药物生殖毒性研究
药物毒理学生殖毒性试验
药物毒理学生殖毒性试验
药物毒理学的研究范围包含了药物对生殖系统的影响，其中生殖毒性是一项重要的研究内容。
生殖毒性试验主要通过实验动物模型，评估药物对生殖系统的对两性生殖器官和功能的影响。
生殖毒性试验通常包括以下内容：
1.生殖毒性评估：评估药物对生殖器官的影响，包括生殖细胞的发育、数量、性功能的影响。
2.生殖发育毒性评估：评估药物对胚胎和胎儿的影响，包括睾丸、卵巢、外生殖器和乳腺等生殖发育的影响。
3.遗传毒性评估：评估药物对基因突变、染色体畸变和细胞遗传毒性等的影响。
药物毒理学生殖毒性试验是一项重要的药物安全性评估内容，能够为药物的开发和上市提供重要数据支持，保障人类健康和安全。
药物生殖毒性研究
• 白鼬：
• 如果不采用特殊的管理系统，只能季节性 繁殖（其成功与否主要取决于人和动物的 相互影响），历史背景资料不足。
• 仓鼠：
• 静脉给药虽非不可能，但相当困难，会将 受试物存于颊部小囊中而影响实际给药量
• 攻击性非常强
• 对肠道功能紊乱敏感，对许多受试物有过 度敏感的致畸反应，胎仔小。
• 犬：
终末检查：
•-剖检所有亲代动物
•-保存肉眼观察出现异常的器官，必要时进行 组织学检查，同时保留足够的对照组动物的 相应器官以便比较
•-保存所有动物的睾丸、附睾或卵巢、子宫， 必要时进行组织学检查，根据具体情况进行 评价
•-建议计数附睾中的精子数并进行精子活力检 查
胚胎-胎仔发育毒性试验（II段）
• 此外，还应进行第二种动物胚胎-胎仔发育
• 两段试验设计（啮齿类动物）
• 最简单的两段试验设计为生育力试验和围 产期试验。
• 目前研究认为，如果受试物在动物中的暴 露量达到人体暴露量以上的足够范围时， 围产期试验中并未发现其对产前发育有影 响，那么在大多数情况下，再进行胎仔检 查也不能显著改变其危险性评价的结果。
• 终末检查： • -剖检所有成年动物 • -保存肉眼观察出现异常的器官，必要时进
行组织学检查，同时保留足够的对照组动 物相应器官以便比较 • -计数黄体数，活胎、死胎、吸收胎并计算 着床数 • -胎仔体重，胎仔顶臀长 • -胎仔异常（包括外观、内脏、骨骼）
• 胎仔骨骼检查
围产期毒性试验（III段）
• 低剂量应为生殖毒性方面的NOAEL。 • 高剂量与低剂量间根据具体情况可设计1～
2个剂量，以观察可能的剂量反应关系。
• 4.2 给药途径 • 一般情况下，给药途径应与临床拟用途径
盐酸度洛西汀的生殖毒性试验研究
ｌ ｓ ｄｏ ｐｄｓ ｇｔ ， ｅｄ ａ ｍ ｕ ｔ ｆ ｍ ｒｏｏ — ｐ ｎ ｄ ｅ ； ｈ ｏ ｙｗ ｉ ｔ ｆ ｍｂｙ ｆ—ｓｒ ｇｄ — ｏ ） ｒｐ ｅ ｌ ｈｌ ｔ ｗ ｒ ａ ｏ ｎ ｏ ｂｙ ｆ ｓｒ ｇａ ｄｄ ③ｔｅｂ ｄ ｅ ｈ ｒｏｏ ｓ ｉ ｙｈ ｆ ｅ ｉ ｇ ｏｅ ｐｉ ｅ ｎ ｓｅ ｄｄ ａ ｔｅｈｇ ｌ ｄ ｓ ａ ｎ ａｂｔ； ｈ ｒｔ ｅ ｉ ｅｆ ｔ ｎｔｅｅ ｂ ｏｏ —ｓｒ ｇ ｆａｓ ｎ ａｂｔ ｃ ｎ ｅ ｔｈ ｉ ｙ ｏｅｉ ｒｔ ａ ｄｒｂ ｉ ⑧ｔｅｔ ａ ｇ ｎｃ ｆ ｃ ｏ ｍ ｒ ｆ ｐｉ ｔ ａ ｄｒｂ ｉ ｈ ｎ ｓ ｓ ｅ ｏ ｅ ｈ ｙ ｎ ｏｒ ｓ
或家兔管饲法整个器官发生期 口服给药 ， 研究药物对胚胎发育 的毒 性作用 Ｊ 。结 果 体重增幅下降 。结论
大 鼠和 家兔 高剂量组 均可见摄食 量和
对胚胎 的毒性 仅限于高剂量组 ： ①大 鼠前期 和后期 胚胎植 入丢失增 加 ； 家兔早 期吸收胚 （ ② 和后 期胚
胎植人丢失 ） 轻度下 降 ， 胎仔矮小数增加 ； 大 鼠或家兔高剂量组胎仔体重下降 ； ③ ④未见对大 鼠或家兔 胎仔 的致 畸作用。
关键词 盐酸度洛西汀 ； 动物 ； 殖毒 性试 验 生 ［ 中图分类号］ Ｒ ６ ９９ ［ 文献标识码］ Ａ
文 章 编 码 ：０ １ １１ ２ １ ） ３— ０ ３—０ １０ —８３ （ ０ ０ ０ ０ ０ ２
生殖毒性试验与评定
生殖毒性试验的目的在于了解外源化学物及其代 谢产物对机体成年哺乳动物的生殖功能和生育力 的影响。
多代繁殖试验在整个生命期内接触受试化学物， 更符合人类实际生活中长期低剂量接触食品添加 剂、微量重金属、农药及环境污染物的情况。
（1）试验方法原则
生殖毒性试验多用性成熟大鼠，也可用小鼠或家 兔。大鼠自然受孕率较小鼠为高，较为理想。 一般设三个剂量组，另设对照组。
一、 生殖毒性试验与评定 二、发育毒性试验与评定
一、生殖毒性试验与评定
外来化合物对生殖过程的损害作用，即生殖毒性。 生殖毒性可发生于妊娠期，也可发生于妊娠前期和 哺乳期。 生殖毒性试验主要研究外来化合物对生殖细胞发生、 卵细胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳过程的 损害及其评定。过去也称为繁殖试验。
幼仔出生存活率= ———————————×100%
分娩时出生幼仔数
4．幼仔哺乳成活率反映雌性动物授乳哺育幼 仔的能力。
21天断奶幼仔存活数
幼仔哺乳成活率= —————————×100%
出生后4天幼仔存活数
（四）结果判定
