补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定
异补骨脂素实验报告
一、实验目的1. 学习香豆素类化合物的提取、分离与鉴定方法。
2. 掌握溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
3. 鉴定补骨脂中异补骨脂素的存在。
二、实验原理补骨脂素和异补骨脂素属于香豆素类化合物，具有内酯结构。
它们具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等生物活性。
本实验采用溶剂法提取补骨脂中的香豆素类化合物，并通过薄层色谱（TLC）和高效液相色谱（HPLC）进行分离与鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 补骨脂药材- 乙醇、盐酸、氨水等试剂- 石油醚、乙酸乙酯等有机溶剂- 硅胶薄层板、显色剂等2. 实验仪器：- 分析天平- 热水浴锅- 烘箱- 液相色谱仪- 紫外分光光度计四、实验方法1. 异补骨脂素的提取- 称取一定量的补骨脂药材，加入适量乙醇，浸泡过夜。
- 将浸泡好的药材与乙醇混合液进行超声提取，提取时间为30分钟。
- 提取液过滤，滤液用盐酸调至酸性，加入氨水反萃取，静置分层。
- 分离出有机层，用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩至一定体积。
2. 异补骨脂素的分离- 将浓缩后的滤液进行薄层色谱（TLC）分析，展开剂为石油醚-乙酸乙酯（体积比8:2）。
- 观察TLC板，根据斑点颜色和Rf值确定异补骨脂素的位置。
3. 异补骨脂素的鉴定- 将TLC板上的异补骨脂素斑点刮下，进行高效液相色谱（HPLC）分析。
- 比较样品与标准品的保留时间，确定异补骨脂素的存在。
五、实验结果与分析1. 异补骨脂素的提取- 超声提取法可提高异补骨脂素的提取率，实验中采用超声提取法，提取率为90.25%。
2. 异补骨脂素的分离- 薄层色谱分析结果显示，在展开剂石油醚-乙酸乙酯（体积比8:2）的作用下，异补骨脂素在TLC板上的Rf值为0.65。
3. 异补骨脂素的鉴定- 高效液相色谱分析结果显示，样品与标准品的保留时间基本一致，进一步验证了补骨脂中异补骨脂素的存在。
六、实验结论1. 本实验采用溶剂法提取补骨脂中的香豆素类化合物，提取率为90.25%。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之马矢奏春创作（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识, 通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的把持技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离, 熟悉干柱色谱的把持技术.3．掌握香豆素类化合物的检识方法.（二）主要化学成份的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实, 全国各地多有栽培.含有多种呋喃香豆素类成份, 主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成份, 具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯, 分子式C11H6O3, 分子量186.16.无色针状结晶（乙醇）, mp.189～190℃, 有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3, 分子量186.16.无色针状结晶, mp.137～138℃, 溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿, 微溶于水、乙醚, 难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4, 分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水）, mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮, 分子式C20H20O4, 分子量324.36.无色针状结晶, mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度年夜, 利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等, 并用活性炭吸附脱色, 再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性不同, 利用柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板, 为了下次筛分离条件, 铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献, 设计了石油醚：乙酸乙酯10：1, 石油醚：乙酸乙酯8：1, 石油醚：乙酸乙酯6：1, 石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比, 经过对Rf值的比力, 最终决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统.把醇提液减压浓缩至剩下20ml水左右.萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml, 用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离, 采纳湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对比品：补骨脂素对比品乙醇液异补骨脂素对比品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成份含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构, 具有内酯类成份的通性, 可用碱提酸沉法提取, 但因补骨脂种子中含有年夜量油脂和糖类成份, 易与碱水发生皂化反应和形成胶状物, 致使难以滤过, 降低收得率, 故选用50％乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精制品, 为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶, 两者含量近于1∶1, 但随药材品种、质量等分歧而有不同.在进行干柱色谱分离之前, 应先进行薄层色谱检查, 了解两者含量情况.因两者皆具有光敏作用, 均为有效成份, 故临床应用时, 不势必两者分开.。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳法创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素 补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳历创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识讲解
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
O O O OOO补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
CH3 H3CHOOHOHOOOHHOCH3H3C补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳术创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定
补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定摘要：补骨脂为中医治疗脾肾阳虚的传统补虚药物，其新型的生物活性已逐渐受到重视并被开发使用，同时对补骨脂所含活性成分的研究也逐步深入，为临床治疗提供新药物提供可靠依据。
本文就有关补骨脂的研究作一综述。
关键词：补骨脂异补骨脂结构提取分离结构鉴定中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，别名破故纸、黑故子、胡故子等，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。
在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。
据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。
补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分有着密切联系。
因此，近年来；国内外学者对补骨脂化学成分的提取分离及相关药理作用进行了多方面的研究，并取得一些新成果，为进一步开发利用补骨脂奠定了基础。
补骨脂的植物来源、品种、科属及分布补骨脂来源为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的果实。
属于补骨脂属，蝶形花科，约130种，分布于热带和亚热带地区，我国有补骨脂P.corylifoliaFranch.1种，产西南部，种子入药。
分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南。
临床应用和药理活性研究概况1药理作用研究进展1.1皮肤药理研究补骨脂素(PSO)口服后,增加皮肤对紫外线的敏感性,经UVA 照射,可与表皮角质层细胞的DNA形成光加合物,抑制DNA合成,减低表皮细胞的过速增生,其用于银屑病治疗的疗效已为临床所肯定。
PSO为一光敏感物质,PSO和8MOP均能促进皮肤黑色素的合成,并使之沉积于皮下。
95%乙醇的补骨脂提取物对酪氨酸酶有明显的激活作用,而酪氨酸酶是人体内黑素合成的关键酶,因此认为补骨脂系通过提高酪氨酸酶的活性使黑色素的生成速度和数量增加。
1.2抗癌活性研究有研究表明补骨脂具有抗癌活性,实验表明补骨脂素对KB细胞、Hela细胞、小鼠肉瘤、艾氏腹水癌等有抑制作用。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之老阳三干创作（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识,通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的把持技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离,熟悉干柱色谱的把持技术.3．掌握香豆素类化合物的检识方法.（二）主要化学成份的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实,全国各地多有栽培.含有多种呋喃香豆素类成份,主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成份,具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯,分子式C11H6O3,分子量186.16.无色针状结晶（乙醇）,mp.189～190℃,有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3,分子量186.16.无色针状结晶,mp.137～138℃,溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿,微溶于水、乙醚,难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4,分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水）,mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮,分子式C20H20O4,分子量324.36.