各实验试剂配制方法
医学实验技术用到的试剂配制方法
实验中用到的试剂配方
一、WB实验
1.电转液(PH=8.3)
甘氨酸 14.5g
Tris 2.9g
甲醇 200ml
蒸馏水至 1000ml
先用蒸馏水溶甘氨酸,最后加甲醇,室温保存,2-3次可用,最好4度保存,可配制成2x转移缓冲液,稀释后可用。
2.TBS缓冲液
1mol/L Tris-HCL (PH=7.5) 10ml
NaCl 8.8g
蒸馏水至 1000ml
可配制成10x转移缓冲液,稀释后可用。
3.TBST缓冲液
20%Tween 1.65ml
TBS 700ml
混匀后即可使用,最好现用现配。
二、免疫染色相关实验
5.多聚甲醛溶液(4%)
多聚甲醛 40g
1×PBS 定容至1L
6.柠檬酸盐抗原修复液(1×)
柠檬酸三钠 3g
柠檬酸 0.4g
dH2O 定容至1L
PH调至6.0
7.盐酸酒精(1%)
浓盐酸 2.5ml
75%乙醇定容至250ml
8.氨水(1%)
氢氧化铵 2.5ml
dH2O 定容至250ml
三、其他
4.红细胞裂解液
NH4CL 2g
KHCO3 0.25g
ddH2O 250ml
0.5M EDTA 250ul
最后用除菌过滤器过滤,待用。
化学试剂配制方法
电厂化学试剂配制1、硬度:一种测定硬度大于0.5me/L的水样;二种测定硬度在1-0.5ue/L的水样。
⑴、氨-氯化铵缓冲溶液:称取20g氯化铵溶于500高纯水中,加150ml浓氨水,用高纯水稀释至1000ml混匀;取50ml按第二方法测定其硬度,根据测定结果往其余950ml缓冲溶液加所需EDTA溶液抵消其硬度。
⑵、(高硬度)氨-氯化铵缓冲溶液:称取67.5克氯化铵,加570ml浓氨水,加1gEDTA用高纯水稀释至1000ml混匀;⑶、硼砂缓冲溶液:称取40g硼砂溶于80ml高纯水中,加入10g氢氧化钠,溶解后用高纯水稀释至1000ml,按上述方法抵消硬度。
⑷、0.5﹪铬黑T指示剂(乙醇溶液):称取0.5g铬黑T 与4.5g盐酸羟胺在研钵中磨匀,混合后溶于100ml95﹪乙醇中,转入棕色瓶中。
使用期限不超过1个月。
⑸、酸性铬蓝K指示剂(乙醇溶液):称取0.5g酸性铬蓝K与4.5盐酸羟胺混合,加10ml氨-氯化铵缓冲溶液(硼砂也可)和40ml高纯水,溶解后用95﹪乙醇稀释至100ml. 使用期限不超过1个月。
2、磷酸盐:⑴、磷酸盐储备液(1ml=1mgPO4),称取在105℃干燥过的优级纯磷酸二氢钾1.433g溶于少量除盐水中,并稀释至1000ml。
⑵、磷酸工作溶液:(1ml=0.1mgPO4),取上述储备液10ml稀释至100ml⑶、钼酸铵-偏钒酸铵-硫酸显色液(酸性钼酸铵):(A)称取50g钼酸铵和2.5g偏钒酸铵,溶于400ml除盐水中;(B)取195ml浓硫酸,在不断搅拌下徐徐加入到250ml除盐水中,并冷却至室温。
将(B)配置的溶液倒入(A)配置的溶液中,用除盐水稀释至1000ml。
3、二氧化硅:⑴、酸性钼酸铵溶液:A.称取50g钼酸铵溶于500ml高纯水中;B.取42ml浓硫酸,在不断搅拌下加入到300ml高纯水中,并冷却至室温。
C.将A加入到B中,然后用高纯水稀释至1000ml。
⑵、10﹪酒石酸溶液(质量/体积)⑶、1、2、4酸还原剂:A.称取1.5g1、2、4酸和无水亚硫酸钠溶于200ml高纯水中B. 称取90g 亚硫酸氢钠,溶于600ml高纯水中。
高中生物实验试剂配制方法
高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂试剂甲:将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中,加0.5亳升硫酸,混合均匀。
试剂乙:将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。
(贮于带橡皮塞的瓶中)※临用时试剂甲与试剂乙等量混合※斐林试剂是由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。
它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀因此,斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。
2、双缩脲试剂取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。
取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。
瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。
※双缩脲试剂使用时,先向蛋白质溶液中加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,与蛋白质发生紫色反应,因此,双缩脲试剂常用于检测蛋白质的存在与否注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:(1)溶液浓度不同斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲,其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05g/ml;双缩脲试剂中NaOH溶液(双缩脲试剂A)的浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g/ml。
(2)使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。
用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。
20几种常用试剂配置方法
