和真菌的DNA。
本试剂盒提供的裂解液能快速有效裂解细胞，裂解产物能够直接用于PCR 扩增，并且灵敏度高，特异性强，省去了繁琐的核酸提取与纯化步骤，实现快速PCR检测。
对于病原微生物检测，流行病学调查、菌群调查及其它一些以口腔微生物为样本的核酸检测都非常适用。
操作步骤
1、待检拭子样本直接置于200IFatlyeL1中，充分搅拌洗脱拭子上的样本，在管壁挤压数次后弃拭子；
2、吹打混匀，95℃孵育5min；
3、孵育后的样本12，000rpm离心2，3min，上清可直接用于PCR扩增，上清如不立即使用，需置于-20℃长期保存。
推荐使用咽拭子DNA快速提取扩增试剂盒（荧光PCR法），货号MKNJGNSWDLAQP008。
注意：
离心后的上清加入PCR反应体系的量不宜超过总体积的5%。
如偏好较小体积的反应体系，可将裂解产物稀释5倍或10倍后用作模板；
样本要求
用专用采样拭子，适度用力拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将拭子放采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封，以防干燥。
以上标本可立即用于测试，也可放置在-20℃条件下长期保存。
注意事项
2、如样本中扩增反应抑制物较多时，可将裂解后的上清稀释5倍作为模板，进行PCR扩增。
3、实验完毕用1%的次氯酸钠或75%酒精处理工作台和移液器。
质粒小提试剂盒使用说明书
质粒小提试剂盒I简明步骤（PD1211）（详细内容请参考英文说明书）I.实验前准备II.注意事项RNase A: 使用前将提供的所有RNase A瞬时离心后加入Buffer A1, 使用后将Buffer A1/RNase A置于4o C保存。
质粒拷贝数:纯化中低拷贝的质粒时，使用2倍的菌液体积，2倍的Buffer A1,B1,N1, 相同体积的Wash Buffer 和Elution Buffer.转化菌:若为-70o C甘油冻存的菌，请先涂布平板培养后，再重新挑选新的单个菌落进行培养。
切勿直接取冻存的菌种进行培养。
DNA Wash Buffer*: 使用前请将8 mL (PD1211-00)或48 mL(PD1211-01)或216 mL (PD1211-02) or 90 mL (PD1211-03) 96-100%乙醇加入DNA Wash Buffer。
Buffer B1: 在低于室温时会沉淀，请于50o C左右水浴加热至沉淀完全溶解，溶液澄清，使用后保证Buffer B1瓶盖旋紧。
在室温下（22-25o C）进行所有离心操作。
III.操作步骤1.接种新鲜的单个菌落到1-5 mL的LB培养基（含适量抗生素），37o C震荡培养14-16小时。
室温下10,000 xg离心1分钟，收集菌体，并尽可能的吸去上清。
注：残留的液体培养基容易导致菌液裂解不充分，第5步离心后沉淀较松，不能有效吸取上清。
注：本说明书中的操作程序适用于标准LB （Luria Bertani）培养基培养12-16 小时后，OD600（细菌密度）在2.0-3.0之间的菌液。
若采用的是富集培养基，例如TB 或2×YT，请注意保证OD600不超过3.0。
2.加入250 µL Buffer A1（确保已加入RNase A），用移液枪或涡流震荡充分悬浮细菌细胞。
注：细菌细胞如果没有充分悬浮均匀，将导致菌体裂解不完全，从而降低产量。
Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒说明书
Axygenmini-prepare质粒提取试剂盒说明书AxyPrep质粒DNA⼩量试剂盒本试剂盒采⽤改进的SDS碱裂解法，结合DNA制备膜选择性地吸附DNA的⽅法达到快速纯化质粒DNA的⽬的。
适合于从1-4 ml细菌培养物中提取多⾄20 µg⾼纯的质粒DNA，⽤于测序、体外转录与翻译、限制性内切酶消化、细菌转化等分⼦⽣物学实验。