将试验组动物各项观察指标统计结果与对照组动 物进行比较，如试验动物在交配、妊娠、幼仔存 活、幼仔发育（哺育）等方面受到影响，则说明 受试物对动物繁殖功能有损害作用。
发育毒性研究的目的是通过计数胚胎或胎仔 吸收或死亡数，测量胎仔的重量和性别比， 检查外观、内脏和骨骼的形态，来识别受试 物有无对胚胎或胎仔的致死、致畸或其他毒 性作用。
变异：是由遗传和遗传外因素控制的外观变化，或 由于分化改变而引起的中途歧异。
2. 发育毒性的表现
① 生长迟缓 即胚胎与胎仔的发育过程在外来化合物影响下，较正常的 发育过程缓慢。 ② 致畸作用 由于外来化合物干扰，活产胎仔胎儿出生时，某种器官表 现形态结构异常。致畸作用所表现的形态结构异常，在出 生后立即可被发现。
药物生殖毒性指导原则
药物生殖毒性研究技术指导原则二○○六年十一月一、概述生殖毒性研究（Reproductive toxicity study）是药物非临床安全性评价的重要内容，它与急性毒性、长期毒性、遗传毒性等毒理学研究有着密切的联系，是药物进入临床研究及上市的重要环节。
拟用于人体的药物，应根据受试物拟用适应症和作用特点等因素考虑进行生殖毒性试验。
在药物开发的过程中，生殖毒性研究的目的是通过动物试验反映受试物对哺乳动物生殖功能和发育过程的影响，预测其可能产生的对生殖细胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等亲代生殖机能的不良影响，以及对子代胚胎-胎儿发育、出生后发育的不良影响。
生殖毒性研究在限定临床研究受试者范围、降低临床研究受试者和药品上市后使用人群的用药风险方面发挥重要作用。
本指导原则适用于中药、天然药物和化学药物的生殖毒性研究。
本指导原则重点阐述动物生殖毒性试验中动物、给药剂量、给药方法、试验方案选择的基本原则，并介绍一些常用的试验方案；对所获得数据进行分析及评价要求；以及所涉及的科学原理与背景。
二、基本原则（一）实验管理药物的生殖毒性试验属于非临床安全性评价研究，根据《中华人民共和国药品管理法》的规定，必须执行《药物非临床研究质量管理规范》。
（二）具体问题具体分析生殖毒性试验的设计，应在对受试物认知的基础上，遵循“具体问题具体分析”的原则。
应根据受试物的结构特点、理化性质、已有的药理毒理研究信息、适应症和适用人群特点、临床用药方案等选择合理的试验方法，设计适宜的试验方案，并综合上述信息对试验结果进行全面分析评价。
（三）随机、对照、重复生殖毒性试验应符合一般动物试验的基本原则，即随机、对照和重复。
三、基本内容（一）总体考虑1、受试物1.1 中药及天然药物生殖毒性试验的受试物应能充分代表临床研究受试物或上市药品，因此受试物应采用制备工艺稳定、符合临床研究质量标准规定的样品，一般用中试样品，并注明受试物的名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件及配制方法等。
第18章-生殖毒性研究
第一节 致畸胎研究研究概况
年份
1932 1935 1948 1950 1956 1963 1966 1971
事件
作者
维生素A缺乏可使猴胚胎畸形
Hale
X射线照射使大鼠胚胎发生各种畸形 Gob
氮芥导致大鼠胚胎畸形
Harriu
可的松致小鼠胚胎畸形
Baxter
反应停（Thalidomide）事件
母体毒性（embryo toxicity ）：指药物引起怀孕动物的毒效 应，如体重不增或减轻等，最严重的是死亡。
第二节 有关生殖毒性的基本概念
畸形（malformations）：永久性结构异常或功能异常的 胎儿和新生儿。通常不包括显微镜下细微结构的异常, 生 化代谢性缺陷。单纯功能异常(如精神缺陷、智力缺陷), 也不包括分娩过程中各种因素造成的缺陷。
第三节 一般生殖毒性试验
[目的]
一般生殖毒性试验（reproductive toxicity test） 是研究药物对整个生殖过程的影响。包括生殖细胞 （精子、卵细胞）的发生，卵细胞受精、着床胚胎 形成，胚胎发育阶段的影响并作出评价。
[动物及分组]
至少一种动物，一般为大鼠或小鼠，每组雄性 动物10只，雌性动物至少20只。
第三节 一般生殖毒性试验
[检查]
1. 雄性与雌性动物同笼交配后，每日检查小鼠阴道中有无 阴栓，大鼠则检查精子，以检查到阴栓或精子的当日作 为妊娠第0天。
2. 雌鼠于妊娠第13天解剖观察，以确定妊娠、胎儿的吸收 和死亡情况，并记录母鼠的一般状况、体重变化和胎盘 重量，以确定子宫内的活胎数，对活胎进行性别鉴定、 体重和身长的测量以及外表和内脏器官的形态学观察， 对骨骼进行茜红素染色后进行检查，必要时进行组织学 和组织化学的详细检查。
西地那非的生殖毒性研究进展
西地那非的生殖毒性研究进展西地那非作为第一个用于治疗阴茎勃起功能障碍的Ⅴ型磷酸二酯酶抑制剂，其人群使用范围非常广泛，但其是否影响生育存在争议。
本文就国内外有关西地那非雄性生殖毒性的实验动物及人群研究结果进行了综述，结果表明，长期使用西地那非可能对前列腺、睾丸和阴茎组织产生不良影响，并影响精子功能导致不育，其对前列腺的作用值得深入研究。
