紫外检测器使用说明书-液相色谱仪
高压液相色谱仪操作说明书
高压液相色谱仪操作说明书1. 简介高压液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种广泛应用于化学、生物、药物等领域的分析仪器。
本操作说明书旨在介绍HPLC仪器的基本操作步骤和注意事项,以确保正确高效地使用仪器。
2. 仪器准备2.1 检查仪器:确保HPLC仪器外部无损坏,各部件连接紧密,无泄漏和污垢。
检查色谱柱是否正确安装,并确认流动相和标准物质充足。
2.2 启动电源:接通电源并打开电源开关,等待仪器启动。
2.3 打开气源:如需要,连接气源并打开气源开关。
3. 参数设置3.1 流动相:按照实验需求,选择合适的溶液组成和流速。
在色谱柱和样品之间建立合适的溶剂系统。
3.2 柱温控制:根据样品特性,设置合适的柱温。
某些实验可能需要保持恒定温度。
3.3 波长选择:对于紫外检测器,根据目标物质的吸收特性选择合适的检测波长。
3.4 设置进样量:根据实验需求,设置合适的进样量。
注意不要超出色谱柱的承载范围。
4. 进样操作4.1 进样方式:根据样品性质和实验要求,选择合适的进样方式,如进样针、自动进样器等。
4.2 进样量:根据先前设定的参数,在进样器中加载适量的样品。
4.3 进样顺序:按照需要,设置好进样顺序,确保准确可靠的分析结果。
5. 开始分离5.1 启动流动相:打开流动相开关,确保流动相无气泡,并达到稳定流速。
5.2 设置检测器:根据实验需要,选择合适的检测器,并设置检测器参数。
5.3 启动柱温:如需要,打开柱温控制开关,使柱温控制系统开始工作。
6. 数据分析6.1 数据采集:启动数据采集软件,确保与HPLC仪器连接正常。
设置数据采集参数,如采集时间、采集波长等。
6.2 数据记录:确保数据采集软件已选择正确的文件保存路径和文件命名规则。
记录实验开始时间和结束时间。
7. 系统维护7.1 每日维护:根据仪器操作手册中的维护流程,进行每日维护工作。
清洗进样器和检测器,检查液相泵、压力传感器等部件是否正常。
液相色谱仪使用说明
液相色谱仪使用说明海南大学生命科学与药学院药学-2017-2一、基本信息1、仪器型号:Waters e2695Alliance HPLC高效液相色谱系统2、结构组成:包括流动相、紫外检测器、分离柱、进样系统和操作界面五部分①为流动相,从前往后分别为“A相:95%的水+5%的乙腈”、“B相:95%的乙腈+5%的水”、“C相:纯乙腈”;B相、C相如果充足,可以不用即用即配;A相必须自己即用即配。
②为紫外检测器。
③为分离柱。
④为样品盘,分为A、B、C、D、E。
⑤为操作界面。
二、仪器原理1、色谱分析仪器基本流程:流动相→进样装置(进样)→色谱柱→检测器→数据记录与处理2、流动相携带进样装置引入的混合试样进入色谱柱,混合试样在色谱柱中根据被洗脱的时间不同,进行分离。
各组分依次进入检测器监测,检测响应信号导入计算机后,得到色谱图。
三、使用步骤1、准备:按照上述标准配制A、B、C相中的液体,放入超声机的水池中,进行超声脱气处理,保证瓶内无气泡。
A相和C相超声20分钟,B相8分钟(超声时,要把盖子适当拧松,便于排气泡)。
2、开始:打开电脑→打开液相色谱仪侧面的开关(左图)→打开紫外检测器的开关(右图)3、换柱:打开分离柱系统的门,将原柱取下(先取掉上端的管子,再取下端的管子),安装新柱时,先将下端的管子拧好,此时分离柱上半部分可见有液体,再将上端的管子拧好即可。
4、灌注:①按Menu键→设置A相为100%,B相、C相、D相均为0%→按“Direct Function”键→选择“Wet prime”→按“Enter”键,开始灌注→当左上角出现IBLE时,即为停止②设置B相为100%,A相、C相、D相均为0%→重复上述操作③设置C相为100%,A相、B相、D相均为0%→重复上述操作,进行第三次灌注5、进样:打开进样系统,在操作界面上选择一个样品盘,将样品放入,记录样品所在盘上的位置序号。
6、计算机操作:在灌注的同时,可以进行计算机操作。
液相色谱仪操作步骤说明书
液相色谱仪操作步骤说明书一、引言液相色谱仪是一种用于分离、检测和定量分析样品中化合物的仪器。
本操作步骤说明书旨在向用户介绍液相色谱仪的正确操作步骤,以保证分析结果的准确性和可靠性。
二、仪器准备1. 检查液相色谱仪的各部件是否完好,如进样器、柱箱、检测器等。
2. 确保仪器已接通电源,并处于正常工作状态。
3. 确保液相色谱仪已连接到适当的计算机或数据处理系统,以便记录和分析数据。
三、试剂与样品准备1. 根据分析需要,准备好所需的试剂和溶剂,并确保其纯度和稳定性。
2. 根据样品特性,选择适当的前处理方法,如萃取、稀释等。
3. 对于需要进样的样品,使用适当的方法进行前处理和稀释,并制备成适合液相色谱仪进样的样品。
四、进样操作1. 将准备好的样品注入进样器,确保样品量适当。
2. 设置进样器参数,如进样体积、进样速度等,以便保证进样的准确性和重复性。
3. 开始进样操作,并确保样品完全进入色谱柱。
五、色谱条件设置1. 选择适当的色谱柱和填料,根据分析需要进行柱温、流动相等条件的设置。
2. 设置流动相的流速和压力,以确保适当的柱温和分离效果。
3. 根据分析需要,选择和设置适当的检测器和检测参数。
六、色谱运行1. 确保色谱条件已设置好后,启动液相色谱仪,并开始色谱分离。
2. 监测色谱运行过程,注视峰形、保证峰的分离度和对称性。
3. 根据分析需求和实际观察情况,调整色谱条件,以获得最佳分离结果。
七、数据处理与分析1. 将液相色谱仪连接到计算机或数据处理系统后,启动数据采集和记录。
2. 根据实验要求,选择合适的数据处理工具和算法,对采集到的数据进行处理和分析。