⼀、试剂盒组成、贮存、稳定性Cat. No. AP-MN-P-4 AP-MN-P-50 AP-MN-P-250制备次数 4 preps 50 preps 250 preps250 制备管 4 502502 ml离⼼管 4 502501.5 ml离⼼管 4 50RNase A 10µl30µl150µlBuffer S1 2 ml 15 ml 75 mlBuffer S2 2 ml 15 ml 75 mlBuffer S3 2.5 ml 21 ml 105 mlBuffer W1 2.8 ml 28 ml 135 mlBuffer W2 concentrate 2.4 ml 24 ml 2×72 mlEluent 1 ml 5 ml 25 ml说明书 1 1 1 RNase A：50 mg/ml，室温可贮存6个⽉，长期贮存于-20°C。
Buffer S1：细菌悬浮液。
加⼊RNase A后，混合均匀，4°C贮存。
Buffer S2：细菌裂解液（含SDS/NaOH），室温密闭贮存。
Buffer S3：中和液，室温密闭贮存。
Buffer W1：洗涤液，室温密闭贮存。
Buffer W2 concentrate：去盐液。
使⽤前，按试剂瓶上指定的体积加⼊⽆⽔⼄醇（可⽤100%⼄醇或95%⼄醇）。
混合均匀，室温密闭贮存。
Eluent：2.5 mM Tris-HCl，pH 8.5，室温密闭贮存。
⼆、注意事项Buffer S2、Buffer S3和Buffer W1含刺激性化合物，操作时要戴乳胶⼿套和眼镜，避免沾染⽪肤、眼睛和⾐服，谨防吸⼊⼝⿐。
OMEGA无内毒素质粒中提试剂盒中文说明书
E.Z.N.A. Fastfiler Endo-free Plasmid Maxiprep Protocol(OMEGA无内毒素质粒中提)依据该程序可从30-50ml过夜培养物中纯化100-250ug高拷贝数质粒或10-100ug低拷贝数质粒。
若要提高低拷贝质粒的产量，请第8页“Low Copy-Number Plasmids protocol”操作。
■细菌培养：1. 于200-400的培养瓶中加入30-50 LB培养基/AMP或KAN（50ug/ml）,然后接种含所需质粒的菌种于37℃摇床培养12-16小时；使用过夜培养物（0.3-0.5ml）可以获得最佳的结果。
强烈推荐使用E.coli(endA-)菌株用于常规的质粒提取，如DH5a和JM109。
细菌达到最佳生长条件对获得最高质粒DNA产量至关重要。
从新鲜转化平板或新鲜平板挑取单菌落接种于2-5ml含相应抗生素的初始培养基内，于37℃振荡培养（约300rpm）约8小时。
然后接种到合适体积的含相应抗生素预热好的液体培养基中。
于37℃振荡培养（约300rpm）12-16小时。
使用3-4倍于培养物体积的三角瓶或其它容器并以1/500-1/1000的比例稀释初始培养物到生长培养基。
这样可又获得最佳培养条件。
过夜培养后，OD600达1.5-2.0提示为较好的培养物。
建议每批培养物都测下OD600值可以得到最佳的结果。
稀释细菌培养物（10-20倍）使其分光光度测量值在OD6000.1-0.5范围内呈线形变化，该步也具有重要意义。
我们推荐细菌密度在OD6002.0-3.0之间。
若使用非营养丰富培养基，一定要确保细胞浓度不要超过OD600 3.0。
如果使用甘油冻存的菌种作接种物，则应在含有相应抗生素的琼脂糖平板上划线培养以获取间菌落。
然后按照上面步骤挑取单菌落接种于2-5ml初始培养基内。
■碱性SDS溶液裂解细菌：2. 收集20-50ml培养基至适当的离心管，室温3,500-5,000×g离心10分钟；3. 倒去或吸取培养基并弃去。
质粒提取试剂盒说明书
Low copy-number plasmid used
No DNA eluted.
DNA W ash Buffer Concentrate not dilute d w ith ab so lute eth an ol. Ov er m ixin g o f ce ll lysate upon addition of So lutio n II. Trace con tam inan ts eluted from column increase A 2 6 0. RNase A not added to S olu tion I. Ethanol traces not co m ple tely removed from column following wash steps.
