生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书

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尿酸测定尿酸酶法-过氧化物酶法(精)

尿酸测定尿酸酶法-过氧化物酶法(精)
空白管 蒸馏水(微升) 60 标准(微升)
标本(微升) 工作液(微升) 3000 3000
标准管 60
标本管
60 3000
混匀,置37 ℃水浴10min,比色(λ=546nm) 读取各管A值。
计算



尿酸含量=A U/A s × 357umol/L 参考区间: 男性:200-420umol/L 女性:140-340umol/L 尿:1.5-4.5mmol/L
注意事项



1、试剂和标本量可因仪器要求不同按比例 增减。 2、标本中尿酸的含量大于1190umol/L时, 将标本用生理盐水1:1稀释后再测定,结 果乘以2。 3、本试剂中含有又叠氮钠,请勿吸入并避 免与皮肤,粘膜接触。
Байду номын сангаас
临床意义



2. 低尿酸血症 ①尿酸生成过少:见于黄嘌呤尿症(由于先天性黄嘌呤 氧化酶缺乏,使尿酸不能正常生成,故患者血与尿酸水 平很低,而排出大量黄嘌呤和次黄嘌呤),服用别嘌呤 醇类药物(使嘌呤氧化酶抑制或假性反馈抑制嘌呤生物 合成,从而阻断尿酸生成,出现低尿酸血症,伴有尿中 尿酸排出减少和黄嘌呤排出增多)。 ②肾排出尿酸过多:见于Fanconi征(先天性肾小管疾 患,使肾小球滤液中尿酸不能被重吸收)、大剂量应用 阿司匹林、可的松、和ACTH(可抑制肾小管对尿酸的 重吸收和增加肾小管的分泌,使尿酸的清除增加)。
尿酸测定尿酸酶法-过氧化物酶法
实验原理
原理: 尿酸 + O2 + H2O 尿囊素 + H2O2 2H2O2 + 4-AAP + 3,5DHB S INDAMINE + 3H2O DHBS:3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠 INDAMINE:吲达胺

尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程UA-SOP

尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程UA-SOP

尿酸测定试剂盒(尿酸酶法)标准化操作规程1 目的规范实验室操作,保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。

2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。

3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或尿液中尿酸的含量。

4 检验方法本试剂盒采用酶法测定尿酸的含量。

5 检验原理样品中的尿酸在试剂中尿酸氧化酶(GOD)的催化作用下氧化生成尿酸酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶(POD)的催化下与苯胺类色原物质和4-氨基安替比林作用产生水和醌亚胺色素,醌亚胺色素的生成量与样品中尿酸的含量成正比,通过测定特定波长处反应最终生成的色素量,可以计算出样品中尿酸的浓度。

尿酸+ H2O + O2−−−→−GOD尿酸酸+ H2O2H 2O2+ 4-氨基安替比林 + 苯胺类色原物质−−−→−POD醌亚胺色素 + 水6 标本要求6.1 血清样本应及时离心分离,不得使用溶血或被污染的样本。

6.2 建议尿液样本作pH测定,若pH<8.0,可用NaOH调至pH=8.0。

尿液样本测定前需用水稀释10倍。

6.3 血清、尿液样本无微生物污染在2℃~8℃可稳定3天,冷冻保存可稳定6个月。

7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司尿酸试剂盒(酶法)7.27.3试剂的稳定性与贮存7.3.1试剂在2℃~8℃条件下,干燥、避光、密封贮存,有效期为18个月。

7.3.2试剂开封后在2℃~8℃可稳定30天。

7.4试剂的变质指示若试剂混浊,或以水为空白在520 nm处吸光度值大于0.100A时,则不能使用。

8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白吸光度:A≤0.100。

8.2.1 分析灵敏度:测试1mmol/L被测物时,吸光度变化△A>0.10。

8.2.3 线性范围:0.01mmol/L~1.5mmol/L;线性相关系数r≥0.9900;[0.01,0.3] mmol/L区间内,线性绝对偏差应不超过±0.06mmol/L;(0.3,1.5] mmol/L 区间内,相对偏差不超过±15%。

酶法检测尿酸(UA)检测标准操作程序

酶法检测尿酸(UA)检测标准操作程序

1.检测原理尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。

在过氧化物酶(POD)的存在下,过氧化氢氧化4-氨基安替比林和2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸(TBHBA),产生红色醌亚胺(Trinder反应产物),引起特定波长处吸收光度的上升,通过比色测定出样品中的UA的浓度。