3. 分析结果应准确地报告目标化合物的数量、浓度等信息,并进行合适的统计学处理。
八、仪器维护与清洁1. 在每次实验结束后,彻底清洗液相色谱仪的各部件,以防止残留物的积累和交叉污染。
2. 定期检查并更换液相色谱仪中的耗材,如柱子、进样针等,以保证仪器的正常工作和分析质量。
液相色谱仪操作规程
液相色谱仪操作规程一、仪器介绍1.液相色谱仪是一种利用固定相和流动相对样品中的化合物进行分离和检测的仪器。
2.仪器包括主要部件:进样系统、色谱柱、检测器、数据处理系统等。
3.操作人员需要熟悉仪器的基本原理和结构。
二、实验前准备1.检查液相色谱仪是否正常工作,如有故障需要及时报修。
2.准备好所需的试剂、标准品、溶剂等。
3.安全操作,穿戴实验室必需的防护设备。
三、进样系统的使用1.打开试剂瓶盖前,先进行试剂瓶标识确认,避免误用。
2.根据实验需要,选择进样方式(自动或手动)。
3.对于自动进样方式,需要设置样品体积、流速等参数。
4.使用手动进样方式时,注意避免气泡进入进样器中。
四、色谱柱的使用1.色谱柱的选择需要根据样品的性质和分离效果进行合理选择。
2.在进行柱操作前应检查柱头是否完好,柱温是否正常。
3.进样之前应先进行空白试样,记录基线值。
五、检测器的操作1.根据实验需要选择合适的检测器类型(如紫外检测器、荧光检测器等)。
2.设置检测器的波长、增益等参数。
3.进行检测之前先对检测器进行暗噪声调零。
六、数据处理系统的使用1.打开数据处理系统前需要先进行登录和用户验证。
2.设置分析方法,包括样品名称、浓度范围等信息。
3.分析数据时对峰面积、峰高等进行计算和记录。
七、实验操作注意事项1.实验操作过程中需注意实验室卫生和个人安全,如佩戴实验手套、护目镜等。
2.严格按照实验操作步骤进行操作,不可随意更改实验参数。
3.禁止将未知物质试样直接注入色谱柱,应遵循进样规程。
八、实验后处理1.完成实验后关闭仪器电源和气源,并及时清理仪器和实验台面。
2.将试剂瓶盖盖好,防止蒸发和污染。
3.检查实验记录,整理数据和结果,制作实验报告。
九、仪器维护和保养1.定期对液相色谱仪进行维护和保养,包括清洁仪器表面、更换耗材等。
2.仪器异常时应及时报修,并配合维修人员进行维修操作。
以上为液相色谱仪操作规程,操作人员在使用液相色谱仪时需严格按照规程进行操作,确保实验的准确性和安全性。
紫外分光光度计及液相色谱仪的原理及使用
一、紫外光谱与荧光光谱在产生原理上有何不同?荧光光谱有何特点?产生荧光光谱的先决条件是什么?1、紫外线光谱产生原理:紫外-可见吸收光谱是物质中分子吸收200-800nm光谱区内的光而产生的。
这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级跃迁,当这些电子吸收了外来辐射的能量就从一个能量较低的能级跃迁到一个能量较高的能级。
因此,每一跃迁都对应着吸收一定的能量辐射。
具有不同分子结构的各种物质,有对电磁辐射显示选择吸收的特性。
吸光光度法就是基于这种物质对电磁辐射的选择性吸收的特性而建立起来的,它属于分子吸收光谱。
跃迁所吸收的能量符合波尔条件。
当光照射在物质上时,其中某些光被选择性地吸收,当辐射能等于分子中的电子从低能态跃迁到高能态所需能量时,则分子对光产生吸收,即产生了分子吸收光谱。
荧光光谱产生的原理:物质分子吸收某一波长(激发波长)辐射能被激发后,电子以无辐射方式从高激发态跃迁至第一电子激发态的最低振动能级并释放部分能量,再以辐射的方式释放另一部分能量,该辐射能(光)即为荧光,其波长为发射波长,而产生的光谱即为荧光光谱。
2、荧光光谱特点:(1)以荧光强度对激发波长作图,得到激发光谱;同样以荧光强度对发射波长作图得荧光光谱。
激发光谱与发射光谱的图形几乎是镜面对称。
(2)基于物质吸收光后仅释放部分能量来发射荧光,故发射波长大于激发光波长(3)荧光波长是不变的,光谱的形状与激发波长大小无关3、产生荧光光谱的先决条件是:(1)具有较强的紫外-可见光吸收(2)具有一定的荧光效率二、1、在紫外-可见光测试中所用的比色杯与荧光测试时用的比色杯有何不同?在紫外-可见光测试中所用的比色杯为两面透光,荧光测试为四面透光2、玻璃比色杯与石英比色杯各自的适用波长范围?有一个物质的最大吸收为254nm,另一物质的最大吸收为500nm,这两种物质分别可选用哪几种比色杯?玻璃:320nm以上石英:≥210nm第二种物质两种比色杯都可以用,第一种物质则只能用石英比色杯。
高效液相色谱紫外检测器需要信噪比指标 液相色谱如何操作
高效液相色谱紫外检测器需要信噪比指标液相色谱如何操作紫外检测器是高效液相色谱中常用的检测器,目前市场上生产厂家及型号很多,厂家通常接受检测器的噪音,基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。
考虑到样品的紫外吸取响应值紧要与样品有关,与仪器的紫外检测器是高效液相色谱中常用的检测器,目前市场上生产厂家及型号很多,厂家通常接受检测器的噪音,基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。
考虑到样品的紫外吸取响应值紧要与样品有关,与仪器的关系不大,一般认为这可以基本反映仪器在灵敏度方面的性能。
本文在试验的基础上证明对同一样品各检测器的响应值实际上也存在不同程序的差异,说明仅使用噪音和基线漂移的指标不能精准显示仪器在灵敏度方面的性能差异,因此,提出用信噪比来评价仪器的灵敏度性能。
2 灵敏度评价指标设置的目的和依据高效液相色谱及其紫外检测器紧要用于化学样品的分析测试。
其评价指标必定与其用途相关联。
一个分析方法对检测器的要求紧要在灵敏度、选择性、精准明确度和精准性方面。
在色谱分析中灵敏度是特别紧要的指标。
