补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识讲解
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之马矢奏春创作（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识, 通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的把持技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离, 熟悉干柱色谱的把持技术.3．掌握香豆素类化合物的检识方法.（二）主要化学成份的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实, 全国各地多有栽培.含有多种呋喃香豆素类成份, 主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成份, 具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯, 分子式C11H6O3, 分子量186.16.无色针状结晶（乙醇）, mp.189～190℃, 有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3, 分子量186.16.无色针状结晶, mp.137～138℃, 溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿, 微溶于水、乙醚, 难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4, 分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水）, mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮, 分子式C20H20O4, 分子量324.36.无色针状结晶, mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度年夜, 利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等, 并用活性炭吸附脱色, 再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性不同, 利用柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板, 为了下次筛分离条件, 铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献, 设计了石油醚：乙酸乙酯10：1, 石油醚：乙酸乙酯8：1, 石油醚：乙酸乙酯6：1, 石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比, 经过对Rf值的比力, 最终决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统.把醇提液减压浓缩至剩下20ml水左右.萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml, 用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离, 采纳湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对比品：补骨脂素对比品乙醇液异补骨脂素对比品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成份含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构, 具有内酯类成份的通性, 可用碱提酸沉法提取, 但因补骨脂种子中含有年夜量油脂和糖类成份, 易与碱水发生皂化反应和形成胶状物, 致使难以滤过, 降低收得率, 故选用50％乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精制品, 为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶, 两者含量近于1∶1, 但随药材品种、质量等分歧而有不同.在进行干柱色谱分离之前, 应先进行薄层色谱检查, 了解两者含量情况.因两者皆具有光敏作用, 均为有效成份, 故临床应用时, 不势必两者分开.。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳法创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素 补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳生创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识讲解
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
O O O OOO补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
CH3 H3CHOOHOHOOOHHOCH3H3C补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定
补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定摘要：补骨脂为中医治疗脾肾阳虚的传统补虚药物，其新型的生物活性已逐渐受到重视并被开发使用，同时对补骨脂所含活性成分的研究也逐步深入，为临床治疗提供新药物提供可靠依据。
本文就有关补骨脂的研究作一综述。
关键词：补骨脂异补骨脂结构提取分离结构鉴定中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，别名破故纸、黑故子、胡故子等，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。
在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。
据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。
补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分有着密切联系。
因此，近年来；国内外学者对补骨脂化学成分的提取分离及相关药理作用进行了多方面的研究，并取得一些新成果，为进一步开发利用补骨脂奠定了基础。
补骨脂的植物来源、品种、科属及分布补骨脂来源为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的果实。
属于补骨脂属，蝶形花科，约130种，分布于热带和亚热带地区，我国有补骨脂P.corylifoliaFranch.1种，产西南部，种子入药。
分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南。
临床应用和药理活性研究概况1药理作用研究进展1.1皮肤药理研究补骨脂素(PSO)口服后,增加皮肤对紫外线的敏感性,经UVA 照射,可与表皮角质层细胞的DNA形成光加合物,抑制DNA合成,减低表皮细胞的过速增生,其用于银屑病治疗的疗效已为临床所肯定。
PSO为一光敏感物质,PSO和8MOP均能促进皮肤黑色素的合成,并使之沉积于皮下。
95%乙醇的补骨脂提取物对酪氨酸酶有明显的激活作用,而酪氨酸酶是人体内黑素合成的关键酶,因此认为补骨脂系通过提高酪氨酸酶的活性使黑色素的生成速度和数量增加。
