实验四、 苯巴比妥钠和放线菌素D对小鼠肝脏细胞色素P-450含量的
药理学实验详解
药理学实验详解药理学实验详悉⼀、动物实验动物实验是根据研究⽬的，恰当地选⽤标准的符合实验要求的实验动物，在设计的条件下，进⾏各种科学实验、观察、记录动物的反应过程或反应结果，以探讨或检验⽣命科学中未知因素的专门活动。
动物实验是⼈类⽣存和发展的必要⼿段。
动物实验⽅法是进⾏动物实验时的各种实验⼿段、技术、⽅法和标准化操作程序。
也探讨实验动物科学中的减少、替代、优化问题。
实验动物的选择：⾸先应从⽣物医学研究的⽬的和实验要求来选择实验动物，进⽽考虑实验动物是否容易获得、是否经济、是否容易饲养。
⼀切实验动物应具有个体间的均⼀性，遗传的稳定性和容易获得三个基本要求。
标准化原则：根据对实验质量的要求选择标准化的实验动物。
动物实验中选择和使⽤与研究内容相匹配的标准化的实验动物标准化动物：是指遗传背景明确或来源清楚的，对其携带的微⽣物和寄⽣⾍实⾏控制，模型性状显著且稳定的动物。
在精确试验中，鉴于动物体内外的微⽣物和寄⽣⾍会⼲扰试验的结果，最好选择⽆菌动物或悉⽣动物，⾄少也应SPF级动物。
规格化原则：选择与实验要求⼀致的动物规格。
实验动物年龄与体重⼀般呈正相关性，可按体重推算年龄。
⼀般来说，实验动物年龄、体重应尽可能⼀致，相差不得超过10%。
不同性别的动物对同⼀药物的敏感程度是有差异的，如实验⽆特殊要求应选择雌雄各半做实验，以避免因性别差异所造成的结果误差。
特殊的⽣理状态下，如发情、妊娠及哺乳期，机体对实验的反应性发⽣改变。
★实验动物的选择应⽤应注意有关国际规范：GLP、SOP、“3R”（Replacement替代Reduction减少Refinement优化）(⼀)实验动物：系指遗传背景明确、来源清楚、对其携带的微⽣物、寄⽣⾍实⾏控制，经科学⽅法⼈⼯培育⽤于科学实验的动物。
(⼆)实验动物的分类⽅法1、按遗传学控制分类*近交系：杂种动物经过相当于20代全同胞兄弟单纯连续繁殖，各条染⾊体上的基因趋于纯合，品系内个体差异趋于零。
微生物遗传学试卷答案(A)07-08
6．细菌的转座因子可分为4类：插入序列、转座子、接合型转座子、某些温和性噬菌体(如Mu、D108)。
（√）7．所有质粒都是独立于染色体外、能进行自我复制的遗传因子。
（⨯）8．SD序列存在于核糖体结合位点中，一般为5个核苷酸组成的富含G和A的短小序列。
（√）9．第一个被测序的原核微生物：大肠杆菌；第一个被测序的真核微生物：毕赤酵母。
（⨯）10．终止子位于一个基因或一个操纵子的末端，提供转录停止信号的DNA区段。
终止子不能被转录成mRNA。
（⨯）三、填空题（共20分，每小题0.5分）1．外线具有杀菌和诱变双重效应。
随着紫外线照射时间的增加，杀菌率和突变率随之提高。
但当照射时间延长到某一程度时，继续延长照射时间，其杀菌率增加，突变率下降。
2．利用枯草芽孢杆菌的芽孢具有较强的抗高温能力和枯草芽孢杆菌产生蛋白酶和淀粉酶的特性，设计实验筛选高产酶活的菌株。
根据透明圈直径(H)和菌落直径(C)之比值(H/C) 可以初步确定酶活力，其比值越大，酶活力越高。
3．经UV诱变后获得的营养缺陷型常包括氨基酸、维生素、核酸三大类营养物质。
如果要对缺陷株的具体营养要素化学组成进行确定，通常需采用生长谱法测定。
4．噬菌体的效价测定通常采用双层平板法计数单位体积样品形成的噬菌斑数量。
其中底层是含2%琼脂的底层培养基，上层是向素琼脂中加入浓度较高的受体菌和一定体积的噬菌体裂解液。
5．微生物细胞经紫外线照射后，菌液要在黑暗或者黄光下进行操作，主要目的是防止光复活。
紫外线照射细胞后的存活率计算公式为诱变后活菌数*100/ 诱变前活菌数。
6．在制备营养缺陷型遗传标记的实验中，为了避免表型延迟要进行中间培养，而在二倍氮源基本培养基中加入青霉素，其目的是使青霉素杀死野生型细胞，从而浓缩缺陷型细胞。
7．证明DNA是遗传物质基础的实验是细菌经典转化和噬菌体的感染实验。
证明RNA是遗传物质基础的实验是烟草花叶病毒的拆开和重建实验。
以上这三个实验证明了遗传物质是核酸。
巴比妥及苯二氮杂卓类镇静催眠药物的分析1
第十章 巴比妥及苯二氮杂卓类镇静催眠药物的分析计算题1.取苯巴比妥（C 12H 12N 2O 3=232.24)对照品用适量溶剂配成10μg/ml 的对照液。
另取50mg 苯巴比妥钠（C 12H 11N 2O 3Na=254.22）供试品溶于水，加酸，用三氯甲烷提取蒸干后，残渣用适当溶剂配成100ml 溶液，取1ml ，稀释至50ml 作为供试品溶液。
在240nm 波长处测定吸光度，对照液为0.431，供试液为0.392，计算苯巴比妥钠的百分含量？解：苯巴比妥钠=（24.23222.254）×10×10-3×（431.0392.0）×（150）×100=99.6%设计题1.已知某药物的结构式﹑分子式与分子量如下：(苯巴比妥)苯乙酸乙酯与碳酸二乙酯在碱作用下缩合生成苯基丙二酸二乙酯，然后与氯乙烷在乙醇钠存在下再次缩合，得到苯基乙基丙二酸二乙酯，再与尿素环合，即生成苯巴比妥。
