细胞工程技术概论
细胞工程概述
第二章细胞工程第一节细胞工程概述学习目标一、知识与技能1.简述细胞工程的基本技术。
2.举例说出细胞工程的应用。
二、过程与方法1.通过阅读生物科学史,简述细胞工程的发展过程。
2.利用教材,归纳出细胞工程的基本技术。
三、情感、态度和价值观1.关注细胞工程研究的发展和前景。
课前导学1.二、细胞工程的基本技术1.细胞工程的概念:以______________为基本单位,在体外无菌条件下培养、繁殖或利用细胞融合、核移植等技术使细胞某些生物学特性按照人们的意愿发生改变,从而改良生物品种、创造新品种和加速繁育生物个体,以及获得某些有用的细胞代谢产物的技术。
2.细胞工程的分类(1)根据研究对象的不同分类:________ __细胞工程,______ _ __细胞工程,____________ 细胞工程。
(2)根据所使用技术的不同分类:①______________技术:在无菌条件下________________植物细胞或组织,将其放在适当的培养基上,给予必要的生长条件,使它们在体外继续生长、增殖与分化,形成新的组织、器官和个体的技术。
②______________技术:采用自然或人工的方法使2个或多个_______________细胞融合为一个细胞的技术。
常用的促进细胞融合的方法有生物法(如________________)、化学法(如________________)和物理法(如________________)等。
③______________技术:将一个细胞的_____________转移到另一个__________的细胞中去,从而使受体细胞获得新的遗传信息,产生新的生命现象的技术。
.④_____________工程:人们按照一定的设计,有计划地消减、添加或替换同种或异种染色体,从而达到________________改变遗传性状和选育新品种的一种技术。
三、细胞工程的应用1.快速培养花卉及濒危植物2.获得无病毒作物3.开发洁净能源减少环境污染4.繁殖优良家畜品种及濒危动物5.医疗领域的应用质疑讨论1.常用的促进细胞融合的方法有哪几种?2.最常用的促进细胞融合的诱导剂是什么?3.细胞融合技术依据的原理是什么?反馈矫正1.下列关于细胞工程技术的叙述中,错误的是()A.以细胞为基本单位进行操作B.植物细胞间融合时需要去除细胞壁C.核移植时主要借助显微操作仪D.20世纪70~80年代已经培育出动植物之间杂交的新品种2.下列技术中,一般来说不属于细胞工程范围的是()A.组织培养B.细胞核移植C.基因芯片的应用D.细胞融合3.下列与细胞工程无关的是()A.克隆羊“多利”的产生B.2种烟草体细胞杂交获得新植株C.利用植物组织培养技术培育郁金香D.葡萄的嫁接4.下列细胞工程技术中,不涉及遗传物质改变的是()A.植物组织培养B.动物细胞融合C.细胞核移植D.真菌细胞融合5.植物体细胞在杂交前,需先除去细胞壁,这一过程中使用酶解法,所使用的酶是()A.蛋白质B.淀粉酶C.纤维素酶D.脂肪酶6.在细胞工程——原生质体融合育种技术中,其技术的重要一环是将营养细胞的细胞壁除去,通常是采用纤维素酶和果胶酶的酶解破壁法处理。
第四章 细胞工程(生物技术概论)
殖兰花的方法,在此基础上,国际上建立了兰花
工业,取得了巨大的经济效益和社会效益。
3、花药培养技术 1973年,Nitch采用花药预培养的方法,首次
获得了烟草花粉植株。 4、次生产物生产
(三) 植物细胞工程的任务 (1)研究植物器官、组织和细胞在离体培养条件 下,所需要的有机营养、无机营养、植物激素等培 养条件和刺激因素。 (2)研究植物器官、组织和细胞,在离体培养条 件下,所需的温度、湿度和光照等环境条件。 (3)研究植物的不同生理年龄、遗传组成(基因 型)在离体培养条件下,形态发生的规律。 (4)研究离体培养条件下再生植株群体的遗传稳 定性和变异性。
(二)植物细胞工程的发展历史 探索阶段(1902-1929)
1902年,德国植物学家Haberlandt提出了高等植
物的器官和组织可以不断分割,直至分到单个细胞的 观点。他认为,如果每个细胞都有植物个体一样的性 质和能力,那么可以通过植物细胞培养,把单个细胞 培养成一个新个体。
在此思想指导下,许多科学家从事组织培养研 究. 1904年,德国植物胚胎学家Hanning 用萝卜和 辣根的胚进行离体培养,提早长成了小植株,首次 获得胚培养成功。 成熟 发芽 常规 幼胚 ―→ 种子 ―→ 植物 培养 幼胚 ―→ 植株