无色针状结晶,mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度年夜,利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等,并用活性炭吸附脱色,再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性不同,利用柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板,为了下次筛分离条件,铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的标准品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献,设计了石油醚：乙酸乙酯10：1,石油醚：乙酸乙酯8：1,石油醚：乙酸乙酯6：1,石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比,经过对Rf值的比力,最终决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统.把醇提液减压浓缩至剩下20ml水左右.萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml,用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离,采纳湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对比品：补骨脂素对比品乙醇液异补骨脂素对比品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成份含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构,具有内酯类成份的通性,可用碱提酸沉法提取,但因补骨脂种子中含有年夜量油脂和糖类成份,易与碱水发生皂化反应和形成胶状物,致使难以滤过,降低收得率,故选用50％乙醇提取而不用碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精制品,为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶,两者含量近于1∶1,但随药材品种、质量等分歧而有不同.在进行干柱色谱分离之前,应先进行薄层色谱检查,了解两者含量情况.因两者皆具有光敏作用,均为有效成份,故临床应用时,不势必两者分开.。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之阿布丰王创作（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操纵技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操纵技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差别，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
从补骨脂中分离鉴定补骨脂素和异补骨脂素
从补骨脂中分离鉴定补骨脂素和异补骨脂素一、本文概述本文旨在详细阐述从补骨脂中分离和鉴定补骨脂素和异补骨脂素的过程。
补骨脂，作为一种传统中药材，具有广泛的应用价值，其中补骨脂素和异补骨脂素是其重要的活性成分。
本文首先介绍补骨脂的来源、化学成分及其药理作用，然后重点描述分离纯化补骨脂素和异补骨脂素的方法，包括提取、分离、纯化等步骤，并对每一步的操作原理和注意事项进行详细说明。
接着，本文将对分离得到的化合物进行结构鉴定，利用现代波谱学方法如核磁共振、质谱等对其结构进行确证。
本文还将对分离纯化过程中的问题以及可能的影响因素进行讨论，以期为补骨脂的深入研究和临床应用提供参考。
二、材料与方法本实验所采用的补骨脂原材料，经过严格筛选与鉴定，确保其品质与纯度满足实验需求。
实验中所用试剂均为分析纯，包括甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂，以及硅胶、氧化铝等层析材料。
实验所使用的主要仪器包括旋转蒸发仪、电子天平、高效液相色谱仪（HPLC）、紫外可见分光光度计等。
将补骨脂原料粉碎后，采用适宜的有机溶剂进行浸泡与提取，确保补骨脂素和异补骨脂素的有效溶出。
提取液经过浓缩后，得到初步的提取物。
采用硅胶柱层析、氧化铝柱层析等色谱分离技术，对提取物进行分离纯化。
通过不断调整洗脱剂的种类与比例，实现目标化合物的有效分离。
利用高效液相色谱法（HPLC）对分离得到的化合物进行定性定量分析，同时通过紫外可见分光光度计测定其光谱特性，与标准品进行对比，从而确定其化学结构。
实验数据采用Excel软件进行整理与统计，利用SPSS软件进行数据分析，以图表形式直观展示实验结果，并进行相应的讨论与分析。
通过上述材料与方法的系统运用，本实验旨在从补骨脂中成功分离并鉴定出补骨脂素和异补骨脂素，为后续的药理研究与应用提供有力支持。
三、结果与讨论经过一系列精细的提取和分离步骤，我们成功地从补骨脂中分离出了补骨脂素和异补骨脂素。
通过对比标准品，我们确认了这两种化合物的身份，并通过高效液相色谱（HPLC）和质谱（MS）等手段进行了精确的定量分析。
设计性实验一补骨脂中补骨脂素的提取分离及结构鉴定
设计性实验一补骨脂中补骨脂素的提取分离及结构鉴定一、概述补骨脂为豆科补骨脂属植物补骨脂（Psoralea corylifolia L.）的种子。
为温肾壮阳、纳气、止泻药。
用于阳痿遗精、遗尿、尿频、腰膝冷痛、肾虚作喘、五更泄泻；外用治白癜风、斑秃。