对于灵敏度,在分析测试方法讨论中紧要使用信噪比、最低检测限,或最低定量限来评价。
其中信噪比是评价的核心,由于最低检测限和最低定量限通常用信噪比在2~3和10的量来定义。
但目前厂家通常接受检测器的噪音,基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。
这实际上是基于样品的紫外吸取响应值紧要与样品有关,与仪器关系不大的假设。
依据朗伯比尔定律,对于同样长度的检测池,同样浓度的样品溶液应当具有相同的吸光度。
这样,对同样浓度的样品溶液,检测器的响应值应当是相同的,所以上述噪音,基线漂移的参数应当可以用来评价检测器的灵敏度性能。
但是,试验中发觉,同一样品溶液在不同检测器中响应实际上存在明显差异,表1显示对于同一种样品溶液,不同厂家和型号检测器的响应值可能相差3倍以上。
这时,由于色谱分析紧要使用相对比较的间接测定方法,其使用实际上并没有受到多少影响。
液相色谱仪(UV)检定操作规程
制备60ug/ml基准重铬酸钾的0.005mol/l硫酸溶液,按紫外分光光度法,用1cm石英比色皿分别在235nm±5nm、257nm±5nm、313nm±5nm、350nm±5nm四个波段处,以0.005mol/L硫酸为空白,测定各波长处60ug/ml基准重铬酸钾的0.005mol/l硫酸溶液的吸收度,各波长重复测量三次。
3.5.2.色谱条件:
色谱柱:C18
流动相:甲醇
流速:1ml/min
波长:254nm
进样量:20ul(定量环)
3.5.3.操作步骤:将仪器各部份联接好,以甲醇为流动相,开机,待基线稳定后,将上述配制好的对照品溶液进样,记录色谱图。
3.5.4.按下式计算最小检测浓度:
Cl=2·Nd·C/H
式中:Cl:最小检测浓度(g/ml);
10min
1ml/min
50%
50%
13min
1ml/min
50%
50%
15min
1ml/min
25%
75%
18min
1ml/min
25%
75%
20min
1ml/min
0
100%
23min
1ml/min
0
100%
25min
1ml/min
100%
0
3.6.4.结果计算:
式中:
--第i段梯度误差(%);
12个月
定性、定量测量重复性误差
12个月
Nd:基线噪声峰-峰高,mm;
C:对照品溶液浓度(g/ml);
H:标准溶液的色谱峰高,mm。
3.5.5.结果判断:对照品溶液的峰高应大于或等于两倍基线噪声峰高,即最低检测浓度应低于4×10-8g/ml(萘的甲醇溶液)。
液相色谱仪的使用方法说明书
液相色谱仪的使用方法说明书1. 引言液相色谱仪(Liquid Chromatography, LC)是一种广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析技术。
本说明书旨在介绍液相色谱仪的基本使用方法,以便用户能够正确、高效地操作仪器。
2. 仪器概述液相色谱仪主要由以下几个部分组成:a. 快速进样器:用于将待测样品注入进色谱仪系统。
b. 柱温箱:稳定色谱柱的温度,以提高分离效果。
c. 电泳液输送系统:通过压力将电泳液从溶液储液器运送至柱部。
d. 柱部:色谱柱进行色谱分离的关键部分。
e. 检测器:用于检测待测物,并输出相应的信号。
f. 数据处理系统:将检测到的信号转化为图谱、峰图等结果。
3. 准备工作a. 色谱柱的准备:根据样品性质选择合适的色谱柱,并根据说明书装配。
b. 样品准备:将待测样品按照要求进行前处理,如稀释、过滤等。
c. 仪器准备:确保液相色谱仪的各个部件完好并连接稳固。
4. 操作步骤a. 开机:插入电源,按下电源按钮,待液相色谱仪自检完成后,屏幕将显示主界面。
b. 参数设置:根据样品特性,在主界面上进行方法设置,包括流速、柱温、检测器波长等参数。
c. 样品进样:将待测样品置于进样器中,选择合适的进样模式,并设置进样体积。
d. 开始运行:点击运行按钮,液相色谱仪将根据设定参数开始分析过程。
e. 数据采集:实时监控色谱峰出现情况,并将数据传输至数据处理系统。
f. 数据处理:对采集到的数据进行处理,如峰面积计算、峰识别等。
g. 关机:实验结束后,关闭仪器及其附属设备,并进行必要的清洗和维护工作。
5. 注意事项a. 安全操作:在使用液相色谱仪时,需遵守实验室的相关安全操作规范,如佩戴实验手套、护目镜等。
b. 柱使用寿命:根据实验要求和柱的性能要求,及时更换色谱柱,以保证测试结果的准确性。
c. 样品浓度:确保待测样品浓度在仪器检测范围内,避免浓度过高或过低造成检测信号异常。
d. 仪器维护:定期进行液相色谱仪的维护保养,如清洗柱部、更换耗材等。
液相色谱仪操作步骤
液相色谱仪操作步骤1.准备工作-检查和清洁仪器以确保其正常运行。
-检查并校准流量计,以确保它们读数准确。
-检查并准备所需的溶剂和样品。
2.设置仪器参数-打开仪器并设置所需的温度和流速。
-设置检测器以选择适当的检测方式(如紫外线检测器、荧光检测器等)。
-根据样品的性质选择适当的波长或选择合适的检测器。
3.校准系统-使用标准品或混合物进行系统校准。
根据需要选择适当的标准品。
-执行系统检漏以确保系统没有泄漏。
-进行系统的质量控制,以确保仪器的准确性和稳定性。
4.准备样品-准备样品溶液并确保其在操作过程中稳定。
-使用过滤器过滤样品以去除悬浮物和杂质。
-根据需要进行样品的预处理,如稀释、洗涤等。
5.填装柱和样品进样-选择合适的柱,并根据需要填充柱。
-连接柱与仪器,并确保其紧固和密封。
-使用进样针将样品引入柱中,并控制进样量。
6.运行色谱仪-开始运行仪器并监控色谱图的生成。
-根据需要调整流速、温度和其他参数。
-定期检查流速计和检测器的读数,并记录结果。
7.数据分析和结果评估-分析和解释色谱图以确定化合物的保留时间和峰形。
