手部微生物监测标准操作规程综述

一、适用范围

1．评价医务人员洗手、卫生手消毒、外科手消毒的效果。

2．怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时。

二、监测时机

在接触患者前或进行诊疗活动前采样。

三、采集方法

i．被检人洗手或手消毒后，在接触患者前或进行诊疗活动前采样。

2．被检人将双手伸出，五指并拢。

3。检查者取2支无菌棉拭子，并浸于含相应中和剂的无菌洗脱液中。

4．取_支棉拭子在一只手手指曲面，从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)，

并随之转动采样棉拭予；按同样方法用另一支棉拭予涂擦另一只手。

5．剪去操作者手接触部位，将2支棉拭子投入10ral含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立

即送检。

四、标本检测

(一)带菌量检测(平皿倾注法)

1．将采样管在混匀器上震荡20s或用力振打80次左右。

2．将无菌吸管分别吸取lmJ待检样品接种于2个直径为90mm无菌平皿中。

3．再加入已熔化的45-48℃的营养琼脂15．18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固。

4．将平皿置于(36±1)℃温箱培养48h，计数菌落数。

5．计算公式：细菌总数(cfu／cm2)=平板上菌落数×稀释倍数／60(cm2)

(二)细菌种类鉴定

1．将无菌增菌肉汤培养液试管置于(36±1)℃温箱培养24-48h。

2．若无菌增菌肉汤培养液试管浑浊，应根据实际情况选择血平板、中国蓝平板、双S 平板、

麦康凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。

3．接种后将平板置于(36±1)℃温箱培养24-48h，挑取可疑菌落进行微生物学鉴定，必要

时做药敏。

六、注意事项

1．结果判定：卫生手消毒后细菌总数应≤10cfu／cm2；外科手消毒细菌总数应≤5cfu／cm2。

2．应根据所用方法，选择含相应中和剂的无菌洗脱液。

3．倾注时温度必须控制在45-48℃，温度过高可致细菌死亡，过低则影响倾注效果。4，当怀疑医院感染暴发或流行与手的传播有关时，监测目的在于考察实际工作中医务人员手卫生状况，虽然同样在接触患者前或进行诊疗活动前采样，但医务人员不一定进行了手卫生。

5．当怀疑医院感染暴发或流行与手传播有关时目标微生物的监测只能定性不能定量。主要参考文献：

中华人民共和国消毒技术规范(2002年版)

医院感染管理办法(2006年)

一、适用范围

监测消毒液(含氯消毒液和戊二醛等)细菌学情况。

二、监测时机

使用中的消毒液。

三、基本方法

琼脂倾注法(细菌学)。

四、基本试剂

1．PBS缓冲液(无水磷酸氢二钠2．85g，磷酸二氢钾1．36g，蒸馏水1000m1)。

2．缓冲液A(PBS缓冲液+甘氨酸2g)：用于醛类、碘类消毒剂。

3．缓冲液B(PBS缓冲液谎代硫酸钠趣)：用于过氧乙酸、含氯制剂。

五、操作步骤

(一)细菌学监测

1．用无菌移液管吸收使用中消毒液1m1，加入9ml含相应中和剂的缓冲液中，充分混匀，作

用约10min。

2．再用无菌吸管分别吸取上述lml的待检样本，置于2个直径为90mm的灭菌平皿内。

3．加入已熔化的45-48℃的营养琼脂16一18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固。

4．其中一个平板置于(25±1)℃温箱培养7日，观察霉菌生长情况；另一个平板置于(36 ±1)℃温箱培养72h，记数菌落数，必要时做致病菌(金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等) 的检测。

5．计算公式：消毒液染菌量(cfu／m1)=每个平板上的菌落数×10

(二)细菌种类鉴定

1．从营养琼脂中挑取可疑菌落，根据实际情况可选择血平板、中国蓝平板、双S平板、麦康

凯平板或各种商用快速筛选平板进行细菌接种。

2．接种后将平板置于(36±1)℃温箱培养24-48h，挑取可疑菌落进行微生物学鉴定，必要

时做药敏与分子生物学分型。

六、注意事项

1消毒液染菌量结果应≤100cfu／ml，不得检出致病菌。

2必须选择含相应中和剂的稀释液进行采样，稀释液与消毒液作用时间不少于10min。

3倾注时琼脂温度保持在45-48℃，温度过高可致细菌死亡，过低则影响倾注效果。

中华人民共和国消毒技术规范(2002年版)

医院感染管理办法(2006年)

新生儿保温箱清洗消毒标准操作规程（SOP）

一、新生儿暖箱类型

保温箱、蓝光箱

二、基本要求

1、应有1～2个备用暖箱用以周转清洁消毒。

2、暖箱和蓝光箱应当每日大晚班湿式清洁恒温罩内外表面，特殊感染患儿(包括多重耐药菌)还应消毒，一人用后一消毒。同一患儿长期连续使用暖箱和蓝光箱时，应当每周消毒一次，用后终末消毒。

3、暖箱和蓝光箱湿化液应用灭菌水，每日更换。

4、清洁消毒后备用的暖箱应放在辅助区，注明清洁消毒日期、失效日期、清洁消毒人员姓名及检查人员姓名。推荐有效期为2周，2周内使用，可仅擦拭恒温罩内外表面。

5、使用中的暖箱应注明启用日期。

三、暖箱、蓝光箱清洁消毒流程

1、先拔掉暖箱电源，推至清洁消毒间(辅助区)，湿式擦拭电线后将电线盘起挂好。

2、先放掉水箱内残水后再清洗、浸泡消毒。

3、取下恒温罩上输氧孔的塑料套、输液软垫，清洗、擦拭消毒。

4、取出婴儿床，清洗、消毒。

5、取出床搁板上密封条，清洗、浸泡消毒。

6、取出床搁板，清洗、消毒。

7、暖箱若为箱外加水式，则逆时针拧下箱体外面的加水杯或用螺丝刀卸掉，用棉签刷洗加水

杯内壁，然后清洗、消毒后冲净，晾干备用。

8、取下空气过滤器盖板，取出空气过滤网，用清洁剂漂洗冲、冼晾干．龋能揉搓滤网。

9、擦拭空气过滤器盖板里面表面及空气输入管内外部。

10、擦拭恒温罩内、外表面、机身内、外表面和机架。

11、更换手套，将所有浸泡消毒的物品取出、冲洗、擦干。

12、按拆卸的反顺序逐个装回。安装时注意部件放置的位置、方向，旋钮应锁紧，密封条四

周应确保密封。

13、安装完毕，插上电源，测试性能是否良好。

14、消毒用500mg／L含氯消毒液。

主要参考文献：

[1] 中华人民共和国卫生部．新生儿病室建设与管理指南(试行)[S]．2010

[2] 中华人民共和国卫生部．消毒技术规范【S]．2002．