血球计数板法测水样细菌数量实验报告
血球样板计数实验报告
一、实验目的1. 掌握血球样板计数法的基本原理和操作步骤。
2. 学习利用血球样板计数法对微生物进行计数。
3. 提高对微生物计数结果的分析能力。
二、实验原理血球样板计数法是一种利用显微镜直接计数微生物数量的方法。
该方法适用于各种微生物的计数,如细菌、酵母、真菌等。
计数原理是将一定稀释度的微生物悬液滴加到血球样板计数室中,在显微镜下直接观察并计数。
血球样板计数室由一块特殊的载玻片构成,其上有四条槽构成三个平台,中间较宽的平台被一短横槽隔成两半。
每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为九个大方格。
每个大方格分为16个中方格,每个中方格又分为25个小方格。
每个大方格中的小方格总数为400个,每个大方格的边长为0.1mm,因此计数室的容积为0.1mm³。
计数时,通常只计数四个四周大方格内的细胞数。
然后求出每个大方格的平均值,即可得出一个大方格中的平均细胞数。
再根据菌液稀释倍数,计算出1ml菌液中的总细胞数。
三、实验材料1. 血球样板计数室2. 显微镜3. 试管4. 吸管5. 微量移液管6. 细胞悬浮液7. 稀释液8. 滤纸四、实验步骤1. 准备工作:将血球样板计数室及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。
2. 制备细胞悬液:将细胞悬浮液吸取少许,注入试管中,加入适量的稀释液,搅拌均匀。
3. 稀释:根据细胞悬液的浓度,将细胞悬液进行适当的稀释,以便在计数时细胞数适中。
4. 计数:将稀释后的细胞悬液吸取少许,滴加到血球样板计数室的盖片边缘,使培养液自然渗透填满计数室。
等待一段时间,让细胞全部沉降到计数室底部。
5. 观察:将计数板放在显微镜载物台上,先用低倍镜找到计数室所在的位置,然后转换到高倍镜观察。
计数四个四周大方格内的细胞数,记录下来。
6. 计算结果:根据计数结果和菌液稀释倍数,计算出1ml菌液中的总细胞数。
五、实验结果与分析1. 实验结果:通过血球样板计数法,得到酵母菌的计数结果为N个细胞/ml。
微生物菌落计数实验报告
微生物菌落计数实验报告实验目的:本实验旨在通过微生物菌落计数方法,确定水样中细菌和真菌的菌落数,以评估水质的卫生安全水平。
实验原理:微生物菌落计数是一种常用的微生物计数方法,通过将待检测样品在适当培养基上培养,促使微生物菌落形成,然后用目镜进行观察计数。
细菌和真菌在不同培养基上生长的特性不同,利用这一特性可以分别计数。
瓶子计数法和平板计数法是常用的微生物菌落计数方法。
实验步骤:1. 做好消毒准备,将取样瓶开盖,取适量水样。
2. 用无菌移液管分别移取水样至含有不同培养基的培养皿中。
3. 均匀涂抹样品,覆膜,进行培养。
4. 培养后观察培养皿上的菌落形成情况,用计数板进行计数。
5. 计算出每毫升水样中的微生物菌落数。
实验结果:根据观察和计数,得出水样中细菌和真菌的菌落数分别为XXX CFU/mL和XXX CFU/mL。
实验分析:通过微生物菌落计数实验,我们可以了解水质中微生物的富集情况,评估水样的卫生安全性。
根据实验结果,可以判断水样是否存在污染,进而采取相应措施提高水质。
结论:微生物菌落计数实验是一种简单而有效的水样检测方法,可以帮助我们及时了解水质情况,保障人们的健康。
在日常生活中,我们应该重视水质安全问题,做好水质检测和管理工作。
实验注意事项:1. 操作时要保持无菌环境,避免外界微生物的污染。
2. 操作时要注意个人防护,避免实验中发生意外伤害。
3. 实验后要及时处理实验用具,保持实验室整洁。
通过微生物菌落计数实验,我们可以更深入了解水质情况,及时采取措施改善水质,保障人们的生活健康。
愿我们在未来的生活中,都能享受清洁卫生的水资源,健康快乐地生活。
环境微生物综合性实验报告
环境微生物综合性实验报告官洲河段不同断面微生物群落分布的测定见习类型专业见习院别化学与环境学院专业环境工程指导教师成文老师班级2010级环境工程姓名翟锦亮学号201024001322012年12月目录1. 前言...................................... 错误!未定义书签。
2. 实验方案与思路 (3)3. 实验方法 (3)3.1 仪器 (3)3.2 试剂 (4)3.3内容 (4)4. 实验结果 (8)4.1 水样观察 (8)4.2 水样细菌总数的计算 (9)4.3 水样菌落的培养观察 (9)4.4 水样菌落数的计算 (11)4.5 微生物个体菌种形态的观察 (12)5. 实验分析 .................................. 错误!未定义书签。
5.1 实验结果分析 (13)5.2 实验存在问题 (14)5.3 实验改进意见 (15)6. 实验结论 (15)7. 实验收获 (15)参考文献..................................... 错误!未定义书签。
1. 前言微生物的群落结构与功能是微生物生态学的研究主题之一。
水体中微生物与区域环境有着密切的联系,其数量及种群分布与水的类型、有机物含量、微生物的拮抗作用等多种因素密切相关。
对它的研究将有助于了解水体的富营养现状及水域中C、N、P循环方式,并可为水体的整体治理方案提供依据[2]。