2. 样本类型及处理方法3.试剂注意事项:开启所有试剂(包括校准品、标准品、质控品)需注明日期及签名。

每个试剂容器都需贴上写有以下内容的标签:启用日期、截止日期。

开启时应检查试剂是否变色,是否肉眼可见的细菌生长迹象、浊度、沉淀反应等,这些表示试剂已经变质或超过保质期。

4.仪器设备备注:“溯源方式”栏填写送较、自校、送检、自检、比对等。

5.质量控制5.1使用的质控品5.2质控周期5.2.1每日均需运行一次质控。

5.2.2更试剂均需运行一次质控。

5.2.3更换批次试剂均需运行一次质控。

5.3变异系数CV<10%5.4分析方法±2SD双水平5.5失控处理:对质控失控需查找原因并进行分析。

5.5.1查找操作过程是否按照SOP文件进行。

5.5.2查看试剂是否失效。

5.5.3查看质控品是否失效。

5.5.4检查仪器是否故障。

6.操作步骤6.1开机前准备:6.1.1清洗液盒:检查系统清洗液(碱性清洗液)是否充足,不足添加。

6.1.2 W1清洗液:检查W1清洗液(碱性清洗液)是否充足,不足添加。

6.1.3 W2清洗液:检查W2清洗液(碱性清洗液)是否充足,不足添加。

6.1.4 45号位置:检查45号位置清洗液(抗菌无磷清洗液)是否充足,不足添加。

6.2选用试剂:合肥伊普若康生物工程有限公司。

6.3试剂添加:从冷藏环境中取出的试剂盒内R1和R2,添加到相应位置,添加时注意核对试剂仓位置、项目、试剂批号等。

添加完成后在软件主界面上点击“试剂信息”键,进入试剂信息界面。

点击“手动试剂水平扫描”进入试剂量扫描界面。

选择“扫描选定的登记项目”。

选择要扫描的试剂“UA”。

尿酸操作程序

尿酸操作程序

尿酸操作程序1.目的规范尿酸(UA )检测试验,确保检测结果准确性和重复性。

2.范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。

3.术语4.测定原理4.1测定方法:尿酸酶-过氧化物酶偶联(Uricse-PAP )法。

4. 2 测定原理:尿酸酶 过氧化物酶 尿酸+O 2+H 2O 尿囊素+CO 2+H 2O 2 H 2O 2+4-AAP+ESPAS 醌亚胺(红色)+ H 2OESPAS:N-乙基-N-(3-磺丙基)-间-茴香胺5.标本5.1标本种类:新鲜无溶血血清、肝素抗凝血浆;留取24小时尿液。

血清尿酸在0~4℃下稳定3~5天,在冰冻条件下稳定6个月。

5.2标本采集:见生化标本采集程序。

6.试剂6.1试剂来源:科华试剂。

6.1.1组成包装规格:R1 70ml×2 R2 70ml×16.1.2试剂准备试剂为液体双试剂,开瓶即可使用,用后及时置于2~8℃避光保存。

6.1.3试剂稳定性原装试剂在2~8℃避光保存,稳定期12个月。

试剂开瓶载机2~8℃稳定30天。

7.仪器参数设定OLYMPUS AU2700参数设定:科华试剂仪器参数设定具体参见试剂厂家提供的相应仪器参数说明书。

8.校准:具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件:8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。

8.1.2仪器经过大保养后。

8.1.3挪动仪器的安装地点。

8.1.4更换试剂批号。

8.1.5室内质控失控。

8.2 AU2700科华试剂系统的校准:8.2.1 准备:申能生化校准物.8.2.2 保存和稳定性:原校准品在2~8℃保存一个月时间,-20℃稳定使用至有效期8.2.3保存位置:低温冰箱-20℃。

8.2.4操作步骤:蓝色样本架的1号位置放蒸馏水;黄色样本架的8号位置放申能复合多项定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。

血清尿酸UA测定

血清尿酸UA测定

血清尿酸UA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2 实验原理尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。

尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2在过氧化物酶存在的情况下,4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。

