文献综述-溶血磷脂酸的合成
溶血磷脂的制备、分离、检测及应用研究进展
３．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈａｒｂｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｏｍｍｅｒｃｅ，Ｈａｒｂｉｎ １５００７６，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ（ＬＰＬｓ）ａｒｅ ｔｈｅ ｓｉｎｇｌｅ ｃｈａｉｎ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｄｅｒ ｉｖａｔｉｖｅ ｄｅｒ ｉｖｅｄ ｆｒｏｍ
面的研 究 未达 到世 界 先进 水 平 。综述 了溶血磷 脂 的制备 方 法 、分 离提 取 方法 、检 测 方 法 以及 应 用的
研究进展 ，以 备 ；分 离提取 ；检 测 ；应 用
中图分 类 号 ：ＴＱ６４５；Ｑ５４５
文 献标 识码 ：Ａ
溶 血 磷 脂 （Ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ）是 磷 脂 水解 失 去 １个脂肪酰基得到的产物。溶血磷脂是体 内磷脂代 谢 的 中 间产物 ，是 细胞 膜 的组 分 ，其 功能 是介 导 各种 磷脂 的合 成 和嵌 入 蛋 白质 到 细 胞 膜 … 。溶 血 磷 脂 有较强 的表面活性 ，其浓度过高 ，能使红细胞及其他
细胞膜破裂 ，导致溶血现象或细胞死亡。 溶 血 磷 脂 的来 源 十 分 广 泛 ，主 要 从 大 豆 等 天 然
油 料种 子 、蛋 黄 、内脏 或 血 液 中分 离 提 取 ，也 可 以用 酶 解 、醇解 等 化 学 方 法 制 备 。溶 血 磷 脂 的 乳 化 性 能 突 出 ，范勋 涛 测 得粉 末溶 血 磷 脂 的 亲 水 亲 油 平 衡 值 （ＨＬＢ）为 １Ｏ，而 一 般 磷 脂 的 ＨＬＢ为 ３—４ Ｌ３ Ｊ。溶 血磷脂乳化性 、渗透性 、表面活性等性能优于普通磷 脂 ，可作为食品添加剂 、抑菌剂和乳化剂等 ，目前广 泛用于食品 、畜牧 、医药等行业。溶血磷脂在体 内参 与多种生命活动 ，在抑制肿瘤 、抵抗艾滋病毒 、治疗 糖 尿病 等 多种 疾病 中起作 用 。
溶血磷脂的生理作用及其在畜牧业中的运用论文
溶血磷脂的生理作用及其在畜牧业中的运用论文引言溶血磷脂---磷脂质的一种，亦称为溶血磷脂酰胆碱，溶血磷脂是一种良好的乳化剂，其作用约为普通磷脂乳化剂的 5 倍。
由于其抑菌性能、表面活性等各方面的功能作用，溶血磷脂已经成为国内外研究的热点。
如今溶血磷脂被广泛应用于饲料行业。
1 溶血磷脂的理化性质溶血磷脂是磷脂失去一个脂肪酸基因所形成磷脂的统称，是普通磷脂在磷脂酶A2 的作用下失去一个分子脂肪酸键所得到得产物或在pH4.80 下由磷脂 PC（聚碳酸酯）、PE（聚已烯）、PA（尼龙，聚酰胺）等氧化水解生产的一组化合物[1],溶血磷脂是迄今发现的一种结构最简单的磷脂。
它是真核细胞磷脂生物合成早起阶段的关键性前体，甘油磷脂代谢的中间产物，从化学结构上溶血磷脂不但保留普通磷脂的性能还增加了亲水性[2],因此溶血磷脂具有很好的水分散性适于制备D/W 型乳状液。
2 溶血磷脂的生理作用大量研究表明，溶血磷脂是生物体正常新陈代谢和健康生长动物不可少的物质。
优良的乳化性是溶血磷脂的最为突出的一个性质，它作为食品添加剂可以起均一性和感酥性，也能延长食品保质期。
江学荣等（2007）研究发现，将溶血磷脂加入单脂肪酸甘油酯、脂肪酸、蔗糖酯组成的复合乳化剂再加入至香肠中，其保油率可以达到88.3%,同时口感和感观效果也比较好[3]. 溶血磷脂作为饲料添加剂可以促进家禽对营养物质的吸收和代谢，补充家禽所需要的多种微量元素，可以增加家禽的产蛋率以及加快家禽的生长[4].3 溶血磷脂在畜牧业上的应用3.1 溶血磷脂在猪生产上的应用由于对溶血磷脂的研究并不是很完整，目前对于猪的应用大多在于断奶仔猪。
仔猪断奶后胃蛋白酶活性大大降低，胰脂肪酶和小肠前端脂肪结合蛋白活性也降低，导致仔猪对饲料中的营养物质消化、吸收不良，造成仔猪营养性腹泻。
同时断奶后的仔猪食欲会大大下降，所以仔猪的生长会受到抑制。
因此在仔猪饲料中添加一定量的乳化剂，可以改善仔猪断奶后产生的营养性腹泻，这是一种安全高效的营养调控措施，溶血磷脂作为优良乳化剂在此方面的应用显着。
磷脂酶a2水解磷脂生成溶血磷脂酸
磷脂酶a2水解磷脂生成溶血磷脂酸磷脂酶A2是一种重要的酶类蛋白，它在生物体内起着许多重要的生物学功能。
磷脂酶A2主要是通过水解磷脂生成溶血磷脂酸的方式来发挥其作用。
本文将从磷脂酶A2的结构与功能、水解磷脂生成溶血磷脂酸的机制、磷脂酶A2在生物体内的作用等几个方面来详细介绍这一酶类蛋白。
首先我们来介绍一下磷脂酶A2的结构与功能。
磷脂酶A2是一种酶类蛋白，其主要结构是由一个单一的多肽链组成。
该多肽链上包含了活性位点和底物结合位点等结构。
磷脂酶A2主要的功能是通过水解磷脂生成溶血磷脂酸，从而参与调节细胞膜的合成和代谢。
此外，磷脂酶A2还能够调节炎症反应、促进血栓形成等生物学功能，因此在生物体内具有重要的生物学作用。
其次我们来详细介绍一下磷脂酶A2是如何通过水解磷脂生成溶血磷脂酸的机制。
磷脂酶A2主要作用的底物是细胞膜上的磷脂类物质，比如磷脂酰胆碱等。
当磷脂酶A2与其底物结合后，活性位点上的氨基酸残基将与底物的磷酸基团发生酯键水解反应，从而将磷脂水解为溶血磷脂酸和游离的脂肪酸。