-根据峰的面积计算化合物的浓度或相对含量。
-使用标准曲线将峰面积转换为浓度或含量。
8.清洗和维护-在使用完毕后,及时清洗仪器以防止残留物的积累。
-维护仪器,包括更换柱和消耗品,以确保其长期正常运行。
以上是液相色谱仪的操作步骤。
通过正确操作仪器和遵循标准程序,可以获得准确和可靠的分析结果。
请注意,实际操作步骤可能因仪器型号和分析需求的不同而有所不同。
因此,在操作前请仔细阅读和了解所使用液相色谱仪的操作手册和相关文献。
紫外检测仪、核酸蛋白检测仪使用说明书
根据用户签订合同而定,目前我公司配备有 XWT-1044S 型台式记录仪、3057-11 型日本进口记录仪。使用时仔细参阅随机说明书。
配我公司仪器记录仪有以下几个要求: ⑴、 量程一定用 10mV。 ⑵、 走纸速度为每小时 3cm、6cm 或 12cm(可自选)
五、使用说明和操作步骤
⑴、在仪器使用前,首先检查检测器,电源和记录仪三部分电连接是否正确, 按说明书上要求将各类插头座接妥后,就把电源箱电源插头和记录仪电源插头插 入 220V 电源插座上。
0-0.02A、0-0.01A.
⑶.记录仪输出:10mV
⑷.积分仪输出:0.1A/mV
⑸.流式样品池:容积 100 微升、光程 3 毫米
微量样品池:容积70 微升、光程 3 毫米
⑹.数显模式:固定 A 量程读数(0-2.0A):可变 A 量程读数(0-2.0A、0-1.0A、
0-0.5A、0-0.2A、0-0.1A、0-0.05A、0-0.02A、HD-21C-B 型)
核酸蛋白检测仪
紫外检测仪
使 用 说 明 书
上海骥辉科学分析仪器有限公司
核酸蛋白、紫外检测仪仪器各部件示图
(正面)
⑴
⑵
⑶
⑷ ⑸⑹
⑺
⑻⑼
⑽
⑾
⑴、产品名称 ⑵、数字显示 ⑶、出样管 ⑷、光量旋钮 ⑸、仪器型号
⑹、波长旋钮 ⑺、电源开关 ⑻、量程转换器 ⑼、进样管 ⑽、A 调零
⑾、指示灯 ⑿、记录仪信号输出 ⒀、T 调零 ⒁、保险丝插座
⒂、电源插座
(背面)
⑿
⒀
⒁⒂
一.简介
核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是液相色谱仪的一1、HD–21C–A、HD–21C–B 型核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是根
紫外检测器使用使用说明-液相色谱仪
目录第四部分紫外检测器前言 (2)1、安全操作注意事项 (3)1.1 仪器使用的环境条件 (3)1.2 日常使用与维修工作中的安全警示 (3)1.3 液流管路与流动相使用的注意事项 (4)2、紫外检测器性能与技术指标 (6)2.1 基本技术指标 (6)2.2 仪器的电源保险丝、模拟输出讯号、遥控启动和数据通信接口 (7)3、紫外检测器的安装 (9)3.1 基本液相色谱系统配置 (9)3.2 液流管路的连接 (11)3.3 电源和控制电缆的连接 (13)3.4 机内微电脑自行控制的色谱系统 (14)4、紫外检测器的操作 (15)4.1 工作状态模式 (15)4.2 参数设置模式 (15)5、维护与检修 (19)5.1 维修前的准备 (19)5.2 现象与故障原因 (21)5.3 流通池的清洗、更换和清污处理 (21)5.3.1 流通池内附留污物的冲洗 (21)5.3.2 流通池的更换 (22)5.3.3 流通池的去污处理 (24)5.4 氘灯的更换 (26)5.4.1 氘灯下卸操作 (26)5.4.2 新氘灯的安装 (28)5.4.3 氘灯光轴的调整 (28)5.5 更换保险丝 (29)前言紫外检测器采用了本公司发明的多项专利技术。
平行双锥孔流通池,提高了光通量、降低了噪声和漂移。
光学系统采用精密定位结构和热隔离技术,提高了光学系统的精确度和热稳定性。
机内具有微电脑控制,可进行系统控制和数据数字化处理。
数字化讯号输出提高了抗干扰能力并降低了信号畸变,避免了二次转换误差。
紫外检测器和高压恒流泵能很方便地与专用色谱工作站联机。
工作站图形化界面能同时控制多达四台高压恒流泵以及紫外检测器,实现多元高压梯度洗脱和波长扫描等功能。
优良的数字化处理能力可实现多种定性、定量分析;建立标准曲线及峰的处理;色谱数据的储存、建立数据库等。
紫外检测器与高压恒流泵可由机内的微电脑设置参数并控制运行。
紫外检测器测量的光吸光度输出讯号可由色谱数据处理机进行液相色谱定波长吸收的定性、定量分析。
高效液相色谱仪紫外检测器使用说明书
2-7 2.3.3 控制面板··················································2-8 2.3.3.1 显示屏介绍··············································2-8 2.3.3.2 键盘功能介绍············································2-9
1.1.5 避免在有腐蚀性气体或大量粉尘的地方安装本仪器,否则会影响仪器的 正常运转,并缩短仪器的使用寿命。
1.1.6 实验室温度需控制在 20℃左右,建议安装空调。
1.2 对电源的要求
1.2.1 本仪器单元电源电压为交流 220V,功率为 200W。检查电源电压是否稳定, 电源的功率是否足够,如果不能满足要求,本仪器单元将不能正常工作。
I
FL2200 高效液相色谱仪紫外检测器
目录
