中药化学常用检出试剂的配制方法

常用检出试剂的配制方法

（一）生物碱沉淀试剂

1．碘化铋钾试剂取8g次硝酸铋溶于17ml 30％硝酸（相对密度1.18）中，在搅拌下缓慢滴加碘化铋钾水溶液（碘化钾27g溶于20ml水中），静置过夜滤过，加蒸馏水稀释至100ml。

附：改良碘化铋钾试剂

甲液：取0.85g次硝酸铋溶于10ml冰醋酸中，加40ml水。

乙液：取8g碘化钾溶于20ml水中。

将溶液甲和乙等量混合，置棕色瓶中能保存较长时间，可作生物碱沉淀试剂用。如作色谱显色剂用，需取上述混合液1ml与2ml醋酸、10ml水的比例混合即得。

2．碘化汞钾试剂取1.36g氯化汞和5g碘化钾各溶于20ml水中，将两液混合后再加水稀释至100ml。

3．碘-碘化钾试剂取1g碘和10g碘化钾，溶于50ml水中，加热溶解，加2ml醋酸，再加水稀释至100ml。

4．苦味酸试剂取1g苦味酸，溶于100ml水中即得。

5．硅钨酸试剂取5g硅钨酸，溶于100ml水中，用盐酸调pH2。

6．磷钨酸试剂取20g钨酸钠、10g磷酸（相对密度为1.13）与水混合后，加热煮沸20分钟，稍冷后加盐酸至酸性。

7．鞣酸试剂取1g鞣酸，加1ml乙醇，溶解后加水至10ml。

（二）苷类检出试剂

1．糖的检出试剂

（1）斐林试剂

甲液：取6.93g结晶硫酸铜，加水至100ml。

乙液：取34.6g酒石酸钾钠及10g氢氧化钠，加水至100ml。使用时甲、乙两液等量混合。

（2）α-萘酚-浓硫酸试剂

甲液：取1gα-萘酚，加95％乙醇至10ml。

乙液：浓硫酸。使用时分别加入两液。

（3）氨性硝酸银试剂取1g硝酸银，加20ml水溶解，小心滴加适量氨水，随加随搅拌，至开始产生的沉淀将近全部溶解为止，滤过即得。

（4）苯胺-邻苯二甲酸试剂取0.93g苯胺及1.6g邻苯二甲酸，溶于100ml 水饱和的正丁醇中。

（5）α-去氧糖试剂

1）三氯化铁-冰醋酸试剂

甲液：取0.5ml 1％三氯化铁水溶液，加冰醋酸至100ml。

乙液：浓硫酸。使用时分别加入两液。

2）呫吨氢醇冰醋酸试剂：取10mg呫吨氢醇溶于100ml冰醋酸（含1％盐酸）中。

2．酚类检出试剂

（1）三氯化铁试剂：5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液。

（2）三氯化铁-铁氰化钾试剂

甲液：2％三氯化铁水溶液。

乙液：1％铁氰化钾水溶液。应用时甲、乙两溶液等量混合或分别滴加。

（3）香草醛-盐酸试剂：取0.5g香草醛，溶于50ml盐酸中。

（4）重氮化试剂

甲液：取0.35g对硝基苯胺，溶于5ml浓盐酸中，加水至50ml。

乙液：取5g亚硝酸钠，加50ml水溶解。应同时取甲、乙两液等量在冰水浴中混合后备用。

本试剂系由对硝基苯胺和亚硝酸钠在强酸性条件下经重氮化作用而成。由于重氮盐不稳定，故本试剂应在临用时配制。

（5）4-氨基安替比林-铁氰化钾试剂

甲液：2％4-氨基安替比林乙醇溶液。