补骨脂中主要含有补骨脂素（psoralen）、异补骨脂素（isopsoralen）和黄酮类化合物等。
二、实验目的1. 学习查阅天然药物化学主要文献资料的方法。
2. 学习整理文献资料，撰写综述的方法。
3. 通过分析文献资料，结合所学知识，自己设计并实施提取分离补骨脂素和异补骨脂素的方法，并进行结构鉴定，以提高学生独立思考和解决问题的能力。
4. 学习并初步掌握香豆素类化合物的提取分离和结构鉴定方法。
三、实验安排：1. 查阅文献，撰写综述外文文献：检索SciFinder Scholar，CA光盘数据库，Medline光盘数据等；中文文献：检索中国药学光盘数据库，中国生物医学数据库等。
要求学会系统查阅国内外文献的方法，有详细的查阅记录及资料，撰写综述，其内容如下：补骨脂的植物来源、品种、科属及分布。
补骨脂及补骨脂素和异补骨脂素的临床应用和药理活性研究概况。
补骨脂中主要化合物的名称、熔点、结构、理化性质、提取分离方法，结构鉴定手段。
2. 文献交流，设计实验方案要求对已经撰写的文献进行充分的交流和讨论，在此基础上，以组为单位设计实验方案，其主要内容包括：（1）提取方法，所用提取装置，提取溶剂的种类及用量。
（2）纯化方法，所用装置，使用的溶剂及用量。
（3）分离方法，选用的色谱填料的种类、用量，洗脱剂的种类、比例及用量。
（4）列出所需实验材料，安排实验进度。
3. 实验方案的实施按照自行制定的实验方案，在教师指导下，独立完成实验，要求在规定的时间周期内（如三周）分离纯化得到补骨脂素和异补骨脂素单体化合物，每一单体化合物的质量不低于5mg。
如果实验方案有所调整，应及时通知指导教师，以便提供必要的实验材料，保证实验顺利进行。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离及鉴定
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离及鉴定 The Standardization Office was revised on the afternoon of December 13, 2020补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离及鉴定1结构及性质补骨脂素和异补骨脂素属香豆素类化合物。
补骨脂素：（补骨脂内酯），C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚和石油醚。
异补骨脂素：C11H6O3，无色针状结晶（乙醇），有挥发性，溶于甲醇，乙醇，苯，氯仿，丙酮；微溶于水，乙醚；难溶于冷石油醚。
O O O补骨脂素O O异补骨脂素O2 提取方法的选择用50%的乙醇浸提：称取补骨脂粗粉50g，用500ml的乙醇冷浸提取，过滤，水浴加热，回收乙醇，得浸膏。
取浸膏置于烧瓶中，加甲醇50ml和适量活性炭，回流15min，趁热抽滤。
浓缩滤液至小体积，放置沉淀，用甲醇淋洗沉淀。
3.补骨脂素和异补骨脂素的分离取色谱用中性氧化铝40g，装于直径1.6cm*30cm的色谱柱中。
取补骨脂精品甲醇液约1-2ml，加样，以石油醚-乙酸乙酯（1：2）作洗脱剂，洗脱，每20ml为一溜份，各溜份回收溶剂后，用薄层板检查，和标准品对比，于紫外光灯下观察荧光与颜色。
4.鉴定a呈色反应(1)异羟肟酸铁反应：取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7％盐酸羟胺甲醇溶液2～3滴，再加10％氢氧化钾甲醇溶液2～3滴，于水浴上加热数分钟，冷却，用盐酸调至pH3～4，加1％三氯化铁试液1～2滴，观察溶液颜色。
(2)开环闭环试验：取样品少许加稀氢氧化钠溶液1～2m1，加热，观察现象；再加稀盐酸试液几滴，观察所产生现象。
(3)荧光：取样品少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，于紫外光灯下观察荧光与颜色。
b薄层色谱鉴定薄层板：硅胶G-CMC-Na板。
点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳化创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之杨若古兰创作（一）目的请求进修喷鼻豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验请求：1．把握用溶剂法提取喷鼻豆素类化合物的操纵技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操纵技术.3．把握喷鼻豆素类化合物的检识方法.（二）次要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培.含有多种呋喃喷鼻豆素类成分，次要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的次要无效成分，具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4，分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36.无色针状结晶，mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验道理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再根据补骨脂素和异补骨脂素的极性差别，利用柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的尺度品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献，设计了石油醚：乙酸乙酯10：1，石油醚：乙酸乙酯8：1，石油醚：乙酸乙酯6：1，石油醚：乙酸乙酯4：1等几组流动相配比，经过对Rf值的比较，终极决定用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离零碎.把醇提液减压浓缩至剩下20ml水摆布.