1.2抗癌活性研究有研究表明补骨脂具有抗癌活性,实验表明补骨脂素对KB细胞、Hela细胞、小鼠肉瘤、艾氏腹水癌等有抑制作用。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之老阳三干创作（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识,通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的把持技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离,熟悉干柱色谱的把持技术.3．掌握香豆素类化合物的检识方法.（二）主要化学成份的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实,全国各地多有栽培.含有多种呋喃香豆素类成份,主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成份,具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯,分子式C11H6O3,分子量186.16.无色针状结晶（乙醇）,mp.189～190℃,有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3,分子量186.16.无色针状结晶,mp.137～138℃,溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿,微溶于水、乙醚,难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4,分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水）,mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮,分子式C20H20O4,分子量324.36.无色针状结晶,mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度年夜,利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等,并用活性炭吸附脱色,再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性不同,利用柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板,为了下次筛分离条件,铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献,设计了石油醚：乙酸乙酯10：1,石油醚：乙酸乙酯8：1,石油醚：乙酸乙酯6：1,石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比,经过对Rf值的比力,最终决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统.把醇提液减压浓缩至剩下20ml水左右.萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml,用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离,采纳湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对比品：补骨脂素对比品乙醇液异补骨脂素对比品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成份含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构,具有内酯类成份的通性,可用碱提酸沉法提取,但因补骨脂种子中含有年夜量油脂和糖类成份,易与碱水发生皂化反应和形成胶状物,致使难以滤过,降低收得率,故选用50％乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精制品,为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶,两者含量近于1∶1,但随药材品种、质量等分歧而有不同.在进行干柱色谱分离之前,应先进行薄层色谱检查,了解两者含量情况.因两者皆具有光敏作用,均为有效成份,故临床应用时,不势必两者分开.。
从补骨脂中分离鉴定补骨脂素和异补骨脂素
从补骨脂中分离鉴定补骨脂素和异补骨脂素一、本文概述本文旨在详细阐述从补骨脂中分离和鉴定补骨脂素和异补骨脂素的过程。
补骨脂，作为一种传统中药材，具有广泛的应用价值，其中补骨脂素和异补骨脂素是其重要的活性成分。
本文首先介绍补骨脂的来源、化学成分及其药理作用，然后重点描述分离纯化补骨脂素和异补骨脂素的方法，包括提取、分离、纯化等步骤，并对每一步的操作原理和注意事项进行详细说明。
接着，本文将对分离得到的化合物进行结构鉴定，利用现代波谱学方法如核磁共振、质谱等对其结构进行确证。
本文还将对分离纯化过程中的问题以及可能的影响因素进行讨论，以期为补骨脂的深入研究和临床应用提供参考。
二、材料与方法本实验所采用的补骨脂原材料，经过严格筛选与鉴定，确保其品质与纯度满足实验需求。
实验中所用试剂均为分析纯，包括甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂，以及硅胶、氧化铝等层析材料。
实验所使用的主要仪器包括旋转蒸发仪、电子天平、高效液相色谱仪（HPLC）、紫外可见分光光度计等。
将补骨脂原料粉碎后，采用适宜的有机溶剂进行浸泡与提取，确保补骨脂素和异补骨脂素的有效溶出。
提取液经过浓缩后，得到初步的提取物。
采用硅胶柱层析、氧化铝柱层析等色谱分离技术，对提取物进行分离纯化。
通过不断调整洗脱剂的种类与比例，实现目标化合物的有效分离。
利用高效液相色谱法（HPLC）对分离得到的化合物进行定性定量分析，同时通过紫外可见分光光度计测定其光谱特性，与标准品进行对比，从而确定其化学结构。
实验数据采用Excel软件进行整理与统计，利用SPSS软件进行数据分析，以图表形式直观展示实验结果，并进行相应的讨论与分析。
通过上述材料与方法的系统运用，本实验旨在从补骨脂中成功分离并鉴定出补骨脂素和异补骨脂素，为后续的药理研究与应用提供有力支持。
三、结果与讨论经过一系列精细的提取和分离步骤，我们成功地从补骨脂中分离出了补骨脂素和异补骨脂素。
通过对比标准品，我们确认了这两种化合物的身份，并通过高效液相色谱（HPLC）和质谱（MS）等手段进行了精确的定量分析。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之杨若古兰创作（一）目的请求进修喷鼻豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验请求：1．把握用溶剂法提取喷鼻豆素类化合物的操纵技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操纵技术.3．把握喷鼻豆素类化合物的检识方法.（二）次要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培.含有多种呋喃喷鼻豆素类成分，次要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的次要无效成分，具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4，分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36.无色针状结晶，mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验道理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再根据补骨脂素和异补骨脂素的极性差别，利用柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的尺度品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献，设计了石油醚：乙酸乙酯10：1，石油醚：乙酸乙酯8：1，石油醚：乙酸乙酯6：1，石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比，经过对Rf值的比较，终极决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离零碎.把醇提液减压浓缩至剩下20ml水摆布.萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml，用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离，采取湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液睁开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及留意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和构成胶状物，导致难以滤过，降低收得率，故选用50％乙醇提取而不必碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精成品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶，两者含量近于1∶1，但随药材品种、质量等分歧而有差别.在进行干柱色谱分离之前，应进步前辈行薄层色谱检查，了解两者含量情况.因两者皆具有光敏感化，均为无效成分，故临床利用时，不势必两者分开.。
补骨脂
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取、分离和检识一、实验目的：在补骨脂药材中提取、分离并检识补骨脂素和异补骨脂素背景：中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。
在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。
据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。
补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分脂素和有着密切联系。
其活性成分中香豆素类化合物主要有呋喃香豆素类和拟雌内酯类两种，前者主要含补骨脂素、异补骨脂素等。
二、补骨脂素和异补骨脂素的化学结构与性质：1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
三、实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
四、实验内容检识鉴定1）.外观：两种方法得到的晶体都呈白色针晶，且在uV灯下显蓝色荧光。
2）.异羟肟酸铁反应：分别取上述晶体各少许，加乙醇1ml溶解．加6d盐酸羟胺的饱和乙醇液混匀后加人6dKoH的饱和乙醇液，水浴加热10rain，冷却，用5HC1使呈酸性(pH6左右)沿壁滴10FeCl3溶液30s后出现紫红色(反应阳性)。
3）mp：50%晶I：136．6～138．6℃50%晶II：162．8～163．8℃75%晶I：136．9～138．8℃75%晶II：l62．8～l64．0℃4）薄层色谱检识：薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）晾干，置254nmUV灯下观察，相同位置的斑点显相同颜色的荧光。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳史创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳科创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳歌谷创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识欧阳歌谷（2021.02.01）（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
中药化学实验指导—实验二 补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提讲解
实验二 补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
O O O OOO补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
CH 3H 3C HO OHO OH O O OHHOCH 3H 3C补骨脂乙素 补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用氧化铝干柱色谱予以分离。
（四）实验内容1.提取方法Ⅰ:见书方法Ⅱ:见书2.精制见书3.分离取色谱用中性氧化铝12g，装于直径1.0cm×28cm的干柱用色谱柱中。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之袁州冬雪创作（一）目标要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操纵技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操纵技术.3．掌握香豆素类化合物的检识方法.（二）主要化学成分的布局及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培.含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4，分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36.无色针状结晶，mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，操纵乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差别，操纵柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的尺度品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献，设计了石油醚：乙酸乙酯10：1，石油醚：乙酸乙酯8：1，石油醚：乙酸乙酯6：1，石油醚：乙酸乙酯4：1等几组活动相配比，颠末对Rf 值的比较，最终决议用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统.把醇提液减压稀释至剩下20ml水左右.萃取：稀释后的混旋液加蒸馏水至100ml，用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离，采取湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯布局，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和形成胶状物，致使难以滤过，降低收得率，故选用50％乙醇提取而不必碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精制品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶，二者含量近于1∶1，但随药材品种、质量等分歧而有差别.在停止干柱色谱分离之前，应先停止薄层色谱检查，懂得二者含量情况.因二者皆具有光敏作用，均为有效成分，故临床应用时，不势必二者分开.。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素战同补骨脂素的提与分散与检识之阳早格格创做（一）手段央供教习香豆素类化合物的提与分散及检识，通过真验央供：1．掌握用溶剂法提与香豆素类化合物的支配技能.2．通过补骨脂素战同补骨脂素的分散，认识搞柱色谱的支配技能.3．掌握香豆素类化合物的检识要领.（二）主要化教身分的结构及本量补骨脂为豆科动物补骨脂Psoralea corylifolia L.的搞燥老练果真，世界各天多有栽培.含有多种呋喃香豆素类身分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、同补骨脂内酯（同补骨脂素）战补骨脂次素等.其中补骨脂素战同补骨脂素为抗黑癜风的主要灵验身分，具备光敏本量.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥收性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于火、乙醚战石油醚.2.同补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于火、乙醚，易溶于热石油醚.