交中利用的可能性。
培养技术建立阶段(1930-1959)
作为一门技术,它必须具有一定的程序性。
也就是说,它应该具有一定的技术模式。在这一阶 段,植物组织培养建立了两个与培养技术有关的重 要模式,一是培养基模式,二是激素调控模式。
1934年,White 等用番茄根尖的组织培养,建 立了第一个活跃生长的无性繁殖系。1934年,
盛慧珍教授(右二)正在指导学生做实验
生物技术概论2细胞工程
第二章 细 胞 工 程
第二章 细 胞 工 程
• 三、植物细胞原生质体的制备与融合
• (一)原生质体的制备 • 1. 取材与除菌 • 2. 酶解 • 3. 分离 • 4. 洗涤 • 5. 鉴定
第二章 细 胞 工 程
• (二)原生质体的融合
• 1. 化学法诱导融合
第二章 细 胞 工 程
• 五、人工种子的研制
• (一)人工种子的构成及特点 • 1. 人工种皮 • 2. 人工胚乳 • 3. 胚状体
第二章 细 胞 工 程
• 人工种子具有以下突出的优点:
• ①可以不受环境因素制约,一年四季进行工厂化生产; • ②由于胚状体是经人工无性繁育产生,有利于保存该种系 的优良性状; • ③与试管苗相比,人工种子成本更低,更适合于机械化田 间播种; • ④可根据需要在人工胚乳中添加适量的营养物、激素、农 药、抗生素、除草剂等,以利胚状体的健康生长。
第二章 细 胞 工 程
• (三)杂合体的鉴别与筛选
• 1. 杂合细胞的显微镜鉴别
• 2. 互补法筛选杂合细胞
• 3. 采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 • 4. 根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别
第二章 细 胞 工 程
• 四、单倍体植物诱发与利用
• (一)花药培养
• 1. 选取成熟度适中的花蕾或幼穗 • 2. 花药预处理 • 3. 选择适当的培养基与培养条件
第二章 细 胞 工 程
第二章 细 胞 工 程
• 2. 外植体的消毒灭菌
第二章 细 胞 工 程
• 对外植体除菌的一般程序如下: • 外植体→自来水多次漂洗 • →消毒剂处理→无菌水反复冲洗
细胞工程概论概要(1)新
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1.2. The cell history
Three indispensable theories upon which the science of biology is built. The theory of evolution The cell theory The theory of equilibrium thermodynamics
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All
living things are composed of one or more cells. Cell has the special features of living thing.
Movement
Respiration
Sensitivity to environment Growth Reproduction Metabolism
Plant Cell Prokaryotic cells and plant cells both have a rigid cell wall made up of polysaccharides. Plant cells have the chloroplast which is the site of photosynthesis. While animal and plant cells have the mitochondrion which is the site of aerobic respiration. The vacuoles, large empty appearing areas in the cytoplasm, are usually found in plant cells where they store waste. Vesicles are much smaller than vacuoles in animal cells.