萃取：浓缩后的混旋液加蒸馏水至100ml，用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离，采取湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液睁开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及留意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯结构，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和构成胶状物，导致难以滤过，降低收得率，故选用50％乙醇提取而不必碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精成品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶，两者含量近于1∶1，但随药材品种、质量等分歧而有差别.在进行干柱色谱分离之前，应进步前辈行薄层色谱检查，了解两者含量情况.因两者皆具有光敏感化，均为无效成分，故临床利用时，不势必两者分开.。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
资料范本本资料为word版本，可以直接编辑和打印，感谢您的下载补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识地点：__________________时间：__________________说明：本资料适用于约定双方经过谈判，协商而共同承认，共同遵守的责任与义务，仅供参考，文档可直接下载或修改，不需要的部分可直接删除，使用时请详细阅读内容补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳史创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳科创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之欧阳家百创编
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识欧阳家百（2021.03.07）（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C20H20O4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识之袁州冬雪创作（一）目标要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操纵技术.2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操纵技术.3．掌握香豆素类化合物的检识方法.（二）主要化学成分的布局及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培.含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等.其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质.1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性.溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚.2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C11H6O3，分子量186.16.无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚.补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮.分子式C20H20O4，分子量324.36.黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃.4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C20H20O4，分子量324.36.无色针状结晶，mp.191～192℃.补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，操纵乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差别，操纵柱色谱予以分离.（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇.铺薄层硅胶板，为了下次筛分离条件，铺好15块板.2：用补骨脂素和异补骨脂素的尺度品通过TLC筛选硅胶柱色谱的分离条件.根据文献，设计了石油醚：乙酸乙酯10：1，石油醚：乙酸乙酯8：1，石油醚：乙酸乙酯6：1，石油醚：乙酸乙酯4：1等几组活动相配比，颠末对Rf 值的比较，最终决议用石油醚：乙酸乙酯6：1作为硅胶柱色谱分离的分离系统.把醇提液减压稀释至剩下20ml水左右.萃取：稀释后的混旋液加蒸馏水至100ml，用乙酸乙酯萃取三次.3.柱色谱分离，采取湿法装柱干法上样.薄层色谱检识薄层板：硅胶G-CMC-Na板试样：补骨脂素乙醇液异补骨脂素乙醇液对照品：补骨脂素对照品乙醇液异补骨脂素对照品乙醇液展开剂：①石油醚-醋酸乙酯（6∶1）显色：紫外灯下观察荧光（五）实验说明及注意事项1．提取药材应是未炮制过的补骨脂种子,其补骨脂素和异补骨脂素等成分含量较高.2．补骨脂素和异补骨脂素含内酯布局，具有内酯类成分的通性，可用碱提酸沉法提取，但因补骨脂种子中含有大量油脂和糖类成分，易与碱水发生皂化反应和形成胶状物，致使难以滤过，降低收得率，故选用50％乙醇提取而不必碱溶酸沉法提取.3．由补骨脂种子中提取所得的精制品，为补骨脂素和异补骨脂素的混合物结晶，二者含量近于1∶1，但随药材品种、质量等分歧而有差别.在停止干柱色谱分离之前，应先停止薄层色谱检查，懂得二者含量情况.因二者皆具有光敏作用，均为有效成分，故临床应用时，不势必二者分开.。
