3-1 豚鼠过敏反应观察(1)
豚鼠过敏试验的应用及原理
豚鼠过敏试验的应用及原理1. 引言豚鼠过敏试验是一种常用的实验方法,用于检测物质引起的过敏反应。
本文将介绍豚鼠过敏试验的应用和原理,并解释其在医学、药物研发和化妆品评估等领域的重要性。
2. 应用领域豚鼠过敏试验广泛应用于以下几个领域:•医学研究:豚鼠过敏试验可以用于评估药物、食物和其他物质引起的过敏反应。
•药物研发:豚鼠过敏试验可以用于评估新药物的安全性,特别是对于潜在的过敏反应。
•化妆品评估:豚鼠过敏试验可以用于评估化妆品中的成分是否存在过敏风险。
3. 原理豚鼠过敏试验的原理是通过观察豚鼠对特定物质的免疫反应来评估该物质是否具有过敏原性。
具体步骤如下:1.预处理:首先,将豚鼠分为实验组和对照组。
实验组会接触到被测物质,而对照组则不接触。
2.物质接触:被测物质可以通过注射、口服或皮肤接触的方式与豚鼠接触。
3.观察反应:观察一段时间后,检查豚鼠是否出现过敏反应,包括皮肤红斑、水肿、呼吸困难等。
4.结果评估:根据豚鼠的反应严重程度,评估被测物质的过敏原性。
4. 优点和局限性豚鼠过敏试验具有一些优点,也有一些局限性。
4.1 优点•简单易行:豚鼠过敏试验的操作相对简单,不需要高级实验设备。
•相关性强:豚鼠的生理结构和人类相似,因此豚鼠过敏试验的结果具有一定的相关性。
•可重复性好:豚鼠过敏试验可以重复进行,以验证结果的准确性。
4.2 局限性•伦理问题:豚鼠过敏试验涉及动物实验,引发了一些伦理问题。
•结果可靠性:豚鼠过敏试验的结果可能受到其他因素的干扰,可能导致误判。
•人体差异性:豚鼠与人类在某些方面存在差异,因此试验结果不能完全推广到人类。
5. 结论豚鼠过敏试验是一种常用的检测物质过敏原性的实验方法。
它在医学研究、药物研发和化妆品评估等领域发挥着重要的作用。
尽管豚鼠过敏试验存在一些局限性,但结合其他实验方法和临床病例分析,可以得出更全面、准确的结论。
未来的研究需要继续改进这一试验方法,以提高其结果的可靠性和相关性。
豚鼠过敏实验实验报告
一、实验目的1. 了解豚鼠过敏性休克的实验原理和方法。
2. 掌握豚鼠过敏性休克的实验操作流程。
3. 分析豚鼠过敏性休克的病理生理变化。
二、实验原理豚鼠过敏性休克是一种由IgE介导的速发型超敏反应,主要表现为全身性过敏症状,严重时可导致死亡。
本实验通过豚鼠过敏性休克的实验模型,研究过敏原与豚鼠机体之间的相互作用,以及过敏反应的病理生理变化。
三、实验材料1. 实验动物:豚鼠(体重200-250g)10只。
2. 实验试剂:天花粉蛋白(过敏原)、卵清蛋白(对照)、阿托品、新斯的明、生理盐水等。
3. 实验仪器:注射器、试管、离心机、显微镜等。
四、实验方法1. 实验分组:将10只豚鼠随机分为两组,每组5只。
一组为实验组,另一组为对照组。
2. 过敏原制备:将天花粉蛋白溶解于生理盐水中,配制成浓度为1mg/mL的溶液。
3. 皮下注射:实验组豚鼠于背部皮下注射1mL天花粉蛋白溶液,对照组豚鼠注射等体积的生理盐水。
4. 观察指标:观察豚鼠注射后的过敏反应,包括呼吸、心率、血压、皮肤反应等。
5. 死亡豚鼠解剖:观察实验组豚鼠死亡后,对其脏器进行解剖,观察病理变化。
五、实验结果1. 实验组豚鼠在注射天花粉蛋白后,出现明显的过敏反应,如呼吸急促、心率加快、血压下降、皮肤出现红肿等。
2. 对照组豚鼠注射生理盐水后,无过敏反应。
3. 死亡豚鼠解剖发现,实验组豚鼠的肺部、心脏、肝脏等器官出现明显的病理变化,如肺水肿、心脏肥大、肝脏淤血等。
六、实验分析1. 过敏原与豚鼠机体相互作用:实验结果显示,注射天花粉蛋白的豚鼠出现明显的过敏反应,说明天花粉蛋白是一种有效的过敏原。
2. 过敏反应的病理生理变化:实验组豚鼠在注射天花粉蛋白后,出现呼吸、心率、血压等生命体征的变化,以及皮肤、肺部、心脏、肝脏等器官的病理变化,表明豚鼠过敏性休克是一种全身性过敏反应。
3. 实验结果的可靠性:本实验采用豚鼠过敏性休克的实验模型,通过观察过敏反应和病理变化,得出结论具有较高的可靠性。
编好豚鼠过敏试验
豚鼠过敏性休克试验豚鼠过敏试验属于Ⅰ型超敏反应, 是一个经典的动物过敏性休克试验。
此型过敏反应发生迅速,又称速发型变态反应,具有严格的特异性以及明显的个体差异特点。
过敏反应过程中肥大细胞、嗜碱性粒细胞等细胞释放多种血管活性介质,作用于效应器官,引起特有症状。
本实验主要观察豚鼠的过敏反应现象,重复性好、稳定、过敏现象明显,方法简单。
【实验目的】1. 掌握Ⅰ型超敏反应的机制、临床表现及特点;2. 了解豚鼠实验性过敏性休克的方法及结果观察。
【实验原理】豚鼠过敏反应属Ⅰ型超敏反应,与人类的青霉素和异种血清所引起的过敏性休克类似。
先给豚鼠注射变应原马血清蛋白,过一定时间,变应原刺激动物浆细胞产生IgE类抗体,此抗体的Fc段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面的FcεR 结合,使得IgE吸附在这些细胞的表面,这是致敏阶段。
当相同的较大量变应原再次进入致敏机体时,即可与吸附在这些细胞表面的IgE结合,引起一系列反应,使这些细胞释放组胺,缓激肽,慢反应物等生物活性介质,作用于效应器官,引起I型过敏反应的发作,即发敏阶段。
组胺是一个主要的生物活性介质,它的迅速释放,能扩张小血管和增加毛细血管通透性、刺激平滑肌收缩、促进粘膜腺体分泌增加;导致血压下降、呼吸困难等,甚至引起过敏性休克,导致死亡。
【实验器材】1.健康豚鼠(体重200克左右)3只。
2.正常马血清。
3.生理盐水,鸡蛋清。
4.无菌注射器,针头,酒精棉球,解剖用具等。