第二章 细胞工程第一节 细胞工程概述第二节 细胞工程基础知识
第二章细胞工程第二章细胞工程●第一节细胞工程概述●第二节细胞工程基础知识●第三节植物细胞工程●第四节动物细胞工程●第五节微生物细胞工程(略)第一节细胞工程概述一、定义●应用细胞生物学和分子生物学的方法,通过类似工程学的步骤,在细胞或细胞器水平上,改变细胞内的遗传物质以获得新细胞或新种产品的一门综合性科学技术。
二、操作对象:●细胞、受精卵、细胞器(原生质体、细胞核、染色体等)三、主要内容:●植物细胞工程●动物细胞工程●微生物细胞工程第一节细胞工程概述四、关键技术●无菌操作技术(非常严格)●细胞培养技术(离体培养)●细胞融合技术五、重要应用●优质植物快速培育与繁殖●优质动物的快速繁殖●生产活性产物和药品●新型物种的培育●器官修复和移植●珍稀濒危动植物资源的保护第一节细胞工程概述六、基本原理细胞的全能性(cell totipotency):一个细胞中包含着这种生物的全部遗传信息(基因),在适当的条件下可以发育成一个完整的生物体,这种潜在的能力——全能性七、与其他生物工程的关系基因工程细胞工程酶工程发酵工程产品生化工程转基因小结:细胞工程概述●一、定义●二、操作对象:●三、主要内容:●四、关键技术●五、重要应用●六、基本原理●七、与其他生物工程的关系第二节细胞工程基础知识(复习) 一、细胞生物学基础(一)细胞的结构与功能真核细胞的基本结构光镜下结构细胞膜细胞质细胞核电镜下结构膜相结构非膜相结构细胞膜内质网高尔基复合体线粒体溶酶体过氧化氢体核膜核糖体中心粒微管微丝中等纤维细胞质基质核仁染色质核基质生物膜在结构上的联系细胞内的各种膜在结构上存在着直接或间接的联系在蛋白质的合成、运输与分泌过程中还需要能量,这些能量主要是由线粒体通过有氧呼吸合成的ATP 提供的。
线粒体的内膜上有进行有氧呼吸所需的各种酶。
由此可见,细胞内的各种生物膜不但在结构上互相连系,在功能上也是既有分工又相互联系的。
各种生物膜的分工合作、相互配合是细胞生命活动协调进行的结构与功能的基础。
细胞工程
在食品生物工程领域中,我 们常常利用各种微生物发酵生产 蛋白质、酶制剂、氨基酸、维生 素、多糖、低聚糖及食品添加剂 等产品。为了使其高产优质,除 了通过各种化学、物理方法诱变 育种及基因工程育种外,采用细 胞融合技术或原生质体融合技术 也是一种有效的方法。同时,采 用动物、植物细胞大量培养生产 各种保健食品的有效成分及天然 食用色素等都是生物工程领域的 重要组成部分,在食品、医药及 化工等领域得到广泛应用。
现在新的细胞融合方法正在尝试将各种物 理、化学手段综合应用,使细胞融合的方法和手 段操作更为简便,便于量化研究,同时又能使融 合率得到不断提高的方向发展 细胞融合技术的不断改进一方面表现在融 合剂上,另一方面体现在新方法上,再者体现在 融合对象的不断扩展上。 现在新的细胞融合方法正在尝试将各种物 理、化学手段综合应用,使细胞融合的方法和手 段向操作更为简便,便于量化研究,同时又能使 融合率得到不断提高的方向发展。
没有种子, 如何繁殖?
植物繁殖的新途径
微型繁殖技术
概念: 快速高效实现种
苗繁殖,培育优良
植物品种的植物 组织培养技术。
获得无病毒作物
脱毒苗
脱毒技术
马铃薯疮痂病 脱毒马铃薯
有用次数代谢产物生产
1.种类: 蛋白质,脂肪,糖类,药物,香料,生物碱等。
2.技术: 植物的组织培养----愈伤组织细胞培养。
动物细胞工程 植物细胞与组织培养
二、细胞工程基本技术
细胞工程
植物细胞工程 按 对 象 分 类 按 技 术 分 类 细胞融合 细胞核移植 染色体工程
微生物细胞工程
2.1植物细胞与组织培养
在无菌条件下,分离植物细胞或组织,将其 放在适当的培养基上,给予必要的生长条件,使他 们在体外继续生长、增殖与分化,形成新的组织、 器官和个体的技术。
细胞工程(cell engineering)技术
细胞工程(cell engineering)技术广义的细胞工程(cell engineering)指所有应用于生物学和医学的、以细胞为操作对象的技术手段,其中也包括细胞培养。