这一过程是磷脂酶A2发挥生物学功能的重要途径，也是其能够调节细胞膜的合成和代谢的主要机制。
接下来我们将介绍一下磷脂酶A2在生物体内的作用。
磷脂酶A2在生物体内具有多种生物学作用，它参与了细胞膜的合成和代谢、调节炎症反应、促进血栓形成等过程。
其中，磷脂酶A2在炎症反应中的作用尤为重要，它能够通过水解膜磷脂生成溶血磷脂酸，从而促进炎症介质的释放和炎症反应的进行。
此外，磷脂酶A2还能够促进血小板的活化和血栓的形成，从而参与了维持血管内皮屏障的完整性和心血管系统的功能。
总的来看，磷脂酶A2是一种重要的酶类蛋白，在生物体内具有多种重要的生物学功能。
通过水解磷脂生成溶血磷脂酸是磷脂酶A2发挥作用的重要途径，而在生物体内，磷脂酶A2参与了调节细胞膜的合成和代谢、调节炎症反应、促进血栓形成等多种生物学过程。
因此，对磷脂酶A2的研究和理解能够为相关疾病的治疗和预防提供重要的依据和思路。
文献综述-溶血磷脂酸的合成
缩写： 缩写： • PL: 磷脂 • LPL:溶血磷脂 LPL:溶血磷脂 • GPC: 甘油磷酸胆碱 • LPA: 溶血磷脂酸 • LPC:溶血磷脂酰胆 LPC:溶血磷脂酰胆 碱
1.化学合成 1.化学合成
1.1.由 1.1.由D-甘露醇合成 • D-甘露醇是一种光学活性物质，可以通过几个步骤反应转化到LPLs。 甘露醇是一种光学活性物质，可以通过几个步骤反应转化到LPLs
2.酶法合成LPL 2.酶法合成LPL 酶法合成
• 相对于化学合成，酶法合成LPLs有很多优点。 相对于化学合成，酶法合成LPLs有很多优点。 LPLs有很多优点 • 1.选择具有选择位点的酶 1.选择具有选择位点的酶 • 2.减少了有毒有害化学试剂的使用 2.减少了有毒有害化学试剂的使用 • 3.产品容易分离纯化 3.产品容易分离纯化
1.4.通过P 1.4.通过P -硝基苯甘油合成 通过
• 通过P -硝基苯甘油合成2,3 - O -异亚丙基- D -甘油 通过P 硝基苯甘油合成2,3 异亚丙基最终合成LPA LPC。 LPA和 酸甲酯 ，最终合成LPA和LPC。
LPC
LPA
1.5.由 1.5.由GPC合成 合成
• GPC和天然卵磷脂具有相同的手性，是合成LPC的理想初始 GPC和天然卵磷脂具有相同的手性，是合成LPC的理想初始 和天然卵磷脂具有相同的手性 LPC 物质。由于GPC是水溶性物质，能溶于低级醇如甲醇中， GPC是水溶性物质 物质。由于GPC是水溶性物质，能溶于低级醇如甲醇中，在 有机溶剂中的溶解度低， 有机溶剂中的溶解度低，这一特点制约了其在合成中的应 需要由锡作为介质合成2 LPC。 用。需要由锡作为介质合成2-LPC。
不同的酶 具有不同 的酶切位 点，根据 不同的酶 切位点， 切位点， 可以合成 LPL
磷脂酶a2水解磷脂生成溶血磷脂酸
磷脂酶a2水解磷脂生成溶血磷脂酸磷脂酶A2是一种重要的酶类蛋白，在人体和许多其他生物体内都起着关键的生物学作用。
它主要负责水解磷脂分子，将其分解成溶血磷脂酸以及其他生物活性产物。
本文将从磷脂酶A2的结构和功能、其在生物体内的作用、以及与溶血磷脂酸相关的研究进展等方面进行全面的介绍。
磷脂酶A2的结构和功能磷脂酶A2是一种酶类蛋白，它在人体和许多其他生物体内都广泛存在。
该酶是一种酯酶，主要作用是水解膜磷脂酰胆碱，将其分解成溶血磷脂酸和胆碱。
磷脂酶A2的活性受到钙离子的调节，其活性受到许多生理和病理条件的影响。
磷脂酶A2在生物体内的作用磷脂酶A2在生物体内起着多种重要的生物学作用。
首先，它参与调节细胞膜的脂质组成，影响细胞膜的流动性和通透性。
其次，该酶还参与调节细胞凋亡和炎症反应，对细胞的生长、分化和存活都有一定的影响。
此外，磷脂酶A2还与许多疾病的发生和发展有关，例如癌症、心血管疾病等。
与溶血磷脂酸相关的研究进展溶血磷脂酸是磷脂酶A2水解磷脂生成的产物之一，它在炎症反应、血栓形成等生理和病理过程中起着重要的作用。
近年来，人们对溶血磷脂酸的研究越来越深入。
研究显示，溶血磷脂酸与许多炎症性疾病，如类风湿关节炎、炎症性肠病等有着密切的关联。
此外，溶血磷脂酸还参与调节血栓形成过程，对心血管疾病的发生和发展有一定的影响。
结语总之，磷脂酶A2作为一种重要的酶类蛋白，在生物体内起着多种关键的生物学作用。
它的功能不仅与细胞膜组成和生物学膜的功能密切相关，还与炎症反应、凋亡、疾病的发生和发展等有着密切的关联。
因此，对磷脂酶A2及其水解产物溶血磷脂酸的研究具有重要意义，有望为相关疾病的治疗和预防提供新的思路和方法。
希望未来能有更多的研究人员投入到这一领域，共同揭示磷脂酶A2的生物学功能及其潜在的临床意义。
最新：溶血磷脂在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展
最新：溶血磷脂在慢性阻塞性肺疾病中的研究进展摘要慢性阻塞性肺疾病(COPD)是呼吸系统中的常见病，其临床表现为呼吸困难、慢性咳嗽、咳痰，以持续气流受限为特征。
因肺功能进行性减退，严重影响患者的劳动力和生活质量，造成巨大的社会和经济负担。
因此COPD 的早诊断早治疗以及开发新的治疗靶点意义重大。
溶血磷脂作为重要的信号传递介质，与气道慢性炎症、氧化应激、细胞凋亡、肺组织纤维化等COPD 病生理过程密切相关，有望成为COPD临床标志物及治疗靶点。
COPD是呼吸系统中的常见病和多发病，是以持续气流受限为特征的可预防和治疗的疾病。
其气流受限呈进行性发展，与气道和肺组织的异常慢性炎症反应有关。