2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比,可通过测定吸光度的上升来获得。

3 标本:3.1 病人准备:使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清.3.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆,尿液。

3.3 标本存放:血清、血浆的稳定性:20~25℃保存可稳定3天;4~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定6个月。

对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测,结果乘11后报告。

3.4 标本运输:常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。

4 实验材料4.1 试剂:上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014)4.1.1 试剂组成R 1 磷酸盐缓冲液:0.05 mol/L,pH 7.8;TOOS:7 mmol/L;脂肪醇聚乙二醇醚:4.8%;抗坏血酸盐氧化酶(EC 1.10.3.3;胡瓜)≥83.5 μkat/L(25℃)R 2 磷酸盐缓冲液:0.1 mol/L,pH 7.8;亚铁氰化钾(Ⅱ):0.3 mmol/L;4-氨基比林≥3mmol/L;尿酸酶(EC1.7.3.3;原生节杆菌)≥83.4 μkat/L(25℃);过氧化物酶(POD)(EC 1.11.1.7;辣根)≥50μkat/L(25℃)4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:2-8℃下的保存期限:见试剂标签上的有效期。

机上稳定期: 4周4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。

尿酸(UA)测定标准操作程序SOP文件

尿酸(UA)测定标准操作程序SOP文件
3标本
3.1血液:血清及肝素/EDTA抗凝血浆,处理方法见标本准备。
稳定性:2-8℃5天
-20℃6个月
收集后的标本应该尽快检测,或者与细胞进行分离。
3.2尿液:新鲜标本、不要冷冻、加入NaOH后可以
稳定性:20-25℃4天
4试剂
4.1试剂
来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末
S.VOLUME(DECREASE) [14/5/140]
SENSITIVITY LIMIT(LOW) [ 1 ]
S.VOLUME(INCREASE) [ 10 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ 1.9 ]
R.VOLUME(R1) [ 180 ]
S1 ABS(LOW) [ -32000 ]
R.VOLUME(R2) [ 0 ]
S1 ABS(HIGH) [ 32000 ]
R.VOLUME(R3) [ 36 ]
10.3溶血:溶血指数达到750时不会有明显干扰。(血红素浓度约为750mg/dl)
10.4脂血:乳糜指数达到1000明显干扰。(甘油三酯浓度约为2000mg/dl)
10.5抗坏血酸浓度低于30mg/dl时不会有明显干扰。
11临床意义
11.1血清尿酸测定对痛风诊断最有帮助,痛风患者血清中尿酸升高。
11.2在核酸代谢增加时,如白血病、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症等,血清尿酸值常升高。
7.2.2 24小时尿:200-1000mg/24h(1200-5900umol/l)
7.2.3平常饮食:250-750mg/24h
7.2.4低嘌呤饮食:
男性:<480mg/24h

尿酸(UA) 酶比色法

尿酸(UA) 酶比色法

目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理反应生成的醌亚胺在505nm波长有最大吸收,所产生的颜色强度与血清中尿酸含量成正比,再通过与同样处理的尿酸标准溶液比较,经过计算可求出血清中尿酸的含量。

试剂中的抗坏血酸氧化酶可排除抗坏血酸对结果的影响,测定尿酸所用的酶反应如下:尿酸酶尿酸+O2 +2H2O ------------ 尿囊素+CO2 +2H2O2过氧化物酶H2O2+4-氨基安替比林+2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸---------------醌亚胺+H2O2.标本采集与处理2.1 受检者的准备:病人空腹12h,不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂:血浆使用0.1mg/ml肝素作为抗凝剂。

2.4 标本处理:血标本室温放置30min~45min后离心分离血清或血浆,在两小时内检测完毕;如两小时内不能检测完毕,将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3.试剂3.1 试剂:本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司UA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:尿酸标准液:590umol/L3.2 尿酸校准血清:使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

尿酸测定标准操作规程

尿酸测定标准操作规程

尿酸测定标准操作规程1.检验原理:(尿酸氧化酶-过氧化物酶偶联法)尿酸在尿素酶的催化下,氧化生成尿囊素和过氧化氢。

过氧化物酶(POD )在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧,使色原性氧受体4-氨基安替比林(4-AA )和3,5-二氯-2-羟苯磺酸钠(DHBS )去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder 反应。

