超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)

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超氧阴离子清除能力检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-5054

超氧阴离子清除能力检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-5054

2超氧阴离子清除能力检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-5054规格:100T/96S微量法产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体110mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体 1.3mL×1支2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三液体6mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体6mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体6mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制:1、试剂二:临用前每瓶加5.34mL 蒸馏水充分溶解。

2-8℃保存4周。

产品说明:生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。

AP-TEMED 系统产生超氧阴离子,与盐酸羟胺反应生成NO 2-,NO -与对氨基苯磺酰胺和α-萘胺的作用生成红色的偶氮化合物,在530nm 处有特征吸收峰,样品对超氧阴离子的清除能力与530nm 的吸光值呈负相关。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器,冰和蒸馏水。

操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1、组织样本:按照组织质量(g )︰提取液体积(mL)为1︰5~10的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g ,4℃,离心10min ,取上清,置于冰上待测。

2、液体样本:直接检测。

若有浑浊则离心后取上清待测。

3、细胞样本:收集细胞到离心管内,弃上清,按照每500万细胞加入1mL 提取液,超声波破碎细胞(功率200w ,超声3s ,间隔10s ,重复30次),然后10000g ,4℃,离心10min ,取上清,置冰上待测。

2022年同济大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)

2022年同济大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)

2022年同济大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)一、填空题1、细菌表面常有毛状附属物,其中用于运动的称为______,帮助细菌附着到物质表面的称为______,在不同菌株间传递遗传物质的称为______。

2、温和噬菌体的存在形式有三种,即______、______和______。

3、呼吸链在传递氢或电子的过程中,通过与______反应相偶联,产生了生物的通用能源______,其形成机制可根据英国学者______的______ 学说来解释。

4、实验室常用的培养细菌的天然培养基为______,培养酵母菌的天然培养基为______,培养放线菌的组合(合成)培养基为______等,培养真菌的组合培养基为______等。

5、细胞骨架是由______、______和______三种蛋白质纤维构成的细胞支架,具有支持、运输和运动等功能。

6、在微生物促进人类医疗保健事业发展过程中,曾发生过“六大战役”,即______,______,______,______,______,______。

7、1971年,McCord和Fridovich提出了一个关于厌氧菌氧毒害机制的______学说。

其根据是厌氧菌缺乏______酶,一般也缺乏______酶,因此易受______等的毒害。

8、微生物间和微生物与它种生物间的主要关系有五种,即______、______、______、______、______。

9、某些核糖体蛋白mRNA的部分二级结构和rRNA的部分二级结构相似,当rRNA短缺时,多余的核糖体蛋白质与本身的mRNA结合,从而阻断本身的翻译,同时也阻断同一多顺反子的mRNA下游其他核糖体蛋白质编码区的翻译,使______的合成和______的合成几乎同时停止。

10、在免疫学反应中,抗原抗体反应的一般规律是______、______、______、______、______。

二、判断题11、核糖核蛋白体是核酸和蛋白质合成的场所。

植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒

植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒

植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途植物总抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量检测试剂盒是一种旨在通过过硫酸钾的参与,使染料ABTS 氧化,在抗氧化剂的存在下,通过分光光度仪,观察其峰值下降的变化,来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力,即抑制氧化等值浓度的权威而经典的技术方法。

该技术经过精心研制、成功实验证明的。

适用于各种体液包括血浆、血清、尿液、脑脊液、唾液、精液等各种体液的总抗氧化能力检测。

产品严格无菌,即到即用,操作简易,性能稳定。

技术背景超氧自由基阴离子(superoxide radical;O2-)、过氧化氢(hydrogen peroxide;H2O2)、羟自由基或氢氧基(hydroxyl radical;OH-)、过氧化基(peroxyl radical;ROO-)、氢过氧自由基(hydroperoxyl;HOO)、烷氧自由基(alcoxyl radical)、氮氧基(nitric Oxide;NO-)、过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite anion;ONOO-)次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)、半醌自由基(semiquinone radical)、单线态氧气(singlet oxygen)等细胞内活性氧族(Reactive Oxygen Species;ROS)的产生和增多,将导致细胞衰老或凋亡,甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。

在生物系统内,通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等,大分子,例如白蛋白、铜蓝蛋白(ceruloplasmin;CER)、铁蛋白(ferritin)和抗氧化因子,例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素(bilirubin)等,产生抗氧化能力,即捕获自由基的能力,达到消除或降低ROS的损害。

抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒

抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒

抗超氧阴离子自由基及生产超氧阴离子自由基测试盒说明书修订日期:2015.07.13 Cat number:KGT012Store at4℃for6monthsFor Research Use Only(科研专用)一、测定原理模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统,产生超氧阴离子自由基O2—,加入电子传递物质及gress 氏显色剂,使反应体系呈现紫红色,可用分光光度计测其吸光度,当被测样本中含有O2。

抑制剂时,则比色时测定管的吸光度低于对照管的吸光度,而如果被测样本中含有产生O2。

物质时,则比色时测定管的吸光度高于对照管的吸光度,通过以维生素C做标准,可计算出被检物品对O2。

的影响能力。

二、试剂盒组份组份KGT01250assaysBuffer A 5.0mLBuffer B 5.0mLBuffer C 5.0mLBuffer D350μLBuffer D稀释液 5.0mL试剂E1支试剂F1支Vc标准品4支注意事项1.Buffer A室温较低时会有部分结晶析出,溶解后加蒸馏水稀释10倍至1×Buffer A50ml。

