流式细胞术彩色图谱(学习版)4a

图4-8-42 B系恶性淋巴瘤患者化疗中骨髓的细胞凋亡
（巨大细胞凋亡峰，20.23 %；伴异倍体）
③体腔液细胞凋亡检测
图4-8-43 1例胃恶性淋巴瘤合并白血病患者化疗及放疗后脑脊液细胞的凋亡
（较小细胞凋亡峰，12.72 %；伴异倍体）
图4-8-44 1例卵巢恶性肿瘤患者腹水细胞的凋亡
（较大细胞凋亡峰，16.55 %；伴异倍体）
④转移淋巴结的细胞凋亡检测
图4-8-45 1例食管中段癌患者食管旁转移淋巴结的细胞凋亡
（较小细胞凋亡峰，2.83 %；伴异倍体)
⑤癌组织的细胞凋亡
图4-8-46 1例胃癌患者化疗后癌组织细胞的凋亡
（明显细胞凋亡峰，13.44%）
图4-8-47 1例左乳腺癌患者癌组织细胞的凋亡
（明显凋亡细胞峰，4.80 %；伴异倍体）
⑥培养细胞的细胞凋亡
图4-8-48 家兔血管内皮细胞在药物浓度5.0μU / ml培养3h后的凋亡
（小细胞凋亡峰，21.43%）
图4-8-49 家兔血管内皮细胞在药物浓度12.5μU / ml培养3h后的凋亡
（较大细胞凋亡峰，46.23%）
图4-8-50 家兔血管内皮细胞在药物浓度20μU / ml培养3h后的凋亡
（巨大细胞凋亡峰，63.70%）
图4-8-51 SGC-7901细胞（胃癌细胞株）在呋尿嘧啶处理前的细胞凋亡
（小凋亡细胞峰，1.05%）
图4-8-52 SGC-7901细胞（胃癌细胞株）在呋尿嘧啶处理后12h的细胞凋亡
（较大细胞凋亡峰，6.55%）
图4-8-53 SGC-7901细胞（胃癌细胞株）在呋尿嘧啶处理后24h的细胞凋亡
（大细胞凋谢亡峰，37.49%）
3、细胞分化的检测
（1）细胞角蛋白抗原（CK）
1例肺癌患者肿瘤组织
CK+细胞为32.16%
1例胃癌复发患者，肿瘤组织
CK+细胞为64.32%
1例肝癌骨转移患者，肿瘤组织
CK+细胞为98.66%
图4-8-60 细胞角蛋白（CK）在不同肿瘤组织细胞中的表达
（FL1：CK-FITC）
（2）癌胚抗原（CEA,CD66e）
组
1例肺炎患者炎症灶穿剌细胞中1例卵巢囊肿患者卵巢组织CEA+细胞为7.23% CEA+细胞为4.26%
组
1例大肠癌患者肿瘤组织1例食管癌患者肿瘤组织
CEA+细胞为39.72% CEA+细胞为37.43%
癌
组
1例胃癌患者肿瘤组织1例大肠癌患者肿瘤组织
CEA+细胞为49.39% CEA+细胞为87.76%
图4-8-61 各种癌组织中癌胚抗原（CEA+或CD66e+）的表达
（FL1：CD66e-FITC）
（九）机体免疫功能的检测
图4-9-1 外周血免疫细胞间相互关系图
图4-9-2 细胞免疫反应原理示意图
(细胞表面抗原与带荧光标记的抗体特异性结合，形成荧光抗原抗体复合物，用流式细胞仪检测细胞的荧光强度和荧光标记细胞相对数，从而判断免疫细胞的数量和绝对数)
图4-9-3 外周血免疫细胞的散射光及各种细胞的分布
（红色细胞群:淋巴细胞；绿色细胞群：单核细胞；桃红色细胞群：粒细胞）
图4-9-4 人类外周血细胞的流式细胞术检测参数一览表
1、外周血T、B、NK细胞的同步检测法
散射光图右限：CD45+细胞
左上限：B细胞左上限：NK细胞；右限：T细胞
右限：T细胞；右上限：Ts细胞右限：Th细胞
图4-9-5 外周血T、B、NK细胞的六色免疫表型分析
使用PAINT A GATE软件进行人外周血6色荧光分析：图内呈灰色的点表示未染色细胞。

T辅助细胞（Th）：CD3+/CD8-/CD4+/CD19- 28.7% (紫色) T抑制/细胞毒T细胞(Ts)： CD3+/CD8+/CD4-/CD19- 13.6% （红色）B细胞(BC)：CD3-/CD8-/CD4-/CD19+ 19.5% （蓝色）T细胞(TC)：CD3+/CD16+56弱+/CD8+/CD19- 11.3% （黄色）NK细胞(NKC)：CD3-/CD16+56+/CD8弱+/CD19- 16.5% （绿色）
2、外周血T细胞的检测
图4-9-6 T淋巴细胞发育分化过程中膜表面抗原的表达
T淋巴细胞发育分化过程与细胞膜表面抗原表达（各期细胞表面标志顺序：从高到低）：Ⅰ期——CD34+、CD7+、CD10+、CD2+、CD1a+、CD45+、CD4/8+
Ⅱ期——CD4/8+、CD45+、CD1a+、CD7+、CD10+
Ⅲ期——CD4/8+、CD1a+、CD45+、CD2+、CD3+、CD10+、CD7+
Ⅳ期——CD4/8+、CD3+、CD2+、CD7+、CD45+
