DMEM培养基配方
DMEM高糖配方培养基
DMEM高糖配方/F12培养基说明书产品代号：MD207-050一．【组成成分】成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68二．【产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解，溶液澄明。
pH值①加NaHCO3 6.60～7.20②不加NaHCO3 5.50～6.10水分（%）≤5.0渗透压（mOsm/kgH2O）①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238～263细菌内毒素（EU/ml）≤10微生物检查（CFU/g）≤1000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
DMEM培养基配制方法
DMEM培养基配制方法DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛应用于细胞培养、病毒繁殖和实验室研究中。
DMEM培养基含有多种必需和非必需氨基酸、糖类、维生素和盐类成分，提供了生长细胞所需的营养和环境。
以下是DMEM培养基的配制方法。
配制DMEM培养基的主要成分包括基础培养基、补充物和pH调节剂。
基础培养基：1.准备适量的无菌去离子水，用于稀释和配制DMEM培养基。
补充物：1.氨基酸：将提供的无菌氨基酸液中的每种氨基酸均匀混合，制得氨基酸混合液。
如有需要，可以根据实验需求添加特定的氨基酸。
2.糖类：将葡萄糖溶液与无菌去离子水混合，配制成葡萄糖溶液。
3.维生素：将提供的无菌维生素溶液与去离子水混合，制得维生素溶液。
4.盐类：将提供的无菌盐溶液与去离子水混合，制得盐溶液。
pH调节剂：1. 英文名Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）：是一种常用的pH缓冲剂。
取适量的Tris溶液。
2. 英文名Sodium bicarbonate：是一种重要的pH调节剂，可提供细胞培养中所需的碱性环境。
取适量的Sodium bicarbonate溶液。
先准备好所需的试剂和仪器，并保证它们是无菌的。
配制过程如下：1.取适量的基础培养基（DMEM），移至无菌培养瓶中。
2.依次向DMEM基础培养基中加入补充物。
首先加入氨基酸混合液，根据提供的比例将其加入培养基中，充分混合。
然后加入葡萄糖溶液、维生素溶液和盐溶液，依次混合均匀。
3. 加入适量的Tris溶液，用于调节pH值。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Tris溶液，同时用pH计测量pH值，直到达到所需的pH范围（通常为7.2-7.4）。
4. 加入适量的无菌Sodium bicarbonate溶液，用于调节和维持培养基的碱性环境。
根据实验需求和DMEM配方，逐渐加入Sodium bicarbonate溶液，充分混合。
DMEM培养基配方
DMEM培养基配方DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）是一种常用的培养基，常用于细胞培养和病毒培养中。
该培养基是由Eagle在1961年发展而来的，并在之后被Dulbecco所改进，增加了可以用于细胞培养的组分。
DMEM培养基具有良好的细胞生长和维持能力，适用于多种细胞系的培养。
以下是DMEM培养基的标准配方：成分（每1升DMEM培养基）：-无菌去离子水1000mL- 葡萄糖（D-葡萄糖） 1000 mg- L-谷氨酰胺 584 mg-青霉素/链霉素100单元/mL-菌脂体抗生素混合物（氰胺苯胂和核黄素酮）10mL-青霉素/链霉素抗生性混合物10mL- 乳酸 660 mg- 杂酸钠 200 mg- 高氨基酸（L-谷氨酸，L-赖氨酸，L-Leu，L-异亮氨酸，L-Lys，L-Met，L-Phe，L-Thr，L-Trp，L-Arg，L-His，L-Ile，L-Val） 2 mL - L-胱氨酸 4 mg- 胖利钠 392 mg-维生素溶液（1X）10mL-必需氨基酸溶液10mL-非必需氨基酸10mL-小牛血清10%各组分的详细介绍如下：1.无菌去离子水：用于稀释和制备培养基，确保培养基的无菌。
4.青霉素/链霉素：抗菌药物，避免培养基中细菌的污染，浓度为100单元/mL。
5.菌脂体抗生素混合物：混合了氰胺苯胂和核黄素酮，提供对细菌和真菌的广谱抗生素覆盖。
6.青霉素/链霉素抗生素性混合物：对细菌的广谱抗生素覆盖。
7.乳酸：调节培养基的酸碱平衡，以维持适宜的细胞生长环境。
8.杂酸钠：提供缓冲剂，维持培养基的pH值稳定。
9.高氨基酸：添加了多种必需氨基酸，为细胞提供生长所需的氨基酸。
10.L-胱氨酸：提供了硫含量丰富的氨基酸，对细胞代谢和抗氧化有重要作用。
11. 填充无机盐 392 mg：提供一些无机盐，维持细胞代谢所需的电解质平衡。
12.维生素溶液（1X）：提供维生素，满足细胞生长过程中的营养需求。
DMEM-F12培养基成分
DMEM/F12培养基说明书产品代号：MD207-050【组成成分】成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042五水硫酸铜 0.0013 L—赖氨酸盐酸盐 91。
25 硫辛酸 0。
105 九水硝酸铁 0。
05 L—蛋氨酸 17。
24 酚红 8.1七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081氯化钾 311。
8 L-丝氨酸 26。
25 丙酮酸钠 55氯化镁 28.64 L—苏氨酸 53。
45 维生素H 0.0035无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2。
24氯化钠 6999.5 L—天门冬酰胺 7。
