药品中有关物质分析方法验证
有关物质分析方法验证方案
有关物质分析方法验证方案物质分析方法验证是确保实验室分析方法的准确性、可靠性和适用性的重要步骤。
验证方案是根据相应的法规、准则和指南来制定的，旨在提供明确的实验室管理和质量控制的标准。
以下是一个关于物质分析方法验证方案的详细描述，包括验证目标、实施步骤和结果解释。
一、验证目标1.确定分析方法是否足够准确和可靠，以满足监管机构的要求和行业标准。
2.确定分析方法的适用性，即该方法是否适用于特定样品类型和矩阵。
3.确保实验室分析设备和仪器的正确使用和性能稳定性。
二、实施步骤1.选择合适的验证样品：根据实验室所涉及的应用领域和样品类型，选择一定数量和范围的样品进行验证。
2.样品准备：对于涉及样品预处理的方法，如提取、浓缩等，按照方法要求进行样品的准备。
3.参考方法的建立：验证样品和参考方法之间的结果比较是验证方法准确性的关键步骤。
如果没有可用的参考方法，可以选择其他方法进行比较。
4.准确性评估：确定方法的准确性，包括从反应的选择性、灵敏性和偏倚等方面进行评估。
例如，可以进行内标法、标准样品法或平行样品法。
5.精密度评估：确定方法的精密度，包括重复性和中间性的评估。
例如，可以进行重复性试验和不同实验员的中间性试验。
6.确定方法的线性范围：在方法的线性范围内进行一系列稀释或浓度变化试验，确定方法的线性范围和相关系数。
7.确定方法的限值：根据参考方法或法律法规的要求，确定方法的检出限、定量限和限量限。
8.确定方法的稳定性：评估方法所需的稳定性，包括短期稳定性、中期稳定性和长期稳定性。
例如，可以进行样品在不同温度条件下的稳定性试验。
9.确认方法的适用性：根据实际应用的需求，进行方法的适用性验证，包括对样品矩阵的适应性、干扰物质的影响等。
三、结果解释1.根据验证结果，确定分析方法是否满足准确性、可靠性和适用性的要求。
如果符合要求，可进行分析实验的正式应用。
2.如果有部分验证结果不符合要求，需要进一步优化方法，重新进行验证或根据结果进行确认范围的限制。
HPLC有关物质分析方法验证
HPLC有关物质分析方法验证HPLC（高效液相色谱）是一种常用的物质分析方法，广泛应用于药品、食品、环境等领域。
为了保证分析结果的准确性和可靠性，对HPLC方法进行验证是非常必要的。
HPLC方法验证包括了准确性、精密度、线性范围、灵敏度、特异性和系统适应性等方面的评估。
首先，准确性是衡量方法是否精确地测量目标物质含量的能力。
方法准确性的验证包括添加回收试验、标准品浓度重现性试验以及样品稀释后的测试。
通过添加已知浓度的目标物质到待测样品中，在不同浓度下测定回收率，可以评估方法的准确性。
其次，精密度是衡量方法在短期内进行重复实验的一致性。
精密度的验证包括了重复测定试验以及系统精密度试验。
通过重复测定同一样品多次，计算相对标准偏差，可以评估方法的精密度。
线性范围是指方法在一定浓度范围内的目标物质含量与测定结果之间的关系。
验证线性范围时，需要测试少量目标物质的浓度，以及相对较高的浓度，测定结果在一定限度内应与浓度成比例关系。
灵敏度是指方法在检测限下测定目标物质的能力。
灵敏度的验证包括了检测限试验和定量限试验。
检测限试验是通过在基质中添加多个不同浓度的目标物质溶液，确定出检测限。
定量限试验是通过在基质中添加不同浓度的目标物质溶液，确定出定量限。
特异性是指方法所测定的目标物质与其他干扰物之间的选择性。
特异性的验证包括了干扰物试验和选择性试验。
通过加入干扰物到目标物质溶液中，然后进行测定，确定干扰物是否对结果产生影响。
选择性试验是通过测定其他可能存在的相关物质浓度，确定是否与目标物质有影响。
最后，系统适应性主要是验证HPLC仪器和设备的稳定性和可靠性。
系统适应性的验证包括了仪器精度试验和仪器稳定性试验。
精度试验是通过测定标准品溶液的浓度，评估仪器的精度。
稳定性试验是在一定时间范围内，对同一样品进行多次测定，评估仪器的稳定性。
在进行HPLC方法验证时，需要根据相关规范文件，制定详细的验证计划和方案，确保验证方法的全面性和科学性。
有关物质分析方法验证的可接受标准
#1 有关物质分析方法验证的可接受标准有关物质分析方法验证的可接受标准简介药审中心黄晓龙摘要：本文介绍了在对有关物质检查所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
关键词：有关物质检查分析方法验证可接收标准药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。
由于这些有关物质的存在会影响到药品的纯度，进而可能会产生毒副作用，所以有关物质的控制是药品研发的一个重要方面，也是我们在药品审评中一直重点关注的要点之一。
而要对有关物质进行严格的控制，就离不开专属性强、灵敏度高的分析方法，这就涉及到分析方法的筛选与验证。
从现有的申报资料看，药品研发单位已基本上意识到分析方法验证的重要性，但是对验证时各具体指标是否可行尚没有一个明确的可接受标准，从而难以对验证结果进行评判。
为解决这一问题，本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对有关物质检查方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
该项目的可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
具体的验证方法为：在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
有关物质方法验证方案
分析方法预验证方案方案名称：XXXX有关物质测定方法预验证方案方案编号：版本号：01版起草人/日期:审核人/日期:审核人/日期:批准人/日期:目录1.概述 (1)2.分析方法 (1)2.1试剂 (1)2.2对照品 (1)2.3样品 (1)2.4仪器 (1)2.5色谱条件 (2)2.6溶液的配制 (2)2.7测定方法 (3)2.8计算 (3)3.方法验证 (3)3.1验证项目、验证方法及接受标准 (3)3.2系统适用性 (5)3.3专属性 (7)3.4精密度 (11)3.5线性 (12)3.6 定量限及检测限 (15)3.7准确度 (16)3.8溶液稳定性 (18)4.版本历史 (20)1.概述本品为xxxx注射液，规格为xxxx。