因肺功能进行性减退，严重影响患者的劳动力和生活质量。
COPD发病率和患病率居高不下，造成巨大的社会和经济负担[1]。
预计到2020年，COPD将成为世界第三大死亡原因[2]。
肺功能检查对确定气流受限有重要意义。
根据慢性阻塞性肺疾病全球倡议[3]，在吸入支气管扩张剂后，第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in one second，FEV1)/FVC<0.7表明存在持续气流受限。
尽管COPD传统的定义建立在肺功能检查上，人们发现随着年龄的增长，肺功能逐渐下降[4]，因此将FEV1/FVC<0.7作为诊断标准有可能导致健康的中年人和老年人的COPD 误诊。
另一方面，因为肺功能明显下降之前就启动COPD前期病理过程，有可能导致早期的轻度COPD患者的漏诊[5]。
最新研究表明不同表型的COPD肺功能有所差异，例如肺气肿型[6]、慢性支管炎型[7]或频繁急性加重型[8]。
这些表型的具体分子机制仍不清楚，但是有些研究通过使用若干组生物标志物的组合，发现炎症在鉴别这些表型中起到重要作用[9,10]。
在此背景下，有学者把研究方向转向了COPD发病机制以及相关分子代谢产物，试图从中寻找新的生物标记物以及治疗靶点。
溶血磷脂的理化性质、制备方法及在畜牧业上的应用
溶血磷脂的理化性质、制备方法及在畜牧业上的应用贾洪强【摘要】文中主要介绍溶血磷脂的理化性质、制备方法及其在畜牧业上的应用.【期刊名称】《福建畜牧兽医》【年(卷),期】2018(040)003【总页数】3页(P17-19)【关键词】溶血磷脂;畜牧;作用机理【作者】贾洪强【作者单位】麦仑(漳州)生物科技有限公司福建漳州 363902【正文语种】中文乳化剂的研究最早始于1915年美国的Murlin和Riche。
20世纪60年代，乳化剂开始作为可乳化脂肪、淀粉和蛋白质的食品添加剂得到开发使用[1]。
饲料乳化剂目前已经广泛应用于饲料工业和畜牧行业，其种类包括离子型乳化剂（如胆汁酸盐类[2]、磷脂类[3]等）、非离子型乳化剂（如羧甲基纤维素、山梨醇酐单硬脂酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯等多聚物[4]）和复合型乳化剂[5]。
其中，大豆卵磷脂使用最为广泛，尤其是关于溶血磷脂的研究得到越来越多的关注。
溶血磷脂（Lysophospholipid）也称溶血卵磷脂、水解磷脂，是目前发现的分子量最小、结构最简单的磷脂，它是真核细胞磷脂生物合成早期阶段的关键性前体，甘油磷脂代谢的中间产物[6]。
溶血磷脂是由各种磷脂失去一个脂肪酸基因所形成磷脂的统称，失去α位和β位脂肪酸的磷脂都称为溶血磷脂，但β位的酰基容易转移到α位[7]。
1 溶血磷脂的理化特性磷脂是一种极性脂类，含有疏水基团（脂肪酸部分）和亲水基团（磷酸部分），又因非极性基团和易氧化的不饱和双键结构的减少而明显增加了亲水性能和稳定性[7]。
大量试验表明，动物饲料中添加溶血磷脂可以起到很好的乳化作用，提高油脂在生物体内的消化吸收率[8-13]，但二者作用效果又有不同。
孙万成等[14]对溶血磷脂与普通磷脂的理化性质做了体外试验研究对比，结果表明溶血磷脂能增强脱脂乳粉的润湿能力，具有更强的乳化稳定性。
刘晔等[15]的研究也证实，在润湿能力试验中，溶血磷脂比普通磷脂与脱脂乳粉润湿时间缩短了35 s；在乳化稳定性试验中，溶血磷脂亦表现出远优于普通磷脂的抗酸碱（pH3~9均稳定，而普通磷脂只有pH5时稳定）、抗高温（80 ℃）、抗高盐（0.1%NaCl和 0.05%CaCl2）能力。
溶血磷脂的制备、分离、检测及应用研究进展
溶血磷脂的制备、分离、检测及应用研究进展李招;谷克仁;张海臣;潘丽;康世宗【期刊名称】《中国油脂》【年(卷),期】2018(043)006【摘要】溶血磷脂(Lysophospholipids)是磷脂在自然降解或磷脂酶的作用下从1位或2位酯键断裂产生的单链脂肪酰磷脂衍生物,是一类仅含有1条脂肪酸链的甘油磷脂.溶血磷脂具有良好的表面活性、乳化性等性能,应用于食品、医药等行业,也作为信号分子参与生命活动.我国在溶血磷脂方面的研究未达到世界先进水平.综述了溶血磷脂的制备方法、分离提取方法、检测方法以及应用的研究进展,以期对溶血磷脂的研究有所帮助.【总页数】6页(P132-136,143)【作者】李招;谷克仁;张海臣;潘丽;康世宗【作者单位】河南工业大学化学化工与环境学院,郑州450001;河南工业大学化学化工与环境学院,郑州450001;吉林工程技术学院,吉林四平136001;吉林工程技术学院,吉林四平136001;河南工业大学化学化工与环境学院,郑州450001;哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨150076;河南工业大学化学化工与环境学院,郑州450001【正文语种】中文【中图分类】TQ645;Q545【相关文献】1.原子转移自由基聚合技术及其在分离材料制备中的应用研究进展 [J], 陈佑宁;张君才;杨小玲2.导电分离膜的制备及其在水处理中的应用研究进展 [J], 徐莉莉;王昆朋;李魁岭;刘烈;汪志永;郭菁菁;刘泓锌;张勇;王军3.渗透汽化分离膜的制备与应用研究进展 [J], 林源4.纳米纤维素基气凝胶的制备及其吸附分离应用研究进展 [J], 杨桂花;李伟栋;和铭;吉兴香;马光瑞;陈嘉川5.木质素低共熔溶剂分离、功能材料制备及应用研究进展 [J], 罗朝兵;李海潮;游婷婷;许凤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