本实验将大学城官洲河段到入珠江段分为三个断面(对照断面,控制断面,消减断面),在同一天同一时间段对各断面水体的水样分别采样比较,测定水体中微生物的种类和数量,了解官洲河段不同断面的水体中存在的微生物的种类和数量,分析各断面中微生物群落的分布特点,了解各断面水体污染情况以及污染物对水体中微生物群落的影响。
2、实验方案与思路2.1 采样容器的洗涤和灭菌2.2 水样的采集2.3 水样微生物的观察2.4 培养基的制备2.5 微生物的纯种分离与培养2.6 微生物菌种的革兰氏染色2.7微生物菌种的观察与鉴定3.实验方法3.1 实验仪器高压灭菌类:培养皿(12个)、试管(9支)、移液管(3支,1mL)、高压蒸汽灭菌器、锥形瓶(1个)制备培养基类:烧杯(1000mL)、药物天枰、玻璃棒、药匙、pH试纸、加热器、超净工作室、恒温培养箱观察类:显微镜、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、血球计数板、滴管、烧杯、量筒(1个,10mL)3.2 实验试剂肉膏胨淀粉培养基配方[1]:牛肉膏3g,蛋白胨10g,淀粉2g,氯化钠5g,琼脂15-20g,蒸馏水1000mL,pH:7.4~7.8,。
微生物实验10水中大肠菌群数的测定
实验九水中大肠菌群数的测定一、目的要求学习大肠菌群数的检测原理和方法。
二、实验材料1.样品:水样2. 培养基:乳糖胆盐发酵管(单料及双料),伊红美兰琼脂(EMB)平板,乳糖发酵管。
3. 其他:显微镜,酒精灯,无菌吸管(10m1、1m1),接种环,载玻片等三、基本原理水中的病原菌多数来源于病人和病畜的粪便。
由于病原菌的数量少,检测过程复杂,因此,直接测它们的存在是非常困难的专业化工作。
由于大肠菌群在粪便中数量大,在体外存活时间与肠道致病菌相近,且检验方法比较简便,因此一般采用测定大肠菌群或大肠杆菌的数量来作为水被粪便污染的标志。
如果水中大肠菌群的菌数超过一定的数量,则说明此水已被粪便污染,并有可能含有病原菌。
大肠菌群的定义是指一群好氧和兼性厌氧、革染氏阴性、无芽孢的杆状细菌,并能在乳糖培养基中,经37℃24~48h培养能产酸产气。
我国规定每升自来水中大肠菌群不得超过3个。
检测大肠菌群的方法有稀释培养法和膜滤法两种,其中稀释培养法是标准分析法,为我国大多数卫生单位和水厂所使用。
它包括初发酵试验、平板分离和复发酵试验三个部分。
四、方法与步骤1.采样:取100ml磨口带塞玻璃瓶,包扎后,干热灭菌备用。
取自来水样时,至少应先放水5min,以冲去龙头口所带的微生物,获得主流管中有代表性的水样。
取样时,用右手握瓶,左手启开瓶塞,用覆盖瓶口的纸托住瓶塞,收集样品后,连同覆盖纸一起将瓶口塞好,并用线绳在原处扎好。
注意手指不得触及瓶口内部。
在静水中取样时,先用右手揭去塞子,瓶口朝下浸入水下约30cm处,然后将瓶子反转过来,待水注满后,取出塞好瓶口。
如果水在流动,瓶口必须迎着水流,以免手上的细菌被水冲进瓶子。
2.水样放置过程中,内含的细菌数目和类型会发生变化,所以要求水样品应于6~10℃贮存,并不超过6h。
3.初发酵试验:吸取待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,10ml接种量采用双料发酵管,而lml及lml以下接种量采用单料管。
血球计数板实验报告
血球计数板实验报告实验目的:通过使用血球计数板,观察和计数血液中的不同种类的细胞,以确定它们的数量和比例。
实验步骤:1.准备工作:a.将实验室仪器和试剂摆放整齐,并按要求进行消毒。
b.对血液样本进行稀释,使得细胞数量在可计数范围内。
2.使用血球计数板:a.将稀释后的血液样本注入血球计数板的计数室中。
b.轻轻晃动计数室,使血细胞均匀分布在计数室的每个小格子中。
c.在显微镜下逐个计算并记录不同种类的细胞数量,如红细胞、白细胞和血小板。
d.对每个种类的细胞数进行统计并计算平均值。
实验结果:根据实验步骤,我们观察到并记录了血细胞计数的结果。
具体数据如下:- 红细胞计数:平均值为4.5 某10^6 cells/μL- 白细胞计数:平均值为7.8 某10^3 cells/μL- 血小板计数:平均值为3.4 某10^5 cells/μL实验讨论:1.根据实验结果,我们可以得出血液中红细胞数量最多,白细胞数量较少,血小板数量也较少的结论。
2.实验结果可能会受到样本稀释时的误差影响。
如果样本稀释不准确,会导致细胞计数值不准确。
4.血球计数板是一种常用的血液检测工具,可以用于观察和计数各种血细胞,对于疾病的诊断和治疗提供重要依据。
实验总结:通过本次实验,我们学习了使用血球计数板进行血细胞计数的方法。
通过观察和计数不同种类的细胞,我们可以得到血液中细胞的数量和比例。
同时,我们也了解到实验结果可能受到多种因素的影响,需要进行准确的样本稀释和细胞计数操作。
血球计数板是一种非常实用的工具,对于临床医学领域的疾病检测和治疗具有重要意义。
血球计数实验报告
一、实验目的1. 了解血球计数板的使用方法及原理。
2. 掌握血细胞计数的实验操作流程。
3. 学会计算血细胞数量,为后续生物学实验提供数据支持。
二、实验原理血球计数板是一种用于计数血细胞或其他细胞群体的实验器材。
其原理是将一定体积的细胞悬液加入计数板中,在显微镜下观察计数板中的细胞数量,然后根据计数板的结构和悬液稀释倍数计算出细胞总数。
血球计数板由盖玻片和计数室两部分组成。
计数室是一块特制的载玻片,上面有四个长方形槽,槽内各有三个平台,每个平台上有九个大方格。
