药物分析手性hplc
手性药物的分离在色谱法中的应用
手性药物的分离在色谱法中的应用
手性药物是指具有手性结构的药物分子，即能够存在两种非重叠的立体异构体，分别为左旋体和右旋体。
左旋体和右旋体的生物学活性、药理学效应以及代谢动力学等方面可能存在显著差异。
对手性药物的分离具有重要的意义。
色谱法是一种常用的分离手性药物的方法，可通过多种不同的基质和条件实现手性药物的分离。
色谱法是通过样品在固定或移动相上的分配和传递行为实现分离的方法。
常见的色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和超高效液相色谱法（UPLC）等。
高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于药物分析的方法。
在手性药物的分离中，HPLC常用的手性担子包括α-酮基-β-环糊精、β-环糊精、碘化环糊精等。
这些手性担子能够与手性药物形成包合物，从而实现手性药物的选择性分离。
还可以通过改变流动相的组成、pH值和温度等条件来调节手性药物与手性担子之间的相互作用，进一步优化分离效果。
HPLC分离后的手性药物可以通过光学旋光仪进行旋光度测定，以确定药物的手性纯度和相对含量。
HPLC在药物分析中的应用
高效液相色谱及其在药物分析中的应用摘要：高效液相色谱法的发展非常迅猛，许许多多的新方法不断涌现，它具有分离效率高，选择性好，分析速度快，操作自动化和应用范围广的特点。
本文主要简单介绍高效液相色谱的知识及其在药物分析中的广泛应用，通过实例描述了高效液相色谱法的优点。
高效液相色谱(HPLC)是结合经典液相色谱及气相色谱的分离原理。
由于与气相色谱法相比，高效液相色谱法具有下列主要优点：①不受试样的挥发性和热稳定性的限制，应用范围广②可选用不同性质的各种溶剂作为流动相，而且流动相对分离的选择性有很大作用，因此分离选择性高；③一般在室温条件下进行分离，不需要高柱温。
因而广泛应用于生物化学，生物医学，石油化工，合成化学，环境监测，食品卫生，以及商检，法检和质检等许多分析检验部门。
高效液相色谱不仅仅是一种有力的分析工具，而且越益成为分离制备和纯化的手段。
液相色谱在国内和国外已被广泛地应用于药物分析，尤其在我国，近十几年来HPLC方法越来越受到重视。
中国药典1985年版才规定使用，该版只有8个品种规定使用HPLC方法检测，到了1995版达到113个品种，2000版药典的应用达到了282种，2005版仅药典一部的应用达到了479种，涉及518项；药典二部中采用高效液相色谱法的品种有848种，较2000年版增加了566次，其中复方制剂、杂质或辅料干扰因素多的品种多采用高效液相色谱法。
2010年药典则更多的用液相色谱法取代了某些药物含量测定的薄层法，并引入了各式各样的检测器。
由此可见，我国高效液相色谱法在药物分析中的重要性。
1. 高效液相色谱仪的进展高效液相色谱(HPLC)是20世纪70年代迅速发展起来的一种分离分析技术，是目前各种色谱模式中应用最广的一个领域。
据估计，世界上几百万种化合物中除20％宜用气相色谱(Gc)分离分析外，其余80％的化合物，包括大(高)分子化合物、离子型化合物、热不稳定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC(正相HPLC、反相HPLC、离子交换色谱和离子色谱、体积排除色谱、亲合色谱等)进行分离分析。
手性药物HPLC分析
一、概述
分子中含有手性中心的药物为手性药物.
20世纪90年代以来, 药物的光学活性与生 物活性之间的关系引起人们日益重视,手 性药物的研究与开发已成为国内外医药 工作者的一个重要研究方向.
一、概述
手性药物的研究近二十年来发展速度 较快. 2001年诺贝尔化学奖授予3位从 事不对称反应研究的科学家.
法严格控制起始原料或试剂的光学纯 度,制定合理可行的手性杂质的限度.
二、手性药物药学研究的基本思路
（一）合成过程中控制光学纯度
1. 直接从起始原料或试剂中引入 其次要根据后续反应的机理,充分分
析后续反应是否会影响已有手性中心 的构型,如可能会产生影响时,应研究 与优化工艺条件,尽量避免或减少外
消旋化的产生.
引入手性环境使对映异构体间呈现物理特性的 差异是手性HPLC进行光学异构体拆分的基础.