2.Buffer D用前用Buffer D稀释液按1︰14稀释至1×Buffer D(不可冷冻,4℃可保存2个月)。

3.试剂E配制:将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用,4℃避光保存。

4.试剂F配制:将试剂加入蒸馏水37.5mL中溶解后备用,4℃避光保存。

5.显色剂配制:试剂E︰试剂F︰冰乙酸=3︰3︰2的体积比配制,4℃避光保存(冰乙酸自备)。

6.Vc标准贮备液配制:将一支Vc标准品加蒸馏水定容至5ml(Vc标准配制后当天内使用)Vc标准品工作液(0.15mg/ml)配制:取1ml贮备液加4ml蒸馏水,5倍稀释现配现用。

Vc标准品配制后见光极易分解,配制的0.15mg/ml Vc标准品工作液需30分钟内检测。

三、操作步骤试剂测定管对照管标准管1×Buffer A (mL ) 1.01.0 1.0蒸馏水(mL )0.050.15mg/ml Vc 标准品(mL )0.05样品(ml )0.05Buffer B (mL )0.10.10.1Buffer C (mL )0.10.10.11×Buffer D (mL )0.10.10.1用涡旋混匀器充分混匀,置37水浴40分钟显色剂(ml )2.02.02.010min 后倒入1cm 光径比色杯中,蒸馏水调零,波长550nm 处比色。

超氧阴离子清除实验

超氧阴离子清除实验

·O2ˉ自由基清除实验(1) 实验原理黄嘌呤氧化酶黄嘌呤+H2O+O2尿酸+H2O2+·O2¯即黄嘌呤氧化酶在有氧条件下催化黄嘌呤转化为尿酸,同时产生超氧阴离子自由基(·O2¯)。

·O2¯与NBT结合后呈蓝色,样品清除能力越大,与NBT结合的·O2¯越少,溶液的颜色越浅。

(2)试剂Xanthine(黄嘌呤): (C5H4N4O2 ), MW=152.1, 6.084mg/100mL(0.4mmol/l)实际配制:1.216mg/10mL,与NBT等体积混合使用Xanthine oxidase(黄嘌呤氧化酶)贮液: 1 unit/mL , (溶解酶的溶液要高压灭菌!防止蛋白酶对酶的降解!)0.05 unit/mL,每次取200uL稀释到4mL(PBS溶解)NBT: (Nitro blue tetrazolium chloride氯化硝基四氮唑蓝), MW=817.65,黄色19.6236mg/100mL(0.24mmol/l)实际配制3.925mg/10mL,与Xanthine等体积混合使用PBS(0.01mol/L,pH=8.0): NaCl 8g, KCl 0.2g, Na2HPO4(无水) 1.44g, KH2PO4 0.24g,800mL水,用NaOH(1M)调pH到8.0,定容到1000mL。

实际配制500mL。

高压灭菌,室温保存。

PBS(0.01mol/L,pH=7.4): 配制同上Ascorbic acid: MW=176.12 母液为1mg/mL 先两倍逐级稀释5个浓度实际配制见记录本!HCl(1M): MW=36.5 310ul/10ml.(36% HCl密度1.18g/ml)实际配制:800uL浓盐酸+9mL水,于塑料管中4℃保存。