大方格又分为16个中方格,每个中方格又分为25个小方格。
每个大方格的体积为0.1mm³,其中包含400个小方格。
三、实验材料1. 血球计数板2. 显微镜3. 试管4. 吸管5. 微量移液管6. 细胞悬液7. 蒸馏水四、实验步骤1. 准备计数板:将计数板及盖玻片用擦镜纸擦拭干净,并将盖玻片放置在计数板上。
2. 稀释细胞悬液:将细胞悬液用微量移液管吸取适量,加入试管中,用蒸馏水稀释至适当浓度。
3. 加样:用吸管吸取稀释后的细胞悬液,滴加在计数板盖玻片的边缘,使细胞悬液自行渗入计数室。
4. 观察计数:将计数板放置在显微镜载物台上,调节焦距,使细胞清晰可见。
按照从左上角开始,逐个中方格进行计数,注意观察四个大方格内的细胞数量。
5. 计算细胞数量:根据计数结果,计算出每个大方格的平均细胞数,再根据计数板的结构和悬液稀释倍数,计算出细胞总数。
五、实验结果与分析1. 实验结果:本次实验中,四个大方格内的细胞数量分别为120、150、130、140个。
2. 结果分析:根据计数板的结构,每个大方格包含400个小方格,因此每个大方格的平均细胞数为(120+150+130+140)÷4=135个。
根据实验原理,1ml菌液中的总细胞数为135×10000×M(M为悬液稀释倍数),例如,若悬液稀释倍数为100倍,则1ml菌液中的总细胞数为135×10000×100=1.35×10⁷个。
环境工程微生物学实验四 微生物数量的测定实验报告
南昌大学实验报告学生姓名:学号:专业班级:实验类型:√验证□综合□设计□创新实验日期:实验成绩:实验四微生物数量的测定一、实验目的:1了解血球计数板测定微生物数量的原理;2 了解血球计数板的结构,学习并掌握血球计数板计数微生物数量的技术,包括样品的点样、菌数计数的方法与计算;二、实验基本原理:镜检计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如有杂菌或杂质常不易分辨。
菌体较大的酵母菌或霉菌泡子可采用血球计数板;一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petroff Hausser)细菌计数板。
两种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。
而血球计数板较厚,不能使用油镜,故细菌不易看清。
血球计数板是一块特制的厚载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各有一个方格网。
每个方格网共分9大格,其中间的一大格(又称为计数室)常被用作微生物的计数。
计数室的刻度有两种:一种是大方格分为16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即每个大方格都由400个小方格组成。
每个大方格边长为1mm,则每一大方格的面积为1mm2,每个小方格的面积为1/400mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与计数室底部之间的高度为0.1mm,所以每个计数室(大方格)的体积为0.1mm3,每个小方格的体积为l/4000mm3。
使用血球计数板直接计数时,先要测定每个小方格(或中方格)中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
本方法适用于细胞数较多的样品测定(每毫升105~106以上),当样品中的细胞浓度较低时,须选择其他方法测定,否则因误差太大而影响实验结果。
板的构造a.平面图(中间平台分为两半,各刻有一个方格网)b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙)血球计数板计数网的分区和分格三、主要仪器设备及耗材:显微镜、血球计数板、盖玻片(22mm×22mm)、吸水纸、滴管、擦镜纸、酵母菌液四、实验步骤:(1)取洁净的血球计数板一块,在计数室上盖上一块盖玻片。
微生物大小与数量的测定实验报告
微生物大小与数量的测定实验报告一、实验目的本次实验旨在掌握使用显微镜测量微生物大小的方法,以及学会运用血球计数板对微生物数量进行测定。
通过实验操作和数据处理,深入了解微生物的形态特征和种群密度,为后续的微生物学研究打下基础。
二、实验原理(一)微生物大小的测定微生物细胞的大小是微生物的基本特征之一。
使用显微镜测微尺可以较为准确地测量微生物细胞的长度、宽度和直径等参数。
显微镜测微尺包括目镜测微尺和镜台测微尺。
目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形小玻片,上面刻有刻度;镜台测微尺是一块特制的载玻片,中央有精确的刻度,用于校正目镜测微尺。
(二)微生物数量的测定血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的工具。
它由一块特制的厚玻璃片制成,玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台又被一短横槽隔成两半,每半边上面各刻有一个方格网。
方格网上刻有 9 个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成 16 个中方格,而每个中方格又分成 25 个小方格;另一种是一个大方格分成 25 个中方格,而每个中方格又分成 16 个小方格。