第四章 仪器的操作················································4-1 4.1 准备·························································4-1 4.2 单波长模式的操作············································4-2 4.2.1 设定测量波长···············································4-2 4.2.2 设定响应时间···············································4-3 4.2.3 设定输出量程···············································4-3 4.2.4 输出信号调零···············································4-4 4.3 波长时间程序的操作···········································4-4 4.4 光谱扫描模式的操作···········································4-6 4.5 查找特征波长的操作·········································4-10 4.6 系统信息界面的操作·········································4-11
液相色谱仪的操作步骤
液相色谱仪的操作步骤液相色谱仪(High-Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一种在实验室常用的分析仪器,广泛用于化学分析、生化分析、药物分析等领域。
正确的操作步骤能够保证实验的准确性和可重复性。
下面将介绍液相色谱仪的操作步骤。
1. 准备工作在进行液相色谱实验前,需要准备好所需的试剂、样品和标准品。
同时,检查仪器状态,确保所有连接管路的连接紧固,并检查进样器、检测器和泵的工作情况。
确保试剂瓶中有足够的溶剂,并检查柱温箱和样品转移系统的温度设定。
2. 样品准备根据实验目的,准备好待分析的样品。
样品准备包括样品提取和预处理。
提取要求根据分析物的特性选择适当的方法,如溶剂萃取、固相萃取等。
预处理包括滤过、稀释、调整pH等步骤,确保样品符合分析要求。
3. 进样将待分析样品按照一定比例稀释后,通过进样器进入液相色谱柱。
在进样之前,需要通过洗涤进样针和管道以去除前一个样品的残留物。
进样体积和进样速度根据样品的浓度和分析需要进行设定。
4. 色谱柱选择与操作选择适合分析目标化合物的色谱柱,并根据分离要求进行调试与优化。
首先,打开流动相泵,并调节压力和流速使其稳定。
然后,调节流动相的比例和温度,保持恒定。
5. 检测器设置与操作根据分析的目标化合物的特性,选择合适的检测器,如紫外检测器、荧光检测器、电导检测器等。
设置检测器的波长、灵敏度和采集速率,并进行空白检测和灵敏度校准。
6. 数据采集与分析连接计算机或数据采集仪器,设置数据采集参数,并开始采集数据。
实时观察色谱图,确保峰形对称、峰高一致和无明显的杂散峰。
数据采集完毕后,进行数据处理和分析,包括峰面积计算、峰高计算、相对保留时间计算等。
7. 清洗与保养实验结束后,关闭仪器各个部分的进样、流动相和电源开关。
进行液相色谱柱的冲洗,使用纯溶剂和纯水,以去除残留的样品和流动相。
清理进样器和检测器,保持仪器干净。
定期检查仪器各个部件的状态,并进行维护和保养。
L-2000高效液相色谱仪操作使用方法和注意事项
L-2000高效液相色谱仪操作使用方法和注意事项Liquid Chromatograph型号L-2000厂商日本HITACHI公司性能特点液相色谱仪配有紫外检测器,波长范围190~900nm,波长带宽6nm。
仪器配备四元泵,可使流动相进行高压混合梯度洗脱。
基本功能对一般的中性及弱酸、弱碱性有机物进行分离分析。
应用范围有机合成、药物分析、环境样品、化工厂品纯度分析、天然有机化合物的分析等。
操作规程:1.检查1~4号瓶,准备好预先经过滤并超声脱气20min以上的所用流动相,并保证实验过程中各液体足用。
2.打开稳压电源开关→待电压稳定后打开组织器后总开关→检测器开关→泵开关→检查仪器自检情况。
3.设定检测器的波长:按输入波长数值4.泵的准备:逆时针旋转旁通阀→按将%B、%C、%D设为0排A通道气至回液管内无气泡关泵)5.同上操作分别将B、C、D通道内的气体排空→关闭旁通阀(顺时针关到底)。
6.设定工作方式及条件→打开计算机→工作站7.开泵始工作→待基线稳定后进样→搬动六通阀→进样→等出峰完全后,停止采集保存色谱图,再将六通阀手柄转回到“LOA D”,拔出注射器。
8.实验结束后,根据色谱柱类型用相应的流动相清洗柱30分钟,若使用过缓冲液,还要用经过滤并超声脱气的水清洗管道泵头,以防堵塞。
9.退出色谱工作站→关闭各模块电源开关→清洁实验工作面。
10.关闭仪器总电源开关,经由负责人验收,并在使用记录本上登记签字后方可离开。
注意事项:1.使用仪器前必须仔细阅读仪器使用说明书。
2.必须在熟悉仪器使用人员的指导下操作仪器。
3.按仪器使用要求准备测试样品,不得测试不符合要求的样品。
4.小心操作,防止样品污染和腐蚀仪器。
5.仪器要保持干燥、清洁,每次使用完毕应盖上防尘罩。
液相色谱仪使用教程
液相色谱仪使用教程液相色谱仪是一种用于分离和检测混合物中成分的分析仪器,广泛应用于各个领域的分析和研究。
本教程将介绍液相色谱仪的使用方法和操作注意事项,以期为使用者提供帮助。
一、液相色谱仪的基本原理液相色谱仪利用不同成分在流动相和静相之间的分配系数差异进行分离,实现了对混合物中成分的分离和检测。
其基本工作原理为:将混合物注入色谱柱,经过流动相的推动下,不同成分分别在柱中分配,从而实现分离。
随后,通过检测器检测不同成分的信号,进而进行分析和定量。
二、液相色谱仪的使用方法1. 准备工作:首先要准备良好的试样,保证样品的纯度和浓度,避免可能的干扰和误差。