[Abstract] As the first PDE5 inhibitor to treat erectile dysfunction，Sildenafil is widely used in humans all over the world，however，it is still argued whether Sildenafil can induce infertility. In this paper，all the recently published articles of experimental animal and human being research on the male reproductive toxicity induced by Sildenafil at home and abroad are summarized. It is suggested that Sildenafil will bring adverse effects to prostate，testis and penis after long-time using，and it will also result in infertility by affecting sperm function，moreover，the relationship between Sildenafil and prostate is worth to be further developed.[Key words] Sildenafil；Reproductive toxicity；Phosphodiesterase inhibitor阴茎勃起功能障碍（erectile dysfunction，ED）是男科和泌尿外科中常见的疾病之一，其发病原因分为器质性和心理性两大类，前者又包括血管、神经、内分泌及阴茎本身等因素。
药物生殖毒性研究技术指导原则
附件三药物生殖毒性研究技术指导原则药物生殖毒性研究技术指导原则一、概述生殖毒性研究（Reproductive toxicity study）是药物非临床安全性评价的重要内容，它与急性毒性、长期毒性、遗传毒性等毒理学研究有着密切的联系，是药物进入临床研究及上市的重要环节。
拟用于人体的药物，应根据受试物拟用适应症和作用特点等因素考虑进行生殖毒性试验。
在药物开发的过程中，生殖毒性研究的目的是通过动物试验反映受试物对哺乳动物生殖功能和发育过程的影响，预测其可能产生的对生殖细胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等亲代生殖机能的不良影响，以及对子代胚胎-胎儿发育、出生后发育的不良影响。
生殖毒性研究在限定临床研究受试者范围、降低临床研究受试者和药品上市后使用人群的用药风险方面发挥重要作用。
本指导原则适用于中药、天然药物和化学药物的生殖毒性研究。
本指导原则重点阐述动物生殖毒性试验中动物、给药剂量、给药方法、试验方案选择的基本原则，并介绍一些常用的试验方案；对所获得数据进行分析及评价要求；以及所涉及的科学原理与背景。
二、基本原则（一）实验管理药物的生殖毒性试验属于非临床安全性评价研究，根据《中华人民共和国药品管理法》的规定，必须执行《药物非临床研究质量管理规范》。
（二）具体问题具体分析生殖毒性试验的设计，应在对受试物认知的基础上，遵循“具体问题具体分析”的原则。
应根据受试物的结构特点、理化性质、已有的药理毒理研究信息、适应症和适用人群特点、临床用药方案等选择合理的试验方法，设计适宜的试验方案，并综合上述信息对试验结果进行全面分析评价。
（三）随机、对照、重复生殖毒性试验应符合一般动物试验的基本原则，即随机、对照和重复。
三、基本内容（一）总体考虑1、受试物1.1 中药及天然药物生殖毒性试验的受试物应能充分代表临床研究受试物或上市药品，因此受试物应采用制备工艺稳定、符合临床研究质量标准规定的样品，一般用中试样品，并注明受试物的名称、来源、批号、含量（或规格）、保存条件及配制方法等。
药物生殖毒性研究
体外和计算机模拟技术的 发展
通过体外实验和计算机模拟技术，可以在一 定程度上模拟体内生殖毒性反应，为早期风
险评估提供依据。
生殖毒性研究的前沿领域与展望
个体化生殖毒性研究
随着基因组学和表观遗传学的发展，未来研 究将更加关注个体差异对药物生殖毒性的影 响。
促进合理用药
通过生殖毒性研究，医生可以了解药物对生殖系 统的影响，为患者提供更合理的用药建议。
3
药物研发与注册
生殖毒性研究是药物研发和注册过程中必不可少 的一部分，为新药的上市提供安全性依据。
02
药物生殖毒性评估方法
体内评估方法
动物实验
利用动物模型进行药物生殖毒性研究 ，观察药物对动物生殖系统的影响， 评估药物的潜在生殖毒性。
跨学科合作与数据共享
加强跨学科合作和数据共享，有助于推动生 殖毒性研究的进展，提高风险评估的准确性。
谢谢观看
长期健康影响
某些药物可能对胎儿和新生儿的长期健康造成影响，如行为问题和学 习障碍等。
药物对乳腺和子宫的影响
乳腺疾病风险增加
某些药物可能增加女性乳腺疾病的风险 ，如乳腺增生和乳腺癌等。
VS
子宫疾病风险增加
某些药物可能增加女性子宫疾病的风险， 如子宫内膜异位症和子宫肌瘤等。
05
药物生殖毒性研究的挑 战与展望
药物可能对精子和卵子的数量和 质量产生负面影响，降低受孕概 率或导致遗传物质异常。
生殖内分泌干扰
一些药物可能干扰正常的生殖内 分泌功能，如影响激素分泌和信 号转导，导致性发育异常和生育 能力下降。
生殖毒性研究的重要性
生殖毒性试验流程及意义
啮齿类动物生殖毒性I、II、III段实验流程及意义1.概述生殖毒性试验（Reproductive toxicity study）是通过动物试验反映受试物对哺乳动物生殖功能和发育过程的影响，预测其可能产生的对生殖细胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等亲代生殖机能的不良影响，以及对子代胚胎-胎儿发育、出生后发育的不良影响。
包括：生育力与早期胚胎发育毒性实验（I段）、胚胎—胎仔发育毒性试验（II段）、围产期毒性试验（III 段）。
生殖毒性试验中，为方便实验一般可将一个完整生命周期过程分成以下几个阶段如下图所示：图1. 动物生命周期划分A. 从交配前到受孕（成年雄性和雌性生殖功能、配子的发育和成熟、交配行为、受精）。
B. 从受孕到着床（成年雌性生殖功能、着床前发育、着床）。
C. 从着床到硬腭闭合（成年雌性生殖功能、胚胎发育、主要器官形成）。
D. 从硬腭闭合到妊娠终止（成年雌性生殖功能、胎仔发育和生长、器官发育和生长）。
E. 从出生到离乳（成年雌性生殖功能、幼仔对宫外生活的适应性、离乳前发育和生长）。
F. 从离乳到性成熟（离乳后发育和生长、独立生活的适应能力、达到性成熟的情况）。
各段试验研究阶段如下：生育力与早期胚胎发育毒性实验（I段）：A-B胚胎—胎仔发育毒性试验（II段）：C-D围产期毒性试验（III段）：C-F1一般试验设计简介1.1受试物生殖毒性试验的受试物应能充分代表临床研究受试物或上市药品。
1.2实验动物首选啮齿类动物为大鼠。
在胚胎-胎仔发育毒性研究中，一般还需要采用第二种哺乳动物，家兔为优先选用的非啮齿类动物。
1.3给药1. 3.1计量选择：至少应设三个剂量组，必要时可增加剂量组。
高剂量：应出现一些轻微的母体毒性反应，或为最大给药量/最大耐受量。
低剂量：应为生殖毒性方面的“未观察到不良反应的剂量（NOAEL）”。
1.3.2给药途径：给药途径应与临床拟用途径一致（不用腹腔注射途径，因腹腔注射会对胎儿及子宫产生直接影响）。
药物毒理学：生殖与发育毒理学
5
❖ 二十世纪60年代发生的“反应停”事件揭开了药物致畸性研究的 序幕。
❖ 年来出现的不孕、流产、死胎、畸形、后代患病现象的增多，引 起了人们对化学物影响人类生殖机能的重视。
6
常用术语
生殖毒理学（Reproductive toxicology）：研究药物 对生殖过程(包括生殖细胞的发生形成、交配、受 精、合子形成、着床、胚胎形成并发育、分娩、 哺乳等）的影响及其规律的学科。
发育毒理学（Developmental toxicology）：研究药 物对胚胎发育的影响及出现异常胚胎发生（结构 畸形、生长迟缓、功能缺陷、个体死亡等）的规 律的学科。
7
胚胎毒性（Embryo toxicity）：药物对胚胎的选择毒 性作用，表现为胚胎死亡、生长迟缓、畸形、功 能缺陷。
致畸性（Teratogenicity）：胚胎在器官形成期接触 药物后，引起的永久性结构畸形和/或功能缺陷。
第十五章 生殖与发育毒理学
Reproductive & Developmental Toxicology
1
药物
ADME
体内的靶部位
一般药理 （安全性药理）
局部毒性
一般毒性
特殊毒性 （三致）
全身毒性 免疫毒性
致致 致
单重 次复 给给
突畸 癌 变性 性 性
药药
毒毒
性性
2
遗传与变异突变
图15-1 体细胞与生殖细胞突变的可能后果
❖ 不同器官在器官形成期发育的时间顺序不一，在此期内不 同时间给予致畸药物，可出现不同类型的畸形。（CP）
❖ 同一剂量的药物，给药持续时间不同。结果也不同，一般 来说一次足量暴露所引起的致畸效应比分多次暴露大。
药物生殖和发育毒性作用
6
生殖毒理学(reproductive toxicology)主要研究外
源化学物对生殖细胞发生、卵细胞受精、胚胎形成、
妊娠、分娩和哺乳过程的损害作用及其评定，评定方 法即为生殖毒性试验。 发育毒理学(developmental toxicology)主要研究外 源化学物对胚胎发育、胎仔发育以及出生幼仔发育的
药物生殖和发育毒性作用
1
反应停事件 (沙利度胺; 酞胺哌啶酮)
1957 –1961
2
3
生殖发育是哺乳动物繁衍种族的生理过程，其中包
含生殖细胞发生（即精子发生和卵细胞发生）、配 子的释放、性周期和性行为、卵细胞受精、受精卵 的卵裂、胚泡的形成、植入或着床、胚胎形成、胚 胎发育、器官发生（或称器官形成）、胎仔发育、
力的降低不孕或不育等。雄性可表现为睾丸萎
缩或坏死，精子数目减少。
18
3、生殖毒性的评价
外源化学物对生殖过程作用的评定主要
通过生殖毒性试验来进行。
生殖毒性试验可以全面反映外源化学物
对性腺功能、发情周期、交配行为来自受孕、妊娠过程、分娩、授乳以及幼仔断