但无论哪种规格,每个大方格的边长均为 1 毫米,盖上盖玻片后,计数室的容积是一定的。
因此,在一定体积的菌液中,通过计算微生物在计数室中的数量,就可以换算出菌液中微生物的数量。
三、实验材料与仪器(一)材料枯草芽孢杆菌、酿酒酵母的菌悬液。
(二)仪器显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、盖玻片、滴管、擦镜纸、吸水纸等。
四、实验步骤(一)微生物大小的测定1、安装目镜测微尺将目镜测微尺装入目镜的隔板上,注意有刻度的一面朝下。
2、校正目镜测微尺(1)将镜台测微尺置于载物台上,先用低倍镜观察,找到镜台测微尺的刻度线。
(2)移动镜台测微尺,使镜台测微尺与目镜测微尺的刻度线平行,并使两者的“0”刻度线重合。
(3)换用高倍镜观察,找出两尺再次重合的刻度线。
分别记录目镜测微尺和镜台测微尺在重合线段内各自的格数。
实训四微生物细胞数计数
使用血球计数板计数பைடு நூலகம்细胞微生 物的数量。
二、实验原理
血球计数板是一块比普通载玻片厚的特 制玻片制成。玻片中央刻有四条槽,中央两 条槽之间的平面比其它平面略低,中央有一 小槽,槽的两边的平面上各刻有9个大方格。 中间的一个大方格为计数室,它的长、宽各 为1mm,深度为0.1mm,容积为3。计数室有两 种规格,一种是把大方格分成16个中格,每 一中格分成25小格,共计400小格;另一种规 格是把大方格分成25中格,每一中格分成16 小格,总共也是400小格。
式中,400为计数板的小格总数; 10000为由计数室3换算成lmL体积的系数
三、实验材料和用具
1.材料 酵母菌悬液
2.用具 显微镜、血球计数板
四、实验方法
1.取清洁干燥的血球计数板,在计数室 上面加盖玻片。在显微镜下找到计数室。
2.取酵母菌液,摇匀,用滴管由盖玻片 边缘滴一小滴(不宜过多)。菌液可自行渗 入计数室。计数室不得有气泡,然后置高 倍镜下计数。
四、实验方法
3.样品浓度要求每小格内有5~10个菌体为宜。
4.计数时,用16×25的计数板要按对角线方位, 取左上、左下、右上,右下四个中方格(即100 小格)计数酵母菌液,用25×16的计数板,除 计数上述对角线的四个方格外,还需数中央一 个方格的酵母菌数(即80小格)。
四、实验方法
5.每个样品重复计数2~3次,取其平均值, 按上述公式计算每毫升菌液所含的酵母细 胞数。
6.计数完毕,将计数板在水龙头上冲洗,切 勿用硬物洗刷,自行晾干或吹风机吹干, 或用擦镜头纸轻轻擦拭。
五、实验内容
使用血球计数板对样品酵母菌液进行计 数,并计算菌液浓度。
六、实验报告
将微生物计数的结果填入下列空白 1.第一次计数的酵母细胞数目= 个。 2.第二次计数的酵母细胞数目= 个。 3.从两次的计数结果中求出酵母细胞的平均数目 4.稀释倍数= 倍。 5.求出每毫升酵母菌液中的细胞数= 个。
血球计数板计数实验
环工综合实验血球计数板计数实验实验报告环境科学与工程学院实验中心使用血球计数板计数时,先要测定每个小方格中微生物的数量,再换算成每毫升菌液(或每克样品)中微生物细胞的数量。
2.血球计数板计算微生物数量的优缺点是什么?血球计数板与平板稀释法对细菌个数进行测定,结果往往差别很大。
分析原因。
答:⑴将细菌(或其他微生物)以染料(例如结晶紫)染色后,直接以显微镜观察的方式计数,再推算回细菌数,所得即为总菌数,即死菌、活菌一并计算。
优点:简单、快速、重复性高。
不足:不能区分死细胞和活细胞,应用范围较窄;一些小的细胞在显微镜下很难看到;样品中菌液浓度不能低于106个/mL;不能用于菌丝体或呈链状而不分散的微生物测定⑵血球计数板计量时所得到的结果为死菌与活菌的总数,而平板稀释法培养得到的为活菌数目,因此结果差异较大。
四、实验步骤1.稀释:取接种酵母菌的斜面一支,加入5ml无菌水,摇晃试管一分钟,使形成菌液;将菌液倒入洁净的150ml锥形瓶中,加结晶紫三滴,摇晃2分钟,再加入无菌水至50ml。
2.镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。
若有污物,则需清洗后才能进行计数。
2.加样品:将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的细口滴管将稀释的酿酒酵母菌液由盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多),让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自行进入计数室,一般计数室均能充满菌液。
注意不可有气泡产生。
4.显微镜计数:静止5分钟后,将血球计数板置于显微镜载物台上,先用低倍镜找到计数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。
在计数前若发现菌液太浓或太稀,需重新调节稀释度后再计数。
一般样品稀释度要求每小格内约有5—10个菌体为宜。
每个计数室选5个中格(可选4个角和中央的中格)中的菌体进行计数。
位于格线上的菌体一般只数上方和右边线上的。
如遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作两个菌体计数。
计数一个样品要从两个计数室中计得的值来计算样品的含菌量。
实验5 水中细菌总数的检测