同时,要检查色谱仪的各项参数和仪器状态,确保仪器性能良好。
2. 样品注入:将试样输入液相色谱仪,通常采用注射器进行,注意调整样品量和注入速度,避免样品泡沫和排气现象。
3. 柱温控制:柱温控制是液相色谱仪中重要的一环,可以影响柱内流体的温度和流动速度。
在使用时,应根据需要选择合适的柱温,保证实验的准确性和重现性。
4. 流速调节:流速是液相色谱分离的重要参数之一,需要根据具体实验要求进行调节。
调节时,应逐渐增加流速,以避免柱塞现象和流动相泡沫的产生。
5. 检测器设置:检测器是液相色谱分析的核心部分,通常有紫外检测器、荧光检测器、电化学检测器等多种类型。
在使用时应根据实验需要选择合适的检测器,并调节检测器参数,以获得最佳的检测效果。
三、液相色谱仪使用注意事项1. 注意安全:在使用液相色谱仪时,应注意安全,避免使用中产生爆炸、气体泄漏等危险情况。
同时,应遵守相关规定,做好实验室安全防护工作。
2. 注意试样纯度和浓度:试样的纯度和浓度会直接影响分析结果的准确性和重现性,应尽可能保证试样的质量。
3. 注意流动相选择:流动相的选择和配制应根据实验需要和分析目的进行,以获得最佳的分离和检测效果。
4. 注意柱的保养和更换:柱是液相色谱分析中的核心部分,应注意柱的保养和更换,以保证柱的性能和使用寿命。
液相色谱仪紫外检测器检定操作程序
液相色谱仪检定操作程序
1、使用前按要求检查仪器外观和安全性能。
2、按要求设定流量,启动仪器,压力稳定后,在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相,同时用秒表计时收集规定时间流出的流动相,在分析天平上称重,每一设定流量重复测量3次,计算流量稳定性。
3、选用C色谱柱,以100%甲醇为流动相,流量为1.0mL/min,紫外检测器的波长设定为254nm,检测灵敏度调到最灵敏档。
开机预热,待仪器稳定后记录基线30min,选取基线中噪声最大峰-峰高对应的信号值,计算基线噪声,用检测器自身的物理量(AU)作单位表示。
基线漂移用30min内基线偏离起始点最大信号(AU/30min)表示。
JJG705-2002液相色谱仪操作、维修保养规程
二、适用范围:适用于JJG705-2002液相色谱仪操作、维修保养。
三、编制依据:《JJG705-2002液相色谱仪使用说明书》四、责任者:QC检验员。
五、内容:(一)操作规程:1 开机:依次打开稳压器、电脑、打印机电源开关,再打开泵及检测器电源。
2 设置流速:按上下键设置所需流速(ml/min)。
3 波长的设置:按编辑键EDIT,再按NEXT,找到WL,根据需要,输入波长,按ENTER确定。
4 更换流动相(祥见“维修保养规程”中3“流动相的更换原则和方法”):先停泵,待压力降低(出液管口不滴液)后,将滤头放入新的流动相中,旋松排液口,用大针管抽出空气泡(观察流动相的管道中是否有气泡,若有气泡需完全抽出),抽找过渡液(气泡时可按住出液管口。
旋紧排液口。
降低流速,按下RUN/STOP键,开始运行。
十分钟后,再调回所需流速,继续运行至显示屏基本稳定。
5 进样(进样前检查工作站是否提示采样,详细步骤见6):进样阀应在左位(load),插入针头,快速推针(废液出口应有液体滴出);再将进样阀扳到右位(inject),开始采样。
6 工作站的使用:6.1 在电脑桌面上双击“江申”工作站,打开工作站。
6.2 单击“文件”,选择“新建实验方法”;6.3 单击“编辑”,选择“完整实验方法”,依次设置“实验参数”、“积分定量参数”、“报告参数”、“校正参数”、“记录实验方法”等;6.4 单击“操作”,选择“数据采样”,自动走基线,提示采样,插入针头、推针、扳阀后,自动采样。
6.5 根据需要可利用主菜单中的“操作”、“谱图”对图谱进行查看、比较、变换等操作。
6.6 单击“打印”,选择“编辑报告注释”,编辑完后,即可打印图谱。
7 检测完毕后,液路的清洗:7.1 先用流动相冲洗干净(无峰为干净);7.2 按流动相的更换方法更换为新的流动相或封存液8 检测完毕后,进样阀的清洗:用流动相或与样品及流动相相溶的其他溶剂,冲洗进样阀,进样阀在左、右位都须清洗,且应多注入几针清洗。
液相色谱检测器说明
紫外吸收检测器紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器(UV),是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。
因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质,所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器,几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。
示差检测:是通用型检测器,凡具有与流动相折光率不同的样品组分,均可使用示差折光检测器检测。
目前,糖类化合物的检测大多使用此检测系统(当然现在糖类elsd很普遍)。
示差检测器示差检测器(RID)是连续检测样品流路与参比流路间液体折光指数差值的检测器,是根据折射原理设计的,属偏转式类型。
光源通过聚光镜和夹缝在光栏前成像,并作为检测池的入射光,出射光照在反射镜上,光被反射,又入射到检测池上,出射光在经过透射镜照到双光敏电阻上形成夹缝像。
双光敏电阻是测量电桥的两个桥臂,当参比池和测量池流过相同的溶剂时,使照在双光敏电阻的光量相同,此时桥路平衡,输出为零。
当测量池中流过被测样品时,引起折射率变化使照在双光电阻上的光束发生偏转,使双光敏电阻阻值发生变化,此时由电桥输出讯号,即反映了样品浓度的变化情况。
