一株吐温-80降解真菌的分离及其降解特性研究

合集下载

一株降解DON毒素真菌的鉴定及其生理特性研究

ｆｇｌｎｓｔｅｕｆＡｓｒｌｕｇｒａｇｅａｅＬｔｒａｔｔｌｌｎｇｈｏ８ｂｐｇｎｅｕｎｃｓｏｂａｎｄｒ — ｕｎｕｓｂｅｏｇｏｇｎｓｏｐｅｇｉｓｎｉｅｇｒｇｔ．ａｅｏａｅｔｆ７３ｅｅｓｑｅｅｗａｔｉｅｅｌ
ｗｉｈｅｉｔｎｅｕｅｃｎＧＥＮＢａｎｅａｉｎｈｐｃｍｐａｉｏｎａｙｉｕｎｈｔｒｔｘｓｉｇｓｑｎｅｉｎｋａｄｒｌｔｏｓｉｏｒｓｎａｌｓｓｆｄｔａＤＮＡＴＳｏｈｔａｎｈａ００％ｏＩｆｔｅｓｒｉｄ１
曲霉集合体。进一步分另用引物对Ｂ —Ｒ和ＩＳｑＭＢＣＴ２及ＩＳ和ＩＳＴ１Ｔ４扩增ｒＮ的ＩＳＩ－．ＳｒＮＩＳⅡ，ＤＡＴ５８ＤＡ— Ｔ得到总长为７８ｂ３ｐ的基因序列，ＧＮａｋ中已有的基因序列比对和亲缘关系比较分析发现该茵ｒＮＴ与ＥＢｎＤＡＩＳ区基因序列与塔宾曲霉的同源性为１０，０％最终确定ＮＡ１为ｌ株塔宾曲霉。菌株ＮＡ１ｒＮＳ区基因序列Ｊ．Ｊ．ＤＡＩＴ
ｓｅｔｅｙｕｉｇｐｉｒｔｍｐｉＴＩ８ＤＮＩＳＩｏｐｅｉｌｓｎｒｖｍｅｏａｌｙＩＳ－ＳｒＡ－ＴｆＤＮＡｆｒｆ５．ＩｒｏＢＭＢＣ，ＩＳｎＴ４ — ＲＴ２ａｄＩＳ．Ａｎｔａｏａｅｄｉｗｓｃｍｐｒｄ
ｉｏｄｒｏｉｎｉＯ（ｅｘｎｖｌｎ１ｅｒｄｂｅｆｎａｓａＮＡ１．ＩｗｓｏｎｏｐｏｇａｙｔｔｈｎｒｅｔｙＤＮｄｏｙｉａｏ）ｄｇａｌｕｇｌｔｉｅｔｄｆａｅａｒｎ（Ｊ一）ｔａｆｄｍｒｈｌｉｌａｔｅｕｏｃｌｈ

1株产广谱细菌素乳酸菌的筛选及其抑菌物质的特性

1株产广谱细菌素乳酸菌的筛选及其抑菌物质的特性曹珂珂;王娣;李妍【摘要】By A broad spectrum bacteriocin producing strain was screened by plant punching and its antibacterial characteristics was studied. The results showed that one baeteriocin-producing Lactic acid bacteria strain isolated from plant materials exhibited strong inhibition activity against the E. coil. The supernatant of this strain could still inhibit the growth of indicator strain strongly after eliminating hydrogen peroxide and organic acid. After treatment with pep- sin, the strain' s inhibitory activity decreased sharply, which showed the inhibitory substance possessed the character- istic of protein, and it could be named bacterioein. The strain was identified as Laetobacillus plantarum through detec- tion of its appearance, physiological and biochemical characteristics. The inhibitory activity of strain fermentation su- pernatant was not affected by high temperature, 1% Tween-80, SDS, EDTA and the low pH. However, its inhibitory activity revealed an obvious decrease after treatment with protease K and trypsin than with pepsin. The bacterial inhi- bition spectrum showed that this was a kind of bacteriocin with wide inhibition soectrum.%从植物性材料中筛选到1株对大肠杆菌有明显抑制作用的乳酸菌,在排除有机酸和过氧化氢的干扰后,该菌株的发酵上清液仍有较强的抑菌性;胃蛋白酶处理后,抑菌活性明显降低,说明其抑菌物质为蛋白质类物质,是一种细菌素。

一株产纤维素酶真菌的筛选、鉴定及降解效果

ｃｎｉｏｓｏ０ｒｒｎａ２ｅｒｅＣｈｅｐａａｅｏｄｇｃｎｓＥ／ｅ）ｅｏｌｃｎｅ（Ｂ／ｅ）ａｄＢｏｄｔｎｆ２ａ８ｄｇｓ．Ｔｅｋｌｓｆｎｏｌａａｅ（ＧＣｎ，ｘｇｕａａＣＨＣｘｎ．ｉ１／ｉｔｅｖｕｅｕｓ
基。１）全国优秀博士学位论文专项基金（０５４；２０４）黑龙江省杰出青
年基金（Ｃ０９９。Ｊ２００）第一作者简介：李保深，，９５年２月生，男１８东北林业大学林学院，硕士研究生。通信作者：高大文，东北林业大学林学院，授。Ｅｍｉｄｗｎ教 — ａ：ａｅ— ｌ
ｇｅｓａｅ（．ａｅｅ．５，．８ｎ．８／ｓｃｖｌｌｏｉｓＢＧｓ）ｗｒ３８６２６１ａｄ１４７ＩｍＬｒｐｔｅ．ｙｄｅＵｅｅｉｙ
ＫｅｗｏｄＳｒｅｅａａｉｎｙｒｓｃｎｓｐｔ：Ｐｅｉｉｉｍｅｕｅｓ；１Ｓｒｅｒｏｎｃｌｕｄｃｍｂｎｌ８ＤＮＡ；Ｃｌｌｅ；Ｓａｎｎｌｃｒｎｍｉｒｓｏｅｅｌａｕｓｃｎｉｇｅｅｔｏｃｏｃｐｓ
ｇｏｇｉ．ｏｏａ＠ｍａｌｅｍ
１材料与方法
收稿日：１期２０年ｌ２０２月９日。责任编辑：红。程
１２分析方法。将纯培养菌株接人发酵培养基中，２、０／ｉ摇床８℃ １ｍｎ２ｒ培养７ｄ用移液枪吸取１ｍ，Ｌ发酵液离心（０／ｉ，９００ｒｍｎ５ｍｉ）上清液即为粗酶液。ｎ，酶活力的测定：滤纸糖化力的测定。取粗酶液０５ ① ．ｍ，Ｌ加入醋酸一醋酸钠缓冲液（Ｈ值４８０１ｏＬ２ｍ，ｐ．，．ｍｌ）Ｌ／然后加入一张（ｘ）１ｍ６ｍ新华１ｃｃ号滤纸， ℃恒温水浴１５０ｈ

一株菲降解细菌的分离、鉴定及其降解特性研究

子技术开发有限公司；物显微镜，Ｍ２０生Ｂ００型，
南京麦迪森仪器有限公司。
１２实验方法．
ａＸ．ｌ１８对齐后，使用ＭＥ４０进行序列同源性分ＧＡ．析并制作系统发育数，算法为Ｎｅｈｏ－ｏｉｇｉｂｒｉｎ。ｇＪｎ
ＡｂｔａｔＳｖｒｌＰＡＨｓｄｇａｉｂｃｅｉｅｅｉｏａｅｒｍｈｅｏｌｐｏｌｅｂｙｏｌｓｒｃ：ｅｅａ — ｅｒｄｎｇａｔｒａｗｒｓｌｔｄｆｏｔｓｉｌｕｔｄｉｎａＳｈｅｇｉｉｉｌｗｉｈｅｅｔｖｍｅｉｍｕｉｐｎｎｈｒｎｅｓｈｅｏｅａｂｏｅｒｎｌＯｌｅｄｆｔｓｌｃｉｅｄｕｓｎｇｈｅａｔｅａｔｓｌｃｒｎ
始每隔６ｈ整瓶提取培养液，文献［１方法测按１］
定培养液中菲浓度，释平板涂布法测定培养液稀中的活菌数量ｌ１。
１２８菌株鉴定．．
本研究中的样品均采自胜利油田，别在盐分碱地和受石油污染的土壤等４不同地点采样。个ＰＲ试剂盒采用ＧｅＳａＣＣｎｔｒＰＲ套盒，润生康
条件下，８℃振荡培养９，２６ｈ对菲的降解率达到９．３０在菲浓度为２０ｍＬ１培养３７Ｋ；０ｇ・＿时，
９６ｈ后的菲降解率为９．６。同时发现菲的降解程度与细菌数量的增长呈正相关关系。８３