实验五水中细菌总数的检测一、实验目的1.采用标准平皿法对水样中细菌作计数。
2.掌握微生物实验中无菌操作技术方法。
二、实验原理水中细菌总数往往同水体受有机物污染的程度呈正相关,它是评价水质污染程度的一个重要指标之一。
由于重金属及某些其他有毒物质对细菌有杀灭或抑制作用,因此总细菌数少的水样,并不能排除已被这些物质所污染。
试验采用标准平皿法对水样中细菌作计数,这是一种测定水中好氧的和兼性厌氧的异养细菌密度的方法,由于细菌在水体中能以单独个体、成对、链状,成簇或成团的形式存在,此外没有单独的一种培养基或某一环境条件能满足一个水样中所有细菌的生理要求,所以由此法所得的菌落数实际上要低于被测水样中真正存在的活细菌的数目。
细菌总数是指l ml水样在营养琼脂培养基中,37ºC、24h 培养后所生长的菌落数。
一般规定,1ml自来水中总菌数不得超过100个。
三、材料和器皿1.培养基:营养琼脂培养基牛肉膏:3-5 g ;NaCl :5 g ;蛋白胨:10 g ;琼脂:15-20 g;H2O :1000 ml ;pH :7.0-7.2.2.无菌采样瓶、灭菌移液管、灭菌培养皿,盛有90ml及9ml灭菌蒸馏水的锥形瓶和试管。
四、方法和步骤1.采集水样。
2.吸取10ml水样(河水、污水、游泳池水或港湾水等),注入罐有90ml无菌水的三角瓶中,混匀成10-1稀释液,在吸水样前,水样应彻底搅动均匀。
3.按10倍稀释法将水样稀释成10-2、10-3、l0-4。
4.营养琼脂培养基(用于河水样)倒平皿(厚度约2-3毫米,12毫升)水平放置至固化。
5.根据水样的洁净程度,污染严重者选取10-2、10-3、l0-4稀释度;中等的选取10-1、10-2、10-3稀释度,每个稀释液分别注入两个培养皿,每皿0.2 ml,用玻璃刮刀涂匀。
稀释度的选择是本试验精确度的关键,选择适宜者,平皿上菌落总数介于30~300个之间。
6.将培养皿倒置于37ºC 培养24h,可观察出明显菌落。
血球计数板实验报告
一、实验目的1. 熟悉血球计数板的使用方法。
2. 学习微生物计数的基本原理和操作技巧。
3. 通过计数,了解酵母菌种群数量的变化规律。
二、实验原理血球计数板是一种常用的微生物计数工具,其计数原理是将一定稀释度的微生物悬液滴入计数室中,在显微镜下直接计数。
血球计数板通常由厚玻璃制成,中间有两个计数池,每个计数池内画有9个大方格,大方格内再分为25个中方格,每个中方格又分为16个小方格。
通过计数大方格内的微生物数量,可以计算出单位体积内微生物的总数。
三、实验材料1. 血球计数板2. 显微镜3. 酵母菌悬液4. 稀释液5. 移液器6. 试管7. 玻璃棒四、实验步骤1. 将血球计数板和盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。
2. 用移液器吸取适量酵母菌悬液,滴入计数池边缘,使悬液自行渗入计数池中。
3. 待悬液稳定后,将计数板置于显微镜载物台上,调整显微镜焦距,使计数室清晰可见。
4. 选择计数室中的一个大方格,按照从左上角到右下角的顺序,依次计数大方格内的微生物数量。
5. 计数完成后,计算每个大方格的平均微生物数量。
6. 根据稀释倍数,计算出单位体积内微生物的总数。
五、实验结果与分析本次实验共计数了5个大方格,每个大方格的平均微生物数量分别为:200、250、300、350、400。
根据稀释倍数,计算出单位体积内酵母菌的总数约为2.5×10^6个/mL。
从实验结果可以看出,酵母菌种群数量在一定时间内呈现增长趋势,这与酵母菌的生长特性相符。
六、实验总结1. 血球计数板是一种简单、方便、准确的微生物计数工具。
2. 在进行微生物计数时,应注意操作规范,避免误差。
3. 通过本次实验,加深了对微生物计数原理和操作技巧的理解。
七、注意事项1. 计数前应确保血球计数板和盖片干净、无尘。
2. 滴加悬液时,应避免产生气泡。
3. 计数时,应尽量保持显微镜焦距不变。
4. 计数过程中,应避免人为误差。
通过本次实验,我们掌握了血球计数板的使用方法,并了解了酵母菌种群数量的变化规律。
实验—血球计数板的使用
一、血球计数板的使用原理显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数,然后推算出含菌数的一种方法。
血球计数板是常用的计菌器之一。
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室。
这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其容积为0.1mm3,即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板;大方格的长和宽各2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3,即2mm×2mm×0.1mm方格的计数板。
在血球计数板上,刻有一些符号和数字,其含义是:XB-K-25为计数板的型号和规格,表示此计数板分25个中格;0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的高;1/400mm2表示计数室面积是1mm2,分400个小格,每小格面积是1/400 mm2。
计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。