20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作,准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法,帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一,通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备,根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂,并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积,然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量,然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式,按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等,并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积,并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积,然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式,计算所需溶液的质量、体积,并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液,并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例,计算所需试剂的质量或体积,并进行配制。
实验室试剂配制方法
实验室试剂配制方法1.水溶液的配制:a.一般的水溶液配制需要使用蒸馏水或者经过高纯水处理的水。
首先,取一定体积的蒸馏水或高纯水加入容器中。
b.如果需要调节溶液的pH值,可以使用酸或碱进行调节。
首先,将所需量的酸或碱溶解在一定体积的蒸馏水中,然后将调节液缓慢滴加到待配制的水溶液中,同时用pH计监测溶液的pH值,直到达到目标值。
2.盐酸溶液的配制:a.取一定体积的蒸馏水或高纯水加入容器中。
b.缓慢滴加盐酸到水中,同时用磁力搅拌子搅拌,直到达到目标浓度。
在配制盐酸溶液时,请务必注意安全,因为盐酸是一种强酸,会对人身体和实验器材造成伤害。
3.NaOH溶液的配制:a.取一定体积的蒸馏水或高纯水加入容器中。
b.缓慢滴加NaOH固体到水中,同时用磁力搅拌子搅拌,直到固体完全溶解,达到目标浓度。
在配制NaOH溶液时,要小心避免固体氢氧化钠与水的剧烈反应,以及注意防护措施,因为氢氧化钠是一种强碱。
4.缓冲溶液的配制:a. 首先,选择合适的缓冲液体系和 pH 值。
常见的缓冲溶液体系有PBS(磷酸盐缓冲溶液)、Tris-HCl(Tris 氢氯酸盐缓冲溶液)等。
b.使用蒸馏水或高纯水加入容器中。
c.根据所需浓度,称取一定质量或体积的缓冲盐或缓冲液,溶解于水中,并用pH计调节溶液的pH值。
5.稀释液的配制:a.确定要配制的目标浓度和配制体积。
b.使用蒸馏水或高纯水加入容器中。
c.根据所需浓度和体积,计算所需的试剂质量或体积。
d.将试剂添加到容器中,并进行充分的混合。
6.细胞培养基的配制:a.根据实验需求和细胞类型选择合适的培养基配方。
b.使用蒸馏水或高纯水加入容器中。
c.按照制定的配方将培养基原料逐一称取,并加入容器中,同时进行充分的混合。
d.最后,将培养基过滤或灭菌处理,以保持无菌状态。
总结:实验室试剂的配制需要准确称量试剂,选择合适的溶剂,并严格按照实验要求进行操作。
在配制过程中,注意安全、准确、固体的溶解效果和溶液的稳定性等因素是非常重要的。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1.碘液的配制
取2g碘化钾,溶解在5mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2.斐林试剂
试剂A:将结晶硫酸铜溶于500mL水中,加硫酸,混合均匀。
试剂B:将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
(贮于带橡皮塞的瓶中)
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3.双缩脲试剂
试剂A:10%氢氧化钠试剂B:1%硫酸铜
4.苏丹Ⅲ试剂
苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中,因脂肪可溶于酒精中,因此染色脂肪不得超过10分钟。
5.二苯胺试剂:
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中,再加浓硫酸(置冰箱中可保存根6个月,使用前在室温下摇匀)。
6.醋酸洋红染液
冰醋酸45mL+55mL蒸馏水+洋红
先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸 10分钟,待冷却后,即可使用。
7.有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。
8.有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合配成染色液
9.卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定)酒精:冰醋酸=3:1(体积比)。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
实验室常规试剂配制
实验室常用试剂、缓冲液的配制1M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1g Tris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量181.7g Tris置于1L烧杯中。
2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
10×TE Buffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度100mM Tris-HCl,10mM EDTA配制量1L配制方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合。
3.将溶液定容至1L后,高温高压灭菌。
4.室温保存。