Low Copy-Number Plasmids
Low copy-number plasmids generally give 0.1-1:g DNA per ml overnight culture. For routine screening of recombinant clones, 10-15 ml culture should provide ample material for agarose gel visualization or restriction digest analysis. However, the method can be modified to essentially double the yield if necessary. Start with 15-25 ml bacterial culture, centrifuge for 10 min at 5,000 x g in a 50 ml centrifuge tube. Proceed to Step 3 (Page 8) and double the volumes of Solutions I, II, and Buffer N3. Continue as above using only one HiBind DNA Mini Column II per 15-25 ml culture. There is no need to increase the volumes of Buffer HB and DNA Wash Buffer used. Note: This method is not recommended for high copy number plasmids because above 15 ml culture, the HiBind® DNA Mini Column II quickly becomes saturated. In this situation we recommend processing of multiple samples from the same culture.
质粒提取试剂盒说明书
E.Z.N.A Plasmid Miniprep Protocol 质粒小规模提取试剂盒Product Number D6942 and D6943,D6944注意：1．使用之前，把试剂盒中的一小管RNA酶加入溶液Ⅰ. 4℃保存2．加60ml 100%乙醇到DNA Wash Buffer Concentrate中.室温保存除试剂盒外还需准备：可达到13000×g的离心机无核酸酶的离心管无菌去离子水或TE缓冲液纯乙醇操作规程：(提取过程在室温下进行)：1.在10-20ml试管中，将携带有所需质粒的E.coli接种到5ml LB培养基LB（含氨苄青霉素50μg/ml），37cº振荡培养12-16h。
需特别指出的是：endA阴性的E.coli菌株用于常规质粒提取，如DH5α和JM109.2. 取1.5~5ml菌液室温10000×g离心1min，去上清3. 加250µl溶液Ⅰ（含RNase A），涡漩振荡器震荡至菌体完全悬浮。
（用移液枪吹打进行重悬浮）4.加入250µl溶液Ⅱ，温和颠倒离心管4~6次，获得澄清的裂解液。
最好室温孵育2min，剧烈混合会使剪切染色体DNA，降低质粒纯度。
(储存溶液Ⅱ应拧紧瓶盖)5.加350µl溶液Ⅲ，温和颠倒数次混合，至出现白色絮状沉淀6.室温13000×g离心10min，紧凑的白色沉淀就会形成，迅速进行到下一个步骤7.特别小心吸取上清，移至洁净的装配好容积2ml离心管的吸收柱中。
要保证没有吸入沉淀和细胞碎片。
室温10000×g离心1min，至裂解物完全通过吸收柱8.弃滤过液，加500µl Buffer HB，10000×g离心1min，清洗吸收柱，除去残余蛋白质保证DNA的纯度以备后续试验使用。
如果接下来的步骤对质粒纯度要求不高，如酶消化法等其它筛选方法，此步可省略9.弃滤过液，再用100%乙醇稀释的750µl Wash Buffer清洗吸收柱，10000×g离心1min，弃过滤液。
质粒小量提取纯化试剂盒 说明书
质粒小量提取纯化试剂盒使用说明书产品简介GBpure Plasmid试剂盒是质粒DNA提取领域中的突破性进展，它有效结合了细胞裂解，杂质去除，及质粒纯化等功能。