本品各国药典均未收载，本方法是参照欧洲药典（EP10.4）、美国药典（USP43）、中国药典2020年版收载的xxxx原料质量标准及英国药典（BP2020）收载的xxxx注射液质量标准及xxxx注射液进口注射标准（I物质A）项下的有关物质方法，采用中国药典2020年版四部通则0512高效液相色谱法，建立了本品的有关物质方法。
本预验证实验是为了确保该分析方法能够适用于当前本品有关物质的测定。
验证参数包括：系统适用性、专属性、重复性、精密度、线性、定量限（LOQ）、检测限（LOD）、准确度和溶液稳定性。
2.分析方法2.1试剂2.2对照品2.3样品2.4仪器2.5色谱条件色谱柱：C18，250×4.6mm，5μm或效能相当的色谱柱；检测波长：XXXnm；柱温：40℃；流速：1.0ml/min；进样体积：20μl；流动相A：0.2%磷酸氢二胺（pH7.5），流动相B：甲醇-异丙醇（87:13）。
梯度洗脱条件：时间（min）流动相A（%）流动相B（%）X X XX X XX X XX X XX X X2.6溶液的配制2.6.1 流动相流动相A：取磷酸氢二胺2g，加水1000ml溶解，用磷酸调pH值至7.5，过滤，取滤液，即得；流动相B:量取甲醇1000ml，超声，即得。
浅议有关物质分析方法验证的接受标准
浅议有关物质分析方法验证的接受标准李正邦(杭州民生药物研究院有限公司，杭州311121)摘要目的：阐述HPLC有关物质分析方法各验证项目的接受标准。
方法与结果：介绍HPLC有关物质分析方法各验证项目的目的和操作，参阅文献并结合实际工作经验，通过对比分析提出其接受标准。
结论：正确理解有关物质分析方法验证的目的，是制定合理接受标准的基础；规范的方法验证需要一个较为公认的接受标准。
关键词：HPLC；有关物质；方法验证；接受标准Discussion on Acceptance Criteria of Analytical Method Validation of Related SubstancesLi Zhengbang (Hangzhou Minsheng Institute for Pharma Research Co., Ltd., Hangzhou 311121 )Abstract Objective: To elaborate the acceptance criteria for each validation subject of HPLC analytical method for related substances. Methods and Results: Introduce the purpose and operation of method validation for HPLC related substances, combining literature research with actual work experience, and propose the acceptance criteria by comparative analysis. Conclusion: Formulating reasonable acceptance criteria is based on understanding correctly the purpose of method validation of related substances. It is necessary to establish more recognized acceptance criteria for standardizing method validation.Key words: HPLC; related substances; method validation; acceptance criteria有关物质主要是指药品在生产过程中带入的起始原料、中间体、反应副产物，以及贮藏过程中的生成降解产物等。
药审中心：有关物质分析方法学验证的项目及可接受标准
有关物质分析方法学验证的项目及可接受标准药审中心黄晓龙药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。
本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对有关物质检查方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
该项目的可接受标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
3．精密度1）重复性配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于15%。
2）中间精密度配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于20%。
4．专属性可接受的标准为：空白对照应无干扰，该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于2.0。
5．检测限杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。
6．定量限杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。
另外，配制6份最低定量限浓度的溶液，所测6份溶液杂质峰保留时间的相对标准差应不大于2.0%，峰面积的相对标准差应不大于5.0%。
有关物质分析方法验证技术指导原则
摘要：本文介绍了在对有关物质检查所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
关键词：有关物质检查分析方法验证可接收标准药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。
由于这些有关物质的存在会影响到药品的纯度，进而可能会产生毒副作用，所以有关物质的控制是药品研发的一个重要方面，也是我们在药品审评中一直重点关注的要点之一。
而要对有关物质进行严格的控制，就离不开专属性强、灵敏度高的分析方法，这就涉及到分析方法的筛选与验证。
从现有的申报资料看，药品研发单位已基本上意识到分析方法验证的重要性，但是对验证时各具体指标是否可行尚没有一个明确的可接受标准，从而难以对验证结果进行评判。
为解决这一问题，本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对有关物质检查方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
