非小细胞肺癌T790M基因突变研究进展

·314·中国肺癌杂志2013年6月第16卷第6期Chin J Lung Cancer, June 2013, Vol.16, No.6·综 述·DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2013.06.08非小细胞肺癌T790M 基因突变研究进展李慧 张爽 综述 程颖 审校【摘要】 携带表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR ）基因活性突变的非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC ）晚期患者使用EGFR-受体酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor, TKI ）治疗后具有较好的临床获益，但大部分患者在使用该药治疗10个月后出现耐药现象。

研究发现EGFR 基因20号外显子T790M 基因突变是导致EGFR-TKI 耐药的最主要因素，但其作用机制至今未明。

目前的研究结果显示T790M 基因突变是一个独立的、好的预后因素，但其能否作为EGFR-TKI 的疗效预测因子仍存在争议。

近年来，针对NSCLC 肿瘤中T790M 基因突变的检测技术不断更新，针对T790M 耐药的新的治疗策略也不断涌现。

本文就NSCLC 中T790M 基因突变的耐药机制、临床意义、检测方法及应对策略等方面的最新研究进展进行综述。

【关键词】 肺肿瘤；表皮生长因子受体；T790M ；酪氨酸激酶抑制剂Advanced Research on T790M Mutation in Non-small Cell Lung CancerHui LI, Shuang ZHANG, Ying CHENGDepartment of Thoracic Oncology, Jilin Provincial Cancer Hospital, Changchun 130012, ChinaCorresponding author: Ying CHENG, E-mail: jl.cheng@【Abstract 】 Patients with advanced non-small cell lung cancer (NSCLC) carrying epidermal growth factor receptor (EGFR ) activating mutations benefit from EGFR-tyrosine kinase inhibitor (TKI) treatment, however, most of TKI-treated pa-tients eventually suffer drug resistant after 10-month treatments. Previous studies demonstrated that T790M mutation in exon 20 of EGFR gene would be the essential factor leading to EGFR-TKI resistance, leaving the mechanisms of which elucidative. Current research identified that T790M is an independent, favorable prognostic factor for predicting survival, but whether it is also a predictive biomarker for EGFR-TKI efficacy is still controversial. Up to date, techniques to detect T790M mutation in lung cancer have been greatly improved and the new therapeutic strategies emerged as well. In this review, we summarized the newly updated data about T790M mutation in terms of its mechanisms involved in EGFR-TKI resistant, clinical value, ad-vanced detection assays and ongoing strategies against the mutation subtype.【Key words 】 Lung neoplasms; EGFR; T790M; TKIThis study was supported by the grant from Science Foundation of Jilin Province (to Ying CHENG)(No.20110452).本课题受吉林省自然科学基金（No.20110452）资助作者单位：130012 长春，吉林省肿瘤医院胸部肿瘤内一科（通讯作者：程颖，E-mail: jl.cheng@ ）近年来，非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC ）治疗领域里程碑式的改变是针对表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR ）基因突变阳性的晚期患者采用EGFR-酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine ki-nase inhibitor, TKI ）进行治疗。

治疗获益的患者表现为无疾病进展期（progression-free survival, PFS ）延长，客观反映率（objective response rate, ORR ）提高，生活质量得到极大改善。

尽管对初始EGFR-TKI 治疗应答良好，但大部分患者在平均治疗10个月后会出现对此类药物的耐药。

早期的研究[1,2]发现，使用EGFR-TKI 治疗后进展的肿瘤中，50%存在EGFR 基因20号外显子第790位点的突变，即T790M 基因突变。

转染携带T790M 基因突变的质粒的肿瘤细胞对EGFR-TKI 的耐药性明显增加。

随后更多的研究[3]结果也验证了肿瘤组织中T790M 基因突变是导致EGFR-TKI 耐药最主要的机制。

随着临床研究的拓展和检测技术的更新，研究者发现使用EGFR-TKI 前的NSCLC 中也存在一定比例的de novo T790M 基因突变[4,5]，由此引发了T790M 基因突变是获得性模式还是选择性模式的争论。