红色醌类化合物的生成量与尿酸含量成正比。

尿酸+222222CO O H O H ++−−→−尿囊素尿酸酶O H DHBS AA O H POD 222442+−−→−+-+红色醌类物质2.试剂主要组成成分3.样本要求:新鲜无溶血血清。

在22~25℃保存8小时,2~8℃保48小时,-20℃保存7天,样本不可反复冻融!4.检验方法;仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5.参考范围:6.检验结果的解释:6.1在给定的样本/试剂比例和条件下测定时,本试剂线性范围可达1500umol/L。

样本含量超出线性范围时,建议用0.9%(W/V)的氯化钠溶液稀释样本,最大稀释比例为5.6.2.单位换算:mg/dL=umol/L×0.01687.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊,或以水空白在405nm处吸光度大于0.800时不能使用。

8.试剂性能指标8.1试剂外观:R1:无色或淡红色透明液体,无悬浮物及沉淀。

R2:无色透明液体,无悬浮物及沉淀。

8.2装量:不低于标识值。

8.3试剂空白吸光度:在500nm处,光径1cm时,空白吸光度A≤0.2008.4线性区间:试剂的线性区间为[30-1500]umol/L,在此线性区间内:a)线性相关系数r应不小于0.9900;b)[30-50]umol/L区间内,线性绝对偏差不超过±15umol/L;[150-1500]umol/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。

尿酸测定SOP_UA临床意义_检验科生化项目SOP

尿酸测定SOP_UA临床意义_检验科生化项目SOP
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
试剂船1~3、7孔为缓冲液,稳定剂,液体;8孔为尿酸酶8IU/Ml,稳定剂,液体。
3.1.2试剂准备
直接使用。
3.1.3试剂保存
试剂2~8℃保存,有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控品。
3.3校准品
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。
5校准程序
5.1校准品准备和储存
每瓶加2.0ml蒸馏水复融,轻轻旋转摇匀,室温放置30min,即可使用。
降低:见于黄嘌呤尿和剥脱性皮炎,亦可见用别嘌呤醇治疗后。
10参考文献
[1]西门子医学诊断产品(上海)有限公司尿酸(URCA)测定试剂说明书。
[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006:471~473。
编写:审核:批准:
7性能参数
本法线性范围为0~1190umol/L,对于超过测定线性范围的结果,用净化水对标本进行稀释,输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
血清:女性155~357umol/L
男性208~428umol/L
尿液:0.89~5.89umol/24小时。
9临床意义
增高:多见于痛风,可增至387~595µmol/L。核酸代谢增强的白血病、多发性骨髓瘤、红细胞增多症、溶血性贫血以及恶性贫血治疗期尿酸也可增高。在肾功能减退时,一般伴有血清尿酸增高,但肾外因素影响较多,故较少作为肾功能指标。娠妊毒血症、高乳酸血症、氯仿中毒、四氯化碳中毒及铅中毒及服用富含核酸的食物等,均可使血清尿酸升高。吃富含嘌呤的食物如动物肝、肾、胰、贝类等,可因外源性嘌呤增加而致尿酸升高。

检验科生化尿酸测定的标准操作规程

检验科生化尿酸测定的标准操作规程

尿酸测定的标准操作规程【目的】体外检测血清中尿酸(UA )的含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ,室负责人监督落实。

2.本SOP 的改动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ,不饮酒24h 后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外,对于体检者,采血的季节都应做相关记录,因为样本中各项目的含量有季节性变动,为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布,会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟,一般从肘静脉取血,使用止血带的时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪,低速离心机一、检测原理本试剂采用改良Trinder ’s 方法,其反应为:22222O H CO 尿囊素尿酸酶O H O 尿酸++−−−→−++O H 醌亚胺色素过氧化物酶TBHBA AAP O H 222+−−−−−→−++式中 AAP = 4-氨基安替比林TBHBA = 3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸在上述反应中,红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比,通过可在520nm 波长处测定吸光度的变化值,从而计算出尿酸的浓度。

试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素的干扰。

一、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司UREA试剂盒,为液体双试剂,各组分如下:试剂1(R1)过氧化物酶 300U/L3-羟基-2,4,6-三溴苯甲酸 2.5mmol/L亚铁氰化钾 0.05mmol/L磷酸盐缓冲液 150mmol/L4-氨基安替比林0.7mmol/L含非反应性填充物及稳定剂试剂2(R2)磷酸盐缓冲液 150mmol/L尿酸酶 500U/L2.校准要求2.1校准品:使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清(货号:4490050/4590050)对测定进行校准。

