编好豚鼠过敏试验

豚鼠过敏性休克试验

豚鼠过敏试验属于Ⅰ型超敏反应, 是一个经典的动物过敏性休克试验。此型过敏反应发生迅速，又称速发型变态反应，具有严格的特异性以及明显的个体差异特点。过敏反应过程中肥大细胞、嗜碱性粒细胞等细胞释放多种血管活性介质，作用于效应器官，引起特有症状。本实验主要观察豚鼠的过敏反应现象，重复性好、稳定、过敏现象明显，方法简单。

【实验目的】

1. 掌握Ⅰ型超敏反应的机制、临床表现及特点；

2. 了解豚鼠实验性过敏性休克的方法及结果观察。

【实验原理】

豚鼠过敏反应属Ⅰ型超敏反应，与人类的青霉素和异种血清所引起的过敏性休克类似。先给豚鼠注射变应原马血清蛋白，过一定时间，变应原刺激动物浆细胞产生IgE类抗体，此抗体的Fc段与肥大细胞或嗜碱性粒细胞表面的FcεR 结合，使得IgE吸附在这些细胞的表面，这是致敏阶段。当相同的较大量变应原再次进入致敏机体时，即可与吸附在这些细胞表面的IgE结合，引起一系列反应，使这些细胞释放组胺，缓激肽，慢反应物等生物活性介质，作用于效应器官，引起I型过敏反应的发作，即发敏阶段。组胺是一个主要的生物活性介质，它的迅速释放，能扩张小血管和增加毛细血管通透性、刺激平滑肌收缩、促进粘膜腺体分泌增加；导致血压下降、呼吸困难等，甚至引起过敏性休克，导致死亡。

【实验器材】

1.健康豚鼠（体重200克左右）3只。

2.正常马血清。

3.生理盐水，鸡蛋清。

4.无菌注射器，针头，酒精棉球，解剖用具等。

【实验方法】

1. 致敏注射：取3只豚鼠，以甲、乙、丙编号，其中甲、乙两只经腹腔或皮下注射1:10 马血清0.1ml ，丙注射0.1ml生理盐水做为对照。

2. 发敏注射：两周后，固定好豚鼠，找到心尖搏动处，用碘酒、酒精依次消毒后，甲豚鼠心脏注射鸡蛋清 1 ～2ml，乙丙两只豚鼠经心脏注入马血清1～2ml 。

3. 注射后数分钟内密切观察动物状态及反应现象。

【实验结果】

1．乙豚鼠发生超敏反应，注射后数分钟，动物出现兴奋、不安、躁动、鼻翼翕动，前爪搔鼻，耸毛、咳嗽等现象，继而发生气急及呼吸困难，站立不稳，痉挛性跳跃，大小便失禁，倒地挣扎而死。解剖见肺脏极度气肿，胀满整个胸腔，这是支气管平滑肌痉挛的结果。

2. 甲丙豚鼠均不出现过敏症状。

【注意事项】

1.心脏内注射时，要固定好动物，以避免划破心脏；

2.当看见到注射器内有回血时再注入变应原。

【思考题】

1.本试验中甲丙两只豚鼠和乙豚鼠为什么会出现完全不同的反应现象？

2.过敏是如何发生的？

【参考资料】