3M醋酸钠(pH5.2)组份浓度配制量配制方法PBS Buffer组份浓度137mM NaCl,2.7mM KCl,10mM Na2HPO4,2mM KH2PO4配制量1L配制方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3.滴加浓盐酸将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4.高温高压灭菌后,室温保存。
注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5mM MgCl2。
实验室常用试剂配制方法
实验室常用试剂配制方法实验室中,常用试剂的配制方法非常重要,准确的配制方法可以确保实验的准确性和可重复性。
以下是几种常用实验室试剂的配制方法:1.缓冲溶液的配制:缓冲溶液常用于调节实验的酸碱度,常见的缓冲溶液有Tris缓冲液、PBS缓冲液等。
以Tris缓冲液为例,其配制方法如下:1) 称取所需量的Tris氯化物(Tris-HCl)。
2) 将Tris氯化物溶解于去离子水中,搅拌使其彻底溶解。
可以加热水浴促进其溶解。
3)调整溶液的pH值至所需的酸碱度。
可以使用酸(如盐酸)或碱(如氢氧化钠)来调节pH值,同时使用pH计监测溶液的pH值。
4)将溶液转移到容量瓶中,用去离子水稀释至最终体积。
2.浓度溶液的配制:浓度溶液的配制需要准确计算溶质的质量以及溶液的体积。
以下以NaCl浓度溶液的配制为例:1) 根据所需的NaCl浓度和溶液体积,计算所需的NaCl质量。
可以使用以下公式进行计算:质量(g)=浓度(mol/L)×体积(L)×摩尔质量(g/mol)。
2)称取所需质量的NaCl。
3)加入去离子水溶解NaCl,搅拌使其溶解。
4)如果需要,通过使用pH计校正溶液的pH值。
3.酶溶液的配制:酶溶液常用于生物学实验中。
以下以酶的配制为例:1)根据酶的活力或浓度,计算所需酶的质量或体积。
2)称取所需量的酶,可以在低温环境中操作以保持酶的活性。
3)加入合适的缓冲液溶解酶,并按需添加其他辅助试剂,如辅酶等。
4)将溶液通过滤器过滤以去除可能存在的杂质。
5)根据需要,将溶液分装至小容器中,如冰盒中保存。
4.染色剂的配制:染色剂常用于细胞培养、组织切片,或者蛋白质凝胶电泳等实验中。
以下以伯克氏液的配制为例:1) 称取所需质量的碱性苏丹黑(Fast Green FCF)和亚甲蓝(Methylene Blue)。
2)加入足够的去离子水,用搅拌棒搅拌使其均匀溶解。
3)使用滤纸或滤器将溶液过滤以去除杂质。
4)将溶液分装至小容器中,并用铝箔纸覆盖以避免溶液暴露于光线中。
实验室常用试剂的配制
5倍TBE储存液的配制配制1L的TBE缓冲液:Tris 54 g硼酸 27.5 g0.5 M EDTA (pH 8.0) 20 mldH2O to 1000 ml要用0.5倍的TBE缓冲液进行电泳,用5倍的TBE缓冲液进行储存常规实验所用溶液配方大全1.0.5mol/LEDTA 配制组分浓度:0.5mol/l EDTA,PH=8配制量:500ml配制方法(1)称取93.06克EDTA.Na2.2H2O,置于500 ml烧杯中(2)加入约400ml dd H2O.用热磁力搅拌器充分搅拌(3)用NaOH调节PH值到8,约用10克固体NaOH(4)在溶液冷却后,再用NaOH调节至PH=8(5)加dd H2O将溶液定容到500 ml(6)高温高压灭菌后,室温保存2.NaOH溶液的配制组分浓度:5 mol/l NaOH配制量:100 ml配制方法(1)称取固体NaOH20克于容器中(2)加入dd H2O定容到100 ml3.100 mmol/l Tris-HCl的配制组分浓度:mmol/l Tris-HCl,PH=6.4配制量:250 ml配制方法(1)称取3.025克Tris于250 ml烧杯中.(2)加入约200ml dd H2O充分搅拌溶解.(3)用浓盐酸调节PH值到6.4.所用浓盐酸约3 ml(4)将溶液定容至250ml(5)用棕色瓶分装于4度冰箱中(6)如使用,用水浴加热溶解.4.氯仿-异戊醇的配制:配制方法(1)简单的体积混合,既要求比例为24:1即可(2)储存于棕色玻璃瓶子中(3)置于4度冰箱以便日后使用5.去污剂:CTAB:可将细胞膜裂解,使DNA释放到提取液中,同时也使组织匀浆中的蛋白质变性.EDTA:能与DNase的辅助因子Mg2 结合,使DNase失去活性,不能降解从细胞中释放的DNA.6.还原剂巯基乙醇:它抑制从细胞中释放的多酚氧仿.防止植物组织发黄变褐.7.氯仿—异戊醇:它可把组织匀浆中变性的蛋白质除去,将DNA与细胞中的蛋白质、碳水化合物等分开除去.8.RNase:它可去除核酸中的RNA,只留下DNA.9.硅珠悬浮液的配制(1)称取1.2g硅珠粉,溶解于10ml无菌水中.(2)放入4℃冰箱备用.(3)使用时先涡旋使其混合均匀10. 10×TE,500ml配制如下:将100mM Tris-Hcl(PH=8.0)6.057g与10mM EDTA(PH=8.0)1.8612g溶于400ddH2O中,调PH=8.0,定容到500ml。
试验各种试剂的配制方法
组织培养实验有关试剂的配制:75%的酒精:75ml的95%的酒精加水定容至95ml。
0.2%的升汞溶液:称取HgCl2 20克,加蒸馏水至4000ml。
1N 盐酸:取8.25ml的浓盐酸,加蒸馏水定容至100ml。
1N NaOH:称8g NaOH,用蒸馏水定容至200ml。
0.1mg/ml的2,4-D溶液:取25mg的2,4-D,加入少量95%的酒精和1N的NaOH 溶解,再加蒸馏水定容至250ml。
0.1mg/ml 的6-BA溶液:取25mg的6-BA,用少量1N的盐酸溶解,再加蒸馏水定容至250ml。
遗传转化与GUS基因检测的试剂配制LB培养基的配制:将下列组分溶解在0.9L水中:1L10ml 的10mmol/l的AS(乙酰丁香酮)母液(100x)配制:称19.6mg的AS,先溶于少量甲醇中,然后慢慢加蒸馏水定容至10ml,过滤除菌,分装成200ul/管(每组1管),使用时将200ul的AS母液加入20ml的MS液体培养基中。
50mmol/l的磷酸钠缓冲液(pH 7.0):A液:取NaH2PO4.2H2O 3.12g溶于蒸馏水,定溶至100ml。
B液:取Na2HPO4.12H2O 7.17g溶于蒸馏水,定溶100ml。
取A 液39ml与B 液61ml混合,定容至400ml,调PH至7.0。
50mmol/L铁氰化钾母液:称3.295g,用蒸馏水定容至200ml50mmol/l亚铁氰化钾母液:称4.224g ,用蒸馏水定容至200ml。