乳后生长发育可能发生的影响。
19
评定的主要依据是交配后母体受孕情况（受孕
分娩和哺乳过程。
生殖发育也可称繁殖过程。
4
外源化学物对生殖发育的影响
干扰生殖发育的任何环节，并造成损害作用。 可以通过对内分泌系统，特别是对性腺的作用，
发生间接的影响。
神经系统对内分泌功能也有调节作用，通过下
丘脑-垂体-睾丸轴(下丘脑-垂体-卵巢轴)两条
途径作用于生殖发育过程 。
5
外源化学物对生殖发育损害作用的特点 生殖发育过程较机体其他系统更为敏感 外源化学物对生殖发育过程影响的范围 较为广泛和深远
药物生殖毒性研究概述
（三）随机、对照、重复 生殖毒性试验应符合一般动物试验的基本原则，即随机、对照和重 复。
基本内容
（一）总体考虑
（二）试验方案 （三）毒代动力学
（一）总体考虑
1、受试物 1.1 中药及天然药物 生殖毒性试验的受试物应能充分代表临床研究受试物或上市 药品，因此受试物应采用制备工艺稳定、符合临床研究质量标准 规定的样品，一般用中试样品，并注明受试物的名称、来源、批 号、含量（或规格）、保存条件及配制方法等。如不采用中试样 品，应有充分的理由。如果由于给药容量或给药方法限制，可采 用原料药进行试验。试验中所用溶媒和/或辅料应标明批号、规 格及生产厂家。 1.2 化学药物 生殖毒性试验的受试物应采用制备工艺稳定、符合临床研究 用质量标准规定的样品，并注明受试物的名称、来源、批号、含 量（或规格）、保存条件及配制方法等，并附有研制单位的自检 报告。所用辅料、溶媒等应标明批号、规格和生产厂家，并符合 试验要求。
药物生殖毒性研究技术 指导原则
山东大学新药评价中心 2006-10
概
述
动物生殖毒性研究（Reproduction toxicity study）是药物非临床安全性评价的重要内容，它与 急性毒性、长期毒性、遗传毒性等毒理学研究有着密 切的联系，是药物申请进入临床研究及上市的重要环 节。拟用于人体的药物，应根据受试物拟用适应症和 作用特点等因素考虑进行动物的生殖毒性试验。
2、受试物药代动力学研究
在开始生殖毒性试验前，掌握一些受试物药代动 力学方面的信息，这些信息可能来源于非妊娠或非哺 乳期动物，可提示是否应进行动物种属选择、试验设 计、给药方案的调整等。在进行结果评价时，可能有 必要进一步研究妊娠或哺乳动物的药代动力学情况 （注释1）。
3、试验系统 3.1 试验动物 应采用哺乳动物进行生殖毒性试验。在选择生殖毒性试验用动物种 属和品系时，应考虑动物的背景资料、实用性、与人的相关性等。应从 受试物、采用的试验方案和阐明试验结果的角度考虑所选择动物种属 （品系）的优缺点（注释2）。 通常应采用与其他毒理学试验相同的种属和品系，这样与其他毒理 学试验结果具有可比性，并可能避免进行过多的预试验。大鼠实用性好、 与其他试验结果的可比性高并已积累了大量的背景资料，因此可作为生 殖毒性试验的首选啮齿类动物。 在胚胎-胎仔发育毒性研究中，一般还需要采用第二种哺乳动物， 其中家兔已积累了丰富的背景资料，且容易获得和实用，因此家兔为优 先选用的非啮齿类动物。家兔不适合时，可根据具体情况，选择另一种 可替代的非啮齿类动物或第二种啮齿类动物。 通常选用年轻、性成熟的成年动物，雌性动物未经产。个体动物初 始体重不应超过或低于平均体重±20%。 动物应符合国家有关规定的等级要求，来源、品系、遗传背景清楚， 并具有实验动物质量合格证。
药物毒理学之生殖毒性实验
生殖毒性试验：所用药物至少应有二至三种剂量并设对照组，高剂量可产生轻度毒性反应，低剂量应为拟议中的治疗量的某些倍量。
给药途径原则上与推荐临床应用的给药途径相同，口服制剂应用灌胃法。
（１）一般生殖毒性试验动物：一种或一种以上试验动物，如用小鼠或大鼠每组雌雄各２０只以上。
给药时期：选择性成熟的动物，交配前雄性动物连续给药６０天以上，雌性动物连续给药１４天。
雌性动物在确定已经交配后继续给药至多数胚胎器官发生期。
检查：给药的雌性动物与给药的雄性动物同笼交配过夜后，以适当方法检查其交配成功与否（阴栓或精子的有无）。
同笼饲养期限最多两周。
必要时给药动物可以和非给药动物分别交配，已交配的雌性动物，推定其妊娠末期及时解剖，观察妊娠的确立、胎儿的吸收和死亡及子宫内活胎的发展情况，并进行形态学检查（性别、外表及内部器官的形态学观察及骨骼透明染色标本的检查），必要时进行组织学和组织化学的详细检查。
给药的雄性动物及未交配上的雌鼠均作剖检，必要时进行病理组织学检查。
（２）致畸胎试验动物：至少一种动物，一般采用小鼠或大鼠，每组１５—２０只孕鼠，家兔每组８—１２只孕兔。
剂量：至少有二至三种剂量，并另设对照组，高剂量可有轻度毒性反应，低剂量应为拟议中的治疗量的某些倍量。
给药途径：原则上与推荐临床应用的给药途径相同，口服制剂应用灌胃法。
给药时期：胚胎的器官形成期。
检查：全部动物在妊娠末期剖检，观察妊娠的确立，有无死胎和吸收胎及子宫内活胎的发育情况，并进行形态学检查（性别、外表及内部器官的形态学观察及骨骼透明染色标本的检查），必要时进行组织学和／或组织化学的详细检查。
某些新药需要观察其对子代的影响。
动物数应相应增加孕鼠１０只，使其自然分娩，观察其下一代直至成年。