呕吐毒素(DON)生物合成和降解研究进展

呕吐毒素(DON)生物合成和降解研究进展曹慧英;伍松陵;孙长坡【摘要】Vomitoxin,also known as deoxynivalenol (DON),is a kind of secondary metabolites produced by certain Fusarium species;it is one of the common mycotoxins which polluted the food.With the frequent occurrence of climate disasters domestically,the trend of DON pollution exacerbates,so prevention and treatment of DON contamination are imminent.This peper covers the physical and chemical properties of DON,analysis of the DON biosynthetic pathways based on its chemical structure and genes,and summarizes biodegradation of DON by microorganism,speculates possible sites of degradation,degradation pathways and products.Based on a comprehensive understanding of DON,it aims to inspire to seek safe,efficient and cost effective biodegradation pathways using biotechnology,finally to ensure grain and food safety and protect health of consumers.%呕吐毒素(Vomitoxin),即脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON),是镰刀菌产生的次生代谢物质,是污染粮食的主要真菌毒素.随着我国灾害气候的频频发生,DON的污染程度呈现加剧趋势,因此DON污染的控制迫在眉睫.本文阐述了DON的物理化学特性,结合化学结构和基因遗传分析了DON的生物合成途径,并综述了微生物对DON的生物降解研究,推测了DON可能的作用位点、降解途径及降解产物,以此启发利用生物技术,探求安全、高效,低成本的DON生物降解途径,确保粮食和食品安全、保护消费者健康.【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2013(028)005【总页数】8页(P116-123)【关键词】真菌毒素;粮食;生物合成;降解【作者】曹慧英;伍松陵;孙长坡【作者单位】国家粮食局科学研究院,北京 100037;国家粮食局科学研究院,北京100037;国家粮食局科学研究院,北京 100037【正文语种】中文【中图分类】Q93-31真菌毒素是霉菌产生的有毒次生代谢产物。

1株高效油脂降解菌株的筛选及其降解特性研究

１材料与方法
１１材料．
１１１污泥来源．．
合肥－业大学餐厅排污池。Ｔ１．培养基成份．２１驯化培养基（－）ＫＨＯ０Ｋ２Ｏ０ｇ：２Ｐ４．，ＨＰ４．１１，
ＮａＨＰ．２Ｏ４１０，Ｎａ．ＭｇＯ４７０．。Ｃ１５，０Ｓ。Ｈ２０５
维普资讯
生态环境２０，２：４－４０６１（）２４２７５
ＥｏｏｙａｄＥｎｉｏｍｅｔｃｌｇｎｖｒｎｎ
ｈｔ：ｗｗｊｅｅｃｍｔ／ｗ，ｓｉｏｐ／ｅ，
Ｅｍａｌｅｉｒｅｓｉｏ－ｉｄｔ＠ｊｅｅｔｍ：ｏ．
摘要：从学校餐厅污泥中分离得到７株油脂降解茼。以芝麻油为唯一碳源，通过驯化培养、初筛和复筛得到１株芝麻油降解优
势菌株。菌种特性研究表明其为好氧菌，降解芝麻油的最适温度￣３－７℃左右，ｐ值为８０２０３Ｈ．；在最仕牛长环境下，该菌株在含２－０ｇ芝麻油的培养基中７内对油脂的降解率达８％以．Ｌ２ｈ０卜。
治理是一项非常有意义的＿作，Ｔ是极具发展前景的生物修复力法，受到国内外学者的重视【】本文通３。
０５．，芝麻油２．。００
牛肉膏蛋白胨培养基（．）：牛肉膏５，．ｇＬ．０蛋白胨５，葡萄糖３，Ｃ．，ｐ．。．０．Ｎａ１００５Ｈ７４１２实验方法．
快速简便的解决水中油脂污染的途径已经迫在眉睫【对于这类油脂废水的处理，２Ｊ。人们常采用筛滤、沉淀、隔油、絮凝、吸附、电解等物理和化学方法，这些方法一般投资大、流程复杂、月．化学方法会容易产生二次污染。相比之下，微生物能利用油脂作为生长的碳源和能源，使之水解成甘油和脂肪酸，最终降解为水和Ｃ２Ｏ等代谢产物，这种方法成本低、无二次污染，同时微生物降解油脂还具有来源广泛、选用便利、操作简单等而优点【２Ｊ。因此，从自然环境中寻找高效降解油脂菌株用于含油废水的

吐温80化学品安全技术说明书

分解产物：
第十一部分：毒理学资料
急性毒性：
亚急性和慢性毒
性：
刺激性：
致敏性：
致突变性：
致畸性：
致癌性：
不列为致癌物质
第十二部分：生态学资料
生态毒理毒性：
鱼类LC50值=471毫克/升，96小时
生物降解性：
不容易生物降解
非生物降解性：
生物富集或生物积
累性：
其它有害作用：
无资料
第十三部分：废弃处置
废弃物性质：
辛醇/水分配系数
的对数值：
闪点（C）:
>149C
引燃温度（C）:
爆炸上限%（V/V）：
爆炸下限%（V/V）：
溶解性：
主要用途：
用作油/水型乳化剂，也可用作增溶剂、稳定剂、扩散剂、抗静电剂、纤维润滑剂。
第十部分：稳定性和反应活性
稳定性：
禁配物：
强氧化剂，碱、重金属盐
避免接触的条件：
聚合危害：
尚未见报道
废弃处置方法：
处理前应参阅国家和地方有关法规。建议用焚烧法处理
废弃注意事项：
第十四部分：运输信息
危险物编号：
无资料
UN编号：
无资料
包装标志：
包装类别：
Z01
包装方法：
无资料
运输注意事项：
严禁与氧化剂、酸类、食品化学品等混装混运。
第十五部分：法规信息
法规信息
化学危险物品安全管理条例（1987年2月17日国务院发布），化学危险品安全管
中国MAC(mg/m3)
无资料
前苏联
MAC(mg/m3)
我在看
TLVTN
TLVWN
监测方法：
工程控制：

增溶剂吐温80稳定性的研究

吐温80的化学稳定性研究进展吐温80（Tween80）又名聚山梨酯80，化学名为聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯，属混合物，平均分子量：1309.68，其以失水山梨醇为骨架，侧链连接具有亲水特性的3个氧乙烯链、1个具有亲脂特性的脂肪链[1-2]，其结构通式见图1，因此吐温80又属于两亲型非离子表面活性剂，能与水、甲醇、乙醇、氯仿、乙酸乙酯相混溶，为药物制剂中常用的辅料之一，可用作增溶剂，稳定剂，乳化剂，分散剂等，用于制备乳剂、乳膏、芳香水剂、合剂、洗剂、栓剂、注射剂、滴眼剂及眼膏等，也广泛用于食品、化妆品、印染等工业。

图1 吐温80的结构通式临床上含有增溶性辅料吐温80的鱼腥草、多西他赛等注射液出现了严重的过敏反应，人们更多地把原因归于吐温80，因为吐温80本身的刺激性和溶血毒性已经被国内外的研究机构所证实，并且过敏反应强度与吐温80的剂量、浓度、给药速率呈正相关，降低吐温80的浓度和剂量可以降低或避免其不良反应的发生；另外吐温80质量差，含有较多毒性杂质也被证明与过敏反应存在一定相关性[3-7]。

但是，作者认为，吐温80本身的不稳定性也是需要引起高度重视的，在一定条件下吐温80会发生降解或与配伍的药物发生化学反应，可能引起药物成分变化甚至产生有毒有害物质。

本文就前人对吐温80的化学反应稳定性方面的研究进行了综述。

1 吐温80的水解反应1.1吐温80本身结构性质[8]吐温80亲水链含有酯键，在酸或碱的催化下能够发生水解，碱催化的水解反应不可逆，生成羧酸盐和相应的醇；酸催化水解为可逆反应，反应较慢，一般需加热回流，生成相应的醇和羧酸；若有醇存在的碱性溶液，还能发生醇解（酯交换反应），生成新的酯和醇。