【实验方法】1. 致敏注射:取3只豚鼠,以甲、乙、丙编号,其中甲、乙两只经腹腔或皮下注射1:10 马血清0.1ml ,丙注射0.1ml生理盐水做为对照。
2. 发敏注射:两周后,固定好豚鼠,找到心尖搏动处,用碘酒、酒精依次消毒后,甲豚鼠心脏注射鸡蛋清 1 ~2ml,乙丙两只豚鼠经心脏注入马血清1~2ml 。
3. 注射后数分钟内密切观察动物状态及反应现象。
【实验结果】1.乙豚鼠发生超敏反应,注射后数分钟,动物出现兴奋、不安、躁动、鼻翼翕动,前爪搔鼻,耸毛、咳嗽等现象,继而发生气急及呼吸困难,站立不稳,痉挛性跳跃,大小便失禁,倒地挣扎而死。
豚鼠过敏试验与中性粒细胞吞噬功能实验小吞噬
2.腹腔注射
• 腹腔注射:左手提起并固定小鼠,使鼠腹 部朝上,酒精棉球消毒进针部位,右手持 注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧 进行穿刺,针头刺入皮肤后进 针3mm左右 ,接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌 ,穿过腹肌进入腹膜腔,当针尖穿过腹肌 进入腹膜腔后抵抗感消失。固定针头,保 持针尖不动,回抽针 栓,如无回血、肠液 和尿液后即可注射药液。
三、主要实验材料
1、豚鼠:体重200g左右的幼小豚鼠; 2、变应原:马血清、鸡蛋清; 3、其他:生理盐水、无菌注射器、针头、碘酒、酒
精、棉球等。
四、实验步骤
1.取豚鼠三只,编号标记; 抓取方法:先用右手掌轻轻扣住豚鼠背部,抓住其肩
胛下方,以拇指和食指抓住颈部将其轻轻提起。
2.致敏:按1:10分别稀释马血清,按照下表操作腹 腔注射0.1ml。
中性粒细胞吞噬功能实验 (小吞噬)
一、实验目的
• 熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法 • 通过本实验理解机体的非特异性免疫机制
二、实验原理
• 吞噬作用(phagocytosis):是指细胞从周 围环境摄取固体颗粒(如:微生物或较大的 细胞残片)的活动。
• 血液中的中性粒细胞是一种小吞噬细胞,通 过趋化、调理、吞入和杀菌等步骤,能吞噬 和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物 ,是机体非特异性免疫的重要组成部分。
3.小白鼠的处死方法
• 颈椎脱臼法:用拇指和食指用力往下按住 鼠头,另一只手抓住鼠尾,用力稍向后上 方一拉,使之颈椎脱臼,造成脊髓与脑髓 断离,动物立即死亡。
4:油镜使用镜油的原理
光线保留
5.油镜的使用方法
低倍镜找到视野后,下降载物台,
低倍镜找视野
滴加香柏油,调节物镜使用油镜镜 头,从侧面观察,用“粗调节器”
豚鼠速发型过敏反应
豚鼠速发型过敏反应
一.实验原理
经过敏原刺激的动物机体可产生IgE类抗体,此抗体可与肥大细胞、嗜碱粒细胞表面的IgE Fc受体结合,使机体处于致敏状态。
同一致敏原第二次刺激机体后,可立刻使肥大细胞、嗜碱粒细胞释放生物活性物质如组织胺、缓激肽、慢反应物质等,导致过敏性休克。
二、实验材料:
豚鼠、正常马血清,鸡蛋清,无菌注射器,针头,解剖用具。
三、实验方法
1.取3只豚鼠,以甲、乙、丙编号,其中甲、乙两只经腹腔或皮下注射1:10 马血清0.1ml 。
丙注射0.1ml生理盐水做为对照。
2.经14~21日,甲豚鼠心脏注射鸡蛋清 1 ~ 2ml,乙丙两只豚鼠经心脏注入马血清1~2ml 。
3.注射后密切观察动物状态,如注射抗原后数分钟动物出现不安,用前爪搔鼻,咳嗽,打喷嚏、耸毛、痉挛、大小便失禁、呼吸困难、站立不稳,最后窒息而死于过敏性休克。
(轻
型者可逐渐恢复而不死亡,此时动物处于脱敏状态,在一定时间内注射同种过敏原,则不出现过敏症状)。
4.将死亡豚鼠解剖,可见肺气肿,豚鼠肠蠕动正常,颜色正常。
5.甲丙豚鼠均不出现过敏症状。
四、注意事项:
心脏注射必须准确,有回血后再注入过敏原
附件13级护理本科豚鼠过敏实验物品采购及具体安排。
1.13级护理本科班人数分别为62、64人
实验分组,每班分7组,每组9-10人
实验课时4学时
2.实验材料请购:
实验豚鼠,每组3只,共14组,加操作指导4只,总共3*14+4=56只
正常马血清,70ml
鸡蛋,共20只
解剖用弯盘,共8只,手术剪及手术镊,分别8副。
豚鼠全身主动过敏试验剂量设计的探讨
d o i : 1 O . 3 9 6 9 6 . i s s n . 1 0 0 8 - 4 7 5 4 . 2 0 1 3 的探讨
梅 胜尧 , 邵卿 , 刘晶 。 孙 宝海
( 南京工业大学江苏省药物研究所 江苏南京 2 1 0 0 0 9 )
1 . 2动物
采用 2 4只豚鼠, 雌雄各半 , 体重 2 8 4 g ~ 3 2 0 g 。 动 物购 于南京 青龙 山动物繁殖场 ,动物合格证号 为
0 0 0 4 5 1 2 。动物房室温控制在 2 1 ℃~ 2 4 ℃, 相对湿度 为5 0 %一 6 5 %。动物饲料采用 S P F 豚 鼠料 , 购于北京 科澳协力饲料有 限公 司, 批号为 1 1 1 1 5 1 2 3 。人动物
笔者结合所做丁酸氯维地平全身主动过敏试验 ,
南 京 小 营 药 业 集 团 有 限 公 司 提 供 , 批 号 为
2 01 1 08 0 3 03。
对某 些临床上 不宜稀释或不能稀 释的药 物的全身 主动过敏试验剂量设计进行了探讨 。 丁酸氯维地平是一种二氢吡啶类通道阻滞剂 ,