乙液：8％铁氰化钾水溶液（或用0.9％4-氨基安替比林和5.4％铁氰化钾水溶液）。应用时分别加入。

3．黄酮类检出试剂

（1）盐酸-镁粉试剂：浓盐酸和镁粉。

（2）三氯化铝试剂：2％三氯化铝乙醇或甲醇溶液。

（3）碱式醋酸铅（或醋酸铅）试剂：饱和碱式醋酸铅（或饱和醋酸铅）水溶液。

（4）醋酸镁试剂：1％醋酸镁甲醇溶液。

（5）氢氧化钾试剂：10％氢氧化钾水溶液。

（6）锆-柠檬酸试剂

甲液：2％二氯氧锆甲醇溶液。乙液：2％柠檬酸甲醇溶液。应用时分别加入。

4．蒽醌类检出试剂

氢氧化钾试剂、醋酸镁试剂、碱式醋酸铅试剂参见黄酮类检出试剂（5）、（4）、（3）。

5．香豆素类及内酯类检出试剂

（1）异羟肟酸铁试剂

甲液：新鲜配制的1mol/L羟胺盐酸盐的甲醇溶液。

乙液：1.1mol/L氢氧化钾甲醇溶液。

丙液：取1g三氯化铁溶于100ml1％盐酸中。应用时甲、乙、丙三溶液按次序滴加，或甲、乙两溶液等量混合滴加后再加丙液。

（2）内酯环的开环-闭环试剂

甲液：1％氢氧化钠水溶液。乙液：2％盐酸溶液。

（3）重氮化试剂：参见酚类检出试剂（4）。

（4）4-氨基安替比林-铁氰化钾试剂：参见酚类检出试剂（5）。进行3、4试验时，试样应先加3％碳酸钠水溶液，加热处理后再分别滴加试剂。

（5）间硝基苯试剂：2％间硝基苯乙醇液。

6．强心苷类检出试剂

（1）碱性3,5-二硝基苯甲酸试剂

甲液：2％3,5-二硝基苯甲酸甲醇溶液。

乙液：1mol/L氢氧化钾水溶液。应用前甲、乙两液等量混合。

（2）碱性苦味酸试剂

甲液：1％苦味酸水溶液。

乙液：10％氢氧化钠水溶液。应用前甲、乙两液以9∶1混合。

（3）碱性亚硝酰铁氰化钠试剂

甲液：吡啶。

乙液：0.5％亚硝酰铁氰化钠水溶液。

丙液：10％氢氧化钠水溶液。

7．皂苷类检出试剂

（1）溶血试验

2％血细胞生理盐水混悬液：取新鲜兔血（由心脏或耳静脉取血）适量，用洁净小毛刷迅速搅拌，除去纤维蛋白，用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后，量取沉降的红细胞，加入生理盐水配成2％混悬液，贮存于冰箱内备用（贮存期2～3天）。

（2）醋酐-浓硫酸试剂

甲液：醋酐。乙液：浓硫酸。

8．氰苷类检出试剂

（1）苦味酸钠试纸：取适当大小的滤纸条，浸入苦味酸饱和水溶液中，浸透后取出晾干，再浸入10％碳酸钠水溶液内，迅速取出，晾干即得。

（2）亚铁氰化铁（普鲁士蓝）试剂

甲液：10％氢氧化钾水溶液。

乙液：10％硫酸亚铁水溶液。

丙液：10％盐酸水溶液。

丁液：5％三氯化铁水溶液。

（三）甾体和三萜类检出试剂

1．醋酐-浓硫酸试剂参见皂苷类检出试剂（2）。

2．氯仿-浓硫酸试剂

甲液：氯仿（溶解试样）。乙液：浓硫酸。

3．三氯化锑试剂取25g三氯化锑，溶于75g氯仿中（亦可用氯仿或四氯化碳的饱和溶液）。

4．五氯化锑试剂五氯化锑和氯仿（或四氯化碳）按1∶4于用前配制。

5．间二硝基苯试剂

甲液：2％间二硝基苯乙醇溶液。乙液：14％氢氧化钾乙醇溶液。用前等量混合。