1.2 吐温80产品的水解吐温80产品中杂质水含量过高，会导致吐温80发生水解降解[7]，但是其中含有的一定量的双、三油酸酯杂质，能够抑制水解降解的发生。

发生水解的吐温80分子，酯键断裂的同时也失去了表面活性和形成胶束的能力[9]。

吐温80分解

吐温80分解一、吐温80的化学性质吐温80（Tween 80）是一种非离子型表面活性剂，化学名为聚氧乙烯（20）硬脂酸酯。

它是由失水山梨醇与高级脂肪酸酯化生成的高分子化合物。

吐温80具有乳化、增溶、润湿等作用，广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。

吐温80的化学性质主要表现为以下几个方面：1.乳化性：吐温80具有较好的乳化作用，能够降低油水界面张力，形成稳定的乳浊液。

2.增溶性：吐温80可以增加难溶性物质的溶解度，提高其在溶液中的溶解速率。

3.润湿性：吐温80能够降低固体表面的张力，促进固体表面的润湿，提高其润湿效率。

二、分解反应机理吐温80在一定条件下可以分解为多个组分，包括单硬脂酸甘油酯、乙酸甘油酯等。

其分解反应机理主要包括以下几个方面：1.水解反应：吐温80中的酯键在水中可以发生水解反应，生成相应的醇和酸。

2.氧化反应：在某些条件下，吐温80中的不饱和键可以被氧化，生成相应的过氧化物或醛酮类物质。

3.热解反应：在高温条件下，吐温80中的高分子链可以断裂，生成低分子量的化合物。

三、影响因素分析吐温80的分解过程受到多种因素的影响，如温度、pH值、金属离子等。

下面将对这些影响因素进行分析：1.温度：随着温度的升高，吐温80的分解速率加快。

这是因为高温可以提供更多的能量，促进分子间的碰撞和反应。

2.pH值：在酸性或碱性条件下，吐温80的分解速率也会加快。

这是因为酸或碱可以提供质子或接受质子，促进水解反应的进行。

3.金属离子：某些金属离子如铜、铁等可以催化吐温80的分解反应。

这是因为金属离子可以提供电子对，与吐温80中的不饱和键发生配位反应，促进氧化反应的进行。

四、分解产物的鉴定对吐温80分解产物的鉴定是研究其分解过程的重要手段。

可以采用各种分析方法对吐温80的分解产物进行定性和定量分析，以确定其组成和结构。

这些方法包括气相色谱-质谱联用、红外光谱、核磁共振等。

通过这些分析方法，可以确定吐温80分解产物的种类和数量，为进一步研究其分解机理提供依据。

吐温80高温分解问题

吐温80高温分解问题引言吐温80是一种常见的高分子材料，具有良好的耐热性能。

然而，在高温条件下，吐温80可能会发生分解，影响其性能和应用。

本文将深入探讨吐温80在高温条件下的分解问题，包括分解机理、影响因素以及可能的解决方法。

吐温80的基本特性吐温80，全称聚对苯二甲酸丁二醇酯，是一种聚酯类高分子材料。

它具有以下基本特性：1.耐热性：吐温80能够在高温条件下保持较好的稳定性。

2.机械性能：吐温80具有良好的机械强度和刚性。

3.化学稳定性：吐温80对酸、碱等化学物质具有较好的耐受性。

4.绝缘性能：吐温80是一种优秀的电绝缘材料。

然而，当吐温80长时间暴露在高温环境下时，可能会发生分解现象，从而影响其性能和应用。

分解机理吐温80的高温分解主要是由于其分子链的断裂和氧化反应导致的。

具体分解机理如下：1.热裂解：在高温条件下，吐温80的分子链会发生断裂，产生低分子量的气体和液体产物。

这些产物可能会挥发出来，导致吐温80的质量和性能下降。

2.氧化反应：吐温80在高温条件下与氧气发生氧化反应，形成氧化产物。

这些氧化产物会对吐温80的结构造成破坏，导致其性能下降。

影响因素吐温80的高温分解受到多种因素的影响，主要包括以下几个方面：1.温度：温度是影响吐温80分解的关键因素。

较高的温度会加速分解反应的进行。

2.时间：分解反应的时间越长，吐温80的分解程度越高。

3.氧气浓度：氧气浓度的增加会促进吐温80与氧气的氧化反应，加速分解的进行。

4.湿度：湿度较高的环境中，吐温80的分解速度可能会加快。

因此，控制温度、时间、氧气浓度和湿度等因素，对于减缓吐温80的高温分解具有重要意义。

解决方法为了解决吐温80的高温分解问题，可以采取以下措施：1.降低温度：控制吐温80所处的温度，避免过高的温度对其产生不利影响。

可以通过改变加热条件或选择合适的工作温度来实现。

2.缩短时间：减少吐温80在高温环境下的暴露时间，降低分解程度。

可以通过提高工艺效率或改变工作方式来实现。

一株含盐污水降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

田
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２ —５４２５．２０１３．１２．０１２
２０１３，ＶｏＩ．３０Ｎｏ．１２
学与生物互程
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ
导致排放的废水中除了含有有机污染物外，还含有大
泥样取白天津塘沽下邮局码头泥滩，新鲜取用。１．１．２大生活用海水葡萄糖３００ｍｇ・Ｌ＿。，ＮＨ４Ｃｌ４１ｍｇ・Ｌ，
Ｋ２ＨＰＯ４９．４ｍｇ・Ｌ＿。，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２０５０ｍｇ・及其降解特性研究
张晓青，杨波，姜天翔，张雨山，王静（国家海洋局天津海水淡化与综合利用研究所，天津３００１９２）
摘要：从塘沽海滩泥样中分离筛选出１株海洋细菌，标记为ＮＹ０９３５，该菌株对舍盐污水中有机物有较好的去除效
１．２．１菌种的富集和分离纯化将泥样用灭菌蒸馏水溶解，空曝２４ｈ，静置后取上清液接入２２１６Ｅ液体培养基中，３７℃、１６０ｒ・
量的无机盐［：｛ “ ］。传统的活性污泥法、生物膜法等污水处理工艺在处理高盐度污水时常遇到以下问题：高
盐度不仅使微生物的酶活性丧失，而且会改变渗透压使微生物的细胞膜破裂，降低处理效果；高盐度还会改

吐温80

注入对照溶液b气体1.0ml，调整仪器灵敏度使环氧乙烷和乙醛的峰高为满量程的15%，乙醛和环氧乙烷的分离度应达到至少2.0，二氧六环峰高至少应为基线噪音的5倍。

分别注入供试品溶液及对照溶液a气体1ml，重复进样至少3次。

准确度的验证计算供试品溶液和对照溶液a图谱中环氧乙烷和二氧六环峰面积的相对标准偏差，环氧乙烷的3次测量值的相对标准偏差应不得过15%，二氧六环的3次测量值的相对标准偏差应不得过10%。

供试品溶液精密称取供试品1g 置10ml顶空瓶中，加入1.0ml超纯水，密封，摇匀。

70℃放置45分钟。

环氧乙烷贮备液的配制所有操作均应在通风橱中进行，操作者应戴聚乙稀手套及合适的面具保护手和面部，所有溶液均应密闭，在4℃～8℃保存。

用冷至-10℃ 的玻璃注射器，取约300μl液态环氧乙烷（相当于0.25g环氧乙烷），置50ml聚乙二醇400中，加入前后称重，用聚乙二醇400稀释至100ml，用前摇匀。

环氧乙烷贮备液的含量测定：配制10ml 50%氯化镁的无水乙醇混悬液并与20ml醇制盐酸滴定液（0.1mol/L）混匀，放置过夜使平衡，精密称量5g环氧乙烷贮备液置上述溶液中混匀，放置30分钟，用0.1mol/L醇制氢氧化钾滴定液滴定，用电位法指示终点，用聚乙二醇400作为空白，按下式计算环氧乙烷浓度（mg/g）：4.404（V0-V1）/mV0 和V1分别为空白液和测定液消耗的醇制氢氧化钾滴定液体积，m为样品的重量（g）。