UA 文档,尿酸测定试剂盒(UA)检测标准操作规程

UA 文档,尿酸测定试剂盒(UA)检测标准操作规程

过氧化物酶抗坏血酸氧化酶尿酸酶 1、方法依据:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司尿酸(UA)测定试剂盒(尿酸酶-过氧化物酶法)测定方法2、适用范围:适用于人血清、血浆或尿液尿酸(UA)的测定。

3、试剂仪器:3.1 试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。

3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃~8℃有效期为一年。

试剂开瓶后在2℃~8℃应避光保存可稳定2周。

试剂不可冰冻。

3.3 仪器:迈瑞BS-2000M 全自动生化分析仪. 4、操作程序4.1方法原理首先抗血酸氧化酶消除样品中抗坏血酸的影响,然后样品中的尿酸在尿酸酶和过氧化物酶的作用下生成醌系色素,通过测定反应引起的吸光度的变化可求得尿酸的含量。

抗坏血酸+ O 2脱氢抗坏血酸+ H 2O尿酸 + 2H 2O + O 2 尿囊素 + CO 2 + H 2O 2TOOS + 4-AAP +2H 2O 2 + H + 醌系色素+ 4H 2O4.2样本要求血清、肝素或EDTA 抗凝血浆、尿液。

不可使用已被污染的样本。

对尿液用蒸馏水作1+10稀释后检测,结果乘11后报告。

4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M 全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。

4.3.2 校准:4.3.2.1 标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱中取出,复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2 校准程序:首次使用校准。

当有以下情况时需重新校准:1)换试剂批号或出现质控漂移时;2)当仪器做完保养后;3)仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行校准,校准通过后进行检测。

4.3.2.3 质控:在标本开始之前做质控,质控通过后方能进行标本的检测。

4.3.3 测试基本参数4.4参考范围血清:男性 202~416µmol/L女性 142~340µmol/L尿液:1.5~4.5µmol/L /24h(注:各实验室应有自己的参考范围)4.5 方法评价线性范围:20.8~1500µmol/L。

尿酸检测作业指导书

尿酸检测作业指导书

尿酸检测作业指导书1 检验目的规范尿酸(UA)检测试验,确保检测结果准确性和重复性。

2 测定方法尿酸酶-过氧化物酶法。

3 检测原理尿酸(UA)在尿酸酶的作用下,生成过氧化氢。

在过氧化物酶(POD)的作用下,过氧化氢使ESBmT和4-氨基安替比林氧化缩合产生紫红色色素,通过测定色素的吸光度,求出尿酸的含量。

尿酸酶尿酸+ 2H2O+2O2 尿囊素+CO2+2H2过氧化物酶2H2O2+4-氨基安替比林+ESBmT 紫红色色素+4H2O4 样本血清、肝素、EDTA、草酸盐及氟化物抗凝血浆,处理方法见生化标本采集程序。

稳定性:2~8℃稳定7天;室温可稳定3天。

5 仪器和试剂5.1 仪器:美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。

5.2 试剂:由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂(详见试剂说明书),超过失效期的试剂不能使用。