无需过柱，不用酚氯仿抽提，直接获得高质量的质粒DNA。
我们独特的试剂系统能确保所提质粒DNA高产量，高质量。
本试剂纯度高，采用人性化设计，可按用户需求灵活制定容量大小。
产品特色●简单:添加GBpure Plasmid使细胞裂解，释放DNA，及杂质去除有效结合起来。
●方便:无需过柱，无需过滤，无需高效液相色谱法，无需超速离心机，无需特殊设备。
●无毒性:无酚、氯仿，无饱和正丁醇，无溴化乙锭，无氯化铯，无盐酸胍。
●快速:一分钟完成菌体沉淀，五分钟完成颗粒细菌碎片，10分钟完成沉淀质粒DNA，从培养细菌到提取质粒DNA只需30分钟。
●高纯度:A260/A280 = 1.7-1.8. 所得质粒DNA无任何抑制剂，可应用于所有分子生物学的操作。
●延展性: 一盒GBpure Plasmid试剂盒可以进行：miniprep, midiprep,或maxiprep;无需购买额外的试剂盒。
●高产量: 您可以从1 (mini), 10 (midi), 100 (maxi) ml的过夜培养基中获得大约5μg, 50 μg, 500 μg的DNA质粒。
●实惠：一盒GBpure Plasmid 售价 RMB 500/ 50 minipreps，即 RMB10/miniprep ，质优价廉。
产品内容与储存条件室温保存。
有效期12个月。
操作方法1.取1 ml过夜培养菌液，装入1.5 ml离心管中，室温12,000 × g离心1 min沉淀菌体，完全弃除上清。
2.加入300 μl Buffer P1，充分混匀震荡菌体沉淀10-15 sec，使其完全分散开，至无絮块存在。
3.加入300 μl Buffer P2，轻轻颠倒离心管3-5次，室温放置1 min，使细菌完全裂解，此时溶液应呈透明。
Plasmid Mini Kit 质粒小提试剂盒 说明书
Version 02152011 Plasmid Mini Kit质粒小提试剂盒Cat. No. CW0511保存： 室温组分说明Cat. No. CW0511C CW0511AKit Size 100 200Buffer P1 30 ml 60 mlBuffer P2 30 ml 60 mlBuffer N3 40 ml 80 mlBuffer PS 30 ml 60 mlBuffer PW（concentrate） 25 ml 50 mlBuffer EB 10 ml 30 mlRNase A（10 mg/ml） 300 μl 600 μlSpin Column CM 100 200Collection Tube（2 ml） 100 200产品简介本试剂盒提供一种简单快捷提取质粒的方法，快速获得大量的质粒DNA。
采用碱裂解法裂解细胞，新型硅基质膜高效专一性结合质粒DNA，独特的缓冲液系统洗去杂质，无需酚抽提和乙醇沉淀。
本试剂盒在保证提取量和纯度的前提下，大大简化提取步骤，可从1-5 ml菌液中纯化多达30 μg的高拷贝质粒DNA。
得到的DNA可直接用于PCR、酶切、测序、转化等生物学实验。
注意事项1.Buffer P1在使用前先加入RNase A（将试剂盒中提供的RNase A全部加入），混匀，置于2–8℃保存。
2.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer PW中加入无水乙醇。
3.使用前请检查Buffer P2、Buffer N3是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
4.注意不要直接接触Buffer P2和Buffer N3，使用后应立即盖紧盖子。
5.提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。
6.所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心。
自备：无水乙醇，离心管操作步骤1.取1-5 ml过夜培养的菌液，加入离心管（自备）中，12,000 rpm（~13,400×g）离心1分钟，尽量吸弃上清。
质粒提取HiPure DNA Purification Kit Manual
高纯无内毒素质粒DNA纯化试剂盒本试剂盒用于大量制备高纯无内毒素质粒DNA，所制备的质粒可以直接用于细胞转染。
主要优点：1.制备量大，单次可制备1mg质粒;2.纯度高，可达99.5%;3.低内毒素，<1EU/ml,直接可用于细胞转染。