聚乙二醇400的处理：称量聚乙二醇400 500g置1000ml圆底烧瓶中，以60℃，1.5～2.5kPa旋转蒸发6小时，除去挥发成份。

环氧乙烷对照溶液的配制：临用前配制，精密称取1g冷的环氧乙烷贮备液，置含40.0g冷的聚乙二醇400的50ml量瓶中，用冷的聚乙二醇400稀释至刻度，得环氧乙烷浓度为50μg/g的溶液，精密称量10g，置含30ml水的50ml 量瓶中，用水稀释至刻度。

一株萘降解菌的筛选及其降解途径

一株萘降解菌的筛选及其降解途径王博;刘兆普;隆小华;姚瑶;黄玉玲【摘要】A bacterial strain W1 which could use naphthalene as the sole carbon source was isolated from oil-polluted soil of Shengli oil field. It was preliminarily identified that W1 belonged to Serratia sp. by the morphology, physiological-biochemical characteristics and sequencing analysis of the 16S rDNA. The optimal temperature and pH for its growth were 35 ℃ and 7.5. It could tolerate the high concentration of NaCl and naphthalene. Under the treatments of 30 g/L NaCl, the degradation rate of naphthalene was 80.9% after culture for 3 days when the naphthalene concentration was 100 mg/L,even the degradation rate reached 15.8% when 800 mg/L. According to the analysis of GC-MS and the ab-sorbance measured of different substrates,the Wl strain could utilize other aromatic hydrocarbons,such as phenol,meth-ylbenzene, benzoic acid, 1-Naphthalenol,acetone and octane for growth. It also could degrade aliphatic hydrocarbon of C20-C23 , C33-C36 in crude oil. The pathway of naphthalene degradation was measured by scanning the metabolic intermediates of degradation with UV-Vis. The possible degradation pathway of Wl strain was catechol pathway. Naphthalene was first turned into salicylic acid,and then pyrocatechol,small molecule substance by opening benzene ring,finally entered the tricarboxylic acid cycle.%从胜利油田被污染土壤中筛选出一株能够以萘为唯一碳源的菌株W1,经形态和生理生化以及16S rDNA测序分析,初步鉴定为沙雷氏菌属.其最适生长条件为35℃,pH 7.5.该菌对盐及萘有较好的耐受性.当培养基盐质量浓度为30 g/L,底物萘质量浓度为100 mg/L时,培养3d后,其萘降解率仍可达到80.9％.当萘浓度为800 mg/L时,仍具有一定的降解作用,降解率为15.8％.通过对菌株降解原油前后组分的GC-MS分析,以及检测其降解多种底物后的吸光度,得出该菌能利用苯酚、甲苯、苯甲酸、1-萘酚、丙酮、辛烷生长,对原油中组分C20～C23C33～C36的直链烃有较好的降解效果.经UV-Vis扫描其降解中间产物,初步判断其萘降解生物途径为邻苯二酚途径,萘首先被其降解生成水杨酸,而后转化为邻苯二酚,开环并生成一系列小分子物质,最后进入三羧酸循环.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2012(024)012【总页数】6页(P1697-1702)【关键词】萘;萘降解菌;降解特性【作者】王博;刘兆普;隆小华;姚瑶;黄玉玲【作者单位】南京农业大学江苏省海洋生物学重点实验室,南京210095;南京农业大学江苏省海洋生物学重点实验室,南京210095;南京农业大学江苏省海洋生物学重点实验室,南京210095;南京农业大学江苏省海洋生物学重点实验室,南京210095;南京农业大学江苏省海洋生物学重点实验室,南京210095【正文语种】中文【中图分类】Q93-33多环芳烃(PAHs)在环境中分布广泛，是一类化学结构复杂，具有诱变性和致癌性的污染物，它可通过生物链的传递进行富集，对环境和人类造成极大的危害。