四、手性药物的HPLC分析方法
手性固定相法
色谱柱：Chiral-AGP (100mm×4.0mm) 流动相：含0.5％异丙醇的20mM醋酸铵 缓冲溶液（pH4.1，醋酸盐总浓度约 110mM） 流 速：1mL/min 检测波长：225nm
一、概述 单一异构体药物
消旋体药物中的药理活性和治疗作用只由单一 对映体产生. 消除（或减轻）原有混旋体药物的副作用； 降低使用剂量； 提高疗效； 故使用单一活性异构体代替外消旋体药物, 已成为当今制药业的趋势. 2003年世界销售额领先前10之一： 降血脂药辛伐他丁、胃酸分泌抑制剂艾美拉唑
3
HO HO
CH2
C COOH CH3 3
四、手性药物的HPLC分析方法
L-甲基多巴样品中D-对映体的限量检查 流动相添加剂法
手性药物的拆分——高效液相色谱(HPLC)
其它类型的旋光性聚合物CSPs还包含旋光性聚酰 胺、聚氨酯类、含有轴手性联萘基的旋光性聚合物、 (+)-聚-N-二苯甲基马来酰亚胺等。
2.手性拆分实例
2.1 高效液相色谱手性固定相法分离酸性化合物对 映体
手性柱 涂敷型CDMPC(20 nm, 300 mm×4.0 mm) Pirkl(S,S)WhelkO1(12mm,250mm×4.0mm )
1.4 多模式环糊精固定相
环糊精衍生化固定相既可以用于反相分离又可以用于正相分 离，因而称为多模式手性固定相。手性识别作用既有包容络 合，又有π-π电荷转移，氢键和立体排斥相互作用等多种作 用，应用范围广泛。
制备过程有四个步骤：
（1）硅胶上键合N-（2-氨乙基-3-氨丙基）基团 （2）用对甲苯磺酰氯专一性的磺化环糊精的羟基 （ 3）2-氨乙基-3-氨丙基键合硅胶与甲苯磺酰氯-β-环糊精反应；通
淀粉手性固定相的制备方法与纤维素手性固定相相似，首先 用淀粉与相应的有机化合物，如苯甲酰氯，苯基异氰酸酯等 反应，得到淀粉衍生物，再将这种衍生物涂敷在氨丙基键合 硅胶上，便可以得到淀粉类手性固定相。
1.3 环糊精手性固定相
OH
HO O OHOHO
OHO OH O
HO
OH
OOH
O
OH
O
HO
OH
+
SiO2
O O Si O
CH2CH2CH2NHCOCH2CH2CONHCH2CH2NH
3.碳氧键连接 醚基键合相与环糊精反应，：
O
SiO2
O
HO
O Si
+ (CH2)3oCH2CHCH2
O
SiO2
O O Si O
HPLC中的手性固定相
经典手性固定相
• 配体交换型手性固定相：
经典手性固定相
• 配体交换型手性固定相：
– 配体结合型的手性固定相主要用于生物相关性 物质的手性分离，如氨基酸和羟基酸。只有那 些具有2个或以上可供螯合的基团的对映体， 才能在这一类固定相上分离。 – 常见的金属离子，有Cu（II）、Zn（II）、Ni （II）等，其中以Cu（II）为多用，Zn（II）分 离含羟基的氨基酸效果最好。 – 如分子结构中含有芳香基团或杂原子时，分离 情况会有所不同。
经典手性固定相
• 环糊精型手性固定相：
经典手性固定相
• 环糊精型手性固定相：
– 大多数环糊精手性固定相只适用于反相色谱， 分可以被用于正 相色谱，如Cyclobond I RN或SN，因其可作为 π电子供体，具有π电子接受能力的被分析物可 以正相色谱的方式保留在这种手性固定相上。
经典手性固定相
• 人工合成多聚体型手性固定相：
– 通过加聚反应制备的含手性基团的线性聚合单 螺旋聚丙烯酸酯和聚（甲基）丙烯酰胺，是这 类手性固定相的主要代表，最早的该类手性固 定相是1979年合成的单螺旋三苯甲基-甲基丙 烯酸酯。 – 螺旋形是该类固定相产生手性识别能力的主要 原因，碳水化合物、醚类、胺类、卤化物和有 机含磷化合物都有在该类固定相上分离的成功 例子。
经典手性固定相
• Pirkle型手性固定相：
– Pirkle型手性固定相最早于1970年代末由Pirkle课题组 研制。该类手性固定相是将小分子手性选择物质键合 到固体载体（如硅胶）上得到，通常被称作Pirkle型、 刷型或π电子给予或π电子接受型手性固定相。 – 刷型固定相的手性分子主要分布在惰性基质的表面， 容易接触到被分析物质。在被分离物与固定相间的主 要相互作用是π-π相互作用，同时也存在其他类型的相 互作用，如氢键、偶极-偶极作用、空间位阻等。 – 由于良好的载样能力，Pirkle型固定相非常适用于临床 前少量药物的HPLC手性分离制备。
浅谈高效液相色谱(HPLC)在目前手性药物分析领域中的应用
体进行分离。铜和锌等都是常用的配位金属。氨基酸及衍生物、 多巴胺、氧氟沙星等均可用此类方法分离[4]。由于目前为止还未 发现任何一种试剂可以作为通用型试剂，所以在选择手性试剂时 可能会经过多次尝试，选择分离效果最好的手性添加剂。