第十一章 吩噻嗪类抗精神病药物的分析计算题1.盐酸氯丙嗪片的含量测定：取本品（标示量为25mg/片）10片，去糖衣后精密称定，重0.5130g ，研细，称取片粉0.0206g ，置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）70ml ，振摇使盐酸氯丙嗪溶解，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml ，置100ml 量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，于254nm 波长处测定吸光度为0.453，按吸收系数E 1%1cm =915计算每片的含量。
解：标示量%=∑⨯⨯⨯⨯⨯⨯%111001000cm B W W D A ×100%= 0.453×100×100÷5×0.5130÷10×1000915×100×0.0206×25×100% =98.63%设计题1.请采用适当的化学方法将盐酸氯丙嗪（A)﹑奎氟奋乃静（B)和奋乃静（C)三种药物区分开。
2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)试卷及答案指导
2024年高级卫生专业技术资格考试微生物检验技术(094)(正高级)模拟试卷(答案在后面)一、多项选择题（本大题有30小题，每小题1分，共30分）1、以下哪些属于微生物检验技术的基本步骤？（）A. 样品采集与处理B. 微生物分离纯化C. 微生物鉴定D. 药物敏感试验E. 报告撰写2、在微生物分离纯化的过程中，以下哪种方法常用于分离革兰氏阳性菌？（）A. 霍夫曼平板法B. 沙氏平板法C. 肉汤培养法D. 培养基稀释法E. 稀释涂布平板法3、下列关于细菌培养基的选择与配制的说法正确的是：A. 所有细菌的培养都使用相同的培养基B. 选择培养基时需要考虑目标菌株的营养需求和生长条件C. 培养基配制完成后无需灭菌即可使用D. 鉴定肠道致病菌常用SS琼脂作为选择性培养基E. 血平板常用于初次分离培养细菌4、关于抗生素敏感性试验，以下叙述正确的是：A. 抗生素敏感性试验仅对革兰氏阳性菌有意义B. MIC（最小抑菌浓度）法可以定量测定细菌对抗生素的敏感度C. 纸片扩散法适用于所有临床分离菌株的药敏测试D. 抗生素敏感性试验的结果可以直接指导临床用药E. 在进行药敏试验前，必须确保菌悬液浓度符合标准5、下列关于细菌形态学的描述中，正确的是（）A. 革兰氏染色法可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌B. 细菌的形态学观察主要用于细菌的鉴定C. 细菌的形态学观察包括细菌的大小、形状、排列等D. 细菌的形态学观察可以用于判断细菌的致病性6、以下关于细菌生理学的描述中，错误的是（）A. 细菌的生长繁殖需要营养物质、水分、适宜的温度和pH值B. 细菌的新陈代谢包括同化作用和异化作用C. 细菌的同化作用包括自养和异养D. 细菌的异化作用包括光合作用和化能作用7、关于细菌L型的描述，下列哪些是正确的？A. 细菌L型是指在某些条件下细菌细胞壁缺陷而形成的形态B. L型细菌可以通过常规培养基生长C. 它们通常在高渗透压培养基上生长D. L型细菌对青霉素类抗生素敏感E. 由于细胞壁的缺失，L型细菌可以在不利环境下存活8、关于真菌的基本特征，以下哪几项说法是准确的？A. 真菌属于原核生物界B. 大多数真菌通过产生孢子的方式繁殖C. 酵母菌是一种单细胞形式的真菌D. 所有真菌都是多细胞有机体E. 真菌能够进行光合作用9、以下哪些微生物属于革兰氏阴性菌？A. 肠杆菌属（如大肠杆菌）B. 铜绿假单胞菌C. 链球菌属（如肺炎链球菌）D. 霍乱弧菌 10、以下哪些指标可以用来判断细菌的耐药性？A. 最小抑菌浓度（MIC）B. 敏感性试验结果C. 药物敏感度指数D. 耐药基因检测11、下列关于细菌的细胞壁成分及其功能的说法，哪几项是正确的？A. 肽聚糖是所有细菌细胞壁的主要成分。
大学药理学实验(附答案)
实验题目：小鼠腹腔注射筒箭毒碱ED50的测定Determination of Cl-Tubocurarine's Median Effective Dose （ED50）【实验目的】了解ED50的测定方法、原理、计算过程与意义。
【相关理论】1．关于量反应，质反应：量反应是指个体上反应的强度并以数量的分级来表示；例如：血压、尿量等。
质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现；如：生死、有效或无效。
以阳性反应的出现频率或百分数来表示（全或无，阳性率）。
2．关于ED50，LD50，以及治疗指数:能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则为半数有效量ED50，ED50是质反应的参数。
若此效应为死亡时，则为半数致死量LD50。
治疗指数= LD50/ ED50=TI，该值越大越好，说明药物越安全.可用机率单位正规法或点斜法求出LD1 ，ED99 ；LD5 ，ED95。
3．肌松药分为去极化型和非去极化型两种。
去极化型肌松药的代表为琥珀酰胆碱，其肌松作用不能被抗胆碱酯酶药新斯的明拮抗，反而会加重。
非去极化型肌松药的代表为筒箭毒碱，其肌松作用能被新斯的明解救。