但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
1.16×25型的计数板将计数室放大,可见它含16中格,一般取四角:1、4、13、16四个中方格(100个小方格)计数。
将每一中格放大,可见25个小格。
计数重复3次,取其平均值。
计数完毕后,依下列公式计算:酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/100 ×400×10000×稀释倍数2.25×16型的计数板中央大方格以双线等分成25个中方格,每个中方格又分成16个小方格,供细胞计数用。
细菌计数板和血细胞计数板的计数原理
细菌计数板和血细胞计数板的计数原理
细菌计数板和血细胞计数板是实验室常用的工具,用于帮助科
研人员和医学专业人员对细菌和血细胞进行计数。
下面将详细介绍
它们的计数原理。
1. 细菌计数板的计数原理:
细菌计数板是一种含有特定培养基的平板,通常被用于分析水
样或其他液体样品中的细菌数量。
其计数原理主要基于菌落计数法。
在实验中,将待测样品通过稀释系列后均匀涂布在细菌计数板表面,然后将其放入恒温培养箱中培养一段时间,使细菌在培养基上形成
可见的菌落。
最后,通过肉眼或显微镜观察并计数每个板上的菌落
数量,再根据稀释倍数和计数结果计算出原始样品中的细菌数量。
2. 血细胞计数板的计数原理:
血细胞计数板主要用于计数血液中的白细胞、红细胞和血小板
数量。
其计数原理基于血细胞计数法。
在实验中,将待测血液样品
与稀释液混合后装入计数板中,通过显微镜观察并计数每个小格中
的血细胞数量,再根据计数结果和稀释倍数计算出血液中各种细胞
的浓度。
同时,还可以通过染色方法区分不同类型的白细胞,从而
进一步了解血液的状况。
总的来说,细菌计数板和血细胞计数板都是通过对样品进行稀释、培养或染色处理后,利用显微镜观察和计数来确定细菌或血细
胞的数量。
这些计数板在医学诊断、环境监测和科研实验中都有广
泛的应用,为人们提供了重要的数据支持。
水处理微生物实验二报告
实验二微生物显微计数及活菌观察一、血球计数板的使用及酵母菌的显微计数(暗视野)(一)实验目的学习血球计数板的使用。
直接计数法测定样品中酵母细胞数。
(二)实验原理利用血球计数器在显微镜下直接计数是一种常见的微生物计总数的方法。
因为计数器载片和盖片间的容积一定,所以可以根据显微镜下观察到的微生物数目来计算单位体积内微生物总数。
血球计数器是一只特制载玻片。
载片上有两个方格网,每一方格网共分九个大方格,其中间的一个大方格用来做微生物计数,所以又称为计数室。
计数室的刻度一般有两种,一种是每个大方格分成16个中方格,每中方格又分成25个小方格(麦氏血细胞计数板)。
另一种是一个大方格分25个中方格,每个中方格又分成16个小方格(希里格血细胞计数板。
但是不论哪一种,一个大方格,都等分成(25×16或16×25)400个小方格。
(图2-1)因为每个大方格边长为1毫米,载片与盖片间距离为0.1毫米,所以每个计数室(1个大方格)体积为0.1立方毫米。
测出每个中方格菌数,就可以算出一个大方格的菌数,由此推算出1毫升菌液内所含的菌数。
(三)实验材料1. 器材血球计数板、显微镜。
2. 菌种酿酒酵母菌液。
(四)操作步骤1. 血球计数板的操作1) 取一个清洁的血球计数板,将洁净的专用盖玻片放置在计数室上;2) 把在液体培养基上室温培养了24~48h 的酿酒酵母菌悬液进行稀释,以每小格有3~5个酵母菌为宜;3) 摇匀稀释的酵母菌液,用无菌滴管吸取少许菌液,沿盖玻片的边缘滴一小滴(不宜太多),使菌液自行渗入计数室(两个计数室各滴一滴;注意:加菌液时不得使计数室内有气泡),静置5 min ;4) 将计数板放置在显微镜的载物台上,先在低倍镜下找到方格网,然后转到高倍镜下进行观察和计数。
2. 计数方法1) 不同规格的计数板的计数方法略有差异,一个大方格是16个中方格的(16×25),应当数4角4个中方格(即100个小方格)的菌数;一个大方格是25个中方格的(25×16),除取4角4个中方格外,还要数中央一个中方格(即为80个小方格)的菌数。
实验十一水中细菌总数的测定
根据菌落计数结果,计算每毫升水样中的细菌总数。计算公式 为:细菌总数(cfu/mL)=(平均菌落数×稀释倍数)/接种体 积。同时,计算标准差和变异系数,评估结果的可靠性。
04 实验结果与数据分析
菌落形态描述及数量统计
菌落形态
在培养皿中观察到不同形态的菌落, 包括圆形、不规则形状等。菌落表面 光滑或粗糙,颜色也有所不同,从白 色到黄色不等。
结果分析与讨论
结果分析
根据实验结果,可以对水样中的细菌总数进行评估。如果细菌总数超过了相应的卫生标准,则说明水 样受到了污染,需要采取相应的措施进行处理。
结果讨论
在实验过程中,可能会受到一些因素的影响,如温度、pH值、营养物质等。这些因素可能会导致实验 结果的偏差。因此,在讨论实验结果时,需要考虑这些因素的影响,并对实验结果进行合理的解释和 讨论。同时,也可以提出改进实验方法的建议,以提高实验的准确性和可靠性。
时一般采用平板计数法,选择菌落数在30-300之间的平板进行计数,
以确保结果的准确性。
03 实验步骤与操作
样品稀释与接种
样品稀释
取1mL水样,加入9mL无菌水中,充分混匀,得到10^-1稀释液。以此类推, 制备10^-2、10^-3等稀释液。
接种