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识
补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的提取分离与检识（一）（一）目的要求学习香豆素类化合物的提取分离及检识，通过实验要求：1．掌握用溶剂法提取香豆素类化合物的操作技术。
2．通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱的操作技术。
3．掌握香豆素类化合物的检识方法。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂 为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯 （补骨脂素）、异补骨脂内酯 （异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen) 又称补骨脂内酯，分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen) 分子式 C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
O O O O O O补骨脂素 异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone) 又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp. 166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin) 又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
CH3 H3CHOOHO OHOOOH HOCH3H3C补骨脂乙素补骨脂甲素（三）实验原理本实验根据补骨脂素和异补骨脂素等在乙醇中溶解度大，利用乙醇从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素等，并用活性炭吸附脱色，再依据补骨脂素和异补骨脂素的极性差异，利用柱色谱予以分离。
（四）实验内容1：把20g补骨脂研磨后用50%乙醇冷浸提取72h,24h,24h,每次用六倍量体积的乙醇。
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补骨脂素和异补骨脂素的提取分离和结构鉴定摘要：补骨脂为中医治疗脾肾阳虚的传统补虚药物，其新型的生物活性已逐渐受到重视并被开发使用，同时对补骨脂所含活性成分的研究也逐步深入，为临床治疗提供新药物提供可靠依据。
本文就有关补骨脂的研究作一综述。
关键词：补骨脂异补骨脂结构提取分离结构鉴定中药补骨脂始载于<开宝本草>，为豆科植物补骨脂的干燥成熟果实，别名破故纸、黑故子、胡故子等，其性温，味辛，具补肾助阳之功效。
在传统的中医临床上主治肾虚冷泻，阳萎，小便频数，腰膝冷痛，虚寒喘咳等病症。
据现代研究表明，补骨脂还具有抗肿瘤，抗菌，抗骨质疏松，雌激素作用以及治疗白癜风等多重药理活性。
补骨脂所具有的这些药理活性与其所含的活性成分有着密切联系。
因此，近年来；国内外学者对补骨脂化学成分的提取分离及相关药理作用进行了多方面的研究，并取得一些新成果，为进一步开发利用补骨脂奠定了基础。
补骨脂的植物来源、品种、科属及分布补骨脂来源为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的果实。
属于补骨脂属，蝶形花科，约130种，分布于热带和亚热带地区，我国有补骨脂P.corylifoliaFranch.1种，产西南部，种子入药。
分布于山西、陕西、安徽、浙江、江西、河南、湖北、广东、四川、贵州、云南。
临床应用和药理活性研究概况1药理作用研究进展1.1皮肤药理研究补骨脂素(PSO)口服后,增加皮肤对紫外线的敏感性,经UVA 照射,可与表皮角质层细胞的DNA形成光加合物,抑制DNA合成,减低表皮细胞的过速增生,其用于银屑病治疗的疗效已为临床所肯定。
PSO为一光敏感物质,PSO和8MOP均能促进皮肤黑色素的合成,并使之沉积于皮下。
95%乙醇的补骨脂提取物对酪氨酸酶有明显的激活作用,而酪氨酸酶是人体内黑素合成的关键酶,因此认为补骨脂系通过提高酪氨酸酶的活性使黑色素的生成速度和数量增加。
1.2抗癌活性研究有研究表明补骨脂具有抗癌活性,实验表明补骨脂素对KB细胞、Hela细胞、小鼠肉瘤、艾氏腹水癌等有抑制作用。
该类物质能促进非特异性细胞进入分化,干扰细胞核有丝分裂,抑制DNA的合成,并与DNA形成交联,打开DNA双螺旋结构的氢键。
1.3对骨质的影响和性激素样作用补骨脂提取物能促进骨再生和重建。
临床应用及现代药理研究结果都表明补骨脂确有强筋骨,防治骨质疏松的作用。
采用体外成骨细胞试验法,将补骨脂的系统溶剂提取物作用于新生大鼠颅骨成骨细胞,通过检测成骨细胞的增殖率及碱性磷酸酶(ALP)的含量,筛选出补骨脂乙酸乙酯提取物和乙醇提取物均能促进大鼠颅骨成骨细胞ALP活性及其增殖。
药理研究表明补骨脂具有雌激素样作用,每天给雌鼠补骨脂干粉0.35克或0.175克(混合在饮食中),可增加阴道角化,此作用为可逆性。
0.35克使成熟雌鼠阴道开放,持续喂33~77天,能伤害成年雌鼠生育力,但改变正常饮食后一周即可恢复。
喂雄鼠46天却无影响。
1.4对心血管系统的作用补骨脂中的黄酮类成分对心血管有一定的作用。
补骨脂乙素具有强心和扩张冠状动脉的作用。
10-5–10-8mol/L的补骨脂乙素就能明显扩张大鼠、豚鼠、兔、猫等动物的离体心脏和冠状动脉,其作用强度是凯林(Khellin)的4倍,能对抗脑垂体后叶素对冠状动脉的收缩,但对总外周血管阻力影响不大;能加强豚鼠、大白鼠的心肌收缩力;能兴奋蛙心,并对抗乳酸引起的蛙心心力衰竭。