4．测定ED50，LD50的意义可计算治疗指数TI（LD50/ ED50），为临床安全用药提供指导。
【实验动物】小鼠（昆明种KM），雌雄各半。
【实验器材】铁丝网，铁架台，天平，注射器等。
【实验方法】应用点斜法测定ED50。
应用该方法测定ED50时，实验设计必须符合以下5点要求：1）动物以5~8组为宜；2）每组动物数须一致；3）各组给药剂量应呈现等比数列；4）各组给药剂量的公比r = 1.1~1.6；5）最大剂量（Dmax）组的阳性反应率须≥80%，最小剂量（Dmin）组的阳性反应率须≤20%【实验方法】1．预实验：目的是为了找出符合上述点斜法要求5）的Dmax和Dmin。
阳性反应判定标准：20min内小鼠落下3次（注意排除因互相拥挤而落下所造成的假阳性）。
P450测定
背景知识
定义： 对药物转化起非专一性催化作用的肝脏微粒体混合功能系统
特点： 1. 酶系统的活性有限，个体差异大（先天、年龄的影响）， 种类多（150+种） 2. 酶活性易受某些药物的影响 3. 还原型P450可以与CO结合，吸收光谱的主峰在450nm的波 长处
3
实验目的
肝匀浆中细胞色素P-450含量的简易测定； 了解肝药酶的诱导剂、抑制剂对肝药酶含量的影响。
12
① 取肝脏500 mg以上（不能破坏胆囊，用滤纸吸干余血），称重、记录 ② 置匀浆器中，加0.25 M蔗糖溶液（0.5 ml/100mg肝），冰浴研磨 ③ 双层纱布过滤匀浆液 ④ 取匀浆液1 ml，加Tris-HCl缓冲液 9 ml ，混匀。
7
实验方法
5. 冰浴下充CO ，1-2气泡/秒，通气2 min（218室）
测定Pheno（P－450由低浓度至高浓度）。
11
【讨论】 1、P-450在药物转化中的作用； 2、不同实验组P-450含量不同的原因； 3、诱导剂增加P-450含量、抑制剂减少P-450含量的意义；
【结论】 Pheno为肝药酶诱导剂，A.D为肝药酶抑制剂。
【示教】 小鼠断头放血，摘除胆囊，取肝，匀浆器使用。
6. 放入两个比色杯，一个做参照（不加入Na2S2O4 ）一个做样品（加入 Na2S2O4 5 mg）
7. 参照杯调零，在450 nm、490 nm处测定样品杯的吸光度（219室），记
录数据
P450 + CO
参照：不加Na2S2O4
比色： A450nm - A490nm
样品：加Na2S2O4
示差光谱法
P450
1
2
3
4ห้องสมุดไป่ตู้
药理学动物实验讲义汇总
四.抗组胺药的药理作用认识
豚鼠的捉拿和固定方法
豚鼠生性胆小，故捉取时要求快、稳、准。 方法：先用右手掌迅速而又轻轻地扣住豚鼠背部， 抓住其肩胛上方，以拇指和食指环握颈部，对于体型 较大或怀孕的豚鼠，可用另一只手托住其臀部。
四.抗组胺药的药理作用认识
注意事项
1 豚鼠生性温顺胆小，不能惊吓。
2 实验过程要尽量保持实验室安静。
讨论
（1）…………………………………； （2）…………………………………； …………………………………………。
实验 三 药物的抗癫痫、抗惊厥作用
三.药物的抗癫痫、抗惊厥作用
实验目的
1、建立戊四氮（PTZ）诱发的实验性小鼠癫痫模型。 2、观察苯妥英钠、戊巴比妥钠的抗癫痫、抗惊厥作用，初 步掌握抗癫痫药的筛选方法。
一.肝脏功能对药物作用的影响
翻正反射
正常动物可保持腹部朝下，若将其仰 卧其可翻正过来，这种反射称为翻正 反射。如果翻正反射消失1分钟以上称 为翻正反射消失。
维持时间
从翻正反射消失的时间到翻正反射重 新出现（醒转）的时间间隔。
一.肝脏功能对药物作用的影响
腹腔注射法
左手抓住小鼠头颈部，无名指压住小鼠的尾巴，小指压 住小鼠的后腿，使小鼠头部向下,右手持注射器进针。 此时小鼠腹腔中的器官就会自然倒向胸部，可防止注射 器刺入时损伤大肠、小肠等器官。 进针动作要轻柔，拔针时可先转一下针头防止药液流出。
注意腹腔注射部位及方法，切勿进针过深损伤内脏，
2
致小鼠内脏出血而死，影响实验进行。
3 细心观察，可能现象出现时间短暂。
三.药物的抗癫痫、抗惊厥作用
实验结论
（1）…………………………………； （2）…………………………………； …………………………………………。
药理学实验4
1、制造小鼠中毒性肝损伤模型 小鼠均衡随机分组，雌、雄各分为2组，每组8
只，标记。 奇数组为对照组，偶数组为造模组。
对照组：皮下注射色拉油0.1mL/10g； 造模组：皮下注射5％四氯化碳油溶液 0.1ml/10g，造成肝损害。
2、腹腔注射苯巴比妥钠，观察小鼠中枢抑制症状。 48h后，所有小鼠腹腔注射0.45％的苯巴比妥钠
苯巴比妥钠体内消除方式：部分在肝内代谢 失活，以及以原型从肾脏排出。
肝功能被抑制→肝药酶活性下降→苯巴比妥 钠在体内代谢减慢→对中枢的抑制作用起效 快，持续时间长（本实验的给药剂量是小鼠 催眠）→翻正反射消失快，持续时间长。
翻正反射（righting reflex ）——即复位 反射。一般指动物处于异常体位（如侧卧） 时所产生的恢复正常体位（如俯卧）的反射。
0.1ml/10g，观察小鼠的反应。 记录每只小鼠的翻正反射开始消失的时间和恢复
翻正反射的时间。
体重 药量 注射 产生作用 醒转作用 维持时间
(g) (ml) 时间
时间 时间
时间
对照组
肝损伤组
计算对照组和肝损伤组小鼠入睡时间和维持 时间的平均值和标准偏差，并比较两组之间 是否有显著性差异。
记录小鼠给药后的症状：如活动情况，翻正 反射，呼吸深浅。
四氯碳是一种对肝细胞有严重毒害作用的化 学物质。
四氯化碳经口服、皮下注射等方式导致动物肝 中毒，造成中毒性肝损伤的动物模型，常用于 观察肝脏功能状态对药物作用的影响，以及筛 选治疗肝脏疾病的药物。
苯巴比妥钠是巴比妥类中枢抑制药。 小剂量：镇静、抗焦虑作用； 中等剂量：催眠； 大剂量：抗惊厥、抗癫痫、全身麻醉作用。
1.观察肝功能损害对巴比妥类药物的影响。 2.了解肝脏损害模型的制作方法。
2016届高三生物二轮复习 专题七 第2讲 实验设计与分析强化训练
实验设计与分析(建议用时：45分钟)1．(2015·云南昆明质检)试判断下列实验分别是属于什么对照类型？实验组和对照组分别是什么？(1)在“探究影响酶活性的因素”实验中：1号试管加1 mL 蒸馏水；2号试管加1 mL 盐酸；3号试管加1 mL NaOH 溶液。
(2)“观察植物细胞的质壁分离和复原”实验。
(3)“肺炎双球菌转化实验”中以下两组实验：①S 型细菌DNA ＋R 型细菌――→混合培养S 型菌落＋R 型菌落；②S 型细菌DNA ＋DNA 水解酶＋R 型细菌――→混合培养R 型菌落。
(4)在“植物向重力性生长的向性”实验中，将玉米种子放置在不同的方向。
(5)在“动物激素饲喂小动物”的实验中，甲组饲喂甲状腺激素，乙组饲喂甲状腺激素抑制剂，丙组不饲喂药剂。
答案：(1)属于空白对照。
对照组为1号试管，实验组为2号和3号试管。
(2)属于自身对照。
实验处理前的对象状况为对照组，实验处理后的对象变化为实验组。
(3)属于条件对照。
①为实验组，②为对照组。
(4)属于相互对照。
没有单独的对照组，而是几个实验组相互对照。
(5)属于条件对照同时具备空白对照。
甲组为实验组，乙组为条件对照，丙组为空白对照。
2．(2015·广西桂林调研)研究人员用同种小鼠进行了某中药制剂、四环素(一种抗生素)对肝脏脂肪含量影响的实验。
实验设计和结果如下表所示(中药制剂和四环素都用生理盐水________色。
(2)现有健康的体重相近、发育状况相同的雌雄小鼠各100只，按上表的实验设计应如何对这些小鼠进行分组？________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
表中所示的实验自变量有________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
《生物制药技术》实验指导-实验一
《生物制药技术》实验指导-实验一第一篇：《生物制药技术》实验指导-实验一《生物制药技术》实验指导实验一金霉素链霉菌培养基的制备（验证型）实验目的：1、学会培养基的配制2、掌握灭菌方法。
实验原理：金霉素链霉菌（Streptomyces aureofaciens）亦称“金色链霉菌”，放线菌门(Actinobacteria)，放线菌纲(Actinobacteria)，放线菌目(Actinomycetales)，链霉菌科(Streptomycetaceae)，链霉菌属(Streptomyces)。
在固体培养基上产生金色色素，故名。
其菌落为草帽型, 菌落直径一般为3～5毫米, 表面较平坦, 中间有隆起。
菌落开始为白色，长孢子后变青色。
在显微镜下可以看到短杆状的菌丝。
抗菌素工业上用以生产金霉素。
放线菌是一类介于细菌与真菌之间的单细胞微生物。
放线菌在土壤中分布最多，大多数生活在含水量较低、有机质丰富和微碱性的土壤中。
多数情况下，泥土中散发出的“泥腥味”就是由放线菌中链霉菌产生的土腥素造成的。
放线菌大都好氧，属于化能异养，菌丝纤细，分枝，常从一个中心向周围辐射生长。
因其生长具辐射状，故名放线菌。
放线菌能像真菌那样形成分枝菌丝，并在菌丝末端产生外生的分生孢子，有些种类甚至形成孢子囊，因而曾被误认是真菌。
但其菌落较小而致密，不易挑取。
不少菌种在医药、农业和工业上广泛应用，可产生抗菌素，现已发现和分离出的由放线菌产生的抗生素多达4 000多种，其中，有50多种抗生素已经广泛地得到应用，如链霉素、红霉素、土霉素、四环素、金霉素、卡那霉素、氯霉素等用于临床治疗人的多种疾病；有些可生产蛋白酶、葡萄糖异构酶；有的用于农业生产，如灭瘟素、井冈霉素、庆丰霉素等。
四环素类抗生素是由链霉菌生产或经半合成制取的一类广谱抗生素。
抗菌谱极广，包括革兰氏阳性和阴性菌、立克次体、衣原体、支原体和螺旋体。
品种主要包括金霉素、四环素和土霉素。
四环素早在1948年即开始用于临床，至今已有50余年历史。
药物作用规律-1
实验课时4 实验课时4组学生每组取药物组和对照组各 4只小鼠，分别置2个鼠笼内，标号待用。 只小鼠，分别置2个鼠笼内，标号待用。 每2组同学的数据合并进行统计学处理。 组同学的数据合并进行统计学处理。
2. 测肝脏P450实验步骤 测肝脏P450 P450实验步骤
2.1打开分光光度计预热 2.1打开分光光度计预热 2.2 肝匀浆上清的制备 2.3 测定肝脏P450含量 测定肝脏P450 P450含量
医学机能学实验
Functional experiment of medical science
基础医学实验教学中心机能实验室
苯巴比妥钠对小鼠肝细胞细胞色 素P-450的影响 450的影响
【实验目的】 实验目的】
了解肝药酶诱导剂对小鼠肝细胞细 胞色素P 450的诱导作用 胞色素P-450的诱导作用
【实验动物】 实验动物】
昆明种小鼠，体重18 22g， 18昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄不限
【实验方法】 实验方法】
1. 动物的预处理
32只小鼠，随机分成两组，药物组16 32只小鼠，随机分成两组，药物组16只，对照组16 16只 对照组16 只小鼠 只，药物组腹腔注射苯巴比妥钠75mg/kg，每日一次 药物组腹腔注射苯巴比妥钠75mg/kg 75mg/kg， ，共二日。对照组注射等体积的生理盐水。 共二日。对照组注射等体积的生理盐水。
【实验原理】 实验原理】
细胞色素P 450为血红素蛋白， 细胞色素P-450为血红素蛋白，当血红素中铁原 为血红素蛋白 子与CO结合并被还原剂连二亚硫酸钠还原时， 子与CO结合并被还原剂连二亚硫酸钠还原时，细胞 CO结合并被还原剂连二亚硫酸钠还原时 色素P 450在450nm波长出现吸收峰(OD450>0， 色素P-450在450nm波长出现吸收峰(OD450>0， 波长出现吸收峰(OD450>0 OD490<0)。利用TU 1901双光束紫外可见分光光度计 OD490<0)。利用TU-1901双光束紫外可见分光光度计 TU测定OD490 OD450，根据其光密度数值可计算出P 测定OD490、OD450，根据其光密度数值可计算出POD490、 450的含量。 450的含量。 的含量
实验四、 苯巴比妥钠和放线菌素D对小鼠肝脏细胞色素P-450含量的
实验四、 苯巴比妥钠和放线菌素D对小鼠肝脏细胞色素P-450含量的影响 Experiment 4. Influence of phenobarbital sodium and actimycin D on the hepatic cytochrome P-450 content in miceP-450属于血红素蛋白，其还原型与CO结合后，在波长450nm处出现吸收峰。
因此，可以应用示差光谱法测定其含量。
肝匀浆样品中通以CO后，加还原剂连二亚硫酸钠（Na2S2O4），然后在450nm和490nm处测定吸光度，其差值代入公式，即可计算出细胞色素P450的含量。
【实验目的】肝匀浆中细胞色素P-450含量的简易测定；肝药酶的诱导剂、抑制剂的作用。
【实验对象】小鼠（昆明种）【仪器和药品】分光光度计，扭力天平，制冰机，生理盐水（N.S.）；7.5g/L（0.75%）苯巴比妥钠（Pheno）；0.02g/L（0.002%）放线菌素D（A.D.）；0.25M蔗糖溶液；Tris-HCl缓冲液。
玻璃匀浆器，漏斗，试管（10 ml）数只，滤纸，移液管（1ml，2ml，5ml，10ml）数只，冰盒等。
【实验方法】1. 动物分为3组：生理盐水组，苯巴比妥钠组及放线菌素D组。
1.苯巴比妥钠和放线菌素D i.p.三天，诱导或抑制肝药酶。
2.断头放血：于第三天（实验当日）将小鼠断头放血（须放净，因血红素会影响实验结果）；3.制备肝匀浆：将0.25M的蔗糖溶液和0.05M Tris-HCl缓冲液置于冰块中预冷；剪下肝脏（肝组织不得少于400mg；勿破坏胆囊，因胆色素干扰实验结果；以滤纸吸去血迹，因血色素干扰实验结果）；扭力天平称重（垫锡纸；每次加样或加减法码时必须关上关平）；将肝组织置于匀浆器中，加入预冷后的0.25M蔗糖（0.5ml/100mg肝组织）；冰浴下研磨，直至组织变为淡粉色匀浆；取此匀浆液1ml，加入预冷后的0.05M Tris-HCl缓冲液9ml，充分混匀；冰浴下充以CO，1～2气泡/秒，通气2分钟。
微生物学检验题库及答案
微生物学检验题库及答案一.名词解释1.医院感染：指患者在医院内因治疗、护理等原因而感染的疾病。
2.肥达反应：一种血清学试验，用于检测病原体感染。
3.内基小体：一种细胞质内含有细胞核酸的小体，存在于某些细胞中。
4.噬菌体：一种寄生于细菌的病毒。
5.血浆凝固酶：一种酶，可促进血浆中的纤维蛋白原转化为纤维蛋白，从而参与血液凝固过程。
6.败血症：一种严重的血液感染，常由细菌引起。
7.灭菌：杀灭或去除物品中的所有微生物。
8.药物敏感试验：一种实验室技术，用于测试微生物对药物的敏感性。
9.外-XXX试验：一种血清学试验，用于检测梅毒感染。
10.L型细菌：一种变异的细菌，缺乏细胞壁。
11.菌群失调：指肠道菌群组成的失衡状态。
12.微生物：一类生物体，包括细菌、病毒、真菌等。
13.细菌：一种单细胞微生物，广泛存在于自然界中。
14.最小抑菌浓度：指能抑制微生物生长的最低药物浓度。
15.菌落：细菌在培养基上生长形成的圆形或不规则形状的群体。
16.汹涌发酵：一种微生物在液体培养基中进行的大规模发酵过程。
17.无菌操作：一种操作技术，用于避免微生物的污染。
18.流感杆菌“卫星现象”：指流感杆菌在革兰氏染色中与其他细菌形成的“卫星”状结构。
19.培养基：一种用于微生物培养的营养物质混合物。
20.包涵体：一种细胞内含有病毒或细菌的小体。
21.正常菌群：指人体内正常存在的微生物群落。
22.内毒素：一种由细菌产生的毒素，可引起炎症反应等症状。
23.干扰现象：指两种或多种微生物在同一培养基上生长时，彼此干扰或抑制的现象。
24.菌血症：一种细菌感染，细菌进入血液循环引起全身炎症反应。
25.菌丝：真菌等微生物生长时形成的长丝状结构。
二.填空题1 L型细菌是指缺乏细胞壁的细菌。
2杀灭物体上所有微生物的方法称为消毒。
3细菌H-O变异是指细菌在不同环境下表型的变异。
4药敏试验所用标准培养基是Muller-Hinton培养基，所用菌液相当于0.5 McFarland标准的细菌／ml，细菌接种采用Kirby-Bauer法。
2020年高考生物之纠错笔记专题16 实验附解析
专题16 实验易错点1 不能正确分析显微观察类实验的相关问题1．下列关于显微镜观察的问题，叙述正确的是A．在观察根尖细胞有丝分裂过程中，应选择一个处于间期的细胞，持续观察它从间期到末期的全过程B．在低倍镜下找到清晰的物像后，可以直接转用高倍镜进行观察C．在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中，涂片用质量分数为8%的盐酸处理后，立即用染色剂染色D．在观察质壁分离与复原实验时，实验材料需要始终处于生活状态【错因分析】不了解低倍镜转换成高倍镜的操作步骤是错误的主要原因。
另外对实验材料的选择和处理等基础知识掌握不牢是出错的原因之一，观察根尖细胞的有丝分裂实验中，经解离过程，细胞已经死亡，故不可能观察到分裂的整个过程；而质壁分离与复原实验中，要求整个实验过程中细胞都处于生活状态；低倍镜转换成高倍镜时要先在低倍镜下观察到清晰的物像，再移至视野中央，如果物像不在视野中央，转换为高倍镜后有可能观察不到物像。
【试题解析】在观察根尖细胞有丝分裂过程中装片的制作过程包括:解离、漂洗、染色和制片，经过解离过程细胞已经死亡，因此，无法在一个细胞中看到细胞有丝分裂的全过程，A错误；低倍镜转换成高倍镜的过程：在低倍镜下找到清晰的物像→将要观察的物像移至视野中央→转换高倍镜→调节细准焦螺旋和反光镜、光圈，B错误；盐酸处理后要先冲洗再染色，C错误只有活细胞才能发生质壁分离和复原，因此实验材料在整个实验过程中要保持生活状态，D正确。
【参考答案】D1．下列有关“用高倍显微镜观察细胞中叶绿体和线粒体”实验的叙述，正确的是A．观察叶绿体时应用菠菜叶稍带叶肉的下表皮细胞B．用徤那绿染液染色时先用盐酸处理口腔上皮细胞C．该实验可观察到叶绿体具有双层膜结构D．植物的叶肉细胞适合作为观察线粒体的材料【答案】A【解析】本题考查的是“用髙倍显微镜观察细胞中叶绿体和线粒体”实验的相关知识。
菠菜叶片下表皮稍带些叶肉细胞中含有多个的叶绿体，叶绿体为绿色，可直接观察，A正确；观察线粒体需要用活性染料健那绿染色且观察细胞必须是活的，所以不能用盐酸处理口腔上皮细胞，B错误；利用电子显微镜才可观察到叶绿体和线粒体具有双层膜结构，C错误；叶肉细胞可用于观察叶绿体而不能用于观察线粒体，因为叶绿体的绿色会掩盖健那绿的染色效果，影响实验观察，D错误。
2021年高二生物实验专题训练十六
2021年高二生物实验专题训练十六1．（7分）请回答与实验有关的问题：某同学从资料获知，二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，并设计了如下实验加以验证，请根据实验方案回答问题。
实验材料：二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，细胞培养液（内有小鼠肝部肿瘤细胞），试管等。
实验的主要步骤如下表所示：1 2 3 4 5试管编号步骤I 加入等量的细胞培养液（含有全部营养物质与小鼠肝部肿瘤细胞）II 计算试管内的细胞数目，记录数据III 加入 a 溶液加入 bIV 振荡后，在冰箱中培养V 一段时间后，计算试管内的细胞数目，记录数据（1）完成步骤Ⅲ，a：；b：。
（2）纠正步骤Ⅳ中的错误：。
（3）根据纠正后的正确方法进行实验，结果如下：试管编号 1 2 3 4 5二氯二乙胺浓度（mg/mL）0．1 0．2 0．3 0．4 0步骤II记录的细胞数目（个/mL）350 363 342 335 336步骤V记录的细胞数目（个/mL）320 275 186 96 560 结论：第一，；第二，。
2．（9分）分析下列遗传学资料回答问题：资料1 1928年，英国科学家Griffith将加热杀死的S型细菌与R型活细菌相混合后，注射到小鼠体内，结果发现小鼠死亡，并在死亡小鼠体内分离到S型细菌；后来科研工作者重复上述实验，并测定了小鼠体内S型和R型细菌含量变化情况，如图1所示。
（1）Griffith认为S型细菌“复活”的原因是_____ _____。
图1（2）曲线ab段下降的原因是______ __________。
（3）曲线bc段上升，与S型细菌是否有关__ __（是或否），你的理由是_______ _________。