2.3 手性衍生化试剂法（CDR） 当满足以下条件时可以使用手性衍生化试剂法：①手性化 合物对映体中有氨基、羟基或羧基等基团，其容易发生衍生作 用；②反应产物具有稳定的化学性质，手性试剂具有稳定的手 性性质，以及较高的光学纯度，不易发生变化，不会在色谱条 件下发生消旋化反应[5]。根据手性化合物对映体中有氨基、羟 基或羧基等基团以及分离效率之间的差别，将反应产物进行分 离。胺类试剂、酰化试剂氯甲酸酯类等均是目前常用的衍生化 试剂。因为该类方法是使用普通色谱柱，因此成本较低，分离 的灵敏度较高。
过去常使用酶消化法、分布结晶法等非色谱方法对手性药 物进行拆分，拆分过程耗时、烦琐，具有较大的不可控性，近 年来随着色谱技术的不断发展，在对手性药物进行拆分方面有 了较为广泛的应用[2]。 目前在手性药物进行拆分时较为常用的 方法有气象色谱、毛细管电泳和毛细管色谱以及高效液相色谱 法等，其中高效液相色谱法（HPLC）以其反应速度快、效率 高、准确性强等特点被广泛应用。
究进展[J].药物分析杂志,2015,35(7):1127-1133. [2] 刘丽敏.高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用
[D].成都:西南大学,2008. [3] 潘永玉.手性药物的对映体分离方法与药物动力学研究[D].沈阳:
沈阳药科大学,2007. [4] 康自华,阳小成,陈婷.高效液相色谱法在药物分析中的应用[J].广
高效液相色谱（HPLC）是一种在近年来被广泛应用的色 谱分析方法，其与传统色谱法相比，具有效率高、灵敏性高和 分析分离速度快等优点。高效液相色谱法原理上可对所有的 热稳定性差、沸点高和相对分子质量大的有机物进行分离和分 析，其不仅可用于对手性药物的定量分析，而且可用于制备分 离，在手性药物分析领域具有较为广泛的应用。
HPLC法在手性药物分离中的应用
环 糊 精 （ 一－ Ｄ） 分 氯 噻 酮 对 映 体 ， ＨＰ Ｃ 分 离 效 ＨＰ１Ｃ 拆 ３ 但 一 Ｄ
（ ． 昌大 学 医学 院临床 药理研 究所 ， 昌 ３ ０ ０ ； １南 南 ３ ０ ６
２ 江 西 医学 院上饶 分 院 药理教 研 室 ， 西 上 饶 ３ ４０ ） ． 江 ３ ０ ０
关 键 词 ： Ｐ Ｃ 手性药 物 ； ＨＬ ； 对映体分 离
中图 分类 号 ：Ｒ ９
文 献标 识码 ： Ａ
主 要 有 、 、 环 糊 精 ｂ ｔ—ｙｌｄ ｘｒ ｐ ７型 ｅａｃｃｏ ｅｔｉ 其 衍 生 物 。宁 凤 ｎ及
容 等 ＿ 采 用 Ｌ脯 氨 酸 、 一 糊 精 （－ Ｄ） 羟 丙 基 一一 糊 精 ２ 一 口环 １Ｃ 、 ３ ｐ环 （ 一－ Ｄ） 甲 基 一 糊 精 （ －－ Ｄ） 为 手 性 流 动 相 添 ＨＰ￣Ｃ 和 环 Ｍｅ￣Ｃ 作 加剂 ， 以反 相 Ｃ 。 为 固 定 相 ， ＨＰ 法 对 Ｓ Ｒ 萘 普 生 进 柱 用 Ｉ Ｃ ，一 行 了 系 统 的拆 分 研 究 。蔡 小 淦 等 ¨ 使 用 天 然 ８Ｃ 作 ＨＰ Ｃ ３ ‘Ｄ Ｌ 手性 流 动 相 添 加 剂 拆 分 氯 噻 酮 对 映 体 ， 尝 试 了 羟 丙 基 一 也
） 衍 生 物都 成 功 地 应 用 于 分 离 对 映 体 。研 究 结 果 发 现 ， 的 如 果 分 子 中 的 手 性 中心 与 伯胺 基 邻 近 ， 获 得 最 佳 的 分 离 效 可 果 ＿ 。（ ） 维 素 衍 生 物 手 性 固 定 相 ： 维 素 是 以 Ｇ葡 萄 糖 】 ３纤 纤 一 为 结 构 单 元 的 天 然 光 活 性 线 性 高 聚 物 ， 个 结 构 单 元 有 一 个 每 伯 羟 基 和 ２个 仲 羟 基 ， 别 位 于 Ｃ 分 ６和 Ｃ 、 ３位 上 。通 过 对 ２Ｃ
手性药物拆分技术及分析
手性药物拆分技术及分析在药物研究和开发中，手性药物是一个非常重要的领域。
手性药物指的是分子结构中含有手性中心（手性碳原子）的化合物，左旋和右旋两种异构体具有不同的生物活性和体内代谢途径。
因此，正确地分析和分离手性药物对于药物研究和有效性的评估至关重要。
手性药物分析技术主要包括色谱法、光学活性法和核磁共振（NMR）法。
色谱法是一种常用的手性药物分析方法。
它基于手性药物的两种对映异构体在手性固定相上的不同吸附能力进行分离。
常见的色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）和毛细管电泳法。
HPLC通常使用手性固定相柱，通过选择性地吸附左旋或右旋手性分子，实现对手性药物的分离。