检查新生动物的存活、生长及发育情况，包括行为、生殖功能及其他异常症状。
必要时还可对给药的雌性动物长期观察其生殖、受孕、分娩及次子代的情况。
结果处理：将数据汇总成表，尽量将全部观察的结果采用恰当的统计学方法分析及评价。
生殖毒性物质对人的影响及其机制研究
生殖毒性物质对人的影响及其机制研究随着现代工业和化学技术的发展，生产和使用的化学物质越来越多，因此，生殖毒性物质的存在也越来越引起人们的关注。
生殖毒性物质对人类社会的影响无法忽视，且现有的相关研究数据表明，生殖毒性物质给社会带来的影响是长期和深刻的。
一、生殖毒性物质的定义及其对人类的影响生殖毒性是指某一化学物质或其他物质，对生殖系统功能、生殖细胞或胎儿等正常发育过程产生有害影响的现象。
生殖毒性物质的种类繁多，可以是工业原料或制成品、食品、药品、环境污染物等，这些物质均可在一定程度上干扰人体内的生殖系统功能或正常生殖过程。
生殖毒性物质的危害很大，一旦受到污染，就可能给人体带来不可逆的损害，尤其对于发育中的胎儿和婴儿而言，生殖毒性物质的危害是不可逆的，具有影响生育能力和健康的高风险因素。
此外，过度接触生殖毒性物质还会导致代谢功能的紊乱，从而影响人体其他系统的功能。
二、所需的生殖毒性物质研究1. 合理评估生殖毒性物质的影响首先，科学家们需要进行生殖毒性物质的评估，以确定该物质对人体的危害程度和影响，同时还需要制定出防止生殖毒性物质污染的监管和控制措施。
通过对多个国家和地区的生殖毒性物质的监测，可以系统的评估生殖毒性物质对不同人群和环境的影响。
2. 深入研究生殖毒性物质的作用机制其次，生殖毒性物质的作用机制也需要进行深入研究。
虽然已有很多试验表明生殖毒性物质对生殖系统的毒害，但是缺乏对这些毒性机制的详细描述，这在制定控制和预防策略时是极有必要的。
3. 发展相关技术与方法除此之外，发展相关技术和方法对识别和检测生殖毒性物质也是至关重要的。
要研发出能够准确、轻松、廉价，并降低不当接触的检测方法，为人们提高科学防范生殖毒性物质的能力，从而减少其可能导致的危害。
三、生殖毒性物质的危害机制研究1. 生殖系统受损生殖毒性物质的主要危害机制之一是自身导致生殖系统的受损。
这种毒性机理的体现在它们对性激素的作用上。
性激素是维持正常的生殖系统功能所必需的激素之一，而生殖毒性物质往往会干扰性激素的正常合成和释放，从而损害成年人和胎儿的生殖系统形成和功能。
生殖毒性研究
精选ppt
11
第三节 一般生殖毒性试验
[检查]
3. 大鼠于孕期第20天处死（小鼠18天）。剖腹取 出子宫及卵巢，辨认和记录活胎数，早死胎数、 晚死胎数、吸收胎数和黄体数，对活胎仔应辨 别性别、称重，测量身长及尾长，仔细检查活 胎仔的外观有无畸形，将每只母鼠的2/3活胎 仔剥去皮肤和内脏，经脱水透吸及茜红素染色 后，检查骨骼畸形，将1/3活胎仔浸入Bouin氏 溶液中固定，供检查内脏畸形。
生殖毒性研究在限定临床研究受试者范围、 降低临床研究受试者和药品上市后使用人群的用 药风险方面发挥重要作用。
精选ppt
4
生殖过程分期
分期
研究内容
检测方法
交配前到怀 孕 怀孕到着床
着床到硬腭 闭合 硬腭闭合到 怀孕末期 出生到断奶
断奶到性成 熟
成年雄性/雌性动物的生殖功能；配子的
发育和成熟；交配行为及生育力
生殖毒性有两个特点：（1）对化学物质的毒性作用 敏感，一定剂量下，其他系统尚未出现损害之前，生殖过 程中的某个环节或功能已经出现障碍；（2）化学物质毒性 作用对其损害更为深远，不仅表现在接触化学物的机体本 身，还可影响后代。
精选ppt
6
第二节 有关生殖毒性的基本概念
畸胎学：从胚胎学和病理学发展出来的一个分支学科， 是研究胚胎发育时期，由各种内外因子引起结构和功 能异常的先天性畸形的科学。
[动物及分组]
至少一种动物，一般为大鼠或小鼠，每组雄性 动物10只，雌性动物至少20只。
精选ppt
9
第三节 一般生殖毒性试验
[给药剂量及途径]
给药组设高、中、低三个剂量；高剂量应能产生 轻微毒性反应，如体重增长缓慢等，但不应出现严 重中毒或死亡。
生殖毒性(医学研究)
医药材料
20
结果分析评价
• 对各项指标的统计分析，对胎儿应以窝为 单位；对亲代的资料，以个体或交配对为 单位，应考虑受影响的窝的比例；每窝受 影响的胎仔的组均百分率，受影响的胎仔 总数比例。评价配子成熟，交配行为，孕 体着床前的发育、着床。
医药材料
21
2 对胚胎-胎儿发育影响的研究
• 目的：检测从着床到硬腭闭合期内对雌性 动物持续染毒下，对受孕动物和胚胎、胎 儿发育的有害影响。
医药材料
27
生殖毒性的评价
生 试验方法原则
殖 毒
受试动物：性成熟大鼠、小鼠或家兔
性 剂量分组:一般设立三个剂量组（至少两个剂量
及 组）和一个对照组
其 染毒途径:动物接触受试物的方法应参照人类实
评 际接触途径
定 动物数:每组雌雄各16到20只，或雌16到20只，
雄8到10只
医药材料
28
生殖毒性的评价
医药材料
15
• 母体毒性表现为：体重增长减缓或体重增 长加快，特别是当激素分泌受干扰时；特 定的靶器官毒性；血清学、临床生化学的 异常；或过度毒性反应。