5.3 校准物:Rodan混合校准品,符合WHO标准,贮存、准备严格遵照其说明书。

5.4 质控物:Rodan正常值及病理值质控品,符合WHO 标准,贮存、准备严格遵照说明书。

6 校准6.1 仪器校准:每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。

6.2 项目校准:试剂盒在仪器上放置稳定期后;试剂批号更换后;由质控结果随时决定。

7 操作步骤上机操作,操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。

8 参考范围150~430µmol/L。

9 警告/危急值未规定。

10 性能指标10.1 线形上限:1487µmol/L。

10.2 精密度:≤8%。

10.3 准确度:不准确度≤10%。

11 干扰因素及变异的潜在来源11.1脂血对本法有干扰作用。

11.2抗坏血酸(0.3mmol/L),血红蛋白(1g/L)及胆红素(15mg/L)均不干扰。

12 临床意义尿酸测定主要用于各种原因引起的高尿酸血症,以及由此导致的痛风症。

尿酸项目检测标准操作规程

尿酸项目检测标准操作规程
7.2包装规格
R1:2×65mL+R2:1×70mL
7.3主要组成成分
试剂
成分
终浓度
试剂1
哌嗪-1,4-双(2-乙磺酸)
0.1mol/L
过氧化物酶(POD)
300U/L
亚铁氰化钾
20ummol/L
N-乙基-N-(2-羟基-3-丙磺基)-3-甲基苯胺
0.5mmol/L
维生素C氧化酶
1000U/L
试剂2
4.2降低
见于恶性贫血、使用阿司匹林、先天性黄嘌呤氧化酶和嘌呤核苷磷酸化酶缺乏等。
5.标本采集及干扰因素
5.1标本要求
空腹采集不抗凝静脉血2~3ml。
5.2标本保存
室温保存,及时送检。血清室温保存可稳定3d,2-8℃保存可稳定7d,-20℃保存可稳定6个月。尿液中的尿酸在室温下可稳定3d。
5.3注意事项
12.2尿酸测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一,临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
线性范围:在(18-1190)umol/L范围内:a)线性相关系数(r)应>0.995;b)(18-450)umol/L范围内,线性偏差应≦45umol/L;(450-1190)umol/L范围内,线性偏差应该≦10.0%。
9.4使用方法
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温,轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
9.5质控结果判断
利用Westgard多规则质控方法(12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
男:208-428umol/l

UA 血清 项目操作手册

UA 血清 项目操作手册

SOP标准操作程序UA 尿酸(货号:OSR6198,OSR6298)一、目的:规范尿酸测定的操作程序,确保尿酸测定的结果准确二、适用范围:在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人血清中的尿酸(UA)三、临床意义尿酸是人体内嘌呤分解代谢的主要产物。

绝大多数尿酸在肝脏中形成,通过肾脏排泄,体内尿酸库由合成和排泄之间的平衡决定。

高尿酸血症可以分为原发性高尿酸血症和继发性高尿酸血症,包括生成过量或排泄减少。

原发性高尿酸血症也称作特发性或者家族性高尿酸血症。

在大多数病例中,肾小管分泌尿酸减少引起尿酸水平升高。

大约 1% 的原发性高尿酸血症患者在嘌呤代谢中存在酶缺陷,因而导致尿酸生成过多。

原发性高尿酸血症与痛风、Lesch-Nyhan 综合征,Kelley Seegmiller 综合征和磷酸核糖基焦磷酸盐合酶活性升高有关。

继发性高尿酸血症可能由营养型嘌呤摄取增加引起,伴有尿液中尿酸排泄增多。

继发性高尿酸血症与许多情况有关,这些情况包括肾功能不全,骨髓增生性疾病,溶血性疾病,牛皮癣、真性红细胞增多症、I 型糖原贮积病,酒精摄入过多,铅中毒,高嘌呤饮食,禁食,饥饿和化疗。

低尿酸血症可能由于尿酸产生减少引起,例如在遗传性黄嘌呤尿症,遗传性嘌呤核苷磷酸化酶缺乏和别嘌呤醇法治疗中。

低尿酸血症可能由于肾脏尿酸排泄增多引起,这种情况可能出现于恶性疾病,AIDS,Fanconi 综合征,糖尿病,严重烧伤和嗜酸性白细胞增多综合征。

此外,使用促尿酸排泄药物治疗和食入 X 光造影剂也会引发低尿酸血症。

定量测定尿酸的排泄有助于确定高尿酸血症的治疗方案,确认患者是应当使用促尿酸排泄药治疗以增加肾脏排泄,还是应当使用别嘌呤醇治疗以抑制嘌呤合成。

四、方法原理尿酸被尿酸酶转化为尿囊素和过氧化氢。

通过 Trinder 反应测定 H2O2。

在过氧化物酶 (POD) 的作用下,所形成的 H2O2 与 4-氨基比林和 N,N-二(4-磺丁基)- 3,5-二甲苯胺二钠盐 (MADB) 以及4-氨基比林发生反应,生成发色团,该物质可通过双色分析仪在 660/800nm 处测定。