该项目的可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
具体的验证方法为：在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
药品中有关物质分析方法验证的可接受标准简介 药审中心 黄晓龙
1．准确度
该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为 0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
3．精密度
1）重复性
配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供试液含量的相对标准差应不大于15%。
2）中间精密度
配制6份杂质浓度（一般为0.1%）相同的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12个含量数据的相对标准差应不大于20%。
4．专属性
可接受的标准为：空白对照应无干扰，该杂质峰与其它峰应能完全分离，分离度不得小于2.0。
5．检测限
杂质峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。
该项目的可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为：
在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
8、系统适应性
有关物质分析方法验证的可接受标准简介
有关物质分析方法验证的可接受标准简介CDE 黄晓龙摘要：本文介绍了在对有关物质检查所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
关键词：有关物质检查分析方法验证可接收标准药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。
由于这些有关物质的存在会影响到药品的纯度，进而可能会产生毒副作用，所以有关物质的控制是药品研发的一个重要方面，也是我们在药品审评中一直重点关注的要点之一。
而要对有关物质进行严格的控制，就离不开专属性强、灵敏度高的分析方法，这就涉及到分析方法的筛选与验证。
从现有的申报资料看，药品研发单位已基本上意识到分析方法验证的重要性，但是对验证时各具体指标是否可行尚没有一个明确的可接受标准，从而难以对验证结果进行评判。
为解决这一问题，本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对有关物质检查方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
该项目的可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
具体的验证方法为：在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
有关物质方法验证
有关物质方法验证（以HPLC法为例）（1）系统适用性试验系统适应性试验主要是考察主成分与杂质的分离情况以及主峰参数信息，如理论塔板数、拖尾因子、分离度等，均应符合测定要求。
空白溶液、自身对照溶液、供试品溶液各进1针。
系统精密度自身对照溶液连续进样6次，峰面积RSD不大于2%，保留时间RSD不大于1% 。
（2）专属性专属性系指在其它成分可能共存的情况下，采用的方法能准确测定出被测杂质的特性。
对于原料药，可根据其合成工艺，采用各步反应的中间体（尤其是后3步反应的中间体）、非对映异构体、特定杂质、粗品等作为测试品进行系统适用性研究，考察产品中各杂质峰及主成分峰相互间的分离度是否符合要求，从而验证分析方法对工艺杂质的分离能力。
对于制剂，重点控制降解杂质。
专属性试验（用二极管阵列检测器）1、原料药溶剂自身对照供试品起始原料合成中间体特定杂质（可能会与起始原料和合成中间体重复）混合样：将起始原料、合成中间体、特定杂质加到供试品溶液中。
特定杂质的浓度一般同限度浓度，起始原料和合成中间体的浓度一般同自身对照的浓度（如果浓度过高，可能会有杂质峰干扰）。
以上样品各进一针，主要考察色谱条件能不能有效检出杂质，以及各个峰之间的分离情况，特别是主峰和特定杂质峰与相邻杂质峰的分离情况。
注：在现有标准的色谱条件下，如果有的起始原料和合成中间体的峰与主峰的分离度不符合要求或者保留时间过长，只要起始原料和合成中间体不是降解产物，可以用其它合适的色谱条件单独控制，如果粗品中未检出，以后可以不在控制。
破坏试验酸、碱、高温、光照、氧化、金属离子（选做。
一般用铁离子，因为最有可能接触到）。
为了便于比较，同时进未破坏的样品。
空白：酸碱空白、氧化空白，处理过程与样品的最终破坏条件相同。
热破坏：一般将样品溶液水浴加热或固体样品高温放置。
光照破坏：如果已经做过影响因素试验，可用光照10天的图谱代替。
氧化破坏：双氧水由于响应值较强，一般浓度不必太高，一般用几滴即可，必要时可以加热。
化学药品质量标准方法学验证要求
含量测定措施学验证要求
回收率 配制浓度为80％、100％和120％旳供试品溶液各3份，
分别测定含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。各个 浓度下平均回收率均在98.0～102.0％之内，9份回收率RSD 在2％以内。
含量测定措施学验证要求
线性 在80％～120％范围内（日常检验中可扩充至50％～
化学药品质量标准方 法学验证要求
1、有关物质措施学验证要求 2、含量测定措施学验证要求
有关物质措施学验证要求
检测波长及流动相确实定 对仿制药来说，主要是各国药典原则旳比对，参照。检
测波长一般需要紫外扫描后拟定，流动相旳选择需要各个原 则比对后拟定（即药审中心要求旳原则旳溯源）。需要注意 旳是假如原料药中有新旳工艺杂质和副产物，需要考察既有 原则旳合用性。
150％）配制不少于5个浓度旳样品，分别测定其主峰面积， 以浓度对峰面积建立方程，进行线性回归。回归系数不得不 大于0.998，Y轴截距应在100％响应值旳2％以内，响应因 子旳相对原则差应在2％以内。
有关物质措施学验证要求
校正因子 措施有单点计算法、斜率计算法，常用后一种，0.9～
1.1可采用本身对照法测定（实际工作中可放宽至0.8～1.2）
有关物质措施学验证要求
耐用性研究 流动相pH值，水相缓冲液旳pH波动范围为0.2 缓冲液旳浓度，在满足pH条件下，缓冲液中盐旳浓度
波动范围在10％以内 柱温，波动范围在10度以内 流速，波动范围在50％以内
有关物质措施学验证要求
耐用性研究 流动相构成，调整程度合用于流动相中旳小组份，调整
范围在30％以内，但总调整百分比在10％以内。 色谱柱，不能变化固定相填料类型，采用三根不同品
牌长度旳色谱柱进行比较，假如要求色谱柱类型，则需要三 个批号旳色谱柱进行比较。
邻溴碘苯有关物质分析方法的验证
限度：未知单杂≤0.1%；对溴碘苯≤0.01%、间溴碘苯、邻溴硝基苯、溴苯、邻溴苯胺均≤0.1%；总杂≤1.0%。
2 有关物质分析方法验证过程
2.1 仪器与试剂
仪器：气相色谱仪、电子分析天平。
试剂试药：甲醇（色谱纯）、对溴碘苯、间溴碘苯、邻溴硝基苯、溴苯、邻溴苯胺、邻溴碘苯，详细信息见下表。
进样口温度：250℃ 检测器温度：250℃ 分流比：3:1
色谱柱流量：0.54ml/min 载气：N2
色谱柱升温程序：
溶液配制：
空白溶剂：甲醇
系统适用性溶液：称取邻溴碘苯约100mg，精密称定，置10ml量瓶中，再加入溴苯、对溴碘苯、间溴碘苯、邻溴硝基苯、邻溴苯胺适量，使成每ml含邻溴碘苯10mg，溴苯、对溴碘苯、间溴碘苯、邻溴硝基苯、邻溴苯胺10ug的溶液作为系统适用性溶液。
1 绪 论
任何药品都有其相应的质量标准，其内容主要包含药品自身的性质、来源与制备工艺等。想要确保药品的安全性和有效性，就要严格控制药品的质量标准，而药品中的有关物质在药品药品的质量判断中有着举足轻重的地位，因此，对药品中的有关物质的分析方法的验证就显得尤为重要。本文主要是针对邻溴碘苯的有关物质分析方法的验证。
邻溴碘苯，又称1-溴-2-碘苯，分子式为C6H4BrI，分子量为282.91，熔点 9-10°C，沸点120-121 ºC (15 MMHG)，密度 2.203。邻溴碘苯为淡黄色至红色液体，用于氢溴酸沃替西汀等药品的有机合成，结构式如下：
测定方法：取系统适用性溶液1μl注入液相色谱仪，杂质之间分离度≥1.0，主峰与杂质之间分离度≥1.5，已知杂质按外标法计算含量，未知杂质按面积归一化法计算。
结果：
由以上数据可知，间溴碘苯和对溴碘苯保留时间一致，两个峰重合，此方法不适合用于本品检测。间溴碘苯、对溴碘苯、邻溴碘苯属位置异构体，沸点相近，考虑换用极性较强的色谱柱将以上杂质分离；由于对溴碘苯属于非遗传毒性杂质，限度较低，因此将分流比提高至3:1。
含量及有关物质分析方法验证的可接受标准
溶出介质体积的选择
漏槽条件即做溶出的最佳条件，是指药物 所处释放介质的浓度远小于其饱和浓度，生理 学解释为药物在体内被迅速吸收，制剂的体外 包括释放度等测定需要模仿体内生理条件的， 满足药物溶解-吸收的过程，漏槽条件起到了 修正作用，一般释放介质的体积为药物饱和溶 液所需介质体积的3～5倍。
（3）转篮法与桨法的选择
含量及有关物质 分析方法验证的可接受标准
文章来源：药审中心 审评二部 黄晓龙
本文介绍了在对含量及有关物质测定所用的 分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接 受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
内容包括：准确度、线性、精密度、专属性、 检测限、定量限、耐用性和系统适应性 。
1.准确度
含量： 该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般 要求分别配制浓度为80％、100％和120％的供 试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值 与理论值比较，计算回收率。 可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均 应在98.0%-102.0%之间，9个回收率数据的相 对标准差（RSD）应不大于2.0%。
3.精密度
含量： 1）重复性 配制6份相同浓度的供试品溶液，由一个分析 人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得6份供 试液含量的相对标准差应不大于2.0%。 2）中间精密度 配制6份相同浓度的供试品溶液，分别由两个 分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得 12个含量数据的相对标准差应不大于2.0%。
化学药品溶出度方法研究
文章来源：审评二部 唐素芳
化学药品普通口服固体制剂 溶出度方法验证易忽视的几个问题
文章来源：审评四部审评八室 郑国钢
溶出度研究试验主要包括以下内容：
（1）溶出介质的选择 （2）溶出介质体积的选择 （3）溶出方法（转篮法与桨法）的选择 （4）转速的选择 （5）溶出度测定方法的验证 （6）溶出度均一性试验（批内） （7）重现性试验（批间）
有关物质分析方法验证的可接受标准简介
有关物质分析方法验证的可接受标准简介（CDE网站2006年2月8号发表的电子刊物）摘要：本文介绍了在对有关物质检查所用的分析方法进行方法学验证时，各项指标的可接受标准，以利于判断该分析方法的可行性。
关键词：有关物质检查分析方法验证可接收标准药品中的有关物质泛指在药品的生产与储存过程中产生的工艺杂质或降解产物。
由于这些有关物质的存在会影响到药品的纯度，进而可能会产生毒副作用，所以有关物质的控制是药品研发的一个重要方面，也是我们在药品审评中一直重点关注的要点之一。
而要对有关物质进行严格的控制，就离不开专属性强、灵敏度高的分析方法，这就涉及到分析方法的筛选与验证。
从现有的申报资料看，药品研发单位已基本上意识到分析方法验证的重要性，但是对验证时各具体指标是否可行尚没有一个明确的可接受标准，从而难以对验证结果进行评判。
为解决这一问题，本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对有关物质检查方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。
1．准确度该指标主要是通过回收率来反映。
验证时一般要求根据有关物质的定量限与质量标准中该杂质的限度分别配制三个浓度的供试品溶液各三份（例如某杂质的限度为0.2%，则可分别配制该杂质浓度为0.1％、0.2％和0.3％的杂质溶液），分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率，并计算9个回收率数据的相对标准差（RSD）。
该项目的可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在80%-120%之间，如杂质的浓度为定量限，则该浓度下的平均回收率可放宽至70%-130%，相对标准差应不大于10%。
2．线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。
具体的验证方法为：在定量限至一定的浓度范围内配制6份浓度不同的供试液，分别测定该杂质峰的面积，计算相应的含量。
以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。
可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于0.990，Y轴截距应在100％响应值的25％以内，响应因子的相对标准差应不大于10%。
有关物质分析方法验证方案
8***原料有关物质分析方法验证方案20**年**月验证方案的起草与审批方案实施日期：目录1.验证目的 (4)2.方法简介与确认范围 (4)3.标准品、供试品 (4)4.风险评估 (4)5.验证的可接受标准 (5)6.验证步骤 (6)6.1系统适应性 (6)6.2专属性 (6)6.3检测限与定量限 (8)6.4线性 (9)6.5准确度 (9)6.6精密度 (10)6.6范围 (10)6.7耐用性 (10)6.8样品测定 (11)7.偏差 (11)8.风险的接收与评审 (11)9.再验证 (11)10.确认结果评审和结论 (11)11.更改历史 (12)12. 附录 (12)1.验证目的根据法规的要求，采用非药典或其它法规未收载的分析方法应进行验证，证明采用的方法适合于相应的检测要求。
这个验证方案的目的是为验证提供具体方法参数、可接受标准和研究步骤。
2.方法简介与确认范围***原料有关物质检测方法为自行开发的液相室色谱方法。
为确保方法的准确性和可行性，为日常检测方法提供依据，现对该方法进行验证。
方法验证必须按照验证方案进行，此次验证方案提供***原料含量分析方法验证验证，包括：专属性、精密度、线性、范围、准确度、检测限&定量限、耐用性。
3.标准品、供试品3.1标准品3.2供试品4.风险评估按照《质量风险管理规程》，质量控制部和质量管理部共同对分析方法进行了风险评估，确定了需进行方法确认的项目。
具体见下表：风险评估人：评估日期：5.验证的可接受标准6.验证步骤6.1系统适应性分离度测试液：取***产品分离度标准品5mg，置于一比色管中，加稀释液10ml溶解，在95℃下水浴加热30分钟，放冷。
标准液：取***产品标准品25mg，精密称定，置于一25ml量瓶中，用乙腈5ml溶解，然后用稀释液溶解并稀释至刻度；精密移取1ml，置于一100ml量瓶中，用稀释液稀释至刻度。
取分离度测试液进样，记录色谱图，***产品与***Δ-3异构体之间的分离度应不小于2.0。
HPLC测定有关物质和含量方法验证解析
HPLC测定有关物质和含量方法验证解析HPLC（高效液相色谱法）是一种常用的分析技术，在药品分析、环境监测、食品安全等领域有着广泛的应用。
在HPLC测定有关物质和含量方法验证解析中，可以从方法验证的目的、内容和步骤等方面展开。
方法验证的目的主要是验证所采用的分析方法是否可靠、精确、准确且具有可重复性，以保证在日常分析中的可靠性和可应用性。
方法验证的内容包括系统适用性、灵敏度、线性度、准确度、精密度、稳定性等，可以通过一系列实验和分析来进行验证。
方法验证的步骤一般包括以下几个方面：1.系统适用性验证：通过对样品的系统性能参数进行验证，包括压力、回峰时间、分离度和理论板数等。
通过调整仪器条件和操作参数，使得方法能够恰当地适用于所测定的物质。
2.灵敏度验证：通过测定不同浓度的标准品，确定方法的最小测定限和最小检测限。
灵敏度的验证可以通过信噪比、回归方程等指标进行评估。
3.线性度验证：通过测定一系列浓度已知的标准品，绘制浓度与峰面积或峰高的线性关系图，确认方法的线性范围和相关系数。
4.准确度验证：通过加标回收实验，比较样品中已知添加量与实际回收量的差异，评估方法的准确度。
5.精密度验证：通过同一样品的多次测定，计算相对标准偏差（RSD）来评估方法的精密度。
6.稳定性验证：通过不同储存条件下样品的测定，包括短期和长期稳定性试验，评估方法的稳定性。
在方法验证的解析中，需要对上述步骤进行详细的数据处理和结果分析。
对于系统适用性验证，需要报告各项系统性能参数的测试结果，并说明是否符合要求；对于灵敏度验证，需要计算最小测定限和最小检测限，并评价方法的灵敏度；对于线性度验证，需要绘制线性关系图，并计算回归方程的相关系数；对于准确度和精密度验证，需要计算回收率和相对标准偏差，并进行统计学分析；对于稳定性验证，需要比较不同条件下测定结果的差异。
此外，在HPLC测定有关物质和含量方法验证解析中还需要注意的是，要同步验证色谱柱的适用性、短柱、长柱分析的差异，以及可能的干扰和修正因子等因素。
HPLC有关物质分析方法验证
数据要求：需报告平均值，RSD。
6、精密性
• 报告数据：
• 1、回收率、 • 2、平均回收率、 • 3、RSD
• 评价：
• 1、回收率应为90%~110% • 2、RSD不得不小于10%
7、溶液稳定性
• 供试溶液与对照溶液分别放在室温和冷 藏下保存，分别在不同步间测定HPLC
RSD S 100% x
6、精密性
1. 反复性:
A、在相同条件下，由同一种分析人员测定所得成果旳精密度； 在要求旳范围内，至少用9次测定成果评价，如制备三个不同 浓度样品各测三次或 （回收率法） B、把被测物浓度看成100%，至少测6次进行评价。 （样品测定法）
6、精密性
2. 中间精密度 同一试验室，不同步间 由不同分析人员用不同设备所得成果旳精密 度。
如不能测得杂质旳相对响应因子，可在线测定杂 质旳有关数据，如采用二极管阵列检测器测定紫外光 谱，当杂质旳光谱与主成份旳光谱相同，则可采用原 料药旳响应因子近似计算杂质含量（本身对照法）。
5、响应因子
已知杂质相对与主成份在HPLC上旳响应比值
计算措施：
(1)可直接用主成份对照品及杂质对照品进行测定。
2、敏捷度
LOD试验措施
•空白溶剂 •系统合用性溶液5针 •杂质对照品溶液进1针 •根据上一针杂质对照品旳S/N值进行稀释进样 •直到S/N为约3时，平行进样3针。 •系统合用性溶液1针 •图谱打印： •杂质对照溶液及其稀释液均要以performance+noise格式打印。 系统合用必至少有一针用extend performance格式打印
1、专属性 报告数据：
硫酸吗啡原料药中有关物质检查方法研究
硫酸吗啡原料药中有关物质检查方法研究发布时间：2022-11-03T07:06:36.275Z 来源：《科学与技术》2022年第7月第13期作者：郭满1 耿艳丽2[导读] 目的通过对硫酸吗啡原料药的有关物质进行分析,考察现行标准的完善性,探讨存在的问题,为提高产品质量标准提供参考?方法采用HPLC,选用SymmetryC18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,以1.01g·L-1庚烷磺酸钠溶液(用50%磷酸调节pH值至2.6)和甲醇为流动相进行梯度洗脱;检测波长为230nm,流速为郭满1 耿艳丽2凯莱英生命科学技术（天津）有限公司天津市300450 天津市正方科技发展有限公司天津市 300270摘要:目的通过对硫酸吗啡原料药的有关物质进行分析,考察现行标准的完善性,探讨存在的问题,为提高产品质量标准提供参考?方法采用HPLC,选用SymmetryC18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,以1.01g·L-1庚烷磺酸钠溶液(用50%磷酸调节pH值至2.6)和甲醇为流动相进行梯度洗脱;检测波长为230nm,流速为1.5mL·min-1,柱温35℃?结果国内硫酸吗啡原料药中检出的主要杂质有可待因(杂质A)?伪吗啡(杂质B)?10-羟基吗啡(杂质D)?吗啡酮(杂质E)和吗啡氮氧化物(杂质F),溶液稳定性显示其中伪吗啡含量增加明显,表明样品需临用新配?结论建立方法的专属性?线性等均良好,能用于硫酸吗啡原料药中有关物质的检测?现行标准中缺少有关物质检查项,建议增加?关键词:硫酸吗啡;有关物质;高效液相色谱法;伪吗啡;吗啡酮硫酸吗啡是常用的阿片类药物,用于治疗急性和慢性最有效的镇痛药类别之一,是由吗啡成盐后的一种形式,为阿片类受体激动剂,是临床常用的麻醉药品,具有强效镇痛作用,适用于其他镇痛药无效的急性剧痛?除此之外,还具有镇静?呼吸抑制?镇咳?抗癌?抗抑郁等多种药理作用?1仪器与试药1.1仪器岛津LC-2030C3D型高效液相色谱仪(二极管阵列检测器;岛津公司)?Waterse2695型高效液相色谱仪(二极管阵列检测器;Waters公司),SartoriusBS224S型万分之一?CP225D型十万分之一电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司),KQ-500DE型数控超声仪(昆山市超声仪器有限公司)?1.2对照品吗啡杂质A对照品(批号:170317,含量:94.2%)?吗啡杂质B对照品(批号:170720,含量:97.9%)?吗啡杂质C对照品(批号:170718,含量:95.1%)?吗啡杂质D对照品(批号:170914,含量:95.9%)?吗啡杂质E对照品(批号:170520,含量:92.3%)?吗啡杂质F对照品(批号:170523,含量:94.3%)?吗啡对照品(批号:171201-201324,含量:99.1%)?硫酸吗啡对照品(批号:171238-201708,含量:87.3%)?1.3试剂庚烷磺酸钠(Merck公司);甲醇(色谱纯);磷酸?醋酸(分析纯)?1.4样品硫酸吗啡原料药(批号:20180303?20151104?20151001,A药厂)?2方法与结果2.1色谱条件参照EP9.0和BP2018拟定的有关物质检查方法进行研究:采用SymmetryC18(4.6mm×150mm,5μm);流动相A:1.01g·L-1庚烷磺酸钠溶液(用50%磷酸调节pH值至2.6);流动相B:甲醇,梯度洗脱(梯度洗脱程序见表1);检测波长为230nm,流速1.5mL·min-1,柱温35℃,进样量10μL?2.2系统适用性?供试品和对照溶液制备方法系统适用性溶液:精密称取吗啡杂质A?B?C?D?E?F对照品?吗啡对照品?硫酸吗啡对照品,分别置于10mL量瓶中,用1%乙酸溶解并稀释至刻度,制成每1mL中约含吗啡?硫酸吗啡及各吗啡杂质1mg的储备液?量取吗啡及各吗啡杂质适量,用1%乙酸溶液稀释制成每1mL中约含杂质A? B?C?D?E?F各10μg?吗啡50μg的溶液,作为系统适用性溶液?供试品溶液:取本品约125mg,精密称定,置50mL量瓶中,加入1%乙酸约30mL,超声使溶解,用溶剂稀释至刻度,摇匀?滤过,取续滤液作为供试品溶液?对照溶液精密量取供试品溶液1mL,置100mL量瓶中,用1%醋酸溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,再精密量取1mL,置5mL量瓶中,用1%醋酸溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液?2.3方法验证2.3.1专属性试验取1%乙酸?系统适应性溶液各10μL,注入液相色谱仪,记录色谱图?系统适应性溶液中各色谱峰之间的分离度最小为1.9,空白溶剂不干扰检测,色谱图见图1?图 1 硫酸吗啡有关物质检测系统适应性溶液专属性色谱图2.3.2线性与范围分别精密吸取“2.2”项下硫酸吗啡和各吗啡杂质对照品储备液,制成系列对照品溶液,分别注入液相色谱仪,测定峰面积?以峰面积为纵坐标(Y),各对照品质量浓度为横坐标(X),绘制标准曲线?通过计算硫酸吗啡的响应值与已知杂质的响应值之间的比值,得到各已知杂质的校正因子?结果表明,硫酸吗啡以及各杂质在各自的线性范围内线性关系良好?杂质D的校正因子计算约为0.9,根据《中国药典分析检测技术指南》规定,校正因子在0.9~1.1之间,则可视为1,因此杂质D的校正因子最终定为1?2.3.3系统精密度试验精密吸取系统适应性溶液10μL,连续进样6次,记录峰面积,吗啡及杂质A?B?C?D?E?F的峰面积相对标准偏差(RSD)分别为0.2%?0.3%?0.08%?0.09%?0.7%?0.3%和0.2%,均小于2.0%,说明该系统的精密度良好?表1硫酸吗啡有关物质梯度洗脱条件2.3.4中间精密度试验取硫酸吗啡原料药(批号:20180303),由两名分析人员在不同日期分别平行配置6份供试品溶液,按照“2.1”项下色谱条件,使用不同的仪器进行测定,杂质A?B?D?E?F共12次测定的含量RSD分别为3.1%?4.0%?2.8%?1.3%?3.9%,均小于8%,表明方法的中间精密度良好?2.3.5准确度试验精密称取杂质A?B?C?D?E?F和硫酸吗啡适量,用1%乙酸溶解并定量稀释,制成每1mL中约含1mg的溶液,作为各自母液?再精密量取杂质A?C?D?F母液各0.4?0.5?0.6mL和杂质B?E母液各0.8?1.0?1.2mL分别置3个100mL量瓶中,用1%乙酸定量稀释至刻度,制成3个水平的混合对照品溶液?称取硫酸吗啡原料约62.5mg,置25mL量瓶中,一式9份,加入上述3个水平的混合对照品溶液超声溶解并定量稀释,每个水平平行3份?精密量取10μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积分别计算杂质A?B?C?D?E?F的含量,并计算回收率,未知杂质用硫酸吗啡替代,单独配制,方法同杂质A?参考Ch.P2020四部通则《9101分析方法验证指导原则》,各杂质回收率均在90%~108%之间,证实该方法具有良好的准确度?2.3.6强制降解试验将硫酸吗啡原料药(批号:20180303)在酸?碱?氧化?高温?高湿?光照条件下进行强制破坏,了解其降解情况?质量平衡,采用“公式1”计算单位浓度的响应值,以未破坏溶液的响应值为基数(物料回收为100%),计算破坏溶液的物料回收率,结果各破坏溶液的回收率在97.1%~100.1%之间,认为杂质检出情况良好?单位浓度的响应值=A总(校正后)/C(公式1)(A总-校正后的供试品溶液总峰面积,其中杂质E?B和F的峰面积分别乘以校正因子0.5?0.25?0.8加以校正;C-供试品溶液的浓度)硫酸吗啡原料药在高湿条件下较为稳定;在高温和光照条件下,会引起杂质B?D?E的升高;在酸性条件下,杂质B增加,杂质E降解;在碱性条件下,杂质B?D明显增大,并有2个新杂质增加;在氧化条件下,杂质A被降解了,杂质B?D?E?F明显增大,并产生许多新杂质?在本色谱条件下,吗啡峰与相邻杂质峰分离度良好?3讨论3.1检测波长的选择采用二级管阵列检测器测定硫酸吗啡与各杂质,硫酸吗啡在285nm处有最大吸收,以285nm作为检测波长时,硫酸吗啡与各杂质的响应均较小,用230nm作为检测波长时,都有较好的响应,故确定有关物质测定波长为230nm?3.2色谱柱的选择在方法摸索过程中,考察了3种不同的色谱柱:SymmetryC18(4.6mm×150mm,5μm)?X-bridgeC18(4.6mm×150mm,5μm)和SunfireC18(4.6mm×150mm,5μm),发现使用X-bridgeC18和SunfireC18两根色谱柱,杂质F与吗啡之间的分离度分别为0.5和0.8,均小于1.5,无法达到基线分离,说明吗啡与杂质F要实现很好地分离,对色谱柱有一定的选择性,故在色谱系统中推荐使用SymmetryC18色谱柱?3.3稳定性分析通过对溶液稳定性的考察,发现杂质B随时间的推移,面积逐步增大,说明其不太稳定,也提示在检测有关物质时,样品需要临用新配?本研究采用高效液相色谱法,以SymmetryC18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱为固定相,梯度洗脱,并用校正因子法对硫酸吗啡原料药中6个已知杂质进行测定,考察了多种质检方法等?结果表明,本方法专属性好,对硫酸吗啡中的杂质检出度高,为修订和提高标准中的有关物质测定方法提供参考和依据?参考文献:[1]Ch.P(2020)V olⅡ(中国药典2020年版.二部)[S].2020:1573.[2]BP2018(2018)[S].2018:328-330.[3]USP41-NF36(2018)[S].2018:2809-2810.。
有关物质分析方法验证方案
有关物质分析方法验证方案引言物质分析方法验证是确保实验室分析方法的准确性、可靠性和适用性的关键步骤。
验证过程通过实验数据和统计分析，评估分析方法在特定条件下的性能指标。
本文将介绍物质分析方法验证的目的、步骤和关键要素。
目的物质分析方法验证的主要目的是确认分析方法是否能够准确、可靠地测定目标物质的含量。
验证过程应该能够提供实验室和其他利益相关方对分析方法的性能有充分的了解。
此外，验证也有助于确定分析方法出现问题的原因并进行改进。
步骤物质分析方法的验证通常包括以下步骤：1. 确定验证计划验证计划应明确验证的目标、时间表和责任人。
在制定验证计划时，应考虑实验室内部的资源和技术要求。
2. 确定验证样品验证样品应具有代表性，并包含目标物质的不同浓度水平。
样品的制备应严格按照标准操作程序进行，以确保样品的一致性和可重复性。
3. 进行实验测试按照分析方法的操作步骤，进行实验测试。
在测试过程中，需要记录所有使用的试剂、仪器和操作条件等信息。
测试应在预定的条件下进行，并重复多次以获得可靠的结果。
4. 数据处理和统计分析对实验数据进行处理和统计分析，评估分析方法的性能指标。
常见的性能指标包括准确度、精密度、线性范围、检测限和选择性等。
统计方法如方差分析、回归分析和假设检验等可以应用于数据分析。
5. 结果的解释和报告根据验证结果，解释分析方法的准确性、可靠性和适用性。
结论应根据实验数据和统计分析结果进行支持。
验证报告应包含验证目的、步骤、结果和结论等内容，并根据需要提供必要的附表和图表。
6. 评估验证结果并持续改进评估验证结果的有效性，并采取必要的措施进行持续改进。
如果验证结果不符合预期，可能需要进行分析方法的修改、仪器的更换或操作程序的调整等。
关键要素物质分析方法验证的关键要素包括以下几点：•样品制备：确保验证样品的一致性和可重复性，并按照标准操作程序进行制备。
•试剂和仪器：确认试剂和仪器的质量和性能满足验证要求，并按照标准操作程序进行校准和使用。
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溶液1：空白辅料溶液
溶液2：在产品处方空白辅料中加入适量杂质对照品溶液，倍比稀释至目标浓度。
可接受标准
LOD: 按照检验SOP处理后进样空白辅料溶液，记录色谱图，计算平均噪音；连续10次进样处理后的检测限浓度溶液，记录色谱图；S/N要求：≥3；RSD%要求: 20% ；
LOQ：按照检验SOP处理后进样空白辅料溶液，记录色谱图，计算平均噪音；连续10次进样处理后的定量限浓度溶液，记录色谱图；S/N要求：≥10；RSD%要求: 20% ； 平均回收率80-120%；
溶液配制
在产品处方空白基质中加入适量对照品分别制备4X3样品(定量限，50%,100%,150%限度浓度)，每个浓度制备3份溶液，按照SOP处理后进样，记录色谱图。
定量限≤忽略限（或报告限）
其它要求：拖尾因子(T) 理论塔板数(N) 分离度( R) 容量因子.