资料2人类对遗传物质作用机理的探索经历了漫长的过程，请根据下列科学史实回答问题：科学家发现细胞中有三类RNA，一类是核糖体的组成成分，一类能与特定的氨基酸结合，还有一类合成后几小时就会降解，其中哪一类是将DNA的遗传信息传递给蛋白质的“信使”呢？1958年，Crick提出如下观点：核糖体RNA是“信使”——不同核糖体RNA编码不同的蛋白质，简称“一个核糖体一种蛋白质”。
（完整word版）生物药物分析练习题考试题及详细答案
（完整word版）生物药物分析练习题考试题及详细答案生物药物分析练习题一、名词解释：生物药物分析：应用微生物学、分子生物学、免疫学、生物化学、有机化学、数学、分析化学、生化工程等学科的理论及其技术成就，检测和研究各种生物药物质量的一门综合性学科。
生物药物：指的是生物体生命活动过程中产生的，或者通过生物技术加工的，用作疾病的诊断、预防、治疗的初级和次级代谢产物，包括微生物药物、基因工程药物、动植物细胞组织制备的生化药物。
药品标准：是指国家对药品的质量规格及其检验方法所做的技术规定，是药品的生产、流通、使用及检验、监督管理部门共同遵守的法定依据。
药典：一个国家记载药品标准，规格的法典，一般由国家药品监督管理局主持编撰颁布实施，具有法定约束力。
基因工程药物：是先确定对某种疾病有预防和治疗作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来，经过一系列基因操作，最后将该基因放入可以大量产生的受体细胞中去，在受体细胞不断繁殖的过程中，大规模生产预防和治疗这些疾病的蛋白质。
药物杂质：药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。
面积归一法：计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率以测定杂质含量。
内消法：是指将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测组分的峰面积及相对校正因子，按相应公式和方法即可求得被测组分在样品中的百分含量。
外消法：用已知不同含量的标样系列等量进行分析，然后做出响应信号与含量之间的关系曲线。
定量分析样品时，在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品，从色谱图上测出峰高或峰面积，在从校正曲线查出样品的含量。
微生物限度检查法：系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法。
放射性免疫测定法：利用免疫学上的抗原-抗体高度特异性反应与放射性同位素测量技术的高度灵敏性相结合的超微量分析方法。
药理总论实验
0.2％、0.4％和0.8％戊巴比妥钠 0.4％硫喷妥钠 2.5％链霉素
实验方法
小白鼠捉拿
小白鼠编号 （俯卧位）
腹腔注射
操作步骤
实验一
正常小鼠3只编号、称重给药（0.2％、0.4％和0.8 ％戊巴比妥钠，0.1 ml/10g，i.p.）观察翻正反射 消失持续时间的长短
实验二
正常小鼠2只和肝损小鼠2只（实验前24小时注射四氯 化碳诱导肝功能损伤）编号、称重给药（0.4％硫 喷妥钠，0.1 ml/10g，i.p.）比较两组小鼠翻正反 射消失持续时间的长短
药理学总论实验
中南大学药学院药理学系
实验内容
实验一 药物不同剂量对药物作用影响 实验二 肝功能损害对药物作用的影响 实验三 肾功能损害对药物作用的影响
实验目的
观察不同剂量对药物作用的影响 观察肝功能和肾功能损伤对药物作用的影响 掌握小白鼠的捉拿和腹腔注射给药方法
实验原理
实验一 、不同剂量对药物作用的影响
实验三
正常小鼠2只和肾损小鼠2只（实验前24小时注射氯化 高汞诱导肾功能损伤）编号、称重给药（2.5％链 霉素，0.15 ml/10g，i.p.）比较两组小鼠的活动情 况
结果
实验一
随剂量增加，戊巴比妥对小鼠的中枢抑制作用逐渐增 强，表现为剂量由小至大，小鼠翻正反射消失持续时 间逐渐延长。
表1 药物不同剂量对药物作用的影响
实验期间不得喧哗，要求科学认真的实验态度 实验报告书写规范、整洁，按时送交指定位置 实验完毕，各组清理本组实验台，总值日负责
整间实验室清洁
非预期结果及可能原因分析
药物量效关系表现不明显？
样本数少，个体差异大 注射时给药剂量不准确或药液放置时间久而失效
药物代谢动力学实验讲义
药物代谢动⼒学实验讲义实验⼀药酶诱导剂及抑制剂对戊巴⽐妥钠催眠作⽤的影响【⽬的】以戊巴⽐妥钠催眠时间作为肝药酶体活性指标，观察苯巴⽐妥及氯霉素对戊巴⽐妥钠催眠作⽤的影响，从⽽了解它们对肝药酶的诱导及抑制作⽤。
【原理】苯巴⽐妥为肝药酶诱导剂，可诱导肝药酶活性，使戊巴⽐妥钠在肝微粒体的氧化代谢加速，药物浓度降低，表现为戊巴⽐妥钠药理作⽤减弱，即催眠潜伏期延长，睡眠持续时间缩短。
⽽氯霉素则为肝药酶抑制剂，能抑制肝药酶活性，导致戊巴⽐妥钠药理作⽤增强，即催眠潜伏期缩短，睡眠持续时间延长。
【动物】⼩⽩⿏8只，18~22g【药品】⽣理盐⽔、0.75%苯巴⽐妥钠溶液、0.5%氯霉素溶液、0.5%戊巴⽐妥钠溶液【器材】天平、⿏笼、秒表、注射器1 ml×4、5号针头×4【⽅法与步骤】⼀、药酶诱导剂对药物作⽤的影响1、取⼩⿏4只，随机分为甲、⼄两组。