0.5mol/l EDTA母液(pH8.0):药品分子量100ml 500mlEDTA Na2 2H2O 372.24 18.6g 93.06g双蒸H2O 80ml 400ml用NaOH调PH至8.0 6g 10gDdH2O定容至100ml 500mlGUS检测液的配制:100mgGluc,先溶于1ml的DMF。
取80ml 50mmol/l的磷酸钠缓冲液(pH 7.0),加入1ml 50mmol/L铁氰化钾、1ml 50mmol/L亚铁氰化钾和2ml 0.5mol/l EDTA(PH 8.0),再加入已溶解的Gluc,再加20ml的甲醇,混匀。
实验室试剂配制
实验室试剂配制1、0.083M KOH:0.1M KOH稀释12倍(PH必须大于12)2、酸性半饱和硫酸铵:取硫酸铵((NH3)2SO4)400g加蒸馏水500mL.置于37℃水浴24h不时搅拌,使达饱和,再冷至25℃,搅拌一次,使过量的(NH3)2SO4析出,上清液为饱和液,取上清夜400mL加1M HCL20mL。
蒸馏水加至800mL,混匀室温保存(PH必须大于3)3、17%异丙醇溶液:17mL异丙醇加0.1mol/L Tris 缓冲液(7.4)至100mL。
PH〉7.2方可。
4、10g/L(1%)联苯胺:1.0g联苯胺溶于90mL 冰醋酸内,然后加蒸馏水至100mL,贮于棕色瓶,置冰箱内可使用数周。
5、1%H2O2:30%H2O2新鲜配制(稀释30倍)6、100g/L(10%)醋酸溶液:取10mL冰醋酸,加蒸馏水至100mL7、标准Hb溶液:取以生理盐水洗涤过三次的压积红细胞与等体积蒸馏水,0.5倍体积四氯化碳混合,剧烈振荡5min后,离心20min(2,500r/min),吸取上层Hb液,用氰化高铁Hb法准确测定其浓度,稀释成100g/L(10%)Hb浓度,于低温冰箱保存,用时取0.01mL,加生理盐水至10g/L。
即为100mg/L(10mg%)应用标准液。
8、12.5g/L亚硝酸钠—葡萄糖溶液:亚硝酸钠:1.25葡萄糖:5加蒸馏水至100mL,用棕色瓶,4℃保存一个月。
9、0.0004mol/L美蓝溶液:美蓝(次甲基蓝,亚甲基蓝)15mg,加蒸馏水100mL,室温1~2个月。
10、0.02mol/L磷酸盐缓冲液(PH7.4):Na2HPO4·12H2O:229.5mg(1.1475g)KH2PO4:52.2mg(0.261g)加蒸馏水100mL(500mL)11、PH8.5 TEB缓冲液:Tris:10.2g(5.1g)EDTA:0.6g(0.3g)硼酸:3.2g(2.6g)加蒸馏水至1000mL(500mL)12、PH8.5硼酸缓冲液:硼酸5.56g硼砂(四硼酸钠)6.87g加蒸馏水至1000mL13、0.09%丽春红:丽春红S或G:1.8g三氯醋酸:26.8g磺柳酸:26.8g加蒸馏水至100mL用前将上液以蒸馏水稀释20倍使用14、氨基黑:氨基黑10B: 0.5g甲醇50mL冰醋酸:10mL蒸馏水:40mL溶解而成贮棕色瓶内15、漂洗液:甲醇(乙醇)45mL冰醋酸:5mL蒸馏水:50mL溶解而成16、透明液:无水乙醇:70mL冰醋酸:30mL混合而成17、PH6.5磷酸盐缓冲液:KH2PO4:3.11g Na2HPO4: 1.49g(Na2HPO4·2H2O 1.87g)蒸馏水900mL校正PH后稀释至1,000mL18、0.4NaOH:1M →稀释19、0.1Tris缓冲液(PH7.4):Tris: 1.21g 0.1N HCL 40mL加蒸馏水至100mL20、1.0mol/L盐酸标准液:浓盐酸MW=36.465,比重1.18,含HCL 36%~38%。
实验室试剂配制及实验方法
PBS缓冲液的配制(1PBS)NaCl 8gKCL 0.2gNa2HPO4 1.44gKH2PO4 0.24g调pH至7.4,加去离子水至1000ml,放于4℃备用。
Hank's 液用于冲洗动物组织和细胞,具有等渗和一定的酸性缓冲能力。
本实验中使用的是无钙、无镁Hank's 液(又称D- Hank's液),具体配方如下:NaCl 8.00gKCl 0.40gNa2HPO4.12H2O 0.134gNaHCO3 0.35g1%酚红 2ml加去离子水至 1000ml10磅高压灭菌10分钟,0-4℃储存备用。
使用前将调pH至7.2-7.4。
胰酶 (0.25%)NaCl 8gKCl 0.4g柠檬酸钠(5H2O) 1.12g磷酸二氢钠(2H2O) 0.056g碳酸氢钠 1g葡萄糖 1g胰酶 2.5g加去离子水至 1000ml用滤器过滤除菌,分装后放于-20℃备用。
大肠杆菌感受态细胞的制备按分子克隆实验指南中的氯化钙法制备感受态细胞。
以无菌的接种环取冻存的JM83菌种划线接种于LB琼脂平板上,37℃温箱培养过夜。
次日挑取生长好单个菌落接种于5ml LB 培养液中37℃振荡培养过夜。
取1ml过夜培养液接种到100ml LB液体培养基中,37℃剧烈振荡培养2-3小时使OD600达到0.4左右。
在无菌条件下将细菌培养物倒入灭菌后冰预冷的离心管中,冰浴10分钟,4℃1600g离心10分钟后尽弃上清。
加入100ml冰预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液重新悬浮沉淀的细胞,在冰浴中放置30分钟,4℃1600g离心10分钟后尽弃上清。
加入10ml冰预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液再次悬浮沉淀的细胞,加入终浓渡为15% 灭菌的甘油,混匀后分装为200 μl/管,直接用于转化或置-70℃冰箱保存备用。
CEF细胞制备取10日龄的SPF鸡胚,先后用碘酒棉和酒精棉消毒气室部位,无菌取出鸡胚,用Hank's液洗涤胚体,去头、四肢和内脏,剪成2mm大小的组织块,用0.25%胰酶溶液(4ml/胚)在37℃水浴中消化12分钟左右,然后倒掉胰酶,用不含血清的Hank's液洗涤2~3次后,再加入适量的营养液(DMEM),吹打分散细胞,用6层纱布过滤,制成每毫升含活细胞数106-107个的细胞悬液,分装为5 ml/60mm平皿,制成CEF单层细胞。
实验室试剂配制方法
测总汞、溶解态汞试剂配制:1、 氯化溴(BrCl ): 配制100mL 的BrCl 溶液。