需要准备的材料：1.过夜培养的大肠杆菌细胞（含高拷贝质粒）2.异丙醇3.70%乙醇4.无菌离心管5.离心管或者离心瓶（用于收集菌体）6.可耐受>12,000g离心力的50ml无菌离心管（用于质粒洗脱）7.高速冷冻离心机（>12,000g ，温度4℃）试剂盒包含组分：重悬缓冲液（P1）裂解缓冲液（P2）沉淀缓冲液（P3）平衡缓冲液（EQ）洗涤缓冲液(WB)洗脱缓冲液（EB） TE缓冲液（TE）：Tris-EDTA缓冲液再生缓冲液（RB）纯化柱纯化柱平衡:1.加入20ml 平衡缓冲液到柱子上，让平衡液在柱子里面自然流干；在平衡柱子的同时准备细菌裂解物。
细菌裂解物的准备：2.对于高拷贝质粒，100ml LB过夜培养的菌液可用于一次制样；对于低拷贝的质粒，每次需要准备200ml菌液。
3.8000 g离心3min收集菌体，弃掉离心上清液；4.加入7ml 重悬缓冲液（P1）重悬上述离心沉淀的菌体，直到沉淀菌体无团块成为均匀的悬浊液为止。
重悬缓冲液可以按照每克鲜菌液8ml的量加入重悬细菌。
此处如果加入重悬缓冲液体基不是7ml，以下步骤所加液量按照同比例调整。
5.加入7 mL裂解缓冲液(P2)。
轻轻颠倒离心管混匀直到菌体被裂解状态均匀。
不要剧烈震荡。
室温放置5min （裂解不要超过5min）。
6.加入7 mL沉淀缓冲液(P3)。
轻轻颠倒离心管混匀直到整个管子状态均匀。
不要剧烈震荡。
室温12,000 g离心10min，（DNA结合及洗涤，质粒DNA洗脱及沉淀两步骤在超净台完成）DNA结合及洗涤7.上述步骤离心后，取上清至已经平衡好的纯化柱，让溶液自然流干。
8.加入20 mL洗涤缓冲液 (WB)洗涤以上柱子，让溶液自然流干。
EZ-10质粒提取试剂盒说明书
EZ-10柱式质粒小量抽提试剂盒产品编号：B610413 包装规格：50/100 次试剂盒组成组分 50 次 100 次 RNase A Solution I Solution II Solution III Wash Solution Elution Buffer EZ-10 Column 2.0 ml Collection Tube 操作手册2.1mg 14ml 14ml 20ml 12ml 5ml 50 50 1份4.2mg 28ml 28ml 40ml 24ml 10ml 100 1001份a.RNase A 以干粉形式运输。
使用前，加入1ml solution I 到RNase A 中，彻底溶解后将RNase A 溶液全部加入到Solution I 中并混合均匀。
含RNase 的Solution I 如经常使用应保存于4°C ，不经常使用则保存于-20°C 。
b. Solution II 保存过程可能会形成沉淀。
如有沉淀，则将溶液于37ºC 温浴使沉淀溶解。
c.使用前，12ml Wash Solution (B610413，50次)中应加入48ml 96-100%的乙醇，或24ml Wash Solution(B610413，100次)中应加入 96ml 96-100%的乙醇。
如果是其他体积的wash solution ，只需要加入足够的乙醇使得比例为4:1 (无水乙醇:Wash Solution= 4:1)。
d. Elution Buffer 为2.0 mM Tris-HCl ，pH 8.0~8.5。
回收率相当于TE buffer pH 8.0或水的120%。
保存方法除RNase A 外，试剂盒的其他组分可室温保存。
RNase A 应保存于4ºC 。
试剂盒在室温下可稳定保存12 个月。
为长期保存，请将试剂盒置于低温环境中。
原理本试剂盒用于质粒DNA 小量抽提纯化，方法简单高效。
GENMED 小量质粒抽提试剂盒 产品说明书(中文版)
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS60007.1 v.A GENMED小量质粒抽提试剂盒产品说明书（中文版）主要用途GENMED小量质粒抽提试剂是一种旨在通过化学和生物裂解细胞、净化、沉淀、萃取来达到脱盐、去蛋白、去杂质小分子的纯化质粒DNA的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种质粒/柯斯质粒DNA样品的制备，OD260/280在1.8-2.0之间。
产物可用于各种后续。
产品即到即用，性能稳定，操作方便迅速，提取效率和纯化程度高。
技术背景GENMED小量质粒DNA制备技术综合了酶解、碱裂、净化等液体法优势元素充分有效地使细菌中核酶、PCR反应抑制剂失活，清除非DNA分子，其产量较之离心柱法高达数倍。
产品内容GENMED混匀液（Reagent A）毫升GENMED裂解液（Reagent B）毫升GENMED平衡液（Reagent C）毫升GENMED净化液（Reagent D）微升GENMED沉淀液（Reagent E）毫升GENMED清理液（Reagent F）毫升GENMED保存液（Reagent G）毫升产品说明书1份保存方式保存GENMED混匀液（Reagent A）和GENMED净化液（Reagent D）在℃冰箱里，其余的保存在℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于沉淀核酸涡旋震荡仪：用于混匀反应物实验步骤1．加入毫升含质粒的细菌到毫升离心管（注意：确保细菌量OD600＝ ;如果细菌量不足，影响质粒提取）2．放进微型台式离心机离心秒，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）3．小心抽去上清液4．加入微升GENMED混匀液（Reagent A），涡旋震荡少许，使细菌颗粒充分混匀5．加入微升GENMED裂解液（Reagent B），轻轻混匀6．加入微升GENMED平衡液（Reagent C），强力涡旋震荡秒7．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）8．小心移取微升上清液到新的毫升离心管，避免絮状物（注意：如果操作不慎，可以重复实验步骤和，确保避免絮状物）9．加入微升GENMED净化液（Reagent D）10．室温下静置分钟11．加入微升GENMED沉淀液（Reagent E）12．放进微型台式离心机离心钟，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）13．小心抽去上清液14．加入微升GENMED清理液（Reagent F）15．放进微型台式离心机离心分钟，速度为g（RPM，例如eppendorf 5415D）16．小心抽去上清液17．空气中晾干18．加入微升GENMED保存液（Reagent G）19．放进℃冰箱里备用注意事项1．本产品为100次操作2．GENMED液体法采用特殊酶解和净化技术3．细菌量是个重要因素：通常1毫升细菌可获得3－10微克质粒4．如果需要制备各种数量的细菌质粒/柯斯质粒，可订购中量和大量规格5．如果强化去除残留的RNA，建议使用本公司提供GENMED-RNA清除试剂盒（GMS20059）6．如果需要去除细菌内毒素，建议使用GENMED去内毒素试剂盒（GMS20067）7．本公司提供特级优质质粒提取试剂盒：GENMED质粒DNA氯化铯纯化试剂盒（GMS20025）、GENMED 低内毒素小量质粒抽提试剂盒（GMS60007.2）和GENMED无内毒素小量质粒抽提试剂盒（GMS60007.3）质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定提取效率和纯化程度高使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。
质粒大量抽提试剂盒说明书
宁波保税区西区创业大道7号2C-1,315800, 电话：+86-574-86822306 传真：+86-574-26893101, sales@质粒大量抽提试剂盒使用说明书质粒大量抽提试剂盒使用说明书（（离心法离心法））产品编号 产品名称包装 DNAP002质粒大量抽提试剂盒（离心法）6×包装清单包装清单：：Solution Ⅰ（溶液Ⅰ） 60ml Solution Ⅱ（溶液Ⅱ） 60ml Solution Ⅲ（溶液 Ⅲ） 84ml Wash Solution （冲洗液） 21ml Elution Buffer （洗脱液）9ml Affinity Column （质粒纯化柱）6个 Collection Tube （废液收集管） 6个 Instrution （说明书）1份操作步骤操作步骤：：1. 取40ml 过夜培养菌液，放于Collection Tube 中，11,000－13,000rpm 离心2分钟，离心速度低时应适当延长离心时间。
2. 弃上清，再加入40ml 菌液，重复步骤1。
弃上清，离心1分钟，用吸头吸干多余液体。
3. 加10 ml 含RNase A 的Solution Ⅰ，用吸头冲打沉淀或用振荡器使菌体充分混悬。
4. 加10 ml Solution Ⅱ，上下翻转混合6－10次，使菌体充分裂解，形成清亮溶液。
5. 加14 ml Solution Ⅲ，上下翻转混合6－10次，于4℃静置10分钟，应见大量白色沉淀生成。
6. 于4℃，11,000rpm 离心30分钟。
离心期间，将Affinity Column 放在Collection Tube 中。
7. 将上清倒入准备好的Affinity Column 中，11,000 rpm 离心2分钟。
也可将过柱液重新倒回AffinityColumn 中，11,000 rpm 离心2分钟，以增加回收率。
8. 弃过柱液，加8.4ml Wash Solution 于Affinity Column 中，11,000 rpm 离心2分钟。
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E.Z.N.A.™质粒小提试剂盒操作规程（英文版译文）
（适用于No. D6942, D6943 & D6944）
1. 自新鲜划痕选择培养板中分离单菌落，接种含适当选择性抗生素的1-5ml的LB培养基进行培养。
37℃强力摇动（~300rpm）孵育12-16h。
使用10-20ml培养管或容量至少4倍于培养容积的培养瓶。
强烈推荐使用endA阴性大肠杆菌菌株进行常规质粒分离。
此类菌株包括DH5α和JM109。
2. 将1.5-5.0ml细菌室温10,000 x g离心1min。
轻轻倒出或吸走培养基并丢弃。
3. 加入250μl 的溶液I/Rnase A重悬沉淀，涡旋或用移液器反复吹打。
充分重悬沉淀对于获得高质量的DNA非常重要。
4. 加入250μl溶液II，倒置、转动试管数次使之轻轻混匀，得到透明的裂解产物。
可能需要孵育2min。
不要用力混合，以免使染色体DNA断裂，减低质粒的纯度。
该步反应不要超过5min。
溶液II不用时要拧紧瓶盖，以免试剂被空气中的CO2酸化。
5. 加入350μl溶液III，立即倒置试管数次混匀，直至白色絮状沉淀物形成。
为避免形成局部沉淀，加入溶液III后应立即、充分混匀溶液。
6. 室温≥10,000 x g离心10分钟。
白色沉淀物形成，立即进行下一步操作。
7. 小心翼翼
．．．．的吸取上清液，加入装配在2ml收集管中的小量纯化柱I中。
确保离心沉淀未受扰动，确保没有细胞碎片加入到柱子中。
室温下10,000 x g离心1分钟，使裂解液完全通过柱子。
8. 丢弃滤过液，重新使用2ml收集管；加入500μl HB缓冲液清洗柱子，室温10,000 x g离心1分钟，使溶液完成通过柱子。
该步操作需确保残余的蛋白质污染被去除，以保证获得高品质的DNA以适合于下游的应用。
9. 丢弃滤过液，重新使用2ml收集管；加入700μl用无水乙醇稀释的DNA清洗液清洗柱子，室温10,000 x g离心1分钟，使溶液完全通过柱子，丢弃滤过液。
注意：DNA清洗液的浓缩液使用前必须用无水乙醇稀释（5倍稀释），如果DNA清洗液稀释液经过冷藏，则使用之前必须置于室温。
10. 可选步骤：重复清洗，加入另外的700μl用无水乙醇稀释的DNA清洗液。
11. 将空柱子≥13,000 x g离心2min，使柱子的基质干燥。
此步骤为关键操作，不可遗漏。
12. 将柱子放入干净的1.5ml微量离心管中。
将30-50μl（取决于终产物的期望浓度）洗脱液或无菌去离子水直接加入柱子基质上，使之于室温下静置1-2min。
≥13,000 x g离心1min洗脱DNA。
可以进行二次洗脱，以收集残存的DNA。
13. DNA的产量和质量：分别在波长260nm和280nm处测定样品适当稀释液的吸光度。
DNA的浓度计算如下：
DNA浓度=A260×50×（稀释倍数）μg/ml
A260/A280的比率可以反映核酸的纯度。
比值大于1.8表明核算的纯度在90%以上。
或者，DNA的产量（及质量）有时可以通过琼脂糖胶/溴乙锭电泳与已知浓度的DNA样品相比较更好的予以确定。
通常情况下洗脱的大部分DNA是超螺旋单体形式，但也可能存在串联体形式。
张小强翻译。