甲组⼩⿏腹腔注射0.75%苯巴⽐妥钠溶液0.1 ml/10g，⼄组⼩⿏腹腔注射⽣理盐⽔0.1 ml/10g，每天1次，共2天。
2、于第三天，给各⼩⿏腹腔注射0.5%戊巴⽐妥钠溶液0.1 ml/10g，观察给药后⼩⿏的反应。
记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间，计算戊巴⽐妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
⼆、药酶抑制剂对药物作⽤的影响1、取⼩⿏4只，随机分为甲、⼄两组。
甲组⼩⿏腹腔注射0.5%氯霉素溶液0.1 ml/10g；⼄组⼩⿏腹腔注射⽣理盐⽔0.1ml/10g。
2、30分钟后，给各⼩⿏腹腔注射0.5%戊巴⽐妥钠溶液0.1 ml/10g，观察给药后⼩⿏的反应。
记录给药时间、翻正反射消失和恢复的时间，计算戊巴⽐妥钠催眠潜伏期及睡眠持续时间。
【统计与处理】以全班结果（睡眠持续时间，分）作分组t检验，检验⽤药组与对照组有⽆显著性差异。
（参见“数理统计在药理学实验中的应⽤”）【注意事项】1、催眠潜伏期为开始给药到动物翻正反射消失的间隔时间，睡眠持续时间为翻正反射消失⾄恢复的间隔时间。
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实验四、 苯巴比妥钠和放线菌素D对小鼠肝脏细胞色素P-450含量的影响 Experiment 4. Influence of phenobarbital sodium and actimycin D on the hepatic cytochrome P-450 content in mice
P-450属于血红素蛋白，其还原型与CO结合后，在波长450nm处出现吸收峰。
因此，可以应用示差光谱法测定其含量。
肝匀浆样品中通以CO后，加还原剂连二亚硫酸钠（Na2S2O4），然后在450nm和490nm处测定吸光度，其差值代入公式，即可计算出细胞色素P450的含量。
【实验目的】
肝匀浆中细胞色素P-450含量的简易测定；肝药酶的诱导剂、抑制剂的作用。
【实验对象】
小鼠（昆明种）
【仪器和药品】
分光光度计，扭力天平，制冰机，生理盐水（N.S.）；7.5g/L（0.75%）苯巴比妥钠（Pheno）；
0.02g/L（0.002%）放线菌素D（A.D.）；0.25M蔗糖溶液；Tris-HCl缓冲液。
玻璃匀浆器，漏斗，试管（10 ml）数只，滤纸，移液管（1ml，2ml，5ml，10ml）数只，冰盒等。
【实验方法】
1. 动物分为3组：生理盐水组，苯巴比妥钠组及放线菌素D组。
1.苯巴比妥钠和放线菌素D i.p.三天，诱导或抑制肝药酶。
2.断头放血：于第三天（实验当日）将小鼠断头放血（须放净，因血红素会影响实验结果）；
3.制备肝匀浆：将0.25M的蔗糖溶液和0.05M Tris-HCl缓冲液置于冰块中预冷；剪下肝脏（肝组织不得少于400mg；勿破坏胆囊，因胆色素干扰实验结果；以滤纸吸去血迹，因血色素干扰实验结果）；扭力天平称重（垫锡纸；每次加样或加减法码时必须关上关平）；将肝组织置于匀浆器中，加入预冷后的0.25M蔗糖（0.5ml/100mg肝组织）；冰浴下研磨，直至组织变为淡粉色匀浆；取此匀浆液1ml，加入预冷后的0.05M Tris-HCl缓冲液9ml，充分混匀；冰浴下充以CO，1～2气泡/秒，通气2分钟。
4.通气完毕的溶液，倾入2个比色杯中，一个作为参照杯，另一个作为样品杯。
向样品杯中加入连二亚硫酸钠5mg，充分混匀。
参照杯调零后，在450nm和490nm处测定样品杯的吸光度，按下式计算P-450的含量：
P-450（nmol/g肝脏）= [（A450 – A490）/ E • L] × 50000
A=E•C•L
E：P-450从490nm到450nm波长的示差光谱消光系数，本实验中E=104 L /cm •mmol；
L：比色杯厚度（光路长度）≈1cm。
C：溶液浓度
A：吸光度
A.D. N.S. Pheno
A450 A490 P450 A450 A490 P450 A450 A490 P450
Mean±SD Mean±SD Mean±SD
6．计算
（1）P-450升高百分率：
[（Pheno – N.S.）/ N.S.] × 100%
（2）P-450降低百分率：
[（N.S. – A.D.）/ N.S.] × 100%
【注意事项】
1.操作要快（为了保证酶的活性）；
2.冰浴（为了保证酶的活性）；
3.血要放尽（P-450为血红素蛋白；血红素影响P-450）；
4.胆囊破后，胆红素会影响P-450的测定；
5.通CO的速度不能过快或过慢；
6.研磨，至肝组织由红色变成白色匀浆为止；
7.分光光度计上比色时，先测定A.D，再测定N.S，最后测定Pheno（P－450由低浓度
至高浓度）。
【思考题】
1.肝药酶的临床意义；
2.药物的耐受与交叉耐受, 联合用药应注意的问题。
3．P-450在药物转化中的作用。
4．不同实验组P-450含量不同的原因。
5．诱导剂增加P-450含量、抑制剂减少P-450含量的意义。
（韩国柱 苏成业 王明宇）。