溶血磷脂酸的合成途径
溶血磷脂酸的合成途径
溶血磷脂酸（LPA）的合成途径主要有以下几种：
1. 磷脂酰乙醇胺（PE）脂酶的作用：PE脂酶可以催化磷脂酰
乙醇胺与溶血磷脂酸酰基转移酶（LPAAT）反应生成溶血磷
脂酸。
这是LPA的主要合成途径之一。
2. 甘油磷酸酯内酯的水解：甘油磷酸酯内酯（MAG）是LPA
的前体分子，可以通过酵素甘油磷酸酯酶（MAGL）的作用水解为LPA。
3. 咪唑酮磷酸酯的水解：咪唑酮磷酸酯（ZK）是LPA的另一
种前体分子，可以通过酵素咪唑酮磷酸酯脱酯酶（ZKDE）水
解为LPA。
4. 磷酸酯水解：一些研究表明，磷酸酯可以通过酵素磷酸酯酶的作用水解为LPA，但具体的酶类和机制尚不清楚。
需要注意的是，LPA的合成途径还受到一些调控因子的影响，例如胰岛素样生长因子（IGF）和脂肪酸。
这些调控因子可以
通过调节合成酶的表达或活性来影响LPA的合成。
大豆溶血磷脂的制备及其生物安全性分析
Henan University of Technology，Zhengzhou 450001，China）
Abstract： Soybean lysophospholipids are modified phosphatides of losing a fatty acid group in the original
had hemolytic phenomena，and their hemolysis rates at 200 μg / mL were less than 5% ，which could be
considered as biosafety． The cell survival rates were all higher than 80% when soybean phospholipids
摘要： 大豆溶血磷脂是原有大豆磷脂结构中失去一个脂肪酸基团的改性磷脂的统称，较大豆磷脂增 强了亲水性和抗氧化性，被广泛地用于医药、食品和畜牧业。采用磷脂酶 A1 对大豆磷脂进行改性， 以水解率和红外光谱检测其改性程度，以溶血试验和细胞毒性试验检测其生物安全性。结果表明： 采用磷脂酶 A1 在 60 ℃ 、40% 大豆磷脂 － 水的体系中酶解大豆磷脂所制备的大豆溶血磷脂，纯化后 为棕色、块状物质且无明显豆腥味； 其水解率为 101． 6% ； 大豆溶血磷脂中双键和酰胺键的吸收峰 明显低于大豆磷脂； 大豆溶血磷脂和大豆磷脂均有溶血现象，且二者在 200 μg / mL 以下溶血率均 低于 5% ，视为生物安全； 大豆溶血磷脂在 20 μg / mL、大豆磷脂在 50 μg / mL 以下时，Caco － 2 细胞 的存活率均高于 80% 。综上，采用磷脂酶 A1 制备的大豆溶血磷脂，在一定质量浓度下使用，具备 生物安全性。 关键词： 大豆磷脂； 磷脂酶 A1； 大豆溶血磷脂； 溶血性； 细胞毒性 中图分类号： TQ645． 9 + 6； Ｒ318 文献标识码： A 文章编号： 1003 － 7969（ 2019） 06 － 0124 － 05
溶血磷脂酸及其受体与生殖
溶血磷脂酸及其受体与生殖发表时间：2011-06-03T14:44:52.560Z 来源：《中国健康月刊》2011年第1期作者：韩省华1 吴素清1 李慧卿1 李瑞珍2[导读] 溶血磷脂酸（Lysophosphatidic acid，LPA）是一种类似生长因子的脂类小分子物质。
韩省华1 吴素清1 李慧卿1 李瑞珍2基金项目：河北省医学科研基金资助项目（07144）【摘要】溶血磷脂酸（Lysophosphatidic acid，LPA）是一种类似生长因子的脂类小分子物质，通过G蛋白偶联受体（GPCRS）介导，发挥多种生物学作用，与LPA亲和力较高的受体有LPA1、LPA2和LPA3，属于内皮分化基因家族，在胚胎、成年组织和多种细胞中广泛分布。
LPA主要产生于体内被激活的血小板。
LPA通过其受体在生殖系统中发挥重要作用。
【关键词】溶血磷脂酸;溶血磷脂酸受体;生殖【中图分类号】 R352 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)01-0004-03溶血磷脂酸（Lysophosphatidic acid，LPA）是一种细胞膜脂类衍生物，是具有多种生物活性的磷脂介质，通过各种信号传导途径引起广泛的生物学效应,在生殖组织中起着多种作用。
1 LPA的结构LPA化学名为1-酰基-2羟基-3-磷酸甘油，是结构最简单的水溶性甘油磷脂，LPA包含磷酸基团、甘油骨架及长链脂肪酸三部分，甘油骨架是最基本的结构。
1位碳原子上连接脂肪酸链，脂肪酸链越长，其生物活性愈大；2位碳原子上有羟基，使其具有亲水性，在胞内合成后可迅速释放到胞外，充当信号分子；3位碳原子上含有磷酸基。
脂肪酸链通过不同的化学键与甘油骨架相连，形成LPA的亚组，主要为酰基LPA、烷基LPA和烯基LPA，各亚组中不同长度的脂肪酸链形成不同的LPA分子[1] 。
2 LPA的合成与代谢LPA为类生长因子的脂类信号分子，血小板、成纤维细胞、癌细胞、脂肪细胞、神经细胞、某些炎症细胞、内皮细胞受到各种刺激后均可生成，通过内分泌和旁/自分泌的方式释放。
溶血磷脂病理学综述
磷脂酶D 主要存在于植物，动物脑组织中亦有，催化磷脂分子中磷酸 与取代基团(如胆碱等)间的酯键，释放出取代基团。
PC
O R1 C O O CH2 CH CH2 O O P OH CH2CH2N+(CH3)3
R1 O C O HO CH2 CH CH2
LPC
R2
C O
O
磷脂酶A
O
P OH
CH2CH2N+(CH3)3
O R1 C O HO
LPA
CH2 CH CH2 O O
溶血磷脂酶D
P OH
H
乳状液型注射液中LPC产生的其他途径
磷脂的稳定性受pH值和温度的影响较大，只 有在pH值为5.2时，磷脂乳化层最稳定，偏酸 偏碱条件下，易水解以溶血磷脂乳状液形式 存在 。 在乳剂注射液生产工艺中重要的一步为高压 灭菌，因而极有可能在生产过程中就有部分 磷脂转变为溶血磷脂，从而使乳剂注射液中 溶血磷脂的指标超过正常值
磷脂结构式
磷脂酶A1
O
磷脂酶D
R1
R2
C
C O
O O
CH2 CH CH2 O
O P OH
CH2CH2N+ (CH3) 3 PC
X
CH2CH2N+H3 PE
磷脂酶A2
磷脂酶的分布
磷脂酶A1 自然界分布广泛，主要存在于细胞的溶酶体内，此外蛇毒及 某些微生物中亦有，可有催化甘油磷脂的第1位酯键断裂，产 物为脂肪酸和溶血磷脂2 磷脂酶A2 普遍存在于动物各组织细胞膜及线粒体膜，能使甘油磷脂分 子中第2位酯键水解，产物为溶血磷脂1及其产物脂肪酸和甘油
第三节 讨论与结论
综上所述，由于溶血磷脂的强致溶血性和对机体潜在的损害， 在制备注射用乳剂时对产品进行“溶血”等安全性指标的检 测显得尤为重要，中国国家药典委员会在网站发布国药典化 发〔 2007 〕 4 号 “注射剂质量标准提高工作会议纪要” （2007.1.10），公布的首批拟提高质量标准的注射液品种 中榄香烯注射液亦被要求增加“其他（溶血与凝聚、异常毒 性、过敏试验、有关物质）”等的检测项目，标志着我国药 监部门对该产品存在溶血风险的重视。中华人民共和国药典 附录I B关于注射剂检查项下未见溶血磷脂的检查项目及检查 法，因此为提升注射乳剂的安全性、有效性、稳定性及使用 依从性，乳状液型注射液药品生产厂家应重视溶血磷脂项目 的检测。
溶血磷脂酸对胃癌细胞DNA复制起始的影响及其分子机理研究
内蒙古大学硕士学位论文溶血磷脂酸对胃癌细胞DNA复制起始的影响及其分子机理研究摘要溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)是结构最简单的活性磷脂小分子，能够通过结合其特异性受体，引发特定的信号级联反应，从而涉及众多生物学行为，比如参与细胞增殖、迁移、凋亡等过程。
而LPA的生成、受体表达和信号传导途径如果发生异常，可能会诱发某些疾病，甚至是有助于癌症的发生、发展和转移，但对于LPA调控肿瘤细胞DNA复制起始的研究还未见相关报道。
本文研究发现，LPA能够诱导胃癌细胞系MKN45和BGC-803中双能蛋白(Geminin)蛋白质水平的上调，而双能蛋白的删除会诱导DNA的重复制，这些现象并未在胃正常上皮细胞GES-1中观察到，说明这些变化具有肿瘤细胞特异性。
利用RNAi技术和抑制剂处理技术阻断信号通路中相关因子的生物学活性，我们发现LPA特异性结合LPA受体3(LPA receptor3,LPAR3)，通过基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)反式激活表皮生长因子受体(E pidermal G rowth F actor R eceptor,EG FR)，在S期增加双能蛋白的表达量;同时LPA刺激可以在短时间内介导去泛素化酶3(de-ubiquitinating enzymes3,DUB3)表达量上升，抑制双能蛋白的泛素化降解增强其稳定性，进而对胃癌细胞的DNA复制起始进行正调控。
我们的研究是对肿瘤微环境中LPA作用功能以及肿瘤细胞DNA复制起始调控机制的重要补充，为癌症的治疗提供潜在的靶点。
关键词：溶血磷脂酸；胃癌细胞；DNA复制起始；双能蛋白；调控机制溶血磷脂酸对胃癌细胞DNA复制起始的影响及其分子机理研究THE EFFECTS AND MOLECULAR MECHANISM OF LYSOPHOSPHATIDIC ACID IN GASTRIC CANCER CELL DNAREPLICATION INITIATIONABSTRACTLysophosphatidic acid(LPA)is one of the simplest active phospholipid molecules.Binding to its receptors on the cell surface,LPA initiates various intracellular signal cascades,involving in numerous biological processes,such as cell proliferation,migration,and apoptosis.If abnormalities occur in the processes of LPA production,receptor expression or signal transduction,it may induce certain diseases and even contribute to the occurrence,development and metastasis of cancer. However,whether the initiation of DNA replication is regulated by LPA have not yet been investigated.We found that LPA specifically up-regulated of Geminin expression in gastric cancer cell lines, and that the deletion of Geminin protein induced DNA re-replication in gastric cancer cell lines. Nither of these phenomenon has been observed in normal gastric epithelial cells,indicating these phenomenon are restricted to tumor ing RNAi technology or inhibitor to block the biological activity of related factors in the signaling pathway,we found that LPA acts through LPAR3and downstream coupled MMPs signaling to trans-activate EGFR,increasing the expression level of Geminin in S phase.On the other hand,LPA stimulation induced the up-regulation of de-ubiquitinating enzyme3(DUB3)in a short time and inhibited the ubiquitination degradation of Geminin to enhance Geminin stability and positively regulate the DNA replication initiation in gastric cancer cells.Our research is an important supplement to the function of LPA in the tumor microenvironment and the initial regulatory mechanism of tumor cell DNA replication,providing a potential target for the treatment of gastric cancer.内蒙古大学硕士学位论文KEYWOEDS:lysophosphatidic acid;gastric cancer cell;DNA replication initiation;Geminin;regulatory mechanism溶血磷脂酸对胃癌细胞DNA复制起始的影响及其分子机理研究目录符号说明 (IX)第一章溶血磷脂酸研究进展（文献综述） (1)1.1溶血磷脂酸的生物学特性 (1)1.1.1结构 (1)1.1.2分布 (1)1.2溶血磷脂酸的合成 (2)1.2.1胞内合成途径 (3)1.2.2胞外合成途径 (3)1.3溶血磷脂酸的转运 (4)1.4溶血磷脂酸受体 (5)1.4.1LPAR1 (6)1.4.2LPAR2 (7)1.4.3LPAR3 (8)1.4.4LPAR4 (8)1.4.5LPAR5 (9)1.4.6LPAR6 (9)1.5溶血磷脂酸的生物学作用 (10)1.6溶血磷脂酸的代谢降解 (10)1.7溶血磷脂酸的激动剂和拮抗剂 (11)1.8溶血磷脂酸与癌症 (15)1.9实验总体设想 (16)第二章溶血磷脂酸对胃癌细胞DNA复制起始的影响及分子机理研究 (18)2.1引言 (18)2.2实验材料 (20)2.2.1细胞材料 (20)2.2.2主要试剂与药品 (20)2.2.3主要仪器设备 (20)2.3实验方法 (21)内蒙古大学硕士学位论文2.3.1细胞培养 (21)2.3.1.1培养基配制 (21)2.3.1.2细胞复苏 (21)2.3.1.3细胞传代/铺板 (21)2.3.1.4细胞冻存 (21)2.3.2LPA处理 (22)2.3.3转染实验 (22)2.3.4抑制剂实验 (22)2.3.5免疫荧光实验(Immunofluorescence,IF) (23)2.3.6mRNA水平表达检测 (24)2.3.6.1总RNA提取 (24)2.3.6.2cDNA一链反转录 (24)2.3.6.3qPCR (25)2.3.7蛋白免疫印迹反应(Western blot) (26)2.3.8免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP) (27)2.3.9流式细胞术(Flow cytometry,FCM) (28)2.4显著性分析 (28)2.5结果与分析 (28)2.5.1TCGA和HPA公共数据库中双能蛋白表达分析 (28)2.5.1.1双能蛋白表达与癌症类型相关性分析 (29)2.5.1.2双能蛋白在癌症中的突变分析 (29)2.5.2双能蛋白的敲除诱导胃癌细胞MKN45和BGC-803的DNA重复制 (32)2.5.3LPA调控双能蛋白的稳定性及其细胞定位 (37)2.5.3.1LPA能够上调双能蛋白的蛋白质水平 (37)2.5.3.2LPA不影响双能蛋白的mRNA转录 (39)2.5.3.3LPA通过去泛素化酶DUB3调控双能蛋白的稳定性 (40)2.5.3.4培养基添加物BSA不影响双能蛋白的表达 (41)2.5.3.5LPA能够促进胃癌细胞中双能蛋白的入核 (41)2.5.4LPA调控胃癌细胞DNA复制起始的信号通路 (44)溶血磷脂酸对胃癌细胞DNA复制起始的影响及其分子机理研究2.5.4.1LPA能够影响胃癌细胞的DNA复制起始 (44)2.5.4.2胃癌细胞MKN45和BGC-803中LPAR1-6的表达 (46)2.5.4.3LPA通过LPAR3调控DNA复制起始 (47)2.5.4.4LPA能够反式激活EGFR (51)2.5.4.5LPA通过反式激活EGFR来调节DNA复制起始 (52)2.5.4.6LPA通过MMPs反式激活EGFR (55)2.5.4.7LPA通过EGFR介导的DNA复制起始需要MMPs的参与 (56)2.5.4.8LPA调控DNA复制起始需要PI3K/mTOR的参与 (59)2.6讨论 (64)结论 (66)参考文献 (68)致谢 (76)符号说明英文缩写英文全称中文名称LPA Lysophosphatidic acid溶血磷脂酸LPAR Lysophosphatidic acid receptor溶血磷脂酸受体siRNA Small interfering RNA小干扰RNA mRNA Message ribonucleic acids信使核糖核酸RNAi RNA interference RNA干扰FBS Fetal bovine serum胎牛血清PBS Phosphate buffered saline磷酸盐缓冲液cDNA Complementary deoxyribonucleic acid互补脱氧核糖核苷酸RNase A Ribonuclease A核糖核酸酶AqPCR Real-time Quantitaive reverse transcriptionpolymerase Chain Reaction实时定量逆转录聚合酶链式反应PCR Polymerase Chain Reaction聚合酶链式反应MMPs Matrix metalloproteinases基质金属蛋白酶EGFR Epidermal growth factor receptor表皮生长因子受体PI3K Phosphoinositide3-kinase磷酸肌醇3-激酶mTOR Mammalian target of rapamycin哺乳动物雷帕霉素靶向基因ERK Extracellular regulated protein kinases胞外调节蛋白激酶DAPI4',6-diamidino-2-phenylindole4',6-二脒基-2-苯基吲哚PI Propidine iodide碘化丙啶GPCR Guanosine-binding Protein Coupled Receptor G蛋白偶联受体DMSO Dimethyl sulfoxide二甲基亚飒TCGA The Cancer Genome Atlas癌症和肿瘤基因图谱HPA The Human Protein Atlas人类蛋白质图谱MAPK Mitogen-activated protein kinase丝裂原活化蛋白激酶LPC Lysophosphatidylcholine溶血磷脂酰胆碱第一章溶血磷脂酸研究进展（文献综述）1.1溶血磷脂酸的生物学特性溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid,LPA)属于溶血磷脂家族，是结构最简单的活性磷脂小分子，分子量430-480Da[1]。
溶血磷脂的制备及其性能研究
溶血磷脂的制备及其性能研究
周家春;周怀;徐玉佩
【期刊名称】《中国食品添加剂》
【年(卷),期】2000(000)002
【摘要】溶血磷脂可通过磷脂酶A2的催化而获得.酶浓度、钙离子浓度、温度和pH对溶血磷脂转化率都有影响.对溶血磷脂性能的研究表明,溶血磷脂的乳化能力、乳化液在高温和低温下、在不同pH条件下的稳定性都明显高于普通磷脂,并且具
有较强的广谱抗菌能力.
【总页数】4页(P54-57)
【作者】周家春;周怀;徐玉佩
【作者单位】华东理工大学生物工程学院,上海,200237;华东理工大学生物工程学院,上海,200237;华东理工大学生物工程学院,上海,200237
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.溶血磷脂的制备及其性能研究 [J], 周家春;周怀;等
2.溶血磷脂的制备、分离、检测及应用研究进展 [J], 李招;谷克仁;张海臣;潘丽;康
世宗
3.水相体系酶法制备溶血磷脂酰乙醇胺研究 [J], 张薇薇;纵伟;张康逸
4.有机相酶促粉末磷脂制备溶血磷脂的研究 [J], 胡铭畔;张东杰;张爱武;鹿保鑫;李
靖元;怀宝东
5.溶血磷脂制备含沙棘油微乳液的研究 [J], 孙万成
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2.1.由磷脂酶A合成LPL 2.1.由磷脂酶A合成LPL 由磷脂酶 • 磷脂酶A是根据他们作用于天然磷脂的 磷脂酶A 位点命名的。磷脂酶A1 A1可以催化水解 位点命名的。磷脂酶A1可以催化水解 Sn- 位的酰基从而得到1 LPL， Sn-1位的酰基从而得到1-LPL，磷脂酶 A2可以催化水解Sn可以催化水解Sn A2可以催化水解Sn-2位的酰基从而得到 2-LPL.
Review
Synthesis of Lysophospholipids
Paola D’Arrigo 1,2,* and Stefano Servi 1,2
赵艳艳
• Public in Molecules 2010, 15, 13541377 • Monthly • IF: 1.99(2011)
摘要 • 溶血磷脂对炎症、生殖系统、血管生成、 溶血磷脂对炎症、生殖系统、血管生成、 动脉粥样硬化和神经系统具有调节作用。 动脉粥样硬化和神经系统具有调节作用。 本综述主要讲述化学法和酶法合成溶血 磷脂的路线。 磷脂的路线。 • 使用不同的酶如磷脂酶A1（PLA1），A2 使用不同的酶如磷脂酶A1（PLA1），A2 A1 ）， PLA2） 磷脂酶D PLD） （PLA2）,磷脂酶D（PLD）可以水解得到 溶血磷脂， 溶血磷脂，可以酶法工艺与化学合成相 耦合得到溶血磷脂， 耦合得到溶血磷脂，也可以由甘油衍生 物化学法合成溶血磷脂。 物化学法合成溶血磷脂。
2.1.1.由磷脂酶A1和脂肪酶合成 2.1.1.由磷脂酶A1和脂肪酶合成 由磷脂酶A1 • 磷脂酶A1可以催化水解Sn-1位的酰基从 磷脂酶A1可以催化水解SnA1可以催化水解Sn 而得到1 LPL，但是有一些酶在催化PL 而得到1-LPL，但是有一些酶在催化PL 的过程中没有得到充分的利用。 的过程中没有得到充分的利用。根据脂 肪酶的位切特点以及脂肪酶比磷脂酶A1 肪酶的位切特点以及脂肪酶比磷脂酶A1 容易制备的原理， 容易制备的原理，选择脂肪酶和磷脂酶 A1交替使用制备溶血磷脂 交替使用制备溶血磷脂。 A1交替使用制备溶血磷脂。
缩写： 缩写： • PL: 磷脂 • LPL:溶血磷脂 LPL:溶血磷脂 • GPC: 甘油磷酸胆碱 • LPA: 溶血磷脂酸 • LPC:溶血磷脂酰胆 LPC:溶血磷脂酰胆 碱
1.化学合成 1.化学合成
1.1.由 1.1.由D-甘露醇合成 • D-甘露醇是一种光学活性物质，可以通过几个步骤反应转化到LPLs。 甘露醇是一种光学活性物质，可以通过几个步骤反应转化到LPLs
谢谢！！
2.酶法合成LPL 2.酶法合成LPL 酶法合成
• 相对于化学合成，酶法合成LPLs有很多优点。 相对于化学合成，酶法合成LPLs有很多优点。 LPLs有很多优点 • 1.选择具有选择位点的酶 1.选择具有选择位点的酶 • 2.减少了有毒有害化学试剂的使用 2.减少了有毒有害化学试剂的使用 • 3.产品容易分离纯化 3.产品容易分离纯化
1.4.通过P 1.4.通过P -硝基苯甘油合成 通过
• 通过P -硝基苯甘油合成2,3 - O -异亚丙基- D -甘油 通过P 硝基苯甘油合成2,3 异亚丙基最终合成LPA LPC。 LPA和 酸甲酯 ，最终合成LPA和LPC。
LPC
LPA
1.5.由 1.5.由GPC合成 合成
• GPC和天然卵磷脂具有相同的手性，是合成LPC的理想初始 GPC和天然卵磷脂具有相同的手性，是合成LPC的理想初始 和天然卵磷脂具有相同的手性 LPC 物质。由于GPC是水溶性物质，能溶于低级醇如甲醇中， GPC是水溶性物质 物质。由于GPC是水溶性物质，能溶于低级醇如甲醇中，在 有机溶剂中的溶解度低， 有机溶剂中的溶解度低，这一特点制约了其在合成中的应 需要由锡作为介质合成2 LPC。 用。需要由锡作为介质合成2-LPC。
2.1.2.由磷脂酶A2合成 2.1.2.由磷脂酶A2合成 由磷脂酶A2 • 磷脂酶A2可以水解PC得到2-LPC。 磷脂酶可以水解PC得到2 LPC。 A2可以水解PC得到 • 磷脂酶A2广泛存在于蜜蜂、蛇以及哺乳 磷脂酶A2广泛存在于蜜蜂、 A2广泛存在于蜜蜂 动物体内，它能够作用于Sn2位点， Sn2位点 动物体内，它能够作用于Sn2位点，水 解酰基，但是不能够使酰基转移。 解酰基，但是不能够使酰基转移。
3.总结 3.总结
• 合成纯的LPLs需要选择合适的起始物质、 合成纯的LPLs需要选择合适的起始物质、 LPLs需要选择合适的起始物质 保护活泼基团不受影响。 GPC从天然磷 保护活泼基团不受影响。将GPC从天然磷 脂中分离出来， 脂中分离出来，然后利用不同的磷脂酶 进行水解， 进行水解，是的制备纯的溶血磷脂最好 的方法。 的方法。
1.2.由缩水甘油合成 1.2.由缩水甘油合成 纯的对应异构体缩水甘油， 纯的对应异构体缩水甘油，通过缩水甘油的衍生物的亲核开 合成LPLs LPLs. 环，合成LPLs
• 1.3.由甘油酸合成 1.3.由甘油酸合成 • 该方法通过甘油酸定向合成LPC。 该方法通过甘油酸定向合成LPC。 LPC
2.1.3.由磷脂酶A1、磷脂酶A2和脂肪酶合成 2.1.3.由磷脂酶A1、磷脂酶A2和脂肪酶合成 由磷脂酶A1 A2
• 另一种方法是将天然磷脂通过脂肪酸酯化 成GPC，然后酰基化成为PC，通过磷脂酶 GPC，然后酰基化成为PC， PC A2切割 得到2 切割， A2切割，得到2-LPC.
2.2.由磷脂酶D 2.2.由磷脂酶D得到溶血磷脂 由磷脂酶 • 磷脂酶D广泛存在于自然界，可以水解天然磷 磷脂酶D广泛存在于自然界， 脂得到磷脂酸和胆碱。 脂得到磷脂酸和胆碱。