• 给药途径：要求与人类预期接触和使用的 途径相同，若有动力学资料表明其他途径 的合理性，如表现出相似的体内分布，也 可作为次选途径。
医药材料
16
述 入或着床、胚胎形成、胚胎发育、器官发生 （或称器官形成）、胎仔发育、分娩和哺乳 过程。生殖发育也可称繁殖过程。
医药材料
3
外源化学物对生殖发育的影响
干扰生殖发育的任何环节，并造成损害作用。
概 可以通过对内分泌系统，特别是对性腺的作用，
发生间接的影响。
述 神经系统对内分泌功能也有调节作用，通过下 丘脑-垂体-睾丸轴(下丘脑-垂体-卵巢轴)两条 途径作用于生殖发育过程 。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
• 家兔：
• 常缺乏药代动力学和毒理资料，对一些抗生素和消化道功 能紊乱敏感，临床表现的解释较困难。 • 在胚胎-胎仔发育毒性研究中，优先选用的非啮齿类动物 • 家兔的精液样品可不借助于痛苦性的技术（如电刺激采精） 而获得，可用于精液分析研究。
• 豚鼠：
• 常缺乏药代动力学和毒理资料，对一些抗生素和消化道功 能紊乱敏感，胎仔发育期长，历史背景资料不足。
• 这些药代动力学信息可能来源于非妊娠或非哺乳期动物。
• 在进行结果评价时，可能有必要进一步研究妊娠或哺乳期 动物的药代动力学情况。
• 3、试验系统 • 3.1 实验动物
• 应采用哺乳动物进行生殖毒性试验。
• 在选择动物种属和品系时，应考虑动物的背景资料、实用
性、与人的相关性等。 • 通常选用年轻、性成熟的成年动物，雌性动物未经产。 • 个体动物初始体重不应超出平均体重±20%。
• 3.2 其他试验系统
• 其他试验系统指哺乳动物或非哺乳动物的细胞、组织、器 官，体外或体内培养体。 • 这些系统的试验结果有助于作用机理的分析，但它们缺乏 发育过程的复杂性以及母体与生长机体（胚胎）间动态的 相互变化。 • 尚不能替代目前生殖毒性试验常用的整体动物
给药
• 4.1 剂量选择 • 4.1.1 中药及天然药物
观察指标
试验期间：
• • • • -体征和死亡情况，至少1次/天 -体重和体重变化，至少2次/周 -摄食量，至少1次/周(交配期除外) -交配期间至少每日进行阴道涂片检查，以检查是否对交 配或交配前时间有影响 • -其他毒性研究中已证明有意义的指标 • 计数黄体数，活胎、死胎、吸收胎并计算着床数
终末检查： • -剖检所有亲代动物
• 犬：
• 季节性繁殖，多近亲繁殖，历史背景资料不足。 • 犬的精液样品可不借助于痛苦性的技术（如电刺激采精） 而获得，可用于精液分析研究。
• 非人灵长类动物：
• 与其他种属动物一样，其药代动力学情况与人不同，历史 背景资料不足，常常因为其只数太少而难以进行危险性评 估。更适合用于进行明确生殖毒性物质（该毒性已比较肯 定）特性的试验研究，而不是评估其危险性。
• -保存肉眼观察出现异常的器官，必要时进行组织学检查， 同时保留足够的对照组动物的相应器官以便比较 • -保存所有动物的睾丸、附睾或卵巢、子宫，必要时进行 组织学检查，根据具体情况进行评价 • -建议计数附睾中的精子数并进行精子活力检查
胚胎-胎仔发育毒性试验（II段）
• 动物选择
• 通常采用两种动物：啮齿类动物推荐用大鼠；非啮齿类动 物推荐用家兔。 • 通常大鼠不少于20只/组，家兔不少于12只/组。
动物特点 • 大鼠
• 对性激素敏感； • 不适合用于多巴胺受体激动剂的研究，因其早期妊娠的发 生和维持所依赖的激素主要是催乳素； • 妊娠后期对非甾体抗炎药高度敏感。
• 进行生殖毒性研究通用的较佳
动物种属，首选
• 小鼠：
• 代谢率高，易惊、群体畸形现象（所有种属动物均会出现） 特别明显，胎仔小。 • 进行生殖毒性研究通用的较佳
• 可根据已有的研究资料（药理、急性毒性和长期毒性、药 代动力学研究）或预试验以及受试物的理化性质和给药途 径来进行剂量设计。 • 至少应设三个剂量组。 • 高剂量应出现一些轻微的母体毒性反应，或为最大给药量 /最大耐受量。 • 低剂量应为生殖毒性方面的“未观察到不良反应的剂量水 平（NOAEL）”。
生育力与早期胚胎发育毒性试验
1 • 2 • • • 3 • • 动物选择 至少采用一种动物，推荐用大鼠。不少于20只/性别/组。 给药期 交配前给药期可定为雄性动物4～10周，雌性动物2周； 雄性动物给药期应持续整个交配期直至被处死 雌性动物至少应持续至胚胎着床（妊娠第6～7天）。 动物处理 建议雌雄动物按1:1交配。 雌性动物在妊娠第13～15天处死，雄性动物在交配成功后 处死。
• 4.1.2 化学药物
• 高剂量范围内应该出现一些轻微的母体毒性反应，在大多
数情况下，1g/kg/天为最大给药限量。
• 低剂量应为生殖毒性方面的NOAEL。 • 高剂量与低剂量间根据具体情况可设计1～2个剂量，以观 察可能的剂量反应关系。
• 4.2 给药途径
• 一般情况下，给药途径应与临床拟用途径一致。 • 如果拟用途径有多种，若研究提示不同给药途径的药代动 力学特点（包括分布）类似，建议采用暴露量较高的给药 途径。
• 给药期
• 由胚胎着床到硬腭闭合(即到C阶段末)给药。通常，大鼠 为妊娠第6～15天给药，家兔为妊娠第6～18天给药。
• 动物处理