尿酸(UA)测定的标准操作程序

尿酸(UA)测定的标准操作程序

尿酸(UA )测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆及尿液中尿酸(UA )测定。

【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。

【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。

【方法学原理】【方法】使用TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)的酶比色测定法。

【原理】尿酸酶氧化尿酸产生过氧化氢和尿囊素。

在过氧化物酶存在下,过氧化氢氧化4-氨基安替比林和TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸),产生红色醌亚胺(Trinder 反应产物)。

尿酸酶尿酸 + H 2O + O 2 尿囊素 + CO 2 + H 2O 2过氧化物酶TBHBA + 4-氨基安替比林 + 2H 2O 2 醌亚胺 + 3 H 2O【试剂】在测定时的各组分和浓度试剂1(R1):磷酸盐缓冲液 pH 7.0100 mmol/L TBHBA (2,4,6-三溴-3-羟基苯甲酸)抗坏血酸氧化酶 1 mmol/L 1KU/L试剂2(R2):磷酸盐缓冲液 pH 7.0 100 mmol/L4-氨基安替比林0.3 mmol/L铁氰化钾10 mol/L过氧化物酶(POD)≥1000 U/L尿酸酶≥2000 U/L试剂稳定性与贮存试剂和标准品避光保存于2-8℃,若无污染,可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

当520 nm处的试剂空白吸光度小于0.5时,试剂可正常使用。

以试剂起始的反应试剂为即用式。

以样品起始的反应混合“试剂1”4份+“试剂2”1份(例如“试剂1”20 ml +“试剂2”5 ml)成为单试剂(R)单试剂稳定性:15-25℃保存可稳定2周2-8℃保存可稳定3个月单试剂须避光保存。

【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本,适用标本为血清或肝素抗凝血浆(肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l),不可从正在静脉滴注手臂上采血,上机标本不能有凝块,样品采集后2天内离心标本,分离血清,血清或血浆标本室温保存4天,冷藏7天,冷冻保存6个月。

尿酸(UA)检测标准操作规程

尿酸(UA)检测标准操作规程

1、方法依据:
深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司尿酸测定方法
2、适用范围
适用于尿酸的测定
3、试剂仪器
试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒
未开启的试剂盒避光保存于2℃—8℃有效期一年。

试剂不可以冰冻。

4、操作程序
方法原理
抗坏血酸氧化酶
抗坏血酸 + O2————→脱氧抗坏血酸+ H2O
尿酸酶
尿酸 + O2 + 2 H2O ————→尿囊素 + CO2 + H2O2
过氧化物酶
2H2O2 + 4-AAP + TOOS+H+ —————→醌系色素 + 4 H2O
样本要求
新鲜血清或肝素血浆,样本收集后应尽快测定,必须避光保存,避免使用溶血样本。

上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-220全自
动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2校准“
4.3.2.1 标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱取出,复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2校准程序:每30天需要定标一次。

当有以下情况时需重新定标: 1)换试剂批号或出现质控漂移时;
2)当仪器做完保养后;
3)仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行定标,定标通过后进行检测。

血清尿酸UA测定

血清尿酸UA测定

血清尿酸UA测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。

2 实验原理尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。

尿酸+2H2O+O2尿酸酶尿囊素+ CO2 + H2O2在过氧化物酶存在的情况下,4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。

2H2O2+H++TOOSa+4-氨基比林过氧化物酶醌二亚胺+4 H2O醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比,可通过测定吸光度的上升来获得。

3 标本:3.1 病人准备:使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h 分离血清.3.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆,尿液。

3.3 标本存放:血清、血浆的稳定性:20~25℃保存可稳定3天;4~8℃保存可稳定7天;-20℃保存可稳定6个月。

对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测,结果乘11后报告。

3.4 标本运输:常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准:细菌污染的标本。

4 实验材料4.1 试剂:上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056YZB/GER 5724-2014)4.1.1 试剂组成R 1 磷酸盐缓冲液:0.05 mol/L,pH 7.8;TOOS:7 mmol/L;脂肪醇聚乙二醇醚:4.8%;抗坏血酸盐氧化酶(EC 1.10.3.3;胡瓜)≥83.5 μkat/L(25℃)R 2 磷酸盐缓冲液:0.1 mol/L,pH 7.8;亚铁氰化钾(Ⅱ):0.3 mmol/L;4-氨基比林≥3mmol/L;尿酸酶(EC1.7.3.3;原生节杆菌)≥83.4 μkat/L(25℃);过氧化物酶(POD)(EC 1.11.1.7;辣根)≥50μkat/L(25℃)4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:2-8℃下的保存期限:见试剂标签上的有效期。