取100ml 超纯盐酸(HCl)到经500C 灼烧冷却后、容积为100-150ml 的无汞烧杯里,将烧杯放到电磁搅拌器台面上,再称取1.08g KBr (精确到0.0001)加入100mL 超纯盐酸(HCl)中, 用磁力搅拌器搅拌1小时,然后边搅拌边缓慢加入1.52g 的KBrO 3(精确到0.0001),颜色变化由淡黄-红-橙-淡黄,用保鲜膜轻轻盖下再搅拌1小时,将配制好的BrCl 溶液转移到干净的200ml 硼硅玻璃采样瓶中,盖紧瓶塞常温或冷藏备用即可。
保质期长,避免污染即可。
(注意:需在通风橱操作)2、 氯化亚锡(SnCl 2): 配制100mL 的样品。
称取20gSnCl 2·H 2O 溶解在装有10mL 超纯盐酸的烧杯中(微热助溶),待完全溶解为无色透明的溶液后将溶液转移到100ml 容量瓶中,加入适量超纯水,以300mL/min 的速度用纯氮载气除汞6-8小时,用超纯水定容到100mL 盖紧瓶塞,冷藏即可。
保质期至少一周,如发现溶液变得浑浊则说明已过期,不可再用。
3、 盐酸羟胺(NH 2OH·HCl ):称取25g 的NH 2OH·HCl 溶于100mL 的超纯水中,待完全溶解加入100μL 的SnCl 2摇匀,以300mL/min 的速度用无汞氮气除汞6-8小时盖紧瓶塞即可。
此过程同上,均为现在干净的烧杯中配制,最后移入采样瓶或容量瓶。
无需冷藏,远离污染源即可。
4、 汞标准溶液配制:① 原始汞标准溶液浓度:10μg/mL用移液器取1mL 的原始汞标准溶液(稀释100倍)加入到89mL 的超纯水中,再加入10mL 的超纯盐酸即100ng/mL 标准溶液。
②配制1 ng/mL 的汞标准溶液用移液器取1mL ①配好的100ng/mL 汞标准溶液(稀释100倍)加入到89mL 的超纯水中,再加入10mL 的超纯盐酸即1ng/mL 标准溶液。
各实验试剂配制方法
NOx的测定试剂配制1、1・0Og/L盐酸萘乙二胺贮备液:称取0.50g(N-l-萘基)乙二胺盐酸盐(C1O H7NH(CH2)NH2・2HC1)于500ml容量瓶中,用水稀释至标线。
此溶液贮于密闭的棕色试剂瓶中,在冰箱中冷藏可稳定三个月。
2、显色液:称取5.0g对氨基苯磺酸(NH2C6H4S03H),溶解于约200ml热水中,将溶液冷却至室温,全部移入1000ml容量瓶中,加入50.0ml盐酸萘乙二胺贮备液和50ml冰乙酸,用水稀释至标线。
此溶液于密闭的棕色瓶中,在25°C以下暗处存放,可稳定三个月。
若呈现淡红色,应弃之重配。
3、吸收液:临用时将显色液和水按4+1(V/V)比例混合,即为吸收液。
吸收液的吸光度不超过0.005(540nm,lcm比色皿,以水为参比)。
否则,应检查水、试剂纯度或显色液的配制时间和贮存方法。
4、亚硝酸钠标准贮备液:准确称取0.3750g亚硝酸钠(NaN02,优级纯,预先在干燥器内放置24h)溶解于水,移入1000ml容量瓶中,用水稀释至标线。
贮于密闭的棕色试剂瓶中,可稳定三个月。
此溶液每毫升含0.250mg亚硝酸根。
5、亚硝酸钠标准使用液:吸取亚硝酸钠标准贮备液1.00ml于100ml容量瓶中,用水稀释至标线。
临用前现配。
此溶液每毫升含2.5审亚硝酸根。
6、硫酸溶液C(1/2H2S04)=lmol/L:取15ml硫酸(p=1.84g/m1)徐徐加入500ml水中。
7、酸性高锰酸钾溶液:称取25g高锰酸钾,稍微加热使其全部溶解于500ml水中,然后加入lmol/L硫酸溶液500ml,混匀,贮于棕色试剂瓶中。
SO2的测定试剂配制1、环己二胺四乙酸二钠溶液C(CDTA-2Na)=0.0050mo1/L:称取1.82g反式-1,2-环己二胺四乙酸((trans-1,2-Cyc1ohexy1enedinitri1o)tetraaceticacid,简称CDTA),加入1.50mo1/L的氢氧化钠溶液6.5ml,溶解后用水稀释至100ml。
实验室常用试剂配制
实验室常用溶液的配制1mol/L亚精胺(Spermidine):溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammoniumacetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾(potassiumacetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠(sodiumacetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
1mol/LHCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
1mol/LMgCl2:溶解20.3gMgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
5mol/L氯化钠(NaCl):溶解29.2g氯化钠于足量的水中,定容至100ml。
10N氢氧化钠(NaOH):溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-freeRNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH5.0)。
溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。
用1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。
(配制过程中要戴手套)。
2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
实验室常用试剂配制方法
实验室常用试剂配制方法一、50×TAE:称242g Tris溶于800mL 双蒸水中,加入57.1mL 冰醋酸和18.6g(或100mL 0.5mol/L,pH=8.0)EDTA,再加水定容至1L,室温保存备用。
二、1×TAE:将50×TAE加双蒸水稀释至1×使用。
三、LB液体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)和10g NaCl,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,冷却至室温后4℃保存备用。
四、100mg/mL氨苄青霉素(Amp):称取100mg粉末状氨苄青霉素(Amp)置于1.5mL 离心管中,加入800μL 无菌水使其完全溶解,定容至1mL,-20℃保存备用。