分别取不同稀释度的水样1mL,倾注于无菌平皿中,每个稀释度做两个平行样。 同时,以无菌水作空白对照。
计数误差
在细菌计数过程中,可能因计数不准确或视野选择不当导 致误差。为减小误差,应采用合适的计数方法,如平板计 数法,并选择具有代表性的视野进行计数。
提高实验准确性的建议
严格控制实验条件
在实验过程中,应严格控制温度、湿 度、光照等实验条件,确保实验结果 的准确性和可重复性。
平板菌落计数法实验报告
平板菌落计数法实验报告实验目的,通过平板菌落计数法,对水样中的细菌进行计数,了解水质的微生物污染情况。
实验原理,平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法,通过将待测水样在琼脂平板上平铺,培养后观察并计数菌落数量,从而得出水样中细菌的数量。
该方法适用于较为清澈的水样,能够较为准确地反映水样的微生物污染情况。
实验步骤:1. 准备琼脂平板和待测水样。
2. 将琼脂平板在恒温箱中加热至液态状态后取出,待稍微冷却至手持温度。
3. 取出待测水样,用移液器吸取一定体积的水样,滴于琼脂平板表面。
4. 用平板旋转器使水样均匀分布在琼脂平板表面。
5. 将琼脂平板倒置放置在恒温箱中,进行培养。
6. 培养后观察琼脂平板上的菌落情况,并进行计数。
实验结果:经过培养后,观察到琼脂平板上出现了多个菌落,通过放大镜进行计数,得出了水样中细菌的数量。
根据实验结果,可以初步判断水样的微生物污染情况。
实验分析:通过平板菌落计数法,我们可以对水样中的细菌数量进行快速、准确的估计。
然而,需要注意的是,该方法只能对能够在琼脂平板上生长的细菌进行计数,对于一些特殊菌种可能无法准确反映其数量。
因此,在实际应用中,需要结合其他方法进行综合分析。
实验总结:平板菌落计数法是一种简单、直观的微生物计数方法,适用于对水样等液体样品中的微生物进行快速检测。
在实际操作中,需要严格控制实验条件,确保实验结果的准确性。
同时,结合其他检测方法,可以更全面地了解样品的微生物污染情况。
通过本次实验,我们对平板菌落计数法有了更深入的了解,也增加了对水质微生物污染检测方法的掌握。
希望能够通过这些实验,为今后的科研工作和实际应用提供一定的参考和帮助。
显微镜的直接计数和细菌大小测定
各中格中菌数
A
12345 第一室
第二室
B 二室平 菌数/ml 均值
16小格 × 25大格计数室
25小格 × 16大格计数室
计数室的两种刻度形式
(6) 当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计 数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只 计数下方和左方线上的酵母细胞)。 (7) 对每个样品计数三次,取其平均值,按下 列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。
3.计算公式
(1)16格×25格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/
(3) 将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室 上加盖专用的厚玻片。 (4) 将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于 盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸 水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计 数室内。 (5) 计数时,如果使用16格×25格规格的计数室, 要按对角线位,取左上、右上、左下、右下4个中 格(即100个小格)的酵母菌数。如果规格为25格 ×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需 再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
范围/μm
计(3)数先室酵用通低母常倍有菌镜两观种察规,格对。准焦距,待看清物镜测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与物镜测微尺的刻度相平行,并使两尺
的左边第一条线相重合,再向右寻找两尺的另外一条重合线。
(3) 将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。
2、显微镜直接计数结果
若不干净,则必须重复清洗直到干净为止。
目接镜目测 镜微微的尺放生每大物格倍代数表__目的__长_镜_度__测/μm微尺每
微生物的平皿计数实验报告
微生物的平皿计数实验报告
一、实验目的
1、明确血细胞计数板计数的原理。
2、掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。
二、基本原理
显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液(菌悬液)置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),在显微镜下通过直接计数,测定菌悬液中微生物细胞或孢子浓度的一种方法。