毛细管电泳是一种高效的手性药物分析方法，基于对映异构体在电场中的迁移速率不同，通过毛细管中背景电解质的浓度和pH值调节来分离手性药物。
光学活性法是一种基于光学活性性质来分析和测定手性药物的方法。
光学活性手性药物由于具有旋光性，可以引起光的偏振方向发生旋转。
常用的光学活性法包括旋光仪法和圆二色光谱法。
旋光仪法是通过测定手性分子对光的旋转角度来判断手性药物的对映异构体的含量和比例。
圆二色光谱法则是测量手性分子对不同波长光的吸收性质，通过对波长的差异来判断手性药物的对映异构体。
核磁共振（NMR）是一种基于核磁共振现象来分析手性药物的方法。
NMR技术通过检测手性碳原子或核自旋的信号来确定手性药物的结构和对映异构体的比例。
通过对样品进行核磁共振实验后，通过解释谱图的峰位和峰形等信息，可以得到手性药物的分析结果。
此外，还有一些其他的手性药物分析方法，如质谱法、X射线衍射法和环光谱法等。
这些方法在手性药物分析中各有优劣，适用于不同类别和性质的手性药物。
总之，手性药物分析技术对于药物研究和评估的重要性不可忽视。
科学家们通过不断研究和发展新的手性分析技术，为新药开发和治疗提供了更可靠和准确的手性药物分析方法。
手性药物的液相色谱法分析法在药物分析中的应用1
手性药物的液相色谱法分析法在药物分析中的应用第2组：冯文立0903511107彭新平0903511109李茂山0903511105摘要手性药物在目前使用的药物中占有很重要的地位，而液相色谱法在手性药物拆分中有广泛的应用。
本文就手性药物的分离测定中的液相色谱分析现状、分类、具体应用案例研究进行整理和描述，以此来帮助研究手性药物的药动学过程、药理和毒理作用机制、以及手性药物质量控制。
进而指导临床的应用。
手性药物在临床应用的化学药物中占有相当比例，但绝大多数仍以外消旋体给药，药理学研究表明，手性药物的各对映体在进入人体后药理作用有着明显差异，而市场上手性纯的药物和单一光学异构体的药物急剧增加，因此，手性药物的分离，测定对研究手性药物的药动学代谢过程，药理和毒理作用机制以及手性药物的质量控制等多方面具有重要的意义，本文随手性药物研究中应用较多的液相色谱加以综述。
AbstractChiral drugs play an important role in current use of drug, Moreover, liquid chromatographic method on chiral resolution have been widely used. Therefore This paper by the separation of chiral drugs determination of liquid chromatographic analysis situation, classification, application case studies were finishing and description, so as to be of the chiral drugs help to pharmacokinetic process, pharmacological and toxicological effect mechanism, and chiral drugs quality control and guide clinical application in the final.Chiral drugs in clinical application of chemical drug occupies scale, but most still away to spin body other than medicine, pharmacology study show that the chiral drugs each enantiomers in entering the human body pharmacological effects have obvious difference, and the market to pure drugs and sex of a single optical isomers drugs increase sharply, therefore, the separation of chiral drugs, determination of chiral drugs pharmacokinetic metabolic process, pharmacological and toxicological effect mechanism, and the quality of the chiral drugs control and so on various has an important关键词：手性药物液相色谱法药物分析前言[1]据报道：天然或半合成药物几乎都有手性，其中98%以上为光学活性物；全合成药物中40%为手性药物；目前常用的700多种药物有一半至少含有一个手性中心，其中90%使用外消旋体。