一般地说,细胞工程主要指应用各种手段对细胞不同结构层次(整体、细胞器、核、基因等)进行改造,如进行细胞融合、核移植、基因转移等,以获得具有特定生物学特性的细胞。
一.细胞融合技术在细胞自然生长情况下,或在其他人为添加因素存在下,使同种细胞之间或不同种类细胞之间相互融合的过程,即为细胞融合(cell fusi on)。
通过细胞融合,可将来源于不同细胞核的染色体结合到同一个核内,结果形成一个合核体的杂种细胞。
细胞在生长过程中,可能发生自发的融合,但几率很低。
在实际工作中常采用各种促融合手段,包括病毒类融合剂如仙台病毒、化学融合剂如聚乙二醇(PEG)及电激融合法等。
在进行细胞融合反应和适当时间的培养后,需要通过一定方法对两种亲本细胞融合产生的具有增殖能力的杂种细胞进行筛选。
筛选方法主要包括药物抗性筛选、营养缺陷筛选和温度敏感性筛选等。
细胞融合最典型的应用是单克隆抗体技术。
细胞融合技术的发展和骨髓瘤细胞株的建成促成了B细胞杂交瘤技术的建立和单克隆抗体技术的成功。
1975年Koehler和Milstein将用绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞和体外培养能长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合,获得了具有两种亲本细胞特性的杂交细胞,即既能在培养条件下长期生长增殖,又能分泌特异的抗绵羊红细胞的抗体的B淋巴细胞杂交瘤。
对这种融合细胞进行克隆化以后,即可获得来自同一细胞克隆的抗体,这种抗体具有高度的均一性,称为单克隆抗体。
二.核移植技术细胞核移植(nuclear transfer)是指将一个双倍体的细胞核(可来自胚胎细胞或体细胞)移植到去核的成熟卵母细胞或受精卵中。
重组的卵细胞可以植入母体,并能发育为与供核细胞基因型相同的后代,因此又称为动物克隆技术。
1997年诞生的克隆羊“多利”就是体细胞核移植技术的产物。
生物技术概论细胞工程
5、融合细胞的发育动态 (1)核质重组 核1+质1+核2+质2 核1+质1+核2 核1+核2+质2 核1+质1+质2 核2+质1+质2 核1+质2 质1+核2
(2)细胞器重组:线粒体 叶绿体 (3)部分核物质或细胞器丢失 (4)核分裂的非同步性 6、融合体细胞杂种的特点 形态上的趋中性:大小、形状等 变异幅度大 非整倍性 双亲性状的共显性 偏亲现象
3、微生物细胞工程:微生物遗传改良、创造。
三、细胞工程基本技术
1、无菌操作技术:保持材料、培养基、材料生长环境无
菌的操作技术。
2、细胞培养技术:细胞在体外无菌条件下的保存、生长
和发育成新的个体的技术。
3、细胞融合技术:使两个及以上细胞细胞膜发生重排,细
胞合并、遗传物质重组的技术。
4、细胞分离技术:获得用于培养的单细胞方法。
二、花药培养
首先报道通过花药培养获得单倍体植株成功的是印度学者 Guha和Maheshwari (1964, 1966)。目前已有250多种植物花 药培养成功。
花药培养的基本程序是: 外植体选择-外植体(花蕾)预处理—外植体消毒—剥取花 药—接种—诱导培养—分化培养
1.外植体的选择: 遗传背景、 生理状态、 花粉的发育时期
第四节 原生质体融合与培养
一、原生质体的概念
·1、原生质体(protoplast):指除去细胞壁的细胞或是一个被 质膜所包围的裸露细胞。 ·2、亚原生质体(subprotoplast):丢失部分细胞内含物的原 生质体。 ——核质体(nuclearplast):由原生质膜和薄层细胞质包围细 胞核形成的亚原生质体。 ——胞质体(cytoplast):不含细胞核而仅含有部分细胞质 的亚原生质体。
生物技术概论 第四章 细胞工程PPT课件
Cell Engineering
1
内容
(1)细胞工程概念 (2)细胞工程的发展 (3)细胞工程基本大技术 (4)细胞工程的操作流程 (5)细胞工程技术的应用
2
一、细胞工程的概念
1、细胞工程在现代生物技术中的作用 2、细胞工程的概念 3、细胞工程的范畴 4、细胞工程的理论基础
3