图4-9-7 外周血细胞散射光图图4-9-8 外周血成熟T细胞FSC：前向角散射，SSC：侧向角散射“门”内，1 例肺腺癌患者CD3+细胞为
64.32%
图4-9-9 外周血辅助性T细胞(右上限) 图4-9-10 外周血抑制性T细胞（右上限）
1 例肺腺癌患者外周血 1 例肺腺癌患者外周血
CD3+/CD4+（Th）细胞为33.57% CD3+/CD8+（Ts）细胞为54.31%
外周血成熟T细胞
右下限：CD3+/CD19-细胞为80.65%
图4-9-11 用荧光标记双参数检测外周血成熟T细胞（CD3+/CD19-）
外周血T辅助细胞（Th）
右上限：CD3+/CD4+细胞为45.65%
图4-9-12 用荧光标记双参数检测外周血细胞T辅助细胞
外周血T抑制细胞（Ts）
右上限：CD3+/CD8+细胞为19.00%
图4-9-13 用荧光标记双参数检测外周血T抑制细胞
外周血细胞散射光图外周血成熟T细胞横座标：SSC；纵座标：FSC CD3+细胞为81.36%
外周血辅助性T细胞(Th) 外周血抑制性T细胞(Ts) CD4+细胞为45.56% CD8+细胞为36.96%
图4-9-14 用荧光标记单参数检测外周血CD3+、CD4+和CD8+细胞
1例正常人外周血T细胞亚群的荧光标记单参数分析
（4）外周血T细胞亚群的检测分析
① CD4+/CD29+细胞
1例硬膜恶性淋巴瘤患者外周血
CD4+/CD29+细胞为3.12%（右上
限）
1例NHL患者外周血
CD4+/CD29+细胞为13.72% （右
上限）
1例肺癌患者外周血CD4+/CD29+
细胞为23.18%（右上限）
图4-9-15 各种肿瘤患者外周血T辅助细胞诱导亚群（CD4+/CD29+）的表达
(FL1：CD29-PE；FL2：CD4-FITC)
② D4+/CD45-RA+细胞
1例右上肺鳞癌患者外周血
CD4+/CD45-RA +细胞为0.32%
1例肺癌化疗、放疗后患者外周血
CD4+/CD45-RA +细胞为18.42%
1例右腮腺恶性淋巴瘤放疗、化疗
后外周血CD4+/CDA45-R +细胞
为24.39%
图4-9-16 不同肿瘤患者外周血T抑制细胞诱导亚群（CD4+/CD45-RA+）的表达
（FL1：CD4-TITC；FL2：CD45-RA-PE）
③ CD8+/CD28+细胞
CD8-/CD28+细胞CD8+/CD28+细胞
（(细胞毒T细胞）
CD8-CD28-细胞CD8+CD28-细胞
（抑制性T细胞）图4-9-17 CD8-FITC/CD28-PE单抗双荧光标记染色的表达方法
染色方法：CD8+/CD28+——细胞毒T细胞
CD8+/CD28-——抑制性T细胞
图4-9-18 外周血细胞毒T细胞（TCL，CD8+/CD28+）的检测
（FL1——CD8-FITC；FL2——CD28-PE）
1例正常人外周血CD8+/CD28+细胞为9.54%，CD8+/CD28-为21. 68%
对照样品1例NHL Ⅲa期患者外周血
CD8+/CD28+细胞为0.72% CD8+/C28+细胞为10.15%
1例右肺癌手术后患者外周血1例乳腺癌患者外周血
CD8+/C28+细胞为21.45% CD8+/C28+细胞为6.25%
1例胃腺癌术、化后转移患者外周血恶性淋巴瘤患者外周血CD8+/C28+细胞为14.98% CD8+/C28+细胞为22.65%
图4-9-19 各种肿瘤患者外周血细胞毒Ｔ细胞(CTL，CD8+/CD28+)表达率
④外周血T活性细胞的检测
图4-9-20 T细胞活化因子的时效关系
活性T 细胞（CD3-/HLA-DR+）（CD3+/HLA-DR+）
静止T细胞（CD3-/HLA-DR-）（CD3+/HLA-DR-）
图4-9-21 外周血T活性、静止细胞的检测
（FL1：CD3-FITC；FL2：HLA-DR-PE）
1例正常人外周血细胞CD3/HLA-DR）检测
1例NHL Ⅲb期患者外周血T活性
细胞为0.32%
1例右上肺癌患者外周血T活性细
胞为6.41%
NHL患者外周血干细胞移植采集
后外周血T活性细胞为23.21% 图4-9-22 不同肿瘤患者外周血活性T细胞（CD3+/HLA-DR+）的表达
图4-9-23 不同浓度PMA对T细胞的激活（CD69+细胞）
图4-9-24 剌激剂作用4小时后CD3+细胞内及细胞表面CD69的表达
（空心细胞峰为剌激后CD69+表达峰；%——CD69+细胞的百分比；GM——CD69+细胞
的绝对数。

