人 原代细胞
人成骨细胞原代培养
人成骨细胞原代培养1.人成骨细胞的分离和培养：在无菌条件下取自体骨移植患者少量的松质骨，装入无菌HANK’S液中，迅速运送至实验室，充分剥离骨膜及软组织，把将骨块置于盛有DMEM培养液的培养皿中修整为1mm×1mm×1mm大小的碎块，将松质骨块置入含有2∼3mlPBS的EP管中，用力摇动数次，然后静止30秒，令骨块沉下，小心倒掉含有造血组织和细胞的上清液，无菌PBS冲洗3次。
在松质骨块粒内加入红细胞裂解液(碳酸氢钠840mg、乙二胺四乙酸37.2mg、氯化铵8.023g、双蒸水1000mL，pH为7.2)，体积比为1∶2，裂解8min，离心去上液，至骨片发白放入离心管内。
2.酶消化法：加入10倍的2.5g/L胰蛋白酶，在37℃恒温箱振荡预消化20min，胎牛血清终止消化，弃去消化液，PBS清洗两遍。
再加入体积比为1∶8的0.1%的Ⅰ型胶原酶密封置于37℃水浴箱内振荡消化1h，1000r/min离心5min，弃上清，沉淀用PBS洗涤后再1000r/min离心5min，沉淀用DMEM-F12完全培养液重新悬浮反复吹打均匀，将细胞悬液通过200目不锈钢筛网，去除可能存在的非成骨细胞和杂质成分，保留骨粒。
剩余骨粒重复Ⅰ型胶原酶消化，共3次。
然后将3次消化所得的细胞悬液用血球计数板计数，制成5×107L-1的细胞浓度(台盘蓝染色显示存活的细胞不少于95%)，接种于无菌培养皿中，在体积分数5%CO2、95%湿度培养箱中37℃条件下培养。
48h后换液，弃去悬浮细胞，每隔2d换液1次，细胞接近融合时传代。
3.组织块法：将消化过的骨块，先用血清润湿，然后用吸管均匀接种至25 cm2的培养瓶中，翻转培养瓶，小心加入5 mL DMEM-F12完全培养液后，放入体积分数5%CO2、95%湿度培养箱中37 ℃条件下培养4 h后小心翻瓶。
每周换液1次，第3周起每周换液2次，细胞接近融合时按1∶ 2传代。
原代细胞克隆形成实验原理
原代细胞克隆形成实验原理一、引言原代细胞克隆是指通过将原代细胞分离并培养，使其形成与原代细胞相同的克隆细胞群体。
这种技术被广泛应用于生物医学研究、生物工程和农业领域，对于细胞的功能研究、药物筛选和基因改造具有重要意义。
本文将介绍原代细胞克隆形成实验的原理和步骤。
二、原代细胞克隆形成实验原理原代细胞克隆形成实验主要基于细胞的增殖特性和分化能力。
细胞增殖是细胞生命周期中的一个重要过程，通过细胞分裂可以产生两个或更多的细胞。
分化是指细胞在特定条件下转变为特定类型的细胞。
在细胞克隆实验中，我们利用细胞的增殖特性和分化能力，将原代细胞分离并培养，使其形成克隆细胞群体。
三、原代细胞分离原代细胞分离是实现细胞克隆的第一步。
通常，我们从动物或植物组织中取得原代细胞，例如从小鼠胚胎中获取胚胎成纤维细胞。
然后，利用消化酶或机械方法将组织分解成单个细胞。
分离后的细胞可通过显微镜观察验证。
四、原代细胞培养原代细胞分离后，需要将其培养在适当的培养基中，提供细胞所需的养分和环境条件。
培养基的选择对于细胞的生长和分化至关重要。
常见的培养基包括DMEM、RPMI-1640和MEM等。
此外，培养基中还需要添加血清和抗生素等物质，以促进细胞的增殖和防止细菌污染。
五、细胞增殖和分化原代细胞在培养基中经历细胞增殖和分化的过程。
细胞增殖是指细胞通过分裂产生新的细胞，从而形成细胞群体。
细胞分化是指细胞根据特定的信号和环境条件转变为特定类型的细胞，具有特定的功能和形态。
在培养过程中，细胞会不断增殖和分化，形成克隆细胞群体。
六、细胞筛选和传代在细胞克隆形成实验中，为了获取具有相同遗传特性的细胞群体，需要对细胞进行筛选。
常见的筛选方法包括荧光染色和细胞表面标记等。
筛选后的细胞可以进行传代，即将细胞分离并继续培养。
传代可以使细胞持续增殖和分化，保持克隆细胞的稳定性和纯度。
七、应用领域和前景原代细胞克隆形成实验在生物医学研究、生物工程和农业领域有着广泛的应用。
人成纤维细胞的原代培养方法及步骤
人成纤维细胞的原代培养方法及步骤
材料准备
成纤维细胞
人成纤维细胞完全培养基
实验步骤
水浴锅37℃预热。
完全培养基温浴到37℃。
在15mL离心管中加入5mL以上完全培养基备用。
从-80℃冰箱中取出细胞，放入37℃水浴锅中，快速晃动，使冻存液迅速融化。
注意融化过程必须晃动冻存管，保证冻存液融化迅速、均匀；且晃动时应避免水没过管盖造成污染；管内冻存液融化至只剩一个约2mm直径的冰晶时，即停止水浴。
继续晃动冻存管，至冰晶融化。
用75%医用酒精擦拭冻存管外表面。
在超净台中打开冻存管，用巴氏吸管或移液枪吸取细胞冻存悬液，转移至先前准备的离心管中。
用1mL完全培养基洗涤冻存管1次，收集残留细胞，减少损失。
细胞悬液以250×g，离心4min。
离心后去除上清。
加入2mL完全培养基，轻柔吹打细胞沉淀，充分吹散、混匀。
将细胞接种到1个T25培养瓶或底面积相当的培养容器中。
加入足量完全培养基，1个T25培养瓶中培养基总量不少于5 mL。
摇匀细胞，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的CO2培养箱中。
注意接种2h内不可移动、观察细胞。
这会严重影响细胞贴壁，造成状态不佳、细胞聚团、贴壁不均匀等情况。
复苏次日，观察细胞状态，并更换新鲜的完全培养基或传代。
之后，每2天更换一次完全培养基，直到细胞生长至90%汇合，即需传代。
通常用人成纤维细胞传代比例为1:3，72h内生长至可传代汇合度。
请根据细胞实际生长情况调整传代比例。
原代细胞培养 实验报告
细胞生物学实验报告原代细胞培养1.实验目的：了解原理代细胞培养的基本方法，初步掌握无菌操作的方法。
2.实验用品：（1）仪器及器材：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、手术剪、解剖盘、胶头滴管、微量移液管、培养皿、离心机、注射器、L型针头（2）实验药品：蒸馏水、75%酒精溶液、PBS溶液、细胞培养液（3）实验材料：小鼠3.实验原理：（1）动物细胞培养：从动物体内取出体细胞，在体外模拟体内环境在无菌、适宜温度和一定的营养条件下，使之生存、生长、繁殖，并维持其结构和功能的方法。
原代细胞培养：直接从体内获取细胞组织或器官进行体外培养至第一次传代培养为止。
细胞培养至一定程度后，需再做培养。
及培养的细胞分散后，从一个容器以一定比例转移到另一容器扩大培养。
代数：传代培养累计次数（2）细胞培养的条件①气体条件：有一定的O）（小于空气中浓度）和CO2（5%）②无菌环境：培养用品应高温灭菌，培养液应无菌处理，操作应在超净工作台无菌操作。
③最适温度：36～37℃为最适温度，30～37℃细胞可进行代谢，4℃细胞可存活数天。
④渗透压：一般为260～320mmol/l （人血浆一般为290mmol/l）⑤营养条件：含细胞生长必须的有机物，氨基酸、维生素、无机盐、辅助物等。
培养基中不含生长因子，因此，必须在培养基中加入小牛血清。
⑥最适pH：7.0～7.4（中和细胞代谢废物与酸性气体环境）（3）贴壁生长与不贴壁生长①贴壁生长：来自于实体组织的细胞多贴壁生长。
贴壁生长的细胞进行传代培养更换培养皿时有以下步骤：首先，应轻晃培养皿并弃去上清液（去除死细胞），再用胰蛋白酶处理（细胞成片收缩，变圆），倾斜培养皿，用滴管吸去多余酶液，然后用滴管吸取PBS溶液吹打细胞并离心，最后，加入新的培养液，按比例分入培养皿中。
②不贴壁生长：造血细胞、癌细胞等。
半量换液法：吸取1/2培养液到新的培养皿中，再离心，取下层细胞，分入多个培养皿中。
4.实验步骤：（1）用断头法处死小鼠，置于解剖盘中。
人原代子宫内膜基质细胞分离方法
嘿，朋友！今天我来给你唠唠人原代子宫内膜基质细胞分离的独家秘籍哦！这可超级有ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ，保证你一听就懂。
首先啊，咱得准备好材料和工具，这就好比上战场得有称手的兵器呀！咱得有新鲜的子宫内膜组织，这可是关键中的关键，就像做菜得有新鲜的食材一样。然后呢，各种培养液、酶啥的也得准备齐全咯。
离心完了，把上面的上清液倒掉，留下细胞沉淀。这就好比把汤倒掉留下肉一样。
最后，把细胞放到合适的培养液里培养，给它们一个温暖舒适的家。看着它们一点点长大，就像看着自己的孩子成长一样，那感觉可奇妙啦！
哎呀，说起来简单，做起来可得细心哦！每一步都不能马虎，就像走钢丝一样，得稳稳当当的。还有啊，操作的时候一定要注意卫生，可别把细菌啥的带进去了，不然那些细胞宝宝们可要遭殃咯。
总之呢，按照我这方法来，保证你能顺利分离出人原代子宫内膜基质细胞。朋友，快去试试吧！相信你一定行的！哈哈！