1、细胞工程在现代生物技术中的作用
12
大规模的细胞培养可分为三个层次: 单个细胞培养、组织培养和器官培养。植 物细胞和原生质体培养技术可以用于育种, 也可用于各类植物的快速繁殖,在培养无 毒苗、长期贮存种子和生产次生代谢产物 等方面发挥作用。动物细胞培养技术可用 于制取许多有应用价值的细胞产品,如疫 苗和生长因子等。利用细胞培养系统可进 行毒品和药物检测;一些培养细胞可用于 治疗。
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(2)染色体组工程
染色体组工程是整个改变染色体组数 的技术。自从1937年秋水仙素用于生物学 后,多倍体的工作得到了迅速发展,例如 得到四倍体小麦,八倍体小黑麦等。
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(3)细胞质工程
又称细胞拆合工程,是通过物理或化 学方法将细胞质与细胞核分开,再进行不 同细胞间核质的重新组合,重建成新细胞。 可用于研究细胞核与细胞质的关系的基础 研究和育种工作。
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32
2、细胞培养技术
细胞培养是指动物、植物和微生物细胞在体 外无菌条件下的保存和生长。细胞培养技术包括:
1)取材除菌; 2)配制培养基; 3)对培养基除菌或灭菌; 4)采用无菌操作进行接种; 5)在培养室培养,并控制种类细胞生长所 需的最佳培养条件,如温度、湿度、光照、氧气、 二氧化碳等;当细胞达到一定生物量时应及时收 获或传代。
5
3、 细胞工程的研究范畴
细胞工程概论
诱导
B、胚状体途径
•愈伤组织在一定的诱导条件下胚状体,由 胚状体发育成再生植株; •外植体可以不经过愈伤组织直接形成胚状 体。
诱 导
外植体 愈伤组织 诱 导
胚 状 体
植株
诱导
胚状体
概念: ►植物离体培养中; ►起源于一个非合子细胞; ►经过胚胎发生和胚胎发育过程; ►具有双极性的胚状结构。 发育过程类似合子胚:球形胚状体、心形胚状体、鱼雷形 胚状体。
合子发育成胚的过程
Black gram 的胚状体途径
Muruganantham 等2010
继代培养:更换新鲜培养基来繁殖同 种类型的材料(愈伤组织、芽)。
生根培养:将芽苗转接到生根培养基 上培养成为完整植株的过程。
驯化移栽:
组培苗经人工炼苗 后移栽到驯化苗床 上使之适应 露地或 保护地条件的过程。
1948年,Skoog和Tsui(崔瀓) 揭示,在加有IAA和腺嘌呤的培 养基上,烟草茎段髓组织细胞可 分裂和生长,并分化形成不定芽。 从而确定了腺嘌呤/生长素的比 例是控制芽和根形成的主要条件 之一。
1954年,Jablonski和Skoog证实韧皮细胞存在可 促进细胞分裂的物质,Skoog和他的同事(崔溦) 试图鉴定出这种物质。 起初认为这种物质是生长素,所以在培养烟草髓 细胞时加入生长素,结果是生长素只促进细胞扩 大,不促进细胞分裂,甚至形成多核细胞,所以 韧皮部中促进细胞分裂的物质不是生长素。
Miller 将新鲜 DNA 用高压 处理,使其分解,再加 到培养基中,结果发现 也可促进细胞分裂,这 说明不是 DNA 本身,而是 DNA 的某种降解产物促进 细胞分裂。他们将这种 物质分离提纯,命名为 激动素(Kinetin ,KT ) 。
高三细胞工程知识点
高三细胞工程知识点一、细胞工程概述细胞工程是一门研究如何使用生物学、化学和工程学的方法来控制、改造和利用细胞的学科。
它涉及到细胞培养、细胞分离和纯化、基因转移和表达等技术,广泛应用于医学、农业、食品工业等领域。
二、细胞培养技术1. 细胞培养基的制备细胞培养基是支持细胞生长和繁殖所必需的营养物质的混合物。
常用的培养基包括DMEM、RPMI1640等,其中主要包括氨基酸、维生素、无机盐等成分。
2. 细胞的传代细胞的传代是指将细胞从一个培养皿中移入新的培养皿,以维持细胞的生长和增殖。
传代过程中需要注意细胞数量的控制、细胞的状态以及培养基的适应性等问题。
