食品安全国家标准 食品中栀子黄的测定(编制说明)

《食品安全国家标准食品中栀子黄的测定》（征求意见稿）

编制说明

一、标准起草的基本情况（包括简要的起草过程、主要起草单位、起草人等）

本标准对《食品安全国家标准食品中栀子黄的测定（GB/T5009.149-2003）》进行了修订，使修订后的标准满足目前GB 2760-2011对栀子黄的使用量要求。主要起草单位为中国检验检疫科学研究院，起草人为凌云、孙利、邢仕歌、姚美伊、雍炜、储晓刚、张峰。标准起草小组查阅大量标准、文献资料，开展了实验条件优化、方法线性范围、检出限、灵敏度、准确度、重现性等技术内容的确定研究。

二、标准的重要内容及主要修改情况

标准规定了食品中栀子黄的高效液相色谱测定方法。原有标准中第一法，高效液相色谱法，用栀子苷的含量来表征栀子黄，与GB 7912-2010《食品添加剂栀子黄》中规定栀子黄的主要成分为藏花酸和藏花素，栀子苷为杂质成分，相悖；第二法薄层色谱为定性方法，亦不能满足GB 2760的使用量要求。因此，本标准选用栀子黄中主要呈色成分——藏花素和藏花酸，代替原标准中栀子苷作为定量依据，建立了食品中栀子黄测定的高效液相色谱法，同时删除了第二法。同时扩大了标准的使用范围，满足GB 2760的法规要求。

检测波长的优化：对藏花素和藏花酸进行二极管阵列检测器的全波长扫描，结果显示藏花素和藏花酸分别在420-450nm有最大吸收，因此选择440nm为检测波长。

色谱柱的选择：根据现有标准和文献资料，分离栀子黄主要采用反相C18色谱柱，课题组对3种色谱柱进行了比较：SUPELCOSILTM C18、Symmetry C18、Extend-C18 3种色谱柱对栀子黄均有良好的分离效果。

流动相的选择：根据标准和相关文献报道，分离栀子黄流动相大多采用甲醇-水体系、乙腈-水体系，实验考察了甲醇-水体系、乙腈-水体系、乙腈-乙酸水体系。结果证明，甲醇-水体系与乙腈-水体系作为栀子黄的流动相都能实现良好的分离，没有明显差别。而在上述溶液中加酸后，栀子黄的色谱峰响应值明显增高。进一步实验不同比例乙腈-乙酸水对响应值的影响，确定以乙腈-0.0033%乙酸水为流动相。

提取条件的优化：

在GB/T5009.149-2003标准食品中栀子黄的测定中是以栀子苷为目标物质进行提取，本标准目标物质为藏花素和藏花酸。综合相关文献报道，课题组用水、甲醇、乙醇提取食品中的栀子黄色素，对提取效果进行对比。实验结果显示，用甲醇作为提取剂提取效果最好。

起草小组对标准的方法学指标进行了验证：

藏花素和藏花酸线性范围均为1.0~75.0mg/L，实际测定中可根据样品中其含量不同调整最佳的线性范围，现象关系良好，方法检出限（LOD）为2.0 mg/kg，方法定量限（LOQ）为6.0 mg/kg。在实验室内方法的准确度和精密度验证试验上，分别以饮料、面包、巧克力、熟肉为阴性样品，进行加标回收试验，藏花素的平均回收率为88.2~111%，RSD为0.899~4.70%（n=6），藏花酸的平均回收率为79.9~117% ，RSD为0.521~8.23%（n=6）。方法的回收率和精密度符合GB/T 27404-2008《实验室质量控制规范食品理化检测》的要求。

本方法适用性较强，覆盖样品种类较多，较前国标方法——GB/T 5009.149-2003准确度

高、选择性好，且前处理简单、速度快，检测结果更加准确。

三、国内国际相关标准情况

我国现有食品添加剂标准GB 7912-2010《食品添加剂栀子黄》规定了栀子黄产品的质量标准：藏花素和藏花素为栀子黄的主成分，栀子苷为杂质，而栀子黄的检测方法标准GB/T 5009.149-2003《食品中栀子黄的测定》中用栀子苷的含量来表征栀子黄显然是不准确的，本标准建立的食品中藏花素和藏花素的高效液相色谱法能够满足测定要求。GB 2760-2011《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中规定了栀子黄的使用要求：可用于11类加工食品，各类食品最大使用量要求为0.3~1.5g/kg不等，本标准扩大了原标准的适用范围，能够满足其要求。

栀子黄着色剂是我国和周边的亚洲国家，特别是日本广泛应用的天然食品着色剂。随着栀子黄的JECFA的认证，美国、英国、加拿大等欧美国家也逐渐将栀子黄色素用于食品染色。但国际上测定食品中栀子黄的标准方法尚没有一个确定的通用方法，建立的分析方法很少，目前主要是通过紫外可见分光光度法测定栀子黄的OD值（栀子苷的最大吸光值比栀子黄的最大吸光值即A238nm/A440nm）确定其质量，而成型的分析检测方法还没有。

四、其他需要在网上公开说明的事项

无。