接下来，咱就正式开始啦！第一步，把那子宫内膜组织小心翼翼地取出来，就像对待宝贝一样，千万别给弄伤咯。这时候我就想起我有次啊，那手一抖，差点把这组织给掉地上了，哎呀妈呀，可把我给吓坏了，还好我眼疾手快给接住了。
第二步，把这组织放到含有酶的培养液里，让它好好地泡个“温泉澡”，让酶来发挥作用，把那些细胞慢慢给分离开来。这就好比给它们来个“松骨按摩”，让它们舒舒服服地分开。
第三步，等泡得差不多了，就轻轻摇晃摇晃，就跟摇骰子似的，让那些分离出来的细胞飘起来。这时候你就想象那些细胞像一群小精灵在培养液里欢快地跳舞。
第四步，把这含有细胞的培养液过滤一下，把那些杂质啥的都给过滤掉，留下纯净的细胞。这就像淘米一样，把那些沙子啥的都给筛出去。
然后呢，就是离心啦！把细胞们放到离心机里，让它们高速旋转起来，就像坐过山车一样刺激。这一步可得把离心机调好哦，别给整飞出去咯。
原代滋养层细胞的分离培养及鉴定
一、概述原代细胞是从组织或器官中分离得到的未经过传代培养的细胞，通常被用于研究细胞的特性和生物学行为。
在细胞生物学研究中，原代细胞的分离、培养及鉴定是非常重要的步骤，它们可以为科学家提供更加真实的细胞生理功能和反应。
本文将讨论原代滋养层细胞的分离培养及鉴定方法。
二、原代滋养层细胞的分离1. 准备工作在进行原代滋养层细胞的分离前，先准备必要的材料和试剂，包括消毒器械、胰酶、培养基和培养皿等。
2. 组织样本的处理将所需的组织样本取出并进行消毒处理，然后用无菌工具将其切割成小块。
3. 酶解和分离将组织样本块放入含有适量胰酶的培养基中，进行酶解和振荡分离，以获得细胞悬浮液。
4. 细胞分离通过离心等方法，将细胞悬浮液离心沉淀，然后将上清液中的细胞转移到新的培养皿中。
三、原代滋养层细胞的培养1. 培养基的准备根据原代滋养层细胞的类型和特性，选择适当的培养基，并添加相应的生长因子和营养成分。
2. 细胞的培养条件将分离得到的原代滋养层细胞接种于含有培养基的培养皿中，放置在恒温培养箱内，保持适当的温度和湿度条件，定期更换培养基。
3. 细胞的观察和维护利用显微镜观察细胞的生长情况和形态特征，定期对细胞进行传代培养，确保细胞的健康和稳定生长。
四、原代滋养层细胞的鉴定1. 形态学鉴定采用显微镜观察细胞的形态特征，包括大小、形状、胞浆及核的结构等，与已知的细胞形态进行比对鉴定。
2. 免疫细胞化学鉴定利用免疫细胞化学染色技术，检测细胞内特定蛋白的表达情况，例如细胞信号分子或细胞骨架蛋白等，来确定细胞的类型和特性。
3. 分子生物学鉴定通过PCR、Western blot等分子生物学技术，检测细胞内特定基因的表达情况，以确定细胞的遗传特性和分子水平特征。
五、结论原代滋养层细胞的分离培养及鉴定是细胞生物学研究中的重要环节，操作规范和技术熟练对于获得高质量的原代细胞至关重要。
只有通过严格的分离和培养条件，并结合形态学、免疫细胞化学及分子生物学鉴定等手段，才能得到真实、可靠的实验结果，并为细胞生物学研究提供可靠的资料。
人皮肤成纤维细胞原代培养及生物学特性_王晓华
人皮肤成纤维细胞原代培养及生物学特性王晓华，王扬，蒋涛，付立业，姜又红（中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所，沈阳110001）摘要：目的探索和建立人皮肤成纤维细胞原代培养的方法，为皮肤成纤维细胞在临床医学中的应用提供可靠的科学依据。
方法胰蛋白酶消化法分离培养人皮肤成纤维细胞；细胞生长曲线及MTT 法测定细胞增殖能力；流式细胞仪测定细胞生长周期及细胞增殖指数；倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态；HE 染色观察细胞爬片下的形态及着色；免疫组织化学染色观察成纤维细胞中间丝波形蛋白；电子显微镜下观察成纤维细胞超微结构。
结果体外用胰蛋白酶消化法建立了人皮肤成纤维细胞；传5代内细胞及传5代内冻存复苏后人皮肤成纤维细胞增殖能力均很强；倒置镜下观察、HE 染色、波形蛋白免疫组化染色及电镜下观察鉴定培养细胞的形态及生物学特性符合成纤维细胞。
结论本研究确立了体外人皮肤成纤维细胞原代培养。
关键词：人；皮肤；原代培养；成纤维细胞；细胞增殖指数；细胞形态学中图分类号：R318.08文献标志码：A文章编号：0258-4646（2010）12-1041-04Primary Culture and Biological Characteristics of Human Skin Fibroblasts 随着年龄的增长，皮肤会出现松弛、干燥粗糙、弹性下降、皱纹增多等老化现象，这些现象都与成纤维细胞数量减少以及分泌合成功能下降或异常有关［1］。
人皮肤成纤维细胞是皮肤真皮网织层中最重要的细胞，是皮肤衰老和细胞受损后的主要修复细胞之一［2］。
它不但能够促进表皮细胞的迁移、增殖和分化，还能分泌大量的胶原蛋白、弹性纤维蛋白及多种细胞修复因子，具有强大的自我更新能力［3］，从而修复老化的皮肤。
成纤维细胞是维持皮肤弹性和韧性的重要细胞［4］，因其特有的生物学特性，在抗皮肤衰老中起着重要的作用。
本研究拟通过皮肤成纤维细胞的分离和体外培养，观察、总结体外培养的成纤维细胞生物学特性，在细胞水平上对皮肤成纤维细胞的形态及生物学特性进行研究，以获得在体外稳定生长的皮肤成纤维细胞，为成纤维细胞在医学美容除皱术中的应用提供可靠的科学依据［5］。
原代培养
人肺的成纤维细胞1.准备2个50ml的离心管，加入20ml的1640+10%FBS+0.1%三抗。
置于冰盒内。
手术标本取距离肿瘤2cm的标记CAF；距离肿瘤大于2cm的标记NF。
取回的组织在超净台内处理。
2.用1%双抗PBS清洗组织，直至溶液清洗。
尽量去除血清及杂志。
去除血管（黑）等附属物。
3.用剪刀剪碎组织（时间5min以内），大小1mm3,加入双抗PBS,将组织吹散，静止15min,更换新的PBS，离心沉淀组织块。
4.用FBS打湿25cm2培养瓶底，吸掉多余的FBS，静置。
准备200ul 的tip剪掉尖头，用火烧弯。
200ul的tip吸取组织快，接种于培养瓶内，每瓶大约25块。
将培养瓶倒置，加入2ml的1640+10%FBS+0.1%三抗，置于培养箱中，6.除，继续培养2-3天，待细胞长满，即可传代。
注：因为血清浓度低，内皮细胞可以爬出少量，但是很快就会死掉。
7.传代用0.25%胰酶常规消化，以1:2传代，传代完后，采用差速贴壁法纯化一次，即待细胞贴壁1.0 –1.5 h后(即绝大多数成纤维细胞都已经贴壁)，弃去未贴壁的细胞和培养液，更换新的培养液。
鼠成纤维细胞的原代培养1.小鼠颈椎脱臼致死,置于75%的酒精中,转移到超净台内.2.酒精擦拭小鼠2次.镊子夹取皮肤,剪开笑口,钝性分离.剪开肿瘤块外包膜(NF)一个小口,剥离出肿瘤块放入一个培养皿中.剪掉外包膜,放入另一个培养皿中（NF）.洗涤两次.封口转移至细胞放内.3.NF培基吸走,用剪刀剪碎至0.5-1mm3CAF剪取肿瘤块的内包膜，剪碎至0.5-1mm3Ⅳ型胶原蛋白（或胰酶），4℃（或37℃）培养箱过夜。
（或者此步骤省掉）。
4.用纯的血清或者20%血清浸湿组织块。
弯头吸管（注射器）吸取组织块，培养瓶种植0.5CM间隔，15-20块/25ML培养瓶。
5.将组织块加到培养瓶壁上，竖起，培养箱中培养2-4h，直至贴壁。
加入培养基培养。
翻动培养瓶使底朝上，加入2-3ML的培养基，塞紧瓶塞，置于培养箱，2-3h,待组织贴壁。
原代人眼Tenon’s囊成纤维细胞的生物学特性及体外培养方案优化
•实验研究•原代人眼Tenon's囊成纤维细胞的生物学特性及体外培养方案优化王丽君李宏松张文怡廖丁莹杨熹婷王建明【摘要】目的优化原代人Tenon's囊成纤维细胞(HTFs)体外分离、培养的实验方法，并对体外培养的HTFs的生长特性进行观察。
方法采用优化的组织块贴壁法培养原代HTFs；倒置显微镜观察HTFs的基本形态特征；免疫荧光染色Vimentin及CyWbeotin对所培养的原代细胞进行鉴定;采用噻唑蓝比色试验检测细胞增殖活性及生长曲线;流式细胞术检测细胞周期及增值指数。
结果组织块贴壁后9~7d可以见长梭形细胞长出3~3周后可传代。
细胞生长曲线近似“S”形,MTT法显示在第3~5d细胞增殖能力显著。
免疫荧光染色Vwentm阳性率达98% ,CyWbeotin阴性，符合HTFs特性且无上皮细胞污染。
第3~9代HTFs中(63,43士12,26)%处于G2/G)期，(14.80+5.07)%处于G2/M期，(24.34土427)%处于S期，HTFs的增殖指数为35.0%,细胞增殖良好。