补骨脂素同补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、同补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4，分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-火），mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36.无色针状结晶，mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）真验本理本真验根据补骨脂素战同补骨脂素等正在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提与补骨脂素及同补骨脂素等，并用活性冰吸附脱色，再依据补骨脂素战同补骨脂素的极性好别，利用柱色谱给予分散.（四）真验真量1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇热浸提与72h,24h,24h,屡屡用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板，为了下次筛分散条件，铺佳15块板.2：用补骨脂素战同补骨脂素的尺度品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分散条件.根据文件，安排了石油醚：乙酸乙酯10：1，石油醚：乙酸乙酯8：1，石油醚：乙酸乙酯6：1，石油醚：乙酸乙酯4：1等几组震动相配比，通过对于Rf值的比较，最后决断用石油醚：乙酸乙酯6：1动做硅胶柱色谱分散的分散系统.把醇提液减压浓缩至剩下20ml火安排.萃与：浓缩后的混旋液加蒸馏火至100ml，用乙酸乙酯萃与三次.3.柱色谱分散，采与干法拆柱搞法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液同补骨脂素乙醇液对于照品：补骨脂素对于照品乙醇液同补骨脂素对于照品乙醇液展启剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）隐色：紫中灯下瞅察荧光（五）真验证明及注意事项1．提与药材应是已炮造过的补骨脂种子,其补骨脂素战同补骨脂素等身分含量较下.2．补骨脂素战同补骨脂素含内酯结构，具备内酯类身分的通性，可用碱提酸重法提与，但是果补骨脂种子中含有洪量油脂战糖类身分，易与碱火爆收黑化反应战产死胶状物，以致易以滤过，落矮支得率，故采用50％乙醇提与而没有必碱溶酸重法提与.3．由补骨脂种子中提与所得的粗造品，为补骨脂素战同补骨脂素的混同物结晶，二者含量近于1∶1，但是随药材品种、品量平分歧而有好别.正在举止搞柱色谱分散之前，应先举止薄层色谱查看，相识二者含量情况.果二者皆具备光敏效率，均为灵验身分，故临床应用时，没有必然二者分启.。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离及鉴定
补骨脂中补骨脂素战同补骨脂素的提与分散及审定之阳早格格创做1结构及本量补骨脂素战同补骨脂素属香豆素类化合物.补骨脂素：（补骨脂内酯），C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥收性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于火，乙醚战石油醚.同补骨脂素：C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥收性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于火，乙醚；易溶于热石油醚.2 提与要领的采用用50%的乙醇浸提：称与补骨脂细粉50g，用500ml的乙醇热浸提与，过滤，火浴加热，回支乙醇，得浸膏.与浸膏置于烧瓶中，加甲醇50ml战适量活性冰，回流15min，趁热抽滤.浓缩滤液至小体积，搁置重淀，用甲醇淋洗重淀.与色谱用中性氧化铝40g，拆于曲径1.6cm*30cm的色谱柱中.与补骨脂细品甲醇液约1-2ml，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1：2）做洗脱剂，洗脱，每20ml为一溜份，各溜份回支溶剂后，用薄层板查看，战尺度品对于比，于紫中光灯下瞅察荧光与颜色.a呈色反应(1)同羟肟酸铁反应：与补骨脂素细品少量，置于试管中，加进7％盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2～3滴，于火浴上加热数分钟，热却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1～2滴，瞅察溶液颜色. (2)启环关环考查：与样品少许加密氢氧化钠溶液1～2m1，加热，瞅察局面；再加密盐酸试液几滴，瞅察所爆收局面.(3)荧光：与样品少许溶于氯仿中，用毛细管面于滤纸上，于紫中光灯下瞅察荧光与颜色.b薄层色谱审定薄层板：硅胶G-CMC-Na板.面样：补骨脂素细品乙醇液、搞柱色谱分得的二样品乙醇液、补骨脂素对于照品乙醇液及同补骨脂素对于照品乙醇液. 展启剂：石油醚一乙酸乙酯(2：3). 展启办法：上止展启.隐色：正在紫中光灯(365nm)下瞅察荧光乌面.。
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补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
（一）目的要求
学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：
1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质
补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
O O O O
O
O
补骨脂素 异补骨脂素
3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量32
4.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
CH3 H3C
HO
OH
OH
O
O
OH
HO
CH3
H3C
补骨脂乙素补骨脂甲素
（三）实验原理
本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容
1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
2：用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件。
根据文献，设计了石油醚：乙酸乙酯10：1，石油醚：乙酸乙酯8：1，石油醚：乙酸乙酯6：1，石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比，经过对Rf值的比较，最终决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统。
把醇提液减压浓缩至剩下20ml水左右。
萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml，用乙酸乙酯萃取三次。
3.柱色谱分离，采用湿法装柱干法上样。
4.检识
薄层色谱检识
薄层板：硅胶G-CMC-Na板
试样：补骨脂素乙醇液
异补骨脂素乙醇液
对照品：补骨脂素对照品乙醇液
异补骨脂素对照品乙醇液
展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）
显色：紫外灯下观察荧光
（五）实验说明及注意事项
1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含量较高。
2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和形成胶状物，致使难以滤过，降低收得率，故选用50％乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取。
3．由补骨脂种子中提取所得的精制品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶，两者含量近于1∶1，但随药材品种、质量等不同而有差异。
在进行干柱色谱分离之前，应先进行薄层色谱检查，了解两者含量情况。
因两者皆具有光敏作用，均为有效成分，故临床应用时，不必将两者分开。