• 在大约分娩前处死并检查雌性动物，正常情况下，大鼠约 为妊娠第20/21天，家兔约为妊娠第28/29天。检查所有胎 仔的存活和畸形情况。
• 当所用技术方法要求分别检查软组织和骨骼改变时，最好 是每窝分配50%的胎仔进行骨骼检查。
• 1.2 化学药物
• 应采用制备工艺稳定、符合临床研究用质量标准规定的样
品，并注明受试物的名称、来源、批号、含量（或规格）、 保存条件及配制方法等，并附有研制单位的自检报告。 • 所用辅料、溶媒等应标明批号、规格和生产厂家，并符合 试验要求。
• 2、受试物药代动力学研究
• 在开始生殖毒性试验前，掌握一些受试物药代动力学方面 的信息，对于是否应进行动物种属选择、试验设计与给药 方案的调整等有重要提示作用。
观察指标
• 试验期间(母体动物)
• • • • • • -体征和死亡情况，至少1次/天 -体重及体重变化，分娩前至少2次/周 -摄食量，分娩前至少1次/周 -其他毒理研究中已证明有意义的指标 -妊娠期 -分娩
• 终末检查（用于母体，可行时也用于子代)：
• -剖检所有成年动物 • -保存肉眼观察出现异常的器官，必要时进行组织学检查， 同时保留足够的对照组动物相应器官以便比较 • -着床 • -畸形 • -出生时存活的子代 • -出生时死亡的子代 • -子代出生时体重 • -离乳前后的存活率和生长/体重，性成熟程度和生育力， 应说明是否进行了窝仔动物剔除 • -体格发育 • -感觉功能和反射 • -行为
• 动物选择
• 至少采用一种动物，推荐用大鼠，通常不少于20只/组。
• 给药期
• 雌性动物给药期应从胚胎硬腭闭合至哺乳结束，大鼠为妊 娠第15天至离乳（出生后第21天）。 • 为检测可能用于婴幼儿和儿童期药物的不良影响，应选择 特定年龄段子代直接给药，进行相关试验研究。
• 动物处理
• 雌性动物分娩并饲养其子代至离乳，每窝选择雌、雄子代 各1只，饲养至成年，然后进行交配检测其生殖能力。
• 终末检查：
• -剖检所有成年动物
• -保存肉眼观察出现异常的器官，必要时进行组织学检查，
同时保留足够的对照组动物相应器官以便比较 • -计数黄体数，活胎、死胎、吸收胎并计算着床数 • -胎仔体重，胎仔顶臀长 • -胎仔异常（包括外观、内脏、骨骼）
• -胎盘肉眼观察
• 胎仔骨骼检查
围产期毒性试验（III段）
生殖毒性
生殖毒性研究（Reproductive toxicity study） 药物进入临床研究及上市的重要环节。拟用于 人体的药物，应根据受试物拟用适应症和作用 特点等因素考虑进行生殖毒性试验。
在药物开发的过程中，生殖毒性研究的目的是通过动物试验反映受 试物对哺乳动物生殖功能和发育过程的影响，预测其可能产生的对 生殖细胞、受孕、妊娠、分娩、哺乳等亲代生殖机能的不良影响， 以及对子代胚胎-胎儿发育、出生后发育的不良影响。生殖毒性研 究在限定临床研究受试者范围、降低临床研究受试者和药品上市后 使用人群的用药风险方面发挥重要作用。
评价方法:
（1）生育力与早期胚胎发育毒性试验：
对雌雄动物由交配前到交配期直至胚胎着床给药
评价内容包括配子成熟度、交配行为、生育力、胚胎着床前阶段和着 床等。 （2）胚胎-胎仔发育毒性试验： 妊娠动物自胚胎着床至硬腭闭合给药，评价药物对妊娠动物、胚胎及 胎仔发育的影响 评价内容包括妊娠动物较非妊娠雌性动物增强的毒性、胚胎胎仔死亡、 生长改变和结构变化等。 （3）围生期毒性试验： 检测从胚胎着床到幼仔离乳给药对妊娠/哺乳的雌性动物以及胚胎和子 代发育的不良影响 评价内容包括妊娠动物较非妊娠雌性动物增强的毒性、出生前和出生 后子代死亡情况、生长发育的改变以及子代的功能缺陷，包括F1代的行为、 性成熟和生殖功能。
外源化学物对生殖细胞发生、卵细胞受精、 胚胎形成、妊娠、分娩和哺乳过程的损害。
发育毒性： 外源化学物对胚胎发育和出生幼仔发育 的影响。
可将一个完整生命周期过程分成以下几个阶段：
• A. 从交配前到受孕（成年雄性和雌性生殖功能、配子的发育和成熟、 交配行为、受精）。 • B. 从受孕到着床（成年雌性生殖功能、着床前发育、着床）。 • C. 从着床到硬腭闭合（成年雌性生殖功能、胚胎发育、主要器官形 成）。 • D. 从硬腭闭合到妊娠终止（成年雌性生殖功能、胎仔发育和生长、器 官发育和生长）。 • E. 从出生到离乳（成年雌性生殖功能、幼仔对宫外生活的适应性、离 乳前发育和生长）。 • F. 从离乳到性成熟（离乳后发育和生长、独立生活的适应能力、达到 性成熟的情况）。
（二）试验方案
• 对大多数药物而言，三段试验方案（常用的试验方案）通 常比较合适，能够识别有可能发生损害的生殖发育阶段。 • 对于化学药物来说，如果给药剂量达2g/kg而不致死，且
重复给药毒性试验剂量达1g/kg时未出现毒性，可仅进行
单项包括两代的生殖毒性试验，包括两受试物组（0.5 g/kg和1.0 g/kg）与一个对照组。
• 家猪和/或小型猪：
• 群体畸形的背景情况多变,所需的受试物量大，需要较大 饲养空间，历史背景资料不足。
• 白鼬：
• 如果不采用特殊的管理系统，只能季节性繁殖（其成功与 否主要取决于人和动物的相互影响），历史背景资料不足。