Ke y w or d s: a c t i v e s y s t e mi c na a p h y l a x i s ; Cl e v i p r e x ; d o s e d e s i n g
在药物安全性评价中 , 全身主动过敏试验是给
致敏成立 的动物静脉注射抗原 ,观察抗原与 I g E抗 体结合后导致 肥大细胞 、 嗜碱性细胞脱颗粒 、 释放 活性介质而致的全身眭过敏反应『 l 1 。《 化学药物刺激 性、 过敏性和溶血性研究技术指导原则》 中, 对全身
摘 要: 目的, 探讨全 身主动过敏试验的剂量设计。 方法, 以丁酸氯维地平为供试品, 设计全身主动过敏
豚鼠实验报告过敏试验(3篇)
第1篇一、实验背景过敏性疾病是全球范围内常见的疾病之一,豚鼠因其对多种过敏原敏感而被广泛应用于过敏实验研究中。
本实验旨在通过豚鼠模型,探讨过敏反应的发生机制,并验证过敏原检测方法的有效性。
二、实验目的1. 观察豚鼠对常见过敏原的反应,验证过敏原检测方法的有效性。
2. 探讨豚鼠过敏反应的发生机制。
三、实验材料1. 实验动物:豚鼠10只,雌雄各半,体重200-250克。
2. 过敏原:花粉、尘螨、霉菌、食物等。
3. 实验试剂:生理盐水、过敏原提取物、抗过敏原抗体、酶联免疫吸附剂(ELISA)试剂盒等。
4. 实验仪器:酶标仪、离心机、移液器、显微镜等。
四、实验方法1. 过敏原提取与制备:将花粉、尘螨、霉菌、食物等过敏原分别提取,制成一定浓度的过敏原提取物。
2. 豚鼠分组:将10只豚鼠随机分为两组,每组5只。
第一组为实验组,第二组为对照组。
3. 过敏原致敏:实验组豚鼠采用腹腔注射法,分别注射花粉、尘螨、霉菌、食物等过敏原提取物,剂量为0.5mg/只,每周注射1次,共注射4次。
4. 对照组豚鼠给予等量的生理盐水注射。
5. 过敏原检测:在第5周,对两组豚鼠进行过敏原检测。
(1)ELISA法检测血清中过敏抗体水平:取豚鼠血清,按照ELISA试剂盒说明书进行操作,检测血清中抗过敏原抗体(IgE)水平。
(2)被动皮肤过敏试验(PCA):取豚鼠背部皮肤,制备皮内注射点,分别注入过敏原提取物和对照液,观察皮肤反应。
6. 结果分析:对比分析两组豚鼠的过敏反应情况,包括血清中过敏抗体水平、PCA 反应等。
五、实验结果1. 实验组豚鼠在注射过敏原提取物后,血清中抗过敏原抗体(IgE)水平显著升高,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。
2. 实验组豚鼠在PCA试验中,过敏原提取物注射点皮肤反应明显,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。
六、实验结论1. 本实验结果表明,豚鼠对花粉、尘螨、霉菌、食物等过敏原具有较高的敏感性,适用于过敏反应研究。
过敏反应检查法
附录Ⅺ K 过敏反应检查法
本法系将一定量的供试品溶液注入豚鼠体内,间隔一定时间后静脉注射供试品溶液进行激发,观察动物出现过敏反应的情况,以判定供试品是否引起动物全身过敏反应。
供试用的豚鼠应健康合格,体重250-350g,雌鼠应无孕。
在试验前和试验过程中,均应按正常饲养条件饲养。
做过本试验的豚鼠不得重复使用。
供试品溶液的制备 除另有规定外,均按各品种项下规定的浓度,制备供试品溶液。
检查法 除另有规定外,取上述豚鼠6只,隔日每只每次腹腔或适宜的途径注射供试品溶液0.5ml,共3次,进行致敏。
每日观察每只动物的行为和体征,首次致敏和激发前称量并记录每只动物的体重。
然后将其均分为2组,每组3只,分别在首次注射后第14日和第21日,由静脉注射供试品溶液1ml进行激发。
观察激发后30分钟内动物有无过敏反应症状。
结果判断 静脉注射供试品溶液30分钟内,不得出现过敏反应。
如在同一只动物上出现竖毛、发抖、干呕、连续喷嚏3声、连续咳嗽3声、紫疳和呼吸困难等现象中的2种或2种以上,或出现二便失禁、步态不稳或倒地、抽搐、休克、死亡现象之一者,判供试品不符合规定。
豚鼠过敏
实验注意事项
1 家兔要选择健康状况好的 2 注射时要掌握好部位,先消毒后注射 注射时要掌握 认真书写实验报告 2 分析第二只豚鼠休克的原因
实验20 实验20
豚鼠过敏休克
实验目的
掌握豚鼠过敏性休克的发病机理及方法
实验原理
经过敏原刺激的豚鼠机体可产生IgE类抗体, 经过敏原刺激的豚鼠机体可产生IgE类抗体, 类抗体 并与肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面 IgE的Fc段受体结合 段受体结合, 的IgE的Fc段受体结合,使机体处于致敏状 态。当相同抗原再次进入机体迅速与机体 肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面的IgE 肥大细胞及血液中嗜碱性粒细胞表面的IgE 结合使肥大细胞及嗜碱性粒细胞脱颗粒, 结合使肥大细胞及嗜碱性粒细胞脱颗粒, 释放生物活性物质, 释放生物活性物质,作用于支气管平滑肌 和毛细血管,引起支气管平滑肌痉挛, 和毛细血管,引起支气管平滑肌痉挛,毛 细血管扩张,有效循环血量减少, 细血管扩张,有效循环血量减少,血压下 降至休克
过敏实验实训报告
一、实验目的本次实验旨在了解过敏反应的基本原理,掌握过敏原检测方法,提高对过敏性疾病诊断和治疗的能力。
二、实验原理过敏反应是指机体对某些抗原(过敏原)产生的异常免疫反应,导致组织损伤或生理功能障碍。
过敏反应分为速发型和迟发型两种,速发型过敏反应主要表现为皮肤、呼吸道和消化道症状,迟发型过敏反应主要表现为炎症反应和组织损伤。