五、LA液体培养基:按照x mL培养基加入x μL的比例将100mg/mL的氨苄青霉素(Amp)加入LB液体培养基中,4℃保存备用。
六、LB固体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)、10g NaCl和15g琼脂粉,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,稍冷却后按照x mL培养基加入x μL的比例加入100mg/mL的氨苄青霉素(Amp),充分混匀后倒入培养皿中制成琼脂平板,4℃保存备用。
(1L培养基大约可以倒40个平板)七、200mg/mL IPTG:称取2g 粉末状IPTG溶于8mL 双蒸水中,再定容至10mL,配成200mg/mL 溶液,(用0.22μm滤膜过滤除菌,)分装为每份1mL,-20℃保存备用。
八、20mg/mL X-gal:将X-gal溶于二甲基甲酰胺,配成20mg/mL,分装后于-20℃避光保存。
九、DEPC水:将水加入干净玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(v/v),放置过夜,高压湿热灭菌,4℃保存备用。
实验室常规试剂的配制方法
实验室常规试剂的配制方法1.NaCl溶液的配制方法:a.准备所需的NaCl粉末和蒸馏水。
b.秤取适量的NaCl粉末,并加入容量瓶中。
c.用蒸馏水加至容量瓶刻度线,并摇匀,即可得到所需浓度的NaCl 溶液。
2.HCl溶液的配制方法:a.准备所需的浓盐酸和蒸馏水。
b.将适量的浓盐酸缓慢地加入容量瓶中。
c.用蒸馏水加至容量瓶刻度线,并摇匀,即可得到所需浓度的HCl溶液。
3.NaOH溶液的配制方法:a.准备所需的固体NaOH和蒸馏水。
b.将适量的固体NaOH加入容量瓶中。
c.用蒸馏水加至容量瓶刻度线,并摇匀,即可得到所需浓度的NaOH 溶液。
4.氯仿与甲醇混合溶液的配制方法:a.准备所需的氯仿和甲醇。
b.按照所需比例将氯仿和甲醇倒入容量瓶中。
c.盖上瓶盖并轻轻摇匀,即可得到所需混合溶液。
5. 缩醛试剂(Tollens试剂)的配制方法:a.准备所需的银氨溶液和碳酸钠溶液。
b.将适量的银氨溶液和碳酸钠溶液按照1:1的比例混合。
c.摇匀并储存在避光瓶中,使用时需小心避免暴露在阳光下。
6.高锰酸钾溶液的配制方法:a.准备所需的高锰酸钾和蒸馏水。
b.将适量的高锰酸钾溶解在蒸馏水中,直至完全溶解。
c.配制过程中要小心搅拌,以促进高锰酸钾的溶解。
以上是一些常规试剂的配制方法,需要根据实际需求按照比例配制和摇匀。
在操作过程中要注意安全,如佩戴适当的实验室防护设备,保持实验区域清洁整齐,避免试剂的交叉污染。
另外,也需要注意在配制过程中仔细阅读试剂使用说明书,并根据安全操作指南进行操作。
常用实验试剂配制
1DEPC水(1‰) 1000ml 水1ml DEPC根据需要确定要配的体积,泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用,泡24小时。
配液体的DEPC水37℃过夜,送至高压,然后配相关溶液。
20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris1000ml DEPC水用HCL调ph至7.5,高压备用。
3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压)将溶液持续加热至60℃左右,搅拌之至完全溶解,注意温度不要超过65℃,否则PFA降解失效。
30.2% 甘油/0.1M tris20ml 甘油980ml 0.1Mtris4 20XSSC Nacl 175.3g(ph 7.0)柠檬酸钠88.2gDEPC水1000ml分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用5 HEPES 溶液HEPES 23.8g(ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml6 50X Denhaldt′s 液聚蔗糖(Ficoll 400)0.2g聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g牛血清蛋白(BSA)0.2gDEPC 水20ml7 预杂交bufferDeinoized formanmid 5ml20X SSC 1.5ml1M HEPES 0.5ml50X Denhanldt′s液1ml龟精DNA 0.6ml(4ug/ul)DEPC水 1.4ml龟精要先95℃10-15min加热变性,随即冰浴。
杂交buffer分装后-20℃保存。
8Washing buffer(ph7.5) maleic acid 5.8gNACL 4.4gTween(吐温) 1.5ml定容至溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween9Maleic acid buffer(ph7.5) Maleic acid 5.8gNacl 4.4g定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl10Detection buffer(ph 9.5)0.1M Tris-Hcl 7.9g (9.0g)0.1M Nacl 2.9g定容至500ml.使溶质的终浓度为0.1M Tris-Hcl ,0.1M nacl.11blocking reagent(封闭液)(2-8℃保存)(bottle 5) 5gmaleic acid buffer 50ml12blocking solution封闭液(新鲜配制)1mlMaleic acid buffer 10ml13抗体(AP)10000rpm离心5min,吸上清,1:5000稀释,考虑先稀释100倍,用时再稀释。
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NOx的测定试剂配制1、1.00g/L盐酸萘乙二胺贮备液:称取0.50g(N-l-萘基)乙二胺盐酸盐(C10H7NH(CH2)NH2·2HCl)于500ml容量瓶中,用水稀释至标线。
此溶液贮于密闭的棕色试剂瓶中,在冰箱中冷藏可稳定三个月。