一株DDT降解菌的筛选及其降解特性

一株DDT降解菌的筛选及其降解特性冯玉雪;毛缜;吕蒙蒙【摘要】DDT was used as the target pollutant,and a strain capable of degrading DDT was obtained by isolation and the identification of the strain was carried out through morphological observation,experiments on physiological and biochemical characteristics and 16S rRNA sequencing.The strain was identified as Methylovorus,and named as Methylovorus sp.XLL03.The best growing condition for the strain was as follow:pH of 7,30℃,external carbon source concentration of 0.5％,and initial DDT concentration of 20mg/L.The best degradation condition for the strain was as follow:pH of 6,30℃,external carbon source(glucose) concentration of 0.1％,and initial DDT concentration of 20mg/L.Under the optimized conditions,the highest degradation rate of DDT by strain XLL03 was 50.4％ 4 days later.The qualitative analysis of degradation intermediates of DDT was carried out by GC-MS.It was initially concluded that DDT could first be transformed into DDD and DDE via dechlorination and dehydrochlorination respectively,subsequently both DDD and DDE converted to DDMU by further dechlorination,and then after ring opened,DDMU went through a series of reactions was completely mineralized.No metabolic intermediates was found during the metabolism of DDT,which indicating that strain XLL03 has potential application prospects in repairing DDT-contaminated water or soil.%以DDT为目标污染物,通过筛选获得了一株效果稳定的DDT降解菌,并对其进行形态学观察,生理生化特性及16S rRNA测序鉴定.经鉴定,该菌株属于甲基菌属(Methylo vorus),命名为Methylovorus sp.XLL03.菌株在pH值为7,温度30℃,外加碳源浓度0.5％,初始DDT浓度20mg/L时生长量最大.在pH值为6,温度30℃下,外加碳源(葡萄糖)浓度0.1％,初始DDT浓度20mg/L时对DDT的降解率最大.在优化条件下,4d后菌株XLL03对DDT最高降解率可达50.4％.利用GC-MS对DDT的降解中间产物进行定性分析,初步推断在菌株XLL03中,DDT最初分别通过脱氯和脱氯化氢生成DDD和DDE,随后DDD和DDE进一步脱氯得到DDMU,最终DDMU开环后又经过一系列反应被彻底矿化.在DDT的代谢过程中,未发现代谢中间产物的积累,表明菌株XLL03在修复受DDT污染的水或土壤中具有一定的应用前景.【期刊名称】《中国环境科学》【年(卷),期】2018(038)005【总页数】8页(P1935-1942)【关键词】DDT;微生物降解;降解特性;降解途径【作者】冯玉雪;毛缜;吕蒙蒙【作者单位】中国矿业大学(徐州)环境与测绘学院,江苏徐州221116;中国矿业大学(徐州)环境与测绘学院,江苏徐州221116;中国矿业大学(徐州)环境与测绘学院,江苏徐州221116【正文语种】中文【中图分类】X172DDT(2,2-双(4-氯苯基)-1,1,1-三氯甲烷)作为一种有机氯农药,被应用于农业生产以及控制疟疾等虫媒传播疾病[1-2],从20世纪40年代开始,在全球范围内被广泛应用[3].DDT作为一种典型的持久性污染物,能够通过食物链在人体及动物体内的脂肪器官组织中积累,进而致癌、使内分泌紊乱并且危害人体的生殖系统[4-6].因此,DDT及其中间产物DDD(2,2-双(双氯苯基)-1,1-二氯乙烷),DDE(2,2-双(对氯苯基)-1,1-二氯乙烯)已经被美国环境保护署列入优先污染物[7],一些发达国家在19世纪70年代就已经禁止其使用.虽然我国在1983年也已经禁止DDT的使用,但是在我国多地的水[8-12]、土壤[13-18]、空气[19-20]及食物中都检测到了一定程度的DDT残留.为了解决DDT的环境残留问题,国内外许多学者研究并尝试了很多方法来修复DDT污染,其中物化方法包括挖掘,焚烧,热解吸附,表面活性剂洗脱,微波增强热处理,超临界液体抽提以及光催化氧化等[21-22].相比较微生物降解,物化方法处理DDT 固然是快速,高效的,但在处理过程中极易造成二次污染且费用相对较高,研究发现在用于土壤修复时,物化法也会对土壤造成干扰与破坏.而生物修复技术对环境及土壤的干扰要小的多,于是,生物修复成为了研究重点.有关DDT污染的微生物修复,国内外研究人员已经证实存在一些细菌和真菌能够有效降解DDT,包括无色杆菌,气杆菌,芽孢杆菌,梭状芽胞杆菌,埃希氏菌,假单胞菌,变形杆菌,链球菌,黄单胞菌,欧文氏菌,巴斯德梭菌,根瘤土壤杆菌等[23].例如工厂土样中分离的一株能够在好氧条件下降解DDT的菌株DH-7[3],10d后能将初始浓度为20mg/L的DDT降解73.6%,在优化培养条件后,降解率达到81.4%.此外分离得到的革兰氏阳性细菌W-1[1]和DB-1[24]对DDT的10d降解率可达67.4%(10mg/L)和83.6% (40mg/L).其中大多数被筛选出来的DDT降解菌都是在好氧条件下降解DDT菌,如真养产碱菌(Alcaligenes eutrophus)A5[25],但也有细菌,例如反硝化产碱菌(Alcaligenes denitrificans) ITRC-4在厌氧和好氧的条件下都能降解DDT[26].这些菌株在培养条件下虽然有着较高的DDT降解率,但是由于或降解周期较长,或浓度较高容易降解,或培养条件较苛刻等原因,在实际应用中并不广泛.本实验以农田土壤作为原始菌源,旨在驯化筛选出几株以DDT为唯一碳源且具有高效降解能力的菌株,并选择其中一株降解效果较好的菌株,对其生长特性以及降解特性进行研究,以此为生物降解法提供高效降解菌菌源.本实验所用药品为纯度不小于98.5%的P,P’-DDT(2,2-双(4-氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷),由德国Dr.Ehrenstorfer GmbH公司生产,购于生工生物工程有限公司;色谱级的正己烷购于上海展云化工有限公司,培养基所用试剂及其他化学试剂均为分析纯.实验所用4种培养基为无机盐培养基(NaNO3 4.0g/L,KH2PO4 1.5g/L,NaHPO4 0.5g/L, FeCl3.6H2O 0.0083g/L,CaCl2 0.01g/L,MgCl2 0.2g/ L),分离纯化培养基(NaNO3 4.0g/L,KH2PO4 1.5g/ L,NaHPO4 0.5g/L,FeCl3×6H2O0.0083g/L,CaCl2 0.01g/L,MgCl2 0.2g/L,蛋白胨1.0g/L,琼脂 15~ 20g/L),富集培养基(蛋白胨10.0g/L,酵母膏 5.0g/L,NaCl 10.0g/L)和菌种保藏培养基(牛肉膏3g/L,蛋白胨 10.0g/L,NaCl 5g/L,琼脂15~20g/L),每种培养基在使用前均调节pH 值至7.0,121℃灭菌30min.由于DDT是半挥发性的,所以在培养基灭菌后再添加实验所需量的DDT.从徐州市铜山区西南部农田中采集土样,以此作为微生物富集分离培养的来源.采样时,选取不同的农田,进行多点采样,以保证菌源的多样性,采集土样为地表10cm的土壤.1.2.1 菌种的富集取2g原始土样接入装有100mL无机盐培养基的三角瓶中,加入DDT为唯一碳源并使其终浓度为10mg/L.将三角瓶置于恒温振荡器中于30℃,180r/min条件下培养.按照此方法进行多次转接.经过几十天的富集培养后,培养基中的DDT降解菌大量生长.1.2.2 菌种的分离与纯化用接种环沾取最后一次富集培养的培养液,在分离纯化培养基上进行划线,30℃恒温培养2~3d.待菌株在平板培养基中富集后,通过肉眼观察,挑取颜色,形态及大小不同的单菌落于富集培养基中富集2~3d.再以5%的转接量将菌株转接至新鲜的无机盐基础培养基中继续培养6d.按照上面方法,不断划线分离直至获得菌落特征一样的菌株.1.2.3 菌株的驯化本实验采用逐量分批驯化法进行驯化,选择多个分离纯化出来的菌株进行驯化,用1.2.1的方法逐级提高DDT在无机盐培养基中的浓度,且每个浓度培养时间至少4d,以保证菌株降解DDT的效果及其稳定性.当菌株对DDT的降解率基本不变时,停止提高浓度,则该浓度为菌株最大耐受浓度.1.3.1 形态学鉴定 (1)菌落形态观察:将获得的菌株用平板稀释法涂布于固体培养基上,置于30℃的恒温培养箱中培养2~3d,待菌落长出后,从其表面形态,大小,颜色等方面进行观察并记录.(2)扫描电镜:从平板培养基挑取单菌落并用0.2M PBS清洗菌体1遍,向菌体中加入2.5%戊二醛并混匀,然后于冰箱中静置4h;在8000r/min下离心5min,用蒸馏水清洗3次;再分别用梯度浓度酒精脱水;用纯乙酸异戊酯置换酒精2次后置于40℃的恒温干燥箱中烘8h 以上;将干燥好的菌株粉末送至中国矿业大学分析测试中心进行扫描电镜分析,观察菌株形态特征.1.3.2 16S rRNA测序使用生工生产的SK8255细菌基因组抽提试剂盒来提取菌株的基因组DNA.设计引物序列为27F(5’ AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG 3’),1492R(5’TAC GGT TAC CTT GTT ACG ACT T 3’),片段长度1500bp.对提取的菌株基因组DNA进行PCR扩增.PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳后利用SK8131胶回收试剂盒回收.回收的产物送到上海生物工程服务有限公司进行16S rRNA序列的测定,并进行序列Blast比对分析,取其近缘菌的16S rRNA 序列构建系统发育树.1.3.3 生理生化特性实验购买青岛海博生物技术有限公司生产的细菌生理生化特性检测试剂盒,并结合沈萍等编著的《微生物学实验》[27],完成革兰氏染色实验,淀粉水解实验,明胶液化实验,甲基红实验,吲哚实验,硝酸盐还原实验,硫化氢实验,3%过氧化氢酶实验,尿素酶实验,苯丙胺脱氨酶实验以及葡萄糖发酵实验.本实验采用的细菌计数法为比色法,即浑浊度计数法.用移液枪取少量培养物于比色皿中,使用可见分光光度计,与波长600nm处测定其吸光度,记为OD600,以OD600值来表示细菌的生长量.此过程去除DDT悬浊液的背景值.取细菌培养液,经正己烷萃取后,有机相去除水分,过0.22µm滤膜后,用气相色谱/质谱联用仪(GC/MS)测定DDT含量.采用美国铂金-埃尔默公司的CLARUS SQ 8型气质联用仪.柱子类型为30m*0.25nm*0.25µm的毛细管柱,柱流量为 1.0mL/min;传输线和离子源温度均设为250°C;离子源电子能量为70eV;进样口温度设为250°C,不分流进样;柱箱温度设定为初始温度100°C,保持1min,再以20°C /min的速度升温至150°C然后以5°C /min的速度升温至260°C,并保持5min;质量范围选取 45~550amu;数据采集方式为选择离子扫描(SIM);溶剂延迟时间为3.5min,整个测试时间为30.5min.将在无机盐培养基中生长至对数时期的细菌转接5%到新鲜的培养基中,分别考察pH(4, 5, 6, 7, 8, 9),外加碳源(葡萄糖)(0.0%,0.1%,0.3%, 0.5%,1.0%,1.5%),初始浓度(10, 20, 30, 40,50mg/ L)和温度(10, 20, 30, 35, 40℃)对DDT降解率的影响,进而确定菌株降解DDT的最适降解条件.测定菌株对DDT降解能力的试验在最适降解条件下进行,将菌株接种到以20mg/LDDT为唯一碳源的无机盐培养基中培养,定时测定DDT残余浓度,并绘制降解细菌的生长曲线和降解曲线.将菌株的培养液于冰浴的环境下置于超声波细胞破碎仪中进行充分破碎,加入15mL正己烷-丙酮(1:1)超声20min提取有机物.随后将提取的有机相置于旋转蒸发仪上浓缩,将获得的有机相定容至5mL,过0.22µm滤膜后用GC/MS分析.本实验通过GC/MS法测定DDT降解菌的代谢产物,并通过代谢产物分析DDT降解菌对DDT的代谢途径.GC/MS测试程序同1.4节.所有实验都进行3组重复,每组实验数据测3次求平均值,由origin9.1绘制柱状图及折线图,并将误差线表示于图中.用以DDT为唯一碳源的无机盐培养基进行菌种的驯化,在DDT浓度为60mg/L的培养基上筛选出一株降解率达到50%以上降解率的菌株,并将其命名为XLL03.菌株XLL03对DDT的耐受极限为60mg/L.2.2.1 16S rRNA测序鉴定菌株XLL03经过16S rRNA测序,将序列在NCBI中进行BLAST分析,用Mega 6.06软件绘制菌株XLL03系统发育树.结果表明菌株XLL03与Methylovorus menthalis相似度达到99.79%.2.2.2 形态及生理生化鉴定菌株XLL03在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上30℃恒温培养后,为乳白色的不透明圆形菌落,质地粘稠,边缘整齐,表面光滑.通过革兰氏染色后观察到菌株颜色呈紫色,为革兰氏阴性菌,在扫描电镜下的个体形态为短杆状,大小在1mm左右.生理生化实验表明,菌株XLL03具有过氧化氢酶及尿素酶活性,并且可以发酵葡萄糖以及还原硝酸盐,但不能液化明胶,分解含硫有机物生成硫化氢,没有苯丙氨酸脱氨酶.此外,菌株XLL03的甲基红实验和吲哚实验均呈阴性.由此可以看出,菌株XLL03与Methylovorus menthalis个体形态和生理生化特性均具有相似性[26].结合菌株XLL03与Methylovorus menthalis的生理生化特性,初步确定菌株XLL03为甲基菌属,并将其命名为Methylovorus sp.XLL03.2.3.1 初始pH值对菌株生长及降解能力的影响如图1(a)所示:生长量在初始pH 值为7左右时达到最大,而最高降解率56.5%则出现在pH值为6左右.由此可以推测菌株XLL03的最适生长初始pH值为7,最适DDT降解初始pH值为6.2.3.2 外加碳源浓度对菌株的生长及降解能力的影响如图1(b)所示,当外加碳源浓度为0.5%时生长量最大,因此认为葡萄糖是更加便于细菌利用的碳源,所以会加快细菌的生长繁殖.