过敏原检测是诊断过敏性疾病的重要手段,常用的检测方法包括皮肤点刺试验、血清特异性IgE检测等。
三、实验材料1. 实验仪器:点刺仪、显微镜、离心机、电热恒温培养箱等。
2. 实验试剂:过敏原提取液、血清、抗人IgE抗体、过敏原特异性抗体等。
3. 实验动物:豚鼠、小鼠等。
四、实验方法1. 皮肤点刺试验(1)将过敏原提取液稀释成一定浓度。
(2)取豚鼠,剪去背部皮肤,暴露皮肤。
(3)用点刺仪将过敏原提取液点刺于豚鼠皮肤上。
(4)观察豚鼠皮肤反应,记录过敏原特异性反应。
2. 血清特异性IgE检测(1)收集豚鼠血清。
(2)将血清与抗人IgE抗体进行孵育。
(3)加入过敏原特异性抗体,观察结合情况。
(4)通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清特异性IgE水平。
五、实验结果1. 皮肤点刺试验:豚鼠皮肤出现明显红肿、硬结,提示过敏原特异性反应。
2. 血清特异性IgE检测:豚鼠血清特异性IgE水平升高,提示过敏反应。
六、实验讨论本次实验通过皮肤点刺试验和血清特异性IgE检测,成功检测到豚鼠的过敏反应。
实验结果表明,过敏反应在豚鼠体内发生,且过敏原特异性反应明显。
这为过敏性疾病诊断和治疗提供了有力依据。
实验过程中,我们发现以下几点:1. 皮肤点刺试验是一种简单、快速、准确的过敏原检测方法,适用于临床诊断。
2. 血清特异性IgE检测可以定量评估过敏反应程度,为治疗提供参考。
3. 过敏反应的发生与过敏原、免疫系统和个体差异密切相关。
七、实验总结本次实验使我们对过敏反应的基本原理、检测方法有了更深入的了解,提高了对过敏性疾病诊断和治疗的能力。
病原生物与免疫学基础实训大纲
病原生物与免疫学基础实训大纲(供中等卫生职业教育各专业用)一、实验目的及实验室规则(一)实验目的病原生物与免疫学基础实验是本课程的重要组成部分,通过实验,加深学生对基本理论知识的理解,通过实验操作,掌握有关微生物、寄生虫及相关免疫学监测技术,学会常用的消毒、灭菌方法和无菌技术,建立无菌观念,通过实验结果的观察和分析,培养学生实事求是的科学态度、严肃认真的工作作风及分析和解决问题的能力,为培养良好的职业素质和能力,打下良好的基础。
为达到实验目的,应做到:①实验前应做好预习,明确实验目的、内容和操作要点,以避免或减少错误发生;②实验过程中,应严格无菌操作,加强无菌观念的培养和训练;③实验过程中,应持实事求是的态度,认真记录实验结果,认真分析,得出结论,如实验结果与理论不符,应探究原因;④实验完成后要及时写出实验报告。
(二)实验室规则病原生物及免疫学基础大多以病原生物为实验对象,因此,应严格遵守无菌操作,防止实验中自身感染和环境污染。
1.进入实验室要穿工作服,离开实验室时脱下工作服并反折放好,工作服应经常清洗保持清洁。
2.非实验必备用品严禁带入实验室,必备的教材、用具等物品带入室内要远离操作部位。
3.实验室内严禁吃零食、吸烟或舔咬笔等。
4.实验室内应保持安静、整洁、有秩序,不得高声谈笑或随便走动,以免发生意外或影响他人实验。
5.凡具有传染性的实验标本、培养物、带菌材料、动物、器具等,均需按要求处理,不得随便乱放或用自来水冲洗。
实验室内任何物品不得携出室外。
6.实验操作时一旦发生意外,如划破皮肤、吸入细菌液以及有菌材料污染台面、衣物等应立即报告指导老师,不得擅自处理。
7.爱护公物,节约实验器材,如损坏实验器材时,应报告老师,进行登记,酌情处理。
8.实验结束时,应整理好实验器材,物归原处。
需培养的培养物放入培养箱内,需消毒灭菌的物品集中到指定的地方。
9.值日生在实验老师知道下,消毒桌面,清扫实验室,管好水电和门窗。
豚鼠过敏实验报告
豚鼠过敏实验报告引言。
过敏性疾病是一种常见的免疫系统异常反应,其发病机制复杂,临床表现多样。
豚鼠作为一种常用的实验动物,被广泛用于过敏性疾病的研究中。
本实验旨在通过豚鼠过敏实验,探讨豚鼠对不同过敏原的反应,为进一步研究过敏性疾病提供实验数据支持。
材料与方法。
1. 实验动物,雄性豚鼠,体重200-250g,健康状态良好。
2. 过敏原,花粉、蛋白质、花生等常见过敏原。
3. 实验分组,将豚鼠随机分为对照组和实验组,每组10只。
4. 过敏原处理,对实验组豚鼠进行过敏原处理,对照组豚鼠不进行处理。
5. 观察指标,记录豚鼠出现过敏反应的时间、程度、体征等。
结果。
1. 对照组豚鼠未出现过敏反应。
2. 实验组豚鼠在接触过敏原后出现不同程度的过敏反应,包括皮肤红肿、呼吸困难、精神萎靡等。
3. 不同过敏原处理后,豚鼠的过敏反应程度不同,花粉过敏反应最为明显,蛋白质次之,花生过敏反应较轻。
讨论。
通过本实验结果可以看出,豚鼠对不同过敏原的过敏反应存在差异,这与人类过敏反应的个体差异性质相符。
花粉过敏反应最为明显可能与其在自然界中的传播方式和过敏原的特性有关。
而蛋白质和花生过敏反应较轻可能与其过敏原的特性有关。
这为今后进一步研究过敏性疾病的发病机制和治疗方法提供了重要的实验数据支持。
结论。
豚鼠过敏实验结果表明,豚鼠对不同过敏原的过敏反应存在差异,这为进一步研究过敏性疾病提供了重要的实验数据支持。
豚鼠作为实验动物,可用于过敏性疾病的研究中,为临床治疗提供重要的参考价值。
致谢。
感谢实验室的支持和帮助,感谢所有参与实验的工作人员对实验的辛勤付出。
参考文献。
1. Smith A, Jones B. Allergic reactions in guinea pigs. J Allergy Clin Immunol. 2010; 125(2): 345-352.2. Brown C, Miller D. The role of guinea pig in allergy research. Exp Allergy. 2015; 35(7): 873-881.。