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展
高效液相色谱在药物分析中的应用研究进展一、概述高效液相色谱（HPLC）是一种广泛应用于药物分析的重要技术，具有快速、高效、灵敏度高和分辨率高等特点。
自20世纪70年代以来，随着色谱理论和仪器技术的不断发展，HPLC已成为药物分析领域中不可或缺的工具。
其利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异，通过高压泵将流动相推动通过装有固定相的色谱柱，实现样品中各组分的分离。
随后，通过检测器对分离后的组分进行检测，从而实现对药物成分的定性和定量分析。
近年来，随着药物分析需求的不断提高，HPLC在药物分析中的应用研究也取得了显著的进展。
在药物质量控制方面，HPLC可用于药物有效成分的含量测定、杂质含量的检测以及药物制剂中各组分的分离分析等。
HPLC还可应用于药物代谢产物的分析，为药物研发提供重要的参考信息。
在药品检验中，HPLC的应用不仅提高了检验的准确性和效率，还有助于实现药品检验的自动化和智能化。
同时，随着HPLC技术的不断发展，其在药物分析中的应用也将不断拓展和完善。
本文旨在综述HPLC在药物分析中的应用研究进展，为相关领域的研究和实践提供参考和借鉴。
1. 高效液相色谱技术简介高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种重要的色谱分析技术，广泛应用于化学、医学、工业、农学、商检和法检等多个学科领域。
作为色谱法的一个重要分支，HPLC以液体为流动相，通过高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱。
在柱内，各成分因与固定相发生作用的大小、强弱不同，而在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，进入检测器进行检测，实现对试样的分析。
HPLC具有“四高一广”的特点，即高压、高速、高效、高灵敏度和应用范围广。
高压是因为流动相为液体，流经色谱柱时受到的阻力较大，需要高压泵来推动流动相通过色谱柱。
药物分析手性hplc
一、手性药物的拆分方法与机制
1950年Dalgliesh采用纸色谱拆分了手性药物芳族氨基 酸，由此提出三点相互作用的理论概念，这就是“三点 手性识别模式”他认为至少有三个作用力，其中一个要 有立体选择性，可以是吸引的也可以是排斥的。这些作 用力可以是氢键、偶极-偶极作用、π-π作用，经典作用 疏水作用或空间作用
Байду номын сангаас
• 三种手性分离方法的比较
CDR优点：条件相对简易，只需采用普通HPLC的 固定相和流动相即可，而且通过衍生化有利于增 加检测灵敏度；缺点：样品中相关化合物须预先 分离、衍生化手性试剂的光学纯度的要求高以及 异构体对的衍生化反应速率不一 CMP优点：不必做柱前衍生化；对固定相也无特 殊要求；样品的非对映异构化络合具有可逆性而 且有利于制备。缺点：可拆分的化合物范围有限； 某些添加剂不够稳定而且往往会干扰检测 CSP优点:能广泛用于各类化合物，制备分离方便， 定量分析的可靠性较高。缺点：样品有时须做柱 前衍生化，对样品结果有一定的限制，其适用性 尚不及普通HPLC的固定相那样广泛
（一）柱前手性衍生化法
对映异构体与手性试剂反应，其产物为相应的非对映异构 体对。本法需要高化学纯度的手性衍生化试剂，衍生化反 应往往比较繁琐时，各对映体生化反应的速率有时也不同
（二）手性流动相拆分法
1.配基交换型手性添加剂 2.环糊精类添加剂 3.手性离子对络合剂 （三）手性固定相拆分法
体内药物分析手性药物HPLC法
9
手性药物的现状（现代药物分析选论，安登魁）
非手性药物
天然和半 （9） 合成药物 （556） 手性药物
单一异构体 （537）
药物
（547） 外消旋体
（1992）
非手性药物 （10）
（857） 合成药物
单一异构体
（1436） 手性药物 （73）
（579） 外消旋体
（506） 10
同时，手性也是生物体系的基本特征。人体 内糖的构型为D-构型，氨基酸为L-构型，因此， 内源性的大分子物质如蛋白质、酶、载体、受体、 糖蛋白、多糖、核酸等都具有手性特征。