5 氯化胆碱 8。
98无水磷酸二氢钠 54。
35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠 71。
02 L—半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6 七水硫酸锌 0.432 L—谷氨酸 7.35 烟酰胺 2。
02L—精氨酸盐酸盐 147.5 L—脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2L—胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031L-谷氨酰胺 365 L—酪氨酸 38.4 核黄素 0.219甘氨酸 18.75 L—缬氨酸 52。
85 盐酸硫胺 2.17L—组氨酸盐酸盐 31.48 D—葡萄糖 3151 胸苷 0.365 L—异亮氨酸 54。
47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68 【产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解,溶液澄明。
pH值①加NaHCO3 6。
60～7。
20②不加NaHCO3 5.50～6。
10水分（%）≤5。
0渗透压（mOsm/kgH2O）①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238~263细菌内毒素（EU/ml）≤10微生物检查（CFU/g）≤1000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10%小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml 增加到105细胞/ml。
DMEM、F12培养基配置方法
DMEM/F12培养基（华越洋生物）DMEM/F12培养基说明书一．【组成成分】成分mg/L 成分mg/L 成分mg/L无水氯化钙116.6 L-亮氨酸59.05 亚油酸0.042五水硫酸铜0.0013 L-赖氨酸盐酸盐91.25 硫辛酸0.105九水硝酸铁0.05 L-蛋氨酸17.24 酚红8.1七水硫酸亚铁0.417 L-苯丙氨酸35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081 氯化钾311.8 L-丝氨酸26.25 丙酮酸钠55氯化镁28.64 L-苏氨酸53.45 维生素H 0.0035无水硫酸镁48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24 氯化钠6999.5 L-天门冬酰胺7.5 氯化胆碱8.98 无水磷酸二氢钠54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠71.02 L-半胱氨酸盐酸盐17.56 i-肌醇12.6七水硫酸锌0.432 L-谷氨酸7.35 烟酰胺 2.02L-精氨酸盐酸盐147.5 L-脯氨酸17.25 盐酸吡哆醛2L-胱氨酸盐酸盐31.29 L-色氨酸9.02 盐酸吡哆醇0.031 L-谷氨酰胺365 L-酪氨酸38.4 核黄素0.219 甘氨酸18.75 L-缬氨酸52.85 盐酸硫胺 2.17 L-组氨酸盐酸盐31.48 D-葡萄糖3151 胸苷0.365L-异亮氨酸54.47 次黄嘌呤2 维生素B12 0.68 二．【产品指标】外观：粉红色固体粉末溶解性：完全溶解，溶液澄明。
pH值：①加NaHCO3 6.60～7.20②不加NaHCO3 5.50～6.10水分（%）：≤5.0渗透压（mOsm/kgH2O）：①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238～263细菌内毒素（EU/ml）：≤10微生物检查（CFU/g）：≤1000细胞生长试验细胞形态：与标准细胞形态相似细胞数量：加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
DMEM培养基配方
序号
化合物名称
含量(mg/L)
序号
化合物名称
含量(mg/L)
1
无水氯化钙.2H2O
265.00
18
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁.9H2O
0.10
19
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
20
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
21
L-酪氨酸
72.00
5
氯化钠
6400.00
22
含量(mg/L)
1
无水氯化钙
200.00
17
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁.9H2O
0.10
18
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
19
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
20
L-酪氨酸钠盐
104.00
5
氯化钠
6400.00
21
L-缬氨酸
94.00
6
无水磷酸二氢钠
125.00
22
D-泛酸钙
4.00
29
盐酸硫胺
4.00
13
L-异亮氨酸
105.00
30
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-亮氨酸
105.00
31
葡萄糖
1000.00
15
L-盐酸赖氨酸
146.00
32
丙酮酸钠
.00
33
酚红
17
L-苯丙氨酸
各种培养液的配方