此外，T790M 基因突变是否与药物疗效预测和生存预后相关以及是否是EGFR-TKI 的禁忌症等问题都还没有定论。

本文总结近年来有关T790M 和EGFR-TKI 耐药方面的重要研究结果，阐述对T790M 基因突变的共识和争议之处。

1 T790M 基因突变的发现及耐药机制·315·中国肺癌杂志2013年6月第16卷第6期Chin J Lung Cancer, June 2013, Vol.16, No.61.1 T790M基因突变的发现 2005年Kobayashi等[1]对1例71岁、男性、应用EGFR-TKI治疗后疾病进展的NSCLC患者进行二次活检时发现，该肿瘤组织中除了治疗前检测出来的EGFR第19号外显子缺失之外（19Del），还增加了20号外显子T790M基因突变。

该患者既往接受过二线吉非替尼治疗，达到完全缓解（complete response, CR）28个月后出现疾病进展。

研究人员将T790M基因突变质粒转染肿瘤细胞后，该肿瘤细胞开始对吉非替尼产生耐药。

同年Pao等[2]对6例接受TKI治疗后疾病进展的肿瘤组织/胸水标本再次进行EGFR基因突变检测，相比治疗前，3例标本（50%）新增加了T790M基因突变。

随后对155例治疗前肿瘤标本的检测结果证实所有标本都不存在de novo T790M基因突变。

体外试验证实同时携带EGFR基因21号外显子L858R基因突变和T790M基因突变的肿瘤细胞对TKI的耐药性是单独携带L858R基因突变肿瘤细胞的100倍。

基于以上两个重要的研究结果，T790M基因突变被一致认为是导致EGFR-TKI继发性耐药的主要原因，它也是第一个被发现的与耐药相关的基因。

随后更多的报道证明，不同种族或不同地域EGFR-TKI耐药患者的肿瘤组织中都发现有新增加的T790M基因突变。

Chen等[6]采用ARMS法检测29例中国人NSCLC（86%为腺癌）后发现，二次活检肿瘤组织中T790M基因突变率为48%；Kosaka等[7-9]报道日本患者T790M基因突变率为50%-70%；Costa等[10,11]报道美国患者T790M基因突变率为44%-86%。

1.2T790M基因突变导致耐药的可能机制Lynch等在2004年发现，NSCLC患者酪氨酸激酶区域存在EGFR敏感突变（19Del和L858R），EGFR-TKI可阻断三磷酸腺苷（adenosinetriphosphate, ATP）结合到细胞内酪氨酸激酶结构域，因此抑制受体自身磷酸化并导致下游的信号转导受阻，引起受体内化障碍。

随后大量的论文和综述报道了EGFR-TKI对NSCLC治疗的疗效。

2009年IPASS临床试验证实EGFR突变的患者可以从EGFR-TKI治疗中获益，尽管相比标准化疗，EGFR-TKI治疗患者的中位总生存期没有明显延长，但客观反应率提高，PFS延长，患者生活质量明显改善。

随后F-SIGNAL、WJTOG3405、NEJGSG002、OPTIMAL和EURTAC等大规模、多中心、随机对照、前瞻性临床试验都证实了IPASS的结论[12]。

2007年Sharma等[13]详细分析了EGFR的药物敏感基因和药物耐药基因突变，前者主要包括19号外显子缺失（19Del）和21号外显子第858氨基酸位点突变（L858R），后者主要指20号外显子中第790氨基酸位点由苏氨酸（T）突变为甲硫氨酸（G），即T790M，基因水平表现为ACG突变为ATG。

在亚裔、女性、不吸烟、腺癌患者中EGFR基因突变率高，19Del和L858R约占突变总数的90%，T790M约为2.5%。

目前研究发现T790M突变总是与其它类型EGFR 基因突变共存，主要是19Del或L858R，目前未见任何报道显示T790M突变单独存在于肺癌组织中。

由于甲硫氨酸比苏氨酸空间占位大，因此形成空间位阻，改变了EGFR激酶区ATP的亲和性，导致EGFR-TKI类小分子药物不能有效阻断EGFR活化信号，从而失去对肿瘤细胞杀伤作用[1,2]。