结论建立了一种简单、经济、有效的获取原代人Tenon'囊成纤维细胞的方法,为研究青光眼滤过泡瘢痕化提供了可靠的靶细胞模型。
【关键词】原代成纤维细胞;Tenon'囊;原代培养[临床眼科杂志,2020,23:551] Biologicci charocteristicc of primary human TeconS ccpsuic UOroblastc and optimization of thc cUthi'e proto-CoU in vitro Wang LLun,Lt Hongsoog,Zhang Weeut,Lao Dingyrnj,lag Xiting,Wang Jianming.Department of Oph-maOnolofu u T'he Secood ffifiLated Hosphai of Xian Jiaotong UnLersip,Xiaa712004,China【Abstrocti Objective To optimize the expeCmental method of isolation and culture of primao humax Tenons capsule fibwbmsW(HTFs)i n vitro,and observe the growth characteristics of HTFs.Methodt Primag HTFs were culturedbp the optimized adherent methob.Morphological chaocteCstics of the HTFs wew obsewed bp inverted microscope and the HTFs were identifies by Vimentin and CyWberatin immunoVuowscence staining.Thc cell proliferation activity and growth curve were measured by methyl thiazolyl tetrazolium(MTT)assay,and cell cyclo and proliferation index were measured by Oow cytometry.Results Thc Cng syindlo cells could be seen after9-7daps of the tissues attachment to the peWi dish,and passaged after6〜3weeds.Thc cell growth curve ayproximawd the"S"shape,and the cell prohferation abiUty was remarPablo at3-5daps after the cell passaye.Thc positive rate of Vimentin immunoVpowscence staining was98%and that of CyWberatin immunoOpowscence staining was neqative,which was consistent with the chaocteCstics of HTFs withoxt eyithePai cell contamination.Thc results of Oow cytometp showed that in the3-40generation of HTFs,(63.48土14.06)%cells were in G2/G)phase,(14.32±5.07)%cells were in G6/M phase,ad(22.34±4.07)%cells were inS phase.Thc prohferation inUex of HTFs was35.6%,representing well cell prohferation.Conclusions A simple,economical and ePective for cultuCng and obtaining HTFs was estabUshed,which prevideS a rePablo expeCmental cytologicai model for the basic research of Oltering bled scar after gmucoma filtration.【Key woolsi Primary fibrobmsW;Tenons capsule;PCmarg culture[J CUn Ophthalmoi,2222,23：581]青光眼是常见的不可逆致盲性眼病，滤过手术是抗青光眼的主流治疗方法，但术6年的失败率高达10%~36%[-],研究显示Tenon's囊成纤维细胞(humud Tesou fibwbCsts,HTFs)的增殖、迁移以及纤维化在滤过泡瘢痕化过程中发挥着重要作用[23]。
人原代支气管上皮细胞的简易分离和培养
人原代支气管上皮细胞的简易分离和培养谢冬;翟成凯;刘影影;赵乐;张彬彬;吴卫东【摘要】目的建立一种实验环境更贴合人体、方便快捷、细胞活性和纯度较高的支气管上皮细胞原代培养方法.方法通过纤维支气管镜刷检获取新乡市第一人民医院收治的63例患者正常的支气管上皮细胞,采用无血清的支气管上皮细胞培养基(BEGM)进行纯化、分离,行原代培养并传代,锥虫蓝染色,光学显微镜下观察细胞存活状态并测定细胞存活率,通过倒置生物式显微镜和免疫组织化学染色观察鉴定细胞.结果人支气管上皮细胞的平均存活率为(96.8±0.5)％,细胞免疫荧光角蛋白染色阳性,兔抗人细胞角蛋白8单克隆抗体免疫组织化学染色显示细胞质着色为绿色,细胞核复染为蓝色,鉴定为人原代支气管上皮细胞.结论经纤维支气管镜刷检获取并采用无血清BEGM培养人原代支气管上皮细胞操作简便、快捷有效,细胞存活率较高,能够提高上皮细胞纯度,可以为研究呼吸系统疾病提供良好的模型.【期刊名称】《新乡医学院学报》【年(卷),期】2018(035)010【总页数】5页(P854-857,864)【关键词】人支气管上皮细胞;原代培养;鉴定【作者】谢冬;翟成凯;刘影影;赵乐;张彬彬;吴卫东【作者单位】新乡医学院公共卫生学院,河南新乡453003;新乡医学院公共卫生学院,河南新乡453003;新乡医学院附属新乡市第一人民医院呼吸科,河南新乡453000;新乡医学院附属新乡市第一人民医院呼吸科,河南新乡453000;新乡医学院附属新乡市第一人民医院呼吸科,河南新乡453000;新乡医学院公共卫生学院,河南新乡453003【正文语种】中文【中图分类】Q813.1支气管上皮细胞是呼吸道黏膜的第1道屏障，在抵御病原体、异物入侵和机械损伤的过程中发挥重要的免疫调控作用[1]。
支气管上皮细胞与呼吸系统疾病关系密切，通过损伤后的异常修复，分泌多种炎性介质和细胞因子，参与疾病发生、发展的不同环节[2]。
原代细胞
韵涵生物科技有限公司专业专门提供各种细胞、原代细胞、肿瘤细胞、肿瘤耐药细胞、正常遗传变异细胞。
配套专业培养基：上皮细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、微血管、神经元细胞、系膜细胞、胶质细胞、成纤维细胞、心肌细胞、低血清无血清无动物成分细胞培养基等等；传统的常用培养基：DMEM、IMDM、M199、CMRL、BME、MEM等等；以及细胞培养用的相关试剂：赖氨酸、血清、胎牛血清、细胞冻存培养基、消化液、中和液等等。
一、原代细胞第一篇：人正常细胞S Cell System1000 HBMEC (Human Brain Microvascular Endothelial Cells) 人脑微血管内皮细胞1100 HBVSMC (Human Brain Vascular Smooth Muscle Cells) 人脑血管平滑肌细胞1200 HBVP (Human Brain Vascular Pericytes) 人脑血管周边细胞1300 HCPEC (Human Choroid Plexus Endothelial Cells) 人脉络丛内皮细胞1310 HCPEpiC (Human Choroid Plexus Epithelial Cells) 人脉络丛上皮细胞1320 HCPF (Human Choroid Plexus Fibroblasts) 人脉络丛纤维原细胞1400 HMC (Human Meningeal Cells) 人脑膜细胞1520 HN (Human Neurons) 人神经元细胞1530 HCGC (Human Cerebellar Granule Cells) 人小脑颗粒细胞1600 HOPC (Human Oligodendrocyte Precursor Cells) 人少突先驱胶质细胞1610 HOPC-os (Human Oligodendrocyte Precursor Cell-oligospheres) 人少突先驱胶质细胞（状态：球形）1800 HA (Human Astrocytes) 人星形胶质细胞1810 HAc (Human Astrocytes-cerebellar) 人小脑星形胶质细胞1900 HM (Human Microglia) 人小胶质细胞2.PNS Cell System700 HSC (Human Schwann Cells) 人雪旺细胞1710 HPNC (Human Perineurial Cells) 人周神经细胞3.Cardiac Cell System6000 HCMEC (Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells) 人心脏微血管内皮细胞6100 HAEC (Human Aortic Endothelial Cells) 人大动脉内皮细胞6110 HASMC (Human Aortic Smooth Muscle Cells) 人大动脉平滑肌细胞6200 HCM (Human Cardiac Myocytes) 人心肌细胞6210 HCMa (Human Cardiac Myocytes-adult) 成人心肌细胞6300 HCF (Human Cardiac Fibroblasts) 人心脏纤维原细胞6310 HCFav (Human Cardiac Fibroblasts-adult ventrical) 人心脏纤维原细胞（来源：成人心室）6320 HCFaa (Human Cardiac Fibroblasts-adult atrial) 人心脏纤维原细胞（来源：成人心房）Coming Soon：HCVSMC (Human Cardiac Vascular Smooth Muscle Cells)! 人心血管平滑肌细胞4.Pulmonary Cell System(肺部）3000 HPMEC (Human Pulmonary Microvascular Endothelial Cells) 人肺微血管内皮细胞3100 HPAEC (Human Pulmonary Artery Endothelial Cells) 人肺动脉内皮细胞3110 HPASMC (Human Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells) 人肺动脉平滑肌细胞3120 HPAF (Human Pulmonary Artery Fibroblasts) 人肺动脉纤维原细胞3200 HPAEpiC (Human Pulmonary Alveolar Epithelial Cells) 人肺齿槽上皮细胞3210 HBEpiC (Human Bronchial Epithelial Cells) 人支气管上皮细胞3300 HPF (Human Pulmonary Fibroblasts) 人肺纤维原细胞3400 HBSMC (Human Bronchial Smooth Muscle Cells) 人支气管平滑肌细胞3410 HTSMC (Human Tracheal Smooth Muscle Cells) 人气管平滑肌细胞5.Hepatic Cell System（肝部细胞系）5000 HHSEC (Human Hepatic Sinusoidal Endothelial Cells) 人肝窦状腺内皮细胞5100 HIBEC (Human Intrahepatic Biliary Epithelial Cells) 人肝胆上皮细胞5200 HH (Human Hepatocytes) 人肝细胞5300 HHSteC (Human Hepatic Stellate Cells) 人肝星状细胞Coming Soon：HHSC (Human Hepatic Stem Cells)! 人肝干细胞Renal Cell System（肾部细胞系）4000 HRGEC (Human Renal Glomerular Endothelial Cells) 人肾小球内皮细胞4100 HRPTEpiC (Human Renal Proximal Tubular Epithelial Cellls) 人肾最接近管状上皮细胞4110 HRCEpiC (Human Renal Cortical Epithelial Cells) 人肾皮层上皮细胞4120 HREpiC (Human Renal Epithelial Cells) 人肾上皮细胞4200 HRMC (Human Renal Mesangial Cells) 人肾系膜细胞6.Gastrointestinal Cell System（胃肠部位细胞系）2700 HEEC (Human Esophageal Epithelial Cells) 人食管上皮细胞2710 HESMC (Human Esophageal Smooth Muscle Cells) 人食管平滑肌细胞2900 HIMEC (Human Intestinal Microvascular Endothelial Cells) 人肠微血管内皮细胞2910 HISMC (Human Intestinal Smooth Muscle Cells) 人肠平滑肌细胞2940 HCSMC (Human Colonic Smooth Muscle Cells) 人结肠平滑肌细胞Coming Soon：HGSMC (Human Gastric Smooth Muscle Cells)! 人胃平滑肌细胞7.Dermal Cell System（真皮细胞系）2000 HDMEC (Human Dermal Microvascular Endothelial Cells) 人真皮微血管内皮细胞2100 HEK (Human Epidermal Keratinocytes) 人表皮角化细胞2200 HEM (Human Epidermal Melanocytes-light) 人表皮亮黑素细胞2210 HEM (Human Epidermal Melanocytes-medium) 人表皮中黑素细胞2220 HEM (Human Epidermal Melanocytes-dark) 人表皮黑黑素细胞2300 HDF-f (Human Dermal Fibroblasts-fetal) 胎儿真皮纤维原细胞2310 HDF-n (Human Dermal Fibroblasts-neonate) 婴儿真皮纤维原细胞2320 HDF-a (Human Dermal Fibroblasts-adult) 成人真皮纤维原细胞Coming Soon：HELC (Human Epidermal Langerhans' Cells)!8.Adipose Cell System（脂肪细胞系）7210 HPA-v (Human Preadipocytes-visceral) 人前脂肪细胞（来源：内脏）7220 HPA-s (Human Preadipocytes-subcutaneous) 人前脂肪细胞（来源：皮下）9.Ocular Cell System（视觉部位细胞系）6510 HCEpiC (Human Corneal Epithelial Cells) 人角膜上皮细胞6520 HK (Human Keratocytes) 人角膜细胞6540 HRPEpiC (Human Retinal Pigment Epithelial Cells) 人视网膜色素上皮细胞6550 HLEpiC (Human Lens Epithelial Cells) 人晶状体上皮细胞6560 HIPEpiC (Human Iris Pigment Epithelial Cells) 人虹膜色素上皮细胞6570 HConF (Human Conjunctival Fibroblasts) 人结膜纤维原细胞6580 HNPCEpiC (Human Non-Pigment Ciliary Epithelial Cells) 人非色素睫毛上皮细胞Coming Soon：HCEC (Human Corneal Endothelial Cells)! 人角膜内皮细胞10.Urethral Cell System（尿道细胞系）4310 HBdSMC (Human Bladder Smooth Muscle Cells) 人膀胱平滑肌细胞Coming Soon：HBdMEC (Human Bladder Microvascular Endothelial Cells)! 人膀胱微血管内皮细胞11.Reproductive Cell System（生殖细胞系）7100 HAEpiC (Human Amniotic Epithelial Cells) 人羊膜上皮细胞7120 HAF (Human Villous Trophoblasts) 人长茸毛滋养层7130 HVT (Human Villous Mesenchymal Fibroblasts) 人长茸毛间叶纤维原细胞Coming Soon：HEEpiC (Human Endometrial Epithelial Cells)! 人子宫内膜上皮细胞12.Lymphatic Cell System（淋巴细胞系）2500 HLEC (Human Lymphatic Endothelial Cells) 人淋巴内皮细胞2530 HLF (Human Lymphatic Fibroblasts) 人淋巴纤维原细胞Coming Soon：HLBVEC (Human Lymphatic Blood Vessel Edothelial Cells)! 人淋巴血管内皮细胞13.Bone Cell System（骨细胞系）4600 HCO (Human Calvarial Osteoblasts) 人颅盖造骨细胞Coming Soon：HBMEC (Human Bone Marrow Endothelial Cells)! 人骨髓内皮细胞14.Skeletal Muscle Cell System（骨骼肌细胞系）3500 HSkMC (Human Skeletal Muscle Cells) 人骨骼肌细胞3510 HSkMSC (Human Skeletal Muscle Satellite Cells) 人骨骼肌卫星细胞3520 HSkMM (Human Skeletal Muscle Myoblasts) 人骨骼肌成肌细胞15.Oral Cell System（口部细胞系）2610 HOK (Human Oral Keratinocytes) 人口角化细胞2620 HGF (Human Gingival Fibroblasts) 人齿龈纤维原细胞2630 HPDLF (Human Periodontal Ligament Fibroblasts) 人齿根膜韧带纤维原细胞16.Hair Cell System（毛发细胞系）2400 HHDPC (Human Hair Dermal Papilla Cells) 人毛发真皮乳状突起细胞2410 HHGMC (Human Hair Germinal Matrix Cells) 人毛发真皮矩阵细胞2420 HHORSC (Human Hair Follicular Outer Root Sheath Cells) 人毛发小囊外根鞘细胞2430 HHIRSC (Human Hair Follicular Inner Root Sheath Cells) 人毛发小囊内根鞘细胞17.Umbilical Cord Cell System（脐带细胞系）8000 HUVEC (Human Umbilical Vein Endothelial Cells) 人脐静脉内皮细胞8010 HUAEC (Human Umbilical Artery Endothelial Cells) 人脐动脉内皮细胞8020 HUVSMC (Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells) 人脐静脉平滑肌细胞8030 HUASMC (Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells 人脐动脉平滑肌细胞19.Mesenchymal stem cell system（间叶干细胞系）7500 HMSC-bm (Human Mesenchymal Stem Cells-bone marrow) 人骨髓间叶干细胞7510 HMSC-ad (Human Mesenchymal Stem Cells-adipose) 人脂肪间叶干细胞7520 HMSC-he (Human Mesenchymal Stem Cells-hepatic) 人肝间叶干细胞Coming Soon：HMSC-cb (Human mesenchymal stem cells-cord blood)!20.Endothelial Cells（内皮细胞）6530 HREC (Human Retinal Endothelial Cells) 人视网膜内皮细胞Coming Soon：Human Dermal Vascular Smooth Muscle Cells! 人真皮血管平滑肌细胞第三篇Animal CellR1200 RPC (Rat Pituitary Cells) 大鼠垂体细胞R1400 RMC (Rat Meningeal Cells) 大鼠脑膜细胞R1510 RN-r (Rat Neurons-raphe) 大鼠脊神经元细胞R1520 RN-sn (Rat Neurons-substantia nigra) 大鼠黑质神经元细胞R1530 RN-s (Rat Neurons-striatal) 大鼠条纹神经元细胞R1540 RN-h (Rat Neurons-hippocampal) 大鼠海马趾神经元细胞R1550 RN-c (Rat Neurons-cortical) 大鼠皮层神经元细胞R1560 RGC (Rat Granule Cells) 大鼠颗粒细胞R1570 RN-vsc (Rat Neurons-ventral spinal cord) 大鼠腹侧脊髓神经元细胞R1580 RN-dsc (Rat Neurons-dorsal spinal cord) 大鼠脊髓神经元细胞R1700 RSC (Rat Schwann Cells) 大鼠雪旺细胞R1800 RA (Rat Astrocytes) 大鼠星形胶质细胞R1810 RA-c (Rat Astrocytes-cerebellar) 大鼠小脑星形胶质细胞R1820 RA-h (Rat Astrocytes-hippocampal) 大鼠海马趾星形胶质细胞R1900 RM (Rat Microglia) 大鼠小胶质细胞R2530 RLF (Rat Lymphatic Fibroblasts) 大鼠淋巴纤维原细胞R4100 RRTEpiC (Rat Renal Tubular Epithelial Cells) 大鼠肾导管上皮细胞R6200 RCM (Rat Cardiac Myocytes) 大鼠心肌细胞Coming Soon：RSC (Rat Schwann Cells)! 大鼠雪旺细胞第四篇传统和特殊培养基1.Classical media：传统培养基MEMM199DMEMHam's F10 & F12DMEM/F12RPMI 1640IMDM2.Low Serum Medium低血清培养基1801 AM：Astrocyte Medium 星形胶质细胞培养基6201 CMM：Cardiac Myocyte Medium 心肌细胞培养基1001 ECM：Endothelial Cell Medium 内皮细胞培养基4101 EpiCM：Epithelial Cell Medium 上皮细胞培养基2301 FM：Fibroblast Medium 纤维原细胞培养基5201 HepM：Hepatocyte Medium 肝细胞培养基2201 MelM：Melanocyte Medium 黒素细胞培养基1401 MenCM：Meningeal Cell Medium 脑膜细胞培养基4201 MCM：Mesangial Cell Medium 系膜细胞培养基7501 MSCM：Mesenchymal Stem Cell Medium 间叶干细胞培养基1901 MM：Microglia Medium 小胶质细胞培养基1621 OM：Oligodendrocyte Medium 少突胶质细胞培养基1631 OPCDM：Oligodendrocyte Precursor Cell Differentiation Medium 少突先驱胶质细胞区别培养基4601 ObM：Osteoblast Medium 造骨细胞培养基1201 PM：Pericyte Medium 周边细胞培养基7211 PreAM：Preadipocyte Medium 前脂肪细胞培养基1701 SCM：Schwann Cell Medium 雪旺细胞培养基3501 SkMCM：Skeletal Muscle Cell Medium 骨骼肌细胞培养基1101 SMCM：Smooth Muscle Cell Medium 平滑肌细胞培养基5301 SteCM：Stellate Cell Medium 星状细胞培养基7121 TM：Trophoblast Medium 滋养层培养基3.Serum-free Medium无血清培养基3201 AEpiCM：Alveolar Epithelial Cell Medium 齿槽上皮细胞培养基3211 BEpicM：Bronchial Epithelial Cell Medium 支气管上皮细胞培养基2311 FMsf：Fibroblast Medium 纤维原细胞培养基2101 KM：Keratinocyte Medium 角化细胞培养基1521 NM：Neuronal Medium 神经元细胞培养基1611 OsM：Oligosphere Medium 球状少突细胞培养基1601 OPCM：Oligodendrocyte Precursor Cell Medium 少突先驱胶质细胞培养基4.Animal Component-free Medium 无动物成分培养基2321 FMacf：Fibroblast Medium 纤维原细胞培养基2111 KMacf：Keratinocyte Medium 角化细胞培养基第六篇ReagentsCat.No. Code Description Quantity Price 0010 FBS Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 10 ml $14.00胎牛血清（人细胞测试）0025 FBS Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 25 ml $24.00 胎牛血清（人细胞测试）0500 FBS Fetal Bovine Serum, Human Cell Tested 500 ml $270.00 胎牛血清（人细胞测试）0103 T/E Trypsin/EDTA Solution 100 ml $15.50 胰蛋白酶-EDTA消化液0113 TNS Trypsin Neutralization Solution 100 ml $16.50 胰蛋白酶中和液0123 NECDS Non Enzymatic Cell Dissociation Solution 100 ml $15.50 非酶细胞裂解液0133 CFM Cell Freezing Medium 50 ml $34.50 细胞冻存培养基0143 SFCFM Serum-Free Cell Freezing Medium 50 ml $34.50 无血清细胞冻存培养基0203 TB Trypan Blue (0.4%) 50 ml $9.50 台盼蓝0303 DPBS Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline 500 ml $11.50 Dulbecco's磷酸缓冲盐0313 HBSS Hank's Balanced Salt Solution 500 ml $11.50 Hank's平衡盐溶液0403 PLL Poly-L-lysine, 1 mg/ml (500X) 1 ml $11.50 多聚赖氨酸0413 PLL Poly-L-lysine, 10 mg/ml 1 ml $50.50 多聚赖氨酸0503 P/S Penicillin/Streptomycin Solution 5 ml $10.50青链霉素溶液0513 CCGW Cell Culture Grade Water 500 ml $9.50 细胞培养级超纯水0703 BPE Bovine Pituitary Extract 25 mg $35.00 牛垂体抽提物0713 BPE Bovine Pituitary Extract 100 mg $125.00 牛垂体抽提物0803 ITS Insulin-Transferrin-Selenium (100X) 10 ml $25.10 胰岛素铁硒传递蛋白0813 L-Glu L-Glutamine Solution (200mM) 100 ml $15.10 L-谷氨酰胺第七篇Molecular biology1.DNA：Normal human primary cell cDNA 正常人主要细胞cDNA2.RNA：Normal Human Primary Cell total RNA 正常人主要细胞总RNA3.Proteins：Normal Human Primary Cell Lysate 正常人主要细胞溶解产物人类肿瘤细胞系统细胞名称中文名称头颈部肿瘤AM 人腺样囊性癌细胞（高转移）A2 人腺样囊性癌细胞Hep-2 人喉表皮癌细胞KB 人口腔上皮癌细胞CNE-2Z 人鼻咽癌母系细胞肺癌A549 人肺腺癌细胞肺793 人肺腺癌细胞SPC-A-1 人肺腺癌细胞H125 人肺癌细胞NCI-H460 人肺癌细胞LTEP-Sm1 人小细胞肺癌细胞(SCLC)NCI-H446 人小细胞肺癌细胞801-D 人巨细胞性肺癌细胞消化系统肿瘤HT-29 人结肠癌细胞SW620 人结肠癌细胞SW480 人结肠癌细胞LOVO 人结肠癌细胞HCT-8 人结肠癌细胞COLO205 人结肠癌细胞Ls-174-T 人结肠腺癌细胞CL187/CCL187 人大肠癌细胞PA319 人大肠癌细胞AsPc 人胰腺癌细胞HepG-2 人肝癌细胞QGY-7701 人肝癌细胞Bel-7402 人肝癌细胞SMMC-7721 人肝癌细胞BGC-803 人胃癌细胞SGC-7901 人胃癌细胞MGC-803 人胃癌细胞BGC-823 人低分化前胃癌细胞CaEs-17 人食管癌细胞妇科肿瘤MCF-7 人乳腺癌细胞ZR75-1 人乳腺癌细胞MDA-MB-435 人乳腺癌高转移细胞BCaP-37 人乳腺癌细胞LCC1 人乳腺癌细胞MX-1 人乳腺癌细胞T47D 人乳腺癌细胞A2780 人卵巢癌细胞OVCaR-3 人卵巢癌细胞HO-8910 人卵巢癌细胞COC1 人卵巢癌细胞HeLa 人宫颈癌细胞SiHa 人宫颈癌细胞泌尿系统肿瘤PC-3 人前列腺癌细胞PC-3M 人前列腺癌细胞DU-145 人前列腺癌细胞EJ 人膀胱癌细胞Ketr-3 人肾癌细胞神经系统肿瘤TG-905 人脑胶质母细胞瘤细胞U251 人神经胶质瘤细胞CRT 人神经胶质瘤细胞Y79 人视网膜母细胞白血病JK(Jurkat) 人淋巴细胞瘤细胞K562 人白血病细胞HL-60 人白血病细胞NB4 急性早幼粒细胞白血病细胞U937 人白血病细胞肉瘤OS－732 人骨肉瘤细胞HT1080 人成纤维肉瘤细胞黑色素瘤MV3 人黑色素瘤细胞A375 恶性黑色素瘤细胞M14 人黑色素瘤细胞横纹肌癌A673 人横纹癌细胞二、动物肿瘤细胞系统细胞名称中文名称白血病Friend 小鼠红白血病细胞M1 小鼠白血病细胞L1210 小鼠白血病细胞P388 小鼠白血病细胞NFS-60 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性L929 小鼠纤维母细胞P815 小鼠肥大细胞癌细胞肺癌Lewis 小鼠肺癌腹水瘤EAC 小鼠艾氏腹水癌细胞乳腺癌MA-891 小鼠乳腺癌高转移细胞骨髓瘤SP2/0 小鼠骨髓瘤细胞P3-X63-Ag8.653 小鼠骨髓瘤细胞淋巴瘤Yac-1 小鼠淋巴瘤细胞黑色素瘤B16F10 小鼠黑色素瘤高转移细胞B16BL6 小鼠黑色素瘤细胞肝癌H22 小鼠肝癌神经系统肿瘤C6 大鼠神经胶质瘤细胞PC12 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞三、正常细胞细胞名称中文名称VE 人血管内皮细胞EC-304 人血管内皮细胞HELF 人胚肺成纤维细胞293 人胚肾细胞293A 人胚肾细胞L-O2 正常肝细胞L929 小鼠成纤维细胞Ana-1 小鼠巨噬细胞CHL 中国仓鼠肺细胞CHO 中国仓鼠卵巢细胞Vero 绿猴肾细胞COS-7 SV40 转化的非洲绿猴肾MDCK 狗肾细胞四、肿瘤耐药细胞细胞名称中文名称MCF/Adr 人乳腺癌阿霉素耐药细胞株LCC9 人乳腺癌抗雌激素耐药株LCC2 人乳腺癌Tamoxifen耐药株MX-1/T 人乳腺癌紫杉醇耐药株A549/T 人肺腺癌紫杉醇耐药株BEL/FU 人肝癌氟尿嘧啶耐药株HCT-8/V 人结肠癌长春新碱耐药株KB/V 人口腔上皮癌长春新碱耐药株。
细胞生物学名词解释集合
1、细胞：是物质（结构）、能量与信息过程精巧结合的综合体；是高度有序的，具有自装配和自组织能力的体系(第一章)2、细胞培养技术(cell culture)即是选用各种最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术3、原代细胞（primary culture cell）：是指从机体取出后立即培养的细胞。
有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
4、细胞系（cell line）：原代培养物在首次传代成功后所繁殖的细胞群体。
也指可长期连续传代的培养细胞。
5、细胞株（cell strain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain），也就是说，细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群。
6、RNA干扰（RNA interference, RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象（第三章）7、细胞质膜(plasma membrane),又称细胞膜(cell membrane)，是指围绕在细胞最外层，由脂质和蛋白质组成的生物膜。
细胞膜：在稳定内环境；物质、能量交换；信息传递中起着很重要的作用。
8、膜骨架:指细胞质膜下与膜蛋白相连的由纤维蛋白组成的网架结构,它参与维持细胞质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能（第四章）9、信号肽（signal peptide）：是引导新合成肽链转移到内质网上的一段多肽，一般位于新合成肽链的N端，一般16~30个氨基酸残基。
10、信号识别颗粒（signal recognition particle，SRP）：属于一种核糖核蛋白，位于细胞质基质中。
SRP与信号序列结合，导致蛋白质合成暂停。
11、SRP受体（SPR receptor, DP）：是膜的整合蛋白，存在于内质网上，可与SRP特异结合12、移位子（translocon）：由3-4个Sec61蛋白复合体构成的一个类似于油炸圈的结构，每个Sec61蛋白由三条肽链组成。
人脐带间充质干细胞原代培养方法的改良
人脐带间充质干细胞原代培养方法的改良李小战;马红;许辉;李淑;李遇梅【摘要】Objective:To improve the tissue mass primary culture protocol of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells (hUC-MSCs),so as to explore their morphology,cell surface markers,osteogenic and adipogenic differentiation potential and observe biological properties.Methods:Human umbilical cords were obtained from healthy full-term delivered newborns.After stripping off blood vessels,the remaining connective tissues were cut into small fragments,and primary hUC-MSCs were separated by culture of traditional and improved tissue explants methods.The hUC-MSCs were tested with MTT method and the growth curves of them were drawn.Cell surface markers were detected by flow cytometry.After osteogenic and adipogenic differentiation,the potentiality of their differentiation was detected by chemistry staining.Results:After 3-4 days of incubation,flat or spindle-shaped fibroblast-like primary cells were presented,and cells reached 80％confluence after 5-6 days of incubation.Culture period was shortened by more than half.Flowing water-like or spiral growth morphology was presented after cell passage.MTT revealed high capability of proliferation.Flow cytometry analysis showed CD90 (+),CD105 (+),CD73 (+),CD166(+),CD44(+),CD29(+),positive rate of 95％ or more ;CD45(-),HLA-DR(-),negative rate of not more than 2％.Its differentiation potential was proved by osteogenic and adipogenic differentiation,which was proved bychemistry staining.Conclusion:An improved primary culture method of hUCMSCs has been developed.Primary cells can be obtained from improved tissue explants method combined enzyme digestion technique.Primary cell culture time was shortened,and the efficiency of cell culture was improved.Cells isolated by the new method from the human umbilical cords had the following biological characteristics:adherent growth,high proliferation,mesenchymal stem cell phenotype,and multipotent differentiation.They could be used as the source of seed cells in scientific research and clinical applications.%目的:探讨体外组织块培养原代人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)的改良方法,并观察其形态,免疫表型,成脂成骨分化等生物学特性.方法:从健康足月儿获得脐带,将血管剥离后,余下的结缔组织剪成小块,分别用传统植块法和改良植块法分离培养原代hUC-MSCs.MTT法检测细胞增殖情况并绘制细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞免疫表型,成脂成骨诱导分化检测其分化潜能,化学染色鉴定诱导分化结果.结果:改良植块法脐带组织贴壁培养3～4d即可从组织块边缘长出长梭形成纤维样原代细胞,5～6d后细胞可长满80％,比传统植块法原代细胞培养周期缩短了一半以上时间,细胞传代后流水状或漩涡状生长,MTT法显示细胞增殖能力强,流式细胞仪检测提示CD90,CD105,CD73,CD166,CD29,CD44均阳性表达,阳性率均在95％以上,CD45和HLA-DR均阴性表达,阳性率低于2％;诱导分化实验及化学染色结果证实,该细胞具有成脂和成骨多向分化潜能.结论:应用与酶消化法相结合的改良植块法可以获得hUC-MSCs,比传统植块法缩短了原代培养周期,提高了细胞培养效率,所获得细胞贴壁生长,增殖能力强,表达间充质干细胞相关免疫表型,具有多向分化潜能,可在科研和临床应用中作为种子细胞来源.【期刊名称】《江苏大学学报（医学版）》【年(卷),期】2014(024)005【总页数】5页(P375-379)【关键词】脐带间充质于细胞;原代培养;诱导分化【作者】李小战;马红;许辉;李淑;李遇梅【作者单位】江苏大学附属医院皮肤科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院皮肤科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院皮肤科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院皮肤科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院皮肤科,江苏镇江212001【正文语种】中文【中图分类】R329.2间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）是中胚层来源的具有高度自我更新能力和多向分化潜能的多能干细胞［1－2］，可在体外培养扩增，并能在特定条件下分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、神经细胞等［3－4］。
原代细胞培养 条件
原代细胞培养条件原代细胞培养可是个超有趣又有点小复杂的事儿呢，那培养它得有些啥条件呢？咱先来说说环境条件吧。
原代细胞可娇弱啦，就像个小婴儿一样。
它需要一个超干净的环境，那种无菌的状态是必须的。
要是有细菌或者其他脏东西跑进去，那原代细胞可就惨啦，就像小绵羊闯进了狼群，一下子就被欺负得不行。
所以呢，培养的地方得经过严格的消毒，那些培养皿、仪器啥的，都得干干净净的。
温度也很重要哦，就像我们人觉得舒服的温度一样，一般得保持在37度左右，这个温度能让原代细胞感觉就像在自己家里一样自在。
湿度也不能马虎，不能太干也不能太湿，太干了细胞会觉得口渴，太湿了又像住在水帘洞里，细胞也不喜欢。
再讲讲营养方面的条件吧。
原代细胞要茁壮成长，就得有足够的营养。
就像我们人要吃各种食物一样，细胞也需要各种营养物质。
像血清这种好东西，就像是细胞的“高级营养品”，能给细胞提供好多生长必需的东西。
还有各种氨基酸啦、维生素啦，都是细胞的“美食”。
要是营养不够，细胞就会像没吃饱饭的小朋友，长得瘦瘦小小，无精打采的。
还有气体条件也不能忽视。
细胞也是要呼吸的呢，二氧化碳和氧气对它来说就像空气对我们一样重要。
二氧化碳的浓度得刚刚好，就像调一杯美味的鸡尾酒，比例得合适。
氧气也不能太多或者太少，太多了细胞会“醉氧”，太少了又会“喘不过气”。
最后呢，培养原代细胞还得有合适的基质。
这个基质就像是细胞的“小床”，它得舒舒服服的。
不同的原代细胞可能喜欢不同的基质，就像不同的人喜欢不同款式的床一样。
有些细胞喜欢软软的基质，有些细胞可能喜欢硬一点的，得根据细胞的喜好来选择合适的基质。
原代细胞培养的条件真的是一环扣一环，每个条件都像是拼图的一块，少了哪一块都不行。
只有把这些条件都满足了，原代细胞才能在培养环境里快乐地生长、繁殖，就像在自己的小天地里自由自在地生活一样。
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¥5,380
消化系统
肝动脉内皮细胞
Hepatic arterial endothelial cells
5 × 105
¥7,280
人膀胱癌组织源细胞
Bladder Cancer cell
5 × 105
¥5,380
人甲状腺癌组织源细胞
Thyroid cancer cell
5 × 105
¥5,380
人乳腺癌组织源细胞
Breast cancer cell
5 × 105
¥5,380
人肺癌组织源细胞
Lung Cancer cell
人肝癌组织源细胞
Hepatic carcinoma cell
5 × 105
¥7,280
人卵巢癌组织源细胞
Ovarian Cancer cell
5 × 105
¥5,380
人胆管癌组织源细胞
Cholangio carcinomal cell
5 × 105
¥5,380
人肾癌组织源细胞
Kidney Cancer cell
人体肿瘤组织原代细胞
菩禾货号
所属系统
中文名
英文名
数量
价格
肿瘤组织
人结肠癌组织源细胞
Colon Cancer cell
5 × 105
¥5,380
人食管癌组织源细胞
Esophageal cancer cell
5 × 105
¥5,380
人胃癌组织源细胞
Gastric cancer cell
5 × 105
¥5,380
¥4,980
胃粘膜上皮细胞
Gastric epithelial cells
5 × 105
¥4,480
直肠平滑肌细胞
Rectal smooth muscle cells
5 × 105
¥4,480
泌尿系统
肾小球内皮细胞
Glomerular endothelial cells
5 × 105
¥5,880
肾近曲管状上皮细胞
¥5,880
主动脉平滑肌细胞
Aortasmooth muscle cells
5 × 105
¥5,880
脐静脉内皮细胞
Umbilical vein endothelial cells
5 × 105
¥3,580
脐动脉内皮细胞
Umbilical artery endothelial cells
5 × 105
Bladdersmooth muscle cells
5 × 105
¥5,380
肾动脉内皮细胞
Renal artery endothelial cells
5 × 105
¥5,880
肾动脉平滑肌细胞
Renal arterysmooth muscle cells
5 × 105
¥5,280
肾成纤维细胞
Renalfibroblastscells
¥5,080
肺大动脉内皮细胞
Pulmonary aorta endothelial cells
5 × 105
¥5,880
肺大动脉平滑肌细胞
Pulmonary aorta smooth muscle cells
5 × 105
¥5,880
肺大静脉内皮细胞
Pulmonary vein endothelial cells
5 × 105
¥7,080
人胶质瘤组织源细胞
Gliomas cell
5 × 105
¥5,380
人宫颈癌组织源细胞
Cervical Cancer cell
5 × 105
¥5,380
人皮肤癌组织源细胞
Skin Cancer cell
5 × 105
¥7,080
人子宫肌瘤组织源细胞
Uterine fibroids cell
¥5,880
脉络膜血管细胞
5 × 105
¥5,880
前列腺成纤维细胞
Prostaticfibroblasts cells
5 × 105
¥4,880
骨/关节/软组织/皮肤系统
颅盖造骨细胞
Calvaria osteoblasts cells
5 × 105
¥5,680
Renal proximal tubular epithelial cells
5 × 105
¥5,880
肾皮层上皮细胞
Renal cortical epithelial cells
5 × 105
¥5,280
肾上皮细胞
Kidney epithelial cells
5 × 105
¥5,880
输尿管上皮细胞
¥4,480
直结肠平滑肌细胞
Rectal smooth muscle cells
5 × 105
¥4,980
小肠粘膜上皮细胞
Small intestinal epithelial cells
5 × 105
¥4,480
结肠粘膜上皮细胞
Colonicepithelial cells
5 × 105
¥4,980
5 × 105
¥4,980
气管上皮细胞
Tracheal epithelial cells
5 × 105
¥5,080
支气管上皮细胞
Bronchial Epithelial Cells
5 × 105
¥4,480
小气道上皮细胞
Airwayepithelial cells
5 × 105
¥5,080
肺纤维原细胞
子宫成纤维细胞
Uterinefibroblastscells
5 × 105
¥4,480
卵巢上皮细胞
Uterine smooth muscle cells
5 × 105