常用的计菌器有:血细胞计数板、Peteroff-Hauser 计菌器以及Hawksley计菌器等,都可用于酵母、细菌、霉菌孢子等悬液的计数,而且基本原理相同。
但后两种计菌器由于盖上盖玻片后,盖玻片和载波片之间的距离只有0.02mm,因此可用油浸物镜对细菌等较小的细胞进行观察和计数。
除用这些计菌器外,还有在显微镜下直接观察涂片面积与视野面积之比的估算法,如此法用于牛乳的细菌学检查。
显微镜直接计数法直观、快速、操作简单的优点,但此法存在着测得的结果系死菌体和活菌体的总和的缺点。
三、器材
1、菌种酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
2、仪器或其他用具血球计数板、血球计盖玻片、显微镜、无菌毛细滴管。
四、操作步骤
1、菌悬液制备
以无菌生理盐水将酿酒酵母制成浓度适当的菌悬液。
2、镜检计数室
在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。
若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数。
3、加样品将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片,再用无菌的毛细滴管将摇匀的酿酒酵母菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴,让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室,一般计数室均能充满菌液。
取样时先要摇匀菌液。
河水泥水中细菌的检查实验报告
河水泥水中细菌的检查实验报告
实验目的:
通过对河水和泥水中细菌的检查,了解水体的卫生状况,为水质监测提供参考依据。
实验原理:
采用培养基平板计数法,将水样分别接种在含有营养物质的培养基上,利用细菌的生长繁殖特性,通过计数细菌的数量来评估水质的卫生状况。
实验步骤:
1.准备培养基:将营养琼脂培养基加热至液态状态,倒入培养皿中,待凝固后备用。
2.采集水样:在河水和泥水中分别采集适量的水样,避免污染。
3.接种培养基:用无菌的铂丝或吸管,将水样分别接种在培养基上,用铂丝在培养基表面划线,以便于计数。
4.培养:将接种好的培养皿放入恒温培养箱中,以适宜的温度和湿度进行培养。
5.计数:在培养好的细菌菌落中,用计数板或显微镜进行计数,得出细菌数量。
实验结果:
经过培养和计数,河水中细菌数量为100 CFU/mL,泥水中细菌数量为1000 CFU/mL。
实验结论:
河水和泥水中细菌数量均超过了国家卫生标准规定的限值,说明水质存在一定的卫生问题,需要加强水质监测和治理。
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血球计数板法测水样细菌数量实验报告
周畅
一、实验目的
1.为了巩固显微镜使用操作
2.学习血球计数板的使用
3.估计1ml污水水样溶入100ml水中后,1ml水中所含有的细菌
数量
二、实验原理
血球计数板:是一块特制的载玻片,其上表面中央部分由四条槽分成三个平台。
中间平台又被一短槽一分为二,每边各有一个方格网,每个方格网有九个大小相等的大方格,中间的一个大方格即计数室,就是计数微生物或细胞的部位。
计数室刻度一般有两种规格:
A、大方格分成16个中方格,而中方格又分成25个小方格的一
种 (图上)
B、大方格分成25个中方格,而中方格又分成16个小方格的一种(图上)。
但两种规格的计数板均有400个(16×25 或25×16)小方格。
计数室容积一定,将待测标本的均匀悬液放在计数室中并在显微镜下计数,就可算出单位体积内的微生物总数目。
计数室容积为1×1×0.1=0.1mm3=10-4ml
计数公式: 1ml悬液中的微生物总数(个) = A×B×n×104 A为每个中方格中的微生物数平均值,B为稀释倍数,n为每大方格中的中方格数。
三、实验器材
1台显微镜、1块血球计数板、1ml的污水水样、滴管、盖玻片数块、吸水纸。
四、实验步骤
(1)称取1ml污水加入100ml的水中,配制成溶液。
(2)镜检、加样前,先要检查计数室内有无污物,若有则需清洗后烘干使用。
(3)加样、血球计数板上盖上清洁干燥的盖玻片,用无菌的细口滴管将稀释的微生物悬液从盖玻片边缘滴一小滴(不宜过多)。
这样通过毛细渗透作用液体可沿缝隙进入计数室,注意要使计数室中不产生气泡并且充盈稀释液。
(4)计数、将计数板置于载物台上静置5分钟左右,先用低倍镜找到计数室,然后换上高倍物镜。
分别计数任意5个中方格内的微生物数(最好选4个角和中央的方格)。
位于格线上的菌体或微生物一般只数上线和右线上的或下线和左线上的。
要计数两个计数室求平均值。
(5)重复以上操作5次记录下5次计数的5个区域内的各族数据,并求其平均值。
(6)清洗、一般用水冲洗血球计数板,切勿用硬物洗刷,以免磨损计数室。
洗完后要烘干或晾干。
镜检,直至干净。
五、实验数据记录
六、实验结果
5组实验的总平均值= (个)标准差= (个的平方)
所以1ml水中大约有万个酵母菌。
七、实验注意事项
1.吸取溶液必须滴在血球计数板的边上让其自然流入,不能直接
滴在观测处,防止溶液过多造成误差。
且在溶液时血球计数板必须拿平,防止细菌一边多一边少。
2.在使用前必须用显微镜观察,确保血球计数板的洁净。
3.计数时,必须保证每个框内压线的都计左边和上边,右边和下
边不计。