手性药物的作用机制：
从立体化学角度看，手性药物的2个对映体实 际上是2种完全不同的药物。它们通过与体内大分 子的不同立体结合，可产生不同的吸收、分布、代 谢和排泄过程，从而导致药物动力学参数的变化。 由于手性药物的两个对映体的体内药动学过程不同， 而可能具有不同的药理和毒理作用，甚至药效拮抗， 也可能其中一个对映体导致了药物不良反应。？？？
26
柱前衍生化-反相高效液相色谱法 拆分酮洛芬对映异构体
S-()-酮洛芬
R-(-)-酮洛芬
27
酮洛芬对映体的柱前衍生化示意图
S-萘乙胺
＊ ＊
28
酮洛芬对映体的柱前衍生化方法
酮洛芬对照 加入正己烷0.6 mL
品溶液(1 mg/mL)0.1
二氯亚砜溶液
mL
0.2 mL
75℃ 冷却 1 h 至室
温
吹干后加入S- 振摇 加入2.0 mol/L NEA溶液0.2 mL 5 min H2SO4 0.5 mL
13
手性药物光学异构体的药理作用大致有以下5种类型： ①一种光学异构体无治疗活性。 ②生物活性强度不同的光学异体。 ③生物活性强度相等的光学异构体。 ④生物活性类型不同的光学异构体。 ⑤生物活性相反的光学异构体。
药物研究中手性分离分析方法及技巧
药物研究中手性分离分析方法及技巧药物研究中手性分离分析是指将手性药物中的手性异构体（也称为对映体）分离出来，并进行定量分析。
由于手性异构体具有不对称的结构，其物理化学性质和药理活性可能差异巨大，因此手性分离分析对于药物研究具有重要意义。
以下将介绍几种常用的手性分离分析方法及技巧。
1.气相色谱法（GC法）：GC法是通过在手性固定相柱上进行气相色谱分析，分离手性异构体。
该方法基于手性碳氢化合物在手性固定相上的不同吸附能力来实现手性分离。
同时，通过合适的手性底物和手性固定相的选择，还可以更好地提高手性分离的选择性和灵敏度。
2.液相色谱法（HPLC法）：HPLC法是手性分离分析中最常用的方法之一、常见的手性固定相有手性液相、手性离子对和手性硅胶等。
通过在手性固定相上进行液相色谱分析，利用手性化合物在固定相上的差异相互作用，实现手性分离。
此外，还可以结合负载式手性液相色谱法、手性离子对液相色谱法等技术，提高手性分离效果。
3.毛细管电泳法（CE法）：CE法是一种高效、快速的分离技术，特别适用于分析手性药物。
通过在毛细管中施加电场，利用手性化合物在毛细管中的迁移速率差异实现分离。
此外，还可以通过改变运行缓冲液的组成、pH值等条件，调节手性分离的选择性和分离效果。
除了上述主要的手性分离分析方法外，还存在一些辅助技巧和方法，可以进一步提高手性分离的效果：1.共处理：将两个手性化合物混合在一起进行共处理，通过比较混合物中手性峰的相对峰度等信息，来判断手性分离的效果。
2.离子对调整：通过调整分析液中离子对的浓度和种类，来改变手性分离的效果。
一般来说，手性离子对可以提高手性分离的分辨率和选择性。
3.pH调控：通过改变液相色谱系统中溶液的pH值，可以影响毛细管电泳法和液相色谱法中手性分离效果。
pH值的改变可以调节化合物分子的电荷状态，从而影响手性分离的选择性。
总之，手性分离分析方法及技巧在药物研究中起着重要的作用。
通过合理选择合适的手性分离方法，并结合辅助技巧和方法，可以实现对手性异构体的高效、准确的分离和定量分析，从而为药物研究提供有价值的数据。
HPLC手性固定相法在体内药物分析中的应用
手性柱的分类和应用举例
配体交换相 将手性配体通过各种间隔基与硅胶键合，属亲水性
固定相。通过一个金属离子与一个配体分子和一 个对映体溶质分子结合成可逆的非对映体而达到 分离。 例：苏丹等[16]用Phenomenex chirex 3126 配体色 谱柱，对肌肽对映体进行了拆分。。
手性柱的分类和应用举例
❖ 直接法 手性选择剂键合到固定相表面或加入流动相中， 药物对映体通过与手性选择剂形成的暂时的非对 映络合物的能量差或稳定性不同而达到分离的目 的。 手性固定相法（CSP）
手性柱的分类和应用举例
π-氢键型键合固定柱 将有光学活性的有机小分子通过一定间隔基键合到硅胶柱上。 以Pirkle型应用最为广泛。 分离原理在与溶质间的n-n相互作用，氢键作用和偶极-偶极作用。 Pirkle型手性固定相通过链烃基将手性有机小分子链接到硅胶载体上制得。含端
❖Astec Cellulose DMP系列(纤维素型手性柱),适 用于正相、极性有机和SFC模式；
❖Astec P-CAP和P-CAP-DP系列(多环胺聚合物手 性柱),溶剂范围广；
❖Astec CLC (Copper Ligand Exchange) 系列( 配位交换型手性柱),用于分析非芳香有机酸、氨基
手性柱的分类和应用举例