当外加碳源浓度为0.1%时,XLL03对DDT的降解率最大46.6%,降解率随葡萄糖浓度的增加而降低,可以认为细菌优先利用了葡萄糖而对DDT的降解率反而降低.考虑菌株对DDT的降解率,认为0.1%为最佳外加碳源.2.3.3 DDT初始浓度对菌株的生长及降解能力的影响菌株的生长及绝对降解量如图1(c)所示:当DDT浓度从10mg/L逐渐增至50mg/L时,菌株XLL03的生长量和绝对降解量都呈现出先增加后降低的趋势,但菌株生长量在DDT浓度为20mg/L 时达到最大值,而绝对降解量在DDT浓度为40mg/L时达到最大值.认为一定浓度的DDT能够促进菌株的生长量,而浓度大于20mg/L的DDT就会抑制菌株的生长,推测在10~40mg/L的浓度变化中菌株对DDT的耐受性较强,而在浓度达到40mg/L时才会表现出对DDT的降解优势.2.3.4 温度对菌株的生长及降解能力的影响在20~35℃范围内,菌株XLL03的生长量和对DDT的降解率都比较好,在30℃时降解率可以达到48.2%(如图1(d)所示).可以明显得出,菌株XLL03与大部分细菌一样嗜中温,能够在温度适宜的条件下进行各项代谢活动.2.3.5 菌株的生长曲线与DDT降解曲线通过研究菌株的生长特性和降解特性,将菌株的优化条件设为初始pH 6,初始DDT浓度为20mg/L,外加碳源浓度0.1%,培养温度30℃.在此条件下将菌株XLL03连续培养10d,将10d的生长量及DDT残留量绘制成图2:可以看出菌株XLL03的生长曲线与细菌的群体生长规律基本一致,前2d菌株处于延迟期,是对新环境进行适应的过程;在培养的第3d菌株开始快速生长,且在第4d达到最大值,因此这2d对应为对数期,菌株处于最适条件下,生长繁殖很快,相应的消耗有机物的速率也较快,对DDT的降解率也在第4d达到最高值50.4%;此后菌株的数量基本维持平稳的状态,而DDT的剩余量虽略有回升,但基本维持平稳的状态,分析认为除了XLL03的增殖对DDT的降解量增大之外,同时还对DDT有一定的吸附作用,所以之后部分被吸附于菌株表面的DDT又被释放出来,此阶段也即稳定期和衰老期,随着DDT的逐渐耗尽,代谢产物不断积累,生长条件如pH值,氧化还原电位等条件改变,不利于菌株XLL03的生长繁殖,因此生长曲线基本上为水平曲线,而DDT的剩余量也几乎不再变化.2.3.6 DDT代谢产物分析通过GC/MS得到菌株代谢物的总离子流图和代谢产物离子特征图如图3和图4所示:可知DDD,DDE以及DDMU都是DDT的初步代谢产物.并且在检测过程中,未发现代谢产物的积累,说明菌株XLL03对DDT的代谢是一个完整的矿化过程.2.3.7 DDT代谢途径的初步确定结合本实验的中间产物检测结果与现有研究,推测甲基属菌XLL03对DDT可能的代谢途径为:(1)一个氢原子取代脂肪链上的一个氯原子将DDT还原脱氯生成DDD,这种代谢方式在微生物Proteus vulgaris 代谢DDT的途径中出现过,Proteus vulgaris 是最早报道的能够将DDT还原成DDD的微生物之一[28],2003年Ahuja等[26]也提出过在厌氧环境下DDT会被降解为DDD;接着DDD通过进一步脱氯作用被脱去一个氯原子生成DDMU,这一过程在海洋沉积物的实验也曾被证明,DDE和DDD在产甲烷和硫代微生物中被脱氯至DDMU[29-30].(2)DDT脱氯化氢后生成DDE,这一途径与Thomas[31]和Hay[32]的文章中提到的一致,菌株首先将DDT脱氯化氢生成DDE,再在酶的作用下将苯环开环继续降解;随后DDE被脱去氯原子生成DDMU.最终DDMU经过一系列反应可能被矿化为二氧化碳,而DDT和DDE也可能在加氧酶的作用下被直接开环,再通过一系列反应被矿化,大致代谢通路如图5所示.与本研究得出的结论类似,一些其他细菌如气单胞菌(Aeromonashydrophila)HS01[33],黄金杆菌(Chryseobacterium) PYR2[34],红球菌(Rhodococcus)ⅡTR03[35]和恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)T5[36]等细菌都能够在各种媒介中将DDT代谢为DDE和DDMU.此外,Fang等[37]还在宏基因组的基础上得出包括DDT最初经过脱氯作用转化为DDD和DDE,再进一步通过脱氯变为DDMU,最后去氧成为DDA后进一步矿化等涉及还原脱氯,氢化,双加氧,羟基化,脱羧,水解和间位环裂解反应的多步骤过程.而Pan等[38]在基因组功能注释和质谱结构分析的基础上,将苍白杆菌(Ochrobactrum) DDT-2降解DDT过程中的每一步机理都用相应的基因注释标注,在基因方面证实了DDT降解途径的准确性.3.1 从农田土壤中分离到一株能利用DDT作为唯一碳源生长的菌株,经鉴定,该菌株属于甲基菌属(Methylovorus) ,命名为Methylovorus sp. XLL03.3.2 菌株XLL03在温度30°C,pH值为7,外加碳源(葡萄糖)浓度0.5%,初始DDT浓度20mg/L时生长量达最大;在温度30°C,pH值6,外加碳源浓度0.1%,初始DDT浓度20mg/L时对DDT最高降解率可达50.4%.3.3 利用GC/MS分析代谢产物,推测菌株XLL03在代谢DDT的过程中,最初分别通过脱氯和脱氯化氢将DDT转化为DDD和DDE,随后DDD和DDE进一步脱氯得到DDMU,最终DDMU开环后又经过一系列反应被彻底矿化.【相关文献】[1] 顾立峰,何健,张明星,等. DDT降解细菌W-1的分离鉴定及其降解特性研究[J]. 农业环境科学学报, 2007,26(2):568-571.[2] 徐亮,刘月雪,包维楷.生物体内有机氯农药的研究进展[J]. 四川环境, 2003,22(5):15-18.[3] 李红权,李红梅,蒋继志,等.一株DDT降解菌的筛选,鉴定及降解特性的初步研究[J]. 微生物学通报, 2008,35(5):696-699.[4] 刘文斌. DDTs好氧降解菌株的筛选及其降解特性研究[D]. 大连:大连理工大学, 2009.[5] 王占杰.有机氯化物滴滴涕降解研究[D]. 北京:北京化工大学, 2008.[6] 李延红,郭常义,汪国权,等.上海地区人乳中六六六,滴滴涕蓄积水平的动态研究[J]. 环境与职业医学, 2003,20(3):181-185.[7] 潘淑颖.土壤中有机氯农药DDT原位降解研究[D]. 济南:山东大学, 2009.[8] 郁亚娟,黄宏,王斌,等.淮河(江苏段)水体有机氯农药的污染水平[J]. 环境化学,2004,23(5):568-572.[9] 杨嘉谟,王赟,苏青青.长江武汉段水体悬浮物中有机氯农药的残留状况[J]. 环境科学研究, 2004,17(6):27-29.[10] 杨清书,麦碧娴,傅家谟,等.珠江干流河口水体有机氯农药的研究[J]. 中国环境科学,2005,25(S1):47-51.[11] 夏凡,胡雄星,韩中豪,等.黄浦江表层水体中有机氯农药的分布特征[J]. 环境科学研究, 2006,19(2):11-15.[12] 张秀芳,董晓丽.辽河中下游水体中有机氯农药的残留调查[J]. 大连工业大学学报,2002,21(2):102-104.[13] 丛鑫,薛南冬,梁刚,等.有机氯农药污染场地表层土壤有机-矿质复合体中污染物的分布[J]. 环境科学, 2008,29(9): 2586-2591.[14] Gao H J, jiang X, Wang F, et al. Residual level sand new inputs of chlorinated POPSin agricultural soils from Taihu Lake region [J]. Pedosphere, 2005,15(3):301-309.[15] 罗飞,宋静,潘云雨.典型滴滴涕废弃生产场地污染土壤的人体健康风险评估研究[J]. 土壤学报, 2012,49(1):26-35.[16] 吴志昇,谢光炎,杨国义,等.广州市农业土壤中六六六(HCHs)和滴滴涕(DDTs)的残留特征[J]. 生态环境学报, 2009,18(4): 1256-1260.[17] 周晓燕,崔兆杰.土壤及果树中HCH和DDT残留及分布规律研究[J]. 环境科学与技术, 2009,32(5):62-65.[18] 李倦生,陈一清,吴小平,等.湖南省土壤中有机氯农药的残留规律研究[J]. 环境科学研究, 2008-21(5):85-90.[19] 程翠莉.大连地区大气中DDT和HCH的监测与来源解析[D]. 大连:大连海事大学, 2009.[20] 邵丁丁,史双昕,周丽,等.长江沿岸四省大气中的有机氯农药残留量调查[J]. 环境保护, 2007,(24):68-69.[21] 李常亮,刘文彬,汪莉,等. DDT废弃处理与环境修复技术综述[J]. 四川环境, 2007,26(5):87-92.[22] 董玉瑛,冯宵.持久性有机污染物分析和处理技术研究进展[J]. 环境工程学报, 2003,4(6):49-55.[23] Kale S P, Murthy Nbk, Raghu K, et al. Studies on degradation of 14C-DDT in the marine environment [J]. Chemosphere, 1999. 39(6):959-968.[24] 张明星,洪清,何健,等. DDT降解菌株DB-1的分离,系统发育及降解特性[J]. 中国环境科学, 2005,25(6):674-677.[25] Nadeau L, Menn F, Breen A, et al. Aerobic degradation of 1,1,1-trichloro-2,2-bis(4-chlorophenyl)ethane(DDT) by Alcaligenes eutrophus A5 [J]. Appl. Environ. Microbiol., 1998,60:51-55.[26] Ahuja R, Kumar A. Metabolism of DDT(1,1,1-Trichloro-2, 2-bis (4-chlorophenyl)ethane)by Alcaligenes denitrificans ITRC-4 under aerobic and anaerobic conditions [J]. Current microbiology, 2003,46:65-69.[27] 范秀荣,李广武,沈萍.微生物实验 [M]. 2版.北京:高等教育出版社, 1989.[28] Tang J C, Wang R G, Niu X W, et al. Enhancement of soil petroleum remediation by using a combination of ryegrass (Lolium perenne) and different microorganisms [J]. Siol &Tillage Research, 2010,110:57-93.[29] Rd Q J, Mueller S A, Jain M K, et al. Reductive dechlorination of DDE to DDMU in marine sediment microcosms [J]. Science, 1998,280(5364):722-724.[30] Rd Q J, Tiedje J M, Jain M K, et al. Factors controlling the rate of DDE dechlorination to DDMU in Palos Verdes margin sediments under anaerobic conditions [J]. Environmental Science & Technology, 2001,35(2):286-291.[31] Doronina N V, Kaparullina E N, Trotsenko Y A. Methylovorus menthalis, a novel species of aerobic obligate methylobacteria associated with plants [J]. Microbiology, 2011,80(5):713-719.[32] Hay A G, Focht DD. Transformation of 1,1-dichloro-2, 2-(4- cholorophenyl)ethane (DDD) by Ralstonia eutropha strain A5 [J]. Fems Microbiology Ecology, 2000,31:249-253.[33] Cao F, Liu T X, Wu C Y, et al. Enhanced biotransformation of DDTs by an iron- and humic-reducing bacteria Aeromonas hydrophila HS01upon addition of goethite and anthraquinone-2, 6-disulphonic disodium salt (AODS) [J]. Agric. Food Chem,2012,60(45):11238-11244.[34] Rangachary L, Rajagopalan R P, Singh T M, et al. Purification and characterization of DDT-dehydrohalogenease from Pseudompnas putida T5 [J]. Prep. Biochem. Biotechnol. 2012, 42(1):60-76.[35] Bajaj A, Mayilraj S, Mudiam M K R, et al. Isolation and functional analysis of a glycolipid producing Rhodococcus sp. Strain ⅡTR03 with potential for degradation of 1,1,1-trichloro-2, 2-bis(4-chlorophenyl)ethane (DDT) [J]. Bioresour. Technol. 2014,167:398-406.[36] Qu J, Xu Y, Ai G M, et al. Novel Chryseobacterium sp. PYR2degrades various organochlorine pesticides (OCPs) and achieves enhancing removal and complete degradation of DDT in highly contaminated soil [J]. Environ. Manag. 2015,161:350-357. [37] Fang H, Dong B, Yan H, et al. Characterization of a bacterial strain capable of degrading DDT congeners and its use in bioremediation of contaminated soil [J]. Hazard. Mater. 2010, 184:281-289.[38] Pan Xiong, Xu Tian heng, Xu Hao yu, et al. Characterization and genome functional analysis of the DDT-degrading bacterium Ochrobactrum sp.DDT-2 [J]. Science of the Total Environment, 2017,592:593-599.。