2、显色液:称取5.0g对氨基苯磺酸(NH2C6H4S03H),溶解于约200ml热水中,将溶液冷却至室温,全部移入1000ml容量瓶中,加入50.0ml盐酸萘乙二胺贮备液和50ml冰乙酸,用水稀释至标线。
此溶液于密闭的棕色瓶中,在25℃以下暗处存放,可稳定三个月。
若呈现淡红色,应弃之重配。
3、吸收液:临用时将显色液和水按4+1(V/V)比例混合,即为吸收液。
吸收液的吸光度不超过0.005(540nm,lcm比色皿,以水为参比)。
否则,应检查水、试剂纯度或显色液的配制时间和贮存方法。
4、亚硝酸钠标准贮备液:准确称取0.3750g亚硝酸钠(NaN02,优级纯,预先在干燥器内放置24h)溶解于水,移入1000ml容量瓶中,用水稀释至标线。
贮于密闭的棕色试剂瓶中,可稳定三个月。
此溶液每毫升含0.250mg亚硝酸根。
5、亚硝酸钠标准使用液:吸取亚硝酸钠标准贮备液1.00ml于100ml容量瓶中,用水稀释至标线。
临用前现配。
此溶液每毫升含2.5μg亚硝酸根。
6、硫酸溶液C(1/2H2S04)=lmol/L:取15ml硫酸(ρ=1.84g/m1)徐徐加入500ml水中。
7、酸性高锰酸钾溶液:称取25g高锰酸钾,稍微加热使其全部溶解于500ml水中,然后加入lmol/L硫酸溶液500ml,混匀,贮于棕色试剂瓶中。
SO 2的测定试剂配制1、环己二胺四乙酸二钠溶液C(CDTA-2Na)=0.0050mol/L :称取1.82g 反式-l ,2-环己二胺四乙酸((trans-1,2-Cyclohexylenedinitrilo)tetraacetic acid ,简称CDTA),加入1.50mol/L 的氢氧化钠溶液6.5ml ,溶解后用水稀释至100ml 。
2、甲醛缓冲吸收液贮备液:吸取36%~38%的甲醛溶液5.5ml ,0.050mol/L 的CDTA-2Na 溶液20.0ml ;称取2.04g 邻苯二甲酸氢钾,溶解于少量水中;将三种溶液合并,用水稀释至100ml ,贮于冰箱,可保存10个月。
3、甲醛缓冲吸收液:用水将甲醛缓冲吸收液贮备液稀释100倍而成,此吸收液每毫升含0.2mg 甲醛,临用现配。
4、氢氧化钠溶液C(NaOH)=1.50mol/L 。
5、0.60%(m/V)氨磺酸钠溶液:称取0.60g 氨磺酸(H 2NSO 3H)于烧杯中,加入1.50mol/L 氢氧化钠溶液4.0ml ,搅拌至完全溶解后稀释至100ml ,摇匀。
此溶液密封保存可使用l0d 。
6、碘贮备液C(1/2I 2)=0.10mol/L :称取12.7g 碘(I 2)于烧杯中,加入40g 碘化钾和25ml 水,搅拌至完全溶解后,用水稀释至1000ml ,贮于棕色细口瓶中。
7、碘使用液C(1/2I 2)=0.05mol/L :量取碘贮备液250ml ,用水稀释至500ml ,贮于棕色细口瓶中。
8、0.5%(m/V)淀粉溶液:称取0.5g 可溶性淀粉,用少量水调成糊状,慢慢倒入100ml 沸水中,继续煮沸至溶液澄清,冷却后贮于试剂瓶中。
临用现配。
9、碘酸钾标准溶液C(1/6KIO 3)=0.1000mol/L :称取3.5667g 碘酸钾(KIO 3,优级纯,经110℃干燥2h)溶解于水,移入1000ml 容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀。
10、盐酸溶液(1+9)。
11、硫代硫酸钠贮备液C(Na 2S 2O 3)=0.10mol/L :称取25.0g 硫代硫酸钠(Na 2S 2O 3·5H 2O),溶解于1000ml 新煮沸并已冷却的水中,加入0.20g 无水碳酸钠(Na 2CO 3),贮于棕色细口瓶中,放置一周后备用。
如溶液呈现混浊,必须过滤。
12、硫代硫酸钠标准溶液C(Na 2S 2O 3)=0.05mol/L :取250.0ml 硫代硫酸钠贮备液,置于500ml 容量瓶中,用新煮沸并已冷却的水稀释至标线,摇匀。
标定方法:吸取三份0.1000mol/L 碘酸钾标准溶液10.00m1分别置于250ml 碘量瓶中,加入70ml 新煮沸并已冷却的水,加入1g 碘化钾,摇匀至完全溶解后,加入(1+9)盐酸溶液10ml ,立即盖好瓶塞,摇匀。
于暗处放置5min 后,用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色,加入2ml 淀粉溶液,继续滴定溶液至蓝色刚好褪去为终点。
硫代硫酸钠标准溶液的浓度按下式计算:V C 00.101000.0⨯= (2-1-1)式中:C ——硫代硫酸钠标准溶液的浓度,mol/L ;V ——滴定所消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,ml 。
13、0.05%(m/V)乙二胺四乙酸二钠盐(Na 2EDTA)溶液:称取0.25gNa 2EDTA(C 10H 14N 2O 8Na 2·2H 2O),溶解于500ml 新煮沸但已冷却的水中,临用现配。
14、二氧化硫标准溶液:称取0.200g 亚硫酸钠(Na 2SO 3),溶解于200mlNa 2EDTA 溶液中,缓缓摇匀以防充氧,使其溶解。
放置2~3h 后标定。
此溶液每毫升相当于320~400μg 二氧化硫。
标定方法:吸取三份20.00ml 二氧化硫标准溶液,分别置于250ml 碘量瓶中,加入50ml 新煮沸但已冷却的水、20.00ml 碘使用液及lml 冰乙酸,盖塞,摇匀。
于暗处放置5min 后,用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色,加入2ml 淀粉溶液,继续滴定至溶液蓝色刚好褪去为终点。
记录滴定硫代硫酸钠标准溶液的体积V 。
另取三份Na 2EDTA 溶液20.00ml ,用同法进行空白试验。
记录滴定硫代硫酸钠标准溶液的体积V 0。
平行样滴定所耗硫代硫酸钠体积之差不应大于0.04ml ,取其平均值。
二氧化硫标准溶液的浓度按下式计算:()()100000.2002.323220⨯⨯⨯-=O S Na C V V C (2-1-2)式中:C ——二氧化硫标准溶液的浓度,μg/ml ;V 0——空白滴定所耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,m1;V ——二氧化硫标准溶液滴定所耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,ml ;C(Na 2S 203)——硫代硫酸钠标准溶液的浓度,mol/L ;32.02——二氧化硫(1/2SO 2)的摩尔质量。
