高三生物二轮复习基因工程(三)(选修3)

基因工程（三）
1.
人组织纤溶酶原激活
物（htPA ）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA
基因母羊的羊
（1）_____________________________ htPA基因与载体用切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载
体。

检测目的基因是否已插入受体细胞DNA可采用 ___________ 技术。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其 __________
采集的精子需要经过_____________ ，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是 _______________ 。

为了获得母羊，移植前需
对已成功转入目的基因的胚胎进行________________ 。

利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转
基因个体，这体现了早期胚胎细胞的________________ 。

（4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到________________ ，说明目的基因成功表达。

2.
F面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。

请据图回答:
⑴获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在_____________ 酶的催化下，合成互补的
单链DNA然后在 ___________ 作用下合成双链DNA从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质
的_________ 序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的.
序列，再通过化学方法合成所需基因。

羊乳
乳中获得。

流程如下:
转拉用基因母羊
转化射胞
-----
►
工程苗
⑵利用PC敲术扩增DNA寸，需要在反应体系中添加的有机物质有
4种脱氧核苷酸三磷酸和耐热性的
DNA 聚合酶，扩增过程可以在 PCR T 增仪中完成。

⑶由A 和载体B 拼接形成的C 通常称为 ____________ 。

⑷在基因工程中，常用 Ca2+处理D,其目的是
3. 2015年，屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获奖.工业上青蒿素一般从青蒿植株中
提取，产量低，价格高.基因工程及细胞工程等为培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路. 科
学家先通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，
偶然发现一株高产植株. 通过基因测序发现该高产
植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变.
(1 )提取了高产植株的全部 DNA 后，要想快速大量获得该突变基因可以采用 PCR 技术，该
技术的原理是 _________ .
(2) 如果用青蒿某个时期 mRNA 反转录产生的双链 cDNA 片段，用该双链cDNA 进行PCF 扩增， 进
行
了 30个循环后，理论上可以产生约为 ___________个DNA 分子，该双链与载体连接后储存在一个 受体菌群中，这个受体菌群就叫做青蒿的 ____________ ，获得的cDNA 与青蒿细胞中该基因碱基序 列 _______ (填“相同”或“不同”).
(3)
将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体， 图I 、2中箭头表示相关 限制
酶的酶切位点.请回答：
用图中的质粒和外源 DNA 构建重组质粒，不能使用 Smal 切割，原因是 ______________ ，构建好的重 组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子，启动子是 _______________ 识别结合位点.
(4)
检测目的基因是否表达出相应蛋白质， 应采取 技术.
目的基因导入组织细胞后, 通过 ______ 技术培育出青蒿幼苗.
4.
阅读如下材料：
材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中， 得到了体型巨大的“超级小鼠”；
科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。

材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，
科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，
L 1
t K 1
BamH I
SHl Smd I /find!
nMDNA
使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨
酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。

材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移
植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。

回答下列问题：
（1）材料甲属于基因工程的范畴。

将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用________ 法。

构建基因表达载体常用的工具酶有_______________ 和________________ 。

在培育转基因植物是，
常用农杆菌转化发，农杆菌的作用是________________________ 。

（2）材料乙属于_________________ 工程范畴。

该工程是指以分子生物学相关理论为基
础，通过基因修饰或基因合成，对________________ 进行改造，或制造制造一种____________________ 的技术。

在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的__________________________ 序列发生了改变。

（3）材料丙属于胚胎工程的范畴。

胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到_________ 种的，生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。

在资料丙的实例中，兔甲称
为_______________ 体，兔乙称为__________ 体。

5.斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。

具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。

利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上，带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。

未整合和N进行如下杂交实验。

亲代：M X
了-找陋胎；恋色菰光红色悄比
（1）在上述转基因实验中，将G基因-
重组质粒显微注射到斑马鱼_______________ 中，整合到染色体上的G基因________________ 后，使胚胎发出绿色荧光。

（2）根据上述杂交实验推测：
①亲代M的基因型是___________ （选填选项前的符号）。

G基因的染色体的对应位点表示为g。

用个体M
，需要的两类酶是。

将（肚胎期无辰
比）
a. DDgg
b. Ddgg
②子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括_____________ （选填选项前的符号）。

a. DDGG
b. DDGg
c. DdGG
d. DdGg
（3）杂交后，出现红•绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是亲代____________________ （填“M'或“ N'）的初级精（卵）母细胞在减数分裂过程中，同源染色体的__________________
____________________________ ____ 发生了交换，导致染色体上的基因重组。

通过记录子代中
红•绿荧光胚胎数量与胚胎总数，可计算得到该亲本产生的重组配子占其全部配子的比例，
算式为________________ 。

基因工程（三）
1. 【答案】（1）同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）；DNA分子杂交（或核酸探针）
（2）超数排卵；获能（处理）（3）显微注射法；性别鉴定；全能性
（4）htPA （或人组织纤溶酶原激活物）
2. ［答案】（1）逆转录酶DNA聚合酶氨基酸脱氧核苷酸（2）引物（目的基
因或A基因）模板（3）基因表达载体（4）使其成为感受态细胞，使大肠杆菌更容易吸收重组DNA分子3. ［答案】（1）DNA双链复制（2）230 cDNA 文库（或部分基因文库）不同
（3）Smal会破坏质粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因（答对一个即得分）RNA 聚
合酶
（4）抗原抗体杂交植物组织培养
4. ［答案】（1）显微注射法限制性内切酶DNA连接酶农杆菌可感染植物，将目的基
因转移到受体细胞中（2）蛋白质现有蛋白质新蛋白质氨基酸（3）同供受
5. 【答案】（1）限制性核酸内切酶DNA 连接酶受精卵表达
（2 ［①b ②b、d （3）N 非姐妹染色单体 4 x（红•绿荧光胚胎数量/ 胚胎总数）。