一株喹啉降解菌的降解特性及代谢途径研究

杂环上氮原子以氨氮的形式释放。
关键词：啉生物降解动力学Ｆ — 喹ＴＩ代谢途径Ｒ
原油一般由碳、、、、等元素组成，中氢氧氮硫其氮元素的质量分数一般在００～２０，油中．２，．０石９６
２ｍＬ微量元素储备液，足蒸馏水至１００ｍＬ补０。ＬＢ培养基：１０ｍＬ蒸馏水中加入蛋白胨１ｇ在０、酵母抽提物０５ｇＮａ１，Ｈ值为７０７２．、Ｃｇｐ１．～．。微量元素储备液：Ｓ￣Ｈ．，ｎＯ・ＨＭｎＯ・Ｏ０１ｇＺＳ４７Ｏ
摘
要：某石化厂污水处理站厂区内受石油污染的土壤中分离出１株能以喹啉为唯一碳源、源和能源从氮
生长代谢的菌株Ｑ２降解试验结果表明，２能将喹啉质量浓度为５０ｍｇＬ的培养液中的喹啉在３。Ｑ０／２ｈ内完全
去除，其降解喹啉的适宜温度为３ｏ℃、培养基初始ｐＨ值为８０摇床转速为１００／ｎ喹啉浓度对Ｑ２～１、０￣２０ｒｍｉ，
的降解有较大影响，啉质量浓度为ｌ５７６ｍｇＬ时，喹９～９／Ｑ２降解喹啉的过程符合零级动力学方程。生物降解过程中，养液从黄色变为粉红色，后呈棕色。红外光谱分析显示，培最Ｑ２降解途径很可能为８羟基香豆素途径，一且