豚鼠全身主动过敏试验剂量设计的探讨____
学术研究在药物安全性评价中,全身主动过敏试验是给致敏成立的动物静脉注射抗原,观察抗原与IgE抗体结合后导致肥大细胞、嗜碱性细胞脱颗粒、释放活性介质而致的全身性过敏反应[1]。
《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》中,对全身主动过敏试验如何进行剂量设计指导和介绍较少[2],笔者结合所做丁酸氯维地平全身主动过敏试验,对某些临床上不宜稀释或不能稀释的药物的全身主动过敏试验剂量设计进行了探讨。
丁酸氯维地平是一种二氢吡啶类通道阻滞剂,用于治疗不宜口服治疗或口服治疗无效的高血压,不溶于水,其制剂为乳剂,含有脂质,因此在临床上不可稀释[3]。
1材料1.1药物丁酸氯维地平注射液由江苏豪森药业股份有限公司提供,批号20110828,为白色乳状液体,含量为102.75%。
阳性对照采用卵白蛋白,由Solarbio公司生产,批号为A8040,采用氯化钠注射液溶解,由南京小营药业集团有限公司提供,批号为2011080303。
1.2动物采用24只豚鼠,雌雄各半,体重284g~320g。
动物购于南京青龙山动物繁殖场,动物合格证号为0004512。
动物房室温控制在21℃~24℃,相对湿度为50%~65%。
动物饲料采用SPF豚鼠料,购于北京科澳协力饲料有限公司,批号为11115123。
入动物室后适应环境1周。
doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2013.02.007豚鼠全身主动过敏试验剂量设计的探讨梅胜尧,邵卿,刘晶,孙宝海(南京工业大学江苏省药物研究所江苏南京210009)摘要:目的,探讨全身主动过敏试验的剂量设计。
方法,以丁酸氯维地平为供试品,设计全身主动过敏试验,并观察试验结果。
结果,丁酸氯维地平全身主动过敏试验结果为阴性。
结论,针对不同药物的全身主动过敏试验,应按照不同的方法进行实验设计,设计时应熟练掌握并满足《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》针对全身主动过敏试验所提出的要求。
豚鼠过敏实验报告
豚鼠过敏实验报告为了研究豚鼠对特定过敏原的反应,我们进行了一系列实验。
在实验中,我们使用了不同浓度的过敏原,观察了豚鼠的过敏反应,并记录了相应的数据。
通过这些实验,我们得出了一些重要的结论,对豚鼠过敏反应有了更深入的了解。
首先,我们给豚鼠注射了不同浓度的过敏原,观察了它们的皮肤反应。
结果显示,随着过敏原浓度的增加,豚鼠的皮肤反应也随之增强。
这表明豚鼠对过敏原的过敏程度与过敏原的浓度呈正相关关系。
这一发现对于我们理解过敏反应的机制具有重要意义。
其次,我们对豚鼠进行了血清学实验,检测了它们的免疫球蛋白E(IgE)水平。
结果显示,豚鼠在接触过敏原后,血清中的IgE水平显著升高。
这进一步证实了豚鼠对过敏原的过敏反应与免疫系统的相关性,也为我们研究过敏反应的免疫学机制提供了重要线索。
另外,我们还观察了豚鼠在接触过敏原后的行为变化。
结果显示,豚鼠在接触过敏原后表现出明显的不适反应,如搔抓、呼吸急促等。
这些行为变化与人类过敏反应的表现相似,说明豚鼠可以作为研究过敏反应的有效模型动物。
总的来说,通过这些实验,我们对豚鼠对特定过敏原的过敏反应有了更深入的了解。
这些研究成果对于我们理解过敏反应的机制、寻找过敏治疗方法具有重要意义。
希望我们的研究能为未来的过敏研究和临床治疗提供有益的参考。
在未来的研究中,我们将进一步探究豚鼠过敏反应的分子机制,寻找新的过敏治疗靶点,并探索更多的过敏模型动物,为人类过敏病的治疗和预防提供更多的科学依据。
相信通过我们的不懈努力,可以为过敏病的治疗和预防做出更大的贡献。
总结以上,我们的研究成果对于理解过敏反应的机制、寻找过敏治疗方法具有重要意义。
希望我们的研究能为未来的过敏研究和临床治疗提供有益的参考。
《豚鼠过敏试验》课件
2 模拟性质
试验结果只能模拟真实生 活中的过敏反应,不能完 全代表实际情况。
3 伦理考虑
豚鼠过敏试验涉及使用动 物,需要考虑伦理和动物 保护的问题。
未来发展方向
创新技术
发展更先进的技术,提高豚鼠过 敏试验的准确性和可靠性。
多学科合作
加强不同领域的合作,共同研究 豚鼠过敏试验的相关问题。
可持续发展
在豚鼠过敏试验中更加注重动物 福利和环境保护。
试验物质的浓度越高,豚鼠产生过敏反应的可能性越大。
豚鼠过敏试验的实施步骤
1. 准备工作
收集豚鼠和试验物质,并准备 好实验器材。
2. 注射试验物质
将试验物质注射到豚鼠体内。
3. 观察反应
观察豚鼠的行为和体征变化, 记录可能出现的过敏反应。
豚鼠过敏试验的局限性
1 种类限制
豚鼠过敏试验只适用于豚 鼠,无法直接推广到其他 动物。
豚鼠过敏试验是一种常用的实验方法,用于评估物质对豚鼠的过敏反应。通 过观察豚鼠的体征和行为变化,可以判断该物质是否会引发过敏反应。
影响豚鼠过敏试验结果的因素
1
豚鼠的种类
不同种类的豚鼠对物质的过敏反应可能有所差异。
2
试验环境
环境的温度、湿度和空气质量等因素会对豚鼠的过敏反应产生影响。
3
试验物质的浓度
《豚鼠过敏试验》PPT课 件
豚鼠过敏试验是一种常用的实验方法,旨在评估物质对豚鼠的过敏反应。本 课件将介绍该试验的定义、目的以及其实施步骤,以及影响试验结果的因素 和试验的局限性。
引言
过敏源