在标定出准确浓度后,立即用甲醛缓冲吸收液稀释为每毫升含10.00μg 二氧化硫的标准溶液。
临用时再用此吸收液稀释为每毫升含1.00μg 二氧化硫的标准使用溶液。
此溶液在冰箱中5℃保存,可稳定1个月。
15、0.20%(m/V)盐酸副玫瑰苯胺(pararosaniline 简称PRA ,即副品红、对晶红)贮备液:盐酸副玫瑰苯胺的提纯方法及纯度质量检验应达到的指标见附录A 。
16、0.05%(m/V)盐酸副玫瑰苯胺使用溶液:吸取0.20%PRA 贮备液25.00ml 于100ml 容量瓶中,加入85%的浓磷酸30ml 、浓盐酸12ml ,用水稀释至标线,摇匀。
放置过夜后使用,避光密封保存。
碘量法测定DO试剂配制1、硫酸锰溶液:称取480g(MnSO4·4H2O或364gMnSO4·H2O)溶于水,用水稀释至1000ml。
此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中,遇淀粉不得产生蓝色。
2、碱性碘化钾溶液:称取500g氢氧化钠溶解于300-400ml水中,另称取150g碘化钾(或135g碘化钠)溶于200 ml水中,待氢氧化钠溶液冷却后,将两溶液合并,混匀,用水稀释至1000ml。
如有沉淀,则放置过夜后,倾出上清液,贮于棕色瓶中。
用橡皮塞塞紧,避光保存。
此溶液酸化后,遇淀粉应不呈蓝色。
3、1+5硫酸溶液。
4、1%(m/V)淀粉溶液:称取1g可溶性淀粉,用少量水调成糊状,再用刚煮沸的水冲稀至100ml。
冷却后,加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌防腐。
5、0.02500mol(1/6K2Cr2O7)重铬酸钾标准溶液:称取于105-110℃烘干2h并冷却的重铬酸钾1.2258g,溶于水,移入1000ml容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀。
6、硫代硫酸钠溶液:称取6.2g硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)溶于煮沸放冷的水中,加入0.2g碳酸钠,用水稀释至1000ml。
贮于棕色瓶中,使用前用0.02500mol/L重铬酸钾标准溶液标定,标定方法如下:高锰酸盐指数的测定1、草酸钠标准贮备液(0.1M):0.6705g烘干1h后→100ml定容2、草酸钠标准使用液(0.01M):10.0ml→100ml容量瓶3、(1+3)硫酸:配制时趁热滴加高锰酸钾溶液至微红色4、高锰酸钾贮备液(0.1M):3.2g高锰酸钾→1.2L,加热煮沸使体积减少→1L,暗处放置过夜,过滤后贮于棕色试剂瓶中,使用前用0.1M草酸钠标定,求浓度5、高锰酸钾使用液(0.01M):10.00ml→100ml定容色度,浊度实验试剂配制方法1、色度标液(500度):0.1748K2Cr2O7+4.000gCoSO4·7H2O+2.0ml硫酸→2L定容2、浊度标液(400度):硫酸肼溶液:10g→1L;六次甲基四胺:100g→1L浊度标液:取上述两种溶液各100ml→2L定容水中氨氮的测定试剂配制1、10%(m/V)硫酸锌溶液:称取10g硫酸锌溶于水,稀释至100ml。
2、25%(m/V)氢氧化钠溶液:称取25g氢氧化钠溶于水,稀释至100ml,贮于聚乙烯瓶中3、纳氏试剂:称取16g氢氧化钠,溶于50ml水中,充分冷却至室温。
另称取7g碘化钾(KI)和10g碘化汞(HgI2)溶于水,然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中,用水稀释至100ml,贮于聚乙烯瓶中,密塞保存。
4、酒石酸钾钠溶液:称取50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)溶于100ml水中,加热煮沸以除去氨,放冷,定容至100ml。
5、铵标准贮备溶液:称取3.819g经100℃干燥过的氯化铵(NH4Cl)溶于水中,移入1000ml 容量瓶中,稀释至标线。
此溶液每毫升含1.00mg氨氮。
6、铵标准使用溶液:移取5.00ml铵标准贮备液于500ml容量瓶中,用水稀释至标线。
此溶液每毫升含0.010mg氨氮。
水中氯化物的测定试剂配制1、NaCl标液:1.6496g→2L定容2、AgNO3溶液:(用5L烧杯配制)12g→5L3、铬酸钾指示剂:25g→500ml食醋总酸度的测定1、食醋:取冰乙酸250m→l5L2、NaOH溶液0.06M左右:取NaOH 72g→30L,之后用草酸标液进行标定3、草酸标液0.024M(精确):取草酸0.756g定容至250ml4、酚酞指示剂:混合碱分析1、混碱一:Na2CO3:NaHCO3=74.2g:42g(Na2CO3于180-200℃干燥2h后放于干燥器中)2、混碱二:NaOH:Na2CO3=40g:106g3、Na2CO3标液0.0400M:取1.0600g Na2CO3→250ml4、0.1000M的HCl标准溶液的配置和标定:取9ml HCl→1L标定方法:分别取3份25.00ml Na2CO3标液于3个250ml 锥形瓶中,每个锥形瓶中加2滴甲基橙,分别用HCl溶液滴定至黄色变成橙红色,记录V HCl,计算平均值V,计算,C HCl=2C Na2CO3╳25/V平均平均5、酚酞指示剂0.1%(90%乙醇溶液)6、甲基橙指示剂0.05%水溶液生活用水总硬度的测定1、Ca2+标液0.015M(精确):称CaCO33.0000g于250ml烧杯中,加少量水润湿,盖好表面皿,从杯嘴沿玻璃棒加HCl(1:1)30ml,使之完全溶解,加热煮沸,冷却后定容至2L2、10%NaOH溶液:100g NaOH→1L3、三乙醇铵溶液(粗):三乙醇胺:水=1:24、NH3·H2O-NH4Cl缓冲溶液:称54g NH4Cl溶于水中,加浓氨水410ml,加水稀释至1L5、铬黑T:0.5g 铬黑T溶于75ml无水乙醇,+25ml 三乙醇胺加碘盐中碘酸钾含量的测定1、KIO3标液(精确):取0.5g KIO3定容至1L,取40ml上述溶液定容至2L2、H2SO4 0.1M:取98%H2SO4 55.5ml→10L3、KI-淀粉:取淀粉5g→1L沸水,煮至清亮,加5gKI,加2mlNaOH(0.2M:4g→500mL)。