吐温-80对硝酸咪康唑抑菌效果的影响

Байду номын сангаас
温一０８的硝酸咪康唑溶液对白色念珠菌进行抗菌活将沙氏琼脂培氧基加热熔化，倾注无菌平皿中，每性研究，以抑菌圈的直径大小观察抗菌效果，现将ｎ２￣，ｌ０１放冷凝固后作为底恳另取培氧基加热熔实验结果报道如下。化后放冷至４ ℃￣５＂加入一定量白色念珠菌悬８０Ｃ，１仪器与药试液，摇匀，在上述平皿中每碟加入５Ｌ摊布均匀，ｍ，
明显，病程好转较不冲洗快。但该制剂不稳定，存咪康唑研磨，搅拌下加入已溶于氯化钠的８ ℃左０放到一个月左右即析出硝酸咪康唑结晶。通过对配右的纯化水，最后添加纯化水至足量，搅拌均匀，制００％．１硝酸咪康唑溶液的实验研究［，对原处方含测合格后过滤分装，灭菌放冷即得。共三个样ｕ和工艺进行改进，加入吐温－０８增加硝酸咪康唑在品。水溶液中的溶解度，所得制剂经留观１个月，２质量稳定。为了解吐温０硝酸咪康唑抑菌效果的影对响，通过对含吐温一０８的硝酸咪康唑溶液、不含吐２１３配制０９．．．％氯化钠溶液。２１４配制０３．．．％吐温－０溶液。８２２管碟法测定抑菌圈大小，比较抑菌效果。．
样品。４讨论
４１硝酸咪康唑为咪唑类抗真菌药，已在临．
维普资讯
表２不含与含吐温一０的硝酸咪康唑溶液对白色念珠菌抑菌圈对比比较８
床使用多年，其抗真菌作用疗效确切。对许多临
４３采用吐温－０为增溶剂来配成的硝酸咪．８作２个月，质量保持稳定。该床致病真菌，如白色念珠菌、新生隐球菌、芽生康唑溶液，经留观１菌、球孢子菌、拟酵母菌等深部真菌和一些表皮制剂经三年多时间的使用，临床使用科室反馈效果真菌等都有良好的抗菌作用。硝酸咪康唑为白色或

吐温80分解

吐温80分解
摘要：
1.什么是吐温80
2.吐温80 的用途
3.吐温80 的分解
4.吐温80 分解的影响
5.如何应对吐温80 分解
正文：
吐温80 是一种非离子表面活性剂，常用于食品、药品、化妆品和个人护理产品中，具有良好的乳化和分散性能。

然而，吐温80 在环境中分解时，可能会产生有害物质，对生态环境和人类健康造成潜在影响。

吐温80 的分解主要发生在水体中，通过微生物降解和光解等途径进行。

在自然环境中，吐温80 的降解速度较慢，可能会长时间存在于水体中，影响水质。

此外，吐温80 分解产生的代谢产物，如醇类和醚类物质，具有一定的毒性，可能对水生生物和人类健康产生不良影响。

为了应对吐温80 分解带来的环境问题，我国已经采取了一系列措施。

首先，限制吐温80 在部分产品中的使用，降低其对环境的影响。

其次，加强对吐温80 生产和使用的监管，确保其使用符合环保要求。

最后，加大对吐温80 分解研究的支持，寻求环保、高效的替代产品。

综上所述，吐温80 的分解问题不容忽视。

我们应关注其潜在的环境风险，并采取有效措施减少其对生态环境和人类健康的影响。

吐温80灭菌方法

吐温80灭菌方法随着科技的不断发展和人们对卫生安全的日益重视，灭菌方法成为了我们生活中不可或缺的一部分。

其中，吐温80灭菌方法作为一种常用的灭菌方法，被广泛应用于医疗、食品加工和实验室等领域。

本文将重点介绍吐温80灭菌方法的原理、操作步骤和应用范围，以期为读者提供相关知识和指导。

吐温80灭菌方法是以吐温80为主要灭菌剂的一种灭菌方法。

吐温80，又称为辛酸甘油酯，是一种非离子表面活性剂，具有较好的杀菌效果。

吐温80灭菌方法的基本原理是通过吐温80分子与细菌细胞膜相互作用，破坏细胞膜结构，导致细胞内容物泄漏，最终达到灭菌的效果。

吐温80灭菌方法的操作步骤如下：1. 准备工作：将吐温80溶液稀释至适当浓度，准备好待灭菌的器具或物品。

2. 涂抹法：将吐温80溶液均匀涂抹在待灭菌的表面上，确保完全覆盖。

然后等待一定时间，让吐温80与细菌充分作用。

3. 温湿热法：将待灭菌的器具或物品浸泡在含有吐温80的温湿环境中，同时加热至一定温度。

温湿热可以增加吐温80与细菌之间的作用力，提高灭菌效果。

4. 温度和时间的控制：根据不同的实验要求和物品特性，确定适当的温度和时间参数。

通常情况下，温度在60-80摄氏度之间，时间在10-30分钟之间。

5. 清洗和干燥：灭菌结束后，将物品进行清洗和干燥，确保吐温80残留物的彻底清除。

吐温80灭菌方法具有以下优点和应用范围：1. 广谱杀菌：吐温80灭菌方法对多种细菌和真菌具有较好的杀菌效果，可以有效消灭病原微生物。

2. 简单易行：吐温80灭菌方法操作简单，无需复杂的设备和条件，适用于各种场合。

3. 经济环保：吐温80是一种环境友好型灭菌剂，不会对环境造成污染，使用成本较低。

4. 应用广泛：吐温80灭菌方法广泛应用于医疗器械、食品加工、实验室等领域。

例如，在医院中，可以用吐温80灭菌方法对手术器械、诊断仪器进行灭菌，确保手术操作和诊断结果的准确性和安全性。

吐温80灭菌方法是一种简单易行、经济环保且广泛应用的灭菌方法。

吐温80分解温度

吐温80分解温度（原创实用版）目录1.吐温 80 的定义和用途2.吐温 80 的分解温度3.吐温 80 分解温度的影响因素4.吐温 80 分解温度的测试方法5.吐温 80 分解温度在实际应用中的意义正文吐温 80，即聚山梨酯 80，是一种非离子型表面活性剂。

它广泛应用于制药、食品、化妆品等行业，作为乳化剂、增稠剂、分散剂等。

吐温 80 的特性之一是其分解温度，即在特定温度下，吐温 80 会发生分解反应。

本文将探讨吐温 80 的分解温度及其影响因素、测试方法以及在实际应用中的意义。

吐温 80 的分解温度受多种因素影响，如原料类型、生产工艺、分子结构等。

一般来说，吐温 80 的分解温度在 80℃左右，这也是其名字“吐温 80”的由来。

但具体温度还需根据具体情况而定，因此在实际应用中需要进行具体测试。

测试吐温 80 分解温度的方法通常是将其置于不同温度的环境中，观察其稳定性。

如果吐温 80 在特定温度下出现沉淀、分层等现象，说明该温度已经接近或达到了其分解温度。

通过这种方法，可以确定吐温 80 在实际应用中的安全温度范围。

吐温 80 分解温度在实际应用中具有重要意义。

首先，它关系到吐温80 在不同温度下的稳定性。

当温度接近或超过分解温度时，吐温 80 容易发生分解，导致产品性能下降。

因此，在制药、食品等对产品质量要求较高的领域，需要确保吐温 80 的使用温度在其分解温度以下。

其次，吐温 80 分解温度还可以作为选择合适型号的依据。

例如，如果需要在高温环境下使用吐温 80，可以选择分解温度较高的型号，以保证其在高温下的稳定性。

总之，吐温 80 的分解温度是衡量其性能和稳定性的重要指标。

了解吐温 80 的分解温度及其影响因素，有助于在实际应用中选择合适的型号和确保产品质量。