含碳水化合物的手性固定相 包括醋酸纤维素、 其他纤维素衍生物（如环糊精、冠醚）和直链淀 粉等。
纤维素-三苯甲酸酯涂敷在氨丙基硅烷化硅胶上便得 到CTB固定相
手性柱的分类和应用举例
含碳水化合物的手性固定相
微晶纤维素+异氰酸苯酯→纤维素-三苯基氨基甲酸 酯
三苯基氨基甲酸酯涂敷在氨基键合的硅胶上 →CTPC
反应停事件
手性药物的药代动力学
手性药物的拆分——高效液相色谱(HPLC)
SiO2
OH
(CH3O)3Si(CH2)3NH(CH2)2NH2 SiO2
O Si(CH2)3NH(CH2)2NH2
(1)
(OH)2
H3C
SO2Cl
(OTs)2
(2)
SiO2 O
n(NHR)
H2NR
SiO2 O
β-CD固定相改性过程
n(OTs)
1.5 刷型手性固定相
刷型手性固定相（CSP）是通过链烃基将手性有机 小分子链接到硅胶载体上制得，又叫Pirkle型手性固 定相。
刷型手性固定相的合成主要有两种途径，即含端羧 基或异氰酸酯基的手性基团的化合物与氨基键合硅 胶进行缩合反应，分别形成含酰胺型或脲型结构的 手性固定相：
OH
O
+
O
H
OH
OH
n
NCO
OCONH
H
NHOCO
O
O OCONH
n
3.纤维素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）（CDMPC）
商品名为手性OD柱，具有极高的光学拆分能力，是广泛使用的 手性固定相之一。以微晶纤维素与3，5-二甲基苯基异氰酸酯反 应，将生成的纤维素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）以 15%的量涂敷在氨丙基硅胶上，制得CDMPC-CSP：
Dalgliesh 三点相互作用
a
b
Y d
c (S)-选择剂
A
D
X
B
C （R)-对映体
a
b
药物分析中的手性分析技术研究
药物分析中的手性分析技术研究手性分析技术在药物分析中的研究药物是人类对抗疾病的重要工具，但很多药物都存在手性的特性。
手性分析技术的发展对于药物的研究与合成具有重要的意义。
本文将介绍药物分析中的手性分析技术及其研究进展。
一、手性与药物手性是化学中常见的现象，指的是分子存在两个非重叠的立体异构体，分别被称为左旋体和右旋体。
由于手性分子的空间结构不对称，其在生物体内的代谢与作用机制往往存在差异。
一种手性药物的两个异构体在生物作用上可能具有完全相反的效果。
因此，对手性药物的手性分析具有重要的理论和实践意义。
二、手性分析技术的原理在药物分析中，常用的手性分析技术主要包括气相色谱法（GC）、液相色谱法（HPLC）、毛细管电泳法（CE）等。
这些技术利用手性分离柱或手性分离剂作为分离介质，通过衡量手性分子的分离度来确定样品中手性异构体的相对含量。
1. 气相色谱法（GC）气相色谱法是一种常用的手性分析技术。
该技术利用手性柱通过手性相互作用实现手性分离。
常见的手性柱包括化学手性柱和拓展手性柱。
气相色谱法具有分离度高、分析速度快、准确性高的优点，广泛应用于药物分析中。
2. 液相色谱法（HPLC）液相色谱法是另一种常用的手性分析技术。
该技术主要利用手性分离剂与手性分析物之间的相互作用实现手性分离。
液相色谱法分离度较高，适用性广泛，常用于药物的手性分析及手性异构体的定量分析。
3. 毛细管电泳法（CE）毛细管电泳法是利用毛细管中的电渗流和电泳作用实现手性分离的一种分析技术。
该技术具有分离度高、样品消耗少等特点，适用于药物样品中手性异构体的分析与检测。
三、手性分析技术的应用手性分析技术在药物研究与开发中具有广泛的应用。
通过手性分析，可以评估药物的手性纯度、分离手性异构体、研究手性异构体的代谢过程等。
1. 评估药物的手性纯度药物合成过程中，常常会产生手性异构体的混合物。
通过手性分析技术，可以确定药物样品中各个手性异构体的相对含量，评估药物的手性纯度，确保药物的质量和疗效。
药物色谱分析 第10章-手性高效液相色谱法
Chiral Drugs (手性药物)
严格地来说，手性药物是指药物的分 子结构中存在手性因素而言。但通常，手 性药物是指由具有药理活性的手性化合物 组成的药物，其中只含有效对映体或者以 含有效的对映体为主。
获得手性化合物的不同途径
天然手性 化合物
发展趋势：
劣映体本身或其代谢物产生毒副作用，不再 使用外消旋体。
外消旋体转换成单一对映体，可以提高质量， 减少副作用。
如：氧氟沙星的左旋异构体活性更强， 左旋氧氟沙星临床使用剂量是消旋体的 一半。
手性药物的现状
临床药物 1850种
天然和半 合成药物 523种
化学合成 药物 1327种
非手性6种 手性517种
.
课后查询：常见的手性拆分的方法和策略
组成相同但空间结构上互成镜像的分子，称 之为对映异构体；不成镜像的分子，称之为 非对映异构体，分子中所含手性碳越多，非 对映异构体的数目越多。
非对映异构体
A(S) A(R) B(R) B(S)
对映体
A(R) A(S) B(R) B(S)
对映体
（-）麻黄碱 （+）麻黄碱
H OH N
CH3 H
. H HCl CH3
（ - ）盐酸伪麻黄碱
（ + ）伪麻黄碱 （ - ）伪麻黄碱
色谱条件：色谱柱：苯基柱150mm×4.6mm，I.D. 5mm；流 动相：三乙胺-水（含50mmol·L-1磷酸二氢钾，磷酸调pH至 4.0）-甲醇（0.01∶90∶10, v/v/v）；流速1.0 mL·min-1；检测 波长：210nm；柱温：室温。
白蛋白柱（HSA、BSA ） 糖蛋白柱：α1-酸糖蛋白柱 （ α1- AGP ） 酶类
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• 三种手性分离方法的比较
CDR优点：条件相对简易，只需采用普通HPLC的 固定相和流动相即可，而且通过衍生化有利于增 加检测灵敏度；缺点：样品中相关化合物须预先 分离、衍生化手性试剂的光学纯度的要求高以及 异构体对的衍生化反应速率不一 CMP优点：不必做柱前衍生化；对固定相也无特 殊要求；样品的非对映异构化络合具有可逆性而 且有利于制备。缺点：可拆分的化合物范围有限； 某些添加剂不够稳定而且往往会干扰检测 CSP优点:能广泛用于各类化合物，制备分离方便， 定量分析的可靠性较高。缺点：样品有时须做柱 前衍生化，对样品结果有一定的限制，其适用性 尚不及普通HPLC的固定相那样广泛
• 手性拆分发分为直接法和间接法两大类 • 对映体混合物以手性试剂作为柱前衍生，形成一对非对
映异构体，然后以常规固定相分离，成为间接法也叫手 性衍生试剂法；未做上述处理中，使用手性流动相或手 性固定相拆分者为间接法
• 共同点是：均以现代Hபைடு நூலகம்LC技术为基础，并引入不对称
中心；不同是CDR法将其引入分子内，而CMP和CSP则 引入分子间
一、手性药物的拆分方法与机制
1950年Dalgliesh采用纸色谱拆分了手性药物芳族氨基 酸，由此提出三点相互作用的理论概念，这就是“三点 手性识别模式”他认为至少有三个作用力，其中一个要 有立体选择性，可以是吸引的也可以是排斥的。这些作 用力可以是氢键、偶极-偶极作用、π-π作用，经典作用 疏水作用或空间作用
药品质量控制中现代分析方 法的进展
手性HPLC技术与应用
建立和发展快速而灵敏的分离（或拆分）和测定 对映体药物的方法，以有效地进行以下四个主要 方面的工作是十分重要和必要的①对某些手性药 物进行对映体的纯度检查；②生物体液中药物对 映体的分离分析研究可探索血药浓度与临床疗效 的关系；③在研究手性药物过程中，可分别评价 单个对映体的效价、毒性、不良反应以及药动学 性质；④必要时，可进行药物对映体的制备分离 （或拆分）
二、手性HPLC应用 （一）柱前手性衍生化法 （二）手性流动相拆分法 （三）手性固定相拆分法
（一）柱前手性衍生化法
对映异构体与手性试剂反应，其产物为相应的非对映异构 体对。本法需要高化学纯度的手性衍生化试剂，衍生化反 应往往比较繁琐时，各对映体生化反应的速率有时也不同
（二）手性流动相拆分法
1.配基交换型手性添加剂 2.环糊精类添加剂 3.手性离子对络合剂 （三）手性固定相拆分法
1.Pirkle型手性固定相 2.蛋白质类手性固定相 3.环糊精类 4.手性聚合物固定相