各种培养液的配方不同的细胞类型和培养目的需要使用不同的培养液。
下面列举一些常见的细胞培养液配方及其用途。
1.DMEM培养液：DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种最常用的细胞培养基，适用于多种哺乳动物细胞的培养。
以下是DMEM培养液的配方：-1×DMEM：将DMEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%胎牛血清（FBS）：将FBS加入1×DMEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素（如青霉素/链霉素）加入1×DMEM中，使最终浓度为1%。
2.RPMI1640培养液：RPMI1640是一种适用于淋巴细胞和白血病细胞的培养基。
以下是RPMI1640培养液的配方：-1×RPMI1640：将RPMI1640粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×RPMI1640中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×RPMI1640中，使最终浓度为1%。
- 2-mercaptoethanol：将2-mercaptoethanol加入1×RPMI 1640中，使最终浓度为0.05mM。
3.MEM培养液：MEM（Minimum Essential Medium）是一种用于哺乳动物细胞培养的基础培养液。
以下是MEM培养液的配方：-1×MEM：将MEM粉末加入去离子水中，调整pH至7.2-7.4，用0.22μm过滤器过滤灭菌。
-10%FBS：将FBS加入1×MEM中，使最终浓度为10%。
-1%抗生素/抗菌素：将1%抗生素/抗菌素加入1×MEM中，使最终浓度为1%。
-1×非必需氨基酸：将非必需氨基酸（如谷氨酰胺、苏氨酸等）加入1×MEM中。
细胞培养基及其配制方法
D ME M(A)细胞培养基（粉末型）成分会上升0.1到0.3，因而调节pH值使它比最终想要的pH值低0.2到0.3。
培养基在过滤前要保持密封。
配制培养基要注意以下问题：●认真阅读说明书。
说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。
这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。
●配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。
●配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。
●所用器皿应严格消毒。
●配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。
●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素等的溶液，可节省科研人员的工作量。
DMEM各种成分都有什么作用一般的基础培养基包括四大类物质：无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物。
（1）无机盐：对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。
（2）氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型)都是细胞用以合成蛋白质的必需氨基酸，不能由其他氨基酸或糖类转化合成。
除此之外，还需要谷氨酰胺(glutamine)。
谷氨酰胺具有特殊的作用，对细胞的培养特别重要，能促进各种氨基酸进入细胞膜；它所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的来源，还是合成—磷酸腺苷、二磷酸腺甘和三磷酸腺苷的原料。
细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，谷氨酰胺缺乏可导致细胞生长不良甚至死亡。
在配制各种培养液中都应补加一定量的谷氨酰胺。
值得注意的是：谷氨酰胺在溶液中很不稳定，故4℃下放置1周可分解50%，使用中最好单独配制，置-20℃冰箱中保存，用前加入培养液中。
（3）维生素：是维持细胞生长的一种生物活性物质，在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶，对细胞代谢有重大影响。
（4）碳水化合物：是细胞生命的能量来源，有的是合成蛋白质和核酸的成分。
DMEM高糖配方培养基
DMEM高糖配方/F12培养基说明书产品代号：MD207-050一．【组成成分】成分mg/L 成分mg/L 成分mg/L无水氯化钙116.6 L-亮氨酸59.05 亚油酸0.042五水硫酸铜0.0013 L-赖氨酸盐酸盐91.25 硫辛酸0.105九水硝酸铁0.05 L-蛋氨酸17.24 酚红8.1七水硫酸亚铁0.417 L-苯丙氨酸35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081氯化钾311.8 L-丝氨酸26.25 丙酮酸钠55氯化镁28.64 L-苏氨酸53.45 维生素H 0.0035无水硫酸镁48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24氯化钠6999.5 L-天门冬酰胺7.5 氯化胆碱8.98无水磷酸二氢钠54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠71.02 L-半胱氨酸盐酸盐17.56 i-肌醇12.6七水硫酸锌0.432 L-谷氨酸7.35 烟酰胺2.02L-精氨酸盐酸盐147.5 L-脯氨酸17.25 盐酸吡哆醛2L-胱氨酸盐酸盐31.29 L-色氨酸9.02 盐酸吡哆醇0.031L-谷氨酰胺365 L-酪氨酸38.4 核黄素0.219甘氨酸18.75 L-缬氨酸52.85 盐酸硫胺 2.17L-组氨酸盐酸盐31.48 D-葡萄糖3151 胸苷0.365L-异亮氨酸54.47 次黄嘌呤2 维生素B12 0.68二．【产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解，溶液澄明。
pH值①加NaHCO3 6.60～7.20②不加NaHCO3 5.50～6.10水分（%）≤5.0渗透压（mOsm/kgH2O）①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238～263细菌内毒素（EU/ml）≤10微生物检查（CFU/g）≤1000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
三.【配制方法】⑴将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容器。
DMEM培养基配方
DMEM培养基配方DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）是一种常用的细胞培养基，广泛用于体外细胞培养和研究。
下面是一种常见DMEM培养基的配方，以及其组成成分和原理解析。
1.DMEM基础培养基：-DMEM混合物：420mL-热灭菌的双蒸馏水：500mL2.补充物：-胎牛血清（FBS）：100mL-青霉素和链霉素：1mL-10%海马酸溶液：5mL配方的组成成分和原理解析：1.DMEM基础培养基：DMEM是Eagle培养基的一种改良版，其中包含了额外的氨基酸、维生素和无机盐。
DMEM是无血清培养基，不含胎牛血清，可减少实验结果受到外界因素的影响。
2.热灭菌的双蒸馏水：双蒸馏水是通过蒸馏过程去除水中的杂质和微生物，保证细胞培养过程中的无菌状态。
3.胎牛血清（FBS）：胎牛血清是培养细胞所必需的重要补充物，其中含有许多生长因子、激素和蛋白质，可以提供细胞所需的养分。
4.青霉素和链霉素：青霉素和链霉素是两种广谱抗生素，用于预防和控制细胞培养中的细菌污染。
5.10%海马酸溶液：海马酸（L-glutamine）是一种重要的氨基酸，对细胞的生长和分裂非常关键。
10%的海马酸溶液用于提供细胞所需的L-谷氨酰胺。
补充物中的FBS用于提供细胞所需的生长因子、激素和蛋白质。
青霉素和链霉素的加入可以预防细菌感染，确保细胞培养的纯度和健康度。
海马酸溶液则提供细胞所需的L-谷氨酰胺，促进细胞的生长和分裂。
总结：DMEM培养基是一种常用的细胞培养基，配方中包含基础培养基、水和补充物。
基础培养基提供细胞所需的基本成分，而补充物则提供细胞所需的生长因子、抗生素和氨基酸。
这种培养基的配方可以为细胞提供稳定的生存环境，促进细胞的生长和分裂。
常用细胞培养基配方及缓冲液
常用细胞培养基配方及缓冲液细胞培养基是一种含有适当营养物质和生长因子的液体或凝胶，用于维持细胞的生长与繁殖。
常用的细胞培养基配方和缓冲液如下：一、常用的细胞培养基配方：1. DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）-DMEM是最常用的细胞培养基之一，适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：-高糖DMEM：添加25mM葡萄糖-低糖DMEM：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸DMEM：添加高浓度的氨基酸，以促进细胞生长和蛋白质合成。
2.RPMI1640-适用于淋巴细胞和一些肿瘤细胞的培养。
-基本配方：-高糖RPMI1640：添加25mM葡萄糖-低糖RPMI1640：添加5.5mM葡萄糖-高氨基酸RPMI1640：添加高浓度的氨基酸。
3. MEM（Minimum Essential Medium）-MEM是最早用于细胞培养的培养基。
-基本配方：-高糖MEM：添加25mM葡萄糖-低糖MEM：添加5.5mM葡萄糖4. Ham's F-10-适用于肿瘤细胞和一些原代细胞的培养。
-基本配方：- 高糖Ham's F-10：添加25mM葡萄糖- 低糖Ham's F-10：添加5.5mM葡萄糖5.L-15-适用于多种种类的细胞培养。
-基本配方：- L-15培养基：必须在CO2-free环境下使用。
二、常用的缓冲液：1. 磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，PBS）-0.1MPBS的配方：-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-1L去离子水-调pH至7.42.HEPES缓冲液-基本配方：-119mMNaCl-5mMKCl-0.8mMMgSO4-0.4mMKH2PO4-2.4mMNaHCO3-20mMHEPES（pH7.4）-0.6mMCaCl23. Tris缓冲液-基本配方：- 25mM Tris- 192mM glycine-10%甘油-0.1%SDS-pH8.34. Hanks平衡盐液 (HBSS)-基本配方：-8gNaCl-0.4gKCl-0.146gKH2PO4-0.2gMgSO4-0.06gMgCl2-0.35gNaHCO3-0.06gNa2HPO4-pH7.45. Tris-EDTA-基本配方：- 1M Tris-HCl，pH 8.0-0.5MEDTA，pH8.0以上是常用的细胞培养基配方和缓冲液的一些例子，不同细胞类型和实验要求可能需要不同的培养基和缓冲液。
最新dmemf12培养基成分资料
DMEM/F1培养基说明书产品代号： MD207-050【组成成分】成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L无水氯化钙 116.6 L- 亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042 五水硫酸铜0.0013 L- 赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105 九水硝酸铁 0.05L- 蛋氨酸 17.24 酚红 8.1七水硫酸亚铁 0.417 L- 苯丙氨酸 35.48 1,4- 丁二胺二盐酸盐0.081氯化钾 311.8 L- 丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55氯化镁 28.64 L- 苏氨酸 53.45 维生素 H 0.0035无水硫酸镁 48.84 L- 丙氨酸 4.45 D- 泛酸钙 2.24氯化钠 6999.5 L- 天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98 无水磷酸二氢钠 54.35 L- 天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65 磷酸氢二钠 71.02 L- 半胱氨酸盐酸盐 17.56 i- 肌醇 12.6 七水硫酸锌 0.432 L- 谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02L-精氨酸盐酸盐147.5 L-脯氨酸17.25 盐酸吡哆醛2L-胱氨酸盐酸盐31.29 L-色氨酸9.02 盐酸吡哆醇0.031 L-谷氨酰胺365 L-酪氨酸38.4 核黄素0.219甘氨酸 18.75 L- 缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17L-组氨酸盐酸盐31.48 D-葡萄糖3151胸苷0.365L-异亮氨酸54.47 次黄嘌呤2维生素B12 0.68产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解，溶液澄明。
pH值①加 NaHCO3 6.60^ 7.20②不加 NaHCO3 5.50-6.10水分（% < 5.0渗透压（ mOsm/kgH2O①加 NaHCO3 27-4 302②不加 NaHCO3 23-8 263细菌内毒素（EU/ml）< 10微生物检查（CFU/g < 1000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10%小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
完全培养基配制操作方法
完全培养基配制操作方法完全培养基（Complete medium）是一种为细胞培养提供所有必需营养物质的培养基。
完全培养基包括有机和无机物质、糖、氨基酸、维生素和激素等物质，可以满足细胞的生长和增殖的需求。
下面是一种常见的制备完全培养基的方法。
1. 准备实验室所需设备和试剂，包括称量器具、移液器、试剂瓶等。
2. 按照预先计算好的配方准备所需的试剂。
完全培养基的配方可以根据具体实验需要调整。
以下为一种常用的完全培养基配方：- DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）培养基- FBS（Fetal Bovine Serum）胎牛血清- L-谷氨酰胺粉末（或谷氨酸盐酸盐）- 青霉素和链霉素（或青霉素和链霉素抗生素混合物）3. 使用称量器具称量所需的DMEM粉末，并将其溶解于无菌蒸馏水中。
根据DMEM培养基的配方指导书，溶解适量的DMEM粉末可以得到一定浓度的DMEM培养基溶液。
4. 将配制好的DMEM培养基溶液过滤器通过0.22微米的滤膜过滤器以去除悬浮物和细菌，得到无菌的DMEM培养基液。
5. 加入适量的FBS胎牛血清到DMEM培养基中。
一般情况下，FBS浓度为10%。
加入FBS胎牛血清的目的是提供细胞生长所需的营养物质和生长因子。
6. 加入适量的L-谷氨酰胺粉末（或谷氨酸盐酸盐）到DMEM培养基中，以提供氨基酸供细胞使用。
L-谷氨酰胺是蛋白质合成的重要组成部分。
7. 加入适量的青霉素和链霉素（或青霉素和链霉素抗生素混合物）到DMEM培养基中，以预防细菌污染。
青霉素和链霉素是在无菌环境中操作时添加的，以防止培养物中细菌的生长。
8. 将配制好的完全培养基溶液分装到无菌的试剂瓶中，并进行无菌操作，以避免污染。
常用的分装方式是使用无菌移液器将培养基吸取到试剂瓶中。
9. 将完全培养基储存在低温干燥的地方，以延长其保存时间。
10. 在使用前，将完全培养基溶液加热到37摄氏度，使其达到体内温度。
细胞培养基及其配制方法
D ME M（A)细胞培养基（粉末型)成分配制培养基要注意以下问题：●认真阅读说明书。
说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。
这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。
●配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。
●配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。
●所用器皿应严格消毒。
●配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。
●液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素等的溶液，可节省科研人员的工作量。
DMEM各种成分都有什么作用一般的基础培养基包括四大类物质:无机盐、氨基酸、维生素、碳水化合物.(1)无机盐：对调节细胞渗透压、某些酶的活性及溶液的酸碱度都是必须的。
（2）氨基酸：缬氨酸、亮、异亮、苏、赖、色、苯丙、蛋、组、酪、精氨酸、胱氨酸(L型）都是细胞用以合成蛋白质的必需氨基酸，不能由其他氨基酸或糖类转化合成。
除此之外，还需要谷氨酰胺（glutamine）。
谷氨酰胺具有特殊的作用，对细胞的培养特别重要，能促进各种氨基酸进入细胞膜；它所含的氮是核酸中嘌呤和嘧啶的来源，还是合成—磷酸腺苷、二磷酸腺甘和三磷酸腺苷的原料。
细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质，谷氨酰胺缺乏可导致细胞生长不良甚至死亡.在配制各种培养液中都应补加一定量的谷氨酰胺。
值得注意的是：谷氨酰胺在溶液中很不稳定,故4℃下放置1周可分解50%，使用中最好单独配制,置-20℃冰箱中保存，用前加入培养液中。
（3）维生素：是维持细胞生长的一种生物活性物质，在细胞中大多形成酶的辅基或辅酶，对细胞代谢有重大影响。
（4）碳水化合物:是细胞生命的能量来源,有的是合成蛋白质和核酸的成分.体外培养动物细胞时，几乎所有培养基或培养液中都以葡萄糖作为必含的能源物质。
(5）葡萄糖和谷胺酰胺：体外培养条件下，葡萄糖主要经糖酵解降解，产生过量的乳酸。
脱纤维羊血培养基配方
脱纤维羊血培养基配方
脱纤维羊血培养基是一种用于细胞培养的基础培养基，通过提供细胞所需的营养物质和环境条件，使细胞能够正常生长和繁殖。
下面是一种常用的脱纤维羊血培养基配方。
配方如下：
- DMEM/F12培养基：500ml
- 脱纤维羊血清：10% (v/v)
- 青霉素/链霉素：1% (v/v)
- 丙氨酰胺：1% (v/v)
- 胰岛素：10ng/ml
- 转铁蛋白：10μg/ml
将500ml DMEM/F12培养基倒入一个无菌培养瓶中。
然后，加入10%的脱纤维羊血清，这是培养细胞所需的主要营养物质来源。
接下来，加入1%的青霉素/链霉素，这是一种抗生素，可以预防细胞培养过程中的细菌感染。
同时，也加入1%的丙氨酰胺，这是一种氨基酸，可以提供细胞所需的能量和合成物质。
此外，还需要添加10ng/ml的胰岛素，这是一种生长因子，可以促进细胞的增殖和分化。
最后，加入10μg/ml的转铁蛋白，这是一种铁载体蛋白，可以提供细胞所需的铁元素。
以上就是一种常用的脱纤维羊血培养基配方，通过提供细胞所需的营养物质和环境条件，可以促进细胞的正常生长和繁殖。
在使用脱
纤维羊血培养基进行细胞培养时，需要注意无菌操作，确保培养基的质量和纯度。
同时，也需要根据具体的细胞类型和实验目的进行相应的调整和优化，以获得更好的培养效果。
细胞培养是一项重要的实验技术，对于细胞生物学和医学研究具有重要意义。
通过优化培养条件和配方，可以获得高质量的细胞，为后续的实验和研究提供可靠的基础。
DMEMF12培养基说明书
DMEM/F12培养基说明书产品代号：MD207-050一．【组成成分】成分mg/L 成分mg/L 成分mg/L无水氯化钙116.6 L-亮氨酸59.05 亚油酸0.042五水硫酸铜0.0013 L-赖氨酸盐酸盐91.25 硫辛酸0.105九水硝酸铁0.05 L-蛋氨酸17.24 酚红8.1七水硫酸亚铁0.417 L-苯丙氨酸35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐0.081氯化钾311.8 L-丝氨酸26.25 丙酮酸钠55氯化镁28.64 L-苏氨酸53.45 维生素H 0.0035无水硫酸镁48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24氯化钠6999.5 L-天门冬酰胺7.5 氯化胆碱8.98无水磷酸二氢钠54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65磷酸氢二钠71.02 L-半胱氨酸盐酸盐17.56 i-肌醇12.6七水硫酸锌0.432 L-谷氨酸7.35 烟酰胺 2.02L-精氨酸盐酸盐147.5 L-脯氨酸17.25 盐酸吡哆醛 2L-胱氨酸盐酸盐31.29 L-色氨酸9.02 盐酸吡哆醇0.031L-谷氨酰胺365 L-酪氨酸38.4 核黄素0.219甘氨酸18.75 L-缬氨酸52.85 盐酸硫胺 2.17L-组氨酸盐酸盐31.48 D-葡萄糖3151 胸苷0.365L-异亮氨酸54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68二．【产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解，溶液澄明。
pH值①加NaHCO3 6.60～7.20②不加NaHCO3 5.50～6.10水分（%）≤5.0渗透压（mOsm/kgH2O）①加NaHCO3 274～302②不加NaHCO3 238～263细菌内毒素（EU/ml）≤10微生物检查（CFU/g）≤1000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
三.【配制方法】⑴将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容器。
培养基配方
培养基配方一、哺乳动物培养基1、DMEM培养基DMEM培养基低糖(干粉) D2902 10X1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L的葡萄糖。
不含酚红和和碳酸氢钠。
50L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5523 10×1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L葡萄糖，不含碳酸氢钠。
2×5L每升培养基含10.0g干粉。
配制时每升加3.7g碳酸氢钠。
5L50L DMEM培养基低糖（干粉）D5030 10×1L 不含L-谷氨酰胺，葡萄糖，酚红，丙酮酸钠和碳酸氢钠。
10L每升培养基含8.3g干粉。
配制时每升加1.0g葡萄糖，0.584g 50L L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（干粉）D5280 10×1L 可以高压消毒。
10L含1000 mg/L的葡萄糖。
不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
50L每升培养基含9.6g干粉。
配制时每升加0.584g L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。
DMEM培养基低糖（液体）D5546 500ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺。
用盐6×500ML 酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
24×500ML 1L6×1L DMEM培养基低糖（液体）D5921 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠，不含L-谷氨酰胺和酚红。
500ML 用盐酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。
使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。
6×500MLDMEM培养基低糖（液体）D6046 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖，L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
用盐酸维500ML 生素B6代替盐酸吡哆醛。
6×500ML1LDMEM培养基低糖（液体）D2429 100ML 1×的培养基含有1000 mg/L的葡萄糖。
DMEM高糖配方培养基
DME高糖配方/F12培养基说明书产品代号： MD207-050 一．【组成成分】成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L 无水氯化钙 116.6 L- 亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042 五水硫酸铜 0.0013 L- 赖氨酸盐酸盐91.25 硫辛酸 0.105 九水硝酸铁 0.05 L- 蛋氨酸 17.24 酚红 8.1 七水硫酸亚铁0.417 L- 苯丙氨酸 35.48 1,4- 丁二胺二盐酸盐 0.081 氯化钾 311.8 L- 丝氨酸26.25 丙酮酸钠 55氯化镁 28.64 L- 苏氨酸 53.45 维生素 H 0.0035 无水硫酸镁 48.84 L- 丙氨酸4.45 D- 泛酸钙 2.24 氯化钠 6999.5 L- 天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98 无水磷酸二氢钠 54.35 L- 天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65 磷酸氢二钠 71.02 L- 半胱氨酸盐酸盐 17.56 i- 肌醇 12.6 七水硫酸锌 0.432 L- 谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02L-精氨酸盐酸盐147.5 L-脯氨酸17.25盐酸吡哆醛2L-胱氨酸盐酸盐31.29 L-色氨酸9.02 盐酸吡哆醇0.031L-谷氨酰胺365 L-酪氨酸38.4核黄素0.219甘氨酸 18.75 L- 缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17L-组氨酸盐酸盐31.48 D-葡萄糖3151胸苷0.365L-异亮氨酸54.47次黄嘌呤2维生素B12 0.68产品指标】外观粉红色固体粉末溶解性完全溶解，溶液澄明。
pH值①加 NaHCO3 6.60- 7.20②不力卩 NaHCO3 5.50-6.10水分（% 屿.0渗透压（ mOsm/kgH2O①加 NaHCO3 27*302②不加 NaHCO3 23*263细菌内毒素（EU/ml）<10微生物检查（CFU/g <000细胞生长试验细胞形态与标准细胞形态相似细胞数量加10%小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞 /ml 。
DMEM培养基制备SOP
DMEM培养基的配置1 实验目的➢配制DMEM培养基2 实验原理2.1 DMEM培养基的用途➢➢DMEM and Click’s media have an osmolarity that is more compatible with mouse serum than RPMI; in fact, RPMI was specifically designed for the culture of human cells.2.2 本实验室在培养小鼠来源细胞时选用DMEM培养基的理由➢2.3 培养基中各种组分的作用及添加依据2.3.1 Hepes（羟乙基哌碃乙硫磺酸）：25mM /L (/L)，不加碳酸氢钠时pH为，加碳酸氢钠时pH为。
单独配制时，配制为100X即/ml。
➢配制 /L (/mL) Hepes：12g的Hepes定容到20ml PBS中，过滤除菌，分装为1ml/管，－20°C保存。
Cell Biology建议为4°C保存。
➢HEPES 是一种非离子缓冲液,在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒.HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加(不懂，何为抵消？邹强).在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中. 来自网络。
2.3.2 缓冲系统: 来自网络。
➢大多数细胞所需pH 在7.2 - 7.4.但是,细胞培养最适pH值随培养的细胞种类不同而不同.成纤维细胞喜欢较高pH (7.4 - 7.7), 而传代转化细胞系则需要偏酸pH (7.0 - 7.4).➢由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡.如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为/L;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为/L.➢细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换.➢大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色.➢碳酸氢钠：CO2浓度为5%时，培养液中碳酸氢钠浓度为/L；CO2浓度为10%时，培养液中碳酸氢钠浓度为/L（科学出版社.细胞实验指南P6）。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
13
L-异亮氨酸
105.00
30
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-亮氨酸
105.00
31
葡萄糖
1000.00
15
L-盐酸赖氨酸
146.00
32
丙酮酸钠
110.00
16
L-甲硫氨酸
30.00
33
酚红
9.30.00
17
L-苯丙氨酸
66.00
DMEM(H)细胞培养基（粉末型）成分
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
1
无水氯化钙
200.00
17
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁 .9H 2 O
0.10
18
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
19
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
20
L-酪氨酸钠盐
104.00
5
氯化钠
6400.00
21
L-缬氨酸
94.00
6
无水磷酸二氢钠
125.00
22
D-泛酸钙
4.00
7
L-盐酸精氨酸
84.00
23
氯化胆碱
4.00
8
L-盐酸胱氨酸
63.00
24
叶酸
4.00
9
L-谷氨酰胺
584.00
25
肌醇
7.20
10
甘氨酸
30.00
26
烟酰胺
4.00
11
L-盐酸组氨酸
42.00
27
核黄素
0.40
12
L-异亮氨酸
105.00
28
盐酸硫胺
4.00
13
L-亮氨酸
105.00
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁 .9H 2 O
0.10
18
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
19
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
20
L-酪氨酸钠盐
104.00
5
氯化钠
6400.00
21
L-缬氨酸
94.00
6
无水磷酸二氢钠
125.00
22
D-泛酸钙
4.00
7
L-盐酸精氨酸
84.00
23
氯化胆碱
序号
化合物名称
含量(mg/L)
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
1
无水氯化钙 .2H 2 O
265.00
18
L-丝氨酸
42.00
2
硝酸铁 .9H 2 O
0.10
19
L-苏氨酸
95.00
3
氯化钾
400.00
20
L-色氨酸
16.00
4
无水硫酸镁
97.67
21
L-酪氨酸
72.00
5
氯化钠
6400.00
22
L-缬氨酸
29
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-盐酸赖氨酸
146.00
30
葡萄糖
4500.00
15
L-甲硫氨酸
30.00
31
丙酮酸钠
110.00
16
L-苯丙氨酸
66.00
32
酚红
15.00
DMEM(L)细胞培养基（粉末型）成分
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
序号
化合物名称
含量 (mg/L)
1
无水氯化钙
200.00
17
4.00
8
L-盐酸胱氨酸
63.00
24
叶酸
4.00
9
L-谷氨酰胺
584.00
25
肌醇
7.20
10
甘氨酸
30.00
26
烟酰胺
4.00
11
L-盐酸组氨酸
42.00
27
核黄素
0.40
12
L-异亮氨酸
105.00
28
盐酸硫胺
4.00
13
L-亮氨酸
105.00
29
盐酸吡哆辛
4.00
14
L-盐酸赖氨酸
146.00
30
葡萄糖
1000.00
15
L-甲硫氨酸
30.00
31
丙酮酸钠
110.00
16
L-苯丙氨酸
66.00
32
酚红
15.00
94.00
6
无水磷酸二氢钠
109.00
23
D-泛酸钙
4.00
7Байду номын сангаас
丁二酸
75.00
24
酒石酸胆碱
7.20
8
丁二酸钠
100.00
25
叶酸
4.00
9
L-盐酸精氨酸
84.00
26
肌醇
7.20
10
L-盐酸胱氨酸
63.00
27
烟酰胺
4.00
11
甘氨酸
30.00
28
核黄素
0.40
12
L-盐酸组氨酸
42.00
29
盐酸硫胺