机上稳定期: 4周4.1.4 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。

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生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书
1、前言
试验名称:尿酸测定,英文名称:UA,方法:氧化酶法。

本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室,目的是指导工作人员正确的在科华KHB-450全自动生化分析仪上测定血清、血浆、样本中的尿酸浓度,以保证测定结果的准确可靠。

尿酸是嘌呤、核酸的代谢产物,因此,尿酸水平异常可作为上述物质代谢异常的指征,高尿酸血症可见于:肾功能障碍、痛风、白血病、红细胞增多症、动肪粥样硬化、糖尿病、甲状腺机能减退、或其他遗传疾病,尿酸水平低可见于威乐逊氏病。

2、测定原理
本试验采用改良的Trinder氏方法,其反应原理:
尿酸+O2+H2O尿酸酶尿囊素+CO2+H2O2
H2O2+AAP+TBHBA过氧化物酶醌亚胺色素+H2O
上式中AAP为4-氨基安替比林
TBHBA为3-羟基-2,4,6三溴甲酸
在上述反应中,红色醌亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比,通过在520nm波长处测定吸光度的变化值,从而计算出尿酸的浓度,试剂中亚铁氰化钾可抑制样本中胆红素
的干扰。

3、试剂
试剂生产商:长海科华生物工程股份有限公司。

剂型:液体双试剂。

包装量:R1:4*40ml R2:4*20ml
注册号:沪食药监械(准)字2010第2400028号。

生产许可证号:沪药管械生产许20030916号。

基本成份:
试剂1:
过氧化物酶300u/l
3-羟基-2,4,6三溴甲酸 2.5mmol/l
亚铁氰化钾0.05mmol/l
磷酸盐缓冲液150mmol/l
4-氨基安替比林0.7mmol/l
含非反应性填充物及稳定剂
试剂2:
磷酸盐缓冲液150mmol/l
尿酸酶500u/l
储存条件和有效期:试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。

启用后2―10℃可稳定14天,若试剂混浊,或空白在520nm 下吸光度值高于0.4A时,则不能使用。

4、标准品:使用试剂盒附带标准品
5、质控品:
生产商:英国Randox公司。

剂型:干粉试剂,用5ml去离子水复溶,完全溶解30分钟后使用。

保存条件:未溶解时2―8℃稳定至有效期,复溶后2―8℃稳定一周。

6、、样品要求:
样品采集前病人准备无特殊要求,空腹,用肝素锂抗凝管或促凝管常规方法肘静脉采血,血标本4000转离心3分钟,分离血清样本,应不溶血。

无污染血清样品室温可保存三天,冷冻保存可稳定6个月。

样品拒收标准遵照《安阳鼎城医院标本收集管理制度》要求执行。

7、质控品分析要求:
每批分析需做高、低两个值。

失控范围和失控后处理遵照《安阳151医院检验科室内质控操作规范》的规定设置。

质控品分析操作见上述OLYMPUS AU640标准化操作规程。

8、校准品分析要求
校准操作见上述标准化操作规程。

9、设备
设备生产商:上海科华公司公司
设备型号:AU-400
10、操作步骤:
见KHB-450全自动生化分析仪标准化操作规程第四节
12、计算方法
尿酸浓度(mmol/l)=样本管吸光度/校准管吸光度*校准液浓度(mmol/l)。

13、技术参数:
可测定范围:0--4720umol/l
试剂空白起始吸光度:≦0.30A (520nm 37℃)。

相对偏差:≦±10%
批内精密度:CV%≦6%
批间精密度:相对极差(%)≦6%
14、参考范围:
男性:208-428umol/l
女性:155-357umol/l
15、报告方式:umol/l
16、注意事项:
a、当样品中尿酸浓度大于900umol/l时,可用生理盐水稀释,计算结果时乘以稀释倍数。

b、反应颜色可稳定15分钟。

c、试剂中含有防腐剂和稳定剂,可能存在一定的刺激作用或毒性,请勿直接接触皮肤、眼睛。

一旦接触,即用大量清水清洗。

请勿吞服。

17、替代方法:如因特殊情况本试验不能正常工作,在征得患者同意后在安阳地区医院用同样方法测定。

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