3. 细胞凋亡与增殖调控细胞凋亡是指细胞主动死亡的过程,而细胞增殖调控与细胞周期相关,包括细胞周期的调控因子以及细胞周期检查点等。
三、细胞分离和纯化技术1. 细胞分离方法常用的细胞分离方法包括机械分离、酶解法、渗透法等。
机械分离是通过机械力的作用将细胞从组织中分离出来,酶解法是应用特定的酶将细胞与周围组织分离,渗透法是利用渗透压差将细胞分离出来。
2. 细胞纯化方法细胞纯化是指将目标细胞从混合细胞群中提取出来的过程。
常用的细胞纯化技术包括流式细胞术、免疫磁珠法、密度梯度离心法等。
四、基因转移与表达技术1. 基因转染技术基因转染指的是将外源基因导入到目标细胞中。
常用的基因转染技术包括化学法、转染剂法、电穿孔法、病毒载体法等。
2. 基因表达技术基因表达是指使外源基因在目标细胞中转录和翻译为蛋白质的过程。
常用的基因表达技术包括原核表达系统、真核表达系统等。
五、细胞工程在医学中的应用1. 细胞治疗细胞治疗是指将人体的细胞或转基因细胞注入到患者体内以治疗疾病。
常见的细胞治疗包括干细胞治疗、免疫细胞治疗等。
2. 细胞培养技术在药物筛选中的应用细胞培养技术广泛应用于药物筛选的过程中,可以通过观察细胞的生长情况、细胞代谢产物来评估药物的疗效和毒副作用。
六、细胞工程在农业中的应用1. 转基因植物细胞工程技术可以用于制造转基因植物,通过引入外源基因来增加植物的抗病性、抗虫性以及耐胁迫能力。
细胞工程技术
细胞工程技术细胞工程(cell engineering)是生物技术的主要学科之一,一般指通过细胞培养或融合等在细胞水平上进行遗传操作的技术。
植物细胞工程最基本的技术是离体培养,该技术是在人工控制的环境条件下,通过无菌操作,将植物细胞或其他类型的外植体(如花药、子叶等器官或组织)接种于培养基上,在一定环境下(温度、湿度、光照等)进行培养,使得培养或所操作的对象体现一定的生命活动并按照人们的意愿发育或发生性状的改变。
根据其应用目的又可分为细胞工程育种、细胞代谢产物生产、植物组织快繁、离体种质的保存等。
一、植物细胞工程技术发展简述植物细胞工程的理论基础是植物细胞全能性,而植物细胞的全能性的研究历史可以追溯到19 世纪30 年代德国科学家施莱登(Schleiden)和施旺(Schwann)提出的细胞学说。
1902 年德国植物学家Harberlandt 首次进行了高等植物的细胞培养实验,但未获得成功。
1904 年Hanning 对萝卜和辣根菜进行离体胚的培养可提前萌发成小苗。
1922—1925 年Knudson 和Laibach 通过胚培养法分别获得了兰花幼苗和亚麻杂种幼苗。
1930—1940 年,White、Gautheret、Nobercourt 等人通过对番茄、柳树、烟草、胡萝卜和马铃薯等作物的幼茎、根尖或块茎薄壁组织等进行的一系列离体培养实验研究,初步建立起植物组织培养技术体系。
1940—1960 年,美国的Skoog 等人对植物组织培养中培养基中的激素进行了较为系统的研究,建立起离体培养的器官分化激素配比模式,这为不同植物离体培养奠定了重要基础;与此同时,众多学者也对细胞培养技术方法进行了大量探索,提出了一些在目前也广泛应用的细胞培养方法,如Muir的“细胞悬浮培养法”“看护培养技术”,De Ropp 的“微室培养法”,Bergmann的“琼脂平板培养法”。
1958年英国人Steward等通过对胡萝卜次生韧皮部进行悬浮培养,获得了类似胚胎发生的结构(胚状体),之后形成了完整植株,首次证明了植物细胞的全能性。
细胞工程技术
• 细胞融合:用电冲击法使乳腺细胞 核融合进入去核卵细胞中
• 将融合细胞臵于羊的结扎的输卵管 内,6天后发育为桑椹期胚胎或囊胚 (8-16个细胞),再转移至母羊子宫 内,直至出生
五、克隆动物的研究进展
对克隆羊的怀疑 1998 年7 月出版的《Nature》报道两个 独立的研究小组分别对Dolly 的血样、供 体母羊冷冻组织及其细胞培养物进行卫 星DNA 分析和DNA指纹分析,确认三者 的一致性,证明Dolly 确实是体细胞克隆 动物。
三、胚胎细胞克隆动物
4. 胎儿分化细胞核移植