NaOH(1M): MW=40 0.4g/10mL, 存于冰箱(3) 测定方法超氧阴离子自由基清除能力的测定参照Bae等人的方法略加改进。

sod检测试剂盒原理

sod检测试剂盒原理

sod检测试剂盒原理SOD检测试剂盒原理主要涉及到超氧化物歧化酶(SOD)的检测。

SOD是一种重要的抗氧化酶,负责清除体内产生的超氧自由基(O2-)。

在正常情况下,超氧自由基的产生和清除保持平衡,但当机体处于应激状态下,超氧自由基的产生量增加,而SOD的活性降低,则会导致氧化应激的增加和自由基损伤的发生。

因此,检测SOD的活性水平对评估机体的抗氧化能力和氧化应激状态具有重要意义。

SOD检测试剂盒主要通过一系列的反应和测定来评估SOD的活性水平。

下面将详细介绍SOD检测试剂盒的原理。

1.建立标准曲线:首先,准备一系列浓度不同的SOD标准溶液,称量一定量的SOD酶加入到不同的试管中。

然后,加入一定量的染色剂(如NBT溶液)和一定量的底物(如VES溶液),使其反应一定的时间。

最后,使用其中一种固定方法测量反应产物的光密度,并记录下来,得到不同浓度下的光密度值。

2.准备试样:获取待测样品,如血清、细胞提取液等,将其转移到试管中。

3.反应:将试管中的样品(或标准溶液)加入其中一种缓冲溶液和染色剂、底物等试剂,使其反应一定的时间。

4.终止反应:加入适量的终止液,使反应停止。

5.测量光密度:使用特定的方法或仪器测量反应产物的光密度,并记录下来。

6.数据处理:根据标准曲线,将测得的各样品(或标准溶液)的光密度值换算成SOD的活性。

根据不同的SOD检测试剂盒,可能需要进行一定的计算和校正。

SOD检测试剂盒的原理基本上是通过测定反应产物的光密度来间接评估样品中SOD的活性水平。

反应过程中,底物和染色剂会与SOD反应生成有色产物(如蓝色、紫色),其浓度与样品中的SOD活性呈正相关。

测得的光密度值经过换算和校正后,即可得到目标样品中SOD的活性水平。

需要说明的是,不同的SOD检测试剂盒可能具有不同的具体原理和操作步骤,但总体上都是通过测量特定反应产物的光密度来评估SOD的活性。

同时,SOD检测试剂盒还可能结合其他酶活性的检测,如过氧化氢酶(CAT)的活性等,以全面评估抗氧化酶系统的功能和机体的抗氧化能力。

DHE-ROS活性氧的检测

DHE-ROS活性氧的检测

产品号 BB-4101 BB-4102 BB-4201 BB-4202 BB-4203 BB-4204 BB-4131 BB-4133 BB-4122
产品 细胞周期检测试剂盒 JC-1 线粒体膜电位试剂盒 Caspase 3 活性检测试剂盒 Caspase 8 活性检测试剂盒 Caspase 9 活性检测试剂盒 Caspase 10 活性检测试剂盒 细胞凋亡形态学检测试剂盒 Rhodamine 123 染色试剂盒 AO/EB 双染试剂盒
荧光显微镜检测: 1、 对贴壁生长细胞或活组织,可直接在荧光显微镜下观察;对悬浮生长细胞,取 25-50 μl 细胞悬液滴到一张显微载玻片上,再盖上一张盖玻片。 2、 荧光显微镜下,用蓝光或绿光激发,观察和拍摄细胞红色发射图像,ROS 阳性细

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咨询邮箱:bestbio@
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咨询邮箱:bestbio@
电话:021-33921235
本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!
产品说明书
产品特点: ● 使用方便:可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式
细胞仪检测; ● 背景低,灵敏度高; ● 线性范围宽,使用方便。
电话:021-33921235
本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途!
产品说明书
胞在整个核区被染成红色;用紫外光激发时,胞浆中未氧化的二氢乙啶可发出 蓝色荧光。
流式细胞仪分析: 1、 对贴壁生长细胞,用胰酶消化制备成单细胞悬液;对悬浮生长细胞,直接收集细胞。 用 0.5~1 ml 冰冷 PBS 重悬细胞(5~10 万)。 2、 采用 480~535 nm 波长激发,测定 590 nm~610 nm 以上的发射,细胞应可分成两个 亚群:ROS 阴性细胞仅有很低的荧光强度,ROS 阳性细胞有较强的红色荧光。

超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒分光光度计法

超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒分光光度计法

超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒(A002-96T分光光度计法)一、测定原理该方法利用NADH-PMS-NBT为超氧阴离子(O2·-)生成系统,超氧阴离子清除剂能减少NBT的蓝色。

通过检测560nm处吸光值可判断体系中还原物质的还原能力。

二、试剂组成试剂一:液体40mL×1瓶;试剂二:液体1mL一瓶;试剂三:液体1mL一瓶;试剂四:粉剂一支;试剂五:1mg/mL没食子酸标准品,1mL。

三、储存条件及有效期试剂盒-20℃可保存6个月。

四、试剂的配制试剂一工作液:用时加双蒸水360mL,也就是10倍稀释,得到400mL试剂一工作液;试剂二工作液:用赠送的棕色瓶配制。

试剂二工作液由试剂二加上100mL试剂一工作液配得,现配现用,注意避光;试剂三工作液:试剂三工作液由试剂三加上100mL试剂一工作液配得,现配现用;试剂四工作液:粉剂一支。

用50mL双蒸水溶解,摇匀后,取10mL,加入90mL试剂一,配成试剂四工作液,现配现用,用赠送的棕色瓶盛装。

注意避光,配好的试剂请于2小时内用完。

试剂五:1mg/mL没食子酸标准品,100μL,-20℃保存。

五、操作步骤测定吸光值。

1空白管很重要,建议做3个以上平行;2如样品颜色较浅可不做对照管六、计算公式注: 1 如未做对照孔,可以将其视作为0;2 阳性对照求值时将其视作测定孔进行计算即可。

七、注意事项1. 如样品中色素物质不是分析对象,建议先通过SEP C18柱进行脱色处理,处理后样品可不做对照孔;2. 如不确定样品的超氧阴离子自由基清除能力,可先做不同浓度的稀释液进行摸索,并选择适宜浓度进行测定,高浓度下,浓度与清除率间并不线性相关。

3. 试剂四切记避光保存,特别是配制后,且应尽快用完。

建议在做好一切其它准备工作后再配制试剂四应用液。

试剂四正常颜色为黄色,强光照射下,5-10分钟内会变为绿色,随后变为蓝色,变色后试剂不可再用!4. 试剂二、三应用液和样品混匀后再加入试剂四,次序颠倒会导致不显色。

植物组织超氧阴离子自由基含量测定

植物组织超氧阴离子自由基含量测定

植物组织超氧阴离子自由基含量测定一、实验原理超氧阴离子是植物体内重要的信号分子,同时,在逆境环境或细胞衰老时,氧作为电子传递的受体,易得到单电子而形成超氧阴离子。

它是细胞内生成的第一个氧自由基,能启动自由基连锁反应,经过一系列反应转化生成过氧化氢、羟自由基、单线态氧等其它的氧自由基,最后导致植物细胞的氧化损伤。

利用羟胺氧化的方法可以测定生物系统中超氧阴离子含量。

超氧阴离子与羟胺反应生成亚硝酸根,亚硝酸根在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成粉红色的偶氮染料(对-苯磺酸-偶氮-α-萘胺)。

取生成物在530nm波长处测定吸光度(A)值,根据A530值可以算出样品中超氧阴离子含量。

二、实验仪器高速冷冻离心机;分光光度计;恒温水浴锅;研钵;试管;移液管;试管架;移液管架;洗耳球等。

三、实验试剂0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8);10mmol/L盐酸羟胺;17mmol/L对氨基苯磺酸;7mmol/L α-萘胺;5µg/mL亚硝酸钠标准液四、实验材料小麦叶片五、实验步骤1、亚硝酸根标准曲线制作按照下表分别加入亚硝酸钠标准液和蒸馏水:氨基苯磺酸和α-萘胺各1mL),置于25℃显色15min,然后以1号管调零,在530nm波长处测定其余管的吸光值。

最后以1-9号管亚硝酸根含量为横坐标,吸光度值作纵坐标,求出方程式标准曲线回归直线。

2、超氧阴离子含量测定(1)提取液制备:称取1g小麦叶片放入研钵中,加入少许预冷的50mmol/L 磷酸缓冲液(PH7.8),研磨成匀浆,最后定容至5mL,摇匀后,在4℃,3000r/min 下离心10min,取上清液,在4℃,12000r/min下离心20min,取二次上清为提取液。

(2)取4支试管,按下表加入溶液各1mL混匀,置于25℃下显色15min,最后以1号管调零,在530nm波长处测定其余管吸光值。

六、实验结果及计算求平均值得A530为0.073。

通过标准曲线回归方程求得亚硝酸根含量为2.36nmol/mL ,反应体系中提取液为1mL,故反应体系中中亚硝酸根含量为2.36nmol。

南京建成生物工程研究所价目表

南京建成生物工程研究所价目表

南京建成生物工程研究所价目表南京建成生物工程研究所价目表二○○四年七月一、抗氧化检测试剂及科研试剂:(注:**为新试剂盒)序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A001 超氧化物歧化酶(SOD)测试盒100T 盒羟胺法240.00 建成50T 盒羟胺法130.00 建成A003 丙二醛(MDA)测试盒100T 盒TBA法150.00 建成50T 盒TBA法90.00 建成A002 黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A015 总抗氧化能力(T-AOC)测试盒50T 盒比色法120.00 建成25T 盒比色法70.00 建成A018 羟自由基测试盒50T 盒比色法150.00 建成A052 超氧阴离子自由基(O )测试盒50T 盒比色法130.00 建成A044 髓过氧化物酶(MPO)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A007 过氧化氢酶(CAT)测试盒紫外分光光度法100T 盒紫外比色法100.00 建成可见光分光光度法100T 盒钼酸铵法100.00 建成A064 过氧化氢(H2O2)测试盒50T 盒比色法50.00 建成A004 谷胱甘肽—S转移酶(GSH—ST)测试盒80T 盒比色法200.00 建成A005 谷胱甘肽—过氧化物酶(GSH—PX)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A062 谷胱甘肽-还原酶(GR)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A006 还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A061 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 测试盒50T 盒比色法180.00 建成A063 巯基(-SH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A034 单胺氧化酶(MAO)测试盒50T 盒紫外比色法150.00 建成A012一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法) 50T 盒比色法300.00 建成25T 盒比色法180.00 建成A013 一氧化氮(NO)测试盒(化学法测NO2—)100T 盒比色法150.00 建成A014 -1 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[(T-NOS、iNOS、cNOS)三型同时出结果] 50T 盒比色法480.00 建成25T 盒比色法260.00 建成A014-2 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[总NOS(T-NOS)] 50T 盒比色法350.00 建成25T 盒比色法200.00 建成A019-1 乳酸(LD)测试盒(测全血)50T 盒紫外比色法240.00 建成50T 盒可见光比色法240.00 建成A019-2 乳酸(LD)测试盒(测血清、组织)50T 盒比色法200.00 建成A020 乳酸脱氢酶(LDH)测试盒100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法130.00 建成A016-1 A TP酶测试盒(组织及细胞膜需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法150.00 建成A016-2 A TP酶测试盒(组织及细胞膜不需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A057 Cu-A TP酶(Cu-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A069 氢-钾A TP酶(H+-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A070-1 超微量A TP酶测试盒(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ A TPase、总ATPase)200T 盒比色法390.00 建成100T 盒比色法230.00 建成A070-2 超微量A TP酶测试盒(可测总A TPase)100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A021 苹果酸脱氢酶测试盒50T 盒紫外比色法面议建成A022 琥珀酸脱氢酶测试盒50T 盒比色法240.00 建成A032 肌酸激酶(CK)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A023 胆碱酯酶(CHE)测试盒50T 盒比色法70.00 建成A024 乙酰胆碱酯酶(T-CHE)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A025 丁酰胆碱酯酶测试盒50T 盒比色法150.00 建成A027 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A031 b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)测试盒50T 盒比色法260.00 建成A053 β-葡萄糖醛酸苷酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A055** 红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测试盒50T 盒比色法260.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A049 前列腺酸性磷酸酶(PACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A058 抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A068 钙调神经磷酸酶(CaN)测试盒25T 盒比色法200.00 建成A072 全血2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)测试盒50T 盒比色法面议建成A047 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒50T 盒比色法300.00 建成A048 腺苷脱氨酶(ADA)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A073** 谷氨酰胺测试盒50T 盒比色法200.00 建成A074** 谷氨酸测试盒50T 盒比色法260.00 建成A075** 谷氨酰胺、谷氨酸(两种均可测)50T 盒比色法480.00 建成A076** 丙酮酸激酶(PK)测试盒50T 盒比色法面议建成A077** 己糖激酶(HK)测试盒50T 盒比色法面议建成A036 唾液酸(SA)测试盒(带SA标准) 50T 盒比色法200.00 建成A017-1 细胞凋亡测试盒(TdT酶、稀释液、POD)10片盒TUNEL法1450.00 建成A017-2 细胞凋亡测试盒(TdT介导的原位末端切口平移双标记法)(全套)10片盒TUNEL法1850.00 建成A008 维生素E(VE)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A009 维生素C(VC)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A010 维生素B1(V B1)测试盒50T 盒比色法面议建成A011 维生素B2(V B2)测试盒50T 盒比色法面议建成A026 总氨基酸(T—AA)测试盒80T 盒比色法100.00 建成A030-1 羟脯氨酸测试前处理试剂消化液50T 瓶比色法100.00 建成调PH试剂50T 瓶比色法70.00 建成A030-2 羟脯氨酸(Hyp)测试盒(可测血清、培养液、尿液、心肌、皮肤、软骨、肝脏等等)50T 盒比色法180.00 建成A041 5’-核苷酸酶(5’-NT)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A035 D—木糖测试盒50T 盒比色法100.00 建成A056 糖化血红蛋白(GHb)测试盒15T 盒比色法55.00 建成A037 糖化血清蛋白(GSP)测试盒(果糖胺法)(带标准)50T 盒比色法150.00 建成25T 盒比色法80.00 建成A043 肝/肌糖元测试盒50T 盒比色法160.00 建成A038 脂蛋白(a)[LP(a)]测试盒96T 盒ELISA法380.00 建成A054 脂肪酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A067 总脂酶【脂蛋白脂酶(LPL)/肝脂酶(HL)】测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法160.00 建成A042 游离脂肪酸(NEFA)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A033 脂褐质测试盒50T 盒荧光比色法100.00 建成A039 血清铁测试盒50T 盒比色法100.00 建成A040 总铁结合力(TIBC)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A029 铜兰蛋白(CP)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A071 微量游离血红蛋白测试盒50T 盒比色法80.00 建成A028 白蛋白测试盒(溴甲酚绿法)100T 盒比色法30.00 建成A045-1 总蛋白定量测试盒(双缩脲法)100T 盒比色法30.00 建成A045-2 总蛋白定量测试盒(考马斯亮兰法)100T 盒比色法30.00 建成A046 蛋白标准品(总蛋白、白蛋白) 1ml 支7.00 建成A050-1 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒试管比浊法60.00 建成A050-2 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒平板法60.00 建成A050-3 溶菌酶标准品2mg 支6.00 建成A050-4 微球菌粉30mg 支40.00 建成A065 解脲(溶脲)支原体快速培养基(UU培养基)每人份支培养基10.00 建成A066 人型支原体快速培养基每人份支培养基10.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成二、不孕症系列酶免疫试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家B001 抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B002 抗精子抗体测试盒(AsAb)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B003 抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成B004 抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成三、常用试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家C001 钾(K)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C002 钠(Na)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C003 氯(Cl)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比色法(手工)28.00 建成C004 钙(Ca)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)40.00 建成30T 盒比色法(手工)30.00 建成C006 磷(Pi)测试盒(带标准)100T 套孔雀绿显色39.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成C009 谷丙转氨酶(SGPT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C010 谷草转氨酶(SGOT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C018 总胆红素、直接胆红素测试盒80T 套咖啡因比色法65.00 建成80T 套一步法65.00 建成C017 Υ—谷氨酰转移酶(Υ—GT)测试盒100T 套比色法88.00 建成C020 尿胆红素测试盒50T 套哈里森氏法25.00 建成C033 尿胆原测试盒50T 套25.00 建成C013 尿素氮(BUN)测试盒100T 套脲酶比色法36.00 建成100T 套二乙酰-肟比色法27.00 建成C016 淀粉酶(AMS)测试盒100T 套淀粉一碘比色法39.00 建成C012 尿酸测试盒50T 套比色法40.00 建成C011-1 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(除蛋白)60.00 建成C011-2 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(不除蛋白)40.00 建成C021 血红蛋白稀释液(测试液)5ml 支HICN比色法4.50 建成C022 血红蛋白标准品5ml×4支套比色法12.00 建成C023 血红蛋白校正液250ml 瓶比色法35.00 建成100ml 瓶比色法14.00 建成C024 血小板稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C025 白细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C037 红细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C026 血细胞仪清洗液250ml 瓶25.00 建成C028 CO2结合力测试盒2ml×3×10 套滴定法40.00 建成C034 脑脊液蛋白测试盒50T 盒磺基水杨酸法50.00 建成C038 血沉测试液100ml 瓶10.00 建成C039 嗜酸粒细胞直接计数液40ml×1 瓶50.00 建成C040 网织红细胞计数液8 ml×2 套试管法30.00 建成10 ml×1 瓶玻片法20.00 建成C035-1 尿蛋白定性测试盒100T 盒磺基水杨酸法30.00 建成C035-2 尿蛋白定量测试盒100T 盒CBB法30.00 建成C041 尿糖试剂100ml 瓶班氏法40.00 建成C027 尿粪隐血测试盒100T 套联苯胺法15.00 建成100T 套邻联甲苯胺法15.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成四、染液类序号产品名称规格单位检测方法售价厂家D001 碱性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D002 酸性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D003-1 酸性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-2 中性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-3 碱性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-4 双重酯酶染液5.0ml´4 盒染色60.00 建成D009 快速血细胞染液50ml×2 套染色40.00 建成D004 糖元染液10ml×4 盒染色40.00 建成D005 苏木素染液50ml×1 瓶染色40.00 建成D019 伊红染液100ml×1 套染色50.00 建成D006 H-E染液套染色55.00 建成D007 瑞氏染液50ml×2 套染色40.00 建成D010 瑞氏一姬姆萨复合染液50ml×2 套染色40.00 建成D011 姬姆萨染液套染色30.00 建成D015 巴氏染液(脱落细胞染色)套染色50.00 建成D017 快速H-E组织细胞及脱落细胞染液10ml×4 染色20.00 建成D008 革兰氏染液50ml×4 套染色50.00 建成D012 抗酸染液50ml×2 套染色40.00 建成D013 溴酚兰溶液1.0ml 支染色10.00 建成D014 溴乙淀溶液1.0ml 支染色20.00 建成D016 细胞活性鉴别染液20ml 瓶伊文斯蓝法20.00 建成D018 血管通透性测试染液20ml 瓶美蓝法20.00 建成D020** 过氧化物酶染液5ml 套染色20.00 建成五、各种浓度及PH值的缓冲液:(注: 以下缓冲液PH值、摩尔浓度按客户要求配制。

二氧化钛纳米材料对氧化应激状态大鼠肾脏的毒性

二氧化钛纳米材料对氧化应激状态大鼠肾脏的毒性

二氧化钛纳米材料对氧化应激状态大鼠肾脏的毒性沙保勇;刘洁;冯浩;景晓红;高巍【摘要】Objective To investigate the adverse effects of nano-titanium dioxide (TiO2 )on kidney tissues in healthy rats and rats with oxidative stress (OS).Methods Thirty-six healthy male SD rats were randomly divided into control group, alloxan-treated group, nano-TiO2 treated (NM) group, and alloxan and nano-TiO2 dual treatment (OS-NM)group.Nano-TiO2 of three concentrations (0.5,5 and 50 mg/kg body weight)was injected intraperitoneally.The level of OS biochemical factors and blood urea nitrogen (BUN)and pathological changes of kidney weredetermined.Results Compared with those in NM and OS groups,the levels of O2 -· and superoxide dismutase (SOD)in OS-NM group were significantly increased after exposure to nano-TiO2 of 5 mg/kg body weight (P <0.05).Nano-TiO2 of 50 mg/kg body weight led to significant changes of O2 -·,SOD,and glutathione (GSH) levels in OS-NM group in comparison with OS and NM groups (P <0.01).The levels of O2 -· and GSH between OS group and NM group changed significantly (P <0.05 ).Compared with healthy rats,OS rats showed significant increased BUN level (P <0.01),cell number and edema of renal tubular epithelial cells after nano-TiO2 exposure.A synergic effect between OS condition and nano-TiO2 level was shown on the increased level of O2 -·.Conclusion Nano-TiO2 induced more adverse effects on the kidney in OSrats,suggesting a synergistic effect between nano-TiO2 and OS.This resultprovides experimental evidence for patients’safe use of nano-TiO2 .%目的:研究二氧化钛(TiO2)纳米材料对正常及氧化应激 SD 大鼠肾组织的不良影响。

植物超氧阴离子自由基含量的测定LT

植物超氧阴离子自由基含量的测定LT

植物超氧阴离子自由基含量的测定一、实验目的了解实验原理,掌握实验技术二、实验原理超氧阴离子(O⎺∙2)能与羟胺反应生成NO3-,反应式为:NH2OH+2O⎺∙2+H+ = NO2-+H2O2+H2O其中NO2-进一步反应生成对氨基磺酸、反应后再生成α-苯胺,最后生成红色的偶氮化合物。

其中,偶氮化合物在520nm到560nm下有吸收峰,本次实验在530nm下进行比色。

三、实验材料与仪器植物材料小麦叶片,荠菜叶片试剂NaNO2- AR 100μl;蒸馏水;对氨基酸苯磺酸;α-苯酸;PBS;盐酸羟胺;对氨基苯磺酸;α-苯胺。

仪器可见光分光光度计,型号V-1100D四、实验方法1.标准曲线1 2 3 4 5 6 7NO2-标准液(50μg/ml)0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0蒸馏水 2.0 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0对氨基酸苯磺酸 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0α-苯酸 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0然后置于30o C培养箱中保温30min显色反应测定A530,以NO2-为横坐标,A530值为纵坐标,绘制标准曲线。

2. O⎺∙2的提取小麦叶片称取1.0g。

加入少量PH7.8的PBS研磨。

之后定容到5ml。

10000rpm 45o C离心10min。

之后取上清液备用。

注:空白对照直接用上清液显色测本底值NO2-含量。

3.组织中O⎺∙2测定(1)NO2-的产生O⎺∙2PBS 盐酸羟胺标样 2.0 1.5 0.5调零 2.0 2.0 0之后置于25o C保温20min(2)NO2-显色,调标准线上述反应液对氨基苯磺酸α-苯胺标样 2.0 2.0 2.0调零 2.0 2.0 2.0 30o C恒温箱中保温30min4.O⎺∙2含量计算从标准曲线中计算出测定液相对应的NO2-浓度,并换算成超氧阴离子的浓度(X),再算出超氧阴离子的含量。

微生物判断题

微生物判断题

[1.0分]1.我国古代先进的酿酒技艺最早是由名叫仪狄和杜康等代表人物发明的。

答:()[1.0分]2.在酒精发酵技术——阿米露法中,所采用的糖化菌是米根霉。

答:()[1.0分]3.微生物对环境所具有的极强适应性,与其微小的细胞体积密不可分。

答:()[0.0分]4.人类对微生物的利用,多数是利用其细胞物质。

答:()[1.0分]5.微生物是由全部原核类生物和部分小型真核生物所构成的一个低等生物群。

答:()[1.0分]6.病毒是一类原核生物。

答:()[1.0分]7.1935年,德国Domagk等直接合成了一种能治疗链球菌感染的红色的化学治疗剂——磺胺。

答:()()[1.0分]1.L—丙氨酸能促进芽抱的萌发。

答:()[1.0分]2.细菌鞭毛的有无,除通过电子显微镜或光学显微镜观察证明外,别无它法进行初步判断。

答:()[1.0分]3.常用抗生素除青霉素、头抱霉素和灰黄霉素外,绝大多数都由放线菌产生。

答:()[1.0分]4.细菌细胞的基本(一般)结构主要有细胞壁、细胞膜、核质体、细胞质等,特殊结构主要有鞭毛、菌毛、荚膜、芽抱和伴抱晶体等。

答:()[1.0分]5.细菌除基本形态外,在特定条件下还会出现异常形态——畸形和衰退形。

答:()[1.0分]6.球状体一般指G细菌在人工条件下除去部分细胞壁(主要是肽聚糖层)的活细胞。

答:()[1.0分]7.一个菌落若由一个细菌繁殖而来则为一个纯培养,实为一个“克隆”。

答:()[1.0分]8.细菌细胞“核”的数目,与菌体大小无关,与生长速度有关。

答:()[1.0分]9.革兰氏染色法可将所有的细菌分成G■菌和G-菌两大类。

答:()[1.0分]10.工业化发酵生产抗生素时,放线菌在液体培养基中,通常以形成大量的分生抱子来繁殖。

答:()[1.0分]11.支原体没有细胞壁,因而对青霉素及环丝氨酸等抗生素敏感。

答:()[1.0分]12.核质体是真核生物所特有的、无核膜结构的、原始形态的细胞“核”。

SOD试剂盒说明说书(100孔)

SOD试剂盒说明说书(100孔)

图7:以上样品孔和空白孔是按照96 孔板的排列
注意:可以根据自己样品的情况制 订稀释倍率。
“1 Unit SOD”的定义
『 “1 Unit SOD”的定义:20 µl样 品溶液中能够抑制50%的WST®-1
和超氧阴离子的还原反应所需的
酶的量。』
SOD活性的计算
请根据附带的光盘中的计算公式计算每个样品的SOD活性。如果样品之间差异不大,建议可以先做1个样品摸索条件,
*酶工作液加入后会立即有超氧化物生成,请用多通道移液器来加酶工作液以缩短时间,减少各孔间的误差。
表1. 孔板中各孔的溶液用量 空白1:不含抑制剂的空白对照 ; 空白2:样品空白对照; 空白3:试剂空白对照; *如果样品是组织或样品溶液的颜色 较深,必须测定每个稀释样品空白2 的值并扣除。
1) 各 孔 中 加入样品溶液或双蒸水。
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邮编:200030
检测机理
超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的抗氧化酶,它可以催化超氧阴离子(O2- )的歧化反应,生成过氧化氢和单
质氧。目前有很多种直接或间接地测量SOD活性的方法,在这些方法中,使用硝基蓝四唑(氮蓝四唑nitroblue tetrazolium ,
简称NBT)的一种间接测量方法因其便捷、简单的使用方法而被广泛应用。但是,NBT法存在一些缺点,例如生成的染 料(Formanzan dye)的水溶性较低,会和黄嘌呤氧化酶的还原型发生反应等问题。SOD检测试剂盒- WST®提供了更为 简便的检测SOD的方法,它是利用同仁化学研究所研发的高度水溶性四唑盐WST®-1(2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4二磺酸苯基)-2氢-四唑盐,二钠盐),能与超氧阴离子(O2- )反应生成一种水溶性的染料。WST®-1被超氧阴离子还原的 比率与黄嘌呤氧化酶的活性线性相关,并且会被SOD所抑制(见下图,即红色区域SOD反应优先发生,SOD反应完后蓝

细胞ROS测定试剂盒说明书1

细胞ROS测定试剂盒说明书1

用户自备
胰蛋白酶乙二胺四乙酸混合液(GMS12024):用于细胞脱离 完全细胞培养液(GMS12052):用于细胞操作所需的培养基 15 毫升锥形离心管:用于细胞操作的容器 1.5 毫升离心管:用于细胞染色的容器 血细胞计数仪:用于细胞计数 台式离心机:用于沉淀细胞 细胞流式仪:用于细胞荧光分析 (共聚焦)荧光显微镜:用于观察荧光细胞
5
c) 或使用荧光分光光度仪检测(定量检测):
1)移取 400 微升上述细胞悬液到 1 毫升比色杯
2)加入
微升 GENMED 保存液(Reagent D)
3)上下倾倒混匀数次
4)放进荧光分光光度仪:激发波长 540nm,散发波长 590nm――
RFU 增高,表明活性氧族(ROS)含量高
2
二、 直接法
活体组织氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)高质荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒 细胞内氧化应激活性氧(ROS)比色法定量检测试剂盒
细胞内氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒 冰冻切片氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A
GMS10111.1 v.A
GENMED 细胞内氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
GENMED 细胞内氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氢溴化乙啶, 在细胞氧化条件下,产生红色荧光,来定量检测细胞内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。 该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养 学等的研究。产品严格无菌,即到即用,操作简易,活体检测,性能稳定。

索莱宝超氧阴离子含量检测试剂盒说明书

索莱宝超氧阴离子含量检测试剂盒说明书

超氧阴离子含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:BC1290规格:50T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体100 mL×1瓶4℃保存试剂一液体32 mL×1瓶4℃保存试剂二液体25mL×1瓶4℃保存试剂三液体25 mL×1瓶4℃保存试剂四液体42 mL×1瓶(自备)4℃保存标准品液体1mL×1支4℃保存溶液的配制:1、试剂四:自备氯仿;2、标准品:10μmol/mL 亚硝酸钠。

产品说明:生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO 2-,NO 2-在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下,生成紫红色的偶氮化合物,在530nm 有特征吸收峰,根据A 530值可以计算样本中O 2-含量。

技术指标:最低检出限:0.00124 μmol/mL 线性范围:0.0019-0.25μmol/mL注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、氯仿和蒸馏水。

操作步骤:一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)1.植物、动物组织:称取约0.1g 样本,加入提取液1mL ,充分研磨,12000rpm ,4℃,离心20min ,取20μL 上清测定蛋白含量,其余上清作为待测样本。

2.血清或培养液:直接测定。

二、测定步骤1.分光光度计预热30min 以上,调节波长至530nm ,蒸馏水调零。

2.标准溶液的制备将标准溶液稀释为0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078125、0.0039μmol/mL的标准溶液,用这些标准管做标准曲线。

用EP6-A2方法验证比色法检测血清超氧化物歧化酶

用EP6-A2方法验证比色法检测血清超氧化物歧化酶

用EP6-A2方法验证比色法检测血清超氧化物歧化酶齐发梅;李金龙;齐占斌【摘要】Objective To demonstrate the linear range of Superoxide Dismutase (SOD) activity colorimetric kit by the EP6-A2 method, and evaluate the performance of this kit. Methods According to the EP6-A2 document that issued by Clinical and Labo-ratory Standards Institute(CLSI), 6 samples were prepared and detected in duplicate in random order. After outlier test, the propor-tional error (SDr), polynomial regression coefficients (bi), standard error (Syx) and deviation from linearity (DLi) were calculated. Results No outlier was found in all test results. There was no statistically significant difference between zero and nonlinear coeffi-cient b2 in quadratic regression polynomial, so were b2 and b3 in cubic regression polynomial(P>0.05). The linear was the best re-gression polynomial. Conclusion The detecting linear range of SOD assay kit used in our laboratory is 0~250U/ml, in accordance with statement of kit instructions.%目的:用EP6-A2方法验证比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)试剂线性范围,对该试剂盒的性能进行初步评价,为临床提供一种线性范围较宽、准确性好、使用方便、适合临床需求的良好检测试剂。

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超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)
简介:
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基,可攻击生物大分子,如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等,使其交链或者断裂,引起细胞结构和功能的破坏,与机体衰老和病变有很密切的关系,清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。

Leagene 超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺比色法)又称超氧阴离子清除能力检测试剂盒,其检测原理是利用羟胺氧化的方法可以检测生物体系中超氧阴离子自由基(O 2-),即超氧阴离子自由基(O 2-)与羟胺反应生成NO 2-,在一定范围内颜色深浅与超氧阴离子自由基(O 2-)成正比,根据NO 2-反应的标准曲线将A 530换算成NO 2-浓度,再依据上述关系式即可计算出O 2-浓度。

该试剂盒主要用于测定植物组织中的超氧阴离子自由基含量或超氧阴离子清除能力。

该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:
自备材料:
1、 蒸馏水
2、 实验材料:植物组织(大豆、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等
3、 研钵或匀浆器
4、 离心管或试管
5、 低温离心机
6、 恒温箱或水浴锅
7、 比色杯
8、 分光光度计
操作步骤(仅供参考):
编号 名称
TO1123 50T Storage
试剂(A): NO 2-标准(1mM) 1ml RT 试剂(B): O 2- Lysis buffer 125ml RT 试剂(C): 羟胺溶液
30ml RT 试剂(D): 氨基苯磺酸显色液 30ml 4℃ 避光 试剂(E): 萘胺显色液 30ml
4℃ 避光 使用说明书
1份
1、准备样品:
①植物样品:取正常或逆境下的新鲜植物组织,清洗干净,擦干,切碎,迅速称取预冷的O2-Lysis buffer后冰浴条件下匀浆或研磨,4℃离心,上清液即为超氧阴离子自由基提取液,4℃保存备用。

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,4℃保存,用于超氧阴离子自由基的检测。

③高活性样品:如果样品中含有较高浓度的超氧阴离子自由基,可以使用O2- Lysis buffer 进行恰当的稀释。

2、配制系列NO2-标准溶液:取出NO2-标准(1mM)恢复至室温后,以NO2-标准(1mM)
按下表继续稀释:
加入物(ml) 1 2 3 4 5 6
NO2-标准(1mM)0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 蒸馏水0.99 0.98 0.97 0.96 0.95 0.94 NO2-含量(μM) 10 20 30 40 50 60
3、O2-加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意
避免产生气泡。

如果样品中的超氧阴离子自由基浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行管。

加入物(ml) 空白管标准管测定管
蒸馏水1——
系列NO2-标准(1-6号管) — 1 —
待测样品——0.25
O2- Lysis buffer ——0.25
羟胺溶液——0.5
混匀,25℃水浴孵育。

氨基苯磺酸显色液0.5 0.5 0.5
萘胺显色液0.5 0.5 0.5
混匀,30℃水浴孵育。

4、O2-测定:以空白调零,分光光度计(1cm光径比色杯)检测标准管、测定管530nm处吸光度(A标准、A测定)。

计算:
以系列NO2-标准(1-6号管)含量(μM)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,制作标准曲线,根据测定管的吸光度进而计算NO2-含量。

根据如下公式计算具体样品中超氧阴离子
自由基(O2-)的含量:
植物组织样品O2-(μM/g)=2×n×V T/(W×V S)
血清、尿液等样品O2-(μM/ml)=2×n×N/V S
注意事项:
1、实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于4℃。

2、如果样品中含有较多的叶绿素,会干扰测定结果,可在加入羟胺溶液25℃水浴孵育
20min后用等体积乙醚萃取叶绿素,再行显色反应。

3、如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定,但应考虑酶标仪的最大检测体
积。

4、所测样本的浓度过高,应用O2- Lysis buffer稀释样品后重新测定。

有效期:6个月有效。

相关:
编号名称
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
PS0013 RIPA裂解液(强)
TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)。

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