犬静注20mg/kg时,冠脉血流量增加80%以上,冠脉阻力明显下降,每搏心输出量及作功量均有增加,而心肌耗氧量增加不明显,心肌呼吸商有所提高。
补骨脂乙素对家兔实验性缓慢心律有明显提高作用,其效果可与阿托品相当。
补骨脂甲素开环生成的查耳酮也有扩张冠脉的作用。
1.5对免疫功能的影响实验研究证明了补骨脂提取液能明显地提高二倍体成纤维细胞(2BS细胞)的生长增殖速度,提高小鼠腹腔巨嗜细胞的吞噬功能。
连续灌补骨脂煎剂7d,结果补骨脂煎剂和补骨脂黄酮注射液均能增加小白鼠免疫器官的脏器指数,对免疫功能有增强作用,其中,注射液组效果更明显。
补骨脂多糖对机体特异性免疫有促进作用。
用绵羊红细胞(SRBC)和卵清蛋白为抗原给小鼠注射后,灌服补骨脂多糖,结果显示,给药组SRBC抗体和卵清抗体生成水平,IL2、IFN1激发水平均显著高于对照组,提示补骨脂多糖对正常小鼠机体免疫有增强作用。
临床应用进展1.治疗子宫出血补骨脂有较明显的缩短出血时间、减少出血量的效果, 同时对子宫有明显的收缩作用。
止血效果在90%以上。
2 .治疗银屑病 100%补骨脂溶液 2 . 5~3 . 0m , l肌内注射,每天 1次, 或皲裂者加用抗组胺药物或局部用药, 治愈率24.2% 。
3 .治疗白癜风以 50%补骨脂注射液 5ml肌内注射,每天1次, 外用补骨脂液涂抹局部白斑处。
本品含有补骨脂素, 有使色素新生的作用。
4．治疗秃发 5%补骨脂注射液 5ml肌内注射,每天1次,同时紫外照射治疗。
5．治疗指 (趾 )甲癣用补骨脂配合等量菟丝子制成的注射液 5ml肌内注射,每天 1次,可连续数月。
治愈率 50 % 。
综上所述,补骨脂的临床应用较为广泛, 涉及到皮肤科、妇科各个领域。
近年来对其补肾填精作用亦有新的开发,对其治疗骨质疏松亦有新的制剂面世。
（二）主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂Psoraleacorylifolia L.的干燥成熟果实，全国各地多有栽培。
含有多种呋喃香豆素类成分，主要含补骨脂内酯（补骨脂素）、异补骨脂内酯（异补骨脂素）和补骨脂次素等。
其中补骨脂素和异补骨脂素为抗白癜风的主要有效成分，具有光敏性质。
1.补骨脂素(psoralen)又称补骨脂内酯，分子式C11H6O3，分子量186.16。
无色针状结晶（乙醇），mp.189～190℃，有挥发性。
溶于甲醇、乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醚和石油醚。
2.异补骨脂素(isopsoralen)分子式C 11H 6O 3，分子量186.16。
无色针状结晶，mp.137～138℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿，微溶于水、乙醚，难溶于冷石油醚。
O O O OOO 补骨脂素异补骨脂素3.补骨脂乙素(isobavachalcone)又称补骨脂酮、异补骨脂查耳酮。
分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
黄色片状结晶（甲醇-水），mp.166～167℃。
4.补骨脂甲素(coryfolin)又称补骨脂黄酮，分子式C 20H 20O 4，分子量324.36。
无色针状结晶，mp.191～192℃。
CH 3H 3C HO OHOH O O OHHOCH 3H 3C补骨脂乙素补骨脂甲素提取分离方法：浸提法的详细步骤设计称取补骨脂粗粉200g ，用l500ml 的乙醇冷浸提取4攻(600ml ，300ml ，300ml ，300ml)，过滤，合并滤液，水浴加热，回收乙醇至700ml ，放置过夜，抽滤，弃去滤液，得浸膏。
取浸膏置烧瓶中，加甲醇50ml 和适量活性炭，回流15min ，趁热抽滤。
滤液浓缩至小体积，放置，释出沉淀抽滤，沉淀用甲醇淋洗。
乙醇浓度选择采用75%乙醇提取的产率较高，但因补骨脂中大量脂溶性物质被溶解，使提取液旅缩后过于粘稠，过滤较困难，增加实验难度，杂质多而沉淀外观差。
采用50%乙醇提取，产率略低，但其它二方面较佳。
特别是实验难度低，在生产上有较大优势，因此采用5O%乙醇提取优于用75%乙醇。
鉴定1.外观：两种方法得到的晶体都呈白色针晶，且在uV 灯下显蓝色荧光。
2.异羟肟酸铁反应：分别取上述晶体各少许，加乙醇1ml溶解．加6d盐酸羟胺的饱和乙醇液混匀后加人6dKoH的饱和乙醇液，水浴加热10rain，冷却，用5HC1使呈酸性(pH6左右)沿壁滴10FeCl3溶液30s后出现紫红色(反应阳性)。
3.mp：50%晶I： 136．6～138．6℃50%晶II：162．8～163．8℃75%晶I： 136．9～138．8℃75%晶II：l62．8～l64．0℃4.TLc：照薄层层析方法(《中国药典~1995版I部附录)试验，分别取晶I，晶II，和补骨脂索对照品和异补骨脂索对照品的乙酸己酯溶液各，5ul点样于同一硅腔G薄层板上(硅腔G加3倍量0.5％CMC-Na溶液铺顿，晾干后105℃活化3Omin)，以石油醚(60～90℃)一己酸乙酯(2：1)上行展开10cm，取出晾干，置254nmUV灯下观察，相同位置的斑点显相同颜色的荧光。
参考文献：参考文献：【1】曹金一，刘京晶，黄文华，郭宝林. 补骨脂药理作用与临床应用研究进展. 中药药理与临床,2008,24(6)【2】张红莲, 王雅楠, 王建华. 补骨脂的化学成分及药理活性研究概况。
天然产物研究与开发, 2010,（22）【3】刘志林 ,张相年,赵树进,周日笑. 补骨脂中补骨脂素的提取及纯化。
第一军医大学学报,2005,25(6)【4】罗志冬，郭晏华.补骨脂有效成分提取工艺的考察.中国新药杂志, 2007,16(9)【5】余得平.不同浓度乙醇提取补骨脂的比较. 时珍国医国药,2009,11(7) 【6】吴阿富,徐爱仁,黄欣欣,汪大海. 中药补骨脂薄层分离条件的选择. 浙江大学学报(医学版), 2001【7】李晶晶，鹿秀梅，李发美，熊志立补骨脂的化学及代谢成分的超高效液相色谱串联质谱法鉴定时珍国医国药2010年第21卷第9期【8】刘自力施静补骨脂临床研究进展中国民族民间医药 2008年第13卷第2期。