• 由妊娠早期胎儿分离出已分化的细胞,采用核 移植的方法获得胚胎,经移植受体,妊娠产仔, 获得动物个体。 • 英国1996年用胎儿成纤维母细胞获得3只山羊, 日本2000年8月获得克隆猪。 • 美国2000年4月27日采用孕育了45天的胚胎细 胞克隆出的六头小母牛。
三、胚胎细胞克隆动物
1.胚胎分割:
• 将未着床的早期胚胎用显微手术的方法 一分为二、一分为四或更多次地分割后, 分别移植到受体体内让其妊娠产仔。 • 由一枚胚胎可得到两个以上的后代,遗 传性能完全一样。 • 用胚胎分割得到的动物有小鼠、家兔山 羊、绵羊、猪、牛、马、猴等。
三、胚胎细胞克隆动物
2. 胚胎细胞核移植
2. 和基因工程结合生产有经济价值的转基 因动物。为人类提供更丰富、更实用的 珍贵的医药产品,优质的奶产品以及最 佳的肉食品。
转基因动物建立难,保存更难
• 原核显微注射法建立转基因动物只能使 大约5%的动物携带外源基因 • 转基因动物的第一代中仅有50%的后代 携带转入的外源基因
• 用无性繁殖技术对转基因家畜进行 繁衍,其经济意义是十分巨大的 • 英国的PPL公司已克隆成功多只转基 因羊
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二. 填空: 1、 下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:
( 1)步骤①是
是
。
(2)步骤③一般常用的化学试剂是
是
。
,最常用的方法 ,目的
第三章 动物细胞工程 作业
A. 细胞融合首先用酶解法(胰蛋白酶)分散成单个细胞
B. 细胞融合是个细胞识别过程
C. 融合细胞能表现出两个亲本的特点 D. 原生质体自然条件下常自发融合
3、单克隆抗体的生产方法中错误的是( )
A. 发酵罐中培养
B. 小鼠的腹腔繁殖
C. 培养成组织移植到动物体内
D. 牛的体腔培养
4、不能人工诱导原生质体融合的方法是( )
用灭活的病毒诱导的动物细胞融合过程示意图
聚乙二醇(PEபைடு நூலகம்)法细胞融合过程
电融合诱导法原理示意图
原生质体分离过程(以叶片为例)
加果胶酶
和纤维素酶 过滤、离心
固体培养法
液体浅层培养
原生质体 悬浮液
2x105/ml
1mm厚液体培养基
悬滴培养
促融因素
电融合
融合过程
杂种细胞的鉴定
简答 P112 2、4、5、6
第四章 植物细胞工程 作业
1.名词解释 原生质体、外植体、愈伤组织、原生质体融合
2.简答 P127 9
A. 高pH B. 电刺激 C. PEG(聚乙二醇)试剂 D. 重压
5、植物细胞融合常用的诱导剂是( )
A. PEP B. PEG C. ATP D. 大肠杆菌质粒
例题
6、植物细胞融合常用的诱导剂是( ) A. PEP B. PEG C. ATP D. 大肠杆菌质粒 7、目前有一种蔬菜新品种“白菜—甘蓝”,只是将两个来自不同植物的体细
第四章 细胞工程技术概论
LOGO
主要内容
细胞培养技术 细胞融合 细胞重组 遗传物质转移 单克隆抗体技术
贴壁细胞的生长特征
成纤维细胞
人胃腺癌细胞
悬浮细胞的生长特征
白细胞细胞:K562
腹水瘤细胞:Ehrlich腹水瘤细胞EAC
兼性贴壁细胞的生长特征
CHO-K1
显微镜下的高密度微载体
营养物质 细胞
微囊膜
代谢产物
生物大分子
微囊示意图
聚赖氨酸/海藻酸微囊化步骤
1.悬浮细胞胶状液;2.成滴器;3.胶化小珠;4.包被溶液; 5.显微镜下微囊;6.多孔微囊膜;7.完成操作后的微囊。
中空纤维培养法
A Glimpse of Plant Tissue Culture
愈伤组织
显微镜下细胞融合过程
形态鉴定
核移植技术
目前在各治疗领域的单抗产品数量占比
例题
一、选择
1、植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是( )
A. 植物体细胞的结构组成中不包括细胞壁 B. 细胞壁使原生质体失去活力
C. 细胞壁阻碍了原生质体的融合 D. 细胞壁不是原生质的组成部分
2、动物细胞融合的说法不正确的是( )