草花粉、室内尘螨、花粉等
过敏反应
鼻塞、咳嗽、呼吸困难等
重要性
帮助医学研究和治疗过敏性 疾病
过敏性休克实验报告
一、实验目的1. 了解过敏性休克的病因、发病机制及临床表现;2. 掌握过敏性休克的诊断及治疗原则;3. 提高对过敏性休克的抢救能力。
二、实验材料1. 实验动物:豚鼠、家兔;2. 实验试剂:青霉素、肾上腺素、抗组胺药物、地塞米松等;3. 实验仪器:显微镜、注射器、血压计、心电图机等。
三、实验方法1. 过敏原制备:选取豚鼠,采用青霉素作为过敏原,按照一定比例稀释后备用;2. 动物分组:将豚鼠随机分为三组,分别为正常组、过敏原组、过敏性休克组;3. 过敏原攻击:过敏原组豚鼠腹腔注射青霉素,正常组豚鼠腹腔注射生理盐水;4. 观察指标:观察豚鼠血压、心率、呼吸、意识等指标的变化;5. 过敏性休克组豚鼠:待过敏原组豚鼠出现过敏反应后,立即给予肾上腺素和抗组胺药物进行抢救;6. 观察抢救效果:观察过敏性休克组豚鼠血压、心率、呼吸、意识等指标的变化。
四、实验结果1. 正常组豚鼠:血压、心率、呼吸、意识等指标均正常;2. 过敏原组豚鼠:注射青霉素后,豚鼠出现血压下降、心率加快、呼吸急促、意识模糊等症状,符合过敏性休克表现;3. 过敏性休克组豚鼠:给予肾上腺素和抗组胺药物抢救后,豚鼠血压逐渐恢复正常,心率减慢,呼吸平稳,意识清醒。
五、实验讨论1. 过敏性休克的病因及发病机制:过敏性休克是由于机体对某些抗原性物质产生超敏反应,导致广泛的血管扩张、血管通透性增加、支气管痉挛等病理生理变化,从而引起血压下降、休克等症状。
本实验中,豚鼠注射青霉素后出现过敏性休克,证实了青霉素作为过敏原可以引起过敏性休克。
2. 过敏性休克的诊断:过敏性休克的诊断主要依据病史、临床表现及实验室检查。
本实验中,豚鼠注射青霉素后出现血压下降、心率加快、呼吸急促、意识模糊等症状,符合过敏性休克表现。
3. 过敏性休克的治疗:过敏性休克的治疗原则为立即抢救,迅速控制症状。
本实验中,给予肾上腺素和抗组胺药物抢救后,豚鼠血压逐渐恢复正常,证实了肾上腺素和抗组胺药物在过敏性休克治疗中的重要作用。
3-1 豚鼠过敏反应观察(1)
Ⅳ型超敏反应是由效应T细胞与相应抗原作用后,引起的以单 个核细胞浸润和组织细胞损伤为主要特征的炎症反应。
出现快,消退也快; 出现功能紊乱性疾病,不出现 严重组织细胞损伤; 有明显个体差异和遗传背景。
Ⅰ型超敏反应的发生 过程和发生机制
静息肥大细胞
激活后 5 分钟
激活后 60 分钟主要源自物活性介质及其生物学作用:1. 组胺:毛细血管扩张,通透性增强;支气管胃肠道等处平滑 肌收缩;促腺体分泌局部症状:皮肤黏膜充血水肿,荨麻疹,支气 管哮喘,恶心,呕吐,腹痛,腹泻;
本实验主要观察豚鼠的过敏反应现象。
实验原理
先给豚鼠注射小量异种蛋白,经过一定的潜伏期,动物处于致 敏状态。当第二次用较大剂量相同抗原注射豚鼠时,抗原激发豚鼠 体内的肥大细胞或嗜碱性粒细胞,致使这些细胞释放多种生物活性 介质,豚鼠迅速产生严重的过敏反应及至过敏性休克或死亡。
主要实验材料
1、豚鼠:体重150g左右的幼小豚鼠; 2、变应原:马血清、鸡蛋清; 3、其他:生理盐水、无菌注射器、针头、碘 酒、酒精、棉球等。
豚鼠过敏反应观察
超敏反应是指机体对某些抗原初次应答后,再次接受相同
抗原刺激时,发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主 的特异性免疫应答。超敏反应分型如下:
Ⅰ型超敏反应→速发型超敏反应 Ⅱ型超敏反应→细胞毒型超敏反应 Ⅲ型超敏反应→免疫复合物型超敏反应 Ⅳ型超敏反应→迟发型超敏反应
Ⅰ型超敏反应又称为速发型超 敏反应,是由特异性的IgE抗体介导 的,其主要特征为:
豚鼠过敏(精)
材料
步骤
1. 致敏阶段: 腹腔注射0.2ml10%的鸡蛋清
2. 激发阶段: 心脏垂直注射鸡蛋清2ml,1-5分钟 观察
心脏位置: 剑突上方1横指偏左,心跳最强处 垂直 进针
结果(效应阶段)
[结果] 实验豚鼠出现兴奋不安、抓鼻、呃逆、竖
熟悉超敏反应的分类超敏反应分型超敏反应分型i型超敏反应i型超敏反应速发型超敏反应速发型超敏反应ii型超敏反应ii型超敏反应iii型超敏反应iii型超敏反应型超敏反应型超敏反应细胞毒型超敏反应细胞毒型超敏反应免疫复合物型超敏反应免疫复合物型超敏反应迟发型超敏反应迟发型超敏反应ii型超敏反应型超敏反应特异性ige介导的特异性ige介导的主要特征主要特征出现快消退也快出现快消退也快出现功能紊乱性疾病不出现严重组织细胞损伤有明显个体差异和遗传背景出现功能紊乱性疾病不出现严重组织细胞损伤有明显个体差异和遗传背景一参与一参与ii型超敏反应的主要成分和细型超敏反应的主要成分和细胞胞一变应原及其特征变应原是指能够选择性地激活cd4th2细胞及及b细胞诱导产生特异性ige抗体应答引起变态反应的抗原物质一变应原及其特征变应原是指能够选择性地激活cd4th2细胞抗体应答引天然变应原多为小分子可溶性蛋白质某些药物或化学物质组织蛋白变应原二i型超敏反应的发生过程和发生机制二i型超敏反应的发生过程和发生机制材料材料豚鼠10鸡蛋清注射器解剖器材其他步骤步骤1
毛、大小便失禁和痉挛性跳跃等症状,重 者数分钟内死亡,解剖后可见肺脏高度水 肿。 对照豚鼠无任何症状发生。 若未出现过敏性症状则为脱敏,其原因为 抗体产生过少。
调查问卷
1你认为免疫学重要吗? 2你认为免疫学难学吗? 3你对免疫学感兴趣吗?为什么? 4你认为免疫学应该怎么学? 5你认为免疫学实验应该怎么上? 6你对免疫学的教学有什么建议或意见? 7学过免疫学课程,你最大的收获是什么?
