不同产地野生猪苓多糖与麦角甾醇的含量分析_李香串

厂） ； DIONEX Summit HPLC 色 谱 仪 （ P680 HPLC Pump，UVD 170U 检测器，Chromeleon 工作站） 等。 1． 2 试药
D － 无水葡萄糖标准品（ 购于中国食品药品检 定研究院，批号： 110833 － 201205） ； 麦角甾醇标准品 （ 购于中 国 食 品 药 品 检 定 研 究 院，批 号： 111845 － 201102） ； 无水乙醇、浓硫酸、苯酚、甲醇等均为分析 纯； 甲醇（ OCEANPAK，瑞典） 为色谱纯。
李香串1 ，梁文仪2
（ 1． 山西省医药与生命科学研究院，山西 太原 030006； 2． 山西中医学院，山西 太原 030024）
摘 要 目的： 比较不同产地猪苓菌核及子实体中猪苓多糖与麦角甾醇的含量，为分离优质菌株提供科学依据。
方法： 采用紫外 － 可见分光光度法及高效液相色谱法测定不同产地猪苓中猪苓多糖及麦角甾醇的含量。结果： 不
成每 1 mL 含 0． 055 5 mg 的对照品溶液，备用。
1． 4 mL，分别置 10 mL 量瓶中，加水至刻度，摇匀。
2． 1． 2 供试品溶液的制备
精密量取上述各对照品溶液 1 mL，分别加 5 % 苯酚
取猪苓粉末约 1 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加 溶液 2． 5 mL，混匀，加入浓硫酸 10 mL，摇匀，放冷
猪苓药材部分采集于山西、陕西等地，部分购于 太原市内各药店（ 见表 1） ，经鉴定均为多孔菌科真 菌猪苓［Polyporus umbellatus（ Pers． ） Fries］的干燥菌 核或子实体，粉碎过 40 目筛，混合均匀后备用。
表 1 猪苓样品来源
样品 编号
产地
1 山西古县
2 山西盂县
3 陕西留坝 4 山西沁源 5 河北平山
水 100 mL，加热回流 1 h，滤过，如上重复提取 1 次， 后，沸水浴 15 min 冷却。以试剂为空白，在 489 nm
合并滤液，浓缩至适量，转移至 50 mL 量瓶中，加水 波长处采用紫外 － 可见分光光度法测吸光度值。以
至刻度，摇匀，精密量取 25 mL，加无水乙醇 100 mL， 吸光度（ A） 为纵坐标（ y） ，对照品溶液浓度（ C） 为横
猪苓为多孔菌科真菌猪苓［Polyporus umbellatus （ Pers． ） Fries］的干燥菌核，主产于陕西、云南、河南、 山西等 省，其 性 平，味 甘、淡，具 有 利 水 渗 湿 之 功 效［1］，中医临床上主要用于治疗急性肾炎、淋病、糖 尿病、全身浮肿、小便不畅、急性胃炎、泄泻、淋浊、带
试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，按“标 准曲线的制备”项下操作，显色测定吸光度，计算猪 苓多糖的含量，其 ＲSD 为 2． 54% ，表明重复性良好。 结果见表 3。
同，实验结果可为猪苓药材质量控制及优种选育研究奠定基础。
关键词 猪苓多糖； 麦角甾醇； 含量测定； 紫外 － 可见分光光度法； 高效液相色谱法
中图分类号： Ｒ931． 6
文献标识码： A
文章编号： 1006 － 9690（ 2014） 04 － 0011 － 06
Content Analysis of Polysaccharides and Ergosterol in Wild Polyporus umbellatus from Different Areas
2． 1 猪苓多糖的含量测定
ຫໍສະໝຸດ Baidu
2． 1． 3 标准曲线的制备
2． 1． 1 对照品溶液的制备
精密量取对照品储备液 （ 0． 925 0 mg·mL － 1 ）
取 D － 无水葡萄糖适量，精密称定，加蒸馏水制 0． 2 mL，0． 4 mL，0． 6 mL，0． 8 mL，1． 0 mL，1． 2 mL，
第 33 卷第 4 期 2014 年 8 月
中国野生植物资源 Chinese Wild Plant Ｒesources
doi： 10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2014． 04． 004
Vol． 33 No． 4 Aug． 2014
不同产地野生猪苓多糖与麦角甾醇的含量分析
同产地和来源的猪苓中猪苓多糖与麦角甾醇的含量存在一定差异，其中子实体中两者的含量远高于菌核中的含 量，盂县产猪苓子实体多糖含量最高，为 60． 694 6 mg·g －1 ，是菌核含量的 28． 2 倍，沁源麦角甾醇含量最高，为 4． 187 0 mg·g － 1 ，是菌核含量的 2． 1 倍； 菌核中猪苓多糖的含量范围 2． 151 7 mg·g － 1 ～ 8． 887 2 mg·g － 1 ，陕西留坝最 高，麦角甾醇的含量范围 0． 825 9 mg·g － 1 ～ 2． 023 2 mg·g － 1 ，山西沁源最高。结论： 产地、部位不同，有效成分含量不
1． 59% ，结果符合要求。测定结果见表 2。
表 2 精密度试验结果
编号 1 2 3 4 5 6
吸光度（ A） 0． 331 0． 342 0． 327 0． 337 0． 338 0． 335
平均吸光度（ A） 0． 335
ＲSD / % 1． 59
2． 1． 5 重复性试验 取 10 号猪苓样品粉末 6 份，精密称定，按“供
平均吸光度（ A） 0． 410
ＲSD / % 1． 82
图 2 猪苓多糖标准曲线图
2． 1． 4 精密度试验
精密 量 取 葡 萄 糖 对 照 品 溶 液 （ 0． 055 5 mg· mL － 1 ） 1． 0 mL，照“标准曲线的制备”项下操作，显 色测定吸光度，重复 6 次，以 A 值计算，ＲSD 值为
1 仪器与试药
1． 1 仪器 UV － 1601 紫外可见分光光度仪（ 北京瑞利分
析仪器公司） ； METTLEＲ TOLEDO EL204 型万分之 一电子天平； METTLEＲ TOLEDO AB135 － S 型十万 分之一电子天平（ 梅特勒 － 托利多仪器（ 上海） 有限 公司） ； KQ200E 型超声波清洗仪（ 昆山市超声仪器 有限公司） ； HH － 2 水浴锅（ 金坛市杰瑞尔电器有限 公司） ； DL － 5C 离心机（ 上海安亭科学仪器厂） ； HC － 500A 型 粉 碎 机 （ 浙 江 省 安 康 市 金 穗 机 械 制 造
类型
菌核，野生 菌核，野生 菌核，野生 菌核，野生 菌核，野生
样品 编号
产地
6 山西沁源
7 山西盂县
8 山西霍州
9
湖北
10 河北承德
类型
子实体，野生 子实体，野生
菌核，野生 菌核，野生 菌核，野生
图 1 猪苓样品图
2 方法与结果
摇匀，冷 藏 静 置 24 h，离 心，取 沉 淀 加 水 溶 解，置 50 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。
下［2 － 3］等。已报道的猪苓化学成分主要有多糖类、 甾体类、非甾体类（ 除多糖类外） 、氨基酸类、维生素 类及微量元素等，其中猪苓多糖具有增强免疫功能、 抗 肿 瘤、保 肝、抗 老 防 衰、抗 辐 射、抗 诱 变 等 作 用［4 － 5］； 麦角甾醇具有一定的利尿作用，生物代谢研
收稿日期： 2014 － 02 － 18 基金项目： 山 西 省 社 会 发 展 科 技 攻 关 项 目，山 西 特 色 药 材 规 范 化 种 植 技 术 及 质 量 标 准 化 研 究—猪 苓 良 种 选 育 研 究
（ 20130313013—5） 作者简介： 李香串 （ 1965 － ） ，女，高级工程师，主要从事药用植物栽培、育种研究。E-mail： lxch629@ 163． com
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中国野生植物资源
第 33 卷
究发现麦角甾醇和麦角甾醇的过氧化物可以通过一 系列的生物合成途径合成麦角甾酮，麦角甾醇的利 尿作用可能是麦角甾醇在体内二氧化酶作用下转化 为麦角甾酮［6］。本实验参考文献报道［10 － 13］采用紫 外 － 可见分光光度法及高效液相色谱法测定不同产 地猪苓中猪苓多糖及麦角甾醇的含量，比较不同产 地、不同来源猪苓药材的质量差异，为猪苓的优种选 育及质量标准研究提供科学依据。
Li Xiangchuan1 ，Liang Wenyi2 （ 1． Medicine and Life Sciences Institute of Shanxi Province，Taiyuan 030006，China； 2． Shanxi University of Traditional Chinese Medicine，Taiyuan 030024，China） Abstract Objective： The polysaccharides and ergosterol in Polyporus umbellatus from different areas were compared to provide a scientific basis for the separation of high-quality strains． Method： The polysaccharides in Polyporus umbellatus were determined by UV-vis and ergosterol were determined by HPLC． Ｒesults： The contents of polysaccharides and ergosterol in Polyporus umbellatus are different from different areas and source． The contents of two materials in fruiting body are higher than in sclerotiums’． The highest polysaccharides in fruiting body of 60． 694 6 mg·g － 1 is 28． 2 times in sclerotia from Yuxian． The highest Ergosterol of 4． 187 0 mg·g － 1 is 2． 1 times in sclerotia from Qinyuan． The content range of polysaccharides in sclerotium is 2． 151 7 ～ 8． 887 2mg·g － 1 ，with the highest from Liuba and the content rang of ergosterol is 0． 825 9 ～ 2． 023 2mg·g － 1 ，with the highest from Qinyuan． Conclusion： The active ingredients are different with the origin and parts，and the results can be used to provide a scientific basis for the standardized cultivation and excellent breeding of Polyporus umbellatus． Key words Polysaccharides in Polyporus umbellatus； ergosterol； content determination； UV-vis； HPLC
60 min，90 min，120 min 连续测定，以 A 值计算，ＲSD 值为 1． 82 % ，表明 2 h 内样品稳定性良好。结果见 表 4。
表 4 稳定性试验结果
时间 / min 0 30 60 90 120
吸光度（ A） 0． 403 0． 402 0． 413 0． 411 0． 420
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第4 期
李香串，等： 不同产地野生猪苓多糖与麦角甾醇的含量分析
坐标（ x） ，得到葡萄糖标准曲线方程为 y = 5． 065 6x + 0． 047 3，r = 0． 999 0，结 果 表 明 葡 萄 糖 含 量 在 0． 018 5 mg·mL － 1 ～ 0． 129 5 mg·mL － 1 范围内时与吸 光度呈良好的线性关系，该标准曲线可用于样品中 猪苓多糖的含量计算。标准曲线见图 2。