）
剌激剂：图A：PMA-ION 图D：PMA-ION
图B：PMA/ION+BFA 图E：PMA/ION+BFA
图C：PMA/ION+MN 图F：PMA/ION+MN
CD45-RA-/CD45-RO+细胞为66.4%，CD45-RA-/CD45-RO+细胞为68.5%，CD45RA+/CD45RO-细胞（幼稚T细胞） CD45RA+/CD45RO-细胞（幼稚T细胞）为30.3% 为13.3%
图4-9-25 CD4+淋巴细胞CD45-RO、CD45-RA的表达
MS移植后1个月MS移植后5个月CD45RO-/CD45RA+细胞为3.02%， CD45RO-/CD45RA+细胞为39.5%
CD45RA-/CD45RO+细胞为40.1%； CD45RA-/CD45RO+细胞为55.5% 图4-9-26 造血干细胞移植后患者外周血CD45RO/CD45RA的检测分析
正常对照CD154+细胞为0.27% SLE患者CD154+细胞为2.28% 图4-9-27 正常人、红斑狼疮（SLE）患者外周血活化CD4细胞（CD154+）的检测
2、外周血B淋巴细胞（CD19+、CD20+）的检测
图4-9-28 正常B细胞分化成熟过程中各种抗原表达示意图
B细胞发育成熟过程与细胞表面标志：
（每期细胞表面标志表达顺序：从高到低）
Ⅰ期——CD34+、CD45+、CD19+、CD23+、TDT+
Ⅱ期——CD10+、CD45+、CD19+、CD20+、CD22+、
Ⅲ期——CD20+、CD45+、FMC7+、CD19+、CD22+、CD10
Ⅳ期——CD20+、CD45+、FMC7+、CD19+、CD23+
1例肝癌肺、骨、脑多处转移患者外周血CD19+细胞为0.21%（左：散点图，右：直方图）
1例胰头癌肺转移患者介入化疗后外周血CD19+细胞为11.43%（左：散点图，右：直方图）
1例胃癌患者手术后外周血D19+细胞为5.86%（左：散点图，右：直方图）
1例淋巴瘤合并白血病患者化疗后外周血D19+细胞为54.26%（左：散点图，右：直方图）
图4-9-29 外周血B 细胞（CD19+）不同表达水平和不同表达方式的比较
（FL1：CD19-FITC ）
外周血B 细胞（CD20+）的同型对照标本（左：散点图，右：直方图）
1例B 系恶性淋巴瘤、颈淋巴结侵犯患者外周血B 细胞（CD20+）表达率为39.97%
（左：散点图，右：直方图）
图4-9-30 外周血B 细胞（CD20）的检测及其不同表达方式
（FL1：CD20-PE ）
（2）活性B细胞检测
1例乳腺癌手术后转移化疗后外周
血CD5+CD19+细胞为0.42%
1例正常人外周血CD5+/CD19+细
胞为7.43%
1例急性淋巴细胞白血病患者三年
后复发时外周血CD5+/CD19+细胞
为52.21%
图4-9-31 不同肿瘤患者外周血活性B细胞（CD5+/CD19+细胞）的表达
（FL1：CD19-FITC；FL2：CD5-PE）
正常人SLE患者
图4-9-32 正常对照和SLE患者外周血CD40+细胞的表达
（CD40抗原主要分布于正常人各种发育阶段的B细胞和肿瘤化的B细胞表面）
B细胞的功能细胞——浆细胞（CD19+/CD38+）活性B淋巴细胞（CD20+/CD5+）（右上限：浆细胞为1.80%）（右上限：活性B细胞为69.50%）
图4-9-33 外周血浆细胞和活化B淋巴细胞的检测
3、外周血NK细胞的检测
1例乳腺癌患者外周血
CD3-/CD（16+56）+细胞为
14.43%
图4-9-34 荧光标记双参数检测外周血NK细胞（左上限）
1例胃癌患者手术后外周血
CD（16+56）+细胞为30.42%
1例肺癌患者化疗后外周血
细胞CD（16+56）+细胞为
52.46%
图4-9-35 采用外周血CD(16+56)+细胞检测NK细胞的表达水平
（FL2：CD（16+56）-PE）
1例食管癌患者外周血
CD56+细胞为21. 43%
图4-9-36 采用外周血CD56+细胞检测NK细胞表达水平
（FL2：CD56-PE）
1 例乳腺癌淋巴结转移患者
外周血CD16+细胞为1.84% 图4-9-37 采用外周血CD16+细胞检测NK细胞的表达水平
（FL1——CD16-FITC）
4、某些血细胞的细胞表面标志的表达
外周血细胞散射光图同型对照散点图
CD3+细胞直方图外周血CD3+/CD8+细胞散点图图4-9-38 免疫检测的散射光图、同型对照、CD3+细胞直方图和CD3+/CD8+细胞散点图。