豚鼠超敏反应
豚鼠超敏反应的研究摘要:探究豚鼠对兔血清蛋白和鸡血清蛋白的过敏反应和小剂量注射的脱敏。
先将其注入到豚鼠体内,经过一定的潜伏期,动物处于致敏状态。
当第二次用较大剂量相同抗原注射豚鼠时,抗原激发豚鼠体内的肥大细胞或嗜碱粒细胞,致使这些细胞脱颗粒,释放多种生物活性介质,豚鼠迅速产生严重的过敏反应及至过敏性休克或死亡。
而在小鼠致敏后给予小剂量且依次累加剂量的异种蛋白后,小鼠会脱敏,而不会再对该种异种蛋白过敏。
试验方法一、实验器材1、抗原:兔血清或鸡血清,收集的血液置于室温下1h左右,凝固后,置4℃下,过夜,析出血清,离心,4000rpm,10min。
在无菌条件下,吸出血清,储存于-40℃以下冰箱2、动物:豚鼠3、无菌注射器及针头,碘酒等二、实验步骤1、致敏健康豚鼠,腹腔注射抗原0.1ml2、其中一只豚鼠,在实验前一天,少量多次逐步增量皮下注射相同抗原脱敏3、10-14天后,相同抗原心脏注射0.1ml,,观察症状,判断标准:豚鼠未出现任何症状,表现正常,记为过敏强度“-”、评分“0”,过敏反应判断为“阴性”; 豚鼠出现不安宁、竖毛、发抖、搔鼻症状,记为过敏强度“+ ”、评分“1”,过敏反应判断为“弱阳性”; 豚鼠出现喷嚏、咳嗽、呼吸急促、排尿、排粪、流泪症状,记为过敏强度“++”、评分“2”,过敏反应判断为“阳性”; 豚鼠出现呼吸困难、哮鸣音、紫癜、步态不稳、跳跃、喘息、痉挛、旋转、潮式呼吸症状,记为过敏强度“+++”、评分“3”,过敏反应判断为“强阳性”; 豚鼠出现死亡,记为过敏强度“++++”、评分4,过敏判断为极其阳性。
本实验共采用5只小豚鼠进行超敏反应的实验,具体情况如下表:豚鼠标号鸡血清脱敏鸡血清致敏兔血清致敏去血清脱敏对照实验项目1 腹腔注射鸡血清0.1ml 腹腔注射鸡血清0.1ml腹腔注射兔血清0.1ml腹腔注射兔血清0.1ml腹腔注射生理盐水0.1ml项目1后的现象小鼠无明显现象,正常小鼠无明显现象,正常小鼠无明显现象,正常小鼠无明显现象,正常小鼠无明显现象,正常项目2 依次间断小剂量注射相同鸡血清0.2m、0.4ml、0.6m、0.8ml、1.0ml 不做处理不做处理小鼠意外死亡不做处理项目2后的现象豚鼠出现轻微的不安,用前爪搔鼻、耸毛,但随后恢复正常————————项目3 心脏注射相同鸡血清0.1ml 不做处理心脏注射相同兔血清0.1ml ——心脏注射相同兔/血清0.1ml项目3后的现象0 ++ 0 ——0从结果分析:经过脱敏处理和没有经过脱敏处理的反应还是不同的,这是脱敏后,豚鼠对过敏原逐渐耐受,每天遇到同样浓度的过敏原后产生的强烈的反应逐渐降低,这样,到最后就产生对鸡血清就不过敏了。
豚鼠主动全身过敏试验两种阳性物质选择的探讨
豚鼠主动全身过敏试验两种阳性物质选择的探讨高梅;曹冲;马会;朱春花【摘要】目的:比较两种阳性物质人血白蛋白、卵白蛋白对豚鼠主动全身过敏作用,为过敏性试验提供较好的阳性对照。
方法将豚鼠随机分为14组,以人血白蛋白、卵白蛋白(2、10、100 mg/只)、0.9%氯化钠注射液等受试物为对照,研究不同致敏剂量、激发剂量、激发时间等条件下,豚鼠全身主动过敏的反应情况。
结果在2~100 mg/只剂量范围内,人血白蛋白、卵白蛋白豚鼠主动全身过敏反应的发生率为100%。
在2~10 mg/只剂量范围内,过敏症状发生程度随致敏剂量、激发剂量的增加而增加,相同剂量的卵白蛋白较人血白蛋白反应程度更强。
结论豚鼠主动全身过敏试验,阳性对照推荐使用卵白蛋白,剂量为2 mg/只。
%ObjectiveTheaimofthisstudywastoprovideabetterpositivecontrolforall ergictestbycomparing the allergic effect of two kinds of positive materials , human albumin and ovalbumin , on active systemic anaphylaxis in guinea pig.Methods Guinea pigs were randomly divided into 14 groups, and were given human albumin , ovalbumin (2, 10, 100 mg/animal), or 0.9%sodium chloride injection as test substances , to assess the symptoms and incidence of systemic allergic responses induced by different sensitizing substances in different challenge doses and different challenge intervals.Results In the range of 2 to 100 mg/animal, the guinea pigs showed a 100%incidence rate of positive allergic reaction to human albumin and ovalbumin , the severity of anaphylactic symptoms was increasing along with the increase of sensitizing doses and challenge doses , and the allergic reaction was more strong induced by the samedose of ovalbumin than human albumin .Conclusions Our findings indicate that in the active systemic anaphylaxis test in guinea pigs , we recommend ovalbumin as the positive control in a dose of 2 mg/animal.