二极管阵列检测器(diode-array detector, DAD):以光电二极管阵列(或CCD阵列,硅靶摄像管等)作为检测元件的UV-VIS 检测器。
它可构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号,然后,对二极管阵列快速扫描采集数据,得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。
与普通UV-VIS检测器不同的是,普通UV-VIS检测器是先用单色器分光,只让特定波长的光进入流动池。
而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池,然后通过一系列分光技术,使所有波长的光在接受器上被检测。
荧光检测器荧光检测器(FD)是高压液相色谱仪常用的一种检测器。
用紫外线照射色谱馏分,当试样组分具有荧光性能时,即可检出。
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目录第四部分紫外检测器前言....................................... 错误!未定义书签。
1、安全操作注意事项................................. 错误!未定义书签。
仪器使用的环境条件......................... 错误!未定义书签。
日常使用与维修工作中的安全警示............. 错误!未定义书签。
液流管路与流动相使用的注意事项............. 错误!未定义书签。
2、紫外检测器性能与技术指标......................... 错误!未定义书签。
基本技术指标............................... 错误!未定义书签。
仪器的电源保险丝、模拟输出讯号、遥控启动和数据通信接口错误!未定义书签。
3、紫外检测器的安装................................. 错误!未定义书签。
基本液相色谱系统配置....................... 错误!未定义书签。
液流管路的连接............................. 错误!未定义书签。
电源和控制电缆的连接....................... 错误!未定义书签。
机内微电脑自行控制的色谱系统............... 错误!未定义书签。
4、紫外检测器的操作................................. 错误!未定义书签。
工作状态模式............................... 错误!未定义书签。
参数设置模式............................... 错误!未定义书签。
5、维护与检修....................................... 错误!未定义书签。
维修前的准备............................... 错误!未定义书签。
现象与故障原因............................. 错误!未定义书签。
流通池的清洗、更换和清污处理............... 错误!未定义书签。
流通池内附留污物的冲洗................ 错误!未定义书签。
流通池的更换.......................... 错误!未定义书签。
流通池的去污处理...................... 错误!未定义书签。
氘灯的更换.................................... 错误!未定义书签。
氘灯下卸操作.......................... 错误!未定义书签。
新氘灯的安装.......................... 错误!未定义书签。
氘灯光轴的调整........................ 错误!未定义书签。
更换保险丝................................. 错误!未定义书签。
前言紫外检测器采用了本公司发明的多项专利技术。
平行双锥孔流通池,提高了光通量、降低了噪声和漂移。
光学系统采用精密定位结构和热隔离技术,提高了光学系统的精确度和热稳定性。
机内具有微电脑控制,可进行系统控制和数据数字化处理。
数字化讯号输出提高了抗干扰能力并降低了信号畸变,避免了二次转换误差。
紫外检测器和高压恒流泵能很方便地与专用色谱工作站联机。
工作站图形化界面能同时控制多达四台高压恒流泵以及紫外检测器,实现多元高压梯度洗脱和波长扫描等功能。
优良的数字化处理能力可实现多种定性、定量分析;建立标准曲线及峰的处理;色谱数据的储存、建立数据库等。
紫外检测器与高压恒流泵可由机内的微电脑设置参数并控制运行。
紫外检测器测量的光吸光度输出讯号可由色谱数据处理机进行液相色谱定波长吸收的定性、定量分析。
紫外检测器可以与其它通用工作站及其软件配合使用,但同时失去了对仪器的控制,检测精度也有所降低。
因此建议使用专用色谱工作站。
紫外检测器在安装使用前,请用户详细阅读本说明书。
若需咨询与帮助,请及时与本公司联系,以获得技术支持。
1、安全操作注意事项操作人员应具有液相色谱分析的专业知识和实际操作技能。
在安装和使用仪器时应符合安全要求,并具备防护措施和器材。
1.1仪器使用的环境条件(1)工作室内应清洁无尘,无易燃、易爆和腐蚀性气体。
排风良好。
(2)室温在15℃~30℃,检定过程中温度变化不超过3℃。
室内湿度在20%~85%RH范围内。
(3)仪器应平稳地安放在工作台上,周围无机械震动、电磁和静电干扰,仪器接地良好。
(4)电源电压为交流(220±22)V,频率为(50±)Hz。
或者为交流(110±11)V,频率为(60±)Hz(需经开关切换)。
1.2日常使用与维修工作中的安全警示仪器在通电前,应先检查电源是否正确稳定,尤其是电源切换开关位置是否正确(出于安全考虑,电源切换开关一般不连接)。
如果电压超过允许范围则应配备500W以上的稳压电源。
仪器在通电使用时,禁止打开机盖、用手或物件撞击、触摸机内元器件。
电缆不要混杂在一起,以免电磁干扰和短路。
液流管路的泄漏会渗浸入机内(如流通池),可导致漏电损坏器件与发生事故。
严禁打开氘灯罩、灯套筒、升降螺环,使氘灯暴露在外。
严禁撞击氘灯使氘灯爆碎造成伤害。
防止紫外辐射光对眼和皮肤的伤害。
操作人员应采用防护眼镜和手套。
操作人员在配置、使用流动相溶剂时务必穿戴好工作服、手套和防护眼镜,以防止伤害。
若溶剂喷溅外泄应及时收集清除,防止事故的发生。
眼镜和皮肤等受到溶剂喷溅应立即用清水冲洗和进行医疗处理。
1.3液流管路与流动相使用的注意事项紫外检测器与高压恒流泵、色谱柱等连接的液流管路,请采用本公司提供的不锈钢管及接头。
在安装管路时应细心正确进行连接,避免出现缝隙而泄漏流动相或进入空气。
接头处螺钉、螺母不要拧得过紧,以免滑口。
使用的流动相必须是HPLC级纯度,并经过滤孔µm过滤器和脱气后吸入高压恒流泵输入色谱液流管路。
悬浮微粒或气泡在流经流通池时会阻塞流通池锥孔,在窗口形成污垢,而使检测器测定的吸光度大幅波动及噪声、基线漂移增加。
在每次液相色谱系统分析工作开始前与结束后应冲洗液流管路和流通池,排除污物与气泡。
在更换流动相时,要注意前后二种流动相必须是可互相溶解的,如不互溶,必须采用与前后二种流动相能互溶的中间流动相进行过渡置换。
过渡流动相清洗时间要超过四小时。
采用含盐缓冲溶液作流动相,盐溶解度随温度变化会出现沉淀。
流动相中含有F、Cl离子能腐蚀不锈钢与石英流通池窗口。
在使用上述流动相或分析高浓度样品后应立即对液流管路进行充分清洗。
在1mL/min流量下清洗时间要超过四小时。
仪器在通电启动时,自动进行自检和波长校正等检测程序。
检测是通过测量透过流通池光强度来校对氘灯发射光谱亮线656nm峰位置,因此流通池窗口上污垢、气泡或残留某些溶剂都会影响仪器自检波长校正的准确性。
操作人员应具备高效液相色谱专业知识和实践经验,了解流动相溶剂有关的物理化学特性和毒性、易燃、易爆性,在发生意外事故时能安全正确地进行处理。
实验室应备有安全消防器材。
紫外检测器在出厂时,已用甲醇溶剂清洗。
2、紫外检测器性能与技术指标紫外检测器采用微电脑控制曲面衍射光栅光学系统、双孔微型流通池、光强度测量和数据输出电子系统。
仪器通电启动后自动进行自检和波长校正程序。
液晶显示器实时显示检测波长、吸光度、样品池与参照池透射光强度、运行时间、灯的开关及使用时间等。
自检结束后,可用键盘按钮启动运行或设置参数。
2.1基本技术指标(1)波长范围:190-600nm。
(2)波长示值误差:不超过±2nm。
(3)波长重复性:优于2nm。
(4)光谱带宽:8nm。
(5)基线噪声:不超过5╳10-5AU (C18色谱柱,甲醇1mL/min,254nm)。
(6)基线漂移:不超过1╳10-3AU/h(C18色谱柱,甲醇1mL/min,254nm,仪器稳定后)。
(7)最小检测浓度:不超过2╳10-8 g/ml(萘/甲醇溶液)。
(8)线性范围:优于103。
(9)滤波时间常数(秒):(10)外形尺寸:450 mm╳300 mm╳160 mm(长╳宽╳高)。
(11)重量:12kg。
(12)电源:交流(220V±22)V,频率为(50±)Hz。
交流(110±11)V,频率为(60±)Hz(需经开关切换)。
2.2仪器的电源保险丝、模拟输出讯号、遥控启动和数据通信接口(1)电源保险丝:2A。
(2)模拟输出:记录仪输出: 10mV;数据处理机输出: 1V。
(3)遥控启动插头:双芯电线,与手动进样器连接。
(4)RS-485数据通信接口:与高压恒流泵连接,由专用色谱工作站对高压恒流泵进行参数设置与数据读出。
(5)USB数据通信接口或RS-232数据通信接口:这二个接口可以任意使用其中一个与专用色谱工作站所在的计算机连接,实现由色谱工作站对紫外检测器和高压恒流泵的参数设置、测量数据的采集和数字化处理。
注意:紫外检测器可以与其它通用工作站及其软件配合使用,但同时失去了对仪器的控制,检测精度也有所降低。
因此建议使用专用色谱工作站。
仪器的正面板和后面各部件与右侧面液流接口如附图:附图一:紫外检测器-正面板附图二:紫外检测器-右侧面板附图三:紫外检测器-后面板3、紫外检测器的安装操作人员应具有高压液相色谱专业知识和实际操作技能。
在安装前请用户详细阅读压恒流泵、紫外检测器、进样器、色谱柱及色谱工作站等说明书,并具备安装的实验室环境要求、安全措施和必要的器材。
3.1基本液相色谱系统配置高压恒流泵1台紫外检测器1台手动进样器1只色谱柱1支色谱工作站软件1套基本液相色谱系统配置如附图四所示。
附图四:基本系统配置基本液相色谱系统由专用色谱工作站进行系统的控制和色谱数据的数字化处理和储存。
在图形化界面下同时控制可多达四台高压恒流泵及紫外检测器,实现多元高压梯度洗脱和波长扫描等功能以及时间程序。
色谱数据处理功能具有定性、定量分析,建立标准曲线,色谱峰的处理以及数据储存。
色谱工作站控制下的操作,请详细阅读色谱工作站说明书。
3.2液流管路的连接请参阅高压恒流泵说明书进行液流管路的连接。
连接液流管路请采用本公司提供的不锈钢管和接头,要妥善保管好保护塞。
样品池、参照池进液口和出液口注意要连接正确。
在弯曲不锈钢管时应弯成圆弧形,切勿成折角。
(1)将进样器固定支架安装到高压恒流泵上。
(2)将进样器安装在进样器固定支架上。
(3)将二支废液管一端连接到进样器5号、6号孔,另一端连接到废液瓶。
(4)请接好高压恒流泵的电源线。