4.线性及范围
定义
线性系指在设计的范围内，测定响应值与试样中被测物浓度呈比例关系的程度。范围系指分析方法能达到一定精密度、准确度和线性要求时的高低限浓度或量的区间。
溶液配制
在产品处方空白基质中加入分别加入适量杂质对照品溶液制备不少于5个浓度, 包括,空白基质，定量限，25%, 50%, 100%和150% 限度浓度；按照SOP处理样品，每个浓度进样2次。
各破坏溶液中新增降解杂质与主峰及已知单杂R≥1.5；
（可调整，至少保留主峰与相邻杂质R的标准）
各破坏溶液中主峰的纯度因子≥990；
2.系统适用性(在其他项目的验证过程中应考虑是否先符合系统适用性）
定义
系统适用性是为了评价色谱系统处在一种正常的工作状态的一种评价方式。一般来说由少量的几个参数进行评估，例如理论塔板数、拖尾因子、分离度等参数。
溶液配制
杂质对照品溶液，重复进样10次，记录色谱图。
可接受标准
要求：拖尾因子(T)理论塔板数(N)分离度( R) 容量因子符合要求；
重复进样保留时间的RSD符合要求；
重复进样峰面积RSD不大于10%。
（或符合专论中的系统适用性要求）
3.检测限及定量限
定义
检测限定义为样品中被分析物能够检出但无需准确定量的最低量。定量限（LOQ）定义为能够以适当的精密度和准确度对样品中的被分析物进行定量测定的最低量。
可接受标准
要求：测定结果间RSD不大于10%；
报告RSD置信区间（0.95）
2组数据：RSD不大于10%；
报告RSD置信区间（0.95）
重现性下进样序列
溶液名称
进样针数
空白溶液
1针或2针
系统适应性溶液
根据专论确定
对照液
3/5/6针（根据RSD定）
供试液6份
各1针
样品中待测成分的含量与精密度可接受范围（2020药典）
可接受标准
报告线形图，线性公式；R2应不低于 0.990；
│截距│%应低于 10%；报告残差平方和；
5.精密度（对方法n次重复，不是对某个溶液n次重复）
定义
精密度为在相同分析条件下的一组测量值相互接近的程度。ICH定义精密度含有3个部分，即重复性（repeatability）组间精密度（intermediate precision）和重现性（reproducibility）
验证结果/报告
—
方案实施中应从以下几个方面进行：
1.专属性 （专属性的研究一般优先于其它验证项目，为方法首要的属性）
定义
专属性定义为当预料到一些组分可能存在时，准确无误地检测被分析物的能力。
Байду номын сангаас空白干扰实验
溶液配制
空白溶剂溶液
空白辅料溶液
样品溶液
API溶液
对照品溶液
样品+对照品溶液
可接受标准
对照品溶液与供试品溶液、空白加样中目标杂质的保留时间（Rt）应一致；
待测成分含量
待测成分质量分数
重复性（RSD:%）
重现性（RSD:%）
（%）
（ppm或ppb）
（㎎/g或ug/g）
（g/g）
100
1000㎎/g
1.0
1
2
10
100000ppm
100㎎/g
0.1
1.5
3
1
10000ppm
10㎎/g
0.01
2
4
0.1
1000ppm
1㎎/g
0.001
3
6
0.01
100ppm
确认验证方案已经过相关人员批准
相关文件
与方法验证的工作相关的文件均为最新版本，且已获批准。
设备确认
设备是否符合要求 是否经过校准或检定
试剂、试液、标准品确认
试剂、试液是否在有效期内
验证实施
包括验证参数，可接受标准，验证的具体实施办法等
测试记录
验证过程中的记录，图谱等均应包含在验证方案中
偏差报告
验证中若发生偏差，偏差应被记录
未破坏供试液；
各破坏试验空白溶液；
酸破坏试验；
碱破坏试验；
氧化破坏试验；
关照破坏试验；
高温破坏试验。
注释：1.ICH 01B要求光强度总量要达到1.2×106Lux hours
2.破坏后主峰含量的计算：用未破坏供试液为对照液进行外标计算破坏后主峰含量，降解率在5-10%，降解率与总杂偏差≤5%
可接受标准
100ug/g
0.0001
4
8
0.001
10ppm
10ug/g
0.00001
6
11
0.0001
1ppm
1ug/g
0.000001
8
16
10ppb
0.01ug/g
0.00000001
15
32
6.准确度
定义
确度定义为测定值与真实值或认可的参考值之间接近的程度。准确度也可以定义为方法的测定值与真实值接近的程度。
药品中有关物质分析方法验证
一份完整的验证方案应包含以下几部分内容：
内容
备注
封皮
方案号，版本号
签批
也可以设计在封皮上
验证目的和概述
主要描述此次验证的目的和一些基本情况，是首次验证还是周期性验证
职责
规定不同人员在此次验证中的职责
人员/培训确认
确认方案实施人经过有效的培训，且培训合格，有相应的培训记录
方案批准
重复性
溶液配制
对照液，1份；
供试液或100%加标液或杂质限度的主成分考察溶液，6份
可接受标准
RSD（n=6）见下表
重现性
溶液配制
同重复性
可接受标准
RSD（n=6）≤见下表
RSD（n=12）≤见下表
重复性与重现性已知单杂含量均值（或主成分则以主峰计）的绝对差值≤0.05%（可调整）
中间精密度
溶液配制
不同的时间,使用不同的分析员、色谱柱和仪器，使用同批产品，重复<Repeatability>的测试,比较两组数据
空白溶剂、辅料及API对杂质测定无干扰（不大于积分阈值）；
滤膜滤过后的空白辅料溶液，样品溶液，加标溶液，对照品溶液与过滤前峰面积的RSD符合SST要求，杂质峰个数不得增加，杂质个数及保留时间应一致。
不同弃去体积后所得色谱图符合上述要求；
各个色谱图中Rs≥1.5, 峰的纯度检测符合要求。
强制降解试验
溶液配制