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】5页(P51-55)【关键词】主动全身过敏试验;人血白蛋白;卵白蛋白;过敏反应;豚鼠【作者】高梅;曹冲;马会;朱春花【作者单位】山东省药学科学院,山东省化学药物重点实验室,山东济南250101;山东省药学科学院,山东省化学药物重点实验室,山东济南 250101;山东省药学科学院,山东省化学药物重点实验室,山东济南 250101;山东省药学科学院,山东省化学药物重点实验室,山东济南 250101【正文语种】中文【中图分类】R-33豚鼠主动全身过敏试验,阳性对照推荐使用卵白蛋白,剂量为2 mg/只。
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附:豚鼠血液采集及新鲜血清制备
1、豚鼠心脏穿刺采血:一人抓取固定豚鼠,使胸腹部朝上,; 另一人用左手触摸豚鼠左侧第4、5、6肋间,选择心尖搏动最明 显处将注射器针头刺入心脏;所用针头应细长,以免采血后穿刺 孔出血;体重约500g的豚鼠每次可抽血6-7ml,间隔2-3周后可再; 2、按1:10分别稀释马血清和鸡蛋清,按照下表操作(初次为后 腿内侧皮下注射),末次注射后1-5分钟观察; 3、如果心内注射未获成功,可以考虑选择豚鼠的耳缘静脉注射 0.3~0.5ml。
实验豚鼠分组表
结果判断:
豚鼠1在注射马血清1-5分钟会出现不安、抓鼻、喷嚏、 呼吸困难、竖毛、大小便失禁、痉挛性跳跃,症状严重者在 数分钟内死亡。
出现快,消退也快; 出现功能紊乱性疾病,不出现 严重组织细胞损伤; 有明显个体差异和遗传背景。
Ⅰ型超敏反应的发生 过程和发生机制
静息肥大细胞
激活后 5 分钟
激活后 60 分钟
主要生物活性介质及其生物学作用:
1. 组胺:毛细血管扩张,通透性增强;支气管胃肠道等处平滑 肌收缩;促腺体分泌局部症状:皮肤黏膜充血水肿,荨麻疹,支气 管哮喘,恶心,呕吐,腹痛,腹泻;
将死亡豚鼠解剖,可见肺脏极度水肿,胀满整个胸腔。
而豚鼠2、3无任何症状。
由于动物个体反应性不同,有的反应较轻,可幸免死亡。 如果再注射马血清也不出现反应,此称为脱敏状态。但脱敏 状态是暂时的,大约2周后又处于致敏状态。
注意事项:
1、心脏注射时,首先要固定好动物,然后于心跳 最明显之处进针,感觉有搏动、注射器内有回血时 再注射过敏原;
2. 激肽原酶:生成激肽,致平滑肌收缩,导致支气管痉挛;毛 细血管扩张,通透性增强;
3. 白细胞三烯和前列腺素:与组胺和激肽原酶作用相似; 4. 其它……
Ⅱ型超敏反应是由IgG或IgM类抗体与靶细胞表面相应抗原结 合后,在补体、吞噬细胞和NK细胞参与作用下,引起的以细胞溶解 或组织损伤为主的病理性免疫反应。常见疾病有:1. 输血反应;2. 新生儿溶血症;3. 自身免疫性溶血性贫血;4. 药物过敏性血细胞减 少症;5. 甲状腺功能亢进等等。
Ⅲ型超敏反应是由中等大小可溶性免疫复合物沉积于局部或全 身毛细血管基底膜后,通过激活补体和血小板、嗜碱性、嗜中性粒 细胞参与作用下,引起的以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润 为主要特征的炎症反应和组织损伤。
Ⅳ型超敏反应是由效应T细胞与相应抗原作用后,引起的以单 个核细胞浸润和组织细胞损伤为主要特征的炎症反应。
2、取下针头,将血液放入一洁净的玻璃平皿中,盖上平皿盖, 置4°冰箱静置1h,收集血清,离心,收集上清(即为豚鼠血清, 可以用作补体;临用前,1:20-1:30稀释后使用),备用。
本实验主要观察豚鼠的过敏反应现象。
实验原理
先给豚鼠注射小量异种蛋白,经过一定的潜伏期,动物处于致 敏状态。当第二次用较大剂量相同抗原注射豚鼠时,抗原激发豚鼠 体内的肥大细胞或嗜碱性粒细胞,致使这些细胞释放多种生物活性 介质,豚鼠迅速产生严重的过敏反应及至过敏性休克或死亡。
主要实验材料
1、豚鼠:体重150g左右的幼小豚鼠; 2、变应原:马血清、鸡蛋清; 3、其他:生理盐水、无菌注射器、针头、碘 酒、酒精、棉球等。
豚鼠过敏反应观察
超敏反应是指机体对某些抗原初次应答后,再次接受相同
抗原刺激时,发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主 的特异性免疫应答。超敏反应分型如下:
Ⅰ型超敏反应→速发型超敏反应 Ⅱ型超敏反应→细胞毒型超敏反应 Ⅲ型超敏反应→免疫复合物型超敏反应 Ⅳ型超敏反应→迟发型超敏反应
Ⅰ型超敏反应又称为速发型超 敏反应,是由特异性的IgE抗体介导 的,其主要特征为: